实验方法总结(2)：细胞实验部分
初中生物实验知识点
初中生物实验知识点生物实验是初中生物课程中不可或缺的一部分，通过实验，学生可以更好地理解生物的基本原理和概念。
以下是一些初中生物实验的知识点：1.细胞实验：细胞是生命的基本单位，通过显微镜观察细胞的结构，可以了解细胞的基本组成和功能。
常见的细胞实验包括细胞的染色实验、细胞的大小和形态实验等。
2.呼吸实验：呼吸是生物体获取能量的关键过程，通过呼吸实验可以了解不同条件下生物体的呼吸过程。
常见的呼吸实验包括呼吸消耗氧气、产生二氧化碳的实验等。
3.光合作用实验：光合作用是植物获取能量的过程，通过光合作用实验可以了解植物如何利用光能进行合成。
常见的光合作用实验包括植物的生长实验、叶绿素的含量实验等。
4.遗传实验：遗传是生物的一个重要特征，通过遗传实验可以了解基因的传递和表达。
常见的遗传实验包括遗传性状的观察实验、基因的分离实验等。
5.生态实验：生态是生物与环境相互作用的领域，通过生态实验可以了解生物在不同环境条件下的适应性和相互关系。
常见的生态实验包括物种多样性实验、食物链实验等。
6.植物生长实验：植物的生长过程受到光、水、温度等因素的影响，通过植物生长实验可以了解这些因素对植物生长的影响。
常见的植物生长实验包括植物对光的反应实验、植物对水的需求实验等。
7.动物行为实验：动物的行为受到内部和外部因素的影响，通过动物行为实验可以了解动物的行为模式和生存策略。
常见的动物行为实验包括动物的觅食行为实验、动物的社会行为实验等。
8.病原体实验：病原体是导致疾病的微生物，通过病原体实验可以了解病原体的特性和传播途径。
常见的病原体实验包括细菌培养实验、真菌培养实验等。
以上是一些初中生物实验的知识点，通过实验的亲身体验，学生可以更好地理解生物的相关概念和原理，培养观察和实验能力，提高科学素养。
细胞生物学实验报告
实验一细胞的形态观察及其大小测量【实验目的】1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构；2、学习显微测量的方法，对细胞的大小有一直观认识。
【实验用品】普通光学显微镜;目镜测微尺;镜台测微尺;载玻片;盖玻片等。
【实验材料】小白鼠肝细胞切片;鸡血红细胞;蚕豆叶片横切片;洋葱。
【实验内容和方法】(一)细胞形态观察l、动物细胞的观察（1）人肝细胞切片：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。
注意肝细胞之间的界限、细胞的形状、细胞核的形状和数量、核仁的形状和数量、细胞质的形态构造以及细胞质和细胞核染色的区别。
（2）鸡血细胞涂片的观察：注意观察血细胞的组成；红细胞、白细胞、血小板的形态特点。
2、植物细胞的观察（1）取蚕豆叶片横切片的观察：注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。
（2）洋葱表皮细胞的形态观察：用镊子撕取洋葱表皮，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片。
在显微镜下观察的形态和结构。
（二）细胞的大小和测量1、测微尺的使用目镜测微尺是一块圆形玻片，中心刻有一尺，长5～10mm，分成50～100格。
每格的实际长度因不同物镜的放大率和不同镜筒长度而异。
镜台测微尺是在一块载玻片中央，用树胶封固一圆形的测微尺，长1mm或2mm，分成100格或200格，每格的实际长度0.01mm(10μm)。
当用目镜测微尺来测量细胞的大小时，必须先用镜台测微尺核实目镜测微尺每一格的长度。
方法如下：(1)卸下目镜的上透镜，将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上，再旋上目镜的上透镜。
(2)将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好，使测微尺分度位于视野中央。
调焦至能看清镜台测微尺的分度。
(3)小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度模糊，可转动目镜上透镜进行调焦)，使两尺左边的一直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重合的直线(如图所示)。
(4)记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。
按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm：123测定目镜测微尺每格实长的图解 上尺：目镜测微尺；下尺：镜台测微尺镜台测微尺的格数目镜测微尺每格的微米数= —————————×10 目镜测微尺的格数例如，图中镜台测微尺1格=目镜测微尺6格，代入公式得：目镜测微尺每格=1／6×10μm=1.66μm(5)取下镜台测微尺，换上需要测量的玻片标本，用目镜测微尺测量标本。
细胞工程实验总结
实验一、细胞培养实验器材和试剂的准备1、哪些物品适合于高压灭菌，并说明理由。
①材料：微孔滤膜(直径25 cm)：孔径为0.22μm、微孔滤膜(直径90 cm)：孔径为0.22 μm、过滤器(直径25 cm)。
②仪器和器材：眼科剪刀和镊子、长镊子、培养皿、培养瓶、试剂瓶（或盐水瓶）、移液枪、10毫升试管、10毫升离心管、巴氏吸管、5毫升（或10毫升）吸量管、不锈钢过滤器、塑料过滤器、注射器、超净工作台、干燥箱、高压灭菌锅、正压泵。
理由：适合于高压灭菌是布类、橡胶制品(如胶塞)、金属器械、玻璃器皿、某些耐高温的塑料制品以及加热后不发生沉淀的无机溶液(如Hanks液、PBS等)。
2、细胞培养常用液体如何配制和灭菌？1）PBS ：8.0g NaCl、0.2gKCl、2.2gNa2HPO4、0.12gKH2PO4溶于1000 mL双蒸水，高压灭菌，4℃保存。
（准备试剂瓶）灭菌方法：高压灭菌。
2）干粉培养基过滤除菌（先准备好不锈钢过滤器及滤膜，安装后高压灭菌，适度烘干；铝盒4个，三角瓶2个，容量瓶，不锈钢过滤器一套，酒精灯，酒精棉球3瓶，吸耳球3个，吸量管10毫升和5毫升各5根，分装用瓶，血清，超纯水，抗生素）认真阅读说明书。
说明书都注明干粉不包含的成分，常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。
这些成分有些是必须添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根据实验需要决定。
配制方法（1L）：1）在一个尽可能接近总体积的容器中加入大约500mL双蒸水。
2）在室温（20℃到30℃）的水中加入干粉培养基。
3）水洗袋内残留培养基，全部转移到容器内，轻轻搅拌，不要加热。
4）完全溶解之后，1袋1L粉状DMEM加3.7g NaHCO3，1mmoL∕L丙酮酸钠，即0.11g/L，添加双抗。
5）用双蒸水定容到1L，搅拌溶解。
注意不要过分搅拌。
6）通过缓慢搅拌加入1N NaOH 或1N HCL调节pH值培养基在过滤前要保持密封。
植物实验总结报告范文(3篇)
第1篇一、实验目的本次实验旨在通过观察和分析植物的生长发育过程，了解植物的基本生理特性，掌握植物实验的基本操作方法，提高学生的实验技能和科学素养。
二、实验内容1. 植物形态观察（1）实验材料：小麦种子、白菜种子、向日葵种子等。
（2）实验步骤：①将小麦种子、白菜种子、向日葵种子分别播种于装有土壤的盆中。
②观察并记录种子发芽、幼苗生长、叶片展开、花蕾形成等过程。
③测量并记录幼苗的高度、叶片长度等生长指标。
（3）实验结果与分析：通过观察，小麦种子发芽后长出细长的茎和绿色的叶片，叶片展开呈长条形；白菜种子发芽后长出细小的茎和圆形的叶片，叶片展开呈匙形；向日葵种子发芽后长出粗壮的茎和绿色的叶片，叶片展开呈掌状。
实验结果表明，不同植物的种子在发芽和幼苗生长过程中具有不同的形态特征。
2. 植物光合作用实验（1）实验材料：向日葵幼苗、遮光纸、光强计、CO2分析仪等。
（2）实验步骤：①将向日葵幼苗置于光照强度为1000勒克斯的环境中，测量并记录光合速率。
②用遮光纸将向日葵幼苗部分遮光，测量并记录光合速率。
③将向日葵幼苗置于黑暗环境中，测量并记录光合速率。
（3）实验结果与分析：实验结果显示，向日葵幼苗在光照条件下光合速率较高，遮光条件下光合速率降低，黑暗条件下光合速率几乎为零。
这表明植物的光合作用受到光照强度的影响，光照强度越高，光合作用越强。
3. 植物呼吸作用实验（1）实验材料：小麦种子、呼吸速率计、CO2分析仪等。
（2）实验步骤：①将小麦种子置于呼吸速率计中，测量并记录呼吸速率。
②将小麦种子置于黑暗环境中，测量并记录呼吸速率。
（3）实验结果与分析：实验结果显示，小麦种子在光照条件下呼吸速率较高，黑暗条件下呼吸速率降低。
这表明植物的光合作用和呼吸作用相互关联，光照条件下光合作用增强，呼吸作用减弱；黑暗条件下光合作用减弱，呼吸作用增强。
4. 植物水分运输实验（1）实验材料：向日葵幼苗、水势计、染料等。
（2）实验步骤：①将向日葵幼苗的根部用染料染色。
实验针灸学实验报告分析(3篇)
第1篇一、引言针灸学作为我国传统医学的重要组成部分，具有悠久的历史和丰富的实践经验。
随着现代科技的发展，实验针灸学应运而生，它是在中医理论指导下，运用现代科学技术和方法，对针灸作用原理、腧穴定位、针灸疗效等方面进行系统研究的学科。
本报告针对实验针灸学实验报告进行详细分析，旨在了解实验针灸学的研究方法、实验过程和实验结果，为后续研究提供参考。
二、实验内容与方法1. 实验内容实验针灸学实验报告主要涉及以下几个方面：（1）腧穴定位：通过实验验证腧穴的准确性，为临床针灸治疗提供依据。
（2）针灸作用原理：探讨针灸对机体生理、生化等方面的影响，揭示针灸作用机理。
（3）针灸疗效：通过实验评估针灸对疾病的治疗效果，为临床治疗提供参考。
（4）针灸不良反应：观察针灸治疗过程中可能出现的副作用，为临床安全用药提供参考。
2. 实验方法（1）动物实验：采用健康动物作为实验对象，通过观察动物生理、生化等方面的变化，评估针灸治疗效果。
（2）人体实验：在人体上进行针灸治疗，观察治疗效果及不良反应。
（3）实验室检测：利用现代科学技术手段，对针灸作用机理、腧穴定位等进行深入研究。
三、实验结果与分析1. 腧穴定位实验实验结果表明，通过实验验证，腧穴定位具有较高的准确性，为临床针灸治疗提供了可靠的依据。
2. 针灸作用原理实验实验结果显示，针灸对机体生理、生化等方面具有显著影响，如调节神经递质、改善血液循环、提高免疫力等。
3. 针灸疗效实验实验结果显示，针灸对多种疾病具有显著的治疗效果，如疼痛、消化系统疾病、神经系统疾病等。
4. 针灸不良反应实验实验结果表明，针灸治疗过程中可能出现的副作用较少，安全性较高。
四、实验结论1. 实验针灸学实验报告为针灸治疗提供了科学依据，有助于提高针灸治疗效果。
2. 实验针灸学实验方法具有科学性、严谨性，为针灸研究提供了有力支持。
3. 实验结果表明，针灸具有多方面的生理、生化作用，为揭示针灸作用机理提供了重要线索。
显微镜观察细胞实训报告
一、实验目的1. 熟悉显微镜的基本构造和使用方法。
2. 学会制作和观察临时装片。
3. 了解不同类型细胞的结构和特点。
4. 培养严谨的实验操作习惯和观察能力。
二、实验原理显微镜是一种利用光学原理放大微小物体的仪器。
通过显微镜观察细胞，可以直观地了解细胞的结构和功能。
本实验主要采用光学显微镜进行观察，通过调节物镜和目镜的倍数，可以观察到不同倍数的细胞图像。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱鳞片叶、口腔上皮细胞、根尖细胞、酵母菌细胞等。
2. 实验仪器：光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、染色液、吸水纸等。
四、实验步骤1. 制作临时装片（1）取一片干净的载玻片，用镊子夹起一小块洋葱鳞片叶或口腔上皮细胞，放入载玻片中央。
（2）用滴管滴一滴蒸馏水在载玻片上，使细胞平铺在载玻片上。
（3）用镊子夹起盖玻片，轻轻放置在载玻片上，避免产生气泡。
（4）用吸水纸在盖玻片一侧吸走多余的水分。
2. 染色（1）将染色液滴在盖玻片的一侧。
（2）用吸水纸在盖玻片的另一侧吸走多余的染色液。
（3）等待染色液渗透到细胞内。
3. 观察（1）将载玻片放在显微镜的载物台上。
（2）调节物镜和目镜的倍数，观察不同倍数的细胞图像。
（3）记录观察到的细胞结构、形态和特点。
五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶细胞观察到洋葱鳞片叶细胞呈长方形，细胞壁较厚，细胞质呈绿色，细胞核较大，呈圆形。
2. 口腔上皮细胞观察到口腔上皮细胞呈扁平状，细胞质较薄，细胞核较小，呈圆形。
3. 根尖细胞观察到根尖细胞呈长柱状，细胞壁较厚，细胞质呈绿色，细胞核较大，呈椭圆形。
4. 酵母菌细胞观察到酵母菌细胞呈圆形或椭圆形，细胞壁较薄，细胞质呈透明，细胞核较小，呈圆形。
通过观察不同类型的细胞，我们可以了解到细胞的结构和特点。
例如，洋葱鳞片叶细胞具有细胞壁，而口腔上皮细胞则没有细胞壁。
此外，不同类型的细胞在细胞核的大小、形状等方面也存在差异。
六、实验总结1. 本实验成功完成了显微镜观察细胞的目标，学会了制作和观察临时装片。
细胞实验资料
细胞实验在科学研究中，细胞实验是一种常见的实验方法，用于研究细胞的结构、功能和相互作用。
通过细胞实验，研究人员可以深入了解细胞内部的生物学过程，从而推动生命科学领域的发展。
细胞实验的意义细胞实验在生命科学研究中具有重要的意义。
通过细胞实验，科学家可以观察和探索细胞内部的各种生物学过程，如DNA复制、蛋白质合成、信号转导等。
细胞实验还可以用于研究细胞的遗传变异、生长特性以及对环境的适应能力。
这些研究成果对于理解生命的基本规律、疾病的发生机制以及药物的研发具有重要意义。
细胞实验的常用方法细胞实验的常用方法包括细胞培养、细胞染色、细胞计数、细胞分离和细胞转染等。
其中，细胞培养是最基本的实验方法之一，通过将细胞放置在适当的培养基中，可以使细胞在体外继续生长和繁殖。
细胞染色可以用来观察细胞内部的结构和功能，如核酸、蛋白质、细胞器等。
细胞计数可以用于确定细胞培养的浓度和数量。
细胞分离和细胞转染则可以用于研究细胞的特定功能和相互作用。
细胞实验的应用细胞实验在生命科学领域有着广泛的应用。
在癌症研究中，科学家可以利用细胞实验研究癌细胞的生长特性、信号通路以及对化疗药物的敏感性。
在药物研发中，细胞实验可以用来筛选药物的有效性和毒副作用。
在疾病治疗中，细胞实验可以帮助医生设计个性化的治疗方案。
总结细胞实验是生命科学研究中不可或缺的重要方法，通过细胞实验可以深入了解细胞的结构、功能和相互作用。
细胞实验在疾病治疗、药物研发以及生物学研究中有着广泛的应用前景。
随着科学技术的不断进步，相信细胞实验将发挥越来越重要的作用，推动生命科学领域的发展。
高中生物21个实验总结表(3篇)
第1篇一、实验一：观察植物细胞和动物细胞的结构1. 实验目的：了解植物细胞和动物细胞的形态结构，掌握显微镜的使用方法。
2. 实验原理：通过显微镜观察植物细胞和动物细胞的切片，了解其形态结构。
3. 实验步骤：（1）制片：将洋葱鳞片叶或口腔黏膜细胞制成切片。
（2）染色：用碘液染色，使细胞核和细胞质着色。
（3）观察：使用显微镜观察切片，观察植物细胞和动物细胞的形态结构。
4. 实验结果：植物细胞具有细胞壁、液泡和叶绿体，动物细胞无细胞壁、液泡和叶绿体。
二、实验二：观察植物细胞的有丝分裂1. 实验目的：了解植物细胞有丝分裂的过程，掌握有丝分裂各阶段的特点。
2. 实验原理：通过观察洋葱根尖细胞的有丝分裂，了解有丝分裂各阶段的特点。
3. 实验步骤：（1）制片：将洋葱根尖制成切片。
（2）染色：用醋酸洋红或碱性品红染色。
（3）观察：使用显微镜观察切片，观察有丝分裂各阶段的特点。
4. 实验结果：有丝分裂分为间期、前期、中期、后期和末期。
三、实验三：观察减数分裂1. 实验目的：了解减数分裂的过程，掌握减数分裂的特点。
2. 实验原理：通过观察洋葱根尖细胞或果蝇细胞的减数分裂，了解减数分裂的特点。
3. 实验步骤：（1）制片：将洋葱根尖或果蝇细胞制成切片。
（2）染色：用醋酸洋红或碱性品红染色。
（3）观察：使用显微镜观察切片，观察减数分裂各阶段的特点。
4. 实验结果：减数分裂分为减数第一次分裂和减数第二次分裂。
四、实验四：观察线粒体和叶绿体1. 实验目的：了解线粒体和叶绿体的形态结构，掌握观察方法。
2. 实验原理：通过观察洋葱细胞或叶绿体，了解线粒体和叶绿体的形态结构。
3. 实验步骤：（1）制片：将洋葱细胞或叶绿体制成切片。
（2）染色：用健那绿或亚甲基蓝染色。
（3）观察：使用显微镜观察切片，观察线粒体和叶绿体的形态结构。
4. 实验结果：线粒体呈线状或粒状，叶绿体呈扁平囊状。
五、实验五：观察DNA和RNA在细胞中的分布1. 实验目的：了解DNA和RNA在细胞中的分布，掌握观察方法。
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实验方法总结（2）：细胞生物学部分1.原代细胞分离与培养 (2)1.1原代细胞分离 (2)1.2原代细胞培养 (2)2. 干细胞分离培养 (3)2.1胚胎干细胞诱导分化 (3)2.2肿瘤干细胞（CSC）分离鉴定 (3)3. 细胞增殖相关研究方法 (5)3.1 MTT分析法 (5)3.2 XTT (5)3.3 WST-1 (6)3.4 CCK-8(WST-8) (6)3.4 平板克隆形成 (6)3.5 软琼脂克隆形成 (7)3.6 BrdU (7)4.细胞转移相关研究方法 (8)4.1 划痕 (8)4.2 细胞粘附 (8)4.3 Transwell迁移 (9)4.4 Transwell侵袭 (9)5. 血管生成 (10)6. 细胞周期：PI染色 (10)7. 细胞凋亡检测 (10)7.1 AnnexinV/PI双染色法 (10)7.2 TUNEL法 (11)7.3 线粒体膜电位(MMP)检测 (12)8.细胞分选 (12)8.1 流式分选 (12)8.2 磁珠珠分选 (13)9.细胞转染 (13)10. 细胞慢病毒感染 (14)11. 基因稳定细胞株的筛选 (14)12. 耐药细胞株的筛选 (15)13. 细胞共培养 (15)13.1直接共培养 (15)13.2间接共培养 (15)1.原代细胞分离与培养1.1原代细胞分离人或动物体（或胚胎组织）由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。
第一，悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10 min。
经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。
第二，实体组织材料的分离方法对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。
而消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
1.2原代细胞培养原代细胞的培养也叫初代培养，是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养，是建立细胞系的第一步。
第一，组织块培养法组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。
其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶（或皿）中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
第二，消化培养法第三，悬浮细胞培养法。
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
第四，器官培养。
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养。
器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
2. 干细胞分离培养2.1胚胎干细胞诱导分化首先将类胚体消化成单细胞，贴壁培养，于不同的培养阶段添加不同种类和不同浓度的化学物质、条件培养基或细胞因子等诱导条件，直接促进ES细胞定向分化为某种特殊类型的细胞；或通过改变培养条件对某些类型的细胞分化起抑制作用，从而高效诱导目的细胞的分化。
改变细胞的培养条件使ES细胞进行定向分化的基本策略有三种：一是向培养基中添加生长因子和化学诱导剂等；二是将ES细胞与其它细胞一起进行培养；三是将细胞接种在适当的底物上，以促使细胞中某些特定基因的表达上调或下降，从而引发细胞沿着某一特定谱系进行分化。
体外诱导胚胎干细胞的物质有化学试剂诱导法、细胞因子诱导法和外源基因诱导法。
化学试剂诱导法：维甲酸（RA）、DMSO、β-磷酸甘油、维生素C(VC)、地塞米松、维生素K3(VK3)以及2，5-羟基维生素D3等化学试剂，都能诱导ES细胞定向分化为特定类型细胞。
细胞因子诱导法：ES细胞在培养过程中对许多细胞因子具有很强的依赖性。
增加或减少一种或几种细胞因子可影响ES细胞的增殖或分化。
目前研究最深入的细胞因子主要有骨形成蛋白(BMPs)和成纤维细胞生长因子(FGF)等。
外源基因诱导法：转基因法可以弥补细胞因子法的不足。
其原理是使某个促分化基因在ES细胞中过度表达，从而调控ES细胞的分化。
应用此方法之前，首先要确定决定该细胞向不同方向分化的关键基因，其次还要确保在适宜的时间将此基因正确插入到ES细胞基因组序列上。
2.2肿瘤干细胞（CSC）分离鉴定对于CSC的分离纯化主要有根据细胞表型特征和生物学特性而建立的两大类方法：第一类：依赖于细胞表面标志的分离方法造血系统肿瘤干细胞：正常造血干细胞的表型为CD34+CD38+Thy-1-实体瘤肿瘤干细胞：A.乳腺癌：ESA+CD44+CD24-/LowLineage-的细胞是乳腺癌CSC。
B.脑肿瘤：将CD133+的肿瘤细胞命名为脑肿瘤干细胞(BTSC), 还表达Sox2、Musashi-1、bmi-1、磷酸丝氨酸磷酸化酶等神经干细胞和其它干细胞的基因特征C.结直肠癌：CD133+细胞是结直肠癌细胞的起始细胞。
上皮细胞黏附分子、CD44、CD166可以作为鉴定结直肠癌干细胞的细胞表面标志。
以乳腺癌为例，介绍实验方法（其他肿瘤针对下面蓝色的关键词更改）：人乳腺肿瘤细胞分离培养：选择XXX医院肿瘤外科接受治疗的乳腺癌患者，经过患者及其家属知情同意，在手术室无菌条件下获取肿瘤组织样本约10g，置无菌组织转移液中，迅速转入无菌实验室，PBS漂洗数遍，去除脂肪及坏死部分，将乳腺组织充分剪碎；将上述乳腺肿瘤组织移入离心管，加入8mL组织消化液（含2700U/mLⅣ型胶原酶1mL、0.02mg/mL透明质酸酶100μL、DNase50μL的DMEM 培养液），轻轻混匀，37℃水浴消化1~2小时，期间每20~30min振摇离心管1次，以便充分消化；消化结束后，加入10mL PBS，摇匀后以1000r/min离心4min，弃上清，加入1mL乳腺肿瘤干细胞培养液（含10mL/L FBS，100U/mL青霉素，100mg/mL链霉素，10ng/mL bFGF，20ng/mL EGF，20ng/mL ITS的DMEM-F12培养液），混匀，1000r/min离心4min，弃上清；以1×106/mL细胞密度接种于细胞培养箱中培养。
3d后换液，约7~10d开始出培养瓶中，置入37℃、50mL/L CO2现悬浮生长的细胞克隆球。
流式细胞术检测获得乳腺肿瘤细胞：收集培养的乳腺肿瘤细胞克隆球，离心并弃去培养基；PBS漂洗1遍，Accutase消化2min后加等体积培养基终止消化；将细胞悬液移入15mL离心管1000r/min离心4min，弃上清，用PBS溶液混悬后无菌滤膜过滤，取4支试管，按如下组合顺序分别加入荧光标记抗体各10μL：IgG1-PE/IgG2-FITC，CD44-FITC/IgG1-PE，CD24-PE/IgG2-FITC，CD44-FITC/CD24-PE，再加入500μL细胞悬液入试管中，混匀，室温避光静置15min，流式细胞仪检测。
第二类根据干细胞外排DNA结合荧光染料Hoechst33342而建立的SP细胞分离法在Hoechst33342染色的骨髓细胞中存在着一群染色很浅的细胞群，通过紫外激发后用双波长分别为450nm的蓝色荧光~675nm的红色荧光分析，其中有不到0.1％的细胞发出微弱的蓝光和红光，在流式二维分析点阵图上，呈彗星状分布在造血干/祖细胞主群的一侧，因此被称为侧群(SP)细胞。
SP细胞广泛存在于人和动物的多种成体组织、实体瘤及肿瘤细胞系中，并具有干细胞样特征。
实验方法：①细胞染色：细胞消化计数，用37℃预热的DF12培养基重悬，调整到1×106/mL 浓度，制备成单细胞悬液；加入荧光染料Hoechst33342，使终浓度为6 μg/mL，37℃避光水浴90 min；冰上10 min终止染色，计数细胞；离心细胞后，用冰预冷DF12洗涤细胞并重悬浮，将分选组调整浓度到1×107/mL以上，必要时加入1倍的DNase I；上机前再加入PI使终浓度为2 μg/mL以区分死细胞，并且400滤网过滤细胞。
②流式细胞仪检测：355 nm UV激发光源，610 nm双色短通反射滤镜，450 nm和675 nm边缘长通滤片分别检测散射光蓝光及红光部分，线性模式采集信号. 测量前向散射和侧向散射二维参数图，检测细胞均一性，以Hoechst Red为X轴，Hoechst Blue为Y轴作二维散点图，将低Hoechst Red 及低Hoechst Blue且维拉帕米组缺失的区域设定为SP细胞的“门”（gate），计算百分比，分选出SP细胞及Non SP细胞。
3. 细胞增殖相关研究方法3.1 MTT分析法MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂，生成蓝色的formazan结晶，formazan结晶的生成量仅与活细胞数目成正比（死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，不能将MTT还原）。
实验方法：接种XXX细胞用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200 μL。
培养细胞同一般培养条件，培养3-5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。
呈色培养3－5天后，每孔加MTT溶液（5 mg/mL用PBS配）20 μL。
继续孵育4小时，终止培养，小心吸弃孔培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔培养上清液。
每孔加150 μL DMSO，振荡10 min，使结晶物充分融解。
比色选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
3.2 XTTXTT是一种与MTT类似的四唑氮衍生物，可被活细胞线粒体脱氢酶还原成水溶性的棕色甲肷产物，当XTT与电子偶合剂共同使用时，甲肷的生成量与细胞的增殖程度呈正相关。
实验方法：首先配置6.6 mmol/L XTT溶液和220 mmol/L吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)溶液。
临用时将XTT与PMS按1：1混合，形成XTT/PMS。
接种XXX细胞：用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200 μL。