DNAGREEN核酸染料使用说明
SYBR GreenⅠ 核酸染料
6μl
ddH O 2
补足至50μl
上海美季生物技术有限公司 Tel : 021-61452531 Fax : 021-61452532 Email : info@
该产品可用作实时定量 PCR专用荧光指示剂。用于任何一台 real-time PCR 仪上进行 PCR 反应。一般 使用时将 SYBR GREEN Ⅰ 稀释至 1X 浓度。 为了得到更高的荧光信号强度，根据所使用的聚合酶对其 耐受程度的不同，可以选择性的提高SYBR GREEN Ⅰ的浓度至3-4×。
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模板DNA
引物1[10 μM] 引物2[10 μM] 10×PCR Buffer dNTP Mixture (2.5mM each) Taq （2.5U/μl）
20×SYBR Green Ⅰ
<0.1μg
1μl 1μl 5μl 4μl
0.5-2μl
2.5μl
25mM MgCl2
特点
操作简单 价格便宜 适用范围广
储存方法
长期储存在 -20 ℃ 以下，避光 ；4Tel : 021-61452531 Fax : 021-61452532 Email : info@
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产品简介
SYBR GreenⅠ 核酸染料
SYBR Green Ⅰ是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料。与双链DNA结合后，其荧光大大增 强。这一性质使其用于扩增产物的检测非常理想。 SYBR Green Ⅰ的最大吸收波长约为 497nm，发射波长最大约为520nm。在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR Green Ⅰ荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射强荧光信号，而不掺入链中的SYBR Green Ⅰ染料分子仅有微弱荧光信号背景，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加同步。
DNAGREEN核酸染料使用说明
DNAGREEN核酸染料使用说明货号：G7140规格：0.5ml(10000×)保存：常温运输，4℃保存，有效期一年。
注意：DNAGREEN核酸染料属于微量核酸检测试剂，使用时请按照说明书操作。
产品简介：目前最常见的替代EB的核酸染料SYBR Green I（属于花氰类染料）虽然毒性比EB低、灵敏度比EB高，但由于其化学稳定性差；此外，SYBR Green I在电泳过程中能在DNA分子间移位，很容易使DNA条带模糊和扭曲，电泳清晰度和分辨率下降。
所以在实际应用中依然不能有效替代EB。
本产品是同时具有EB稳定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料，其特点如下：1.低毒。
其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品，有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2.灵敏。
检测灵敏度跟EB相当，能满足常规核酸电泳实验要求。
3.稳定。
对光、水和热的稳定性跟EB相当，可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
4.无分子间位移现象。
不会出现SYBR染料常见的条带模糊和扭曲现象。
5.使用方法多样。
既可以加入熔化的胶中，也可以电泳后染色，还可用于PAGE。
6.跟各种常用的核酸电泳缓冲液（如SuperBuffer-2、TBE、TAE）兼容，但在SuperBuffer-2和TBE中背景最低。
7.观察时不需要任何额外的仪器设备或UV光源，可以使用现成的观察EB的300nm UV。
8.可用于RNA染色(也呈绿色)。
9.DNA或RNA浓度较高时还可以直接在日光下观察（需要将胶放在黑色背景下）。
由于避免了UV对DNA的伤害，尤其适用于胶回收实验。
使用方法:电泳中染色：本方法是将DNAGREEN直接加入溶化的凝胶中使用，只适用于琼脂糖凝胶电泳，不适用于PAGE。
1.将DNAGREEN直接加入到融化的琼脂糖凝胶中，每100mL凝胶加3-10uL DNAGREEN，混合均匀后倒胶。
琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料（如EB和SYBR Green I，否则会相互干扰）。
DNAGREEN核酸染料说明书
DNAGREEN核酸染料说明书货号：G7140规格：0.5ml(10000×)保存：常温运输，4℃保存，有效期一年。
注意：本产品属于微量核酸检测试剂，使用时请按照说明书操作。
产品简介：目前最常见的替代EB的核酸染料SYBR Green I（属于花氰类染料）虽然毒性比EB低、灵敏度比EB高，但由于其化学稳定性差；此外，SYBR Green I在电泳过程中能在DNA分子间移位，很容易使DNA条带模糊和扭曲，电泳清晰度和分辨率下降。
所以在实际应用中依然不能有效替代EB。
本产品是同时具有EB稳定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料，其特点如下：1.低毒。
其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品，有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2.灵敏。
检测灵敏度跟EB相当，能满足常规核酸电泳实验要求。
3.稳定。
对光、水和热的稳定性跟EB相当，可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
4.无分子间位移现象。
不会出现SYBR染料常见的条带模糊和扭曲现象。
5.使用方法多样。
既可以加入熔化的胶中，也可以电泳后染色，还可用于PAGE。
6.跟各种常用的核酸电泳缓冲液（如SuperBuffer-2、TBE、TAE）兼容，但在SuperBuffer-2和TBE中背景最低。
7.观察时不需要任何额外的仪器设备或UV光源，可以使用现成的观察EB的300nm UV。
8.可用于RNA染色(也呈绿色)。
9.DNA或RNA浓度较高时还可以直接在日光下观察（需要将胶放在黑色背景下）。
由于避免了UV对DNA的伤害，尤其适用于胶回收实验。
使用方法:电泳中染色：本方法是将DNAGREEN直接加入溶化的凝胶中使用，只适用于琼脂糖凝胶电泳，不适用于PAGE。
1.将DNAGREEN直接加入到融化的琼脂糖凝胶中，每100mL凝胶加3-10uL DNAGREEN，混合均匀后倒胶。
琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料（如EB和SYBR Green I，否则会相互干扰）。
南京灵敏度高的核酸染料的使用方法
南京灵敏度高的核酸染料的使用方法南京灵敏度高的核酸染料是一种广泛应用于分子生物学领域的染料，它能够在水平上提高DNA和RNA的检测敏感度和定量性能。
本文将详细介绍南京灵敏度高的核酸染料的使用方法，包括选择染料种类、操作前准备工作、实验步骤和注意事项等方面。
一、选择南京灵敏度高的核酸染料目前市场上存在许多种有灵敏度高的核酸染料，要选择适合自己实验的染料，需要考虑到以下几点：1、染料颜色：不需要油绿色或者绿色的染料，而是需要选择在GelDoc等成像软件上具有较高亮度且区分率较高的颜色，比如紫外线激发下的深蓝色或者暗红色。
2、染料浓度：选择进口品牌或者大名鼎鼎的品牌，以确保染料浓度准确，不至于影响定量结果。
3、染料用量：按照各自的实验需求，选择不同的染料用量，最好是浓度低但是能够显色清晰的染料。
二、操作前准备工作在进行核酸染色实验之前，需要进行以下准备工作：1、准备好检测所需要的DNA或者RNA样本。
本实验建议用质粒DNA，其不需要如同限制酶切片段那样到次数轴上，只需要做多次步骤，即可做出好几个等级的对照片。
2、根据实验所需的染色剂量，准备好透明的PCR管和电泳用塑料凝胶。
3、检查好实验平台是否干净。
可以使用0.1%甲醛杀菌，并用去离子水冲洗干净。
三、实验步骤1、样品制备：将DNA或RNA样本加入到PCR管2μl离心管中，加入10μl TBE缓冲液，使用30mm针筒进行混合，至于混合比例是1:6.2、电泳载体准备：将凝胶放在盖板上，在电泳盒中加入TBE缓冲液进行电泳，30分钟后取出。
3、样品电泳：将样品加入到凝胶槽中，进行电泳，电压为180V，电流为60mA，电泳时间为30-40分钟。
4、染色：在按照染料的要求使用，通常是将染料放入PET环中，使用电子泳床对其进行冷泳处理，1-2h后可以进行成像。
5、成像：使用GelDoc等成像软件进行成像。
选择最佳光源，调整图像设置，进行成像。
四、注意事项1、注意实验室卫生，防止氧化还原物质泄漏导致伤害。
上海常用的核酸染料的使用方法
上海常用的核酸染料的使用方法
核酸染料在细胞学、免疫学、分子生物学研究以及临床检测等方面都有重要应
用价值。
上海常用的核酸染料有几种，它们在实验室研究样本的各种特性时扮演着重要的角色，如同悬挂灯笼般确定样本当前的活性和分子形态。
下面将介绍上海常用核酸染料在实验室使用时的几种方法。
首先，互补核酸染料可用于核酸的检测，因此很适合检测单链DNA或双链DNA
以及各类核酸杂质。
它可以实现荧光发射或发射的检测，简便的实验方法让许多研究人员受益。
其次，荧光增强剂将普通和低荧光强度红色染料的荧光强度提升10
倍以上，它的覆盖面比吸收染料覆盖的面更广，能检测更少量核酸，在实验室使用时操作起来具有便利性。
再者，序列确定染料用于核酸定位。
它可以识别序列突变，快速检测基因变体，被广泛应用于DNA序列确定，基因组研究、基因诊断，遗传检测等多种研究领域。
最后，荧光寡核苷酸染料可用于克隆验证，它可以测定用于PCR扩增的目的克隆的真实性，从而准确判断是哪个克隆是有进行修饰的。
上海常用的核酸染料的使用方法介绍完毕，总之，核酸染料使用实验室仪器检
测核酸的效果更佳，但更重要的是要根据样本的情况选择合适的染料进行检测，以获取更加准确的实验结果。
另外，掌握正确的染料使用方法也是制定检测流程中不可或缺的一部分，应根据实验规程进行操作，并定期进行染料检测，以确保实验结果准确可靠。
SYBRGreen I 使用介绍
SYBR Green I使用介绍SYBR Green I核酸染料简介SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料，适用于各种电泳分析，操作简单，无须脱色或冲洗；至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。
SYBR Green I 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍，用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强，背景信号低，可适用于多种电泳分析。
SYBR Green I 适合于多种凝胶电泳方法：琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳等。
SYBR Green I 与双链DNA的亲和力非常高，因此可以用做电泳前染色，对分子生物学中常用的酶（如：Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等）没有抑制作用；另外，SYBR Green I 与EB相比，诱变能力大大降低。
SYBR Green I 核酸染料特点● 灵敏高：至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。
● 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
● 操作简单：无须脱色或冲洗。
● 适用范围广：可适用于多种电泳分析。
● 使用方便：不影响其它修饰酶作用。
● 经济：价格比银染便宜。
电泳用SYBR Green I 使用方法简介一、SYBR Green I预染色方法1、该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳。
2、工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍，即为SYBR Green Ⅰ工作液。
SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
3、制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。
4、样品染色：向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。
SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
5、DNA Marker染色：将5μL DNA Marker和5μL DNA Marker稀释液和1μLSYBR Green Ⅰ工作液混匀，室温放置5分钟，使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。
核酸染料安全操作及保养规程
核酸染料安全操作及保养规程核酸染料是生物学实验中广泛使用的化学试剂，但其使用过程中需要特别注意安全操作和保养。
以下是关于核酸染料的安全操作及保养规程。
安全操作规程1. 佩戴个人防护装备在使用核酸染料前，必须佩戴个人防护装备，包括实验室常规的实验手套、实验服、护目镜和口罩。
这些装备可以有效地保护实验人员在操作时的安全。
2. 避免直接接触核酸染料必须避免直接接触皮肤、眼睛和呼吸道，也不能食用。
在使用前，应该阅读核酸染料的物质安全数据表（SDS）并按照要求操作。
3. 避免液体飞溅在使用核酸染料的过程中，应该避免液体飞溅。
为了避免此类情况发生，建议使用带盖的试管和离心管、用滤纸吸去冷却液或分离液上的余液、避免用力搅拌等。
4. 存储与使用环境核酸染料的保存与使用，需要满足相应的环境要求。
一般来说，应该存储在低温（-20°C）和干燥的地方，远离明火和热源。
5. 废弃核酸染料在使用过程中产生的废弃物应该按照相关标准进行处理。
废弃物通常应放入特定的废物容器中，以免对环境和人体健康造成危害。
保养规程1. 冰冻保存核酸染料得以长期保存的关键是冰冻保存。
在从高温环境中取出试剂后，应该尽量避免反复冷却和融化。
存储时应置于 -20°C 的冰箱中，保存时注意不要与空气接触。
2. 避免粘附核酸染料使用后，必须清理其容器并在温水中反复冲洗。
此外，在使用之前应确保试剂容器是干燥的。
避免在容器壁上形成固体附着。
粘附物可能对试剂、其他化学物质以及实验人员的安全产生影响。
3. 交替使用在使用核酸染料时，应该尽可能地避免交替使用同一支试剂。
为了防止多次开盖或多次洗涤容器，可以使用多个标签在容器上标记，将每支试剂和其对应的标签放在一起，以避免混淆。
4. 防水保护对于带有防水特性的核酸染料，需要注意不要破坏其防水性。
在使用过程中，应该保持容器的密封性和防水性，以避免试剂受潮而不能使用。
5. 管理使用期限核酸染料的使用期限应该严格管理。
SYBR Green I 核酸染料使用说明
SYBR Green I核酸染料使用说明货号：SR4110规格：50/100ul保存：-20℃避光保存，有效期至少一年。
产品说明：SYBR Green I染料是一种直接与双链DNA(dsDNA)结合的荧光染料，是荧光定量PCR 最常用的DNA结合染料。
在定量PCR中，SYBR Green I可与双链DNA（dsDNA）非特异性结合后发出荧光，则可以通过检测反应体系中的SYBR Green I荧光强度，达到检测PCR产物扩增量的目的。
游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，一旦与dsDNA结合，其荧光增加1000倍，一个反应发出的全部荧光信号与出现的dsDNA量成比例，且会随扩增产物的增加而增加；所以通过检测PCR反应液中的荧光信号强度，可以对目的基因进行准确定量，同时还可以测定扩增的目的DNA片段的熔解温度。
使用说明：使用时，配置PCR反应混合液，将10000×SYBR Green I浓缩液加入到PCR反应体系，使终浓度为0.5×（0.2×到1×之间调整）。
以上操作建议在冰上进行。
注：①反应液配制方法和PCR扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明。
②Realtime PCR扩增仪的使用方法，请参照各仪器说明书。
注意事项：使用浓度对荧光PCR结果的影响SYBR Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。
如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低，这就意味着低拷贝的样品可能无法检出；而在高浓度时，将会抑制PCR反应，降低PCR反应效率。
所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度，反应的终浓度为0.2×到1×之间。
镁离子浓度的影响提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。
我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时，镁离子浓度比无SYBR Green I的普通PCR反应高出0.5～3mM。
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DNAGREEN核酸染料使用说明
货号：G7140
规格：0.5ml(10000×)
保存：常温运输，4℃保存，有效期一年。
注意：DNAGREEN核酸染料属于微量核酸检测试剂，使用时请按照说明书操作。
产品简介：
目前最常见的替代EB的核酸染料SYBR Green I（属于花氰类染料）虽然毒性比EB低、灵敏度比EB高，但由于其化学稳定性差；此外，SYBR Green I在电泳过程中能在DNA分子间移位，很容易使DNA条带模糊和扭曲，电泳清晰度和分辨率下降。
所以在实际应用中依然不能有效替代EB。
本产品是同时具有EB稳定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料，其特点如下：
1.低毒。
其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品，有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2.灵敏。
检测灵敏度跟EB相当，能满足常规核酸电泳实验要求。
3.稳定。
对光、水和热的稳定性跟EB相当，可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
4.无分子间位移现象。
不会出现SYBR染料常见的条带模糊和扭曲现象。
5.使用方法多样。
既可以加入熔化的胶中，也可以电泳后染色，还可用于PAGE。
6.跟各种常用的核酸电泳缓冲液（如SuperBuffer-2、TBE、TAE）兼容，但在SuperBuffer-2和TBE中背景最低。
7.观察时不需要任何额外的仪器设备或UV光源，可以使用现成的观察EB的300nm UV。
8.可用于RNA染色(也呈绿色)。
9.DNA或RNA浓度较高时还可以直接在日光下观察（需要将胶放在黑色背景下）。
由于避
免了UV对DNA的伤害，尤其适用于胶回收实验。
使用方法:
电泳中染色：
本方法是将DNAGREEN直接加入溶化的凝胶中使用，只适用于琼脂糖凝胶电泳，不适用于PAGE。
1.将DNAGREEN直接加入到融化的琼脂糖凝胶中，每100mL凝胶加3-10uL DNAGREEN，混合均匀后倒胶。
琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料（如EB和SYBR Green I，否则会相互干扰）。
在100mL琼脂糖凝胶中加入DNAGREEN的量不要超过10uL，否则背景增强。
注意：一定要保证琼脂糖彻底熔化，尤其是在第一次熔化胶的时候，否则未熔化的小颗粒将产生跟染料相同的荧光。
2.将DNA样品与DNA上样液按比例混合后上样。
注意：一定要使用不含SDS等去污剂的上样液，否则SDS会跟染料结合，极大地降低灵敏度。
3.上样后电泳，电泳参数同常规的电泳。
4.电泳结束后在300nm左右的UV下观察。
注意：不要使用波长为260nm或360nm的UV，否则检测灵敏度会降低。
如果DNA或RNA浓度较高，还可以直接在日光下直接观察（需要将胶放在黑色背景下），避免UV对DNA的伤害，尤其适用于胶回收实验。
5.用配置了520-550nm滤光片（一般呈黄色或深黄色）的相机拍照。
注意：不要使用与EB兼容的红色滤光片（它能阻挡520-550nm的光）。
如果能再加上能滤去UV的滤光片，效果会更好。
6.后续Southern、转膜或DNA胶回收实验按常规操作进行。
电泳后染色：
本方法是在电泳后对DNA进行染色，适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE。
但该方法需要单独的
染色处理，染料用量较大，不推荐用于琼脂糖凝胶的染色。
1.按照常规方法进行电泳。
2.用去离子水将DNAGREEN稀释500倍后（100mL水需要加0.2mL DNAGREEN），将凝胶放入，室温下摇晃染色30分钟（对琼脂糖凝胶）或15分钟（对PAGE）。
3.用水脱色10-30分钟，具体时间需根据背景强弱决定。
注意：电泳后染色液可以反复使用次数。
疑难解答:
Q：本产品可否用于RNA染色？
A：可以，不论RNA是在甲醛变性胶中电泳，还是在普通的SuperBuffer-2、TBE或TAE胶中电泳，RNA染色后在300nm下都跟DNA一样呈绿色，
Q：本产品是否可以加入上样液中进行染色？
A：不行，本产品只能直接加入凝胶中进行染色或电泳后再染色。
Q：为何前端（靠近正极）的DNA条带很淡或根本看不见？
A：跟EB一样，电泳时DNAGREEN朝负极方向移动，当前端的DNA（最小片段）进入没有DNAGREEN 的区域时，已经结合的染料分子会逐渐从DNA分子上脱落，所以条带会变淡或根本看不见。
解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色；之二是在每100mL电泳缓冲液中补加3-5uL 染料。
Q：本产品在哪种缓冲液中效果最好？
A：DNAGREEN染料在不同缓冲液中背景荧光强度不同，从弱到强的顺序是：SuperBuffer-2、TBE、TAE。
在背景较强的缓冲液体中，可以适当降低染料的用量，比如100mL胶中加3-5uL。
最佳浓度需要稍做摸索。
Q：用SYBR染色的DNA在电泳时为何容易发生条带模糊和扭曲现象？
A：SYBR染料一般与DNA的小沟结合，但在常规电泳条件下该结合并不牢固，染料分子可以
在标记的和未标记的DNA分子之间转移，使DNA分子的泳动速度时快（无染料结合时）时慢（有染料结合时），发生条带模糊和扭曲现象。
嵌入型染料（如EB和本产品）与DNA结合牢固，则无此现象。
相关试剂：
T10505×TBE缓冲液
T106050×TAE缓冲液
D10106×DNA Lodding Buffer
M1060D2000DNA Ladder
PC11202×Taq PCR MasterMix(含染料）。