酶工程期末复习
烟台大学酶工程期末考试复习题及参考答案

酶工程A2022秋复习题提示:输入题目题干部分文字,按键盘快捷键Ctrl+F查找题目答案。
超越高度一、单选题(每题2分,共40道小题,总分值80分)1.酶辅基的叙述正确的是:(2分)A、与酶蛋白结合较紧密B、决定酶催化作用的专一性C、能用透析或过滤方法使其与酶蛋白分开D、以非共价键与酶蛋白结合E、由酶分子的氨基酸组成正确答案:A2.当酶促反应速度等于70%Vmax时,[S]为:(2分)A、1KmB、2KmC、3KmD、4KmE、5Km正确答案:B3.酶促反应动力学所研究的是:(2分)A、酶的基因来源B、酶的电泳行为C、酶的诱导契合D、酶分子的空间结构E、影响酶促反应速度的因素正确答案:E4.Km值大小与:(2分)A、酶的浓度有关B、酶作用温度有关C、酶的性质有关D、酶作用环境pH有关E、酶作用时间有关正确答案:C5.含LDH1丰富的组织是:(2分)A、骨骼肌B、心肌C、脑组织D、肾组织E、肝组织正确答案:B6.关于变构调节的叙述正确的是:(2分)A、变构抑制剂可使S型曲线左移B、变构抑制即为负协同效应C、变构效应与酶的四级结构有关D、变构激活即为正协同E、所有的多亚基酶都受变构调节正确答案:C7.在其它因素不变的情况下,改变底物浓度:(2分)A、反应速度成比例增加B、反应速度成比例下降C、反应初速度成比例改变D、反应速度先慢后快E、反应速度不变正确答案:C8.关于酶的共价修饰的描述正确的是:(2分)A、只有磷酸化和去磷酸化B、该调节不需其它酶参加C、所有受共价修饰的酶则不在进行变构调节D、调节过程虽消耗ATP但经济有效E、调节过程中无逐级放大效应正确答案:D9.米氏酶的动力学曲线图为:(2分)A、直线B、矩形双曲线C、S型曲线D、抛物线E、以上都不是正确答案:B10.同工酶是指:(2分)A、催化的化学反应相同B、催化不同的反应而理化性质相同C、酶的结构相同而存在部位不同D、由同一基因编码翻译后的加工修饰不同E、催化相同的化学反应理化性质也相同正确答案:A11.国际酶学委员会主要根据把酶分为六大类。
《酶工程》期末复习题整理

第一章1.酶工程:是生物工程的重要组成部分,是随着酶学研究迅速发展,特别是酶的推广应用,使酶学和工程学相互渗透、结合、发展而成的一门新的技术科学,是酶学、微生物学的基本原理与化学工程有机结合而产生的边缘科学技术。
2.化学酶工程:指自然酶、化学修饰酶、固定化酶及化学人工酶的研究和应用3.生物酶工程:是酶学和以基因重组技术为主的现代分子生物学技术结合的产物,亦称高级酶工程。
4.酶工程的组成部分?答:酶工程主要指自然酶和工程酶(经化学修饰、基因工程、蛋白质工程改造的酶)在国民经济各个领域中的应用。
内容包括:酶的产生;酶的分离纯化;酶的改造;生物反应器。
5.酶的结构特点?答:虽然少数有催化活性的RNA分子已经鉴定,但几乎所有的酶都是蛋白质,因而酶必然具有蛋白质四级结构形式。
其中一级结构是指具有一定氨基酸顺序的多肽链的共价骨架;二级结构为在一级结构中相近的氨基酸残基间由氢键的相互作用而形成的带有螺旋、折叠、转角、卷曲等细微结构;三级结构系在二级结构基础上进一步进行分子盘区以形成包括主侧链的专一性三维排列;四级结构是指低聚蛋白中各折叠多肽链在空间的专一性三维排列。
具有低聚蛋白结构的酶(寡聚酶)必须具有正确的四级结构才有活性。
具有活性的酶都是球蛋白,即被广泛折叠、结构紧密的多肽链,其氨基酸亲水基团在外表,而疏水基团向内。
6.酶活性中心:是酶结合底物和将底物转化为产物的区域,通常是整个酶分子中相当小的一部分,它是由在线性多肽链中可能相隔很远的氨基酸残基形成的三维实体。
7.酶作用机制有哪几种学说?答:锁和钥匙模型、诱导契合模型8.酶催化活力的影响因素?答:底物浓度、酶浓度、温度、pH等。
9.酶的分离纯化的初步分离纯化的步骤?答:(一)材料的选择和细胞抽提液的制备1.材料的选择:目的蛋白含量要高,而且容易获得2.细胞破碎方法及细胞抽提液的制备。
为了确保可溶性细胞成分全部抽提出来,应当使用类似于生理条件下的缓冲液。
动物组织和器官要尽可能除去结缔组织和脂肪、切碎后放人捣碎机中。
酶工程期末重点总结

酶工程期末重点总结一、酶工程概述酶工程是将酶应用于工业领域的一门科学,通过对酶的研究和改良,可以提高酶的稳定性、催化活力、选择性和产量,以满足工业生产的需求。
酶工程的应用范围广泛,涉及生物技术、医药化学、食品工程等多个领域。
二、酶的产生和分离纯化1. 酶的产生:酶可以通过天然微生物、重组DNA技术等方法进行生产。
天然微生物通过发酵过程产生酶,而重组DNA技术可以将特定基因导入到宿主微生物中,使其产生目标酶。
2. 酶的分离纯化:酶的分离纯化通常包括细胞破碎、组织液处理、沉淀和层析等步骤。
其中,层析是一种常用的分离纯化方法,包括凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。
三、酶的性质和特点1. 酶的性质:酶是一种特殊的蛋白质,具有催化作用。
酶的催化作用是高度选择性的,可以加速化学反应的速率并降低反应的能量活化值。
2. 酶的特点:酶具有高效、低成本、环境友好等特点。
由于酶具有高度选择性,因此可以在温和的条件下催化反应,减少能耗和废弃物产生。
四、酶的改良和优化酶的改良和优化是酶工程的核心内容之一,旨在提高酶的催化活力、选择性和稳定性,以满足工业生产的需求。
1. 酶的改造:通过理性设计和随机突变等手段,改变酶的氨基酸序列,以改善其性质。
常用的改造方法包括点突变、插入突变和删除突变等。
2. 酶的固定化:将酶固定在材料表面或载体上,增加酶的稳定性和重复使用性。
常用的固定化方法包括包埋法、凝胶包覆法和共价固定法等。
3. 酶的进化:通过模拟自然界的进化过程,通过多代选择和酶库筛选等方法,获得具有改良性质的酶。
进化方法包括DNA重组技术、DNA重组酶库和聚合酶链式反应等。
五、酶工程在工业中的应用酶工程在工业中的应用广泛,涉及到生物能源、纺织印染、制药等多个领域。
1. 生物能源:酶可以催化生物质转化为生物能源,如酶解纤维素制备生物乙醇。
2. 纺织印染:酶可以代替传统的化学处理方法,实现更加环保和高效的染色和整理。
3. 制药:酶可以用于合成药物和研发新药,如利用酶合成青霉素等抗生素。
酶工程期末试题及答案

酶工程期末试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 酶工程中常用的酶固定化方法不包括以下哪种?A. 吸附法B. 共价结合法C. 包埋法D. 离心法答案:D2. 下列哪项不是酶的催化特性?A. 高效性B. 专一性C. 可逆性D. 需要高温答案:D3. 酶工程中,酶的来源不包括以下哪种?A. 植物B. 动物C. 微生物D. 无机物答案:D4. 酶的活性中心通常包含哪些元素?A. 金属离子B. 氨基酸残基C. 核酸D. 糖类答案:B5. 下列关于酶工程的描述,错误的是?A. 酶工程是生物技术的一部分B. 酶工程可以提高酶的稳定性C. 酶工程可以提高酶的催化效率D. 酶工程不能改变酶的催化特性答案:D6. 酶工程中,酶的固定化技术主要用于什么目的?A. 提高酶的稳定性B. 增加酶的催化效率C. 便于酶的回收和重复使用D. 以上都是答案:D7. 下列哪种酶在工业生产中应用最广泛?A. 淀粉酶B. 蛋白酶C. 纤维素酶D. 脂肪酶答案:A8. 酶的催化效率通常比无机催化剂高多少倍?A. 10倍B. 100倍C. 1000倍D. 10000倍答案:D9. 酶的专一性是由什么决定的?A. 酶的活性中心B. 酶的氨基酸序列C. 酶的三维结构D. 酶的浓度答案:A10. 酶工程中,酶的催化反应通常在什么条件下进行?A. 高温B. 高压C. 常温常压D. 真空答案:C二、填空题(每题2分,共20分)1. 酶工程是通过___________和___________技术,对酶进行改造和应用的一门学科。
答案:基因工程、蛋白质工程2. 酶的活性中心通常由___________和___________组成。
答案:氨基酸残基、金属离子3. 酶的催化作用是通过___________和___________来实现的。
答案:降低反应活化能、提供反应途径4. 酶工程中,酶的固定化方法主要有吸附法、___________和___________。
酶工程期末复习

酶工程名词解释、填空(3*10)、简答、论述(12*2或20*1)第一章绪论3、生物工程:发酵工程(微生物工程)、酶工程、基因工程和细胞工程。
4、运用基因工程技术和发酵工程技术可改善原有酶的性能、提高酶的产率、增加酶的稳定性,使其在后提取工艺和应用过程中更容易操作。
5、酶工程分为2类:①化学酶工程:又称初级酶工程,是指天然酶、化学修饰酶、固定化酶以及人工模拟酶的研究和应用。
②生物酶工程:又称高级酶工程,是酶学和以DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物。
主要内容包括:用基因工程技术大量生产酶(克隆酶);对酶基因进行修饰,产生遗传修饰酶(突变酶);设计新酶基因,合成自然界不曾有过的新酶。
第二章酶学基础4、影响酶促反应的因素:①底物浓度:酶浓度不变,当底物浓度较低时,反应速率对底物浓度的关系呈正比关系,表现为一级反应。
随着底物浓度的增加,反应速率不再按正比升高,反应表现为混合级反应。
当底物浓度达到相当高时,底物浓度对反应速率影响变小几乎无关,反应达最大速率,为零及反应。
②酶浓度:酶活力的大小可以用一定条件下所催化的某一化学反应的反应速度来表示,两者呈线性关系。
③温度:温度对酶反应速率的影响表现在两个方面,一方面是当温度升高时,反应速率加快。
另一方面由于酶是蛋白质,随着温度升高,使酶蛋白逐渐变性而失活,引起酶反应速率下降。
在较低的温度范围内,酶反应速率随温度升高而增大,但超过一定温度后,反应速率反而下降,因此只有在某一温度下,反应速率达到最大值,这个温度就称为酶反应的最适温度。
④pH:在一定pH下,酶表现最大活力,高于或低于此pH,酶活力降低,通常把表现出酶最大活力的pH称为该酶的最适pH。
酶的最适pH不是一个常数,受许多因素影响。
⑤抑制剂:不可逆抑制剂:(1)非专一性不可逆抑制剂,(2)专一性不可逆抑制剂可逆抑制剂:最重要和最常见的是竞争性抑制剂。
⑥激活剂:凡是能提高酶活性的物质都称为激活剂,其中大部分是无机离子或简单的有机化合物。
酶工程期末重点

酶工程期末复习第一章绪论1、酶是具有生物催化功能的生物大分子,分为蛋白类酶(P酶)和核酸类酶(R酶)。
2、酶的生产(enzyme production)是指通过各种方法获得人们所需的酶的技术过程。
3、酶的改性(enzyme improving)是通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程,主要包括酶分子修饰,酶固定化,酶的非水相催化和酶定向进化等。
4、酶的应用(enzyme application)是通过酶的催化作用获得人们所需的物质,除去不良物质或者获取所需信息的技术过程。
5、酶活力是指在一定条件下,酶所催化的反应初速度。
单位是国际单位IU或卡特(kat)6、酶的比活力(specific activity)是酶纯度的亮度指标,是指在特定条件下,单位重量蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。
7、酶的生产方法可以分为提取分离,反生物合成法和化学合成法三种。
(1)何谓酶工程,试述其主要内容和任务酶工程是指酶的生产、改性和应用的技术过程酶工程的主要内容包括微生物细胞发酵产酶、动植物细胞培养产酶、酶的提取与分离纯化、酶分子修饰、酶固定化、酶的非水相催化、酶定向进化、酶反应器、酶的应用主要任务:经过预先设计,通过人工操作,优质生产获得人们所需的酶,并通过各种方法改进酶的催化特性,充分发挥其催化功能,对酶进行高效应用(2)酶有哪些显著的催化特性?专一性强、催化效率高、作用条件温和(3)简述影响酶催化作用的主要因素底物浓度(主要)、酶浓度、温度、pH、激活剂浓度、抑制剂浓度(4)简述酶活力单位的概念和测定酶活力的基本步骤-酶活力单位:在特定条件下(温度可采用25℃,pH等条件均采用最适条件),每1min催化1微摩尔的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位。
基本步骤:(1)根据酶催化的专一性,选择适宜的底物,并配制成一定浓度的底物溶液。
(2)根据酶的动力学性质,确定酶催化反应的温度、pH、底物浓度、激活剂浓度等反应条件(3)在一定的条件下,将一定量的酶液和底物溶液混合均匀,适时记下反应开始的时间。
酶工程期末复习资料

酶⼯程期末复习资料酶⼯程期末复习资料名词解释:1.酶⼯程:⼜称为酶技术,是指酶的⽣产与应⽤的技术过程。
2.酶的⽣产:通过各种⽅法获得⼈们所需的酶的技术过程。
3.酶的改性:是通过各种⽅法改进酶的催化特性的技术过程。
4.酶的应⽤:是在特定的条件下通过酶的催化作⽤,获得⼈们所需的产物、除去不良物质或获得所需信息的技术过程。
5.酶⼯程的主要任务:经过预先设计,通过⼈⼯操作,获得⼈们所需的酶,并通过各种⽅法使酶充分发挥其催化功能。
6.酶活⼒:指在⼀定条件下,酶所催化的反应初速度。
7.酶活⼒单位:在特定条件下(温度可采⽤25℃,pH等条件均采⽤最适条件),每1 min 催化1 µmol 的底物转化为产物的酶量定义为1 个酶活⼒单位。
或在特定条件下,每秒催化1 mol底物转化为产物的酶量定义为1卡特(Kat)。
1 Kat =6×107 IU8.酶的⽐活⼒:是酶纯度的⼀个指标,是指在特定条件下,单位重量(mg)蛋⽩质或RNA所具有的酶活⼒单位数。
9.酶的转换数:Kp,⼜称为摩尔催化活性,是指每个酶分⼦每分钟催化底物转化的分⼦数。
即是每摩尔酶每分钟催化底物转化为产物的摩尔数。
10.酶的催化周期: 转换数的倒数称为酶的催化周期。
催化周期是指酶进⾏⼀次催化所需的时间。
11.固定化酶: 固定在载体上并在⼀定空间范围内进⾏催化反应的酶。
12.酶的结合效率:⼜称为酶的固定化率,是指酶与载体结合的百分率。
13.酶活⼒回收率:是指固定化酶的总活⼒与⽤于固定化的总游离酶活⼒的百分率。
14.相对酶活⼒:具有相同酶蛋⽩(或酶RNA)量的固定化酶活⼒与游离酶活⼒的⽐值称为相对酶活⼒。
15.酶的定向进化技术:模拟⾃然进化过程(随机突变和⾃然选择)在体外进⾏酶基因的⼈⼯随机突变,建⽴突变基因⽂库,在⼈⼯控制条件的特殊环境下,定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。
16.酶的提取分离法⽣产:是采⽤各种技术从动物、植物、微⽣物细胞或者其它含酶原料中将酶提取出来,再与所含杂质进⾏分离的技术过程。
酶工程期末复习

通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。
酶分子修饰的意义:1)提高酶的活力(activity)(2)增强酶的稳定性(stability)(3)降低或消除酶的抗原性(immunological property)(4)改变酶的动力学特性,如反应温度、pH、Km化学修饰:1、金属离子置换修饰 2、大分子结合修饰 3、小分子修饰(侧链基团修饰)4、肽链有限水解修饰5、氨基酸置换修饰金属离子置换修饰(主要针对金属酶而言)α-淀粉酶中的Ca2+,谷氨酸脱氢酶中的Zn2+,过氧化氢酶分子中的Fe2+,酰基氨基酸酶分子中的Zn2+,超氧化物歧化酶分子中的Cu2+,Zn2+金属离子置换修饰的过程:a.酶的分离纯化b.除去原有的金属离子c.加入置换离子大分子结合修饰(macro molecules combine modification)采用水溶性大分子与酶的侧链基团共价结合,使酶分子的空间构象发生精细的改变,从而改变酶的特性与功能的方法。
抗原性降低或消失聚乙二醇(PEG)、肝素、右旋糖酐、环糊精、羧甲基纤维素、白蛋白、聚丙烯酸等大分子修饰(共价)的过程修饰剂的选择→修饰剂的活化→修饰→分离PEG和人血清白蛋白在消除酶分子抗原性方面效果较好。
精氨酸酶:抗癌作用,经PEG结合修饰,其抗原性消除。
L-天冬酰胺酶:经PEG结合修饰后,使抗原性显著降低甚至消除。
绝大多数酶经化学修饰后,最大反应速度Vm并没有变化,而Km会增大。
固定化酶,是指在一定空间范围内起催化作用,并能反复和连续使用的酶。
酶的固定化:采用各种方法,将酶固定在水不溶性的载体上,制备成固定化酶的过程。
为什么要制备固定化酶?固定化酶的优点:可反复使用,稳定性高;易与底物和产物分开,便于分离纯化;可实现连续化生产,提高效率。
固定化方法:物理吸附法特点:操作简单、条件温和、使用过程中酶易脱落,常与其它方法结合使用。
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酶工程期末复习一、名词解释1、酶工程:是酶的生产、改性与应用的技术过程。
由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新的技术学科。
2、酶的化学修饰:通过化学基团的引入或除去,使蛋白质共价结构发生改变。
3、必需水:一般将维持酶分子完整空间构象所必需的最低水含量称为必需水。
4、抗体酶:具有催化活性的抗体,即抗体酶。
5、别构效应:调节物与酶分子的调节中心结合之后,引起酶分子构象发生变化,从而改变催化中心对底物的亲和力。
这种影响被称为别构效应或变构效应。
6、别构酶:能发生别构效应的酶称为别构酶。
7、酶活力:又称酶活性,是指酶催化某一化学反应的能力。
8、比活力:也称为比活性,是指每毫克酶蛋白所具有的酶活力单位数,一般用IU/mg 蛋白质表示。
9、生物传感器:由生物识别单元和物理转换器相结合所构成的分析仪器。
10、蛋白质工程:是以创造性能更适用的蛋白质分子为目的,以结构生物学与生物信息学为基础,以基因重组技术为主要手段,对天然蛋白质分子的设计和改造。
11、酶反应器12、固定化酶:固定在载体上并在一定空间范围内进行催化反应,可以反复、连续使用的酶。
13、水活度:是指在一定温度和压力下,反应体系中水的摩尔系数w χ与水活度系数w γ的乘积:ww w γχα=。
14、生物反应器:指有效利用生物反应机能的系统(场所)。
15、酶反应器:以酶或固定化酶作为催化剂进行酶促反应的装置称为酶反应器。
16、活化能:从初始反应物(初态)转化成活化状态(过渡态)所需的能量,称为活化能。
二、填空题1、酶活力测定的方法有终止法和连续反应法。
常用的方法有比色法、分光光度法、滴定法、量气法、同位素测定法、酶偶联分析。
2、酶固定化的方法有吸附法(物理吸附法、离子交换吸附法)、包埋法(网格包埋法、微囊型包埋法、脂质体包埋法)、共价结合(偶联)法、交联法。
3、酶活力是酶催化反应速率的指标,酶的比活力是酶制剂纯度的指标,酶的转换数是酶催化效率的指标。
4、细胞破碎的主要方法有机械法(珠磨法、高压匀浆法、超声波破碎法)、非机械法(物理法、化学法、酶法)。
5、有机溶剂的极性系数lgP 越小,表明其极性越强,对酶活性的影响越大。
6、lgP 越大,溶剂的疏水性越强;lgP 越小,溶剂的亲水性越强。
7、酶反应器的类型根据所使用的酶,分为溶液酶反应器、固定化酶反应器。
根据操作方式,分为分批式操作、连续式操作、流加式操作。
根据几何形式,分为罐型、管型、膜型。
根据流体流动特性活塞式反应器,分为非理想型酶反应器、理想型酶反应器(全混式反应器、活塞式反应器)。
8、决定酶催化活性的因素有两个方面,一是酶分子结构,二是反应条件。
9、抗体酶的制备方法主要有拷贝法、插入法、诱导法、化学修饰法和基因工程法。
10、酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。
11、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能,即提高酶活力、消除抗原性、增加稳定性。
12、酶的生产方法有提取分离法、生物合成法和化学合成法。
13、酶的分离纯化方法中,根据目的酶与杂质分子大小差别有凝胶过滤法,超滤法和超离心法三种。
14、由于各种分子形成结晶条件的不同,也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶,因此酶结晶既是纯化手段,也是纯化标志。
15、影响酶催化效率的有关因素(酶具有高效性的原因)有:邻近定向效应、应变效应、酸碱催化、共价催化、金属离子催化。
16、Km值增加,其抑制剂属于竞争性抑制剂,Km不变,其抑制剂属于非竞争性抑制剂,Km减小,其抑制剂属于反竞争性抑制剂。
17、酶生物合成的模式分是同步合成型、延续合成型、中期合成型、滞后合成型。
18、固定化酶的评价指标有酶的活力、蛋白总量、偶联率及相对活力、半衰期。
三、选择题1、核酸类酶是( D )A 催化RNA进行水解反应的一类酶B 催化RNA进行剪接反应的一类酶C 由RNA组成的一类酶D 分子中起催化作用的主要成分为RNA的一类酶2、在葡萄糖效应实验中可以通过添加( C )使分解代谢物阻遏作用解除。
A 诱导物B 激活剂 CcAMP D ATP3、端粒酶是( C )A 催化端粒水解的酶 B存在于端粒中的酶C 催化端粒生成和延长的酶D 催化RNA生成和延长的酶4、在凝胶层析的洗脱过程中,( A )A 分子质量最大的分子最先流出B 分子质量最小的分子最先流出C 蛋白质分子最先流出D 盐分子最先流出5、必需水是指( D )A 维持酶催化反应速度所必需的水量B 酶催化反应速度达到最大是所必需的水量C 与酶分子紧密结合的水量D 维持酶分子完整的空间构象所必需的最低水量6、酶的改性是指通过各种方法(A)的技术过程A.改进酶的催化特性B.改变酶的催化特性C.提高酶的催化效率D.提高酶的稳定性7、关于良好的两性电解质载体必须符合的要求,下列说法错误的是(B)A.在等电点条件下必须有足够的缓冲能力,以便控制好PH梯度B.分子质量要大,以便在等电点聚焦后易于与被分离的高分子物质分离C.化学组成应与被分离的样品组分不同,以免干扰样品组分的检测D.与样品中各组分不会发生化学反应8、能导致km值增加的酶抑制剂是(A)抑制剂A.竞争性B.非竞争性C.反竞争性9、在酶发酵过程中添加表面活剂可以(D)A.诱导酶的生物合成B.阻遏酶的生物合成C.提高酶活力D.提高细胞透过性10、有些酶在细胞进入平衡期以后还可以继续合成较长的一段时间,这是由于(A) A.改酶所对应的mRNA稳定性好 B.改酶所对应的DNA稳定性好C.细胞自溶后使酶分泌出来D.培养基中还有充足的营养成分11、催化一个化合物裂解为两个较小的化合物及其逆反应的酶称为(D)A.氧化还原酶B.转移酶C.水解酶D.裂合酶12、通过温度、压力、声波等各种物理因素的作用使组织细胞破碎的方法称为(B) A.机械破碎法 B.物理破碎法 C.化学破碎法 D.酶促破碎法13、利用抗原与抗体之间专一而又可逆的亲和力使抗体或者抗原分离纯化的亲和层析方法称为(B)A.分子对亲和层析B.免疫亲和层析C.共价亲和层析D.疏水层析14、以各种具有网状结构的多空凝胶作为支持体的电泳技术称(D)A.纸电泳B.薄层电泳C.薄膜电泳D.凝胶电泳15、酶的分离提纯中不正确的方法是(B)A.全部操作需在低温下进行,一般在0-5℃之间B.酶的提取物可长期保存于一般的4℃冰箱C.提纯时间尽可能短D.可采用一系列提纯蛋白质的方法如盐析、等电点沉淀等方法16、酶的特性中利用酶作为亲和层析固定相的分析工具必需的是(A)A.该酶的活力高B.对底物具有高度的亲和性C.酶能被抑制剂抑制D.最适温度高17、酶工程要解决的主要问题是如何降低酶催化过程的(D)A.最佳作用时间B.最大产物生成量C.最佳酶反应器D.成本18、酶工程包括(D)A .酶生产 B. 酶改性 C .酶的应用 D .以上都是19、酶合成的四种模式中最理想模式的是(C)A 同步合成B 中期合成C 延续合成D 滞后合成四、判断题1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。
(╳)2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。
(√)3、酶活力指在一定条件下酶所催化的反应速度,反应速度越大,意味着酶活力越高。
(√)4、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。
(√)5、培养基中的碳源,其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。
(╳)6、膜分离过程中,膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过,而把大于其孔径的颗粒截留。
(√)7、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对,在酶的亲和层析分离中,可把分子对中的任何一方作为固定相。
(√)8、角叉菜胶也是一种凝胶,在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。
(╳)9、α-淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化,但不称为糊精化酶。
(╳)10、酶法产生饴糖使用α-淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。
(╳)11、相同的酶在不同的pH条件下进行测定时,酶活力不同。
(╳)12、竞争性抑制的特点是最大反应速度Vm不变,米氏常数Km 增大。
(√)13、催化两个化合物缩成一个化合物的酶称为合成酶。
(╳)14、RNA剪切酶是催化RNA分子进行剪切反应的核酸类酶。
(╳)15、水解酶在水溶液中不能催化其逆反应。
(√)16、固定化细胞在一定的空间范围内生长繁殖,由于细胞密度增大,使生化反应加速,所以能够提高酶活力。
(╳)17、某些酶的催化反应产物可以诱导该酶的生物合成。
(√)18、在酶的发酵生产中,为了提高产酶率和缩短发酵周期,最理想的酶合成方式是延续合成型。
(√)19、氨酰-tRNA合成酶具有识别mRNA和tRNA的功能。
(╳)20、固定化原生质体与固定化细胞一样可以进行生长繁殖和新陈代谢。
(╳)五、简答题1、酶分离纯化的方法有哪些?析:酶分离纯化的方法主要有:离心分离、沉淀分离、过滤、萃取分离、层析分离以及电泳分离,具体如下:1)离心分离:借助于离心机所产生的离心力,将不同大小、不同密度的物质分离开来。
2)沉淀分离:通过改变某些条件或加入某些试剂,使酶的溶解度降低,而从溶液中沉淀析出,与其它溶质分离开。
3)过滤:利用过滤介质将不同大小、不同性状和不同性质的物质分离开。
4)萃取分离:利用样品中各组分在两项介质中的溶解度或分配比的不同来达到分离和纯化的目的。
5)层析分离:基于混合样品中各组分的物理化学性质差异,使各组分与两相的作用力或溶解度不同,先后被洗脱出来,从而得到分离的技术。
6)电泳技术:利用不同物质带电性质、带电量、颗粒大小和形状的不同,在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动实现分离纯化。
2、对酶进行化学修饰应考虑的因素有哪些?析:1)被修饰酶的性质:包括酶的稳定性,酶活性中心的状况,侧链基团的性质及反应性2)修饰反应的条件:包括PH与离子强度,修饰反应时间和温度,反应体系中酶与修饰剂的比例等3)修饰剂的选择:具有较大的分子量,对蛋白质的吸附具有良好的生物相溶性和水溶性,修饰剂表面的活性基团、反应基团的活化方式和活化条件以及修饰后酶活性的半衰期。
3、固定化酶的优缺点(作为重点,很有可能考10′的论述题)析:优点:1)极易将固定化酶与底物、产物分开,酶的使用效率提高,成本降低;2)可以在较长时间内进行反复分批反应和装柱连续反应;3)在大多数情况下,能够提高酶的稳定性;4)酶反应过程能够加以严格控制;5)产物溶液中没有酶的残留,简化了提纯工艺,增加产物的收率,提高产物的质量。
缺点:1)固定化时,酶活力有损失;2)增加了生产的成本,工厂初始投资大;3)可能存在空间位阻效应,只能用于可溶性底物,而且较适用于小分子底物,对大分子底物不适宜;4)与完整菌体相比不适宜于多酶反应,特别是需要辅助因子的反应; 5)胞内酶必须经过酶的分离手续。
4、酶的提取方法有哪些?析:1)盐溶液提取:大多数酶均能溶于水,而且在低浓度的中性盐存在时,酶的溶解度增加,这种现象称为盐溶。