胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)活性检测试剂盒说明书 微量法
肉桂醇脱氢酶(CAD)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4246
微量法肉桂醇脱氢酶（CAD）活性检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4246规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体120mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶-20℃保存试剂二液体×1瓶4℃保存试剂三液体25mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、提取液：内含不溶物，使用前摇匀。
2、试剂一：临用前加入5mL试剂三溶解。
可溶解后分装-20℃保存，避免反复冻融。
3、试剂二：液体置于试剂瓶内玻璃管中。
临用前加入15mL乙醇充分混匀，配好后4℃保存。
4、工作液的配制：将试剂一、试剂二、试剂三按1:1:2（V:V:V）的比例配制工作液，工作液现用现配。
产品说明：CAD是木质素生物合成途径中的关键酶之一，催化香豆醛、芥子醛以及松柏醛等生成与之相应的肉桂醇。
该酶多存在于高等植物、酵母、菌类中，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理，为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。
CAD催化肉桂醛和NADPH生成肉桂醇和NADP+，在340nm下测定NADPH消耗速率，即可反映CAD活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰、乙醇和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃，离心10min，取上清，置冰上待测。
2、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；10000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
琥珀酸脱氢酶(SDH)活性检测试剂盒说明书 微量法
琥珀酸脱氢酶（SDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0955规格：100T/96S产品内容：试剂一：液体110mL×1瓶，-20℃保存；试剂二：液体1mL×1瓶，-20℃保存；试剂三：液体18mL×1瓶，4℃保存；试剂四：粉剂×1支，4℃保存；临用前加入到试剂三中溶解待用；试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入4mL双蒸水，用不完的试剂仍4℃保存；试剂六：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入3.333mL双蒸水，用不完的试剂4℃保存。
产品说明：SDH（EC 1.3.5.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。
SDH是线粒体的一种标志酶，位于线粒体内膜上的一种膜结合酶，是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。
此外，为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。
SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸，脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸（PMS）传递还原2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），并且在600nm处具有特征吸收峰，通过600nm吸光度的变化，测定2．6-DPIP的还原速度，代表SDH酶活性。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、SDH的提取准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10uL试剂二，用冰浴匀浆器或研钵匀浆充分研磨，4℃11000g离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤和加样表1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至600nm，蒸馏水调零。
2、样本测定试剂名称（μL）测定管空白管试剂三168168试剂五121237℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）保温10min左右样本10蒸馏水10试剂六1010将试剂三和试剂五依次加入到1.5mLEP管中，37℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）保温10min后加入到微量比色皿或96孔板再按表格依次加入各试剂，在600nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1和1分20秒时的吸光度A2，计算ΔA=A1-A2，得到ΔA测定，ΔA空白。
果胶酶活性检测试剂盒说明书 微量法
果胶酶活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2635规格：100T/48S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体25mL×1瓶，4℃保存。
若溶液中有不溶解物质，可以50℃水浴溶解。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1支，10mg半乳糖醛酸。
临用前加入0.943mL蒸馏水，配成50μmol/mL的标准液产品说明：果胶酶（pectinase）是分解果胶的酶类，包括原果胶酶，果胶酯酶，多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类，广泛存在于高等植物果实和微生物中，是水果加工中最重要的酶。
果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸与DNS试剂反应生成在540nm有特征吸收峰的棕红色物质，测定540nm处吸光值变化可计算得果胶酶活性。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
菌类：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
液体：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、将50μmol/mL标准液用蒸馏水稀释为10、8、6、4、2、1μmol/mL的标准溶液备用。
3、取40μL样本沸水浴10min备用。
4、操作表：(在1.5mL离心管中)对照管测定管标准管空白管试剂一（µL）20020020020050℃水浴温育5min标准溶液（µL）--40-样本（µL）-40--蒸馏水（µL）---40煮沸样本（µL）40---混匀，50℃水浴反应30min，马上沸水浴5min，冷却后8000g，常温离心10min，取上清。
精浆柠檬酸定量检测试剂盒(酶法)产品技术要求华康
医疗器械产品技术要求编号：精浆柠檬酸定量检测试剂盒（酶法）2.性能指标2.1外观性状a）试剂盒标签应印制清晰、无错误；包装应清洁干净、无泄漏液体；组份组装应正确无误。
b）A 液应为棕色澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体，为悬浊液。
c）B 液（冻干粉）复溶后应为澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体。
d）缓冲液应为应为澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体。
e）冻干粉溶解液应为澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体。
f）柠檬酸校准液应为澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体。
g）标本稀释液应为澄清透明，无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体。
2.2装量试剂盒液体组份装量不小于组份标签标示装量。
2.3试剂酸碱度试剂盒组份缓冲液pH值范围6.5±0.1。
2.4精密度a)试剂盒重复性CV%≤10%。
b)试剂盒批间相对偏差R≤15%。
2.5准确度参考物质测试值相对偏差R不超过±15%。
2.6特异性干扰试验干扰率不超过±10%。
2.7线性范围a)在线性范围0～80umol/mL内,回归系数r≥0.990。
b)线性偏差X1～X3不超过±10%,X4、X5不超过±20%。
2.8最低检出限不高于0.1umol/mL。
2.9空白吸光度不高于0.050。
2.10分析灵敏度介于0.050 OD～0.150 OD/(10umol/mL)单位浓度。
2.11批内瓶间差试剂盒批内瓶间差的变异系数CV%≤10%。
线粒体复合体Ⅲ活性检测试剂盒使用说明
线粒体复合体Ⅲ活性检测试剂盒使用说明微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号:BC3245规格：100管/96样产品内容：试剂一：液体100mL×1瓶，-20℃保存；试剂二：液体20mL×1瓶，-20℃保存；试剂三：液体1.5mL×1支，-20℃保存；试剂四：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂五：粉剂×1支，-20℃保存；试剂六：液体2.5mL×1瓶，-20℃保存；产品简介：线粒体复合体Ⅲ（EC1.10.2.2）又称CoQ-细胞色素C还原酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，是线粒体呼吸电子传递链主路和支路的共有成分，负责把还原型CoQ的氢传递给细胞色素C，生成还原型细胞色素C。
与氧化型细胞色素C不同，还原型细胞色素C在550nm有特征光吸收，因此550nm光吸收增加速率能够反映线粒体复合体Ⅲ酶活性。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本的前处理：组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：(1)准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10uL试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
(2)将匀浆600g，4℃离心5min。
(3)弃沉淀，将上清液转移至另一离心管中，11000g4℃离心10min。
(4)上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白，可用于测定从线粒体泄露的复合体Ⅲ（此步可选做）。
(5)步骤（4）中的沉淀即为线粒体，加入200uL试剂二和2uL试剂三，超声波破碎（冰浴，功率20%或200W，超声3秒，间歇10秒，重复30次），用于复合体Ⅲ酶活性测定。
二、测定步骤：1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至550nm，蒸馏水调零。
2.样本测定（1）工作液的配制：临用前把试剂五转移到试剂四中混合溶解，置于37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）孵育5min；用不完的试剂4℃可保存一周；（2）在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、25μL试剂六和200μL工作液，立即混匀，记录550nm处初始吸光值A1和2min后的吸光值A2，计算ΔA=A2-A1。
血清异枸橼酸脱氢酶(ICD)
介绍Байду номын сангаас
01 正常值
03 注意事项 05 相关症状
目录
02 临床意义 04 相关疾病
血清异柠檬酸脱氢酶的测定，临床上对诊断肝病有一定意义。尤其是恶性肿瘤病人血清异柠檬酸脱氢酶的升 高，往往是肝脏转移的信号。
正常值
(1)比色法：4-11U/L。 (2)酶速率法(37℃)：1-7U/L。 (3)紫外法： 1.5-7.0U/L。 (注：具体参考值 请根据各实验室而定。)
相关疾病
病毒性肝炎，肝硬化
相关症状
黄疸，腹痛，腹水，恶心与呕吐，消瘦，水肿
感谢观看
临床意义
升高：急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝癌、肝转移癌、胆石症、胆囊炎、胆道阻塞、胰腺炎、右心功能不 全、肺梗死、新生儿黄疸、溶血性疾病等。
注意事项
一、抽血前的注意事项 (1)抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。血液中的酒精成分会 直接影响检验结果。 (2)体检前一天的晚八时以后，应开始禁食12小时，以免影响检测结果。 (3)抽血时应放 松心情，避免因恐惧造成血管的收缩，增加采血的困难。 二、抽血后应注意 (1)抽血后，需在针孔处进行局 部按压3-5分钟，进行止血。注意：不要揉，以免造成皮下血肿。 (2)按压时间应充分。各人的凝血时间有差异， 有的人需要稍长的时间方可凝血。所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫，可能会因未完全止血，而使血液 渗至皮下造成青淤。因此按压时间长些，才能完全止血。如有出血倾向，更应延长按压时间。 (3)抽血后出现 晕针症状如：头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水，待症状缓解后再进行体检。 (4)若局部出现淤血， 24小时后用温热毛巾湿敷，可促进吸收。
索莱宝（Solarbio）线粒体异柠檬酸脱氢酶（ICDHm）活性检测试剂盒说明书
线粒体异柠檬酸脱氢酶（ICDHm ）活性检测试剂盒说明书微量法货号: BC2165规格: 100T/48S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液一液体60 mL×1瓶4℃保存提取液二液体600 μL×2支-20℃保存提取液三液体40 mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶常温保存试剂三液体10 mL×1瓶4℃保存试剂四粉剂×2支-20℃保存试剂五液体5 mL×1瓶常温保存试剂六液体15 mL×1瓶常温保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1、提取液二：易挥发试剂，用完后盖紧盖儿后及时放回-20℃保存；2、试剂一：临用前加入5 mL 试剂三，充分溶解待用；3、试剂二：临用前加入5 mL 试剂三，充分溶解待用；4、试剂四：临用前加入0.375 mL 双蒸水，充分溶解待用；5、标准品：10 mg α-酮戊二酸。
临用前加入684 μL 蒸馏水，配成100 μmol/m L 标准液；6、工作液的配制：临用前根据用量将试剂一、试剂二按1:1比例混合，现配现用。
产品说明：线粒体异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase ，ICDHm ），广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，与线粒体基因表达及线粒体其他的功能有关。
异柠檬酸脱氢酶在生物体内有两种存在形式，以NAD 为辅酶的NAD-依赖型异柠檬酸脱氢酶，和以NADP 为辅酶的NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶。
异柠檬酸脱氢酶的主要功能，是在体内三羧酸循环中，催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸，将NAD 还原成NADH ，通过测定α-酮戊二酸的生成量，可以计算出线粒体异柠檬酸脱氢酶活力高低。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)试剂盒说明书
货号: QS1103 规格：50管/48样胞浆异柠檬酸脱氢酶（ICDHc）试剂盒说明书紫外分光光度法正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：ICDHc（EC 1.1.1.42）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化异柠檬酸脱氢脱羧生成α-酮戊二酸，同时还原NADP+生成NADPH。
ICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源，在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。
测定原理：利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应，在340 nm下测定NADPH浓度的增加。
自备实验用品及仪器:紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：提取液：60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体50 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1支，4℃保存；试剂三：粉剂×1支，4℃保存；试剂四：粉剂×1支，-20℃保存；样本的前处理：1、细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、将试剂二转移至试剂一中充分溶解，置于37℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）水浴中预热10min左右；用不完的试剂4℃保存。
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胞浆异柠檬酸脱氢酶（ICDHc）活性检测试剂盒说明书微量法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0405
规格：100T/96S
产品内容：
提取液：液体120mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；用时加入20mL提取液溶解；
试剂二：粉剂×1支，4℃保存；用时每支加275μL双蒸水充分溶解备用；
试剂三：粉剂×1支，4℃保存；用时每支加275μL双蒸水充分溶解备用；
产品说明：
ICDHc（EC1.1.1.42）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化异柠檬酸脱氢脱羧生成α-酮戊二酸，同时还原NADP+生成NADPH。
ICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源，在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。
利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应，在340nm下测定NADPH浓度的增加。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV 板）、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本的前处理：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：
1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，蒸馏水调零。
2、工作液配制：将试剂一、试剂二、试剂三按85：1：1的比例混合。
3、按下表步骤加样：
试剂名称（μL）测定管
工作液（μL）190
样本（μL）10
将上述试剂按顺序加入微量石英比色皿/石英96孔板中，加样本的同时开始计时，在340nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1；迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃水浴中，准确反应2分钟；迅速取出比色皿并擦干，记录2分20秒时的吸光度A2。
计算ΔA=A2-A1。
注意事项：
1、若A2-A1大于0.5，需将酶液用提取液稀释，使A2-A1小于0.5，可提高检测灵敏度。
若初始值A1大于0.5可尝试将酶液用提取液稀释。
2、实验时，试剂二、试剂三和样本在冰上放置，以免变性和失活；工作液37℃水浴放置。
3、比色皿中反应液的温度必须保持37℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃水浴锅中。
在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
4、最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。
三、ICDHc活力单位的计算：
a、按微量石英比色皿计算：
1、血清（浆）ICDHc活力的计算:
单位的定义：每mL血清（浆）在反应体系中每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
ICDHc（U/mL）＝[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样本÷T=1608×ΔA
2、组织中ICDHc活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
ICDHc（U/mg prot）＝[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样本×Cpr)÷T=1608×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
ICDHc（U/g鲜重）＝[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W÷V提取×V样本)÷T=1608×ΔA÷W
3、细菌或培养细胞中ICDHc活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
ICDHc（U/mg prot）＝[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样本×Cpr)÷T=1608×ΔA÷Cpr
（2）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟生成1nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
ICDHc（U/104Cell）＝[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样本×500)÷T=3.2×ΔA V反总：反应总体积，2×10-4L；
ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103L/moL/cm；
d：石英比色皿光径，1cm；
V样本：加入样本体积，0.01mL；
V提取：加入提取液体积，1mL；
Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；
W：样本鲜重，g；
T：反应时间，2min；
500：细菌或细胞数量，500万。
b、按石英96孔板计算：
将上述公式中光径d-96孔板光径改为0.6cm。