课件--第六章 电泳仪

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• 综上所述,在两界面上一般带有电荷,形成双电层。 在电场作用下,带电界面连同双电层中剪切面以内的 物质向一方移动,而双电层可移动部分的反离子带着 溶剂分子向相反方向移动,于是就产生了电泳与电渗。 而迫使带电界面与双电层中扩散层部分做相对运动产 生电位差,即流动电位与沉降电位。由此可见,动电 现象是电现象与流体流动交叉的复杂现象,动电理论 既涉及双电层,也涉及液体流动理论,所以是很复杂 的。由于动电现象中两相相对移动的边界是双电层中 剪切面,所以它与从剪切面处到液体主体相间的电位 差(即 电位)有关。
zeta电位是动电现象的根本原因
胶体溶液是分散相大小为1nm-1000nm的高 分散多相体系。在胶体的分散体系中,胶体颗粒带 一定量的电荷。由于整个胶体分散系统呈电中性, 因而在胶粒四周的分散介质中,必定具有电量相同 而符号相反的反离子存在,因此胶粒表面和介质间 就形成一定的电势差。从滑动面到溶液本体间存在 的电势差叫做ζ电势。 ζ电势越大,胶体体系越稳 定,因此ς电势大小是衡量胶体稳定性的重要参数。
外循环恒温系统:高电压会产生高热,需冷却; 凝胶干燥器:用于电泳和染色后的干燥; 灌胶模具:制胶,玻璃板和梳子; 电泳转移装置:利用低电压,大电流的直流电场,使凝胶电 泳的分离区带或电泳斑点转移到特定的膜上,如PVDF膜
电泳洗脱仪:回收样品 凝胶扫描和摄录装置:对电泳区带进行扫描,从而给 出定量的结果。
流动电位(streaming potential)
• 与电渗现象正好相反,在外力作用下,液 体沿着毛细管流动,就会产生流动电流和 流动电位。
• 图中的是双层的厚度,双层扩散部分的离子速率 可近似地表示为: • pR • u= —— (1) • 2L 式(1)的变量,定义在图中,离子流产生 德尔电 流可用式(2)给出:

《电泳基本理论》PPT课件

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20世纪50年代,以支持介质为主的电泳模式不断涌现,如滤纸、 醋酸纤维素薄膜、淀粉薄膜等。
60年代以后发展了以凝胶为主的支持物的电泳方法,如 聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶电泳等。
1967年Shapiro A L等在凝胶电泳的基础上建立了SDS-聚 丙烯酰胺凝胶电泳技术。
70年代以后根据不同需要推出了多种电泳模式,如圆盘 电泳、垂直板电泳、双向电泳、脉冲电泳、等电聚焦电泳、 印迹转移电泳等技术。
同而对物质进行分离的一类实验技术。
带电颗粒在电场中移动是物质的一种运动现象。移动的
速度与颗粒带电的强弱、分离介质的阻力、电极液的粘度
和电场强度等因素有关。生物大分子在电场中移动的速度
除上述因素外还与分子形状、相对分子质量大小、分子的
带电性质及数目等因素有关精选。课件ppt
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1.2电泳技术的发展过程 电泳现象早在1808年就已经被发现,但电泳作为一种分 离技术却是在1937年由瑞典科学家Tiselius A首先提出来的, 并设计出世界上第一台自由电泳仪,建立了“移界电泳” 分离模式。他用光学方法观察到在电泳迁移过程中血清蛋 白质界面的移动,首先证明了血清是由白蛋白、α1、α2、β 和γ球蛋白组成的,为表彰他对电泳技术所做出的突出贡 献,1948年他被授予诺贝尔奖。
(4)聚丙烯酰胺凝胶双向电泳;
(5)聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦;
(6)聚丙烯酰胺凝胶转移印迹电泳;
(7)琼脂糖凝胶水平电泳;
与溶液的导电性K成反比。也就是说,电场强度越高电泳
速度越快;溶液的导电性越强,电泳速度越慢。因此电泳
速度随着电位梯度或溶液的导电性的变化而改变。
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3电泳的分类 3.1按分离原理分类 (1)区带电泳(zone electrophoresis,ZEP):是在半固相或 胶状介质上加一个点或一薄层样品溶液,然后在介质上加 电场,带电颗粒在支持介质上或支持介质内迁移,在电泳 过程中,不同的离子成分在均一的缓冲液系统中分离成独 立的区带(图3-2a),这是当前应用最广泛的电泳技术。

电泳技术(共21张PPT)

电泳技术(共21张PPT)
5 显色及分析 机械强度好,透明有弹性,稳定,无吸附作用和电渗作用,可制成不同孔径的凝胶。
优点:分辨率高,区带清晰、窄,加样部位自由,重现性好,可测定P或多肽的等电点。
蛋白:溴酚兰、氨黑10B、偶氮胭脂红B 根据要分离物质的相对分子质量选择合适的单体浓度。
机械强度好,透明有弹性,稳定,无吸附作用和电渗作用,可制成不同孔径的凝胶。
第4页,共21页。

2 滤纸的选择与处理 层析用滤纸,纸宽2~3cm/样品组分,长短影响电场强度。
3 点样
分1 电离泳胶::带小电孔粒径点子,在p圆H电8场.点中向(着与量其本少身电)荷相、反的点电极条移动状的过(程。一般),点中间(未知样品)、 点一边(已知样品) 点圆点(量少)、点条状(一般),点中间(未知样品)、点一边(已知样品)
凝胶(如聚丙烯酰胺凝胶) 4 操作要点
pH梯度支持介质的制备
聚焦电泳 检测 两性电解质载体的除去
第20页,共21页。
电泳技术思考题
1名词解释
电泳、电泳分离技术、泳动度、电渗、区带电泳、 相对迁移率、不连续凝胶电泳
2 影响泳动度的主要因素有哪些?
3 区带电泳的操作步骤一般有哪些?
4 如何制备聚丙烯酰胺凝胶?
CH2(NH2)COOH → (样品胶、浓缩胶pH6.7~6.8) →
CH2(NH2)COO-(0.1%~1.0%)泳动速度最慢(慢离子) 蛋白质(P)泳动速度介于快慢离子之间 电泳时, Cl -超过P走在最前面,其后形成一个离子浓度较
低的低电导区→较高电位梯度→P和慢离子加速移动→P 压缩成层
Aa:茚三酮、靛红
干法、湿法 分类:垂直管型盘状电泳、垂直板型电泳;
1 电泳:带电粒子在电场中向着与其本身电荷相反的电极移动的过程。

电泳仪器操作PPT课件

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U:4-1000v(常压电泳仪) I: 4-500mA P:4-300w 可以同时连接4组电泳槽(并联),此时应选择稳压输出,当接多 个电泳槽时,则仪器显示的电流数值为各槽电流之和。
电极插座
.
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(1) 设置工作程序
方法有三种: ①用键盘输入新的工作程序,主要使用该方法(见后边介绍)。 ②按〔读取〕 键,取出保存在0中的上次工作程序,然后按确认键。 (该电泳仪默认保存上次程序) ③按〔读取〕、〔 0-9〕、〔确定〕键,取出保存在(0-9)中的工作程 序。取出保存的程序,必须检查一遍,确认无误后才可启动仪器工作。
根据电泳方法,大致可分为3类: • 显微电泳 • 自由界面电泳 • 区带电泳:应用最广泛
.
4
电泳的分类
区带电泳按支持物的物理性状不同,可分为: • (1)纸电泳:支持物为滤纸; • (2)粉末电泳:如纤维素粉,淀粉,玻璃粉电泳; • (3)凝胶电泳:如琼脂,琼脂糖,硅胶,淀粉胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳; • (4)缘线电泳:如尼龙丝,人造丝电泳
一般预置电压或电流值要在工作电压或电流值的基础上加30,通常1v电压
≒0.35mA工作电流,1mA≒3.5V工作电压,实际工作功率=工作电压×工作电
流。 例如:恒定电压为200v,预设电流100mA(工作电流+30mA),通常1V电
压≒0.35mA工作电流,200V电压预计工作电流为70mA,电流再向上加 30mA=100mA。
作用:在电泳中提供电压与电流。
1、电泳仪的分类 根据电泳仪的电压范围可将电泳仪分为3类:
(1)常压电泳仪(600V):用于净电荷和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳; (2)高压电泳仪(3000V):用于载体两性电解质等电聚焦电泳和DNA测序; (3)超高压电泳仪(3000~5000V):用于毛细管电泳。

电泳技术和电泳仪

电泳技术和电泳仪

电极
用于产生电场的部件,通常由 金属制成。
缓冲液
维持电泳过程中的pH值稳定 ,并具有导电性。
分离胶
用于分离不同带电粒子的凝胶 ,具有分子筛的作用。
电泳仪的功能和特点
高分辨率
能够分离和检测痕量级别的物 质。
高灵敏度
能够检测低浓度的物质。
快速分离
可在短时间内完成样品的分离 。
自动化
可实现自动化操作,提高工作 效率。
智能化
电泳仪的智能化主要体现在自动 化控制、数据分析和远程监控等 方面,通过与计算机和移动设备 的连接,实现了远程操作和实时
监控。
电泳技术和电泳仪的未来展望
交叉融合
随着多学科交叉融合的深入发展,电泳技术和电泳仪将与 质谱技术、纳米技术、生物信息学等领域进行更紧密的结 合,开拓新的应用领域。
个性化医疗
解释
电泳技术利用了带电粒子在电场 中的迁移率不同而实现分离,广 泛应用于生物、医学、环境监测 等领域。
电泳技术的原理
原理
在电场的作用下,带电粒子在电场中的迁移率取决于其电荷量、质量和分子大 小等因素。通过调整电场强度和电泳介质,可以控制带电粒子的迁移速度和分 离效果。
说明
电泳技术根据带电粒子的性质和分离目的的不同,可分为多种类型,如自由流 电泳、区带电泳、等电聚焦电泳等。
通过改进电泳介质和优化电泳条件,实现了对复杂样品的高分辨率分离,
提高了检测的灵敏度和准确性。
02
自动化和智能化
电泳技术正朝着自动化和智能化的方向发展,通过引入机器人技术和人
工智能算法,实现了电泳过程的自动化控制和智能化分析。
03
微流控芯片技术
微流控芯片技术结合电泳分离,可以实现样品的快速、高效分离,具有

《电泳技术和电泳仪》课件

《电泳技术和电泳仪》课件
• Zhang B, et al. (2018). Advances in electrophoresis technologies for DNA analysis. J Forensic Sci, 63(2): 297-305.
• Li C, et al. (2019). Future perspectives of electrophoresis in proteomics. Expert Rev Proteomics, 16(6): 449-459.
3 等电聚焦电泳
根据物质的等电点将蛋白质等分离成不同电荷的区域。
电泳仪的组成和型号
电力来源
电泳仪使用专用电源提供稳定的电流和电压。
检测和记录系统
可以观察和记录电泳结果的设备和软件。
电解槽
容纳电解液的结构,其中电泳过程发生。
常见型号
常见电泳仪包括平板电泳仪、毛细管电泳仪和 聚合酰胺凝胶电泳系统。
电泳实验的步骤和注意事项
2 微流控电泳
利用微小管道和微流控芯片实现小体积样品 的高通量电泳分离。
3 多维电泳
将不同的电泳技术结合,提高分离能力和分 析维度。
4 新型凝胶材料
研发更先进的凝胶材料,提供更高分辨率和 更快速的电泳分离。
参考文献
• Smith A, et al. (2020). Principles and applications of electrophoresis. J Biol Chem, 295(14): 4563-4579.
常用电泳技术在生物学和医学中的应用
核酸分析
通过凝胶电泳分析DNA、RNA的 大小、纯度和序列。
蛋白质分析
法医学应用
通过凝胶电泳分析蛋白质的大小、 纯度和相对含量。

电泳技术PPT精品课程课件讲义

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电泳技术
主讲:XX XX
凡大医治病,必当安神
定志,无欲无求,先发大慈恻 隐之心,誓愿普救含灵之苦。
- - 孙思邈
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一、基本原理
电泳:在溶液中,带电粒子在外加电场的作用
下向相反电极移动的现象叫做电泳。
电泳分离方法主要就是根据大分子的分子量及
电性差异将大分子在电场中彼此分来的。简单
电流强度应该是每块胶板30mA左右。
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(二)琼脂糖凝胶电泳
1、概述 聚丙烯酰胺凝胶电泳对于分离生物大分子具 有较高的分辨率,但由于核酸分子比蛋白质分子大 得多,只能采用有较大孔径的琼脂糖凝胶来分离核
酸。由于核酸分子本身中含有大量的磷酸根,所以
核酸带有负电荷,在电场中会向正极移动。
中的甘油使样品溶液的密度变 大,避免加样后样品上漂; 2-巯基乙醇使蛋白质中的二硫键断裂,并不再形成新的二 硫键,溴酚蓝是指示剂,显示电泳前沿线的位置。将制胶 板中的密封教条除去,装入电泳槽,在正负极水槽中加入
电极缓冲液,将预处理后的蛋白质样品加入对应的梳空,
装好电泳槽,接好电源,开始电泳。施加在每块胶板上的
在浓缩胶中受到浓缩效应、电荷效应和分子筛效应
的影响,可被浓缩成一条极为狭窄的条带,因此当 蛋白质样品进入分离胶时就形成了彼此分离的清晰 条带,大大提高了分辨率。
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2、试剂 丙稀酰胺溶液中含有甲叉双丙稀酰胺 过硫酸铵(聚合的引发剂) 四甲基乙二胺是加速剂,可加快聚合的速度
2018/11/30
2018/11/30
1)打开电源 插上电泳仪电源,打开右侧面后部开关。主面板指示灯亮。 2)参数设置 电泳仪技术参数如下,在电泳仪使用时不要超过额定值。 最大电压:300 V 最大电流:400 mA 最大功率:75 W 最大时间:999 min 按下电泳仪主面板上“V/A Constant”按纽,进行恒压或恒流模式选择, “V”和 “A”上的指示灯来回切换,同时数显面板左方的“V”“mA”灯也 跟着切换。 恒压模式时,切换到“V”灯亮后,通过“+”和“-”进行调节电压数值 到 需要值。 恒流模式时与上一致。切换到“A”灯亮,设置所需电流值。 按下数显面板左方的“V/mA/时钟”按纽到时钟旁灯亮,可通过“+”“-” 调节设置时间值。 3)接上电泳槽电源线。意红色线插红色接口,黑色线插黑色接口。 4)按下“run/pause”按纽,“run”上的灯亮时开始电泳。 5)电泳过程中按下“V/mA/时钟”按纽可以当前运行电流电压和时间参数。 6)电泳过程中,可以按下“ run/pause”按纽暂停电泳和继续电泳。 2018/11/30 7)电泳完成后,按下“stop”按纽停止电泳。

电泳仪器操作课58页PPT

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电泳仪器操作课
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
28、目标的坚定是性格中最必要的力 量泉源 之一, 也是成 功的利 器之一 。没有 它,天 才也会 在矛盾 无定的 迷径中 ,徒劳 无功。- -查士 德斐尔 爵士。 29、困难就是机遇。--温斯顿.丘吉 尔。 30、我奋斗,所以我快乐。--格林斯 潘。
25、学习是劳动,是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢!

21、要知道对好事的称颂过于夸大,也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤,荒于嬉;行成于思,毁于随。——韩愈
23、一切节省,归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰,决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
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第六章电泳仪(Electrophoresister, EP)(一)、引言:1、现代生命科学研究的方法:分两类。

(1) 形态结构学方法:即把生物组织切片,用各类显微镜电镜等观察切面内的形态和结构,然后研究并总结其中规律。

(2) 生物化学方法:即用分离分析仪器对生物样品组分进行分离,然后用光谱、X光衍射等技术,对各类组分的结构、功能、和物理化学性质进行分析。

2、生命物质的分离技术:常用的有三类,即离心、电泳和层析技术。

支持介质中的带电颗粒,在电场作用下向与其荷电极性相反的电极移动的现象。

3、分离原理:(1) 电泳:带电颗粒(2) 层析:根据颗粒吸附性和摩擦系数进行分离。

(3) 离心:样品质量、密度4、适用性:* 离心方法:适于大量样品粗提纯。

* 电泳和层析:用于小量样品分析性分离。

(二)、电泳1、概念:* 应用:常用于蛋白质和核酸的分离、鉴定及定量分析等。

2、电泳的早期历史1809年:俄国Reuss进行了第一次电泳实验。

1937年:瑞典Tiselius观察了卵白蛋白的电泳迁移过程,用电泳方法证明血清是由白蛋白、 、 和 球蛋白组成的。

为此在1948年荣获诺贝尔化学奖。

* 早期电泳技术和装置的发展:Tiselius于1937年用移动界面电泳方法分离蛋白质,称为自由电泳。

此后几十年,发展了采用不同支持物的电泳技术,如滤纸电泳、醋酸纤维素膜电泳、凝胶电冰等。

各种类型的电泳仪器也不断出现。

* 仪器类型:按操作可分为手工、半自动、全自动等类型。

第一节电泳仪器的工作原理* 电泳原理:许多分子具有可电离基团,在溶液中能形成正、负离子。

(1)缓冲液A、B中各放一电极接直流电源,则两电极间形成一恒定电场。

A、B间用预先被缓冲液浸泡至饱和的支持介质联接,形成一个“桥”。

(2)将电泳的样品液滴在支持介质上。

则在电场作用下,样品中带正(负)电的颗粒移向负(正)极。

(3)在样品的各种离子到达电极之前关闭电源,则样品的各种成分便按照它们的电泳迁移率被分离开。

(一)影响电泳移动速度的若干因素:1、电荷:分子的净电荷越大,其移动速度越高。

2、分子的大小:分子越大,移动越慢。

3、支持介质的性质:孔径:小孔径的有分子筛的作用,能依分子大小或带电不同等分离分子;即具有“筛分”分子的作用。

粘性:阻碍泳动并起吸附作用。

4、电场强度:电压越高,分子的移动速度越大。

5、缓冲液离子强度:离子强度高,则移动速度慢,电泳区带窄而清晰;离子强度低,则移动速度快,电泳区带宽而边缘模糊。

6、温度:温度升高,则泳动速度加快。

(二)迁移率的数学推导1、粒子移动速度:电场中粒子受到的电场力:F=qE粒子运动时受到的阻力,满足stokes 公式:F’=6πηrv式中r 为粒子的半径, 为介质的粘度系数。

当两力平衡时,粒子作匀速泳动,由F =F ’得:v=qE/6πηr2、粒子的迁移率: 指带电粒子在单位电场强度下的迁移速度,可用下式表示: 式中: v -粒子的迁移速度(cm/s); u -迁移率;d -粒子迁移距离(cm); E -电场强度或电势梯度(V/cm); t -通电时间(s); U -加在支持物两端的实际电压(V); L -支持物的有效长度(cm)。

(三)电泳的应用-正常人的血清电泳图谱1、原理:血清蛋白中含有α1、α2、β、γ球蛋白等。

不同成分的物质,其颗粒大小、带电量及重量均不一样,故它们迁移率不同。

相同成分的物质,其迁移率很接近,泳动时形成一条带状。

2、方法:把血清蛋白放在支持介质上电泳,一段时间后,迁移率最大的清蛋白移动距离最大,其余依次为α1、α2、β、γ球蛋白排列。

这样各种蛋白质就被分离开来。

3、组分含量测定:方法有多种。

(1)比色测定—血清蛋白电泳后,分离出5条蛋白区带。

将电泳后滤纸烘干、染色,可看见几条色带。

剪下各色带,分别溶于脱色剂,再做比色测定,可求得各种蛋白质所占百分率。

(2)光密度扫描仪测定—烘干染色后的滤纸用扫描仪测吸光度,以吸光度为纵坐标,滤纸的长度为横坐标,绘出电泳图形。

图中每一峰代表一种蛋白质,用面积仪测峰面积,则各峰面积对总面积的百分数,就是各种蛋白质所占的质量百分比。

第二节 电泳技术的基本类型一、电泳类型* 根据工作原理:可分为区带、移动界面、等电聚焦、等速、免疫电泳等;Ut dL L U t d E v u ===//* 根据载体的性质:可分为滤纸、醋酸纤维膜、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳等;* 根据支持载体的位置或形状:可分为水平、垂直、板状、柱状、U型管、倒V字形、毛细管电泳等;* 根据使用目的:可分为核酸、血清蛋白、制备、DNA测序电泳等;* 根据用法:可分为双向、交叉、连续纸电泳、电泳-层析相结合技术等。

几个基本概念:* 自由电泳:指在自由溶液中直接进行、而不需支持介质的电泳。

* 区(条)带电泳:指大分子物质在特殊介质中(如滤纸等)电泳后,支持物上可呈现出不同的条带图谱;其应用最广泛。

* 支持介质:是样品电泳的场所;其种类很多;本章主要介绍需要载体的电泳技术。

二、常用的电泳方法(一)滤纸电泳1、装置:用滤纸作为支持载体,水平架在两个装有缓冲溶液的容器间,样品点于滤纸中央。

当滤纸被缓冲液润湿后,盖上绝缘密封罩,即可输入直流电压进行电泳。

2、特点:(1)电压愈高,带电粒子迁移速度愈快,样品分离时间愈短。

(2)装置简单,分离效果较好。

(二) 凝胶电泳是指用凝胶物质作支持物的区带电泳。

常用凝胶为葡聚糖、聚丙烯酰胺和琼脂糖。

其中琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳应用最多。

* 琼脂糖凝胶电泳:特点:(1) 区带易染色,干燥后背景几乎无色,便于光密度扫描检测。

可用于分离血清蛋白、血红蛋白、脂蛋白等。

(2) 电泳速度快,血清样品无需处理即可直接加样进行检测。

* 聚丙烯酰胺凝胶电泳:可将血清蛋白分离出20多条区带,广泛用于分析某些蛋白质及较小分子的核酸。

(三)等电聚焦电泳1、蛋白质的等电点pI对两性蛋白质,其分子表面带有COO-羧基和NH3+氨基,当溶液酸碱度在某pH值时,分子所带正、负电荷相同(即净电荷为零),这时蛋白质分子在电场中不会移动,此pH值称为该蛋白质的等电点pI。

(1) pH<pI时:溶液相对于等电点呈酸性,蛋白质带正电,在电场中向负极移动。

(2) pH>pI时:溶液相对于等电点呈碱性,蛋白质带负电,在电场中向正极移动。

2、等电聚焦概念设溶液的pH值是位置的函数,则在一个线性pH梯度的溶液中电泳时,样品中每种被分离的两性物质、在移向与它的等电点一致的pH位置后,便不再移动,称为聚焦。

因这点净电荷正负抵消为零,故又称为等电聚焦。

3、等电聚焦电泳特点(1)条带狭窄,很小样品也能获得清晰的区带界面。

(2)适用于中、大分子量生物组分,如蛋白质的分离。

(3)分辨率高。

(4)电泳速度快。

(四)等速电泳1、方法:在内径250~500 m毛细管内,采用两种不同缓冲液,一为前导缓冲液,其迁移率高于任何样品组分;另一为尾随缓冲液,其迁移率低于所有样品组分。

加电场后,前导液中离子迁移率大,速度快,冲在最前面,紧接的是样品中迁移率最大的组分;以此类推,排最后的是尾随液的离子。

结果各组分的离子形成各自独立的区带而分离。

分离完毕后,各区带都以同一个速度向前移动。

2、特点:(1)所有谱带以同一速度移动。

(2)区带锐化,界面清晰,分离能力强。

(3)区带浓缩,即各区带内离子的浓度为定值。

(五)免疫电泳是将电泳和免疫反应相结合的分析方法。

先利用电泳将蛋白质组分分离,再分别与抗体反应进行检测分析。

常用的免疫电泳技术包括:1、免疫扩散电泳:用于纯化抗原和抗体成分的分析、体液蛋白质的识别分析等。

2、对流免疫电泳:常用于以已知抗体检测相应的抗原。

3、火箭免疫电泳:在抗体量不变时,火箭峰的高度与抗原量成正比。

4、免疫固定电泳:常用于M蛋白的分型鉴定。

(六)、其他电泳方法和技术1、醋酸纤维素膜电泳以醋酸纤维素膜为支持物,电泳结束经染料染色后,用适当试剂使醋酸纤维素膜透明,然后用光密度仪扫描测定。

* 特点:分离速度快,且透明后可长时间保存。

2、淀粉胶电泳可根据表面电荷及分子量不同、用于分离大分子物质。

先根据待分离物所带电荷不同、进行第一向电泳,然后根据分子量大小、进行方向与第一向垂直的第二向电泳。

3、双向电泳* 特点:(1)可多次获得相同的印迹复本,做多次分析鉴定。

(2)灵敏性高,试剂用量少,速度快,操作简便。

4、毛细管电泳是指在极细的毛细管内所进行的各种形式的电泳。

第三节电泳仪器的基本结构分为电源、电泳槽及结果测定分析三个部分。

一、电源作用是建立电泳电场。

而电场与电压有关,一般可分为:* 常压电泳:100~500V,场强1~10V/cm,分离时间较长。

* 高压电泳:500~10kV,场强20~200V/cm,分离时间短。

常用的电泳电源有:1、普通直流电源由整流电路和滤波电路组成。

交流电经变压器变压和整流经滤波后,供给电泳槽。

优点:结构简单、成本低。

缺点:波动较大。

所以现在很少用。

2、直流稳压电源指交流电压或负载电流变化时,输出电压保持不变的电源。

3、直流稳流电源指当输入的电网电压、负载电流及温度发生变化时,输出电流保持不变的电源。

优点:可减少温度波动对电泳的影响。

类型:有两端式、四端式、以及反馈式稳流电源等。

4、双稳电源指输出电压和电流皆稳定的电泳电源。

5、三恒电源指输出电压、电流、功率皆稳定的电源。

6、三恒电源的工作过程共分三个阶段。

等电聚焦电泳过程中,凝胶板阻抗R会随时间t而变化。

故应预先选定好电压、电流和功率这三个参数。

(1)恒流输出阶段:电泳初始时,凝胶板R较小,电流较大。

为避免短路,烧坏凝胶,需限定IW,电流达IW时便保持恒定。

(2)恒功率输出阶段:随着R增加,输出功率P=I2R增大。

为避免凝胶过热,应限定PW,当P达到PW时便保持恒定。

(3)恒压输出阶段:随着R继续增加,输出电压U=(PR)1/2继续上升。

当U达到限定值UW 时便应保持不变。

整个电泳是从恒流 恒功率 恒压自动转换的。

7、电泳仪电源的主要技术指标:包括(1)输出电压、电流、功率:指输出的直流V、I、P范围。

(2)电压、电流、功率稳定度:指输出变化量与输出本身大小的比值。

稳定度越小,性能越高。

(3)输出组数:指电源可同时提供几路输出。

(4)连续工作时间:指电泳仪可连续正常工作的时间。

(5)保护措施:指电源电路的保护方式。

如过流、过压保护等。

(6)显示方式:指对工作电流、电压的显示。

有指针式和数字式两种。

(7)定时方式:电泳时间控制方式。

常用电子石英钟控制。

(8)电源电压、频率:指供电电源的额定电压和频率。

(9)功耗:指电泳仪的耗电功率。

二、电泳槽是样品分离的场所;槽上有盖子。

* 盖子作用:防止缓冲液的蒸发,及防止发生触电危险。

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