显微镜技术基本原理.
光学显微镜技术的原理与应用
光学显微镜技术的原理与应用光学显微镜是一种利用可见光实现物体放大的显微镜。
它具有成像清晰、放大倍数高、成本低廉等优点，因此在生物科学、医学、材料科学、化学等领域得到广泛的应用。
一、光学显微镜的原理光学显微镜的成像原理与人眼观察物体类似，都是利用物体反射、透射的光线进入眼睛或显微镜镜头，形成物体的像。
但是光学显微镜比人眼观察物体更加细致、准确。
1.1 光路结构光学显微镜的光路结构主要包括光源、物镜、目镜、调节机构等。
光源：提供足够的光线，主要分为光学显微镜自带光源和外部光源两种。
物镜：位于物体侧，负责收集反射、透射的光线并放大光线，成像在图像面上。
目镜：位于人眼侧，作为放大器来放大物镜成像的光线，形成真实的、清晰的物体像。
调节机构：主要包括调节光源亮度、调节目镜的焦距、用以调节物镜与物体距离的聚焦装置等。
1.2 成像原理物镜和目镜通过联合放大，使得物体放大成像后的像处于目镜的焦点位置，并让人目观测到像。
物镜放大倍数的提高提高形成的像的清晰度和分辨率。
二、光学显微镜应用无论是高精度的医学、生物学、化学或者更加广泛、复杂的材料学，光学显微镜都有着不可或缺的应用场景。
我们来看一下光学显微镜在各个领域的应用：2.1 生物科学光学显微镜在生物科学领域广泛应用, 它可以被使用于生物学、微生物学、分子生物学、细胞学等领域，使得这些领域的人员可以通过独立观察和研究进行高分辨率的观察。
2.1.1 细胞解剖和形态学研究细胞是组成生物体的最基本单元, 光学显微镜可以对细胞进行高清晰、高分辨率的观察, 这对细胞解剖和形态学研究起着至关重要的作用。
2.1.2 荧光成像经过化学反应的绿色荧光蛋白形成荧光，可以用于研究细胞生命活动的过程，而光学显微镜便可以使用荧光成像技术来观察细胞中的荧光成像反应，从而获取细胞相关的生命信息，例如：哪些特定蛋白质处于交互状态、活动中哪些酵素激活等细胞活动的规律和机制。
2.2 医学在医学领域，光学显微镜能够对病原体进行观察和诊断。
显微镜技术资料
一、光学显微镜的工作原理 二、光学显微镜的基本结构 三、光学显微镜的性能参数 四、像差和色差 五、光学显微镜的不足之处
一、光学显微镜的工作原理
显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统。把 焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜（object lens），而焦距较长，靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜 （ocular lens）。被观察物体位于物镜的前方，被物镜作第 一级放大后成一倒立的实像，然后此实像再被目镜作第二级 放大， 得到最大放大效果的倒立的虚像，位于人眼的明视距 离处。
2.分辨率的极限： 0.2m （可见光照明）
3.景深的极限： 0.1m （要求金相准备）
4.不能分析化学成分
第二节 光学显微镜的分类及其应用
一、双目生物显微镜 二、荧光显微镜 三、倒置显微镜 四、体视显微镜 五、暗场显微镜 六、偏光显微镜 七、激光扫描共聚焦显微镜
一、双 目 生 物 显 微 镜
NA=nsinβ
低数值孔径 干物镜
较高数值孔径 干物镜
油
油
最高数值孔径 油浸物镜
(三) 分 辨 率
• 分辨率：显微镜的最重要参数，能够区 分开两个质点的最小距离。
0.61λ D= N•sinα/2
D：分 辨 率 λ ：光波的波长 N：介质折射率 α ：物镜镜口角
N与D成反比 ，λ与D成正比
提高显微镜分辨率的方法
普通光学显微镜的工作原理
普通光学显微镜的工作原理普通光学显微镜（也称为光学显微镜）是一种常见的显微镜类型，用于研究微观范围内的物体。
它是通过利用物体对光的吸收、折射和散射现象来获得增强的图像放大。
普通光学显微镜通常由以下几个主要部分组成：目镜、物镜、二次放大物镜、光源、光孔、像平面/投影平面及物体舞台。
首先，光源产生光线，通常是透射型光源，可以是白炽灯或者是荧光灯，这些光线通过反射和聚焦后进入到物体上。
装置在显微镜下部的光源提供了一束平行光线，使物体得到正确的照明。
物镜位于物体顶部，物镜是显微镜最主要的组成元件之一。
它由凸透镜或反射镜组成，通过透镜让光线通过物体，聚焦并放大物体的细节。
物镜通常具有高度的放大倍率，常见的物镜倍率有4X、10X、20X、40X、60X 和100X。
目镜位于显微镜的顶部，它通常由两个或两组透镜组成。
目镜的主要功能是进一步放大已放大的物体图像。
目镜通常具有10倍或15倍的放大倍率。
物体舞台位于物镜和目镜之间，用于放置待观察的样品。
物体舞台通常带有可移动的机构，可以在三个轴上（X，Y和Z轴）进行微调以准确定位和对焦待观察的物体。
在双物镜显微镜中，二次放大物镜通常位于目镜和物镜之间，使放大效果增强。
光通过物镜后，由二次放大物镜进一步放大，然后通过透镜组，最后进入目镜。
在目镜中，光线经过折射、聚焦和放大，形成人眼可见的放大图像。
为了获得清晰、锐利和放大的图像，可以使用染色、相差干涉和荧光等技术。
对于放大图像的观察，目镜和物镜的倍率需要相乘，例如，目镜放大率为10倍，物镜放大率为40倍，则总放大率为400倍。
在普通光学显微镜中，还可以通过调整目镜和物镜的位置，以及控制光源的亮度和聚焦来获得更好的图像。
值得注意的是，普通光学显微镜只适用于可见光的观测。
而对于需要更高分辨率的观察和研究，如观察细胞核、分子结构和超微观结构，需要使用电子显微镜。
总结起来，普通光学显微镜的工作原理是通过光源产生的光线，经过物镜、二次放大物镜和目镜的光学组件，对待观察的物体进行放大的过程。
显微镜技术基本原理
显微镜技术基本原理
显微镜是用来观察微小物体的结构和形象的仪器。
相对于人眼自然视觉，显微镜可以将微小的物体放大若干倍，使其在视野中形成一幅完整的
图象，给我们提供了一种更为方便、高效的检测和研究方式。
显微镜技术的基本原理是通过利用光学原理，将光在其他物体表面上
反射，形成一个小的可视图像。
当光在另一个物体上，即显微镜上反射时，根据光学原理，它会发生折射，然后以一种会改变光线长度和方向的形式，使图像更清晰地展示在另一个物体的表面上，从而被观察到。
显微镜技术的基本原理也可以理解为望远镜的原理，即利用光的折射
原理，将一个物体发出的光线反射到另一个物体上，形成一个放大的图像，从而实现放大的目的。
望远镜和显微镜的区别在于，前者用来观测大距离
的物体，而后者用于观测微小的物体。
此外，显微镜还有另外一种原理，即衍射原理。
衍射原理可以被简单
地理解为当光线穿过叶片时，会被分割成多个小光束，每个小光束会有不
同的反射，形成不同的衍射模式，从而实现放大的效果。
总之，显微镜的基本原理是通过利用光学原理和衍射原理，将物体发
出的光线反射到另一个物体上，并以一定的形式改变其长度和方向，使得
反射的图像可以被放大。
活细胞显微镜技术的原理与应用
活细胞显微镜技术的原理与应用活细胞显微镜技术是现代生命科学研究的一项重要技术，它可以让研究者从活体内观察到细胞和生物分子的结构和功能，为我们深入认识生命活动提供了帮助。
本文将从基本原理、技术特点、应用领域三个方面，阐述活细胞显微镜技术的原理与应用。
一、基本原理活细胞显微镜技术的基本原理是通过显微镜观察活体细胞内的生物过程，因此在成像的过程中要求尽可能的减小对样本造成的伤害，并且要求成像过程稳定快捷。
目前的活细胞显微镜技术主要有荧光显微镜和激光共聚焦显微镜两种。
荧光显微镜是利用荧光物质与成像物质的吸收和辐射光谱不同的特性，来获得高对比度和高清晰度的成像，常用的荧光探针有荧光素、荧光蛋白等。
这种技术通过激发样本中的荧光探针分子，使其自发或受激辐射发出荧光信号，进而可以观察到细胞中的生物分子变化，如细胞膜运动、分子运输、细胞周期等。
激光共聚焦显微镜是在荧光显微镜基础上发展的技术，与荧光显微镜不同的是，它使用激光束进行聚焦，采用点扫描成像和非线性光学特性的荧光经过微调进行高清晰度、高分辨率的成像。
这种技术的优点是可以获得更高分辨率的成像效果，可以在细胞培养的条件下，观察到最小生物结构，如蛋白质分子、核酸分子等。
二、技术特点活细胞显微镜技术的优点在于可以实现原位、实时和非侵入性的动态监测，而传统的细胞学方法通常需要进行固定等操作，不能观察到细胞内Molecular movements 和发生的生物过程。
同时，活细胞显微镜技术可以探测一些传统方法不能探测到的日常生活在线的微小的，个体化的分子和代谢物的变化，如生物信号分子、电化学分子等。
近年来，随着生物标记技术的发展，活细胞显微镜技术在蛋白质测序、蛋白质翻译研究、药物筛选、分析弱信号、探究细胞运动行为等领域中得到广泛应用。
例如，深入了解细胞凋亡、病毒感染、癌症发生发展等方面的机理，进而指导临床可视化化疗。
应用于其他应用领域时也显示出显著的优势和潜力。
三、应用领域活细胞显微镜技术的应用领域非常广泛，包括:1、细胞动力学与形态学研究细胞动力学与形态学是细胞生物学的基础研究内容，观察细胞内分子的运动、细胞膜的变化、细胞内脏器的运动、细胞周期等都需要利用活细胞显微镜技术。
3d显微镜技术原理
3d显微镜技术原理3D显微镜技术原理引言：3D显微镜技术是一种先进的显微镜技术，它可以提供具有深度感的三维显微图像。
这种技术在许多领域有着广泛的应用，如生物医学研究、材料科学和纳米技术等。
本文将介绍3D显微镜技术的原理及其应用。
一、3D显微镜技术的基本原理1. 光学原理：3D显微镜技术是基于光学原理实现的。
当光线通过样品时，会发生散射和折射现象。
通过对光线的散射和折射进行测量和分析，可以获得样品的三维形貌信息。
2. 双目视差原理：3D显微镜技术利用双目视差原理来实现对样品的三维成像。
通过在显微镜中加入两个成像系统，分别对样品进行观察，然后通过计算两个成像系统之间的视差，可以获得样品的三维信息。
3. 图像处理算法：为了获得更准确的三维图像，3D显微镜技术还需要进行图像处理。
常用的图像处理算法包括双目视差算法、结构光投影算法和相位测量算法等。
这些算法可以提取图像中的深度信息，并生成真实的三维图像。
二、3D显微镜技术的应用1. 生物医学研究：3D显微镜技术在生物医学研究中有着广泛的应用。
通过观察和分析生物样品的三维结构，可以揭示生物体内部的微观结构和功能。
例如，在细胞研究中，可以利用3D显微镜技术观察细胞的形态和内部结构，进而研究细胞的功能和疾病发生机制。
2. 材料科学：3D显微镜技术在材料科学领域也有着重要的应用。
通过观察和分析材料的三维形貌和微观结构，可以研究材料的性能和功能。
例如，在金属材料研究中，可以利用3D显微镜技术观察金属晶粒的形态和分布，进而研究金属材料的力学性能和耐腐蚀性能。
3. 纳米技术：3D显微镜技术在纳米技术领域有着重要的应用。
由于纳米材料具有特殊的物理和化学性质，利用传统的显微镜技术往往无法观察到纳米结构的细节。
而3D显微镜技术可以提供高分辨率的三维图像，能够观察到纳米材料的形貌和结构。
三、3D显微镜技术的发展趋势1. 高分辨率：随着器件制造技术的不断进步，3D显微镜技术的分辨率也在不断提高。
光学显微镜技术的原理及应用
光学显微镜技术的原理及应用光学显微镜技术（Optical Microscope，简称OM）是研究物质微结构及其相关属性的重要手段，被广泛应用于生物医药、材料科学、环境科学等领域。
其通过利用光学原理，将样品表面显微图像成像，实现对样品形貌、尺寸及内部结构等信息的观测和分析。
本文将介绍OM的原理及应用。
一、OM的原理光学显微镜主要由物镜、目镜、筛孔及调焦机构等部分组成。
具体而言，光学显微镜利用光学原理，通过选择适当的光源及光学镜头，将光聚焦到样品表面，从而使样品表面上的结构以光亮度差的形式呈现在感光底片、CCD等检测器上。
光线进入镜头以后，分别经过物镜和目镜，使得人眼可以观察到物体的清晰图像。
物镜是光学显微镜的核心部分，决定了显微镜的分辨率和放大倍数。
物镜具有多种类型，常见的有单片物镜、复合物镜等。
其中，单片物镜比较简单，由单棱镜和一些单片玻璃组成，主要的缺点是不能消除色差和照明不均匀的问题；而复合物镜则是由多个棱镜组成的复合光学系统，能更好地解决色差和照明问题。
当光线垂直于样品表面时反射回设备的光线称为垂直平面偏振光；当光线平行于样品表面时反射回设备的光线为水平平面偏振光。
目镜是光学显微镜中的另外一个主要部分，主要是用于观察物镜中的显微结构。
不同的样品可使用不同倍数的目镜进行观测。
筛孔可以过滤样品表面的乱波和杂光，确保样品表面图像的质量。
一般在显微镜上使用开衬玻片或者考马斯立方体来过滤不必要的光线。
调焦机构主要由粗动焦、细动焦两个部分组成，用于调整样品表面与聚焦镜之间的距离，以此来改变成像的图像的清晰度。
二、OM的应用OM的应用领域非常广泛，其主要应用在材料科学、生命科学和环境科学等领域。
以下将分别介绍。
1. 材料科学在材料科学领域，OM主要用于材料结构、改性、加工、缺陷及磨损等方面的研究。
通过显微镜观察材料表面、材料内部结构和成分等细节，可以发现材料杂质、颗粒、晶体粒度和相变等重要信息。
此外，OM还可以用于新型材料的研究和开发，如药物控释材料、超滤膜材料、导电粘合剂等。
显微镜光路原理
显微镜光路原理
显微镜光路原理是指光经过显微镜中的光学系统传播的路径和变化过程。
一般来说，显微镜的光路原理包括借物镜放大的原理和借目镜观察的原理。
在显微镜中，光从光源发出，经过准直系统准直后，通过物镜的透镜组聚焦到物的焦点上。
物镜的放大倍数取决于物镜的焦距和用目镜放大倍数。
通过物镜放大的原理，使得显微镜可以放大物体，让人们能够观察到微小的结构和细节。
在经过物镜后，光线通过折射进入目镜系统。
目镜的主要作用是将光线重新聚焦，使得物体的投影映射到观察者的眼睛上。
通过目镜观察的原理，观察者可以看到物体的放大图像。
在整个光路中，显微镜的光学系统主要包括光源、准直系统、物镜和目镜。
这些光学元件的设计和组合使得显微镜能够发挥有效的放大功能，并提供清晰的像质。
除了上述的主要光学元件，显微镜还可能会配备其他光学辅助元件，如滤光片、偏振器等，来增强显微观察的能力和效果。
总的来说，显微镜的光路原理是通过光的折射和聚焦作用，将被观察物体的细节放大后投影到观察者的眼睛上。
这一原理使得人们能够观察到微观世界中细小结构的细节，对科学研究和生物学等领域的探索有着重要的作用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
◈
⊃
►
◄
■
透镜的彗差
光轴
◈ ⊃
透镜
►
加，产生明反差。
◈
⊃
►
◄
■
四、倒 置 显 微 镜
倒置显微镜(Inverted Microscope)的 组成和普通显微镜一样，只不过物镜与照 明系统颠倒，前者在载物台之下，后者在 载物台之上，用于观察培养的活细胞，具 有相差物镜。
◈
⊃
►
◄
■
倒 置 显 微 镜
◈ ⊃
►
◄
■
五、暗 场 显 微 镜
暗视野显微镜（dark field microscope）的聚光镜中央有档光片，使 照明光线不直接进入物镜，只允许被标本 反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的 背景是黑的，物体的边缘是亮的。利用这 种显微镜能见到小至 4nm~200nm的微粒 子，分辨率可比普通显微镜高50倍。
的性能参数相关。
镜像清晰度是指图像的轮廓清晰、衬 度适中的程度。
◈ ⊃
►
◄
■
(七 ) 工 作 距 离
工作距离是指从物镜前表面中心到被观察标本 间满足工作要求的距离范围，与物镜的数值孔径成
反比。
一般情况下，物镜的数值孔径赿大，其工作距 离赿小。
◈
⊃
►
◄
■
四、像 差 和 色 差
(一)、像差 1．球差( spheric aberration )
在物镜后焦面增加一个相板，相板上 有一个环形区，通过环形区的光比从其它 区域透过的光超前或滞后1/4λ，这样就使 通过标本不同区域光波的相位差转变为振 幅差。
◈ ⊃
►
◄
■
相衬显微镜照明原理
◈
⊃
►
◄
■
三、相 衬 显 微 镜
光通过标本致密区时发生衍射，产生
偏折光，相位和未受影响的直射光相比被
推迟了1/4λ。只有未发生偏折的的直射光
◄
■
3．像 散 (astigmatism)
远离光轴的物点发出的光，即使是以 细光束成像也不可能会聚于一点，而是在 像空间不同的成像面上或者成椭圆弥散斑， 或者在特殊位置形成圆形弥散斑，甚至是 形成两个垂直方向上的短亮线，这种成像 缺陷称为像散。
一般来说，透镜像散随透镜形状、光 阑位置而异，可以用正、负透镜适当组合 而消除。
lens），而焦距较长，靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜 （ocular lens）。被观察物体位于物镜的前方，被物镜作第 一级放大后成一倒立的实像，然后此实像再被目镜作第二级 放大， 得到最大放大效果的倒立的虚像，位于人眼的明视距
离处。
◈
⊃
►
◄
■
光学显微镜的工作原理图
◈
⊃
►
◄
■
二、光学显微镜的基本结构
同的两束而形成两个中间像，分别再由左右目镜放
大。来自物镜的光线经棱镜组分光成两束平行光束，
进入目镜，双目显微镜必须满足分光后两束光的光 程必须相同和两束光的光强度大小一致这两个基本 要求。
⊃
◈
►
◄
■
一、双 目 生 物 显 微 镜
目镜
物镜
聚光器
光源
◈
⊃
►
◄
■
二、荧 光 显 微 镜
荧光显微镜 (fluorescence microscopy)是以 紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质，产 生能观察到各种颜色荧光的一种光学显微镜。利
标本所在空间的范围。
◈
⊃
►
◄
■
(五 ) 景 深 与 焦 长
景深(depth of field)又称焦点深度， 是指在成一幅清晰像的前提下，像平面 不变，景物沿光轴前后移动的距离称 “景深”。
景物不动，像平面沿光轴前后移动 的距离称“焦长”。
◈
⊃
►
◄
■
(六 ) 镜 像 亮 度 和 清 晰 度
镜像亮度即显微镜的图像亮度的简称。 高倍率工作条件下的暗场、偏光、摄影显 微镜等都需要足够的亮度，与照明及物镜
① 机械部分：镜座、 镜柱、镜臂、镜筒、调焦装
置、载物台（物镜转换器）
② 光学部分：目镜、 物镜、反光镜、聚光镜 放大倍数： 目镜的放大倍数×物镜的
放大倍数
◈ ⊃
►
◄
■
三、光学显微镜的性能参数
(一) 放大率
(二)数值孔径
(三)分辨率 (四)视野 (五) 景深与焦长 (六)镜像亮度和清晰度 (七)工作距离
◈ ⊃
►
◄
■
(一 ) 放 大 率
显微镜的放大率(amplification)或称放大倍数是 指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相
对于原物体大小的比值，常记作M。
M=maq
M是显微镜的总放大倍数；m是物镜的放大倍数；a是目镜的放大 倍率，一般表达为明视距离(正常视力者为25cm)与目镜焦距之比；q为 在双目显微镜中所增设的棱镜所起的放大倍数，一般取值为1.6倍。
■
(二 ) 数 值 孔 径
NA=nsinβ
油 低数值孔径 干物镜 较高数值孔径 干物镜
油
最高数值孔径 油浸物镜
◈
⊃
►
◄
■
(三 ) 分 辨 率
• 分辨率：显微镜的最重要参数，能够区 分开两个质点的最小距离。 D：分 辨 率 λ ：光波的波长 N：介质折射率 α ：物镜镜口角
D=
0.61λ N•sinα/2
◈ ⊃
►
◄
■
透镜的像散
垂直 焦平面
水平 焦平面 明晰圆 物镜 光轴
物点 ◈ ⊃
►
◄
■
4．场 曲
一个平面的物体通过透镜成像后，虽 然像平面上任意一点仍然是清晰的，但所 成的像不再是一个平面，而成了一弯曲的 面，这就是场曲。
◈
⊃
►
◄
■
5．畸 变 (distortion)
由于像平面上各处放大率不同引起的 成像缺陷称为畸变 。畸变的原因是由于透 镜边缘与透镜近轴的放大率不同而引起的。
光轴上的点光源所发出的光 锥入射到透镜的球折射面时，由 于通过透镜边缘的光线不满足近 轴光线的条件，因此不能和通过 近轴曲面的光线会聚成一个理想 的亮点，而是形成一个中间亮边 缘逐渐模糊的弥散斑，这就是透 镜的球面像差，简称为球差。 球差可以通过设置光阑而减 小。
◈ ⊃
透镜的球差
►
◄
■
2．彗 差 (broom aberration)
用它可研究荧光物质在组织和细胞内的分布。
为防止紫外线进入物镜，可以采用暗视场照明。
◈
⊃
►
◄
■
二、荧 光 显 微 镜
荧光（Fluorescence）：
细胞中的某些物质（如叶绿素）经紫外线照 射后能发出可见光线，称为荧光。
自发荧光：由细胞本身存在的物质经紫外线 照射后发出的荧光。 诱发荧光：一些细胞成分本身经紫外线照射 后不发荧光，但用荧光染料（酸性品红、甲基绿、 吖叮橙等荧光色素）进行活体染色或固定后切片 染色，就能在荧光镜下看见荧光，这种荧光叫诱 发荧光。
2．彗差(broom aberration)
3．像散(astigmatism)
4．场曲
5．畸变(distortion)
(二)、色差
◈ ⊃
►
◄
■
(一)、像 差 (aberration)
像差是指透镜所成的像与理想像 在形状、颜色等方面存在差异。
◈
⊃
►
◄
■
1．球 差 ( spheric aberration )
显微镜技术和显微镜
教 学 基 本 要 求
掌握常 用显微 镜的结 构及性 能特点
熟悉显微 技术的基 础理论， 显微镜的 应用
了解显微 镜的维护， 显微技术 的进展
内
容
提
要
第一节 光学显微镜 第二节 光学显微镜的分类及其应用 第三节 电子显微镜 第四节 显微镜的维护、常见故障及排除 第五节 显微摄影术
◈ ⊃
►
◄
■
七、偏 光 显 微 镜
偏光显微镜是在一般显微镜的基础上 增添了使普通光转变成线偏振光和检测偏振 光的装置或观察干涉图样的特殊透镜。即光 源前有偏振片（起偏器），使进入显微镜的
◈ ⊃
►
◄
■
暗 视 野 照 明 方 式
◈ ⊃
►
◄
■
六、紫 外 光 显 微 镜
使用紫外光源可以明显提高显微镜的分辨 率，对于生物样品使用紫外光照明还具有独 特的效果。生物细胞中的原生质对可见光几 乎是不吸收的，而蛋白质和核酸等生物大分 子对紫外光具有特殊的吸收作用。因此，可 以使用紫外光显微镜（ultraviolet microscope）研究单个细胞的组成与变化情 况。
透镜的色差
◈ ⊃
►
◄
■
透镜的轴向色差（Ａ）和垂轴色差（Ｂ）
Ａ
B
◈
⊃
►
◄
■
五、光学显微镜的不足之处
1、放大倍数的极限： 2000 2、分辨率的极限： 0.2m （可见光照明） 3、景深的极限： 0.1m （要求金相准备） 4、不能分析化学成分
◈
⊃
►
◄
■
第二节 光学显微镜的分类及其应用
N与D成反比 ，λ与D成正比
◈ ⊃
►
◄
■
提高显微镜分辨率的方法