硝化细菌培养基配方及检测方法
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硝化细菌培养基配方及检测方法
一、培养基
1、蛋白胨:1% 酵母膏:0.5% 氯化钠:1% 琼脂:2%
蒸馏水:100ml PH:7.2-7.5
2、土豆:20% 蛋白胨:0.5% 白糖:1% 葡萄糖:1%
混合无机盐:1% 琼脂:2% 自来水:100ml PH:7.0
3、蛋白胨:1% 牛肉膏:0.3% 氯化钠:0.5% 琼脂:2%
蒸馏水:100ml PH:7.0
二、测定步骤
1、样品稀释
从样品中准确称10.0g,加入90ml带玻璃珠数粒的无菌水三角瓶中,30℃水浴锅内,浸泡30-40分钟,拿出后反正摇各60次,即成10-1稀释液,立等用1ml无菌吸管吸中下层菌液1ml,移入装有9ml无菌水试管中,充分吹匀(约吹20余次),即成10-2稀释液,以此类推,连续稀释到10-6稀释液。10-7试管内装8ml无菌蒸馏水,从10-6稀释液中吸取2ml菌液加入到装有10-7稀释液试管中,再用1ml移液管吹动20余次,取0.5ml菌液放入准备好的(装有培养基)培养皿内,用玻璃刮刀慢慢将菌液抹平(样品适宜的每个培养基做3个培养皿)。
2、培养
将培养皿倒放在35℃的培养箱内培养,从10小时开始计数,每隔1小时计数1次菌落,并用记号笔标注,防止菌落连成片无法数清,培养到48小时,培养结束(每个菌落的单位都是亿个/克)。
3、计算
累计每次三个平皿内菌落的平均数,相加就是这个样本的活菌含量,单位是亿个/克。
混合无机盐配方
硫酸铵:77% 磷酸二氢钾:15% 硫酸镁:8%