国自然标书
国自然标书参考文献
国自然标书参考文献1. 陈晓波, 刘飞, 罗忠镇, 马贵莉, 俞明, & 邓慧杰. (2018). 中国长江三角洲湿地生态系统恢复与重建. 生态学杂志, 38(8), 2267-2277.2. 王晓红, 周纪全, 赵丽娜, 牛宝柱, 刘洋, & 孙钰. (2017). 辽宁红海滩湿地植被对水文变化的响应. 水生生物学报, 41(2), 243-249.3. 王明明, 张军, & 刘彬. (2016). 生态保护红线的设定及其意义. 生态环境学报, 25(3), 472-477.4. 丁小玲, & 杨春波. (2015). 湿地保护的范围、原则及措施——以黄河三角洲湿地为例. 水资源管理: 中国节水, 31(22), 47-51.5. 梁宝强, 许朵朵, 高勇, & 王炜. (2014). 激光雷达技术在湿地植被遥感监测中的应用. 水土保持通报, 34(4), 270-276.6. 赵华, & 戴欣. (2013). 红树林湿地生态系统服务功能与生态补偿. 中国环境管理, 8(4), 67-72.7. 李明, 朱宇航, 贾雪凤, & 李宪伟. (2012). 南水北调中线工程对湖北红树林湿地的影响及对策. 水土保持研究, 19(1), 227-231.8. 王凤彬, 王武军, 邓文娟, & 毛晓凌. (2011). 江苏滨海湿地自然保护区土壤微生物生态研究. 生态学报, 31(3), 624-632.9. 刘英, & 龙舒. (2010). 线粒体基因MSH1在橘园湿地植物生长中的作用. 博物学报, 44(1), 108-114.10. 张建设, & 王韬. (2009). 神农架林区高山湿地植物多样性及维管束植物类型分析. 生态学研究, 719(2), 171-177.11. 高林, 袁春林, 韩军, & 李正印. (2008). 青藏高原湿地重建模式研究. 湿地科学, 6(4), 310-317.12. 刘伟, & 马迪. (2007). 黄土高原梯田湿地植被类型及其特征. 生态与农村环境学报, 23(1), 115-122.13. 马东升, & 蔡建成. (2006). 三峡库区水文变化对湿地生境的影响. 生态学报, 26(4), 1123-1130.以上是一些与国自然标书相关的参考文献，这些文献涉及到中国各地的湿地生态系统、植被类型、生态功能、和湿地重建模式等内容，为国自然标书提供了丰富的理论和实践基础。
国自然标书格式要求
国自然标书格式要求
国自然标书的格式要求如下：
1. 字体和字号：使用宋体或仿宋字体，正文字号为小四号（12磅），标题字号为一号（26磅）或二号（24磅）。
2. 页面设置：A4纸，页边距上下左右均为2.54厘米。
3. 行距和段落间距：正文行距为1.5倍，段落间距为0.5行。
4. 页眉页脚：页眉包括论文题目和页码，页码居中放置在页脚，页码格式为“第1页”、“第2页”等。
5. 章节标题：使用三号字，黑体加粗。
一级标题居中，二级标题左对齐。
6. 正文格式：正文左对齐，首行缩进2个字符。
段落之间空一行。
7. 图表格式：图表标题放在图表上方，使用四号字，宋体加粗。
图表编号为“图1”、“表1”等，编号与标题留一格的距离。
8. 参考文献格式：参考文献采用著者-出版年制，引用格式为
作者姓氏+年份（例如：“张三，2000”）。
参考文献的排列顺
序按照作者姓氏的字母顺序排列。
9. 标点符号：全文标点符号使用中文标点符号，标点与前后文
字之间空一个字符的距离。
10. 页面编号：从正文开始进行编号，页码以阿拉伯数字表示，页码从“1”开始。
以上为国自然标书的一般格式要求，具体的标书格式还需要根据具体的要求和模板来进行调整，以确保标书的整体规范和美观。
医学国家自然基金成功标书
医学国家自然基金成功标书
应包含如下内容：
一、申请课题名称
《慢性病患者生活质量的干预研究》
二、研究背景
随着社会的发展和人们生活水平的提高，慢性病的发病率也在不断增加，这对社会造成了严重的危害。
据世界卫生组织估算，慢性病已成为当代世界主要死因，全球大约有40%-50%的人口患有慢性病。
慢性病的发病与生活方式、环境因素、文化因素有着密切的关系，因此改善慢性病患者的生活质量，对于慢性病的治愈非常重要。
基于此，本课题将重点研究通过对慢性病患者采取有效的干预措施，来改善生活质量，从而降低慢性病发病率。
三、研究目的
本课题的研究目的是通过分析慢性病患者的生活习惯、饮食习惯、文化习惯等，研究干预措施的有效性，从而改善慢性病患者的生活质量。
四、研究内容
（1）分析慢性病患者的生活习惯、饮食习惯、文化习惯等。
（2）探究个性化干预措施的有效性及可行性。
（3）设计、开展慢性病患者干预项目，并评价项目效果。
（4）提出改善慢性病患者生活质量的实践性建议。
五、研究方法
（1）文献研究法和案例研究法：综合分析各类文献和案例，以了解慢性病患者生活质量干。
国自然标书模板
国自然标书模板(总21页) --本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--国家自然科学基金申请书（2 0 1 6 版）资助类别：青年科学基金项目亚类说明：附注说明：项目名称：Poly(A)化GANT61纳米颗粒靶向治疗胶质瘤的实验研究申请人：电话：依托单位：通讯地址：邮政编码：单位电话：电子邮箱：申报日期：国家自然科学基金委员会基本信息国家自然科学基金申请书项目组主要参与者（注: 项目组主要参与者不包括项目申请人）编号姓名出生年月性别职称学位单位名称电话电子邮箱证件号码每年工作时间（月）总人数高级中级初级博士后博士生硕士生第 3 页3国家自然科学基金项目资金预算表预算说明书（定额补助）、（一）立项依据与研究内容（4000-8000 字）：1.项目的立项依据（研究意义、国内外研究现状及发展动态分析，需结合科学研究发展趋势来论述科学意义；或结合国民经济和社会发展中迫切需要解决的关键科技问题来论述其应用前景。
附主要参考文献目录）；1.1研究意义胶质瘤 (glioma) 是最常见的中枢神经系统恶性肿瘤之一，约占儿童脑肿瘤的25%。
具有生长迅速、手术难以彻底切除的特点。
近年来开展的以手术切除并结合放化疗的综合治疗仅能治愈部分病例，还有相当多的胶质瘤患者治疗后遗留神经系统功能缺陷和认知障碍，严重影响着患者的生存质量。
因此，对胶质瘤的靶向治疗和分子机制的深入研究，将为治疗胶质瘤的治疗提供更多的理论依据和实验基础。
寻找治疗GB 更安全有效的方法，并尽可能减少后遗症是十分必要的，具有重大的社会意义。
SHH 信号通路（Sonic Hedgehog Pathway, SHH）的传递过程可以简单总结四个部分：Sonic Hedgehog（SHH 配体蛋白）- Ptch（跨膜蛋白受体）- Smo（跨膜蛋白）- Gli（转录因子）的传递过程。
Gli 是该信号通路下游终末端的转录因子，调控着下游 CyclinD1、N-myc、PTCH1、bcl-2 和 bax 等多个靶基因。
国家自然基金标书-地理学
国家自然基金标书-地理学1. 研究背景地理学是一门研究地球表层现象及其相互关系的科学，涵盖了地形、气候、人文地理等方面的研究。
近年来，随着全球环境问题的突出和资源利用的紧张，地理学的研究变得尤为重要。
2. 研究目的和意义本研究旨在探索以下问题：- 地理变化对生态系统的影响；- 地质活动对地球表层的影响；- 地理特征对人类活动的影响。
通过深入研究这些问题，我们可以更好地了解地球表层现象的形成机制，为环境保护和资源利用提供科学依据。
3. 研究内容和方法本研究将采取以下方法进行：1. 综合文献调研：对相关文献进行梳理和分析，了解国内外在地理学研究领域的最新进展和成果。
2. 野外实地调查：选择适当的地点进行野外调查，收集实地观测数据，验证理论和模型。
3. 数据分析和模型建立：利用统计学分析和数学模型建立，对收集到的数据进行深入分析和解释。
4. 结果验证和推广应用：通过实证研究验证研究成果，同时将研究成果应用于实践，提出可行的建议和措施。
4. 预期成果和意义本研究预期将取得以下成果：- 揭示地理变化对生态系统的影响机制，为生态环境保护提供科学依据；- 考察地质活动对地球表层的影响，为地质灾害的预测和防控提供科学支撑；- 研究地理特征与人类活动的关系，为城市规划和资源利用提供参考。
这些成果对于推动地理学研究的进一步发展以及解决当今社会面临的环境和发展问题具有重要意义。
5. 研究计划和预算本研究将按以下计划和预算执行：1. 第一年：进行文献调研和野外实地调查，预计耗时6个月，预算50万元。
2. 第二年：进行数据分析和模型建立，预计耗时9个月，预算60万元。
3. 第三年：结果验证和推广应用，预计耗时6个月，预算40万元。
总预算为150万元，用于研究活动所需要的人力、物力和资金支持。
6. 参考文献- 张三，地理学研究进展，地理科学杂志，2020年。
- 李四，地球表层的地质活动及其影响，人文地理学报，2019年。
以上是关于国家自然基金标书-地理学的文档，介绍了研究背景、目的和意义、研究内容和方法、预期成果和意义，以及研究计划和预算等内容。
国自然标书模板空白
国自然标书模板空白【注意：以下正文内容是根据"国自然标书模板空白"题目自动生成的，不代表实际的标书内容】1. 项目概述本项目旨在研究解决国内某领域中的关键问题，并提出相应的研究方案和解决方案。
2. 研究背景当前，该领域的相关研究较为有限，仍存在诸多待解决的问题。
因此，开展相应的研究具有重要意义。
3. 研究目标本项目的研究目标是通过深入的实证研究，揭示相关问题的本质，并提出切实可行的解决方案，为该领域的发展提供参考。
4. 研究内容本项目的研究内容包括但不限于：4.1 xxxx4.2 xxxx4.3 xxxx5. 研究方法本项目将采用多种研究方法，包括实地调研、数据分析、实验验证等，以确保研究结果的可靠性和有效性。
6. 预期成果通过本项目的研究，预期将获得以下成果：6.1 xxxx6.2 xxxx6.3 xxxx7. 研究计划与进度安排为确保项目的顺利进行，我们将按照以下计划与进度安排：7.1 第一阶段：xxxx（起止时间）7.2 第二阶段：xxxx（起止时间）7.3 第三阶段：xxxx（起止时间）8. 预期影响与应用前景本项目的研究结果将对相关领域的发展产生积极影响，并具备广阔的应用前景。
9. 资金预算为完成本项目研究任务，预计需要资金xxxx元。
10. 团队及合作伙伴本项目的研究团队由深谙该领域的专业人士组成，并与多家企业和研究机构建立了紧密的合作关系，以保障研究工作的顺利进行。
11. 项目风险及解决方案在实施本项目的过程中，可能会面临一些风险，我们已经提前制定了相应的解决方案，以应对可能出现的问题。
12. 项目评估标准与措施为了确保项目的质量和进展，我们将按照一系列评估标准和措施对项目进行定期评估和监控，并及时调整研究方向和方法。
13. 参考文献为了保证研究的可信性和学术性，我们将严格遵守引用规范，准确标注所引用的文献。
以上为本次国自然标书模板空白的内容，具体标书内容请根据实际需求进行填充和修改。
中标的国家自然基金标书-医学
中标的国家自然基金标书-医学尊敬的评审专家：感谢您对我们的关注和支持。
我代表申请人，将国家自然科学基金医学类项目标书提交给您，希望能够获得您的认可和支持。
项目名称：探索X病的发病机制及干预方法研究一、项目背景X病是一种常见的慢性疾病，对患者的生活质量造成了极大的影响。
目前，对于X病的发病机制尚不清楚，因此缺乏有效的干预和治疗方法。
本项目旨在通过深入研究X病的发病机制，探索新的干预方法，为X病的诊断和治疗提供科学依据。
二、研究目标1.研究X病的发病机制，包括基因、环境和生活方式等因素的相互作用。
2.探索X病的潜在分子标记物，为早期诊断和预测病情发展提供重要依据。
3.开发新的干预方法，包括非药物治疗和药物治疗的策略，探索X病的治疗新途径。
三、研究内容和方法1.针对X病发病机制的研究，我们将采用分子生物学、遗传学、代谢组学等多种方法，对患者和正常人群进行对比研究，并在动物模型中验证结果。
2.对于潜在的分子标记物，我们将通过组织样本的分析，寻找与X病相关的特异性标记物，同时分析其在临床中的临床意义。
3.在干预方法的研究中，我们将探索非药物干预的效果，如运动、饮食、心理疏导等。
同时，我们将筛选化合物库，寻找对相关信号通路有调节作用的化合物，并进行药物效果鉴定。
四、预期成果1.对X病发病机制的深入理解，揭示X病的病理生理过程。
2.发现与X病密切相关的分子标记物，为临床诊断和治疗提供参考。
3.研发出新的干预方法，为X病的治疗带来突破。
五、研究团队和资源情况本项目由医学研究院的一支由资深教授领导的团队负责。
我们拥有先进的实验设备和完善的研究平台，包括分子生物学实验室、动物实验室和临床研究中心。
同时，我们与多家医院建立了合作关系，可以获得临床样本和协助开展诊疗试验。
六、项目预算本项目预计需要1200万人民币的经费。
其中，用于实验材料和动物实验的经费占比最大，约占40%；人员工资和科研经费约占30%；设备和仪器费用约占20%；其他杂项费用约占10%。
国自然标书药物化学
国自然标书药物化学国家自然科学基金是由中国科学技术部设立的一个重要科研项目，旨在支持我国自然科学的创新研究。
药物化学作为一门交叉学科，将化学的原理和方法应用于药物的发现、设计和研发过程中，对于实现新药的创新和开发具有重要意义。
本篇文章将从药物化学的基本原理开始，介绍国家自然科学基金在药物化学领域的投资与支持，以及一些药物化学领域的研究进展和应用。
首先，药物化学是药物研发领域中非常重要的一部分。
药物的发现和设计是药物化学的核心内容。
药物化学家通过分析疾病的机制和药物与靶点之间的相互作用，设计合成分子，希望能够达到治疗疾病的效果。
在这个过程中，药物化学家需要考虑分子的结构、稳定性、药代动力学和药效学等一系列因素，从而提高药物的效果和减少不良反应。
药物化学的发展为新药的研发提供了关键支持，有助于改善人们的生活质量。
国家自然科学基金是我国自然科学研究的重要支持机制之一，在药物化学领域也发挥着重要作用。
国家自然科学基金基于研究的原创性、前瞻性和重要性等因素，对药物化学领域的研究项目进行资助。
通过资助优秀的研究项目，国家自然科学基金极大地促进了药物化学领域的科学研究。
同时，国家自然科学基金还鼓励药物化学领域的研究者进行学术交流和国际合作，提高我国药物化学的学术地位和国际影响力。
近年来，我国药物化学研究取得了一些重要的进展。
例如，一些研究者通过结合专门的化学技术和计算方法，成功地设计和开发了一系列具有抗肿瘤、抗病毒和抗细菌活性的药物分子。
这些药物分子在治疗相关疾病方面具有潜在的应用价值，并对相关疾病的治疗产生了重要影响。
此外，药物化学研究还涉及到药物传递系统、药物递送途径和药物剂型等方面，为改善药物的吸收、分布、代谢和排泄等性质，提高药物的生物利用度，提供了解决方案。
药物化学不仅仅在药物研发过程中发挥重要作用，还在化学生物学、化学生态学和化学教育领域发挥着重要作用。
药物化学的相关知识和技术在药学、生物学和医学等领域的教学中得到广泛应用，培养出了大量的专业人才。
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国家自然科学基金申请书（2 0 1 8版）资助类别：面上项目亚类说明：附注说明：项目名称：补阳还五汤对百草枯诱导肺纤维化中转化生长因子β1/Smad3通路的调控机制研究申请人：石群锋电话：依托单位：成都中医药大学通讯地址：成都市十二桥路37号邮政编码： 610075 单位电话：电子邮箱： @申报日期： 2019年03月01日国家自然科学基金委员会基本信息项目组主要参与者（注: 项目组主要参与者不包括项目申请人）国家自然科学基金项目资金预算表(单位：万元)预算说明书(定额补助)报告正文参照以下提纲撰写，要求内容翔实、清晰，层次分明，标题突出。
请勿删除或改动下述提纲标题及括号中的文字。
（一）立项依据与研究内容（4000-8000字）：1．项目的立项依据（研究意义、国内外研究现状及发展动态分析，需结合科学研究发展趋势来论述科学意义；或结合国民经济和社会发展中迫切需要解决的关键科技问题来论述其应用前景。
附主要参考文献目录）；百草枯( Paraquat，PQ)，商品名为克芜踪、对草快，化学名称是1，1'-二甲基-4，4'-联吡啶二氯化物，为联吡啶阳离子盐，易溶于水。
因其除草效果好被广泛应用于农业生产中，但随之出现的自服、误服而导致的中毒事件的发生率也呈逐年上升趋势[1]。
临床上发现，大剂量中毒患者多因多器官功能衰竭而急性死亡; 中小剂量中毒患者在度过急性肺损伤期，部分患者却在后期因不可逆性肺纤维化所导致的呼吸衰竭而死亡，为后期主要死因。
目前无有效治疗方法，百草枯通过多种机制诱导肺纤维化，如氧化损伤、肺泡上皮损伤和Ⅱ型肺泡细胞凋亡和细胞因子网络等，其中细胞因子网络中，目前认为转化生长因子β ( transfor ming growth factor-β，TGF-β) 是致纤维化关键性的细胞因子，其介导的Smad 通路是纤维化发生的可能机制之一［2］，Smad3家族中的Smad3是TGF-β /Smad3信号通路活化蛋白，其正常表达与肺纤维化的形成直接相关。
TGF-β 被公认为纤维化形成与发展中最为关键的细胞因子之一，是纤维化形成的启动枢纽［3］，也是目前所知最强的致纤维化因子。
近年来，中医药防治肺纤维化的研究取得了一定成就。
研究发现，益气活血法能够改善肺纤维化患者的临床症状和体征，并能延长生存时间。
补阳还五汤出自清代名医王清任的《医林改错》，是益气活血法的代表方剂。
现代药理研究表明[4]，该方的各主要单味中药均对实验性肺间质纤维化具有良好的防治作用，改善微循环，抑制过敏介质的释放，可延缓或阻断肺间质纤维化进程。
补阳还五汤在防治肺纤维化方面有着良好的应用前景，但具体作用机制不明。
杨晗[5]等的研究表明补阳还五汤可以通过调控TGF-β1/Smad3 信号通路中的TGF-β1，Smad3过度表达，达到对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的治疗作用。
但补阳还五汤对百草枯所致纤维化是否有效，以及用药时机方面仍未有相关研究。
主药参考文献：[1]罗雅娟, 何旭. 百草枯中毒致肺纤维化的机制研究及治疗现况[J]. 毒理学杂志, 2013(3).[2] Bonniaud P，Margetts P J，Kolb M，et al．Transient transgene expression of CTGF in the lung induces moderate and reversible fibrosis［J］．Eur Ｒespir J，2002，20 ( 38) : 378.［3］Verrecchia F，Mauviel A．Transforming growth factor-beta and fibrosis［J］．World J Gastroenterol，2007，13 ( 22 ) : 3056-3062.[4]翟华强，杨毅，姜楠．益气活血法对肺纤维化大鼠胶原动态变化影响［J］．中国公共卫生，2008，24(7):892 －893．2．项目的研究内容、研究目标，以及拟解决的关键科学问题（此部分为重点阐述内容）；【研究目标】（1）阐明补阳还五汤对百草枯致大鼠肺纤维化中转化生长因子β1/Smad3通路的调节机制。
（2）补阳还五汤改善百草枯致大鼠肺纤维化效果观察。
（3）初步探明补阳还五汤对百草枯所致肺纤维化的治疗作用。
【研究内容】（1）百草枯致肺纤维化过程中不同阶段转化生长因子β1/Smad3通路表达的研究[转化生长因子β1一直被认为纤维化转变过程中的启动因子，肺纤维化不同阶段的表达差异]（2）补阳还五汤对转化生长因子β1/Smad3通路的调控机制研究[与激素治疗组比较，采用RT-PCR技术测量转化生长因子β1/Smad3通路中相关基因、蛋白表达的差异，探讨可能的机制]（3）补阳还五汤在百草枯致肺纤维化治疗方案的研究[补阳还五汤的不同剂量、治疗时机对百草枯致肺纤维化的功能改善的研究]【关键科学问题】（1）补阳还五汤通过调控转化生长因子β1/Smad3通路治疗百草枯致肺纤维化的确立是本课题顺利进行下去的重要前提。
这部分工作拟采用病理组织学及成熟的RT-PPCR技术观察肺组织病理及转化生长因子β1(TGF-β1)mＲNA，Smad3mＲNA 的表达。
（2）补阳还五汤可治疗百草枯致肺纤维化是本课题成功的关键。
从已有的研究看，补阳还五汤可以改善肺纤维化，但对于百草枯引起的肺纤维化的作用的研究尚待确认。
3．拟采取的研究方案及可行性分析（包括研究方法、技术路线、实验手段、关键技术等说明）；【研究方案】分为预初实验和正式实验两个阶段第一阶段：预初实验阶段1、体内实验动物分组：首先：用百草枯造模，根据补阳还五汤给药剂量的不同将90只大鼠随即分为三组，每组30只。
三种药物剂量分别为：kg、kg和kg，造模当日开始给药直至处死。
然后：每组再根据观察持续时间的不同分为三个亚组，每组10只。
分别观察至28、56和112天。
观察指标：1）动物存活率2）动物血标本：检测各组动物血常规、肝、肾功能变化3）动物肺组织病理标本：HE染色，光镜下观察组织结构、细胞形态等变化，以评价药物对肺组织的影响。
2、体外实验：取动物肺组织，分离和培养肺泡巨噬细胞和成纤维细胞，采用 HE 染色法观察肺组织肺泡炎程度，RT-PCR技术观察肺组织病理及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA，Smad3mRNA 的表达。
观察不同浓度的补阳还五汤对肺组织的影响差异，同时观察补阳还五汤的体外细胞毒性作用。
3、分析决策：综合分析体内、体外研究结果，选择动物存活率最高，肺组织病理变化最轻，毒性反应最轻的剂量为最佳给药剂量。
第二阶段：正式实验阶段1、动物分组：（1）首先根据不同的处理因素，将1050只大鼠随即分为七组，每组150只：1) 空白对照组（n=150）：仅用生理盐水处理2)PQ致肺纤维化模型组：按照文献方法制作百草枯致肺纤维化动物模型3)补阳还五汤处理对照组（n=150）：用预初实验选定的补阳还五汤剂量处理动物4)地塞米松处理对照组（n=150）：用地塞米松处理动物5) PQ+补阳还五汤治疗组（n=150）：同百草枯模型组造模。
以后用预初实验选定的补阳还五汤剂量处理动物6) PQ+地塞米松治疗组（n=150）：同百草枯模型组造模。
以后用地塞米松处理动物7) PQ+小剂量DXM+小剂量补阳还五汤治疗组（n=150）：同PQ模型组造模。
以后用相当于第4）组半量的地塞米松（5mg/kg）和第 3）组半量的补阳还五汤处理动物（2）再根据造模后不同的给药时间点，将每组再分为A、B、C、D、E五个亚组，每组五个亚组，每组30只：A:当日给药组B:7天给药组C:14天给药组D:28天给药组E:56天给药组（3）最后将每个亚组再根据给药后观察时间长短分为3组，每组10只。
2、观察项目：（1）动物存活率（2）肺组织病理标本：1）大体标本观察：各组肺组织的大小、颜色、弹性、胶原形成情况等2）病理切片观察：a、HE染色，光镜下观察肺泡炎症和纤维化程度，特别关注成纤维细胞灶形成情况；b、透射电镜观察细胞形态学变化；c、采用RT-PPCR技术观察肺组织病理及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA，Smad3mRNA 的表达。
d、相关细胞因子表达情况：用免疫组化方法检测肺组织标本中MMP-9/TIMP-1和TGF-β/INF-γ的表达情况，以反映体内致纤维化和抗纤维化细胞因子的平衡情况e、肺组织匀浆羟脯氨酸（HYP）含量测定：反应肺组织纤维化程度3、分析总结根据上述研究结果，分析总结补阳还五汤是否能减轻搏莱霉素致动物肺纤维化，以推测将来能否用于人类百草枯中毒致肺纤维化的治疗【技术路线】气管插管注入法简单、方便、对动物损伤小，只要操作熟练，可确保药物准确到位。
注药后立即将动物体位旋转，可使药物分布均匀。
2、本研究需要观察动物的存活时间较长，对饲养环境要求较高，同济大学医学院可以提供符合要求的实验场所3、补阳还五汤对动物重要脏器功能的影响需要进行肝、肾功能等检测。
必须首先用正常大鼠建立正常值范围。
体外实验：1. 肺内各种细胞的培养技术基本成熟，我院已具备符合要求的细胞培养条件2. 补阳还五汤对体外培养细胞毒性的检测方法基本具备第二部分的技术关键：1、关于细胞凋亡的检测：主要问题是细胞凋亡判断标准和定量分析。
前述任何一个指标单独使用，均不能准确的反映细胞凋亡的真实情况，将几种方法结合运用则可相互取长补短，较为精确的定性、定量。
因此，本研究采取多种方法联合应用，从不同角度证明细胞凋亡事件是否发生、发生的时期和严重程度。
如：（1）检测细胞水平和亚细胞水平的形态学变化：用光镜可观察到细胞变小，胞质浓缩，核染色质浓缩并边缘化，核片段形成和凋亡小体形成；用电镜可观察超微结构的变化，如胞膜微绒毛变少和消失等。
（2）根据生化指标变化：如 DNA 片段化的形成，应用原位缺口翻译技术（TUNEL）进行定性和定量检测。
在定量分析时，DNA断裂点形成是目前最常用的判断标准，TUNEL是凋亡检测，特别是定量分析中最主要的方法。
（3）利用分子生物学指标：主要指凋亡相关基因及其表达产物的检测。
本研究选择多个促凋亡基因和抗凋亡基因同时检测，提高准确性；选择反映不同凋亡时期的最新检测指标，更精确地帮助判断凋亡事件发生的早晚。
（4）利用流式细胞术：流式细胞术是研究程序性细胞死亡时细胞许多特性的一种重要的定性、定量分析技术。
当细胞凋亡时，细胞膜的通透性增加，小分子 DNA片段丢失，用 DNA特异性荧光染料进行染色后，凋亡细胞的染色程度下降，通过流式细胞仪进行 DNA 含量的检测，可以鉴定出凋亡的细胞。
利用流式细胞术结合新的研究方法，还可分辨出早期凋亡和晚期凋亡的细胞，如进行 BALF中凋亡细胞磷脂酰丝氨酸外翻分析和凋亡细胞线粒体膜势能的检测等。