生化分离工程作业(1)

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生化分离工程实验试题答案

生化分离工程实验试题答案

生化分离1.动物脏器DNA提取实验中,加入NaCl-SSC缓冲液的原因?答:①形成等渗液②PH中性,维持DNA稳定③抑制DNA酶活2.动物脏器DNA提取实验中,如何鉴定分析DNA的纯化?答:当A260/A280=1.8→DNA最纯,<1.6混有Pro,>2.0混有RNA, 1.6~1.8→较纯3.DNA提取实验中,加氯仿-异戊醇的作用是什么?震荡离心后,分几层?每一层的主要成分是什么?答:使核蛋白质变性、乳化;分三层;上层为DNA和核蛋白的水层,中层为变性蛋白凝胶,下层为氯仿二异戊醇的有机溶剂层。

4.在DNA提取时,RNP(脱氧核糖核蛋白)是如何去除的?答:用氯仿一异戊醇剧烈震荡10min,使其乳化,然后离心除去变性蛋白。

5.茶叶咖啡因提取实验中,加生石灰的作用?答:①吸水②吸收单宁酸③使提取液受热均匀(热缓冲)6.索氏提取和传统提取有何不同?答:传统提取耗时,效率低。

索氏提取利用溶剂回流、虹吸原理,反复多次纯萃取,减短提取时间,节省材料,效率高。

7.茶叶咖啡因提取的原理是什么?答:利用咖啡因易溶于乙醇,易升华等特点,以95%乙醇作溶剂,通过索氏提取、浓缩、焙炒、升华得到纯化咖啡因。

8.离子交换柱层析实验中,离子交换剂为什么要进行预处理?答:①使离子交换剂充分溶胀②酸碱除杂③把活性离子(反离子)转型为clˉ。

9.离子交换柱层析实验中,TCA和丙酮的作用是什么?答:在PH在3.5±0.2时,TCA:使杂质蛋白变性,多得黏蛋白。

丙酮:沉淀黏蛋白10.离子交换柱层析实验中,加TCA后,为什么要将PH调3.5?答:①TCA变性能力与PH值密切相关;PH↑,TCA变性能力减弱;PH↓,TCA变性能力增强②当PH在3.5时,黏蛋白是最稳定的,卵清蛋白等杂质蛋白不稳定易沉淀,可得到相对较纯的黏蛋白。

11.离子交换柱层析实验中,为什么要维持PBS的PH在6.5?答:黏蛋白的PI值约3.4,小于6.5,蛋白质带负电,又由于大多杂蛋白PI值约为10,不易于转型的离子交换剂交换而被洗脱PH6.5时利用交换剂与蛋白结合程度不同而把它们分离开来,达到纯化的目的。

生化分离工程

生化分离工程

错流过滤 研 磨 错流过滤 超 滤 吸 附 喷 干
憎 水 结晶
电泳
基本定义
生化分离工程的定义:
为提取生物产品时所需的原理、方法、技术及相 关硬件设备的总称,指从发酵液、动植物细胞培 养液、酶反应液和动植物组织细胞与体液等中提 取、分离纯化、富集生物产品的过程 (Downstream Processing)。
1)、在设计前,首先要掌握的产物物化性质,主要包括:
(1)、溶解度及影响因素,包括温度、pH值、有机溶剂和盐等; (2)、分子量和分子形状。对于高分子物质非常有意义; (3)、沸点和蒸汽压。对于热稳定的小分子物质非常有意义; (4)、极性大小; (5)、分子电荷及影响因素,包括pH值和盐等; (6)、功能团。功能团为萃取剂和特异性吸附的选择提供依据; (7)、免疫原性。设计亲和色谱; (8)、稳定性及其影响因素,包括温度、pH值、毒性试剂等(如青霉素
6)、提供产品竞争力的关键技术之一。WTO,降低生产成本、 提高产品标准。
7)、环境污染的治理(慢性铅中毒)
作业:检阅文献,谈谈分离科学的作用
刊原:
1)、纯分离分析期刊:Bioassay(IF = 6.227); Anal. Chem.(IF = 4.650); Separ. Purif Method(IF = 3.600); Electrophoresis(IF = 3.465); Adv. Chromatogr (IF = 3.067); J Chromatogr A(IF = 2.768); LC GC-Mag Sep Sci(IF = 2.393); J Chromatogr B(IF = 1.867)。调研论文数/月、本学科国际发展的速度
1)、凝胶 2)、亲和色谱 3)、离子交换

生物分离工程复习题(第1-9填空简答)

生物分离工程复习题(第1-9填空简答)

《生物分离工程》复习题一(第1~3章)二、填空题1、Cohn方程logS=β-KsI中,Ks越大,β值越小,盐析效果越好。

2、固液分离的主要方法有离心和过滤。

3、对发酵液进行预处理方法主要有加热法、调节PH值、凝聚和絮凝、使用惰性助助滤剂、加入反应剂。

4、根据过滤机理的不同,过滤操作可分为澄清过滤和滤饼过滤两种类型5、盐析的操作方法有加入固体盐、加入饱和溶液法、透析平衡法。

6、核酸的沉淀方法主要有有机溶剂沉淀法、等电点沉淀发、钙盐沉淀法、溶剂沉淀法。

7、蛋白质胶体溶液的稳定性主要靠蛋白质分子间静电排斥作用、蛋白质周围的水化层等因素稳定。

8、为使过滤进行的顺利通常要加入惰性助滤剂。

9、典型的工业过滤设备有半框压滤机和真空转鼓过滤机。

10、常用的蛋白质沉析方法有盐析、等电点和有机溶剂。

二、填空1、常用离心设备可分为离心沉降和离心过滤两大类;2、在一个转子中,将粒子沉降下来的效率可以用 K系数来描述。

3、超离心法是根据物质的沉降系数、质量和形状不同,应用强大的离心力,将混合物中各组分分离、浓缩、提纯的方法。

4、密度梯度离心中,制备密度梯度的常用方法有手工法、梯度混合仪法、离心形成法。

5、阳离子交换树脂按照活性基团分类,可分为强酸型、弱酸型和中等强度;其典型的活性基团分别有磺酸基团、羧基和磷酸基。

7、蛋白质分离常用的层析方法有凝胶层析、多糖基离子交换、亲和层析和疏水层析。

8、离子交换分离操作中,常用的梯度洗脱方法有 PH梯度和离子强度梯度。

10、多糖基离子交换剂包括葡集团离子交换剂和离子交换纤维素两大类。

11、离子交换树脂由载体、活性基团和可交换离子组成。

12、DEAE Sepharose是阴离子交换树脂,其活性基团是二乙基氨基乙基。

13、CM Sepharose是阳离子交换树脂,其活性基团是羧甲基。

14、离子交换操作一般分为动态和静态两种。

15、利用薄层定量测定时,一般控制待测组分的Rf在 0.2-0.5 之间。

生化分离工程习题库

生化分离工程习题库

生化分离工程试题16. 利用高压匀浆法破碎细胞,在同样的破碎条件下,下列哪种微生物的细胞破碎率最高 ( ) A.面包酵母 B.大肠杆菌C •酿酒酵母D.热带假丝酵母17.在细胞破碎的操作中,下列哪种方法属于液体剪切力导致细胞破碎的方式 .()A.超声波B.冻结融化C.球磨法D.匀浆法18. 花生四烯酸即二十二碳四烯酸是婴幼儿成长必需的不饱和脂肪酸, 实现工业化生产。

其提取过程中通常要采用辛烷萃取,如果增大水相 系数会发生下列哪种变化( )A.增大B. 减小C. 不变D.19. 红霉素为一弱碱性物质,其提取过程中通常要采用乙酸戊酯萃取,如果增大水相 pH,其萃取的分配系数会发生下列哪种变化( )A.增大B.减小C.不变 D.不能确定20. 采用由阳离子表面活性剂形成的反胶团溶液萃取蛋白质, 理论上下列方法中有利于增大蛋白质的分配系数有( )A.增加无机盐浓度B.适当调节水相pH 大于该蛋白等电点C.降低无机盐浓度D.适当调节水相pH 小于该蛋白等电点21. 下列关于超临界流体说法正确的是( )A. 是物质介于气态和液态之间的一种状态B. 超临界流体的溶解性接近液体C. 超临界流体的溶解能力与其密度有关D. 超临界流体的扩散系数大于该物质处于液态时的扩散系数 A.增加无机盐浓度 B.适当调节水相pH 大于该蛋白等电点 C.降低无机盐浓度D.适当调节水相pH 小于该蛋白等电点23.利用PEG/DEX 双水相体系萃取蛋白质,下列哪种方法可使蛋白质富集在上相( )A.增加PEG 分子量B.减小PEG 分子量C.增加DEX 分子量D.减小DEX 分子量24下图所示为双水相相图,线段 AB 为系线,M 和N 分别为总浓度不同两个双水相体系,下列说法正确的是()A. 图中M 和N 所示的双水相体系在分相后两相体积比相等B. 同一种蛋白质在M 和N 的上相和下相分配系数不同C. M 的上下相组成与 N 的上下相组成一样D. M 的上下相组成与 N 的上下相组成不一样 25. 有关双水相萃取说法正确的是( )A. 系线越长,分配系数越大B. 系线越长,分配系数越小C. 系线越长,上下相差别越大现已通过发酵表达 pH,其萃取的分配不能确定22. 采用由AOT 形成的反胶团溶液萃取蛋白质,配系数有() 理论上下列方法中有利于增大蛋白质的分D. 系线越长,上下相差别越小26. 关于发酵液的乳化现象,不正确的说法是()D.相冋条件下,反渗透膜的水通量大于纳滤膜的水通量38.可用于链霉素浓缩的方法有:()A.纳滤B.超滤C.微滤D.反渗透39.除去发酵液中的热源通常用()A.反渗透B超滤C.透析 D.微滤40.电渗析其装置由许多阴离子和阳离子交换膜交替排列而成,其中RSO3Na为膜,可使离子选择性透过。

《分离工程》思考题及习题(整理)(1)

《分离工程》思考题及习题(整理)(1)

《分离工程》思考题及习题(整理)(1)《生化分离工程》思考题及习题第一章绪论2、生化分离工程有那些特点?3、简述生化分离过程的一般流程?第二章预处理与固-液分离法1、发酵液预处理的目的是什么?主要有那几种方法?2、何谓絮凝?何谓凝聚?各自作用机理是什么?3、发酵液中去除杂蛋白的原因是什么?方法主要有那些?7、何谓密度梯度离心?其工作原理是什么?第三章细胞破碎法1、革兰氏阳性菌和阴性菌在细胞壁在组成上有何区别?2、细胞破碎主要有那几种方法?3、机械法细胞破碎方法非机械破碎方法相比有何特点?4、何谓化学破碎法?其原理是什么?包括那几种?5、何谓酶法破碎法?有何特点?常用那几种酶类?第四章萃取分离法1、何谓溶媒萃取?其分配定律的适用条件是什么?2、在溶媒萃取过程中pH值是如何影响弱电解质的提取?3、何谓乳化液?乳化液稳定的条件是什么?常用去乳化方法有那些?5、某澄清的发酵液中含260mg/l放线菌D, 现用醋酸丁酯进行多级萃取。

已知平衡常数K=57.0,料液流量450升/时,有机相流量20升/时。

为达到此抗生素收率为98%的要求,需要多少级的萃取过程?(计算题)8、何谓双水相萃取?双水相体系可分为那几类?目前常用的体系有那两种?9、为什么说双水相萃取适用于生物活性大分子物质分离?第五章沉淀分离法1)何谓盐析沉淀?其沉淀机理是什么?有何特点?2) 生产中常用的盐析剂有哪些?其选择依据是什么?3) 何谓分步盐析沉淀?4)何谓等电点沉淀?其机理是什么?pH是如何影响pI的?第六章吸附分离法1、吸附作用机理是什么?2、吸附法有几种?各自有何特点?5、已知80g的活性炭最多能吸附0.78 mol腺苷三磷酸(ATP),这种吸附过程符合兰缪尔等温线。

其中b=2.0×10E3mol/L,请问在1.2L的料液浓度为多少时才能使活性炭吸附能力达90%? (计算题)★第七章离子交换法1、何谓离子交换法(剂)?一般可分为那几种?2、离子交换剂的结构、组成?按活性基团不同可分为那几大类?3、pH值是如何影响离子交换分离的?5、在离子交换层析分离过程中,离子交换剂是如何选择的?6、各类离子交换树脂的洗涤、再生条件是什么?7、软水、去离子水的制备工艺路线?★第八章膜分离技术2)膜在结构上可分为那几种?膜材料主要用什么?3)简述微滤、超滤、纳滤及反渗透膜在膜材料、结构、性能、分离机理及其应用等方面的异同点5)何谓浓差极化现象?它是如何影响膜分离的?减少浓差极化现象的措施?6)膜的清洗及保存方法有那几种?7)膜分离设备按膜组件形式可分为几种?相比较的优缺点?第九章层析技术1)何谓色层分离法?可分为那几大类?4)何谓亲和色层分离法?亲和力的本质是什么?亲和色层中常用的亲和关系有那几种?5)何谓疏水作用层析?其最大的特点是什么?6)凝胶层析的原理是什么?何谓排阻极限?第十章电泳技术2、聚丙稀酰胺凝胶电泳的原理什么?影响其操作的因素主要有那些?3、SDS聚丙稀酰胺凝胶电泳原理是什么?有何应用?第十一章结晶法2、何谓过饱和度?饱和度形成有那几种方法?4、结晶法与沉淀法相比较有何区别?综合题1、已知某一氨基酸G是一酸性氨基酸,水溶性随温度升高而升高,pI=6.2,在中性和酸性条件下较稳定。

生物分离工程答案1

生物分离工程答案1

《生物分离工程》练习题一(第1~3章)一、选择题1、下列物质不属于凝聚剂的有( C )。

A、明矾B、石灰C、聚丙烯类D、硫酸亚铁2、发酵液的预处理方法不包括(C )A. 加热B絮凝 C.离心 D. 调pH3、其他条件均相同时,优先选用那种固液分离手段(B )A. 离心分离B过滤 C. 沉降 D.超滤4、那种细胞破碎方法适用工业生产( A )A. 高压匀浆B超声波破碎 C. 渗透压冲击法 D. 酶解法5、为加快过滤效果通常使用( C )A.电解质B高分子聚合物 C.惰性助滤剂 D.活性助滤剂6、不能用于固液分离的手段为( C )A.离心B过滤 C.超滤 D.双水相萃取7、下列哪项不属于发酵液的预处理:( D )A.加热B.调pHC.絮凝和凝聚D.层析8、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是( C )A.过滤B.萃取C.离子交换D.蒸馏9、从四环素发酵液中去除铁离子,可用( B )A.草酸酸化B.加黄血盐C.加硫酸锌D.氨水碱化10、盐析法沉淀蛋白质的原理是( B )A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷,破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点11、使蛋白质盐析可加入试剂( D )A:氯化钠;B:硫酸;C:硝酸汞;D:硫酸铵12、盐析法纯化酶类是根据( B )进行纯化。

A.根据酶分子电荷性质的纯化方法B.调节酶溶解度的方法C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法D.根据酶分子专一性结合的纯化方法13、盐析操作中,硫酸铵在什么样的情况下不能使用( B )A.酸性条件B碱性条件 C.中性条件 D.和溶液酸碱度无关14、有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为( D )A.乙酸乙酯B正丁醇 C.苯 D.丙酮15、有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质( B )A.介电常数大B介电常数小 C.中和电荷 D.与蛋白质相互反应16、蛋白质溶液进行有机溶剂沉淀,蛋白质的浓度在( A )范围内适合。

A. 0.5%~2%B1%~3% C. 2%~4% D. 3%~5%17、生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析,然后适用( C )去除金属离子。

生化分离工程作业

生化分离工程作业

作业1.生物技术:应用生命科学研究成果,以人们意志设计,对生物或生物的成分进行改造和利用的技术。

现代生物技术综合学科技术,可用于研究生命活动的规律和提供产品为社会服务等。

2.生化工程:生物化学反应的工程应用,主要包括代谢工程、发酵工程和生物化学传感器等,生物化学工程和生物医学工程是最初的生物工程学概念,基因重组、发酵工程、细胞工程、生化工程等在21世纪整合而形成了系统生物工程。

3.生化反应工程:生物化学工程的重要组成部分,是化学反应工程与生物技术结合的产物。

它以生物反应器为中心,主要研究发酵动力学、酶动力学,生物反应器中的传递过程,生物反应器的放大规律以及生物反应器的检测和控制等。

4.生化分离工程:生物化工产品通过微生物发酵过程、酶反应过程或动植物细胞大量培养获得,从上述发酵液、反应液或培养液中分离、精制有关产品的过程。

5.热源:与工质发生热量交换的物质系统。

可分为高温热源和低温热源,或者为热源和冷源。

热源是指工质从中吸取热能的物质系统,冷源是指接受工质排出热能的物质系统。

6.微生物工程:即是指发酵工程,指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。

7.生化分离工程的一般工艺流程和所包括的单元操作及其适用范围?8.那些单元操作适用于生物小分子物质的提取层析、离子交换、亲和、疏水、吸附、电泳9.那些单元操作适用于生物大分子物质的提取沉淀、吸附、萃取、超滤10.生物分离工程的发展趋势。

膜分离技术的推广使用、亲和技术的推广使用、优质层析介质的研究、上游技术对生化分离过程的影响、发酵于提取相结和:生物反应器方面11.说出世界上十家生物工程方面的大公司的名称。

Amgen安进、Roche/Genentech罗氏、基因泰克、Johnson强生、NovoNordisk诺瓦诺德、EliLilly礼来、Sanofi-Aventis赛诺菲、Abbott雅培、MerckKGaA德国默克、Schering-Plough先灵宝雅、Wyeth惠氏作业1.絮凝:利用絮凝剂(通常是天然或合成的大分量聚电解质以及生物絮凝剂)将胶体粒子交联成网,形成10mm大小的絮凝剂的过程,其中絮凝剂主要起架桥作用。

《生化分离工程》思考题及答案

《生化分离工程》思考题及答案

第一章绪论1、何为生化分离技术?其主要研究那些内容?生化分离技术是指从动植物组织培养液和微生物发酵液中分离、纯化生物产品的过程中所采用的方法和手段的总称。

2、生化分离的一般步骤包括哪些环节及技术?一般说来,生化分离过程主要包括4个方面:①原料液的预处理和固液分离,常用加热、调PH、凝聚和絮凝等方法;②初步纯化(提取),常用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作;③高度纯化(精制),常选用色谱分离技术;④成品加工,有浓缩、结晶和干燥等技术。

3、生化分离工程有那些特点,及其重要性?特点:1、目的产物在初始物料(发酵液)中的含量低;2、培养液是多组分的混合物,除少量产物外,还有大量的细胞及碎片、其他代谢物(几百上千种)、培养基成分、无机盐等;3、生化产物的稳定性低,易变质、易失活、易变性,对温度、pH值、重金属离子、有机溶剂、剪切力、表面张力等非常敏感;4、对最终产品的质量要求高重要性:生物技术产品一般存在于一个复杂的多相体系中.唯有经过分离和纯化等下游加工过程,才能制得符合使用要求的产品。

因此产品的分离纯化是生物技术工业化的必需手段。

在生物产品的开发研究中,分离过程的费用占全部研究费用的50%以上;在产品的成本构成中,分离与纯化部分占总成本的40~80%;精细、药用产品的比例更高达70~90%。

显然开发新的分离和纯化工艺是提高经济效益或减少投资的重要途径。

4、生物技术下游工程与上游工程之间是否有联系?它们之间有联系.①生物工程作为一个整体,上游工程和下游工程要相互配合,为了利于目的产物的分离与纯化,上游的工艺设计应尽量为下游的分离纯化创造条件,例如,对于发酵工程产品,在加工过程中如果采用液体培养基,不用酵母膏、玉米浆等有色物质为原料,会使下游加工工程更方便、经济;②通常生物技术上游工程与下游工程相耦合。

发酵-分离耦合过程的优点是可以解除终产物的反馈抑制效应,同时简化产物提取过程,缩短生产周期,收到一举数得的效果。

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作业1.生物技术:应用生命科学研究成果,以人们意志设计,对生物或生物的成分进行改造和利用的技术。

现代生物技术综合学科技术,可用于研究生命活动的规律和提供产品为社会服务等。

2.生化工程:生物化学反应的工程应用,主要包括代谢工程、发酵工程和生物化学传感器等,生物化学工程和生物医学工程是最初的生物工程学概念,基因重组、发酵工程、细胞工程、生化工程等在21世纪整合而形成了系统生物工程。

3.生化反应工程:生物化学工程的重要组成部分,是化学反应工程与生物技术结合的产物。

它以生物反应器为中心,主要研究发酵动力学、酶动力学,生物反应器中的传递过程,生物反应器的放大规律以及生物反应器的检测和控制等。

4.生化分离工程:生物化工产品通过微生物发酵过程、酶反应过程或动植物细胞大量培养获得,从上述发酵液、反应液或培养液中分离、精制有关产品的过程。

5.热源:与工质发生热量交换的物质系统。

可分为高温热源和低温热源,或者为热源和冷源。

热源是指工质从中吸取热能的物质系统,冷源是指接受工质排出热能的物质系统。

6.微生物工程:即是指发酵工程,指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。

7.生化分离工程的一般工艺流程和所包括的单元操作及其适用范围?8.那些单元操作适用于生物小分子物质的提取层析、离子交换、亲和、疏水、吸附、电泳9.那些单元操作适用于生物大分子物质的提取沉淀、吸附、萃取、超滤10.生物分离工程的发展趋势。

膜分离技术的推广使用、亲和技术的推广使用、优质层析介质的研究、上游技术对生化分离过程的影响、发酵于提取相结和:生物反应器方面11.说出世界上十家生物工程方面的大公司的名称。

Amgen安进、Roche/Genentech罗氏、基因泰克、Johnson强生、NovoNordisk诺瓦诺德、EliLilly礼来、Sanofi-Aventis赛诺菲、Abbott雅培、MerckKGaA德国默克、Schering-Plough先灵宝雅、Wyeth惠氏作业1.絮凝:利用絮凝剂(通常是天然或合成的大分量聚电解质以及生物絮凝剂)将胶体粒子交联成网,形成10mm大小的絮凝剂的过程,其中絮凝剂主要起架桥作用。

2.凝聚:在投加的化学物质(例如水解的凝聚剂,像铝、铁的盐类或石灰等)作用下,胶体脱稳并使粒子相互聚集成1mm大小块状凝聚体的过程。

3.凝聚值:电解质的凝聚能力可用凝聚值来表示,使胶粒发生凝聚作用的最小电解质浓度(毫摩尔/升),称为凝聚值。

4.混凝:混凝现象是指微粒凝结现象。

凝聚和絮凝总称为混凝。

凝聚是指在水中加入某些溶解盐类,使水中细小悬浮物或胶体微粒互相吸附结合而成较大颗粒,从水中沉淀下来的过程。

絮凝是指由高分子物质吸附架桥作用而使微粒相互黏结的过程;脱稳的胶粒相互聚结,称为凝聚。

2.凝聚原理(1)对初始粒子表面电荷进行简单中和(2)消除双电荷(利用中性盐,例如NaCl等)而脱稳(3)通过氢键或其他复杂的形式与粒子相结合3.絮凝机制利用电荷中和及大分子桥联作用形成10mm大小的粒子。

4.常用的凝聚剂有哪些?常用的絮凝剂有哪些?凝聚剂:(1)无机盐类(2)金属无机盐类(3)聚合无机盐类,例如:明矾、AlCl3.H2O、FeCl3、ZnSO4、MgCO3絮凝剂:(1)聚丙烯酰胺衍生物:非离子型、阳离子型、阴离子型(2)苯乙烯类衍生物及其无机高分子聚合物絮凝剂:聚合铝盐、聚合铁盐(3)天然有机高分子絮凝剂:明胶、海藻酸钠、骨胶、甲壳素等。

作业1.高速湿法珠磨2.高压匀浆3.超声波破碎4.组织捣碎5.酶解6.自溶7.化学溶胞8.渗透压冲击9.冻结融化10.干燥11.撞击破碎每人请任选一种破碎方法,通过若干个典型实例来详细分析说明工艺流程、工艺成败关键点、操作方法及其原理、破碎的实际效果。

列出中英文参考文献。

作业1.盐析法:指在药物溶液中加入大量的无机盐,使某些高分子物质的溶解度降低沉淀析出,而与其他成分分离的方法。

盐析法主要用于蛋白质的分离纯化。

2.有机溶剂沉淀法:有机溶剂的加入会使溶质的构型及溶剂的介电常数等同时发生变化,从而使蛋白质沉淀。

溶剂介电常数的降低,会使蛋白质分子间的静电引力(库仑力)增大,而导致凝集和沉淀。

溶质空间构型的改变致使一些原本包含在内部的疏水集团暴露于表面,并与有机溶剂的疏水集团结合形成疏水层,从而使蛋白质沉淀。

3.选择性变性沉淀法:利用蛋白质的变性作用,除去混合液中杂蛋白的方法。

4.等电点沉淀法:基于不同蛋白质离子具有不同等电点这一特性,用依次改变溶液pH值得方法,将杂蛋白沉淀除去,最终获得目标产物。

5.盐溶:在蛋白质水溶液中,加入少量的中性盐,如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等,会增加蛋白质分子表面的电荷,增强蛋白质分子与水分子的作用,从而使蛋白质在水溶液中的溶解度增大。

6.盐析:向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出。

7.β盐析:β盐析:在一定的离子强度下,改变溶液的pH值及温度,达到沉淀目的,称为“β”分级盐析法。

8.Ks盐析:在一定的pH值及温度条件下,改变盐的浓度(即离子强度)达到沉淀的目的,称为“Ks”分级盐析法。

9.二次盐析:在原盐浓度下,可除去难溶杂质,但不能除去易溶杂质,所以需要进行更高盐浓度的第二次盐析适用于目的蛋白的溶解性,高于“易溶杂质”的场合。

2.盐析的机理(1)把中性盐加入蛋白质溶液,中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质,盐离子与蛋白质分子争夺水分子,降低了用于溶解蛋白质的有效水量,减弱了蛋白质的水合程度,破坏了蛋白表面的水化膜,导致蛋白质溶解度下降;于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失。

(2)同时,中性盐加入蛋白质溶液后,由于离子强度发生改变,蛋白质表面电荷大量被中和,更加导致蛋白溶解度降低,使蛋白质分子之间聚集而沉淀(3)盐离子引起原本在蛋白质分子周围有序排列的水分子的极化,使水活度降低。

由于蛋白质的组成及性质不同,所以盐析时所需中性盐的浓度也不相同。

3.有机溶剂沉淀的机理①亲水性有机溶剂加入溶液后降低了介质的介电常数,使溶质分子之间的静电引力增加,聚集形成沉淀;②水溶性有机溶剂本身的水合作用降低了自由水的浓度,压缩了亲水溶质分子表面原有水化层的厚度,降低了它的亲水性,导致脱水凝集4.二次盐析如何实现?由于不同的蛋白质其溶解度与等电点不同,沉淀时所需的pH值与离子强度也不相同,改变盐的浓度与溶液的pH值,可将混合液中的蛋白质分批盐析分开,这种分离蛋白质的方法称为分段盐析法。

如半饱和硫酸铵可沉淀血浆球蛋白,饱和硫酸铵则可沉淀包括血浆清蛋白在内的全部蛋白质作业1.初级成核:在高过饱和度下,溶液自发地生成晶核的过程,称为初级均相成核;溶液在外来物(如大气中的微尘)的诱导下生成晶核的过程,称为初级非均相成核。

2.二次成核:物质的一个或几个晶体存在于它们的过饱和溶液中,会引起新晶体的生长,其中的成核作用,不会按其他方式发生。

3.直接结晶4.间接结晶5.晶核:结晶过程中首先形成的晶体的胚芽。

结晶过程是一个相变过程。

在开始由气相或液相形成晶相时,一般说是很困难的,原子或分子在气相或液相的吉布斯函数很高,必须在很大程度上降低其分子熵才能形成晶核。

6.请画出味精结晶的T~C关系图,并说明图上各曲线和区域的物理意义,在图上表示出粉状味精和棒状味精生产的操作特点。

A稳定区:不饱和区B第一介稳区:加入晶种结晶会生长,但不产生新晶核C第二介稳区:加入晶种会生长,同时有新晶核产生D不稳定区:瞬间出现大量微小晶核。

发生晶核泛滥7.试述食盐晶体在货架期结块的原因,并结合结晶过程说明预防的方法原因:先是温度高了,受潮水解,在货价上结块有两种情况,一种是温度低结晶析出;另一种是氯化钠干燥后形成块状晶体。

方法:优化生产工艺参数、改善包装方式、科学设置贮存的外部条件、合理使用防结块剂等。

作业1、膜分离技术:膜分离过程的实质是物质透过或被截留于膜的过程,近似于筛分过程,依据滤膜孔径大小而达到物质分离的目的。

2、微滤:以多孔细小薄膜为过滤介质,压力为推动力,使不溶性物质得以分离的操作,孔孔径分布范围在0.025~14μm之间。

3.超滤:以多孔细小薄膜为过滤介质,但孔径更小,为0.001~0.02μm,分离推动力仍为压力差,适合于分离酶、蛋白质等生物大分子物质。

4.纳滤:以压力差为推动力,从溶液中分离300~1000小分子量的膜分离过程,孔径分布在平均2nm。

5.反渗透:是一种以压力差为推动力,从溶液中分离出溶剂的膜分离操作,孔径范围在0.0001~0.001μm之间(由于分离的溶剂分子往往很小,不能忽略渗透压的作用,故而成为反渗透)。

6.浓差极化:是指但溶剂透过膜,而溶质留在膜上,因而使膜面浓度增大,并高于主体中浓度。

7.膜污染:主要有两种情况:一是附着层被滤饼、有机物凝胶、无机物水垢胶体物质或微生物等吸附于表面;另一种是料液中溶质结晶或沉淀造成堵塞。

8.渗析:利用油或其他液体从润滑脂中析出的现象分离物质的一种方法。

9.电渗析:以电位差为推动力,利用离子交换膜的选择透过性,从溶液中脱除或富集电解质的膜分离操作。

10.气体膜分离:在压力驱动下,借助气体中各组分在高分子膜表面上的吸附能力以及在膜内溶解-扩散上的差异,即渗透速率差来进行分离的。

11.渗透蒸发:在膜的渗透边侧形成真空,以膜的前后两侧的化学位差为推动力伴随着相变,由膜选择吸附及在膜中渗透速率不同而进行分离。

12.膜蒸馏:一种采用疏水微孔膜以膜两侧蒸汽压力差为传质驱动力的膜分离过程,可用于水的蒸馏淡化,对水溶液去除挥发性物质。

13.膜萃取:又称固定膜界面萃取,是基于非孔膜技术发展起来的一种样品前处理方法,是膜技术和液液萃取过程相结合的新的分离技术,是膜分离过程中的重要组成部分。

14.亲和膜分离:一种利用亲和配基修饰的膜(亲和膜)为介质的分离纯化生物大分子的技术,是膜分离技术和亲和层析技术的有机结合。

其分离过程包括亲和吸附、洗脱、亲和膜再生等步骤。

15.特异性洗脱法:利用洗脱液中的物质与待分离物质或与配体的亲和特性而将待分离物质从亲和吸附剂上洗脱下来。

16.非特异性洗脱:利用一般液中的物质将待分离物质而将待分离物质从亲和吸附剂上洗脱下来。

17.当采用超滤法生产牛奶时,常出现通透量持续下降的现象,请设计一个合理的方案予以解决,并说明设计的依据。

超滤过滤时出现通量持续下降是正常的,一般的方法有:降低处理量、间断正冲一下、如果可能一定时间后采用纯水反洗一下。

18.试对常用的四种超滤器的性能进行比较。

板框式保留体积小,操作费用低的压力降,液流稳定,比较成熟投资费用大,大的固含量会堵塞进料液通道,拆卸比清洁管道更费时间螺旋卷式设备投资低,操作费用也低,单位体积中所过滤面积大,换新膜容易料液需经预处理,压力降大,易污染,难清洗,液流不易控制管式易清洗,单根管子容易调换,对液流易控制,无机组件可在高温下用有机溶剂进行操作并可用化学试剂来消毒高的设备投资和操作费用,保留体积大,单位体积中所含有过滤面积较小,压力降大中空维式保留体积小,单位体积中所含过滤面积大,可以逆流操作,压力较低,设备投资低料液需要预处理,单根纤维管损坏时,需调换整个组件,不够成熟19.请比较说明微滤、超滤、纳滤和反渗透等四种常用膜分离技术的异同点。

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