染色方法总结

合集下载

各种染色技术总结

各种染色技术总结

一、原理:1、革兰氏染色原理:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。

2、芽孢染色法的原理:芽孢又叫内生孢子(endosopre),是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体,通常呈圆形或椭圆形。

细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽孢在芽孢囊内的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。

芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲和力不同的原理,用不同染料进行着色,使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。

芽孢壁厚、透性低,着色、脱色均较困难,因此,当先用弱碱性染料,如孔雀绿(malachite green)或碱性品红(basic fuchsin)在加热条件下进行染色时,此染料不仅可进入菌体,而且也可进入芽孢,进入菌体的染料可经水洗脱色,而进入芽孢的染料则难以透出,若再用复染液(如番红液)或衬托溶液(如黑色素溶液)处理,则菌体和芽孢易于区分。

用着色力强的染色剂孔雀绿或石炭酸复红,在加热条件下染色,使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内,进入菌体的染料经水洗后被脱色,而芽孢一经着色难以被水洗脱,当用对比度大的复染剂染色后,芽孢仍保留初染剂的颜色,而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色,使芽孢和菌体更易于区分。

3、荚膜染色法的原理:荚膜是包围在细菌细胞外面的一层粘液性物质,其主要成分是多糖类,不易染色,故常用衬托染色法,即将菌体和背景着色,而把不着色且透明的荚膜衬托出来。

细菌染色技术总结

细菌染色技术总结

细菌染色技术(2010-11—22 22:29:46)目的要求初步掌握细菌涂片制作,单染色法及革兰染色法等染色技术。

实验内容1.细菌染色一般程序涂片干燥固定初染(媒染) 脱色复染(1)涂片临床标本或液体培养物可直接涂抹于洁净的载玻片上,固体培养的细菌先在玻璃片上滴一滴生理盐水,然后取菌少许在盐水中磨匀,呈轻度混浊.涂好的菌膜大小一般以1cm2左右为宜。

(2)干燥涂片最好在室温下自然干燥,或将标本面向上,置于酒精灯火焰高处慢慢烘干,切不可在火焰上烧干。

(3)固定细菌的固定常用火焰加热法,即将上述已干的涂片在火焰中迅速通过3~5次,温度以手能摸时热而不烫为度。

目的在于杀死细菌,凝固细胞质,改变细菌对染料的通透性。

(4)初染不同的染色方法,所用染液也不同.染液以覆盖菌膜为度。

(5) 媒染通过媒染可增加染料和被染物质的亲和力。

媒染剂还可用于固定之后,亦可含在固定液或染液中。

(6)脱色此步骤主要目的是观察细菌与染料间结合的稳定程度,作为鉴别染色之用。

(7) 复染细菌初染色被脱色后常以复染液复染,便于观察。

复染液的颜色与初染液有明显不同。

2.常用染料原液配制一般制备100ml纯酒精饱和溶液所需染料量:美兰2g~5g;结晶紫7g~14g;碱性复红3g~7g。

3.常用的染色方法(1) 单染色法即用一种染料染色的方法。

常用吕氏美兰或稀释石炭酸复红染液。

1)染液①吕氏美兰液美兰酒精饱和液30ml+0.01%KOH溶液70ml即成.②稀释石炭酸复红液碱性复红酒精饱和液10ml+5%石炭酸溶液90ml,然后用蒸馏水作10倍稀释即成。

2) 菌种大肠埃希菌普通斜面培养物。

3)染色方法于已做好的涂片上滴加吕氏美兰或稀释石炭酸复红染液,染色1min,以水冲洗至无颜色流下为止,自然干燥或以远火烘干后镜检。

4) 结果以美兰染色者菌体呈现兰色;以稀释石炭酸复红染色的菌体呈现红色.(2)革兰染色法1) 原理细菌被结晶紫着色后,再经媒染剂处理,染成深紫色或紫黑色。

病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)

病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)

病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法Mallory三色染色法可用于胶原和网状纤维的染色,其中蓝色代表胶原和网状纤维,淡蓝色代表软骨、粘液和淀粉样变物质,红色代表神经胶原纤维、肌纤维和酸性颗粒,橘红色代表髓鞘和红细胞。

图表A1.1展示了Mallory三色染色法的效果,其中A组排列规则。

1.2 Masson三色染色法Masson三色染色法可用于胶原纤维和肌纤维的染色,其中绿色代表胶原纤维,红色代表肌纤维,橘红色代表红细胞。

图表B1.2和C1.2展示了Masson三色染色法在胃癌组织和血管平滑肌中的应用。

1.3 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法三联染色法可用于显示胶原、网状和弹性纤维,其中红色代表胶原纤维,黑色代表网状纤维,绿色代表弹性纤维,淡黄色代表肌肉和红细胞。

图表D展示了Weigert间苯二酚法的效果。

胶原纤维染色法2.1 天狼星红苦味酸染色法天狼星红苦味酸染色法可用于胶原纤维的染色,其中红色代表胶原纤维,绿色代表细胞核,黄色代表其他物质。

天狼星红苦味酸染色法在偏光显微镜下观察,Ⅰ型呈强双折光性,呈黄色或红色纤维,Ⅱ型呈弱双折光,呈多种色彩疏网状分布,Ⅲ型呈弱双折光,呈绿色的细纤维,Ⅳ型呈弱双折光的基膜,呈淡黄色。

图表E展示了胶原纤维的染色效果,以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。

2.2 Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法可用于胶原纤维的染色,其中鲜红色代表胶原纤维,黄色代表肌纤维、细胞质和红细胞,蓝褐色代表胞核。

图表E展示了胶原纤维的染色效果,以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。

三、网状纤维染色3.1 XXX-Sweets银氨染色法XXX-Sweets银氨染色法可用于网状纤维的染色,其中黑色代表网状纤维,红色代表胞核(核固红复染),黄棕色代表胶原纤维,淡红色代表细胞质(红液复染)。

油红染色方法总结

油红染色方法总结

油红染色方法总结引言油红染色是一种常用的染色方法,用于对细胞和组织切片进行染色,以提高显微镜下观察细胞结构和组织器官的清晰度和对比度。

本文将介绍油红染色的原理、步骤,并总结一些常见的油红染色注意事项和优化方法。

原理油红染色是利用对嗜酸性的脂质成分特异染色的性质,通过染色剂与细胞膜、胞浆中的脂质结合,使细胞或组织切片呈现出红色。

油红染色的基本原理如下:1.油红染色剂:染色剂中含有对脂质有亲和力的成分,常用的染色剂有Sudan III、Sudan IV等。

2.染色过程:细胞或组织切片与染色剂接触后,染色剂分子与脂质结合形成复合物,通过显微镜观察可见红色染色。

3.嗜酸性:脂质在最多情况下是嗜酸性的,即使用酸性染色剂染色时与脂质结合反应,形成可见的红色油红染色。

油红染色步骤下面是一般的油红染色步骤:1.准备组织切片:首先,需要获取待染色的组织切片样本。

通常,从动物或人体组织中切割出薄片以进行后续染色处理。

2.固定组织切片:将组织切片用10%的缓冲福尔马林进行固定处理,固定时间一般为24小时。

3.洗涤组织切片:用流动的水将固定的组织切片洗涤数分钟,以去除福尔马林残留。

4.脱水组织切片:使用一系列不同浓度的酒精(如70%、85%、95%和100%)进行脱水处理,每个浓度的酒精浸泡时间一般为3-5分钟。

5.渗透组织切片:将组织切片浸泡在透明质酸酯(如甲苯或二甲苯)中,时间一般为3-5分钟。

6.染色组织切片:将经过渗透的组织切片放入含有油红染色剂的盛器中,染色时间一般为10-15分钟。

7.清洗组织切片:用透明质酸酯迅速清洗组织切片,以去除多余的染色剂。

8.盖片和观察:将清洗过的组织切片放在显微镜玻璃片上,在玻璃片上加上一滴透明质酸酯,用盖片覆盖,然后放在显微镜下观察。

注意事项和优化方法在进行油红染色过程中,以下是一些需要注意的事项和可能的优化方法:•组织切片厚度:过厚的组织切片会导致染色剂渗透不均匀,建议切割切片时控制在3-5微米。

病理学技术—特殊染色最最全总结

病理学技术—特殊染色最最全总结

病理学技术—特殊染色最最全总结病理学技术是医学研究领域中的一个重要分支,它利用各种不同的方法和技术,对组织和细胞进行分析和研究。

其中,特殊染色技术是病理学技术中的一个重要组成部分,通过使用不同的染色剂,有助于观察并区分不同的细胞和组织结构,以辅助诊断和研究。

以下是对特殊染色技术的最全总结。

1. PAS染色(Periodic Acid-Schiff染色):PAS染色可以用于检测细胞和组织中的多糖物质,如糖原、粘多糖和黏多糖等。

PAS染色通过一系列的化学反应,将含有醛基的物质氧化,然后与PAS染料反应生成染色物质。

2. 铁染色:铁染色可用于检测细胞和组织中的铁含量,它可以帮助鉴别铁负荷过多或过少的情况。

常用的铁染色方法包括Perls染色和Prussian blue染色。

3.去脂酸和酶染色:去脂酸和酶染色用于检测细胞和组织中的脂质和酶活性。

去脂酸染色通过将组织切片浸泡在油酸中,然后用溴化黄染色,观察脂质的分布情况。

酶染色通过使用特定的染色剂来观察细胞中的酶活性,如碘化物染色用于检测过氧化物酶活性。

4.免疫组织化学染色:免疫组织化学染色是通过使用特异性抗体来检测细胞和组织中的蛋白质和其他分子。

常见的免疫组织化学染色方法包括免疫荧光染色和酶联免疫组化染色。

这些染色技术可以用于确定特定抗原的存在和定位,从而帮助确定疾病的诊断和预后。

5.组织切片染色:组织切片染色是一种常见的特殊染色技术,它可以用于检测细胞和组织中的结构和细胞器。

常用的组织切片染色方法包括伊红染色、苏木素-伊红染色和单色染色等。

6.核酸染色:核酸染色用于检测细胞和组织中的核酸结构和功能,其中最常用的核酸染色方法是荧光原位杂交(FISH)和DAPI染色。

荧光原位杂交可以用来检测染色体异常和基因重排等。

7.肉眼可见染色:肉眼可见染色是一种用于检测显微镜下不易观察到的细胞和组织结构的染色技术。

常见的肉眼可见染色方法包括钙化染色和淀粉样变染色等。

总结以上所述,特殊染色技术在病理学领域中具有重要的应用意义,通过使用不同的染色剂,可以对细胞和组织进行全面和准确的分析和研究。

病理学技术——特殊染色最全总结

病理学技术——特殊染色最全总结

病理学技术——特殊染色最全总结特殊染色是病理学中常用的一种技术手段,用于染色并可视化细胞、组织或病理标本中特定的结构、细胞成分或病理损伤,从而帮助诊断人员更准确地判断疾病类型和病理变化程度。

特殊染色的种类繁多,下面将对一些常见的特殊染色进行全面总结。

一、银染色法银染色法是通过化学反应使待染物质与银盐结合,生成黑色或褐色沉淀,并在显微镜下观察变化。

常见的银染色方法有:Reticulin(網狀纖維)染色、Gomori银染色、Grocott-Methenamine银染色。

二、PAS染色PAS染色(Periodic Acid-Schiff染色)是一种常见的特殊染色技术,用于检测糖原以及其他多糖类物质。

通常使用的PAS染色是将待染物标本与过氧化铬酸溶液(Periodic Acid)处理后再使用Schiff试剂进行染色的方法。

PAS染色为酸性物质染成红色,大多为胞浆染色。

常见的应用包括鉴别肝细胞变性、神经纤维、肾小管等结构。

三、 Masson三色染色法Masson三色染色法是一种多彩染色方法,通过染色剂的组合可染出细胞核、胶原纤维和细胞质等不同组织成分。

Masson三色染色方法包括酸性区域以绿色染色显示胶原纤维,细胞核以黑色或暗蓝色染色显示,胞质以红色染色显示。

该染色法在组织纤维化、炎症反应等病变的检测中应用广泛。

四、Mallory三色染色法Mallory三色染色法和Masson三色染色法类似,可以用于显示胶原纤维、细胞核和胞质等组织成分。

其区别在于Mallory三色染色法标本在染色前需用盐酸处理,使染色剂更易于沉积在纤维上,能更清晰地显示组织纤维结构。

五、Giemsa染色Giemsa染色通常用于血液和骨髓涂片的染色,并可以显示细胞核、染色质和胞质等成分。

Giemsa染色法有多种方法,如Giemsa-Eosin染色法、Giemsa-Wright染色法等,可根据需要选用。

六、von Kossa染色法von Kossa染色法用于检测组织中的钙盐沉积,如血管壁的钙化、尿路结石等。

染色工作总结

染色工作总结

染色工作总结
染色工作是纺织行业中非常重要的一环,它直接影响到织物的颜色和质感。


染色工作中,我们需要精确控制染料的浓度、温度和时间,以确保织物染色均匀、色牢度好。

在过去的一段时间里,我参与了染色工作,并在此总结了一些经验和教训。

首先,精确控制染料的浓度是非常关键的。

染料的浓度过高会导致织物染色不
均匀,而浓度过低则会导致颜色不够鲜艳。

因此,我们需要根据织物的材质和颜色要求,精确计算染料的用量,确保染色效果符合要求。

其次,控制染色的温度和时间也非常重要。

温度过高会导致染料快速分解,而
温度过低则会影响染色的均匀度。

同时,时间的控制也需要精准,过短的时间会导致染色不够深,而过长的时间则会影响织物的质量。

因此,我们需要根据染料的特性和织物的要求,精确控制染色的温度和时间。

另外,染色工作中还需要注意安全和环保。

染料和化学药剂都具有一定的毒性,因此在染色过程中需要严格遵守操作规程,做好个人防护。

同时,废水处理也是非常重要的,我们需要将废水进行处理,确保不对环境造成污染。

总的来说,染色工作是一项需要细心和耐心的工作。

在日常的工作中,我们需
要不断学习和总结经验,以提高染色工作的质量和效率。

希望通过我们的努力,能够为纺织行业的发展贡献一份力量。

各种染色方法及应用

各种染色方法及应用

各种染色方法及应用染色是一种常见的化学实验和工艺,在许多领域都有广泛的应用。

本文将介绍各种染色方法及其应用。

1.染料染色:染料染色是最常见的染色方法之一、染料是一种可溶于水或溶剂的有色化合物,通常由有机合成得到。

染料染色适用于各种材料,如纺织品、纸张、皮革等。

染料染色的优点是色彩鲜艳、染色均匀,并且染色过程简单方便。

2.染色质染色:染色质染色是用希望染色质的颜料染色,常用于生物学实验中。

染色质是一种存在于染色体中的蛋白质-核酸复合物,通过染色质染色可以观察和研究染色质的变化和分布。

常见的染色剂有吉姆萨染料、吉姆萨绿、DAPI等。

3.免疫组化染色:免疫组化染色是一种常用于检测蛋白质分布和定位的方法。

它基于免疫反应原理,通过将特异性抗体与酶、荧光物质或金粒等标记结合,使特定蛋白质在组织切片或细胞中显示出颜色或荧光。

免疫组化染色广泛应用于生物医学研究、病理学诊断和新药开发等领域。

4.电镀染色:电镀染色是一种将金属基材表面镀上一层具有颜色的金属膜的方法。

电镀染色可以改变金属基材的外观和增加表面涂层的耐腐蚀性能。

常见的电镀染色方法有阳极氧化染色和阳离子染色等。

5.实验室染色:实验室染色是一种在实验室中进行的标记方法,常用于细胞和组织的观察和研究。

实验室染色使用特定的染料或标记物,如荧光染料、酶染色剂等,可以使目标细胞或组织在显微镜下更容易观察和分析。

6.化学反应染色:化学反应染色是通过染色剂与待染物发生化学反应而得到颜色变化的方法。

常见的化学反应染色方法有铁氰化钾染色法、酚酞试剂染色法等。

化学反应染色主要用于分析化学、生物化学和医学等领域。

7.DNA染色:DNA染色是将DNA分子染色以便观察和分析的方法。

DNA 染色可以通过荧光染料、酶染色剂和银染法等方法实现。

DNA染色在基因检测、DNA分子分析和遗传学研究等领域有重要应用。

总之,不同的染色方法在各种领域都有广泛应用。

它们不仅丰富了我们对材料、细胞、组织、分子等的观察和研究,而且在医学、生物学、化学等领域中起到了重要作用。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

染色方法总结AgNOR染色法:1、试剂配制:(1)AgNOR染色液:甲液:明胶2 g 溶于双蒸水至99 ml,在60℃使之完全溶解,再加入纯甲酸1 ml 摇匀待用。

乙液:硝酸银50 g 溶解于双蒸水中至100 ml,4℃冰箱保存。

(2)AgNOR工作液取甲液10 ml,乙液20 ml 临用前混合。

2、步骤:(1)切片脱蜡至水(2)双蒸水洗2次(3)AgNOR 工作液中(25℃)浸染30分钟(暗处进行)(镜下观察)(4)双蒸水洗3次(5)脱水,透明,封固3、结果:油镜观察,细胞核及胞质背景为淡黄色,AgNOR呈棕黑色颗粒状。

B鞭毛染色法:1.试剂配制:甲液:丹宁酸5克氯化铁(FeCl3)1.5克福尔马林(15%)2.0毫升氢氧化钠(NaOH)1%1.0毫升乙液:硝酸银(AgNO3)2克蒸馏水100毫升制备乙液时,待硝酸银溶解后,取出10毫升备用,向余下的90毫升硝酸银液中滴加浓氢氧化铵,先呈很浓厚的沉淀,再继续滴加至刚刚溶解沉淀成澄清液为止。

再将备用的硝酸银溶液慢慢逐滴加入澄清液中,先呈现薄雾,但轻摇则消失,继续边滴加边摇动,待澄清液呈现略有轻微不消散的薄雾状为止。

如雾重,则银盐沉淀,不宜使用。

2.染色方法:(1)将待检菌接种在新制备的肉汤琼脂斜面上,置37°培养16—20小时,备用。

(2)在载玻片的中部相隔一厘米处,用接种环各沾一滴蒸馏水,然后用接种环挑取湿润处的菌苔少许于一端的水滴中,倾斜玻片使培养物流至另一水滴中,两水滴自然相通,菌体从上位自然扩散到下位水滴中,待干燥后染色。

(3)在干燥涂片上加甲液3—5分钟,用蒸馏水冲洗。

将残水沥干或用乙液冲去残水后,加适量乙液保持30—60秒钟。

染色时在酒精灯上稍加热,使染液出现蒸汽即可,用蒸馏水冲洗。

(4)镜检:菌体及鞭毛皆染成茶色。

3.注意事项:(1)染液最好随用随配,存放至次日效果则差。

(2)一定要充分洗净甲液后再加乙液,否则背景较脏。

(3)防止水及培养物沾有氯化物。

(4)切忌用接种环涂抹培养物。

(5)载玻片一定要洗净。

先用洗衣粉煮沸,再水洗,干后放在洗液中,浸泡24小时,取出水洗除去残酸,沥干,存放于95%乙醇中备用。

(6)加热时最好置金属板上,使载玻片受热均匀。

概述:大肠杆菌的标志基因Lac Z编码β-半乳糖苷酶(ß-galactosidase;ß-gal),在其催化作用下,半乳糖可从乳糖的水解作用中得到。

β-半乳糖苷酶非常稳定,对蛋白水解降解作用抗性强,且容易测试。

因此β-半乳糖苷酶成为目前最常用的报告基因,以评价载体转染的效果。

X-Gal(5-bromo-4-chloro-3-indoyl-ß-D-Galactopyranoside)是生物化学中常用的一种有机物,β-半乳糖苷酶可以将X-Gal转化为蓝色的产物,由此用它作为生色底物,来建立一种简单的目测颜色来确定原始组织β-半乳糖苷酶的活性,从而通过光学显微镜鉴别转染后组织细胞报告基因的存在与否和强弱表现。

全组织(WHOLE MOUNT或EN BLOC)原位染色第一时间真实反应转染效果,组织形态维持良好,同时后续使用石蜡切片存档保存成为可能。

主要用途:全组织β-半乳糖苷酶原位染色试剂是一种旨在以X-Gal为底物,通过组织内表达的外源性细菌β-半乳糖苷酶的催化所生成的深蓝色的沉积产物,从而在光学显微镜下观察到蓝色表达的组织细胞分布,藉此建立一种简单的目测颜色来识别报告基因阳性组织细胞的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

广泛应用于基因组学、蛋白质组学和其它分子生物学研究。

其适用于转基因后的人体和动物组织。

产品即到即用,性能稳定,参数优化,着色敏感,堪称国际上同类产品最佳。

β-半乳糖苷酶可以催化二糖乳糖水解为单糖:葡萄糖和半乳糖。

β-半乳糖苷酶的活性可以用X-gal(5-溴-4-氢-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)等显色底物加以检测,β-半乳糖苷酶可将X-gal转变为不溶性的深蓝色沉淀。

X-gal可以做为组织染色剂,可以在所有表达β-半乳糖苷酶(lacz)的植物和动物组织上产生颜色。

应该是可以用来病毒感染组织切片染色的。

CCAE染色步骤1、试剂配制:(1)A液:萘酚-AS—D氯醋酸10mg溶于N,N-二甲基甲酰胺1ml中。

(2)4%副品红液:取盐酸副品红(EM级)1g,溶于蒸馏水20ml内,再加入10m1/L的HCl 5m1,稍加温以增加溶解度,过滤、贮室温下。

于使用前,取等量副品红液与新鲜的4%亚硝酸钠混合,之后用淀粉碘化物试纸测试,瞬间试纸应变为蓝色才合格,如果不变色,应加入更多的亚硝酸盐。

(3)B液:o.1mol/L的Michaelis Veronal-醋酸缓冲液(PH 7.6)30ml,加入新配制的副品红液3滴,用1moI/L HCl使PH值调至6.3。

2、染色步骤:(1)将A.、B二液混合,过滤,加入氟化钠(17mg/10ml), 使之最后浓度为0.04mol/L.(2)切片置于上述溶液内孵育1h(30℃)(3)流水冲洗。

(4)苏木素复染。

(5)空气干燥后封固。

GGrimelius硝酸银反应法(嗜银反应):1、试剂配制:硝酸银液: 1%硝酸银水溶液3毫升蒸馏水87毫升0.2M醋酸缓冲液(PH5.6) 10毫升还原液: 对苯二酚1克亚硫酸钠5克蒸馏水100毫升2、染色步骤:(1)切片脱蜡至蒸馏水(2)60℃硝酸银液内3小时(3)用滤纸吸去周围银液,蒸馏水速洗(4)入45℃的还原液处理1分钟(5)蒸馏水洗(6)5%硫代硫酸钠处理1 分钟(可不做)(7)水洗,脱水,透明,封固3、结果:嗜银颗粒呈棕黑色。

正常时嗜银颗粒存在于神经内分泌细胞,故此法主要用于神经内分泌肿瘤的诊断。

HHID染色法1、染色步骤:(1)切片脱蜡至蒸馏水(2)放入预热的1当量盐酸中10分钟(3)蒸馏水洗(4)Schiff液中染10分钟(5)自来水洗15分钟至细胞核红色(如2~5步不做,可在染好爱先蓝后染核固红2分钟)(6)蒸馏水洗(7)高铁二胺液18~24 小时(8)爱先蓝液(pH2.5)染10~20分钟(9)蒸馏水洗(10)脱水,透明,封固2、结果: 硫酸化酸性粘液呈棕黑色,羧基化酸性粘液(唾酸粘液)物质蓝色。

硫酸化酸性粘液可见于大肠粘膜,而小肠粘膜仅出现唾酸粘液,此法多用于确定肠化的分型。

HP(硝酸银法)1、试剂配制:(1)醋酸缓冲贮备液,PH3.60.2N醋酸缓冲液,PH3.6 10 ml蒸馏水240 ml以下各液均用此液配制(2)1 %硝酸银液硝酸银1 g醋酸缓冲贮备液,PH3.6 100 ml(3)2 %硝酸银液硝酸银0.2 g醋酸缓冲贮备液,PH3.6 10 ml(4)5 %明胶液明胶5 g醋酸缓冲贮备液,PH3.6 100 ml先把醋酸缓冲贮备液加温至40℃左右,然后倾入明胶,于37℃温箱内慢慢溶解,搅拌。

(5)3 %对苯二酚液对苯二酚0.3 g醋酸缓冲贮备液,PH3.6 10 ml(6)明胶对苯二酚液3 %对苯二酚液1 ml5 %明胶液15 ml(7)显影液明胶对苯二酚液16 ml2 %硝酸银液3 ml在操作到第4步完成前5分钟充分混合,置于56℃水浴箱中保温待用。

2、操作方法:(1)组织脱蜡至蒸馏水(2)醋酸缓冲贮备液洗2次(3)入1 %硝酸银液中,56℃,1小时(4)切片不水洗,直接放入预热的显影液中56℃,肉眼呈黄棕色为止。

(5)倾去显影液,于56℃的水中浸洗2分钟(6)水洗(7)脱水,透明,封固。

3、结果:幽门弯曲菌呈棕黑至黑色。

Highman甲醇刚果红染色法(类淀粉染色)1、试剂配制:甲醇刚果红染液: 刚果红0.5 g 甲醇80 ml 甘油20 ml碱性乙醇分化液: 氢氧化钾0.2 g 80%乙醇100 ml2、染色步骤:(1)切片脱蜡至水(2)甲醇刚果红染液染10~20分钟(3)用碱性乙醇分化液分化数秒(4)水洗(5)苏木素复染2分钟(6)水洗(7)脱水,透明,封固3、结果:淀粉样物呈桔红色。

4、类淀粉染色的应用:确定淀粉样变性及玻璃样变性的胶原组织,后者在刚果红法染色后呈淡桔色,常用于诊断甲状腺髓样癌和胰岛细胞瘤等。

L六胺银染色法1、试剂配制:六胺银液配制:3%六次甲基四胺水溶液5 ml2.5%硝酸银水溶液0.5 ml摇晃,变清,再加2.5%四硼酸钠1.5~2 ml加蒸馏水至30~40 ml2、步骤:(1)切片脱蜡至水,蒸馏水洗(2)0.5%高碘酸浸15分钟,蒸馏水洗(3)六胺银液60℃,1-2小时,(或六胺银液80-90℃,半小时左右)蒸馏水洗(镜下基底膜呈黑色)(4)0.2% 氯化金调色数秒(5)丽春红淡染(6)水速洗(7)烘干,透明,封片。

3、结果:肾小球基底膜呈黑色,霉菌,弹力纤维及一些网状纤维也呈黑色。

MMallory 三色法1、步骤(1)切片脱蜡至水(2)0.5%酸性复红水溶液1 min(3)蒸馏水洗(4)入下液1-2min苯胺蓝0.5g,桔黄G 2g,磷目酸或磷钨酸1g,蒸馏水100ml。

(5)蒸馏水洗(6)95%乙醇分色(7)脱水,透明,封片。

2、结果:胶原纤维蓝色,红细胞桔黄色,核红色。

M allory磷钨酸~苏木素染色法(PTAH)1、试剂配制:苏木素0.1 g 磷钨酸 2.0 g 蒸馏水100 ml先将苏木素加热溶于20毫升蒸馏水,再将磷钨酸溶于80毫升蒸馏水。

等苏木素冷却后,加入磷钨酸溶液,混合,放置数星期后,才可使用。

如急用,可加入0.2 g高锰酸钾,加速其成熟。

2、染色步骤:(1)切片脱蜡至蒸馏水。

(2)放入0.25%高锰酸钾水溶液5分钟。

(3)蒸馏水洗。

(4)2.5%草酸漂白5分钟。

(5)蒸馏水洗多次。

(6)置于磷钨酸苏木素溶液12~24小时。

(7)95%酒精快速分化,滤纸吸去剩余酒精,置60℃温箱中烘干。

(8)二甲苯透明,封固。

3、结果:纤维胶质,肌胶质,神经胶纤维,纤维素,横纹肌等均染成蓝色。

胶原,网状纤维和骨基质着黄色或砖红色。

在工作中常用于观察横纹以证实肿瘤细胞是否有横纹肌分化特征。

Masson 三色染色法、1、试剂配制:丽春红酸性品红液:丽春红0.7 g 酸性品红0.3 g蒸馏水99ml 冰醋酸 1 ml苯胺蓝液: 苯胺蓝 2 g 蒸馏水98 ml 醋酸 2 ml亮绿液:亮绿0.2g 蒸馏水100 ml 冰醋酸0.2 ml苦味酸酒精液:苦味酸在95%酒精中的饱和液20 ml,加95%酒精10 ml2、染色步骤:(1)切片脱蜡至蒸馏水(2)苏木素染5~10分钟(3)盐酸酒精分化(4)流水蓝化,蒸馏水洗(苏木素可不染)(5)丽春红酸性品红液中染5~8分钟(6)蒸馏水洗(7)1% 磷钼酸中染1~3分钟(8)不用水洗直接入苯胺蓝液或亮绿液5分钟(如染色效果不佳,可在冰醋酸内脱色后重染)(9)水速洗,置60℃温箱中烘干,二甲苯透明,封固3、结果:胶原纤维蓝色(苯胺蓝复染)或绿色(亮绿复染),肌纤维、纤维素红色。

相关文档
最新文档