肿瘤标志物检测方法课件
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肿瘤标志物PPT课件
肿瘤标志物的联合应用
肿瘤类型 肝 结、直肠、胆道 胰 胃 食道 肺 乳腺 卵巢 宫颈 子宫 肾 前列腺 甲状腺 鼻咽
肿瘤标志物（按检测的顺序排） AFP＋CEA CEA＋CA199＋CA50 CEA＋CA199＋CA242＋CA50 CEA＋CA724＋CA199 CEA＋ SCC NSE＋CYFRA 21-1 ＋CEA +CA50＋CA199/SCC CA153 ＋CEA ＋CA125 CA125 ＋β-HCG ＋AFP＋CEA ＋CA724 CEA＋ CA724 CEA＋ SCC＋SF＋β-HCG CEA＋ β-MG FPSA/TPSA＋PAP CEA＋ CA199 ＋TBG ＋T3,T4,FT3,FT4,TSH CEA＋ SCC ＋EBV
鉴于我国国情，对于肿瘤标志物初次检测结果阳性而未见任 何异常的体检对象，建议每3-6w复检一次，若连续3次（即 3个月）呈持续阳性，应引起高度重视，详细询问病史和进 行体格检查，并结合定位肿瘤标志物测定及各种影像学检查， 以便进行肿瘤定位。
若至少在3个月内肿瘤标志物浓度已下降的病员或结果呈阴 性，自然排除肿瘤的可能（可能是良性疾病的一过性升高）
PSA是前列腺癌的特异性标志物，也是目前公 认的唯一具有器官特异性肿瘤标志物。血清 TPSA升高一般提示前列腺存在病变（前列腺炎、 良性增生或癌症），对于前列腺癌的诊断特异 性达90％-97％。
β2-微球蛋白（β2-MG）
β2-MG是恶性肿瘤的辅助标志物，也是一些 肿瘤细胞上的肿瘤相关抗原。在淋巴系统肿瘤 如慢性淋巴细胞白血病、淋巴细胞肉瘤、多发 性骨髓瘤等中尤为明显，在肺癌、乳腺癌、胃 肠道癌及子宫颈癌等中也可见增高。由于在肿 瘤早期，血清β2-MG可明显高于正常值，故有 助于鉴别良、恶性肿瘤。
肿瘤标志物检测和临床课件
• 反映上述肿瘤疗效、复发和预后的指标
3、胚胎性肿瘤标志
• 胚胎时期的某些物质在机体的发育、生 长过程中逐步减少并消失，
• 这些胚胎性和胎盘性物质在某些肿瘤可 以重新表达，成为肿瘤标志。
人绒毛膜促性腺激素
（human chorionic gonadotrophin， HCG） • 滋养层细胞合成
• 加热至4O～60℃时凝固，加热至90～100℃可 再溶解，称为凝溶蛋白
• 在血清蛋白电泳中可见一异常增高的M带，故 也称为M蛋白
• 对多发性骨髓瘤的诊断有重要价值。
香草扁桃酸
（manillylman delicacid,VMA)
• 儿茶酚胺的代谢产物
• 收集24h尿检测，可反映儿茶酚胺的代谢 水平
• AFP是原发性肝癌诊断中最好的肿 瘤标志,70-95％患者的AFP增高，晚 期病人更高
• 当血清AFP升高，而S-GPT正常者， 应高度怀疑原发性肝癌
• 肝硬化及慢性活动性肝炎：AFP100 －400 μg／L，并与S-GPT呈平行关 系，两者同时升高或降低
• 睾丸恶性肿瘤、畸胎瘤、胃、胰、 胆、肾、乳腺肿瘤和白血病也可升 高，但多<100 μg／L
2、血清学肿瘤标志
• 一般是指肿瘤细胞产生的、分泌到血清 或体液中的物质
• 可用生化方法或免疫学方法定量测定
肿瘤来源
血清学标志
临床意义
乳腺
CEA﹡， CA15－3
4
胃 肠 道 （ 结 直 肠 、 CEA﹡，CA19－9 胰腺、胃）
3，4
前列腺
PSA﹡
1，３，４
肝细胞
PAP﹡ AFP﹡
3， 4 1～4
骨髓瘤蛋白 激素 促性腺激素 男性激素 血型抗原 酶 费城染色体
3、胚胎性肿瘤标志
• 胚胎时期的某些物质在机体的发育、生 长过程中逐步减少并消失，
• 这些胚胎性和胎盘性物质在某些肿瘤可 以重新表达，成为肿瘤标志。
人绒毛膜促性腺激素
（human chorionic gonadotrophin， HCG） • 滋养层细胞合成
• 加热至4O～60℃时凝固，加热至90～100℃可 再溶解，称为凝溶蛋白
• 在血清蛋白电泳中可见一异常增高的M带，故 也称为M蛋白
• 对多发性骨髓瘤的诊断有重要价值。
香草扁桃酸
（manillylman delicacid,VMA)
• 儿茶酚胺的代谢产物
• 收集24h尿检测，可反映儿茶酚胺的代谢 水平
• AFP是原发性肝癌诊断中最好的肿 瘤标志,70-95％患者的AFP增高，晚 期病人更高
• 当血清AFP升高，而S-GPT正常者， 应高度怀疑原发性肝癌
• 肝硬化及慢性活动性肝炎：AFP100 －400 μg／L，并与S-GPT呈平行关 系，两者同时升高或降低
• 睾丸恶性肿瘤、畸胎瘤、胃、胰、 胆、肾、乳腺肿瘤和白血病也可升 高，但多<100 μg／L
2、血清学肿瘤标志
• 一般是指肿瘤细胞产生的、分泌到血清 或体液中的物质
• 可用生化方法或免疫学方法定量测定
肿瘤来源
血清学标志
临床意义
乳腺
CEA﹡， CA15－3
4
胃 肠 道 （ 结 直 肠 、 CEA﹡，CA19－9 胰腺、胃）
3，4
前列腺
PSA﹡
1，３，４
肝细胞
PAP﹡ AFP﹡
3， 4 1～4
骨髓瘤蛋白 激素 促性腺激素 男性激素 血型抗原 酶 费城染色体
肿瘤标志物检验ppt课件
目
1 2 3 4
录
概述 常见肿瘤标志物 单克隆免疫球蛋白增殖病的免疫学检测
肿瘤标志物的检测和联合应用
返回总目录
现 状
肿瘤严重威胁人们的健康，乃当今世界人 类的头号杀手，全世界每年有700多万人 死于恶性肿瘤。 我国肿瘤诊治的国策是早期发现，早期诊 断，早期治疗。 实验诊断是肿瘤检查中必不可少的手段之 一，血清、体液、分泌物或排泄物中肿瘤 细胞产生的糖蛋白、激素、酶类及代谢产 物等肿瘤标志物（tumor markers，TM） 检测是目前肿瘤的诊断、疗效观察、复发 判断等的重要手段。
前列腺癌
霍奇金病、白血病、肝癌 多发性骨髓瘤、游离轻链病
第二节 常见肿瘤标志物
胚胎抗原类肿瘤标志物 一
二 糖链抗原类肿瘤标志物
酶类肿瘤标志物 三
激素类肿瘤标志物 四 蛋白类肿瘤标志物 五 其他常用的肿瘤标志物 六
一、胚胎抗原类肿瘤标志物
胚胎抗原类物质是在胚胎发育阶段由胚 胎组织产生的正常成分，在胚胎后期减 少，出生后逐渐消失或仅存极微量，在 癌症患者中这些胚胎抗原重新出现。
甲胎蛋白
化学发光免疫分析法
参考区间
成人<25μg/L CLIA
甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)在胎儿 期分别由卵黄囊和胎肝合成，在胎儿出生 后18个月，清蛋白合成增加，AFP浓度下降 。 正常成人肝细胞几乎不产生AFP。当肝细胞 或生殖腺胚胎组织等癌变时，有关基因重 新被激活，又大量表达AFP。
CEA升高主要见于结/直肠癌，其他恶性肿瘤 如胰腺癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、子宫癌 CEA也升高。
肿瘤患者手术切除后6周，CEA水平恢复正 常，否则提示有残存肿瘤。
肿瘤标志物检测及应用PPT课件
肿瘤标志物还可以用于监测患者的病 情变化和复发情况，及时发现异常情 况并采取相应的治疗措施，提高患者 的生存质量和生存率。
05 肿瘤标志物检测的局限性及展望
CHAPTER
肿瘤标志物检测的局限性
灵敏度与特异性不足
受其他因素影响
目前大部分肿瘤标志物的灵敏度和特 异性有限，容易产生假阳性或假阴性 结果，影响诊断的准确性。
肿瘤标志物存在于患者的血液、体液 、组织或排泄物中，通过生物学、免 疫学或化学的方法进行检测。
肿瘤标志物的分类
01
02
03
按来源分类
可分为肿瘤细胞产生的标 志物和宿主对肿瘤反应产 生的标志物。
按功能分类
可分为肿瘤增殖相关标志 物、分化标志物、凋亡相 关标志物、血管新生相关 标志物等。
按性质分类
可分为蛋白质类、酶类、 激素类、糖类、癌基因产 物等。
过测量放射性强度进行定量检测。
免疫组化技术
03
利用抗体与抗原肿瘤标志物。
生物芯片技术
基因芯片
将大量基因探针固定在芯片上， 通过与待测标本杂交，检测基因 表达谱的变化。
蛋白质芯片
将大量蛋白质探针固定在芯片上 ，与待测蛋白质进行相互作用， 用于蛋白质表达和功能研究。
案例三：结直肠癌标志物检测与应用
要点一
总结词
要点二
详细描述
结直肠癌诊断、预后评估、复发监测
结直肠癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，早期诊断和治疗对 于提高治愈率和生存率至关重要。结直肠癌标志物检测可以 通过检测血液、粪便等生物样本中的肿瘤相关物质，辅助医 生对结直肠癌进行早期诊断、预后评估以及复发监测。常见 的结直肠癌标志物包括癌胚抗原（CEA）、糖链抗原19-9 （CA19-9）、糖链抗原72-4（CA72-4）等。
05 肿瘤标志物检测的局限性及展望
CHAPTER
肿瘤标志物检测的局限性
灵敏度与特异性不足
受其他因素影响
目前大部分肿瘤标志物的灵敏度和特 异性有限，容易产生假阳性或假阴性 结果，影响诊断的准确性。
肿瘤标志物存在于患者的血液、体液 、组织或排泄物中，通过生物学、免 疫学或化学的方法进行检测。
肿瘤标志物的分类
01
02
03
按来源分类
可分为肿瘤细胞产生的标 志物和宿主对肿瘤反应产 生的标志物。
按功能分类
可分为肿瘤增殖相关标志 物、分化标志物、凋亡相 关标志物、血管新生相关 标志物等。
按性质分类
可分为蛋白质类、酶类、 激素类、糖类、癌基因产 物等。
过测量放射性强度进行定量检测。
免疫组化技术
03
利用抗体与抗原肿瘤标志物。
生物芯片技术
基因芯片
将大量基因探针固定在芯片上， 通过与待测标本杂交，检测基因 表达谱的变化。
蛋白质芯片
将大量蛋白质探针固定在芯片上 ，与待测蛋白质进行相互作用， 用于蛋白质表达和功能研究。
案例三：结直肠癌标志物检测与应用
要点一
总结词
要点二
详细描述
结直肠癌诊断、预后评估、复发监测
结直肠癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，早期诊断和治疗对 于提高治愈率和生存率至关重要。结直肠癌标志物检测可以 通过检测血液、粪便等生物样本中的肿瘤相关物质，辅助医 生对结直肠癌进行早期诊断、预后评估以及复发监测。常见 的结直肠癌标志物包括癌胚抗原（CEA）、糖链抗原19-9 （CA19-9）、糖链抗原72-4（CA72-4）等。
临床免疫学：肿瘤标志物的检测
肿瘤标志物的检测
实验目的
掌握ELISA定量检测方法；
熟悉检测肿瘤Βιβλιοθήκη 记物的常用方法；实验原理 (甲胎蛋白定量检测)
双抗体夹心法： 抗-AFP单克隆抗体包被反应板，加入待测标本或标
准品孵育后，洗涤后，再加入HRP标记的抗-AFP多 克隆抗体。如果标本中含有AFP，就能在固相载体 的表面形成(抗-AFP单克隆抗体)-AFP-(HRP-抗-AFP多 克隆抗体)复合物，加入底物后产生显色反应； 在一定范围内，吸光度OD值与标本中的AFP含量的 对数值成线性关系； 通过同步检测已知浓度的AFP标准品并计算标准曲 线后，将待测标本OD值代入回归方程后即可求出 待测标本中AFP含量。
值）； 9、检测结果的计算：
以标准品AFP浓度的lg值为自变量（x），其对应的吸光值（OD值）为应变量 （y），求出回归方程，将待测标本的OD值代入回归方程，求得其AFP含量。
标准品浓度 20
50
100
200
400
ng/ml
lg值
1.301
1.699
2
2.301
2.602
实验结果的判断与解释
1、阴性对照标本OD值≤0.05, 20ng/ml标准品OD值 ≥0.15;
思考题
1、什么是肿瘤标记物，常见的肿瘤标记物主要分 为哪几类？
2、加样：相应反应孔中加入标本或样品各50µl,振荡混匀，封板，置于37 ℃孵 育20分钟；
3、洗板：弃去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置10秒，弃去孔内液体，重 复5次，最后一次在吸水纸上拍干，
4、加酶结合物：每孔加酶结合物50µl，封板，置于37 ℃孵育20分钟； 5、洗板：重复步骤3； 6、显色：每孔加入显色剂A、B各50µl，振荡混匀，封板，置37 ℃孵育10分钟； 7、终止反应：每孔加终止液50µl，混匀； 8、读板：在450nm主波长，630nm副波长下，用酶标仪检测各孔吸光值（OD
实验目的
掌握ELISA定量检测方法；
熟悉检测肿瘤Βιβλιοθήκη 记物的常用方法；实验原理 (甲胎蛋白定量检测)
双抗体夹心法： 抗-AFP单克隆抗体包被反应板，加入待测标本或标
准品孵育后，洗涤后，再加入HRP标记的抗-AFP多 克隆抗体。如果标本中含有AFP，就能在固相载体 的表面形成(抗-AFP单克隆抗体)-AFP-(HRP-抗-AFP多 克隆抗体)复合物，加入底物后产生显色反应； 在一定范围内，吸光度OD值与标本中的AFP含量的 对数值成线性关系； 通过同步检测已知浓度的AFP标准品并计算标准曲 线后，将待测标本OD值代入回归方程后即可求出 待测标本中AFP含量。
值）； 9、检测结果的计算：
以标准品AFP浓度的lg值为自变量（x），其对应的吸光值（OD值）为应变量 （y），求出回归方程，将待测标本的OD值代入回归方程，求得其AFP含量。
标准品浓度 20
50
100
200
400
ng/ml
lg值
1.301
1.699
2
2.301
2.602
实验结果的判断与解释
1、阴性对照标本OD值≤0.05, 20ng/ml标准品OD值 ≥0.15;
思考题
1、什么是肿瘤标记物，常见的肿瘤标记物主要分 为哪几类？
2、加样：相应反应孔中加入标本或样品各50µl,振荡混匀，封板，置于37 ℃孵 育20分钟；
3、洗板：弃去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置10秒，弃去孔内液体，重 复5次，最后一次在吸水纸上拍干，
4、加酶结合物：每孔加酶结合物50µl，封板，置于37 ℃孵育20分钟； 5、洗板：重复步骤3； 6、显色：每孔加入显色剂A、B各50µl，振荡混匀，封板，置37 ℃孵育10分钟； 7、终止反应：每孔加终止液50µl，混匀； 8、读板：在450nm主波长，630nm副波长下，用酶标仪检测各孔吸光值（OD
肿瘤标志物临床应用ppt课件
第二部分：肿瘤标志物的检测
肿瘤标志物单指标检测 如放免法、金标法、酶免法、电化学发光法多肿瘤标志物蛋白芯片集成检测 如TM12
生化检测方法
什么是TM12？
TM12是多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统的简称。 它采用最新的芯片技术，一次性集成检测样品中12种肿瘤标志物浓度。
第三部分：肿瘤标志物的临床意义及典型案例
癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)
【参考值】 ：血清〈5 ng／mL。由Gold和Freedman 于1965年首先从胎儿及结肠癌组织中发现的。 分子量为22KD的多糖蛋白复合物，45％为蛋白质。一般情况下，CEA是由胎儿胃肠道上皮组织、胰和肝细胞所合成。 CEA属于非器官特异性肿瘤相关抗原，分泌CEA的肿瘤大多位于空腔脏器，如胃肠道、呼吸道、泌尿道等。在临床上，当CEA大于60μg/L时，可见于结肠癌、直肠癌、胃癌和肺癌。
肿瘤标志物（tumor marker）
指恶性肿瘤细胞分泌或脱落到体液或组织中的物质或是宿主对体内新生物反应而产生并进入到体液或组织中的物质；反映肿瘤存在和生长；包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因产物等；由于存在于患者的血液、体液、细胞或组织中，可用生物化学、免疫学及分子生物学等方法进行测定， 对肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、观察疗效、监测病情有无复发 以及预后评价具有一定的价值。
癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)
患者：女性 59岁 湖南省邵阳市中心医院 转中南大学湘雅医院病史： 患者于2005年1月20日因腰骶部，右下肢疼痛在湖南省邵阳市中心医院X线、CT扫描后诊断为腰椎盘突出，在邵阳市中心医院做了腰椎盘突出手术后疗效不明显，于3月31日转至中南大学湘雅医院门诊。 C12检测结果：CEA：16.11ng/ml，Ferritin：483.52ng/ml，CA125：92.65 KU/L呈阳性 其他检查：胸片提示右中肺有片状阴影，不排除肺癌的可能性。肺部CT提示右肺肿块，右肺癌？骨扫描提示全身多处骨质代谢异常，肺癌骨转移。 临床诊断：肺癌骨转移
肿瘤标志物联合检测及质量控制PPT课件
细胞中异常表达。
肿瘤细胞表面抗原
如糖蛋白、糖脂等，具有高度 特异性。
肿瘤标志物联合检测的方法介绍
免疫分析法
利用抗原抗体反应的特异性， 通过标记技术对肿瘤标志物进
行定量或定性检测。
化学发光法
利用化学发光剂标记抗体或抗原， 与肿瘤标志物结合后发光，通过光 电倍增管进行信号放大和检测。
酶联免疫法
利用酶催化反应放大信号，提 高检测灵敏度和特异性。
联合检测的优势
多指标联合检测可以综合考虑多种肿瘤标志物的变化，提高早期诊断的准确性； 同时，联合检测还可以用于疗效监测和预后评估，为临床医生提供更全面的信息 。
提高肿瘤标志物联合检测的准确性和可靠性
质量控制
为提高肿瘤标志物联合检测的准确性和可靠性，必须加强实 验室的质量控制，包括样本采集、处理、保存和检测等环节 ，确保检测结果的稳定性和可靠性。
在癌症诊断中的应用
肿瘤标志物联合检测可以辅助医生对癌症进行早期诊断，提高诊断的准确性和可靠 性。
通过检测多种肿瘤标志物，可以发现单一标志物可能忽略的肿瘤，减少漏诊的可能 性。
肿瘤标志物联合检测可以用于筛查高危人群，发现潜在的癌症患者，提高癌症的早 期发现率。
在癌症治疗中的应用
肿瘤标志物联合检测可以监测癌症治 疗的效果，帮助医生及时调整治疗方 案。
应用领域
新型肿瘤标志物在肺癌、乳腺癌、结直肠癌等常见肿瘤的早期诊断、疗效监测 和预后评估中得到广泛应用，为临床医生提供了更准确、更全面的诊断和治疗 信息。
肿瘤标志物联合检测技术的发展
技术进步
随着检测技术的发展，肿瘤标志物联合检测技术也在不断进步，如多指标联合检 测、蛋白质组学技术、基因组学技术等，这些技术的应用提高了肿瘤标志物联合 检测的准确性和可靠性。
肿瘤细胞表面抗原
如糖蛋白、糖脂等，具有高度 特异性。
肿瘤标志物联合检测的方法介绍
免疫分析法
利用抗原抗体反应的特异性， 通过标记技术对肿瘤标志物进
行定量或定性检测。
化学发光法
利用化学发光剂标记抗体或抗原， 与肿瘤标志物结合后发光，通过光 电倍增管进行信号放大和检测。
酶联免疫法
利用酶催化反应放大信号，提 高检测灵敏度和特异性。
联合检测的优势
多指标联合检测可以综合考虑多种肿瘤标志物的变化，提高早期诊断的准确性； 同时，联合检测还可以用于疗效监测和预后评估，为临床医生提供更全面的信息 。
提高肿瘤标志物联合检测的准确性和可靠性
质量控制
为提高肿瘤标志物联合检测的准确性和可靠性，必须加强实 验室的质量控制，包括样本采集、处理、保存和检测等环节 ，确保检测结果的稳定性和可靠性。
在癌症诊断中的应用
肿瘤标志物联合检测可以辅助医生对癌症进行早期诊断，提高诊断的准确性和可靠 性。
通过检测多种肿瘤标志物，可以发现单一标志物可能忽略的肿瘤，减少漏诊的可能 性。
肿瘤标志物联合检测可以用于筛查高危人群，发现潜在的癌症患者，提高癌症的早 期发现率。
在癌症治疗中的应用
肿瘤标志物联合检测可以监测癌症治 疗的效果，帮助医生及时调整治疗方 案。
应用领域
新型肿瘤标志物在肺癌、乳腺癌、结直肠癌等常见肿瘤的早期诊断、疗效监测 和预后评估中得到广泛应用，为临床医生提供了更准确、更全面的诊断和治疗 信息。
肿瘤标志物联合检测技术的发展
技术进步
随着检测技术的发展，肿瘤标志物联合检测技术也在不断进步，如多指标联合检 测、蛋白质组学技术、基因组学技术等，这些技术的应用提高了肿瘤标志物联合 检测的准确性和可靠性。
17项肿瘤标志物化学发光检测医学PPT课件
◆化学发光法（CLIA）
◆磁微粒化学发光法 ◆电化学发光法（ECLIA） ◆蛋白芯片技术
◆斑点法
◆金标法
化学发光免疫分析
进样系统 反应池 PMT 放大器 记录仪
负高压
检测系统
PMT:光电倍增管
化学发光分析法仪器方框图
化学发光免疫分析包含两个部分, 即免疫反应系统和 化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学 发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个 激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基 态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器 测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反 应剂激发下生成激发态中间体 ) 直接标记在抗原 (化 学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或 酶作用于发光底物
5%吸烟者检测值可至2.5~5ng/ml， 1%至10~20ng/ml；肝炎疾病可使CEA
水平短暂升高
在实体肿瘤患者中CEA表达状况
肿瘤患者 %
60 50 50
40
30 20 10 0 7.0
33
28
27
22
7.0
4.2
7.0
7.4
临界值 (ng/ml)
在实体肿瘤患者中,CEA特异性为95%时的敏感性
HCG CA724 fPSA CA242 CA242 HCG、 CA724 HCG
（一）癌胚抗原 （CEA）
生化特性： 糖蛋白，45~60%糖，电泳迁移率， 抗原决定基 分子量： 发生部位： 180,000 胚胎及胎儿肠黏膜
参考值范围：＜5ng/ml
临床应用：
影响因素：
监测结直肠癌、胃癌、乳腺癌和支气管癌病程及疗效
肿瘤标志物的分类（化学特性）