色谱柱使用手册
色谱柱使用手册

正相、反相和极性胶联柱使用手册分类:质量检验 2007.3.22 22:20 作者:LAI | 评论:0 | 阅读:146正相、反相和极性胶联柱使用手册Chrompack HPLC Normal-,Reversed phase and Polar bonded columns 注意:此色谱柱填充的是改性硅胶材料。
向柱内导入碱性溶剂(pH>7.0)或酸性溶剂(pH<2.0)会导致柱子损坏。
在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。
未正确地使用不能享受保修待遇。
1.简介此柱填充的是反相或者极性胶联型态的硅胶基质材料的硅胶。
硅胶形态的柱子用于正相(非水)条件。
反相(C8,C18,ODS,RP-8和RP-18)通常用于反相条件(水相)。
极性胶联型(APS,diol,CN和NH2)依照应用目的,可以用于正相和反相条件。
建议不要将一个相同的柱子用于差别非常大的条件下,这是因为柱子在特定的条件下,固定相的性质会发生变化,所以在其他的条件下,会影响柱效。
也不建议将硅胶柱用在反相条件下或者将方向柱用在正相条件下,这是因为这种过程会发生重复性差的问题(每一次注射之间和柱与柱之间的比较)。
2.色谱柱老化在开始分析工作以前,柱子必须经过正确的老化。
一个没有正确老化的柱子可能会带来问题,诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。
A.在反相条件下老化要老化这类柱子,首先要使用乙腈或者甲醇淋洗,然后你选用的洗脱液进行平衡。
在发货以前,每根柱子都已经测试过并进行了老化。
因此没有必要在第一次使用时用水冲洗)。
如果流动相中使用了添加物(例如缓冲液或离子对试剂),建议使用正确比例的但不含此添加物的流动相进行缓冲冲洗。
缓冲冲洗应当首先以低流速进行,最后再使用正常流速。
B.在正相条件下老化柱效可能会受水与固定相的键合的严重影响。
柱子的干燥(激活)或润湿(失活)可能是需要的。
使用的溶剂可能是水饱和的或者是无水的。
干燥柱子可以使用无水的二氯甲烷。
Chiralpak ASH-中文使用手册

北京慧德易科技有限责任公司Fra bibliotekd e
柱压指色谱柱压降,即接上柱子后系统的压力与未接柱子时系统压力的差值。 50 bar 之内是有助于柱子最长寿命的理想值,但是只要在 100 Bar 之内柱子就是安全的。
色谱条件: 0 A – 流动相
烷烃n/ 异丙醇 CHIRALPAK®AS-H 250 x 4.6 mm ID 250 x 10 mm ID 250 x 20 mm ID
手性柱 CHIRALPAK® AS-H
使用手册
请在使用色谱柱前仔细阅读本《使用手册》
色谱柱描述:
填料结构: 5 μ 硅胶表面涂布有直链淀粉-三[(S)-α-甲苯基氨基甲酸酯
OR
H
O RO OR O
CH 3 N
R= O
*
n
silica-gel
出厂保存溶剂:
正己烷 / 异丙醇(90:10 v/v)
该色谱柱在出厂之前都已经通过了检测,检测条件、结果和批号信息请查阅“出厂检测报告”。
)
清洗色谱柱可以用无水乙醇以适当的流速冲洗 3 个小时(适用于用烷烃/醇类流动相的色谱柱)。
注意事项:
Ö 不能使用强碱性物质作为流动相添加剂或者溶解样品,因为这样会损坏填料中的硅胶成分。 Ö本《操作手册》不适用于其他种类的色谱柱。 Ö 如果您在使用过程有任何疑问,请与我们联系。 严格遵照本《使用手册》,可延长色谱柱的使用寿命。
聚甲基丙烯酸酯
CHIRALCEL®, CHIRALPAK® and CROWNPAK® 是大赛璐化学工业有限公司的注册商标
北京慧德易科技有限责任公司
c 最大流速也和流动相粘度(流动相成分)有关,必须小心不能超过柱压上限。
流动相 烷烃/醇类 90:10 100% 乙醇 100% 异丙醇 250 x 4.6mm ID 150 x 4.6mm ID 1.0 to 1.5 ml/min 0.5 ml/min 0.2-0.3 ml/min 250 x 10mm ID 5.0 to 7.0 ml/min 2.0 to 3.0 ml/min 1.0 ml/min 250 x 20mm ID 18 to 25 ml/min 5.0 to 8.0 ml/min 3.0 to 5.0 ml/min
TSK-GEL G4000PWXL色谱柱操作说明

TSK-GEL® G4000PWXL色谱柱使用手册请使用色谱柱前仔细阅读本《使用手册》。
本使用手册包括TSK-GEL® G4000PWXL色谱柱的操作条件和说明、安装说明以及柱子保护方面的信息。
产品型号08022 7.8mm ID×30cm08035 TSKtop-off gel PWXL,1g wet gelA 操作条件参数说明1. 出货溶剂水2. 最大流速1.0 mL /min当采用高黏度的缓冲溶液,为了不超过最大压力,需要降低最大流速。
当改变溶剂,采用的流速为最大流速的25%。
3. 标准流速 0.3-0.6mL/min4. 最大压力 20kg/cm2=300psi5. pH范围 2.0-12.06. 盐浓度≤ 0.5Molar7. 有机浓度≤ 20%。
低流速下采用梯度洗脱有机溶剂的浓度可以达到50%。
8. 温度 10-80℃ 当低于10℃时降低流速.9. 清洗溶剂1) 高盐浓度缓冲液( 0.5-1.0M),或2) pH 2-3 或pH 9-12缓冲液,或3) 含有乙腈或甲醇的缓冲液,或4)含有尿素或SDS的缓冲液注意:根据样品性质选择清洗溶剂.例如采用1)除去碱性聚合物,2)除去疏水蛋白质等。
10. 储存长时间不使用色谱柱时,请保存在含有0.05%的NaN3缓冲溶液或20%的乙醇溶液中。
如果是过夜保存,色谱柱可在系统中过夜,但需采用流动相在低流速下整夜冲洗柱子。
阻止空气进入柱子。
11 柱子保护建议使用保护柱延长分析柱的寿命。
保护柱的寿命很大程度上取决于样品的清洁度。
一般,保护柱在进行了30-40个样品进样后,峰会变宽或者有峰裂的情况下,需要更换保护柱。
12 TSKtop-off gel 有时,由于事故、样品、流动相或操作的改变,色谱柱或保护柱入口会产生一个凹位。
可采用TSKtop-off gel PWXL来填补这些空隙。
B 说明TSK-GEL G4000PWXL色谱柱是在数据单的条件下进行的柱效测定。
色谱柱的使用说明

色谱柱的使用说明色谱柱是一种在色谱分析中广泛使用的关键设备,它能够通过分离混合物中的组分以及测定它们的相对含量。
不同的色谱柱具有不同的分离机理和特点,因此每种色谱柱在使用前都需要仔细阅读其使用说明书,以了解其正确的使用方法和注意事项。
以下是色谱柱使用说明的一般内容:1.色谱柱的储存:色谱柱在储存期间需要避光、避湿、避高温,以免对其质量产生不良影响。
柱子应垂直存放,避免受到侧面压力。
定期检查柱子上是否有裂纹、损坏或其他异常情况。
2.安装色谱柱:在安装色谱柱前,需要进行适当的准备工作,如用洗涤剂或溶剂清洗色谱柱,以去除表面的杂质。
然后在柱子的接口处使用密封垫圈,确保柱子和接口之间的密封性。
安装时,需要根据仪器的要求和色谱柱的规格调整柱床高度和流速。
安装完成后,检查柱床是否均匀填充。
3.色谱条件的选择:正确选择色谱条件对于得到准确的分析结果至关重要。
色谱柱的选择应根据样品的特性、分离需求和分析目标来确定。
例如,对于非极性化合物的分离,应使用非极性柱;对于极性化合物的分离,则需要使用极性柱。
此外,还需合理选择进样方式、流速、温度等色谱条件,并根据需要进行优化。
4.样品的制备和进样:对于色谱分析之前,样品可能需要经过一系列的预处理步骤,如萃取、浓缩、溶解等。
进样前,需要对样品进行适当的稀释,以避免柱子堵塞或过载。
确保样品进样前是清洁无杂质的,以免污染柱子或影响分析结果。
还需根据样品的特性,选择适当的进样方式,如气相色谱中的气态进样、液相色谱中的静态进样或动态进样等。
5.色谱的运行和操作:在进行色谱分析时,需要根据选择的色谱条件设置好仪器的运行参数,如载气流速、柱温、检测器灵敏度等。
同时,还需注意检测器的基线稳定性、测量范围、线性范围等,以确保准确的定量分析。
在运行过程中,还需注意实验室的环境条件,如温度、湿度等,并及时记录实验过程和结果。
6.色谱柱的维护和保养:为了延长色谱柱的使用寿命和维持准确的分析结果,需要进行定期的维护和保养工作。
色谱柱校准操作说明书

色谱柱校准操作说明书一、简介此操作说明书旨在为用户提供关于色谱柱校准的详细步骤和操作指导。
请用户仔细阅读并按照指导进行操作,以确保准确性和有效性。
二、准备工作在进行色谱柱校准之前,请确保以下准备工作已经完成:1. 检查色谱柱:确保色谱柱没有损坏或污染。
2. 准备校准样品:根据实验要求准备相应的校准样品。
3. 准备标准品溶液:准备一系列浓度递增的标准品溶液,用于构建标准曲线。
三、校准步骤以下是色谱柱校准的具体步骤:1. 样品准备:a. 根据实验要求,准备一定浓度的校准样品。
b. 使用适当的溶剂将校准样品溶解或稀释到适合分析的浓度。
2. 构建标准曲线:a. 取一系列标准品溶液,包括不同浓度的样品。
b. 使用适当的方法(例如体积法或质量法),精确配制出各标准品溶液。
c. 将每种标准品溶液按照相同体积或质量加载进色谱仪,并记录每个峰的峰面积或峰高。
d. 绘制标准曲线,以峰面积或峰高为纵坐标,标准品浓度为横坐标。
3. 校准参数设置:a. 打开色谱仪软件,进入相应的参数设置界面。
b. 根据实验要求,在校准参数设置界面选择所需的校准方法和参数。
c. 输入标准曲线的相关参数,如方程式、截距、斜率等。
4. 样品测试:a. 使用前述参数设置对待测样品进行测试。
b. 确保待测样品的浓度适用于标准曲线的浓度范围。
c. 记录样品的测试结果,如峰面积或峰高。
5. 数据处理:a. 利用标准曲线,根据待测样品的峰面积或峰高,确定该样品的浓度。
b. 根据实验要求,进行数据的处理和分析。
四、注意事项在进行色谱柱校准操作时,请注意以下事项:1. 操作时要穿戴好个人防护装备,如实验手套和安全眼镜。
2. 色谱仪应处于稳定状态,确保系统稳定和准确性。
3. 注意标准品溶液的配制和保存,以避免缓冲溶液变质或污染。
4. 根据实验要求,选择合适的波长和检测器类型。
5. 在操作过程中,严格按照仪器操作手册的要求进行。
6. 操作结束后,及时清洗色谱柱并妥善保存,以保证下次使用的准确性和可靠性。
thoermo acclaim trinity p1色谱柱说明书

Thermo Acclaim Trinity P1色谱柱是一种高性能的液相色谱柱,适用于多种分析应用,包括药物分析、环境分析、食品安全和临床分析等。
以下是Thermo Acclaim Trinity P1色谱柱的一般使用说明,具体操作可能需要根据实际应用和仪器配置进行调整。
一、色谱柱基本特性- 色谱柱类型:液相色谱柱- 填料类型:高纯度硅胶基质的键合相- 适用范围:适用于多种有机化合物的分离和分析- pH范围:通常适用于pH 1-8的溶液- 温度范围:通常适用于室温至60°C的温度范围内二、安装和连接- 在使用前,请确保色谱柱已经正确安装并与其他液相色谱系统组件(如进样器、泵、检测器等)正确连接。
- 根据色谱柱的接口类型(如LC-10、LC-20等),选择合适的连接件进行连接。
- 确保连接无泄漏,并按照仪器制造商的指南进行操作。
三、色谱柱平衡和校准- 在首次使用色谱柱之前,需要进行平衡和校准。
通常,使用纯水或适当的流动相冲洗色谱柱至少30分钟,直到基线稳定。
- 在每次分析之前,使用适当的流动相平衡色谱柱至少15分钟。
四、流动相选择- 根据分析物的性质和分离需求选择合适的流动相。
流动相通常由有机溶剂(如甲醇、乙腈、四氢呋喃等)和水组成,可能还需要添加酸、碱或盐以调节pH值和离子强度。
- 流动相的pH值应在色谱柱的适用范围内。
五、样品准备和进样- 样品应先进行适当的前处理,如过滤、稀释等,以确保样品不会污染色谱柱或影响分析结果。
- 进样量应根据色谱柱的容量和分析物的浓度进行调整。
避免过量的样品进入色谱柱,以免影响分离效果。
六、色谱柱的清洗和维护- 分析完成后,使用适当的流动相清洗色谱柱,以去除残留的样品和溶剂。
- 定期更换色谱柱的过滤器和密封件,以保持色谱柱的性能和延长其使用寿命。
- 避免将色谱柱暴露在极端温度、湿度或化学腐蚀性物质中。
七、注意事项- 使用过程中,避免色谱柱受到机械冲击或过度弯曲。
Bio-Rad色谱柱说明书(DOC)

胺基树脂柱使用维护指南手册目录1树脂色谱柱的介绍2柱子结构2.1拆箱2.2 清洗液的制备3 柱子的保护3.1安装指南3.2 清洗指南4 固定相5 操作参数5.1 流速5.2 样品分离5.3 压力控制5.4 测试6 再生步骤6.1树脂床蓬松6.2清洗污染的柱子6.3 柱子恢复到原始离子状态6.46.5仪器调整/ 连接管道问题7 加热柱关闭8柱子保存8.1 长期保存8.2 短期保存9 故障检修第一部分:树脂基HPLC(高效液相色谱)色谱柱介绍树脂基HPLC色谱柱依据离子排斥、离子交换、配体交换、粒度排斥、反相和正相分配原理。
多重模式和交互作用提供了分离物质的独特的能力。
树脂的装填使柱子有离子交换的能力。
聚苯乙烯的骨架提供了疏水的相互作用。
相互作用的程度取决于待分析的化合物和要求的选择性程度。
要达到有效分离,反相和离子对HPLC技术要求复合洗脱剂条件。
这些方法建立在待分析化合物的改性上,直到对柱子适合为止。
对于树脂基的HPLC柱,可以通过改变填充的材料及优化色谱条件实现化合物的分析。
因此,树脂基柱也可用于异构体的HPLC体系,简化样品的制备方法,同时要求样品没有衍生作用。
通过缩短样品的制备时间,树脂基柱大大缩短了总的分析时间,但是对于大部分的分离,样品制备时必须进行过滤。
柱子是高效液相色谱的核心。
分析的成功与否取决于合适的操作条件选择及柱子的维护保养,不管HPLC系统及样品的制备多么好,如果柱子的使用不当,也得不到好的分离结果。
第二部分:色谱柱结构2.1拆包拆包取色谱柱时,仔细检查是否有运输过程中的损害,粗处理或者溶剂泄漏。
使用运输过程中的箱子存放柱子。
如果发现柱子被损坏的迹象,立即通知运输方,并且联系Bio-Rad公司技术服务部或直接去Bio-Rad公司在当地的办事处。
2.2 准备洗脱液(也就是流动相)只有新的去离子水、分析纯试剂和高纯度有机溶剂可以用来制备洗脱液。
制备好的流动相在使用之前需用0.45μm的过滤器进行过滤以除去可以堵塞系统进口的不溶性微粒。
atlantis t3、dc18和hilic硅基色谱柱使用手册

atlantis t3、dc18和hilic硅基色谱柱使用手册摘要:1.引言2.atlantis t3 硅基色谱柱a.产品概述b.技术参数c.应用领域3.dc18 硅基色谱柱a.产品概述b.技术参数c.应用领域4.hilic 硅基色谱柱a.产品概述b.技术参数c.应用领域5.使用注意事项6.结论正文:atlantis t3、dc18 和hilic 硅基色谱柱是实验室中常用的色谱柱产品。
在本文中,我们将详细介绍这三种色谱柱的使用手册。
1.atlantis t3 硅基色谱柱atlantis t3 硅基色谱柱是一款具有高效分离性能的色谱柱。
其技术参数包括:粒径为3um,长度为150mm,内径为4.6mm。
该色谱柱广泛应用于药物分析、生物制品分析以及食品分析等领域。
2.dc18 硅基色谱柱dc18 硅基色谱柱是一款十八烷基硅烷基键合色谱柱。
其技术参数包括:粒径为5um,长度为250mm,内径为4.6mm。
该色谱柱在生物制品分析、食品分析以及环境分析等领域有着广泛的应用。
3.hilic 硅基色谱柱hilic 硅基色谱柱是一款具有亲水性的硅基键合色谱柱。
其技术参数包括:粒径为3um,长度为150mm,内径为4.6mm。
该色谱柱在药物分析、生物制品分析以及食品分析等领域有着广泛的应用。
在使用色谱柱时,需要注意以下几点:- 避免高温和阳光直射,以免影响色谱柱的使用寿命。
- 避免使用强酸和强碱,以免损坏色谱柱。
- 在使用过程中,应根据实验需要选择合适的色谱柱。
总的来说,atlantis t3、dc18 和hilic 硅基色谱柱是实验室中必不可少的色谱柱产品。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
正相、反相和极性胶联柱使用手册分类:质量检验 2007.3.22 22:20 作者:LAI | 评论:0 | 阅读:146正相、反相和极性胶联柱使用手册Chrompack HPLC Normal-,Reversed phase and Polar bonded columns 注意:此色谱柱填充的是改性硅胶材料。
向柱内导入碱性溶剂(pH>7.0)或酸性溶剂(pH<2.0)会导致柱子损坏。
在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。
未正确地使用不能享受保修待遇。
1.简介此柱填充的是反相或者极性胶联型态的硅胶基质材料的硅胶。
硅胶形态的柱子用于正相(非水)条件。
反相(C8,C18,ODS,RP-8和RP-18)通常用于反相条件(水相)。
极性胶联型(APS,diol,CN和NH2)依照应用目的,可以用于正相和反相条件。
建议不要将一个相同的柱子用于差别非常大的条件下,这是因为柱子在特定的条件下,固定相的性质会发生变化,所以在其他的条件下,会影响柱效。
也不建议将硅胶柱用在反相条件下或者将方向柱用在正相条件下,这是因为这种过程会发生重复性差的问题(每一次注射之间和柱与柱之间的比较)。
2.色谱柱老化在开始分析工作以前,柱子必须经过正确的老化。
一个没有正确老化的柱子可能会带来问题,诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。
A.在反相条件下老化要老化这类柱子,首先要使用乙腈或者甲醇淋洗,然后你选用的洗脱液进行平衡。
在发货以前,每根柱子都已经测试过并进行了老化。
因此没有必要在第一次使用时用水冲洗)。
如果流动相中使用了添加物(例如缓冲液或离子对试剂),建议使用正确比例的但不含此添加物的流动相进行缓冲冲洗。
缓冲冲洗应当首先以低流速进行,最后再使用正常流速。
B.在正相条件下老化柱效可能会受水与固定相的键合的严重影响。
柱子的干燥(激活)或润湿(失活)可能是需要的。
使用的溶剂可能是水饱和的或者是无水的。
干燥柱子可以使用无水的二氯甲烷。
C.对于极性键合柱的特殊说明由于这些柱子可以用于反相或者正相条件,在进行老化以前,一定要首先检查你要使用的淋洗溶剂或洗脱液是否可以与封装在柱子里的溶剂相混溶。
如果这些溶剂不能混溶,必须先使用一个合适的缓冲溶剂进行冲洗。
3.洗脱液注意第节和第2节。
一定不要使用pH低于2或者高于7的缓冲液,这是由于它们会改变固定相的性质。
极性键合柱最好使用在3到5 之间。
在使用以前,洗脱液要进行脱气,以及使用0.5微米的滤膜过滤,以免发生检测和泵送问题。
一定要在开始使用系统以前检查水溶液中有否微生物生长,否则你的柱子会堵塞,柱压会升高到无法接受的水平。
4.流量和压力注意:最高压力:不锈钢柱:4500psi;玻璃柱:3000psi增加流速或者降低流速要采取小的间隔变化以防止填充床的扰动。
如果你想更换柱子,,要降低流量至0,等待洗脱液完全流出柱子为止(2分钟)。
拆除柱子而没有等待压力的降低会损坏柱子。
高柱压的产生一般是由于不正确地使用柱子的结果。
使用保护柱(见第6节)会防止污染物沉积在分析柱上。
5.样品准备保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处理。
你必须防止将疏水性/与流动相极性差别很大的化合物泵入色谱柱,不管是来自流动相还是样品。
特别地,要禁止导入颗粒杂质。
这些最终都会造成操作压力的增高而且非常困难或者不可能去除。
6.保护柱一定要使用保护柱,因为样品和洗脱液污染可能会造成柱压力的增高而且影响选择性。
对于ChromSep 柱我们建议使用正确型号的ChromSep 保护柱。
这个柱子的填充材料与用于分析的色谱柱的材料相似。
当柱压增高的或者观察到柱效降低的时候就需要更换保护柱了。
对于常用不锈钢柱,我们建议使用相同型号的Chromguard High Efficiency(高效)柱(10X3.0mm) 或High Capacity(高容量)柱(50X3.0mm)。
7.进样量和浓度柱子的最大载样量取决于:柱子的型号,使用的条件和样品的类型。
很难给出一个一般的指示。
对于进样体积的建议则比较容易(见表中的典型值)。
注射了太大体积或太浓的样品会使峰展宽或者峰融合。
8.温度HPLC柱最好在柱温箱中使用。
重复性取决于温度控制。
最佳的温度与特定的应用有关。
温度影响洗脱液流动的线速度。
在使用ChromSep玻璃柱的时候,一定要调节流速使压力保持在3000psi以下。
9.贮存一定不要在柱子内充满缓冲液或者其他含盐类的洗脱液的情况下贮存色谱柱。
贮存溶剂应当含有至少20%的有机溶剂,以防止有细菌的生长。
10.柱效损失的可能原因1.额外的峰展宽。
当使用小直径或者长度较短的柱子时,峰展宽的情况可能比较明显。
要保证管路的长度和内径都保持最小。
检查进样体积和检测器检查池体积是否适用于柱体积。
2.洗脱的平衡时间不够。
3.不正确柱温。
4.不正确的修正浓度。
5.床压缩。
使用了过大的洗脱流速。
将柱子反向,使用低流速。
11.柱效丧失和/或高背压1.颗粒物积聚在烧结物或者树脂床上(它们都会使背压增高)。
如果柱压增高了,将柱子与进样器断开,运行泵,以验证背压的来源确实是来自柱子的颗粒污染(样品、洗脱液和系统)。
倒转柱子,以反向的流动来冲洗柱子。
如果这样不能解决问题,更换进口过滤器或者筛板。
2.微生物在洗脱液中生长。
倒转柱子,尝试以反向的流动来将污染物冲洗出柱子。
更换进口过滤器或者筛板。
3.有蛋白质脂肪,油脂污染或者极性化合物等污染。
再生柱子(见第12节)。
12.再生1.再生反相色谱柱a.首先倒转柱子。
b.以大约最佳流速的40%的流速冲洗柱子大约45-60分钟,使用的溶剂的顺序要按照水—甲醇—异丙醇—二氯甲烷—异丙醇—甲醇—水进行。
c.柱子转回正常方向,使用分析所用洗脱液平衡。
注意:在使用另外的淋洗方法的时候,一定要先用水开始冲洗以去除缓冲液,保证其后的洗脱液可以混溶。
2.再生硅胶柱a.首先倒转柱子。
b.以大约最佳流速的40%的流速冲洗柱子大约45-60分钟,使用的溶剂的顺序要按照异辛烷(或己烷)—乙酸乙酯—干燥的异辛烷(或己烷)进行。
c.柱子转回正常方向,使用分析所用洗脱液平衡。
3.再生极性键合柱取决于使用的条件,可以使用反相的条件,也可以使用硅胶柱的条件。
注意:绝对不要使用酮类或醛类冲洗氨基柱,因为可能与固定相发生反应。
四氢呋喃作为替代可以使用。
以上内容由美国瓦里安技术中国有限公司北京办事处李华译自随柱附带的操作手册。
2002年5月16日有机酸分析柱使用手册分类:质量检验 2007.3.22 22:19 作者:LAI | 评论:0 | 阅读:124有机酸分析柱使用手册Chrompack Organic Acids Column注意Chrompack Organic Acids 色谱柱填充的是聚合物材料,需要特殊的维护。
向柱内导入以下介绍了的以外的有机溶剂会导致聚合物材料膨胀和过度增压。
因此,你应当在安装柱子以前,先用异丙醇,然后用0.1N的硫酸十分彻底地冲洗管路以彻底去除有机溶剂。
在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。
未正确地使用不能享受保修待遇。
1.简介Chrompack Organic Acids柱填充有氢形式的阳离子排斥树脂,特别开发用于在低压条件下分离包括酒、果汁、奶制品、生物样品、工业原料和环境样品中的有机酸。
2.洗脱推荐使用浓度范围在0.002到0.05N的稀硫酸溶液。
大多数的分析使用0.01N的硫酸(pH=±2.3)都可以获得成功。
其他的强酸例如磷酸和高氯酸也可以使用,但是卤酸例如盐酸不推荐使用,因为它们会腐蚀不锈钢。
当有强酸用于柱子的洗脱液的时候,柱子就进行了自身再生。
所以,特别的再生步骤是不需要的。
但是这样并不能直接对洗提强度和大多数有机酸的保留性质进行校正,较强的洗提强度通常只减少最后馏出的化合物的保留时间。
在使用以前,所有的洗脱液都要用0.45μm滤膜过滤和脱气。
对于这个柱子,使用有机相修正,例如乙腈(最大20%),可以缩短保留时间。
这样做,总是会造成背压的升高。
所以,较高的操作温度和较低的洗提流速通常可用于防止产生过高压力。
注意,一旦对柱子使用了有机相修正,柱子就会保留使用了有机相修正的洗脱液的色谱特性,即使洗脱液已经恢复到原始的100%的水相,柱子的性质也不会回到当初发货时的状态了。
因此,如果你的应用中包括有芳香酸或不饱和酸,它们会出现较长的保留时间,我们推荐使用Chrompack的芳香酸柱(Cat.no.28352),它是专门设计用于此类化合物的。
3.流量和压力推荐用于Chrompack Organic Acids柱的流量是0.3-0.8ml/min。
任何情况下洗脱流量都不能超过0.8 ml/min,记住柱子压力产生的原因有洗脱流速,柱温,洗脱液的黏度等等。
要限制洗提流速,使泵压力不超过2200PSI。
在45°C,0.6ml/min流速时,预期的压力应当在600-1500 PSI之间。
如果在此条件下,柱压超过了1200 PSI,通常指示有污染物沉积在填充材料上,必须采取改正的措施。
(见有关柱效丧失的原因一节)。
4.样品准备保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处理。
你必须防止将脂肪,油脂,蛋白质物质和重金属离子导入色谱柱,不管是流动相还是样品。
特别地,要禁止导入颗粒杂质。
这些最终都会造成操作压力的增高而且非常困难或者不可能去除。
生物样品在注射以前必须除去蛋白质。
较好的除蛋白试剂是磺基水杨酸。
5.柱前过滤器柱前过滤器含有0.5-2.0um的多孔不锈钢烧结物,安装在样品注射器和柱子之间用于从洗脱液中去除颗粒物。
这样可以防止分析柱产生压力增高的问题,延长柱子的寿命。
当有保护柱的时候,柱前过滤器就可以不用了。
6.保护柱保护柱应当用在这个柱上,因为样品和洗脱液污染可能会造成柱压力的增高。
样品中诸如盐和蛋白质类的污染物可能会使柱效降低,在注射进柱子以前应当去除。
7.样品量通常使用的样品量在10-50微升的范围内,但是进样高达100微升应当没有问题。
进样500微升或者更多可能会导致峰变宽或者融合。
8.温度Chrompack Organic Acids柱可以在20-90°C使用。
提高柱温会改善柱效。
然而,柱温也会样品的保留,所以建议使用柱温箱以保证得到可以重复的结果。
由于某些分离对温度非常敏感,所以有必要仔细地操控温度以优化分离效果。
如果在室温使用这个柱子,洗脱流速必须降低保持泵压不高于2200PSI。
9.贮存柱子提供给你的时候使用0.01N的硫酸作为平衡。
这也是建议的用于贮存的洗脱液。
柱子在保存的时候,一定要使用提供的螺丝和垫圈将端口密封。
色谱柱必须以这种方式使用和保存,在任何时候都要保证不使柱床干涸。
不正确的贮存(没有密封)或不正确的使用,会导致填充材料部分地干涸,会发生高的柱压。