色谱柱知识
色谱柱 原理
色谱柱原理
色谱柱是色谱分析中的关键部分，它是一种固定相和流动相相互作用的介质。
它通常由一种固体或涂覆在固体表面上的液体组成。
色谱柱的原理是利用样品在固定相上的相互作用来进行分离和分析。
色谱柱的固定相可以是多种不同材料，如硅胶、石英、聚合物等。
固定相的选择通常取决于需要分离的化合物的特性。
例如，硅胶色谱柱适用于极性化合物的分离，而聚合物色谱柱适用于非极性化合物的分离。
流动相是通过色谱柱的液体或气体，它分为稳定相和动态相两部分。
稳定相通常是一种不揮发的溶剂，它用来固定样品在固定相上，而动态相是通过柱上的流动相来实现分离。
在进样时，样品溶液被注入色谱柱中。
样品与流动相相互作用后，根据样品与固定相之间相互作用的不同，样品分成了不同的成分。
这些成分经过一段时间后，逐渐从柱中洗脱出来，形成不同的峰。
峰的高度和形状代表了样品中不同成分的含量和化学性质。
通过测量峰的面积或高度，可以定量分析样品中的不同物质。
在色谱分析中，色谱柱的选择非常重要，它直接影响到分离效果和分析结果的准确性。
因此，在选择色谱柱时，需要考虑样品的性质、分离效果和分析要求等因素，并根据实际情况进行选择。
色谱柱基本知识
色谱柱色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。
目录1简介2构造3填料4分类1. 4.1 安装2. 4.2 流动相3. 4.3 样品制备4. 4.4 保存操作5发展方向6性能评价7注意事项8新进展柱效；对于同系物分析，只要500即可；对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子，因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到最佳效率，除柱外死体积要小外，还要有合理的柱结构（尽可能减少填充床以外的死体积）及装填技术。
即使最好的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。
这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。
在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。
2构造色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。
柱管多用不锈钢制成，压力不高于70 kg/cm2 时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。
为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。
也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。
还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。
色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，孔径0.2~20µm(5~10µm)，取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类，尺寸规格也不同：①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm（常用4.6mm，国内有4mm和5mm），柱长10~30cm；②窄径柱（narrow bore，又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径>5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱长10~30cm；⑥生产制备柱内径可达几十厘米。
专业技术知识01-色谱柱的分类、维护及管理
适用于离子或可离解的化合物, 如无机离子、有机酸、核苷酸、 氨基酸、抗生素、蛋白质等.
有机共聚物树脂、硅胶微球 离子交换剂、螯合树脂等.
分子排阻色 谱柱
根的大据线分凝团子胶尺的孔寸物隙间质的的保孔相留径对弱大关小系与，高对分溶子质样进品行分分子离，用多于糖分、析聚多乙肽烯、、蛋聚白氯质乙、烯核等酸、
Part 4 色谱柱的常见异常现象
Part4 色谱柱的常见异常现象
色谱柱的常见异常现象与原因
异常现象 1、压力为零，不上升或流动相流量为零 2、有柱前压，但流量为零 3、柱前压上升，流量下降，甚至到零
4、不能调零
5、基线噪声大 6、基线突然起变化 7、基线漂移
原因
色谱柱柱前管路接头处泄露
（1）柱进口堵塞 （2）色谱柱链接件漏液 （1）柱上端不锈钢多孔滤片被胶片碎沫堵塞， （2）柱下端不锈钢多孔滤片被填料细颗粒堵塞 （3）柱子阻力增大，由于以水作为流动相的体系，柱子 内微生物生长而使柱子堵塞
L39 亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱
L40 Tris 3,5－二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球
L41 球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相
L42 C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相
L43 硅胶微球键合五氟代苯基固定相
L44
多功能固定相,60 Å高纯硅胶基质键合磺酸阳离子交换功能团和C8反相功能 团
L34 铅型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂，9mm球形
L35 锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相，孔径150Å
L36 5mm胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸－3,5二硝基苯甲酰
L37 适合分离分子量2000～40000的聚甲基丙烯酸酯凝胶
色谱柱型号
色谱柱型号
色谱柱的基本概念
色谱柱作为色谱分析领域中的重要组成部分，起着至关重要的作用。
色谱柱的
选择直接影响到分离效果和分析结果的准确性。
在色谱分析中，色谱柱的型号是一个至关重要的参数，不同的色谱柱型号适用于不同的分析目的和条件。
色谱柱型号的分类
根据色谱柱填料的性质和颗粒大小，色谱柱型号主要可以分为不同的类别。
常
见的色谱柱型号包括A、B、C等，每种型号都具有不同的性能特点和适用范围。
在选择色谱柱型号时，需要根据具体的分析需求和样品特性来进行选择。
色谱柱型号的选择原则
在选择色谱柱型号时，需要考虑到样品的分子量、极性、挥发性以及分离目标
等因素。
通常情况下，较小的色谱柱填料颗粒适用于较大分子量的物质分析，而较大的填料颗粒适用于分析分子量较小的物质。
此外，色谱柱型号的选择还受到分析分离目标的影响，需要根据实际情况来进行合理选择。
色谱柱型号的应用案例
以下是一些常见的色谱柱型号及其应用案例：
•型号A：适用于分离较小分子量的样品，常用于生物医药领域的分析。
•型号B：适用于挥发性物质的分离，常用于环境监测和食品安全领域。
•型号C：适用于极性物质的分析，常用于化学品分析和工业生产等领域。
结语
色谱柱型号作为色谱分析中的重要参数，在实际应用中起着至关重要的作用。
正确选择适合的色谱柱型号有助于提高分析效率和准确性，为科研工作和生产实践提供有力支持。
希望本文能够帮助读者更好地理解色谱柱型号的重要性和选择原则。
waters色谱柱相关知识
流动相方面 除去微粒 纯度的要求 超纯水，梯度实验时水中有机杂质含量要低 缓冲液的pH值，在填料的允许范围内 缓冲液（盐）的浓度 溶剂：色谱纯，并与填料相匹配 溶剂中的杂质含量 流动相对样品的溶解度 有机溶剂或水的比例
Good Column
Inject
用“5”法计算柱效
色谱柱的正确使用及操作
流动相的转换 特别是GPC柱 流速(压力)的变化幅度 温度的变化幅度 专用色谱柱∶样品及溶剂的要求
正确使用色谱柱（一）
样品方面 除去微粒及杂质 了解样品在流动相中的溶解度 如样品的溶剂不是流动相，一定要用流动相试溶解度，防止其在流动相中析出 了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用
对HPLC柱填料的了解(五)
填料的端基封口 封口残余硅羟基 减少不可逆吸附或拖尾 增加碳含量（0.1% - 1%）
残基处理的效果
NovaPak C18
未封口 C18
① 抗坏血酸 ② 烟酰胺 ③ 对氨基苯甲酸 ④ 哌咯西叮 ⑤ 核黄素 ⑥ 苯酚 ⑦ 盐酸硫胺
对HPLC柱填料的了解（六）
硅胶的活性 主要影响碱性化合物的保留行为：k' 生产硅胶时处理温度不同，硅胶活性也不同 是选择性差异的主要来源 硅胶的杂质含量 重金属含量低，硅羟基活性小，拖尾减小 是色谱柱质量好坏的重要标志
加速色谱柱寿命试验： (pH 10 ，50 °C)
寿命 (小时)
Xterra: 快梯度分析
AU
0.00
0.10
0.20
Minutes
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
1.20
1.40
1.60
1.80
2.00
化学分析中的柱色谱法基础知识
化学分析中的柱色谱法基础知识柱色谱法是化学分析的基础技术之一，其广泛应用于分离、分析、净化、提纯等领域。
柱色谱法最早应用于有机化学中，主要用于分离各种有机物。
但随着仪器技术的不断升级，柱色谱法已经可以应用于各种领域，包括无机分析、生化分析、环境分析、食品分析等。
柱色谱法的基本原理柱色谱法主要利用物质分子在不同站点处所受的吸附作用差异，来完成分离、分析等任务。
通俗地说，柱色谱法就像是在不同人群中找到不同特征的一样，将不同的物质分开。
整个柱色谱法的过程主要包括三个步骤：样品进样、分离、检测。
其具体过程如下：1、样品进样：将待分离样品注入到柱子中，并通过色谱柱使样品分离。
2、分离：根据不同物质所受吸附作用的差异，在色谱柱中完成不同物质的分离。
3、检测：通过检测器，对分离出来的物质进行鉴定和定量。
柱色谱法的色谱柱柱色谱法的柱子是柱色谱法的核心部件，柱子的质量和种类对整个柱色谱法都至关重要。
目前常用的柱子有液相色谱柱（Liquid Chromatography Column）和气相色谱柱（Gas Chromatography Column）。
在柱子中，分离物质被分子筛分离，根据色谱柱的不同材料、填充物和分子筛分子的大小，可以分为多种柱子，如反相柱、离子柱、手性柱等等。
不同的柱子适用于不同的分离对象和条件，选用合适的柱子能够明显提高柱色谱法的分析效果。
柱色谱法的应用柱色谱法技术的应用领域十分广泛，可用于制药、食品、环境和生物等行业中的质量控制和检验检疫。
以下是柱色谱法的常见应用领域：1、制药工业中，利用反相柱对药物混合物进行消杂，提纯或分离开来。
2、食品工业中，用于检测食品中的添加剂、色素、香料等成分，以及检测食品中的农药残留。
3、环境监测领域，用于污染物检测和土壤分析等。
4、生物科学领域中，利用手性柱分离和分析手性化合物、蛋白质等。
总之，柱色谱法是化学分析领域中最为重要的技术之一，它能够通过选择合适的柱子，分离出不同的化合物和成分，进而实现分析和定量等任务。
气相色谱柱的分类
气相色谱柱是气相色谱仪中的关键组件，用于分离混合物中的化合物。
这些柱根据其内部填充物的性质和结构可以进行不同的分类。
以下是常见的气相色谱柱分类：1. 毛细管柱（Capillary Column）：毛细管柱是一种非常常见的气相色谱柱，其内径通常在0.1-0.53毫米之间。
这种柱的填充物常常是液态涂层或固定相，可以提供更高的分辨率和更好的分离效果。
2. 开放管柱（Packed Column）：开放管柱是一种较早期的气相色谱柱，其内部填充有颗粒状的固定相。
这种柱逐渐被毛细管柱取代，但在某些应用中仍然有用。
3. 固定相分类：液体固定相：使用液体涂层或吸附剂，如聚硅氧烷（polydimethylsiloxane，PDMS）。
固定相涂层：可以根据化合物的极性选择不同的固定相，例如聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）。
多相柱：包含两种或两种以上不同类型的固定相，以增强对复杂混合物的分离。
4. 长度分类：短柱（Short Column）：长度通常在10-30米之间，用于快速分离。
中柱（Medium Column）：长度在30-60米之间，用于一般分离任务。
长柱（Long Column）：长度超过60米，适用于高分辨率的分离。
5. 手性柱（Chiral Column）：用于分离手性异构体（对映体）。
手性柱的填充物具有手性选择性，能够区分具有相似物理性质但不同手性的化合物。
6. 膜柱（Capillary Membrane Column）：使用多孔膜作为固定相，提供更高的热稳定性和更快的分离。
气相色谱柱的选择取决于分析的样品性质、目标化合物、分离需求以及仪器性能等因素。
在选择气相色谱柱时，需要仔细考虑这些因素以确保获得准确且可靠的分析结果。
色谱柱基础知识的总结
色谱柱基础知识的总结色谱柱是色谱分析中的重要工具，它是用来分离混合物中不同化合物的设备。
色谱柱的选择和使用对于色谱分析结果的准确性和灵敏度起着至关重要的作用。
下面将对色谱柱的基础知识进行总结。
色谱柱的种类主要包括气相色谱柱（GC柱）和液相色谱柱（LC柱）。
GC柱使得样品在高温下蒸发成为气态，然后通过柱子的分离效应进行分离。
LC柱是将可溶于液相的样品通过柱子的分离效应进行分离。
色谱柱的工作原理是样品分离的基础。
色谱柱的分离效应由固定填充物和流动相的选择决定。
固定填充物是色谱柱中的重要组成部分，分为填充型和包袋型。
填充型色谱柱常用的填充物有硅胶、氧化铝、氮化硅等。
填充型色谱柱适用于对极性物质的分离。
包袋型色谱柱通常是指薄层涂布型的液相色谱柱，常见的包袋型色谱柱有C18、C8、C4等。
包袋型色谱柱适用于对非极性以及中等极性物质的分离。
流动相的选择也是色谱柱分离效应的关键因素。
在GC柱中，通常使用气体作为流动相，常用的有氢气、氦气等。
在LC柱中，流动相一般是有机溶剂和缓冲液的混合物，常见的有甲醇、乙腈等。
流动相的选择要根据要分离的物质的属性，如极性、溶解度等进行合理选择，以提高分离效果。
色谱柱的选择要根据需要分离的物质的性质进行。
对于GC柱的选择，常见的指标有极性、温度范围、长度和内径等。
相对于液相色谱柱，GC柱的选择范围较窄，通常根据物质的极性选择合适的GC柱。
液相色谱柱的选择相对较为复杂，常见的指标有固定相类型、粒径、孔径、长度和内径等。
固定相的选择要根据样品的性质进行，如极性的物质选择极性固定相，非极性物质选择非极性固定相。
粒径和孔径的选择会影响柱子的分离效果和分析时间。
总之，色谱柱是色谱分析中的重要工具，其选择和使用对于色谱分析结果至关重要。
合理选择柱子的类型和填充物，以及优化流动相的组成和条件，能够提高色谱分离效果和分析灵敏度。
同时，良好的色谱柱的使用与保养也是保证色谱分析质量的重要环节。
只有不断深入了解和熟悉色谱柱的基础知识，才能更好地进行色谱分析工作。
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1.仪器都有个梯度精度的参数指标，那这个参数的好坏是取决于泵和比例阀两个东西吗？还是还有别的影响？2.液相泵分为串联泵和并联泵，请问两种形式的泵有什么区别？各有什么优点？3.在检测四元比例阀是否漏液时,“将管路里吸入一小段气泡”是在一个管路里吸入气泡吗？如果是，那么另外三个管路的吸滤头是放在流动相中，还是提起来呢？4.如果没有那个压力曲线可查，在平常维护仪器时，是否应该检测四元比例阀是否漏液，多久一次？5.我的Agilent1200二元泵A泵前一段时间出口单向阀漏液，怀疑是压力过大顶坏了，换了一个单向阀，但是换完之后就是走梯度的时候在前几分钟的压力不稳，波动比较大，相应的色谱图也有一些问题，找工程师说是有盐析出，需要用长时间冲洗，但是效果一直不好，不得已只能走等度的样品了，想请你给点意见！6.二元高压梯度系统的阻尼器在泵后的三通后边，四元低压梯度系统的阻尼器在泵的两个柱塞杆之间阻尼器位置不同有什么影响呢?7.一时冲动，就去把入口单向阀给拆了，结果装不回来了，感觉那里面也没有什么太多的元件啊，就一个小铁圆柱，弹簧一个，一个小黑色橡胶垫圈，一个透明圆形垫片，怎么装回的时候就不能将两个部件密闭好呢？有没有单向阀的构件图片呢？8.泵头里的溶剂通过出口球阀压入第二个腔体中，此时第二个腔体吸收全部第一个腔体溶剂，然后打出一半？还是第二个腔体吸收一半，剩下的一半直接流到色谱柱里去了？9.用混合有机相（乙腈：甲醇）的时候，二元高压泵混合器以及出口单向阀那里经常堵，随着实验时间延长，压力也越来越高。
所以不得不用了一段时间就拆下来超声清洗。
这个可能是什么原因导致压力升高？还有使用的此流动相，柱子的寿命明显就缩短了【用的是乙腈甲醇混合有机相，磷酸水（添加三乙胺）】，是不是这样的流动相容易导致填料的流失或结构的破坏？10. 蠕动泵清洗时，只是清洗泵的柱塞杆，还是对单向阀也有清洗作用？11.您说了，高压有利于溶剂的混合，那么低压四元梯度，如何有效保证溶剂的混合？不知道混合池的结果怎么样？12.Waters、安捷伦、岛津您能就三种品牌的泵、单向阀等构造做下简介和对比说明吗？他们的优势都在那里？13.目前市场上关于安捷伦，沃特斯，岛津的液相色谱卖的最多，在泵的性能上，各个厂家有都在宣传彩页上写的非常好，以前记得有一句话：岛津的检测器，安捷伦的柱子，沃特斯的泵！但是现在好像沃特斯的泵的指标在三个厂家中最差，是不是现在安捷伦和岛津泵比沃特斯的好啊？而且三个厂家的泵的主要特点及内部材质有何不同？14.四元梯度，日常用A和D，那么B和C长时间闲置，该如何维护保养?放在甲醇溶剂里，会不会对系统有影响?放在空瓶里，管路有气泡会不会影响到其他两路?15.您讲座里提到的压力曲线，我们几乎从来没有调用过，要怎么调出来？16.我们的是WATERS的，那个四元比例阀的地方一直有液体漏出来，流动相是缓冲盐，是不是结晶了还是那个弹簧坏了啊。
要怎么维护啊，工程师说要用热水冲洗。
要不要拆开看看啊?17.有根柱子的柱压过大，反接冲洗后效果也不明显，还有其他的方法吗？18.我们那个老仪器比例阀经常出现漏液，有什么好的办法可以解决？是不是因为拆卸次数多了引起的呢？还有那个曲线是不是需要经常做？19.aligent1100在线脱气，有机相一切正常，水相当流速为0.8ml/min时压力稳定，大于0.8压力出现倒峰，压力波动在9bar左右，啥地方出了问题？20.泵和比例阀可算液相的核心部件吧？是不是出现故障的几率比较大？21.我的同事们在配制流动相（乙腈、甲醇等）时很少过滤，虽然我们过滤的泵和滤膜都是现成的，我问起来，他们就说用的试剂都是色谱级的就不用过滤了。
请问这样可以吗？22.A的1120梯度泵是双泵还是单泵啊，好像是2元的低压单泵吧，那低压泵和高压泵，对样品测定的影响有多大差别？那双倍的钱花的值吗？那2元梯度的没低压的吗？23.在泵的保养和维护过程中一般注意什么？24.在泵长时间不使用时，泵内需装什么液体已保持清洁（除了乙腈和甲醇还有别的溶剂吗？例如异丙醇水或甲醇水，好像异丙醇水的粘度比较大啊）25.泵如长时间不用最好多久开机一次已保证以后使用状态良好?26.泵不用的时候泵里面不是要充满一些溶剂吗?用异丙醇水可以吗？会不会生锈？27.今天注意到岛津10A 与20A的泵，单向阀上有些差别，还请pandora98老师解说下这两中单向阀不同的设计。
28.如果在在线中没有选择压力曲线，在离线中还能调出来吗？系统会自动保存吗？29.当开机自检通过后，没有开灯，为什么会有吸收？而且随着时间，一直在走？30.四元比例阀,进入阀前各通道都正常,从比例阀出来后中间的管路里有气泡,出现这种情况的原因,怎么解决?只能更换比例阀吗?31.AGILENT LC-1200仪器，更换泵的过滤头（白头）后，总是安装不到位，排液口朝上，需好几次才能装好，有什么巧门可以一次安装到位?32.我最近刚刚把液相色谱由等度换成梯度的，可是自从换成梯度的跑空白怎么都有峰，这些峰一般都是在改变流动相配比时产生，怎么改变梯度都不行，改变流动相也不行，换成进口溶剂也不行，换成新的柱子也不行，怎么冲洗系统还是有峰，也不知道是什么原因了?[ Last edit by emoc98311]老多_小多∙技术∙财富∙∙个人资料加为好友∙给他留言帖子合集板凳只看作者回复于：2009-7-7 20:58:05回复本贴回复主题编辑举报管理第一部分：泵与比例阀的结构与工作原理1. 单向阀单向阀一般由阀体、阀座和红宝石球组成，在压力的作用下宝石球离开阀座，流动相流过单向阀，反之，在反向力的作用下宝石球回到阀座上，此时流动相不能流过。
显然宝石球与阀座之间的配合必须非常适合才能防止流动相的泄漏，为了保证单向阀不发生泄漏，Agilent1 200的出口单向阀中安装了两套宝石球和阀座，入口单向阀阀芯是将宝石球用一个合适的弹簧压在阀座上，用电磁阀通过程序主动控制宝石球的位置，进而控制入口单向阀的开闭，并且为了降低成本和节省维护费用，采用了可置换式的卡套式单元件。
单向阀是实现泵体功能的关键部件，平时出问题最多，使用维护起来也格外需要注意。
Agi lent 1200的入口单向阀是主动电磁阀，配备一个阀芯。
如图：从入口主动电磁阀的底部看，中间有一个带火漆的内六角螺钉，这个螺钉是出厂前校定好的，改变螺钉的位置会导致阀体内磁芯冲程的改变，进而改变泵的实际流速，或者导致磁芯上密封膜片被击穿或阀芯损坏。
阀底四角有四个内六角螺钉，拆掉四个螺钉，取下阀体，阀体内是一个空腔，里边有一个磁芯压在空腔内的弹簧上，磁芯另一端有一段柱状突起，正好可以插到正方形塑料片中间的圆孔上，圆孔中间有一个黑色的垫片，取下正方形的黑色塑料板，黑色垫片下压着一个圆形的透明膜片，这个透明膜片起密封作用，膜片下是一个顶针插在孔里，顶针一直伸到电磁阀状阀芯的凹孔内。
将阀芯用合适的塑料杆从阀芯上部（直径大的一端）对准金色的膜片部位用力往下慢慢顶开（尽量不要划伤金色的膜），阀芯尾部顶出来的依次为：半透明的阀座、宝石球和弹簧，留在阀芯外套里的是不透明的塑料套管，弹簧和宝石球就在套管内运动。
阀芯装到阀体上去的时候顶针插在阀芯尾部阀座上的小孔里，顶在宝石球上，装好后宝石球被顶针顶着，离开阀座，阀芯里的弹簧被压缩，此时电磁阀芯处于打开的状态，流动相可以通过；通电时线圈产生磁场，将阀体内部的磁芯以及顶针吸回去，阀芯里的宝石球在弹簧的作用下落在阀座上，封闭阀座中心的流动相入口，此时电磁阀芯处于闭合状态，流动相不能通过。
常见的电磁阀芯一共有两种，如图所示：图中下方左边纯白色的是普通的阀芯，阀芯外壳整体为塑料结构，主要是二元高压梯度系统和四元低压梯度系统使用；下方右边底部深色的是耐压的阀芯，阀芯尾部塑料壳改为金属结构，主要是快速液相使用，和普通的阀芯主要区别在于其阀座上有金属箍，耐压能力大大提高了，估计新出的1290也是这种阀芯或者更好的。
出口单向阀如图所示：出口单向阀内部结构比入口主动阀阀芯结构稍微复杂一点，但其原理都一样，通过宝石球和阀座来达到密封的效果，只允许液体单向流动。
我一共见过三种1200的出口单向阀，分别是四元梯度系统的――外边有黑色套圈，二元梯度系统的――外边有白色透明塑料套圈，快速液相用的――外边有白色不透明塑料套圈。
三种出口单向阀内部结构大同小异，下图列出常见的两种：1200二元和四元系统使用的普通的出口单向阀外壳都一样，用螺纹扣紧固，快速液相的从底部直接扣压，没有螺纹。
普通的出口单向阀用扳手拧开螺纹扣帽以后，露出里边的螺钉，螺钉是中空结构，螺钉孔里由外到里依次是：盖帽状的膜片、柱状金属坠、宝石球、陶瓷套管、膜片、阀座、膜片、柱状金属坠、宝石球、陶瓷套管、膜片、阀座，快速液相的单向阀是从反方向直接打开，内部的零件顺序正好相反，所以前两种拆开以后装回去的时候有一定难度，拧的太紧，阀座容易压裂，太松了可能会漏液，所以不建议大家拿好的单向阀拆开来研究，快速液相的阀座上有金属箍，且压扣上有胶垫，保证出口阀既耐压又不会因为阀座裂开漏液。
1200出口单向阀采用了两套宝石球和阀座串联的结构，一个阀座配一个套管，阀座和套管之间有垫片密封，套管中有宝石球和柱状金属坠，泵在静止和吸液时，宝石球在金属坠和自身重力的作用下落到阀座上，出口单向阀处于关闭状态，流动相不能通过，泵在排液时，由于入口阀关闭，泵腔内压力将宝石球和金属坠推开，出口单向阀处于打开状态，流动相流过单向阀。
两套宝石球和阀座串联，在出口单向阀密封时起到了双重保护的最用。
另外宝石球上的圆柱体金属坠一端有缺口，装的时候有缺口的一端不接触宝石球，这点一定要注意，这是为了避免宝石球被顶开时柱状的金属坠被推上去以后堵住陶瓷套管上端的液体出口，第一个金属坠上是第二个阀座，第二个上边是单向阀出口。
[ Last edit by emoc98311]老多_小多∙技术∙财富∙∙个人资料加为好友给他留言帖子合集3# 只看作者回复于：2009-7-7 20:58:13回复本贴回复主题编辑举报管理2. 泵几元泵就是能控制几个流动相通路，二元泵有两个流动相通路，能同时使用两种流动相，四元泵有四个流动相通路，能同时使用四种流动相。
最初的液相都是单元泵，通过柱塞杆的往复运动配合入口和出口单向阀的使用来实现流动相的定向输送，流动相只能手动配制混合，不能运行梯度。
二元高压梯度系统解决了单元泵需要手动混合流动相的问题，并且能够运行梯度，调节洗脱强度，但是需要两个泵，仪器成本大大的增加了。
四元低压梯度系统用一个泵配合一个四元比例阀实现了四个流动相通路运行梯度的需要，并且降低了仪器的成本和仪器使用维护的费用。
常见的液相泵有凸轮和齿轮两种柱塞杆驱动方式，1200使用的是齿轮驱动，每个泵里有两个柱塞杆，一个入口主动电磁阀，一个出口单向阀。