离心技术2015.9
离心技术
离心技术离心技术是根据颗粒在匀迷圆周运动时受到一个外向的离心力的行为发展起来的一种分离分析技术。
1．用于工业生产的，如化工、制药、食品等工业大型制备用的离心技术，转速都在每分钟5000转以下。
2．用于生物、医学、化学等实验室分析研究的，转速从每分钟几千到几万转以上，此类技术的使用目的在于分离和纯化样品，以及对纯化样品的有关性能进行研究。
一、基本原理1．离心力Centrifugal force (F)F=mω2rω：旋转角速度(弧度／秒) r:旋转体离旋转轴的距离(cm)m：颗粒质量2．相对离心力Relative centrifugal force (RCF)RCF 就是实际离心力转化为重力加速度的倍数RCF=F离心力／F重力= mω2r/mg= ω2r/gg为重力加速度(980．70g/sec2)同为转于旋转一周等于2π弧度，因此转子的角速度以每分钟旋转的次数(每分钟转数n 或r/min)表示：一般情况下，低速离心时常以r／min来表示，高速离心时则以g(或数字Xg)表示。
用“X g”表示每分钟转速可以真实反映颗粒在离心管不同位置的离心力。
Dole&Cotzias 制作了转子速度和半径相对应的离心力列线图(图2—15)。
3．沉降系数Sedimentation coefficient (S)当转子内样品绕着旋转轴离心时，样品沉降率是由样品颗粒的大小、形状、密度和溶剂的粘度、密度以及离心加速度决定的，在一般情况下，样品的沉降特征可以用沉降系数来表示：S：是指单位离心场中粒子移动的速度。
S的物理意义是颗粒在离心力作用下从静止状态到达等速运动所经过的时间。
S在实际应用时常在10-13秒左右，故把沉降系数10-13秒称为一个Svedberg单位，简写S，单位为秒，1S二1×10-13秒。
对一定的样品，在一定的介质中，样品沉降系数S 也常保持不变。
文献中常用沉降系数以描述某些生物大分子或亚细胞器大小。
离心技术
水溶性大 性质稳定 渗透压较高 最高密度可达1.33g/ml, 价格低 容易制备, 常用于细胞器、病毒、RNA分离的梯度材料 有较大的渗透压,不宜用于细胞的分离。
2.聚蔗糖: Ficoll
velocity centrifugation)
利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别, 在同一离心条件下,沉降速度不同,通过不断增 加相对离心力,使一个非均匀混合液内的大小、 形状不同的粒子分部沉淀。 操作过程中一般是在离心后倾倒的办法把 上清液与沉淀分开,然后将上清液加高转速离 心,分离出第二部分沉淀,如此往复加高转速, 逐级分离出所需要的物质。
温度控制是由安装在转头下面的红外线射量 感受器直接并连续监测离心腔的温度，以保 证更准确更灵敏的温度调控，这种红外线温 控比高速离心机的热电偶控制装置更敏感， 更准确。
超速离心机装有真空系统，当速度在40000 rpm以上时，由磨擦产生的热量就成为严重问 题，为此，将离心腔密封，并由机械泵和扩 散泵串联工作的真空泵系统抽成真空，温度 的变化容易控制，磨擦力很小，这样才能达 到所需的超高转速。
rav=( rmin＋rmax) / 2
在离心管的不同部位距旋转中心轴的距 离也不同,那么在一定的转速下其RCF值也各 不相同
设40000rpm时 R1最小、 3.8cm R2平均、 5.9cm R3最大、 8.1cm RCF值分别 67,910g 105,400g 144,700g
R1 R2 R3
超速冰冻离 心机 2.5-8万或更 高
20
高速冰冻离心机
台式高速离心机
BECKMAN Avanti J-20XPI冷冻高速离心机
二、离心机的结构
１、转动装置 ２、离心转头 ３、离心管 4、 温度控制和制冷系统 5、 真空系统 6、 离心室 7、 安全监测系统
超现代实验技术：离心技术
超速离心技术超速离心技术是利用物质的沉降系数、浮力、质量等方面的差异，利用强大的离心力场，使样品中的混合物得以分离、浓缩、纯化和鉴定的技术。
离心技术现在已经成为分子生物学和生物化学研究中不可缺少的一项重要技术。
离心技术可分为制备型和分析型两类。
在生物学领域可以利用这种方法，分离提取各种细胞及其亚细胞物质，如细胞膜、细胞核、染色体、线粒体、叶绿体、溶酶体、核蛋白体等。
也可以鉴定蛋白质、酶及核酸的纯度。
处理的样品可多可少，少至0.2mL以下。
离心技术的范围相当广泛。
目前，利用这种技术分离各种亚细胞物质、酶、病毒、质粒及各种核酸。
因此，为分子生物学、生物化学和医学的发展，提供了有利的手段。
自从1926年瑞典物理学家Svedberg制成世界上第一台超速离心机（45000转/分）到现在已有快80年的历史，在这期间，离心机的发展是非常迅速的。
特别是在50年代以后发展的更快，例如，美国贝克曼（Beckman）公司和杜邦苏凡尔（Dupont Sorvall）公司，英国测量科学设备公司（MSE），日本的日立（HITACHI）公司以及德国的海吕斯（Heraeus）公司，都生产出各种离心机产品，如普通离心机、高速离心机和超速离心机。
从简单的低速高容量的制备离心机到用于精密分析的超速离心机，应有尽有。
美国贝克（Beckman）公司的超速离心机居世界领先地位，采用了大规模集成电路，计算机程序控制，分离-检测，全部实现自动化；最高转速可达13多万转/分钟，并配有各种型号的垂直转头、水平转头、固定角转头、区带转头、连续转头等，供用户选用，不但操作简单、节省时间，而且进一步提高了的分离效率。
此外，离心技术也有了很大的发展，有密度梯度离心技术和区带离心技术，为生物大分子的分离、纯化和鉴定提供了优越的手段。
虽然离心机的种类有多种，离心技术也多种多样，但是它们的工作原理基本相似。
在实际工作中用的最多的还是制备型离心。
本课程主要介绍制备型分离技术。
离心技术
五、离心机使用注意事项 使用前应将负荷平衡， 1. 使用前应将负荷平衡 ， 重量误差越小 越好 严禁空转， 2. 严禁空转，启动时转速由低至高逐步 调节，严格高速启动。 调节，严格高速启动。 选择合适的转头，控制转速。 3. 选择合适的转头，控制转速。 保护转头，防止碰撞、擦伤、 4. 保护转头，防止碰撞、擦伤、防止异 污垢进入、用毕立即清洁。 物、污垢进入、用毕立即清洁。 低温离心样品时, 5. 低温离心样品时 , 先将空转头预冷一 定时间。温度± 定时间。温度±0℃。 发现异常如噪声，应立即停机检查。 6. 发现异常如噪声，应立即停机检查。 离心机结构及使用方法——实习 六、离心机结构及使用方法 实习 离心机的应用——自学 七、离心机的应用 自学
2、离心机的分类 ：按离心机应用范围分为四类： 、 离心机的分类：按离心机应用范围分为四类： 普通离心机、专用离心机、制备离心机和分析用离心机， 普通离心机、专用离心机、制备离心机和分析用离心机， 按离心速度即离心机转速分为： 按离心速度即离心机转速分为： 普通离心机：转速小于5000转/min，在室温下运 ① 普通离心机：转速小于 转 ， 主要用于红细胞，微生物细胞，粗大沉淀物， 行，主要用于红细胞，微生物细胞，粗大沉淀物，细胞 细胞膜等的沉淀分离。 核、细胞膜等的沉淀分离。 高速离心机：转速为5000～20000转/min，通常 ② 高速离心机：转速为 ～ 转 ， 备有致冷和温控装置。适用于各种生物细胞、病毒、 备有致冷和温控装置。适用于各种生物细胞、病毒、血 清蛋白等有机物、无机物溶液， 清蛋白等有机物、无机物溶液，悬浮液及胶体溶液等样 品的分离，浓缩、提取制备工作。 品的分离，浓缩、提取制备工作。它是细胞和分子生物 水平研究的基本工具。 水平研究的基本工具。 ③ 超 速 离 心 机 ： 转 速 为 20000 ～ 90000 转 /min 。 Ultrcentrifuge因它能产生超强的离心力场而达到独特的 因它能产生超强的离心力场而达到独特的 分离纯化目的。它是分离、纯化、分析、 分离纯化目的。它是分离、纯化、分析、鉴定生物大分 子的重要技术手段 。 如 DNA/RNA 杂交分子的分离 ， HDL的分离。 的分离。 的分离
离心技术的原理及应用
离心技术的原理及应用1. 离心技术的概述离心技术是一种以离心力为基础的分离过程，通过利用离心力将混合物的不同组分分离出来。
离心技术被广泛应用于生物化学、制药、环保、食品加工等领域，可用于固体颗粒的分离、液相溶液的分离、精炼和浓缩等。
2. 离心技术的原理离心技术的原理基于离心力的作用。
离心力是由于转动物体的离心力产生的一种力。
物体在离心力作用下，会被推向物体固定轴线的外侧，形成离心效应，使得混合物的不同组分被分离开来。
离心技术通常通过离心机实现。
离心机的核心部件是转子，可以用来容纳试样。
转子围绕着离心机轴线高速旋转，产生强大的离心力，使得试样中的不同组分被分离开来。
3. 离心技术的应用离心技术在各个领域都有广泛的应用，下面列举了其中几个常见的应用：3.1 生物化学领域•分离DNA / RNA：离心技术可以用于从细胞中分离出DNA或RNA，用于基因测序、基因工程等领域的研究。
•分离蛋白质：离心技术可以用于从混合的生物样本中分离出特定的蛋白质，用于进一步的分析和研究。
3.2 制药领域•药物纯化：离心技术可以用于从化学合成或发酵得到的混合药物中分离出纯的活性成分。
•药物制剂：离心技术可以用于将固体颗粒与液体分离，制备出药物颗粒或胶体。
3.3 环保领域•污水处理：离心技术可以用于将污水中的固体颗粒与液体分离，提高水质。
•垃圾处理：离心技术可以用于将垃圾中的有机物与无机物分离，实现垃圾的资源化利用。
3.4 食品加工领域•榨汁：离心技术可以用于将水果中的果汁与果渣分离，制作果汁。
•提取物质：离心技术可以用于从食材中提取有营养或有药用价值的物质，用于食品加工。
4. 离心技术的优点•分离效果好：离心技术可以将混合物中的不同组分快速、高效地分离出来。
•操作简单：离心技术的操作相对简单，不需要复杂的设备和步骤。
•适用性广：离心技术可以适用于多种样本类型和领域，具有广泛的应用性。
5. 离心技术的局限性•样品量有限：离心技术的样品容量一般有限制，不适合处理大量的样品。
离心技术原理
离心技术原理
离心技术是一种常用的分离方法，它基于物质在离心力作用下的不同沉降速度来实现分离目的。
离心技术的原理主要涉及两个方面：离心力和沉降速度。
首先，离心技术利用离心机产生的离心力来加速分离物质。
离心机通常由一个旋转的容器和一个电动机组成。
当电动机启动时，容器以高速旋转。
由于离心力是与旋转速度的平方成正比的，因此高速旋转能够产生强大的离心力。
离心力是指物体在旋转运动中受到的离心加速度，它的作用是将物质向外推离离心轴线。
离心机的设计目的是使离心力尽可能均匀地作用于容器内的物质，以实现有效的分离效果。
其次，离心技术利用不同物质的沉降速度来实现分离。
沉降速度是指物质在液体中下沉的速度，它取决于物质的密度、形状和粒径等因素。
在离心过程中，由于离心力的作用，密度较大或较大颗粒的物质会沉降得更快，而密度较小或较小颗粒的物质则沉降得较慢。
通过调整离心机的转速和离心时间，可以控制不同物质的沉降速度，从而实现物质的分离。
总之，离心技术利用离心力和物质的沉降速度来实现分离。
离心机通过旋转产生离心力，将物质分离为不同的组分，使得密度大的物质向外沉降，密度小的物质留在上层。
离心技术在生物医学、化学、环境等领域具有广泛的应用，例如可用于细胞分离、DNA提取、蛋白质纯化等。
离心技术
一、基本原理
沉降-扩散平衡： 沉降-扩散平衡： 利用沉降-扩散协同作用可将不同质量的物质分开； 利用沉降-扩散协同作用可将不同质量的物质分开；
自然条件下的沉降是由重力场作用，重力场强度有限， 自然条件下的沉降是由重力场作用 ， 重力场强度有限 ， 当 质量小到一定程度时，沉降速度<<扩散速度， <<扩散速度 质量小到一定程度时，沉降速度<<扩散速度，微粒就不能沉 降分离。 降分离。 离心：借助高速旋转产生比重力场更大的离心力场, 离心：借助高速旋转产生比重力场更大的离心力场,加大沉 淀作用，使更小的微粒也能沉淀。 淀作用，使更小的微粒也能沉淀。 离心力场的优点: 离心力场的优点 *远大于重力场 远大于重力场 *可调节大小 可调节大小
水平转头
垂直转头
o转头停止和运动时， 转头停止和运动时， 离心管都是呈垂直放 置的， 置的，适合用于密度 梯度离心。 梯度离心。 o特点；离心结束时， 特点；离心结束时， 液面和样品区带要作 九十度转向， 九十度转向，因而降 速要慢。 速要慢。介由于样品 颗粒沉降距离最短， 颗粒沉降距离最短， 离心所需时间也短。 离心所需时间也短。
第二节 制备离心技术
（一）差速离心法
1Hale Waihona Puke 差速离心法：逐渐增加离心速度, 或低速与高速交替进行离心，使沉降系数 差速离心法：逐渐增加离心速度, 或低速与高速交替进行离心， 不同的颗粒在不同速度或不同离心时间下分离的方法。 不同的颗粒在不同速度或不同离心时间下分离的方法。 2、特点：离心介质的浓度均一；离心速度改变 特点：离心介质的浓度均一； 3、用途：用于分离大小相差10S的样品颗粒的初步分离 用途：用于分离大小相差10S 4、优点：操作容易，通过倾倒就可将上清液和 优点：操作容易， 沉淀分离，而且可用大容量的角转子。 沉淀分离，而且可用大容量的角转子。 • 缺点：需经多次离心，沉淀不纯，分离效果差， 缺点：需经多次离心，沉淀不纯，分离效果差， 沉淀大量堆集在离心管底部， 沉淀大量堆集在离心管底部，颗粒受挤压 易失活。 易失活。 5、应用中的主要问题：离心时间和离心速度的选择 、应用中的主要问题：
第九章 离心技术
ω 是指该转头的最大允许角速度
S，T 和K之间的关系
K 最高转数 T =--------------- x (----------------)2 S 实际转数
二. 离心设备 离心机
转子 离心管 附件
（一）.离心机(Centrifugel) 1.低速离心机 转子 电动机
转子带有放置离心管的孔 转子的中央位于离心机的驱动轴上 离心机的转速和温度控制不够准确 一般最高转速在6,000rpm以下 实验室中常用于分离制备。
离心技术的基本目的
1.最大程度地富集目的颗粒。 2.最大程度地减少非目的颗粒。
问题是在同一离心力作用下,所有的颗粒均会以 不同的速度沉淀。如何能够有效的达到上述的 基本目的，这就是我们要考虑和必须回答的问 题。
3.沉降系数 Sedimentation icient (S) 样品沉降率 样品颗粒的大小 形状 密度 溶剂的粘度、密度 离心加速度
若用 ω=
2πn (rad/sec) 60
(2πn/60)2
RCF= x r 980.7 =1.118×10-5 n2 r n：转子每分钟的转数(rpm)
影响离心力的两大因素
1. 离心机转数（rpm） 2. 离心半径（r ）
换用不同型号的离心机时，你不能只考虑 离心机转数而忽视离心机半径。不同型号 和半径的离心机在相同转数时会产生大小 不同的离心力，也就会产生不同的离心效 果。
澄清时间（T值）--2
1 Lnrt - Lnr0 t1-t0 = ---- x ---------------S
ω2
澄清时间与颗粒的沉淀系数S成反比， 与离心机的重要参数（ Lnrt - Lnr0） /ω2成正比，即与所使用的离心机或 使用的转头有关。
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例：沉降某颗粒需10000g.min 10000g 1min
2000g
5min
离心分离首先需要知道的3要素
颗粒的沉降系数
加在颗粒上的相对离心力
离心时间
二.离心设备：离心机及离心管
3.离心腔
（真空设备） 1. 转头 2.控制系统 （马达）
4.温度控制 （冷却设备）
离心机分类
制备型、分析型；
低速：6800g(细胞级） 分离>10000S的细胞及细胞器 如：Beckman公司的J6，GS-6 高速：17,700－50,400g（亚 细胞级） 分离 >100S的颗粒，包括部分 细胞器及病毒, 如：Beckman 公司的J2 超速：90,400－694,000g（分 子级）离<100S的颗粒, 如：Beckman公司的L,XL
上清
上清
上清
上清
大小颗粒混合物
最大颗粒
较大颗粒
中等颗粒
小颗粒
用途： 分离大小相差悬殊的细胞和细胞结构成分。
特点： 介质密度均一；
速度由低向高，逐级离心；
操作简单； 分离纯度不高。
密度梯度离心法
离心介质有密度梯度
s= 2r2(p- m) 9
理想的离心介质
可自行配制的：蔗糖、
商品化的：Ficoll, Percoll, Accudenz (Nycodenz),
溶酶体、过氧化物酶体、高尔基膜、大的高密度小泡 细胞膜、高尔基体、内体等
差速离心需要的设备
离心机：低速、高速、超高速
转头：
固定角、垂直或水平
介质：
蔗糖
密度梯度离心
梯度离心需要的设备
离心机：低速、高速、超高速
转头：
介质：
水平、固定角、垂直 Metrizoate
蔗糖、Ficoll, Percoll, Accudenz (Nycodenz),
3.等密度梯度离心法
（isodensity centrifugation)
原理：
离心时采用包括各种颗粒密度范围的梯度介质，被分离 颗粒达到与其相同的密度介质时不再移动，形成一系列 区带，然后从管底收集。
s=
2r2(p- m) 9
用途： 分离密度不等的颗粒,适用于病毒、DNA、RNA、 蛋白质等，效果只与颗粒密度有关，与大小无关。 特点： 密度较高介质，陡度大，介质的最高密度应 大于被分离组分的最大密度( p< m ) 。 所需的力场通常比速率沉降法大10~100倍， 往往需要高速或超速离心。
溶液（细胞结构成分）：颗粒溶液、大小、密度特性
设备：
离心机、离心介质
3个因素： 沉降系数 相对离心力
离心时间
1.沉降系数（S）：重要指标
颗粒在单位离心力的作用下的移动速度
s(秒）=
dx/dt
w2x
=
2r2(p- m)
9
r: 颗粒直径
dx: 颗粒与转轴中心的距离
dt：颗粒沉降所需时间
W: 角速度 X: 转子半径
常温、低温；
台式、立式； 低速、高速、超速
OptimaTM L-XP（Beckman Coulter)
制备型超速离心机
Max RPM Max Force (x g) 100000 802400
1.离心机转头:离心技术的核心
性能指标： (1) 离心力：能达到的RCF；
(2) 离心效力：K因子：k值越小，离心时间越
6.举例:线粒体分离
原理： 线粒体特征：体积较大，沉降系数较大； 类似大小的细胞器较多，但密度有差别。
分离设计：
• 细胞破碎（机械匀浆） • 差速离心，必要时密度梯度离心
（1）从大鼠肝脏组织中制备线粒体
细胞破碎：匀浆缓冲液（MS缓冲液，等渗） ：0.21M甘露糖
5mM Tris-HCl pH7.5, 70mM 蔗糖, 1mM EDTA
转头损坏及原因
金属疲劳
转子内部的应力改变导致裂纹 注意：安全系数>2；钛合金；转头寿命
超速
测速盘（超速花盘）
化学腐蚀
离心管破裂、样品渗漏
转头不平衡
离心管平衡误差0.01g；离心管放置不对称；水平转 头吊桶盖安装不当；转头不加盖；“O“形密封圈失效
离心管帽、垫圈、接合器使用不当
三.离心方法
根据离心介质有无梯度：
长
分 离 纯 度
高
水平转头
Beckman 公司转头的标记
SW: 水平转头,如SW50.1；
V：
垂直转头,如V Ti80；
NVT: 近垂直转头； Type: 固定角转头,如Type80Ti JA: JS: 使用在J系列的固定角转头，如JA.2 使用在J系列的水平转头，如JS.13.1
数字：最高安全转速（×1000）； Ti: 钛合金，未标记为铝合金
From “Current protocols in cell biology”
四.细胞结构成分的分离
1. 细胞沉淀
2.细胞破碎 3.细胞结构成分的分离－离心技术 4.分离细胞器的鉴定和评价 5.举例：线粒体分离、细胞核分离(略）
1.细胞沉淀（cell pellet)
1. 介质密度为1g/ml;
p : 颗粒密度
m : 溶液介质密度
： 溶液介质粘度 1S=1×10-13s
决定沉降速度的因素：
与颗粒大小有关；与颗粒密度有关；
与溶液介质密度和粘度有关。
密 度
沉降系数
2.相对离心力（RCF）：重要指标
离心分离时，作用在悬浮颗粒上的力常用RCF数值表 示，即同一颗粒在离心时的离心力同地球重力相比 较后得到的值。
细胞膜
5’-核苷酸酶、Na/K-ATP酶
6.举例:细胞核分离
原理：
细胞核特征：体积大，沉降系数大；
密度高，可通过浓蔗糖，分离容易。 分离设计： • 细胞破碎（机械匀浆，渗透溶胀，表面活性剂），
释放细胞核，光镜鉴定释放效果。
• 离心，光镜鉴定分离效果
从组织中制备细胞核 细胞破碎：裂解缓冲液：0.25M蔗糖，
Potter-Elvehjem或Dounce匀浆器/松型槌；
（时间长，纯度高）
5.分离细胞器的鉴定和评价
（1）形态鉴定：光镜或电镜 （2）生化分析：细胞器特异的标志酶
(2)生化分析：细胞器特异的标志酶
细胞器
细胞核
标志酶
NAD合成酶、DNA聚合酶
线粒体
溶酶体 过氧化物酶体 内质网 高尔基体
细胞色素氧化酶、琥珀酸脱氢酶、单胺氧化酶
酸性磷酸酶、－半乳糖苷酶 过氧化氢酶、尿酸氧化酶 葡萄糖-6-磷酸酶、细胞色素P450 －半乳糖苷转移酶
细胞结构成分分离的离心技术
一.离心技术原理 二.离心设备 三.离心方法 四.细胞结构成分的分离
离心技术发展和细胞器分离
1938 Behrens nuclei and cytoplasm from liver cells (differential centrifugation) 1951 Brakke 1954 De Duve plant virus (density-gradient centrifugation ) lysosomes, peroxisomes
10mM Tris-HCl pH7.4, 10mM NaCl （低渗）, 3mM MgCl2,
1mM DTT, 0.5mM PMSF。
组织研磨器；
肝脏组织切成1cm3小块，装入缓冲液中，倒入研磨器
离心：
浓蔗糖溶液：2M蔗糖
组织匀浆产物和浓蔗糖溶液等体积混合
23 000g， 30min， 4°C(白色沉淀)，水平转头(SW)
介质的梯度形成装置和收集装置
4.离心方法的选择
根据分离细胞器的性质：
匀浆物中各类细胞器大小不同：
差速离心
上清中各类细胞器大小有差别：
速率区带离心
上清中各类细胞器密度有差别：
等密度离心
4.离心方法的选择
根据研究目的： 分析分离：差速离心
（时间短；介质浓度低，对细胞结构成分损伤小） 制备分离：密度梯度离心
细 胞 培 养 和 离 心 技 术
细胞结构成分分离的离心技术
Subcellular fractionation
一.离心技术原理
二.离心设备
三.离心方法
四.细胞结构成分的分离（略）
一.离心技术原理 （Centrifuge)
利用溶液中颗粒密度、大小等特性，用旋转产生的离心 力使不同特性颗粒从溶液中分离并沉降，从而达到分离、 浓缩、提纯和鉴定的目的，称为离心技术。
介质 密度 逐渐 增高
s=
2r2(p- m) 9
用途： 分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。 分离效果只与颗粒大小有关，与密度无关。 特点： 密度梯度介质，且密度较低， 介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最 小密度( p> m )。
s=
2r2(p- m) 9
离心时间(t)，不能使所有颗粒都沉到管底。
差速离心
差速离心形成的沉淀（肝脏）
沉淀
P1
P2 P3 P4 P5 P6
RCF×时间
1000g*10min
3000g*10min 6000g*10min 10，000g*10min 20，000g*10min 100，000g*10min
内容物
细胞核、重线粒体、大片细胞膜
重线粒体、细胞膜碎片 线粒体、溶酶体、过氧化物酶体、完整高尔基体 线粒体、溶酶体、过氧化物酶体、高尔基膜
2. 一般细菌和动物细胞密度为1.08-1.12g/ml,
病毒密度为1.18-1.31 g/ml。
3. 相对离心力 (g)和离心时间（min)决定沉降
材料 动物细胞 人红细胞 大小(m) 10-60 6- 8 离心条件(离心力，离心时间） 200-500g 500g 5-15min 5-15min