探索性实验课件--探索性实验动物使用指南
实验动物饲养管理和使用手册
实验动物饲养管理和使用手册第一节研究机构的政策和职责对于科研、测试和教学方面所用的动物，要求以有关动物所必需的知识以及有关科研、测试和教学计划的具体要求条件为基础，做出合乎科学和专业的判断，进行恰当的管理、使用，并以人道精神来对待。
本章所属的各项准则，目的就在于为各研究机构在制定有关动物的管理和使用的各项政策方面提供指导。
每一所研究机构都应建立一套动物管理和使用计划，并为之提供物力、财力。
这套计划须按本《手册》的规定进行操作，并须符合现行联邦、州和地方各级的法律和规章的要求，如《联邦动物福利法规》(AWRs，CFR，1985)和《公共卫生服务政策》中“以人道精神管理和使用实验动物”(PHS Polilcy，PHS，1996)。
为有效地实施本《手册》所提供的建议，还必须建立“研究机构的动物管理和使用委员会”(IACUC)以监督和评定该计划的执行情况。
指导计划执行的职责，一般都授予在实验动物科学和医学方面受过训练或具有经验的兽医人员或其他有资格的专业人员。
至少必须有1名对于实验动物科学和医学或对所用的动物种类具有受过全面训练的有资格的兽医人员参与计划制定。
研究机构负责保管有关IACUC各项活动的记录和实施职业保健和安全性计划。
一、实验动物管理和使用的监督研究机构的动物管理和使用委员会每所研究机构的最高负责人必须委任一个“研究机构的动物管理和使用委员会”(IACUC)(以下称委员会)，由其监督和评定研究机构有关动物的计划、操作程序和设施条件，以保证其符合本《手册》、《AWRs》和《PHS政策》的各项规定。
研究机构的职责，就是提出适宜的指导方针、背景材料，拨发相应的财力和物力，必要时可安排专门培训，以协助IACUC的成员了解和评定委员会所面临的各类问题。
委员会的组成，应包括下列成员：①1名兽医学博士，持有学位证书[参见附录B，“美国实验动物医学学会”(ACLAM)]，或在实验动物科学或医学方面，或在有关动物种类的使用方面受过培训或具有经验的兽医师。
医学细胞生物学探索性实验教学设计与应用
基金项目： 海军军医大学教学模式方法改革课题面上项目（ＪＹＰ２０２０Ｂ０４）作者简介： 汪超，男，１９８７－０８生，博士，讲师，Ｅ ｍａｉｌ：ｗａｎｇｃｈａｏｓｍｍｕ＠１２６．ｃｏｍ收稿日期： ２０２０－１２－２８医学细胞生物学探索性实验教学设计与应用汪 超，张竞予，李嘉言，张红霞，李文林，朱海英△ （海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室， 上海 ２００４３３；△通迅作者）摘要： 在医学细胞生物学实验课教学实践中，以个性化、高效率学习为教学目标，结合授课对象实际，采用学生自主设计为主、教师指导为辅的探索性实验教学方法。
教学手段上通过使用智慧树学习平台、数码互动显微成像系统等设备实现学生在实验过程中的自主性。
教学过程中增加实验条件的可选择性进而增强学生探索性体验。
该实验教学设计的主要目的是在达到实验课双基训练要求的同时，发挥实验课在培养学生科研思维、学习科研设计和形成科研规范中的作用。
文章以小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察实验为例介绍海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室的具体做法。
关键词： 医学细胞生物学； 实验教学； 教学改革； 探索性实验中图分类号： Ｑ２ 文献标志码： Ａ 文章编号： ２０９５－１４５０（２０２１）０２－００９８－０３ ＤＯＩ：１０．１３７５４／ｊ．ｉｓｓｎ２０９５－１４５０．２０２１．０２．０９ 实验课教学是高校教学体系的重要组成部分，实验课教学改革也是经常被讨论的话题。
大家普遍认同的观点是实验课对学生动手能力以及科研基本素质的培养有着不可替代的作用［１，２］。
从顶层设计层面，国家级的虚拟仿真实验项目的设立以及各高校教学实验中心的建设，目的都是从实验条件方面为学生的能力培养搭建更好的平台。
而建立在这些实验条件基础上的更加有效的授课设计是帮助学生逐步建立科研思维、学习科研设计和形成科研规范的重要环节。
目前，ＰＢＬ教学法、发现教学法、对分课堂、翻转课堂、自主性实验等多种教学方式在医学细胞生物学理论及实验教学中得以开展，其目的都是为了实现教学从重教授、重结果、重模式化向重学习、重过程、重个性化的转变［１－３］。
探索性实验(二)
药物研发
在药物研发过程中，探索 性实验可以帮助科学家发 现新的药物候选分子，并 研究其药理作用和机制。
在医学领域的应用
疾病机制研究
通过探索性实验，医学家可以研 究疾病的发病机制和病理过程， 为疾病的预防和治疗提供科学依
保护个人信息
在进行涉及个人信息的实验时，应确保个人信息的 安全和保密，避免泄露和滥用。
尊重知识产权
在使用他人的研究成果或数据时，应遵循知 识产权法规，确保合法使用和引用。
实验废弃物处理
分类处理废弃物
根据废弃物的性质和危害程度进行分类，并采取相应的处理措施 。
合理处置化学品
对于有毒有害的化学品，应按照相关规定进行安全处理和处置， 避免对环境和人员造成危害。
推断性统计分析
根据实验目的和数据特征，选择 适当的推断性统计分析方法，如 回归分析、方差分析、卡方分析 等，以揭示数据之间的内在联系 和规律。
结果解释与报告
解释实验结果
根据数据分析结果，对实验结果进行 解释，揭示实验变量之间的内在联系 和规律。
撰写实验报告
按照规范的格式和要求，撰写实验报 告，包括实验目的、方法、结果、结 论等部分，以便向其他研究人员或同 行进行交流和分享。
微生物培养
在生物学领域，探索性实 验常用于微生物培养和鉴 定，以研究微生物的生长 规律和代谢机制。
生态学研究
通过探索性实验，生态学 家可以模拟自然环境，研 究生物与环境之间的相互 作用和生态平衡。
在化学领域的应用
材料合成
通过探索性实验，化学家 可以合成新型材料，探索 其性质和应用前景。
反应机理研究
秋北师大八年级生物上册教学课件动物行为的研究PPTppt文档
2.弗里施对蜜蜂色觉的研究
弗 里 施
奥地利动物学家。 1886年11月20日生于维也纳, 1982年6月12日卒于慕尼黑。
如果相信蜜蜂是色盲，就等于承认花 卉的鲜艳色彩对蜜蜂并无吸引作用。 于是他用颜色卡片进行了一系列简单 的实验，证明了蜜蜂的确能分辨不同 的颜色。
3.廷伯根对银鸥幼雏求食行为的研究
秋北师大八年级生物上册教学课件动物行为的研究PPT
看看上面图片涉及动物 的什么行为？
1.初步学会用观察法研究一种常见小动物的行为。 2.学习并领会科学的研究方法，并将这些方法应用 到实践中。
重点探究
【活 动】三刺鱼的生殖行为
1.三刺鱼在繁殖季 节有什么样的行为 表现? 2.科学家是如何研 究三刺鱼生殖行为 的?
【思考与讨论】
你知道科学家们是怎样研究动物行为的吗？
探究主题 一 研究动物行为的案例
1.法布尔对昆虫的研究 法布尔是用观察法研究昆虫生 活的第一位科学家，他观察每一种 昆虫都花去大量的时间，如观察土 蜂20年、地胆过渡变态25年、隧蜂 30年、蜣螂(屎壳郎)40年，最后才 写成《昆虫记》。
蜣螂发现了一堆粪便后，便会用腿将部分粪便制成一个 球状，将其滚开。它会先把粪球藏起来，然后再吃掉。蜣螂 还以这种方式给它们的幼仔提供食物。一对正在繁殖的蜣螂 会把一个粪球藏起来，但是这时雌蜣螂会用土将粪球做成梨 状，并将自己的卵产在梨状球的颈部。幼虫孵出后，它们就 以粪球为食。等到粪球被吃光，它们已经长大为成年蜣螂， 破土而出了。
(4)本实验设计的不足之处是
实验蚂蚁数量太少或没有设置重复实验
。
业精于勤而荒于嬉，行成于思而毁于随。 ——韩愈
银鸥幼雏啄亲鸟的喙 求食的行为是由亲鸟 喙上的红斑引起的
探索性实验
纳洛酮和葛根素对乙醇中毒小鼠的催醒作用1、立题依据：中国酒文化有着悠久的历史，随着生活节奏加快，社会的进步，饮酒的人越来越多，随之因为饮酒过度导致酒精中毒的人也越来越多。
酒精中毒造成各个系统损害，因此及时解酒十分必要。
有文献表明解酒首选药纳洛酮联合氟马西尼有良好的解酒作用，而中药葛根也有解酒的功效，且中药有不良反应少的优点。
因此本实验主要探讨纳洛酮、葛根素及二者合用对乙醇中毒小鼠的解酒效果，旨在探寻更好的解酒方法。
2、实验方案：2.1实验动物：健康小白鼠40只，雌性各半, 18~22 g。
2.2实验药品与器材：盐酸纳洛酮注射液、葛根素注射液、50%无水乙醇、天平、1ml注射器及针头4套、小鼠笼、灌胃针头。
2.3实验步骤：（1）取体重18~22g的健康小白鼠40只，随机分为4组，每组10只: 生理盐水0. 1 m l/10 g组( NS 组)、纳洛酮2mg /kg组( A组)、葛根素2mg /kg 组( B组)、纳洛酮1mg /kg+葛根素1mg /kg组( C组)。
各组均按15m l/kg 体重灌胃给予50%无水乙醇。
（2）观察小白鼠的活动情况，待小鼠翻正反射消失后，NS 组腹腔注射生理盐水，A组腹腔注射2 mg /kg纳洛酮，B组腹腔注射1 mg /kg葛根素注射液，C组腹腔注射1mg /kg 纳洛酮后再腹腔注射1 mg /kg葛根素注射液。
观察小鼠翻正反射消失的持续时间即睡眠时间（单位：min）并记录入表1。
表1 不同药物对乙醇中毒小鼠的催醒作用组别睡眠时间（每组从第1到底10只依次记录）NS组A组B组C组2.4结果处理：采用统计学方法进行数据分析，计量资料用（ X±S）表示，实验结果各小组之间的比较均采用单因素方差分析和q检验，检验水准：α=0.05。
3、可行性分析：本实验的基本操作有小鼠捉拿、腹腔注射、灌胃等，比较简单易行，能计较顺利地完成，器材与药品也不多，若部分药品如葛根素注射液实验室未备有，可以去药店采购。
动物实验基本操作技术优秀课件
第二节 性别鉴定
一、大、小鼠的性别鉴定
二、兔的性别鉴定
Female
Male
第三节 年龄的大致判断
一、大、小鼠 1. 根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样）
日龄/d 1 3 4 5 8
外观形态特征 仔鼠裸体鲜红 耳壳露出表皮 脐带瘢痕脱落
能翻身 能爬行
日龄/d 10
9～11 13～15 18以后
年龄 2个月以下 2～4个月 4～6个月 6～10个月 1岁 2岁 3岁 4～5岁 6～8岁 9～10岁 10岁以上
犬齿更换和磨损情况 仅有乳齿(白、细、尖) 更换门齿 更换犬齿(白，牙尖圆钝) 更换臼齿 牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突 下门齿尖突部分磨乎 上、下门齿尖突大部分磨平 上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄 门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损 唇部、胡须发白 门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白
妊娠检查方法有
① 外部检查法 ② 摸胎法 ③ 阴道检查法 ④ 直肠检查法 ⑤ 超声波检查法 ⑥ 孕酮含量测定法 ⑦ 青蛙试验
第五节 分组与编号
动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组 和编号标记，这是做好实验和实验记录的前提。
一、随机分组 （一） 当分为二组时 例：设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依 次编为1，2，3，…，12号，试用完全随机的方法， 分为甲、乙两组。 分组方法：假设所产生的点是随机数字表上第 21行第31列的78，则从78开始，由上向下抄12个 随机数字，如下：
组 别： B C A B C B C C A A C A
动物编号： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
随机数字：78 38 69 57 91 0 37 45 66 82 65 41
机能探索性实验ppt课件
平均ABP尿量（ml/min)
血肌酐（Cr）含量 尿肌酐（Cr）含量
• 内生肌酐清除率：
•
Ccr =
尿肌酐浓度 血肌酐浓度
×尿量 (ml/min)
6
血浆、尿中肌酐的测定
血
0.1ml肝素、2ml全血 5000r/min，2min
取血浆0.2ml 加入试剂二2ml
5000r/min,2min, 取上清,按下表测 定
尿液中Cr含量(μ mol/L)
=
测定管OD值－空白管OD值 × 标准管浓度 ×201 ※ 标准管OD值－空白管OD值
测试尿液稀释倍数 取原尿0.01ml加入蒸馏水2ml混匀则稀释201倍
8
201※
数据记录表
1.静脉滴注KCL溶液：
滴注前 动脉血压/mmHg 呼吸频率/min 呼吸幅度 心电图 高钾血症时 药物救治后
7
510nm处，以蒸馏水调零，测样品OD值。
血浆、尿中肌酐的测定
计算公式：
血浆中Cr含量(μ mol/L) ＝ 测定管OD值－空白管OD值 标准管OD值－空白管OD值 × 标准管浓度 ×11 ※
11※ 测试血浆稀释倍数 取血浆0.2ml加入试剂二2ml混匀则稀释11倍
☆标准管OD值、空白管OD值和标准管浓度，实验室提供！
家兔高钾血症
实验目的
1.掌握家兔高钾血症模型的复制方法 2.观察高钾血症时家兔心电图变化的特征 3.探索双侧肾衰复制高钾血症模型 4.强化机能实验相关操作技能
2
实验流程
麻醉固定 左颈总动脉 插管/取血
右颈外静脉插管/补液
记录各项指标
观察指标： 动脉血压 呼吸频率 呼吸幅度 心电图变化
缓慢滴注KCL溶液 观察心电图变化 直至出现高钾血症的典型波形 10％氯化钙2ml/kg 4％碳酸氢钠5ml/kg 葡萄糖－胰岛素溶液7ml/kg
新药临床试验之探索性临床试验
新药临床试验之探索性临床试验探索性临床试验为人们的新药研发活动提供了一种高效的研究方法，对于新药IND申报来说，其可以获得一手的人体临床数据。
这一优势为探究药物在人体中的生理药理特性、了解受试人群的体征及测试药物对疾病的治疗程度提供了便利。
此临床试验的开展能够有效地节约资源，缩短研发时间，提高新药研发的效率。
探索临床试验通常是在I期临床试验早期进行的，它不以治疗为目的，也不侧重于检测药物的临床耐受性，如人体的最大耐受量，在研究过程中只涉及到少数人群并使用有限剂量，最终通过有限的人体暴露获取相应的临床参数。
探索性临床试验是新药IND申报的评价内容，其可以探索药物的初步安全性和有效性，了解剂量与效应的关系，明确药物治疗的最小有效剂量和最大耐受剂量，为确证性试验推荐给药方案。
新药在被用于人体临床试验之前，申请者必须向FDA递交新药研究申请（IND申报），其主要目的是向FDA提供数据证明该药物具备用于早期临床试验的合理性与安全性。
美迪西临床注册(IND)申报服务平台深入了解中国和美国法规政策环境以及其对化药的技术要求，能为国内客户提供CFDA的IND申报，USFDA的IND/ANDA申报服务；能为国外客户提供CFDA的IND/ANDA申报服务。
美迪西临床注册申报平台的服务对象不仅包括在美迪西做整套临床前研究的客户，还包括有单独临床注册申报需求的药界同行。
1、探索性试验的研究人群首次在患者中进行以探索有效性为目的临床试验时，可认为是探索性临床试验的开始。
探索性临床试验通常对受试者进行严格筛选，以保证受试者人群的同质性，并对受试者进行严密监测。
研究人群可以选择健康人或患者。
选择健康人的优点在于入组较快、获得的数据较为均一和整齐，干扰因素少，并且受试者耐受性好。
弊端在于受试者没有治疗获益，有些药物毒性较大，选择健康人作为受试者存在安全性风险，存在有悖伦理的情况。
健康受试者的药代动力学和药效学与患者也存在一定差异。
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六、探索性实验动物使用指引
1、要求带教老师加强对学生实验设计的指导，在开题前3～4周开始与学生探讨课题设计，修改学生开题报告或ppt文件至少1～2次，尽量保证各探索性实验项目的可行性、合理性和科学性。
在确保教学质量的前提下关注生物安全，遵循“3R”原则：Replacement（替代）、Reduction（减少）、Refinement（优化）。
2、探索性实验过程中，建议优先选择小鼠，适当选择大鼠：每组（项目）实验动物数量，小鼠建议为60只以内，大鼠建议为30只以内；人员分组，五年制学生一般建议按≧8人/组（项目），长学制一般建议5～8人/组（项目）。
3、提倡使用低等动物，代替高价的高等级实验动物；严谨合理的方案应使动物操作合理正确，减少外伤，减少污染；使用合适的统计学方法，鼓励用少量动物获得较多结果；减少对动物侵扰，控制疼痛，尽量在麻醉状态下进行动物实验；提倡动物处死过程中施行安乐死，并注意其它动物可视范围。
4、在探索性实验过程中，若需使用豚鼠、家兔、家猫、蟾蜍、青蛙、家鸡、家犬等其他实验动物，以及小鼠用量大于60只/组（项目）、大鼠用量大于30只/组（项目）时，需按程序进行报批，具体程序如下：
1）填写《中山医学院探索性实验动物使用申请表》（见下页）,带教老师审核。
2）学生进行答辩，实验生理学专家小组审核。
3）医学实验教学中心审核。
4）中山医学院实验教学生物安全工作小组审核。
中山医学院探索性实验动物使用申请表。