《食品微生物学》授课教案第六章微生物的遗传变异与菌种选育
食品微生物学-教案
绪论教学目标：了解食品微生物的研究对象及发展史以及食品微生物学在我国的发展状况前景，对食品微生物学整体有一个大致了解。
激发同学的学习兴趣。
教学难点：微生物学的发展史。
教学重点：（1）、微生物的特点（2）、微生物的发展史（3）、我国食品微生物工业的发展状况教学方法：重点讲授参考书目：（1）、江汉湖主编：《食品微生物学》，中国农业出版社，2002；（2）、无锡轻工学院合编：《食品微生物学》，轻工出版社，1988；（3）、张文治主编：《食品微生物学》，中国轻工出版社，1995 ；（4）、武汉大学主编：《微生物学》，高等教育出版社，1996第二版；（5）、杨洁彬等编：《食品微生物学》，北京农业大学出版社，1995；第一节微生物与食品微生物学一、微生物学的研究对象（一）、微生物和微生物学1、什么是微生物非细胞生物——病毒、噬菌体生物原核生物细胞生物低等动植物真核生物真菌类高等动植物原生动物藻类低等藻类高等藻类以上除了高等动植物，高等藻类以外都属于微生物范畴也有人把原生动物和藻类排除在外。
微生物不是生物分类学中的名词，而是所有小生物的统称。
2、什么是微生物学？微生物学就是研究以上这些微生物的形态结构、生长繁殖、遗传、变异、生理生化等特征以及微生物在自然界中的分布、作用和与人类及其他生物相互关系的一门学科，通过对各种微生物的研究，达到利用、控制改造它们、使其为人类造福的目的。
（二）、微生物的一般特点1、个体微小、结构简单微生物大小往往以微米来计，仅有十分之一至几个微米，只能用显微镜才能观察到。
结构简单，往往是一个单细胞结构，仅有细胞膜、细胞核等结构。
2、种类多、分布广据统计，以发现的微生物种类多达十万种以上。
由于不同的微生物种类的特点及代谢以及环境条件的要求和适应等都有不同，因而能广泛分布于自然界。
在土壤、大气、水中、各种物品上、人和动植物的体内外都有微生物的存在。
甚至在高空、深海、矿层、沙漠和冰雪等地方都有微生物的存在。
食品微生物学课程教案
原料污染途径及预防措施
• 采收、运输和储存过程中的污染：设备、容器、人员等。
原料污染途径及预防措施
选用优质原料
选择无病虫害、新鲜、质 量好的原料。
严格清洗消毒
对原料进行彻底的清洗和 消毒处理。
控制加工环境
保持加工环境的清洁卫生 ，减少微生物污染源。
加工过程污染途径及预防措施
设备污染
加工设备清洗不彻底，残留微生 物。
稀释与接种
演示如何对样品进行稀释和接种到选择性培养基上。
培养与计数
说明培养条件和时间，以及如何对菌落进行计数和结果分 析。
大肠菌群测定方法步骤与结果分析
初发酵试验
介绍如何进行初发酵试验，包括培养基的选 择和接种方法。
平板分离
演示如何从初发酵阳性管中进行平板分离， 以获得纯培养物。
确认试验
说明如何进行确认试验，包括生化试验和血 清学试验等方法。
能够运用食品微生物学的 基本知识和技术，分析和 解决食品加工和保藏过程 中的实际问题。
情感目标
培养学生对食品安全和质 量的关注，提高食品安全 意识。
教学方法与手段
理论教学
通过课堂讲授、案例分析等方式，传 授食品微生物学的基本知识和原理。
多媒体教学
利用多媒体课件、视频等教学资源， 辅助学生更好地理解和掌握课程内容 。
注意事项
在使用防腐剂时需要注意其使用范围、添加量和使用方法，避免过量使用或滥用防腐剂对人体健康造 成危害。同时还需要注意防腐剂的稳定性和与其他物质的相互作用，确保食品的安全性和卫生性。
04
食品加工过程中微生物污 染途径及预防措施
原料污染途径及预防措施
农田环境
土壤、水源、空气中的微生物。
六章微生物的遗传变异与菌种选育-PPT精选
本章主要内容
微生物遗传变异的基本原理
☀ 关于微生物遗传变异的物质基础及其存在形式。 ☀ 关于微生物基因突变的基本原理（类型、特点和机制）。 ☀ 关于微生物基因重组的基本原理（方式和特点）。
微生物菌种的选育
☀ 关于野生型微生物菌菌株分离、筛选与纯化。 ☀ 关于微生物的诱变育种的工作程序和方法步骤。 ☀ 关于营养缺陷型突变菌株的筛选方法和具体应用。 ☀ 原生质体融合育种技术的操作程序。 ☀ 基因工程育种技术的操作步骤和取得的成就。 ☀ 微生物菌种退化的原因；掌握菌种复壮的方法、防止菌种退化 的措施以及菌种保藏的方式和原理。
第二节 微生物的基因突变
三二、一、基、基因基因突因突突变变变的的的特机类点理型
（ 整一个基）生因诱物突界发变，突的由变类于及型它是其们多遗机种传理多变样异的的，物按质突基变础体是表相型同不的同，，因可此分显示为在以遗下
传变几1异种碱的类基本型对质：的上置都换具有相同的规律，这在基因突变的水平上尤其突出。
第一节 微生物遗传变异的物质基础
证明核酸是遗传变异物质基础的经典实验
肺炎双球菌的转化实验 噬菌体的感染实验 烟草花叶病毒的拆开与重组实验
肺炎双球菌的转化实验
注射R 型活菌 注射S 型灭活菌 注射S 型活菌 注射R型活菌 +S 型死菌
热致死S 型菌 R 型活菌 热致死S 型菌 +R 型活菌 R 型活菌 +S 菌抽取提物
结果发现，几乎全部 35S 都在上清液中， 而几乎全部 32P 和细菌一起出现在沉淀物中。
烟草花叶病毒的拆开与重组实验
1956 年，美国的法朗克-康勒特(Fraenkel-Conrat) 将烟草花叶病毒拆成RNA(因该病毒不含DNA)和蛋白质，并分别对烟草
食品微生物学电子教案
课教案学年学期：2008～2009 学年第二学期课程名称：食品微生物学主讲教师：授课对象：食品科学与工程专业第1 教学周（第1 次课）第页第1 教学周（第 1 次课）第页分析两面性： 育种 及抗药性第 1 教学周（第 2 次课）第页5.六界系统6．三原界系统Ⅲ . 微生物的共性特点1. 种类多（从发现晚，个体小难研究观察，以及近几年所发现的种类和本人 对微生物新种和新属的发现等几讲述种类多的实践应用通过历史事件强 调净化水的重要 性阐明意义和条件 举例并与化工比 较 举例第2 教学周(第 3 次课) 第页第2 教学周（第3-4 次课）第页（2）功能（3）厚度（4）组成ⅰ肽聚糖讲解肽聚糖的组成单位，G+和G-菌的差别介绍肽聚糖研究的热点（补充材料）；肽聚糖的生物活性及功能如免疫调节、抗肿瘤、细胞毒性等。
ⅱ 垣酸ⅲG-菌的外壁层类脂A核心多糖O –特异侧链（5）原生质体，球形体，L 型细菌，拟圆球体提出问题：为什么G-菌去壁不完全？G-菌为什么对青霉素没有G+菌敏感？为什么称为L-型？讲L-型细菌时重点讲述形态特征与菌落特征。
（6）革兰氏染色的机理提出问题：革兰氏染色关键步骤是哪一步？在讲述三个学说后，让学生思考，哪一个学说会更合理？2.细胞膜（略讲）3.中间体组成；功能强调功能在介绍原生质体概念后，讲解溶菌酶和青霉素的作用机理？讲三个学说讲解幼龄菌为色第2 教学周（第 4 次课）第3 教学周（第5次课）第页第教学周（第次课）第页第教学周（第次课）第页第4 教学周（第7次课）第页第教学周（第次课）第页第4 教学周（第8次课）第页第教学周/第节（第次课）第页第5 教学周（第9次课）第页第5 教学周（第9 次课）第页第5 教学周（第10 次课）第页第5 教学周（第10 次课）第页第页第6 教学周（第11 次课）教学基本内容备注教学目的：通过本次课教学，使学生掌握选择和设计培养基的基本方法和原理，学会分离和选择一些微生物的原理和基本实验条件教学重点：培养基教学难点：选择培养基，鉴别培养基，及其应用教具：多媒体课时安排：2 学时教学内容：第三部分微生物对营养物质的吸收Ⅰ . 单纯扩散1.概念2.特点Ⅱ . 促进扩散1.概念2.特点Ⅲ . 主动运输1.概念2.特点Ⅳ . 基团移位1.概念2.特点第四部分培养基概念Ⅰ . 使用和设计培养基的原则和方法Ⅱ . 培养基类型（. 根据营养成分是否已知可分为：（1）天然培养基（2）合成培养基（3）半合成培养基教学基本内容备注第6 教学周（第12-13 次课）第页第7 教学周（第14 次课）第页教学目的：通过本章教学，使学生掌握微生物生长，繁殖，死亡等基本概念，掌握微生物生长的规律，生长的测定和生长方式的基本知识；了解研究微生物生长的理论和实践意义教学重点：生长的测定，分批培养细菌及单细胞微生物的生长规律教具：多媒体课时安排：4 学时教学内容：第七章微生物的生长及影响因素基本概念1.生长2.繁殖3.发育4.死亡Ⅰ . 研究微生物生长的两个先决条件1.两个先决条件（1）纯培养（2）同步生长2.什么是纯培养和同步生长？3.需要两个先决条件的原因？4.获得纯培养和同步生长的方法（1）纯培养的方法（2）同步生长的获得方法A.选择法B.诱导法Ⅱ . 微生物生长的测量1.细胞数量的测量（1 ）直接测定法A.使用血球计数板B. 使用电子计数器（例如库尔特粒度仪）（2）活菌计数A. 平皿菌落计数法B.薄膜过滤法C.涂片染色法D.比例计数法2.细胞重量的测定（1 ）干重法（2）比浊法（3）氮量法叶绿色含量法（藻类）（4）ATP 含量法第8 教学周（第15 次课）第页教学基本内容备第 8 教学周（第16 次课）第页教学内容：III. 微生物生长的含义 IV. 微生物培养的两种方法分批培养 （密闭系统 ） 连续培养 （开放系统 ）1. 批培养和连续培养的概念2. 微生物分批培养曲线－－生长曲线（ 1 ）延迟期A. 概念B. 曲线形状C. 该时期特点D. 影响此时其长短的因素E. 出现延迟期的原因（ 2）对数生长期A. 概念B. 曲线形状C. 该时期特点D. 应用（ 3）稳定期A. 概念B. 特点C. 应用（ 4）衰亡期A. 特点 3. 有关计算 4. 微生物连续培养结合图举例运用公教学基本内容备（1）恒化培养（2）恒浊培养第8 教学周（第16 次课）第页教学基本内容备教学目的：通过本章教学，使学生掌握灭菌，消毒，防腐，卫生处理等基本概念，掌握微生物死亡规律及用理化因素控制微生物，了解控制微生物的理论和实践意义教学重点：各种理化因素控制微生物生长的原理及应用教具：多媒体课时安排：2 学时影响微生物生长的因素I.几个基本概念防腐消毒灭菌商业灭菌II.影响微生物生长的主要因素1．．温度2．氧气3．pH4．其他影响因素A.辐射B.重金属及重金属盐C.强酸、强碱及有机化合物D.化学消毒剂与石炭酸系数E.化学治疗剂F.超声波与渗透压III.物理灭菌的代表——高温（1 ）干热灭菌法①火焰灭菌法第教学周/第节（第次课）第页教学基本内容备②干热灭菌法第教学周/第节（第次课）第页第9 教学周（第17 次课）第页第教学周(第次课) 第页教学基本内容备111.菌种的退化、复壮和保藏1.菌种的衰退与复壮⑴衰退⑵防止衰退的方法狭义的概念⑶菌种的复壮广义的概念2.菌种的保藏⑴原则⑵条件⑶方法第10 教学周（第20 次课）第页第11 教学周（第21 次课）第页教学目的：通过本次教学使学生掌握微生物在食品制造中的作用教学重点：细菌发酵食品，真菌发酵食品教具：多媒体课时安排：2 学时教学内容第十章微生物在食品制造中的作用I ．以细菌为主体的发酵食品1.乳酸发酵食品2.食醋3.味精II.以酵母菌为主体的发酵食品1.面包：酵母将面粉中的糖类化合物分解形成CO2、醇、醛、有机酸等产物。
食品微生物学教案
食品微生物学教案【篇一：2011食品微生物学教案】第一章绪论微生物: 一类个体微小、结构简单、肉眼不可见或看不清楚的微小生物的统称。
微生物的种类: 原核细胞型微生物真核细胞型微生物非细胞型微生物微生物的特点1.个体微小，比表面积大2．繁殖快，个体长不大3．物种多，分布广，食谱杂4．适应性强，易变异5.观察和研究的手段特殊微生物学（microbiology）:是研究微生物在一定条件下的形态结构、生理生化、遗传变异以及微生物的进化、分类、生态等生命活动规律及其应用的一门学科。
微生物学的形成和发展:巴斯德柯赫食品微生物学: 是专门研究与食品有关的微生物的种类、特点及其在一定条件下与食品工业关系的一门学科。
食品微生物学的任务 :有益微生物在食品制造中的作用有害微生物对食品的危害及防止第二章原核生物的形态、结构和功能细菌（bacteria）:是一类个体微小、有细胞壁的单细胞原核微生物。
基本形态分为：球状 ---球菌杆状 ---杆菌螺旋状---螺旋菌其中以杆菌最为常见，球菌次之，螺旋菌较少。
革兰氏染色法? 染色程序：丹麦医生革兰细菌涂片→草酸铵结晶紫初染→鲁哥氏碘液媒染→乙醇(或丙酮)脱色→番红复染? 染色结果：兰紫色——Ｇ＋菌红色——Ｇ－菌革兰氏染色的机理质粒: 一种自我复制、稳定遗传和表达的染色体外的遗传因子(环状dna分子)? 糖被: 某些细菌在新陈代谢过程中产生的覆盖在细胞壁外的一层疏松透明的粘液状物质? 类型：(1) 微荚膜: ＜0.2um(2) 荚膜：有明显的边缘。
(3) 粘液层：没有明显的边缘(4) 菌胶团：菌体连为一体。
? 糖被主要功能有：①保护菌体→→②贮藏养料。
③表面吸附作用。
④作为透性屏障。
⑤细菌间的信息识别作用。
⑥堆积代谢产物。
糖被与生产实践的关系鉴定菌种提取葡聚糖—“代血浆”胞外多糖：黄原胶用于石油开采菌胶团用于处理污水某些细菌生长到一定阶段，在细胞内形成一个圆形、椭圆形或圆柱形，高度折光，厚壁，含水量极低，抗逆性强的休眠体，称为芽孢。
微生物的遗传变异与菌种选育
5-BrU
G:BrU /A:BU ↗ A:BU----→A:T ↗
以酮式状态时能够替换 T，与A配对； G:C----→G:BrU ------→G:C
5-BrU 以烯醇式状态时替换C与G配对；
(b)
5－BrU 能够经过烯醇式和酮式结构 改变； 引发碱基对置换。
而后因为H 和C 配对，U 与A 配
对，所以当DNA 再次复制时，A:T 就O:A
转换为 G:C，而G:C 就转换为 A:T。O:C
G:C RG:C O:C
O:T
O:G
T:A（颠换） 亚硝酸G类:C引（发复碱原基）对置换
A:T（转换） C:G（颠换）
微生物的遗传变异与菌种选育
第10页
间接引发置换诱变剂
肺炎双球菌转化试验 噬菌体感染试验 烟草花叶病毒拆开与重组试验
微生物的遗传变异与菌种选育
第3页
肺炎双球菌转化试验
注射R 型活菌 注射S 型灭活菌 注射S 型活菌 注射R型活菌 +S 型死菌
热致死S 型菌 R 型活菌 热致死S 型菌 +R 型活菌 R 型活菌 +S 菌抽取提物
小鼠不发病（存活）
合F现′ 象+大F肠- 杆菌有雄性与雌2 F性′之分，而决定它们性别是由是否存在
F
因子所决定。
HfFr 因+子F又- 称致育因子，各是种一情个况质粒，分子量为
5×107 道尔顿；
Hfr雌+性F细- 菌不含FH因fr子＋，F称-为（F多- 数菌情株，况下）
Hfr雄+性F细- 菌含有游H离fr存＋在HFf因r（子少，数称为情F况+ 下菌株），
⑵ 间接引发置换诱变剂 （碱基类似物）
微生物的生长与控制—微生物的菌种选育(食品微生物学课件)
微生物的诱变育种
微生物的诱变育种
目录/Contents
0
诱变育种的概念
10
诱变育种的环节
20
诱变育种的步骤
30
诱变育种的注意事项
4
01 诱变育种的概念
诱变育种就是利用物理的或化学诱变剂处理均匀分散的微生物群体， 促进其突变频率大幅度提高，从中挑选少数符合育种目的的突变菌 株，以供生产实践或科学实验之用。
02 菌种选育的步骤
（1）采样 由于土壤是微生物生活的大本营，其中包括各种各样的微生物，因 此，如果我们不知道生产某种产品的微生物属类及某些特征时，一般 都可以土壤为样品进行分离。一般离表层5～15cm深处的微生物数量 最多。 如果我们知道所需菌种的明显特征，则可直接采样。例如分离啤酒酵 母可直接从酒厂的酒糟中采样；分离抗噬菌体的新菌株可以从污染噬 菌体的发酵液中采样；分离能利用糖质原料、耐高渗的酵母菌可以采 集加工蜜饯、糖果、蜂蜜的环境土壤等。
04 诱变育种的注意事项
（4）诱变剂选择与诱变剂剂量确定
②剂量的选择
最适剂量：在提高突变率的基础上，既能扩大变异幅度，又能使变异 向正突变范围移动的剂量。 突变率随剂量的增加而提高，但到达一定程度后，再提高剂量, 反而 会使突变率下降。正变较多出现在偏低剂量中，而负变较多出现在偏 高剂量中。
在产量变异工作中，常采用相对杀菌率为70~75%, 甚至30~70%的 剂量。
04 诱变育种的注意事项
（5）分离和筛选
②根据平板颜色反应直接挑选
透明圈法（蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶）； 抑菌圈法（抗生素）； 变色圈法（柠檬酸）、显色圈（氨基酸）； 沉淀圈法（外毒素）
透明圈直径（H）/菌落直径（C）：产量高低
《食品微生物学》授课教案
目录
• 课程介绍与教学目标 • 微生物基础知识 • 食品中的微生物及其作用 • 食品微生物污染与控制 • 食品微生物检测技术与方法 • 食品微生物安全与风险评估
01 课程介绍与教学目标
食品微生物学概述
食品微生物学的定义
研究食品中微物的种类、数量、生 理生化特性以及与食品相互关系的科 学。
微生物的生理生化特性
营养类型
物质代谢
微生物可分为自养型和异养型两大类。 自养型能利用简单的无机物合成自身 所需的有机物，异养型则依赖现成的 有机物来提供营养。
微生物具有复杂的物质代谢途径，包 括碳水化合物的代谢、氮代谢、脂肪 代谢等。这些代谢途径对于微生物的 生长和繁殖至关重要。
呼吸类型
微生物的呼吸作用可分为发酵、好氧 呼吸和厌氧呼吸三种类型。不同类型 的微生物通过不同的呼吸作用获取能 量。
考核方式
本课程的考核方式包括平时成绩、实验报告和课程设计报告三部分。其中平时成绩占总评成绩的30%，主要考察 学生的出勤率、课堂表现和作业完成情况；实验报告占总评成绩的30%，主要考察学生的实验技能和数据分析能 力；课程设计报告占总评成绩的40%，主要考察学生的综合运用能力和创新思维能力。
02 微生物基础知识
改进加工工艺
采用合理的加工工艺，减少加工过程中的 微生物污染。
B
C
强化储存和运输管理
保持储存和运输环境的卫生，控制温度和湿 度等条件，抑制微生物的生长繁殖。
加强食品卫生监管
D 建立完善的食品卫生监管体系，对食品生产、
加工、储存和运输等各环节进行严格监控和 管理。
05 食品微生物检测技术与方法
传统微生物检测技术
活动。
03 食品中的微生物及其作用
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《食品微生物学》授课教案
第六章微生物的遗传变异与菌种选育
教学目的：
1、掌握微生物基因突变的类型、特点和机制。
2、掌握微生物分离纯化的方法步骤。
3、掌握营养缺陷型突变菌株的筛选方法和具体应用。
教学重点与难点：掌握微生物分离纯化的方法步骤。
教学课时：2学时
教学方法：多媒体教学
教学内容：
微生物在遗传上特点：1、微生物细胞结构简单，营养体一般为单倍体，方便建立纯系。
2、很多常见微生物都易于人工培养，快速、大量生长繁殖。
3、对环境因素的作用敏感，易于获得各类突变株，操作性强。
大多是无性生殖，变异易保留。
一、微生物遗传变异的物质基础
1、证明经典实验
1）转化实验
2）噬菌体T2的感染实验
3）病毒拆开与重建实验
2、遗传物质在细胞中存在方式
1）细胞水平
2）核水平（plasmid）
3）染色体水平
4）核酸水平
5）基因水平（遗传功能单位）
6）密码子水平（遗传信息单位）
7）核苷酸水平（最低突变或交换单位）
质粒种类：
1）F因子（致育因子）：大肠杆菌中发现，含质粒为F+（♂）；无质粒为F-（♀）；质粒DNA整合到染色体上为Hfr.
2）R因子（耐药性）：痢疾杆菌，多价耐药性，耐药信息携带在质粒上。
3）Col因子（大肠杆菌素产生因子）
4）青霉素酶质粒
5）Ti质粒（诱癌质粒）：植物根癌，植物基因工程重要载体。
6）降解质粒：Pseudomonas
二、微生物的基因突变
突变是指遗传物质核酸中的核苷酸顺序突然发生了可遗传的变化。
包括基因突变（点突变）和染色体畸变
（一）基因突变
1、类型
形态突变型、生化突变型
营养缺陷型：由基因突变引起某酶合成能力丧失，必须在原有培养基中添加相应的营养成分才能生长。
致死突变型：基因突变导致个体死亡。
条件致死突变型：在某一条件下呈现致死效应，如温度敏感突变型。
2、特点
不对应性、自发性、稀有性、独立性、诱变性、稳定性、可逆性
3、突变机制
诱变机制：碱基对置换（点突变）；移码突变；染色体畸变；转座因子自发突变机制：背景辐射和环境因素的诱变；自身代谢产物的诱变；互变异构效应；环出效应。
紫外线对DNA的损伤及机体对损伤DNA的修复：光复活作用；暗修复作用（切补修复）；重组修复；SOS修复；DNA 多聚酶的校正作用。
三、微生物的菌种选育
菌种工作包括三方面：选种、育种、复壮和保藏。
选育新菌种可从几方面着手：
1）从原有菌株入手进行各种遗传改造工作。
2）根据文献资料报导的微生物种属，向国内外菌种保藏机构索取同种或同属菌株，从中寻求符合要求者。
3）根据所需菌种特性、嗜好或工艺要求，从特定的生态环境中以特定方法重新分离自然菌株。
（一）从自然界分离菌种（菌种分离与筛选）
1、采样：主要以土壤为样品，一般采5-20cm深处土，须记录日期、地点、环境情况等。
要根据筛选目的、微生物分布、菌种特性以及与之有关的环境，综合考虑，具体分析来决定。
2、增殖培养（富集培养）：实际上是初筛浓缩，方法主要是：
3、菌种筛选主要步骤：
调查研究及查阅充分的资料↓
设计实验方案
↓确定采集样品的生态环境
采样
↓确定特定的增殖条件
增殖培养
↓确定特殊的选择培养基及可能的
↓定性或半定量快速检出法
平板分离
↓
原种斜面
↓确定发酵培养基础条件
筛选
↓
初筛（1株1瓶）
↓
复筛（1株3～5瓶）
↓结合初步工艺条件摸索
再复筛（1株3～5瓶）
↓
3～5株
↓
单株纯种分离
↓生产性能试验
↓→毒性试验
菌种鉴定
4、分离：
5、筛选：即进行生产性能测定，确定适合生产要求菌种。
（二）自发突变与育种
（三）诱变育种
原种（出发菌株）→纯化→斜面→同步培养→离心洗涤→振荡打散→过滤→菌悬液→诱变处理→平板分离→斜面→斜面→斜面→保藏及扩大试验（活菌计数）（计数）（变异率）（初筛）（复筛）（再复筛）
（四）营养缺陷型筛选
基本培养基（MM，[-]）：凡能满足某一菌种野生型和原养型菌株营养要求的最低成分的组合培养基。
完全培养基（CM，[+]）：在基本培养基中加入一些富含生长因子的物质，以满足该微生物各种营养缺陷型要求。
补充培养基（SM，[X]）：在基本培养基中有针对性地加上某一种或几种其自身不能合成的成分，以满足相应营养缺陷型生长的培养基。
营养缺陷型表示：所要求的营养物的头三个字母表示，如bio-，对应的野生型以bio+表示。
一般步骤：
1、诱变处理：
2、淘汰野生型：抗生素法、菌丝过滤法。
3、检出缺陷型：
4、鉴定缺陷型：
1）生长谱法：缺陷型斜面培养后，制成菌悬液涂布于[-]上，平板上划成不同区域，分别加上一种所需测验的营养物，培养观察。
2）组合补充培养基法：菌株较多时用。
5、营养缺陷型应用
1）标记菌种：代谢途径、杂交、基因重组中。
2）生物测定用菌
3）生产菌株：前体积累。
四、菌种衰退、复壮和保藏
（一）衰退与复壮
对产量性状而言，菌种的负变就是衰退，其他原有典型性状变得不典型了，也是衰退。
1、衰退的防止
控制传代次数；创造适宜的培养条件；利用不同类型细胞进行接种传代；采用有效的菌种保藏方法，加强菌种管理措施。
2、复壮
纯种分离；通过宿主体进行复壮（寄生性微生物）；淘汰已退化个体
（二）菌种保藏
低温保藏、干燥保藏、隔绝空气保藏：石蜡油封、冻干保藏、活体保藏。
菌种保藏机构简介。