DNA的鉴定
《DNA 的粗提取及鉴定》 讲义
《DNA 的粗提取及鉴定》讲义一、引言DNA 作为生命的遗传物质，承载着生物体的遗传信息。
对 DNA 的研究有助于我们深入了解生命的奥秘、疾病的发生机制以及进行法医学鉴定等。
DNA 的粗提取及鉴定是分子生物学中的基础实验技术，下面我们就来详细了解一下。
二、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习 DNA 的鉴定方法。
三、实验原理1、 DNA 在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同在014mol/L 的氯化钠溶液中，DNA 的溶解度最低。
利用这一特点，可以使 DNA 从细胞中析出。
2、 DNA 不溶于酒精溶液但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，从而可以将 DNA 与蛋白质进一步分离。
3、 DNA 遇二苯胺会呈现蓝色这一特性可用于鉴定 DNA。
四、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液（也可以使用菜花、洋葱等材料）2、用具研钵、烧杯、玻璃棒、漏斗、纱布、试管、量筒、体积分数为 95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、0015mol/L 的氯化钠溶液、二苯胺试剂等。
五、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂，离心或静置沉淀，除去上清液，得到鸡血细胞液。
2、破碎细胞，释放 DNA取 20mL 鸡血细胞液倒入烧杯中，加蒸馏水到 100mL，搅拌均匀。
然后向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞破裂，释放出 DNA。
3、去除杂质（1）过滤用纱布过滤含 DNA 的溶液，取滤液。
（2）去除核蛋白向滤液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液 40mL，搅拌 1min，使核蛋白充分溶解。
然后缓慢加入蒸馏水，同时轻轻搅拌，直至溶液中氯化钠浓度达到 014mol/L，此时 DNA 会析出，用多层纱布过滤，取纱布上的黏稠物。
4、 DNA 的进一步提纯将上述黏稠物放入 20mL 体积分数为 95%的酒精溶液中，搅拌，使DNA 沉淀。
然后用玻璃棒卷起沉淀，放入试管中。
5、 DNA 的鉴定（1）向两支试管中分别加入 2mol/L 的氯化钠溶液 5mL。
亲子鉴定的六种方法
亲子鉴定的六种方法亲子鉴定是一种通过分析DNA信息来确定两个人是否具有亲属关系的方法。
它广泛应用于法律、医学、社会福利等领域，特别是在解决争议和确立父母子女关系方面。
下面将介绍六种常见的亲子鉴定方法。
1.核酸序列比对法：这是目前最常用的亲子鉴定方法。
其原理是通过提取参与鉴定的双方的DNA样本，并通过特定技术对其DNA进行核酸序列测定，然后将两个样本的核酸序列进行对比。
如果两个样本的核酸序列存在大量相同的碱基序列，则可以推断两个人之间存在亲属关系。
2. STR分型法：它是一种通过分析DNA中的短串联重复序列（short tandem repeats, STRs），来进行亲子鉴定的方法。
STR是一种特殊的DNA序列，由重复单元组成，每个人的STR序列都是独一无二的。
利用PCR技术扩增STR区域后，通过比对被测人物和参照样本的STR图谱，来判断两者之间是否存在亲属关系。
3. SNP分析法：SNP是指单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism），它是DNA序列上最常见的变异形式。
SNP分析法通过寻找被测人物和参照样本之间的SNP位点差异来判定亲子关系。
该方法的优点是需要较少的基因座，但SNP位点较多，数据处理较为复杂。
4.Y染色体鉴定法：Y染色体只有男性有，因此这种方法主要用于男性亲子鉴定。
通过对被测人物和参照样本的Y染色体进行分析，如果两者的Y染色体完全一致，那么可以确认两者之间存在亲属关系。
这是因为Y 染色体遗传基本不发生突变，所以父与子之间的Y染色体序列几乎完全一致。
5.X染色体鉴定法：X染色体鉴定法适用于女性或男性亲子鉴定。
女性有两条X染色体，而男性只有一条，因此通过对被测人物和参照样本的X染色体进行分析，可以确定是否存在亲属关系。
6.高级DNA测序技术：随着DNA测序技术的不断发展，高级DNA测序技术如全基因组测序、外显子测序等也逐渐应用于亲子鉴定领域。
这些技术能够对被测人物和参照样本的整个基因组进行测序，从而更全面、准确地判断两者之间的亲子关系。
DNA的粗提取与鉴定
DNA 的粗提取与鉴定
一、实验原理：
1、析出DNA 的原理：DNA 在NaCL 溶液中的溶解度是随着NaCL 浓度的变化而变化的，当NaCL 的物质的量浓度为0.14mol/L 时，DNA 的溶解度最低，高于或低于这一浓度溶解度都会增高。
如图：
2、提纯DNA 的原理：
DNA 不溶于冷酒精，而细胞中某些物质可溶于冷酒精。
3、鉴定原理：DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。
二、方法步骤：
材料准备：常用鸡血细胞液
柠檬酸钠(抗凝剂)+鸡血−−−→静置或离心
血浆(弃去)+鸡血细胞液。
如图：
说明：①柠檬酸钠防止血液凝固。
②弃去上清液，是因为DNA 存在于血细胞中，血浆很少(没有)。
③用鸟类血细胞是因为鸟类成熟红细胞含DNA ，而哺乳动物成熟红细胞不含DNA ，所以不能用。
④本实验还可以用菜花或动物肝脏等作实验材料。
第一次在2中，使DNA与蛋白质分离
①两次加入高浓度NaCL
第二次在5中，DNA再溶解
第一次在1中，使细胞吸水涨破
②两次加入蒸馏水
第二次在3中，降低DNA的溶解度
第一次在1中，取滤液(含核物质)
③三次过滤第二次在4中，取黏稠物质
第三次在6中，取滤液
说明：在第一、三次取滤液时，纱布1—2层，第二次取黏稠物时纱布应多层。
④5次搅拌均要求超一个方向，轻缓，防止DNA断裂。
(二
璃制品表面带电荷，DNA中的磷酸基带相反的电荷，会被吸附于玻璃表面，减少DNA。
实验九DNA的粗提取与鉴定
【实验九】DNA的粗提取与鉴定陈小珺（江西省赣州市第三中学341000）1 教学建议在本实验的教学中，教师应注意以下几点。
1.1 实验材料必须准备充足。
本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。
每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。
宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。
也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。
（每100ml鸡血加入3g柠檬酸钠）1.2 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。
因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。
1.3 获取较纯净的DNA的关键步骤。
1.3.1 充分搅拌鸡血细胞液：将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
1.3.2沉淀DNA时必须用冷酒精：体积分数为95%的酒精在冰箱中至少存放24 h。
1.3.3正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。
教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA 分子。
进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5 min。
2 实验原理的补充介绍2.1 DNA的释放本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。
一是因为鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。
DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。
为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。
蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。
DNA的提取和鉴定
• 2 破碎细胞，获取含DNA的滤液
• 若选用鸡血和洋葱作实验材料，则怎样获 取含DNA的滤液？
在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并用玻棒搅 拌，过滤后收集滤液；切碎洋葱，加入一定量 洗涤剂和食盐，搅拌研磨，过滤后收集滤液。
• 在以上实验中，加入蒸馏水、洗涤剂和食 盐的作用分别是什么？过滤时应当选用（ 滤纸、尼龙布）。
Thanks
• 3 去除滤液中的杂质
• 最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等 杂质，需要进一步提纯DNA。阅读教材提 供的三种方法，分析其中的原理。
• 方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液 中溶解度不同；
• 方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分 解DNA；
• 方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度 不同。
• ↓→除去细胞质中的大部分物质。
• DNA初步纯化………… 与等体积95％冷却 酒精混合，析出白色丝状物
• ↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。
• DNA鉴定……………… 二苯胺，沸水浴， 呈现蓝色
• 其它注意事项：
• 在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固；鸡血静 置或离心以提高细胞悬液浓度；使用塑料 烧杯；使用尼龙布过滤；玻棒沿同一方向 搅拌；玻棒搅拌要缓慢（细胞破裂快速搅 拌）；玻棒不要碰到烧杯壁；二苯胺试剂 要现用现配等。为了提高DNA纯度，在科 学实验中通常使用的洗涤剂有十六烷基三 甲基溴化铵（CTAB）、十二烷基硫酸钠（ SDS）。
• 3．实验操作 • 制备鸡血液…………加柠檬酸钠，静置或
离心
•↓ • 破碎细胞，释放DNA… 加蒸馏水，同一方
向快速通方向搅拌
• ↓→过滤，除去细胞壁、细胞膜等。 • 溶解核内DNA………… 加入NaCl至2mol/L
DNA鉴定方法
DNA鉴定方法DNA鉴定方法DNA鉴定是一种通过对DNA序列的比较分析，确定个体之间的亲缘关系或确认身份的方法。
DNA鉴定在刑侦、亲子鉴定、遗传病诊断等领域有广泛应用。
本文将介绍DNA鉴定的基本原理和常用方法。
DNA鉴定的原理在于人类DNA的独特性和遗传性。
DNA是一种包含遗传信息的分子，由四种碱基（腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶）组成，它们按照一定的规则排列成两条螺旋状的链。
每个人的DNA序列都是独一无二的，除了一些双胞胎之外。
鉴定方法主要利用DNA的这种独特性，通过比较个体的DNA序列，确定是否具有亲缘关系或是否为同一人。
常用的DNA鉴定方法包括：1. RFLP（限制性片段长度多态性）分析：RFLP分析是DNA鉴定的经典方法之一。
它通过利用限制性内切酶将DNA切割成多个不同长度的片段，然后使用凝胶电泳将这些片段进行分离，并利用射入探针的杂交方法进行检测。
不同个体之间的DNA序列差异会导致不同的片段长度，从而可以通过比较片段长度来确定个体之间的亲缘关系。
2. PCR（聚合酶链式反应）分析：PCR是一种快速有效的DNA复制技术，可以从微量DNA中扩增出足够数量的DNA片段用于分析。
PCR分析常用于亲子鉴定、法医学和遗传病诊断。
PCR分析通常配合其他技术如序列分析、飞行时间质谱和DNA芯片等来进行。
3. STR（短串联重复）分析：STR分析是目前最常用的DNA 鉴定方法之一。
STR序列是由2-6个碱基重复单元组成的，不同个体之间的STR序列重复单元数目存在差异。
STR分析通过PCR扩增DNA片段，然后利用凝胶电泳分离，并通过比较STR重复单元数目来鉴定个体之间的亲缘关系或身份。
DNA鉴定的过程包括取样、提取DNA、扩增DNA片段、分离和检测。
取样可以采用血液、口腔拭子、毛发等样品。
提取DNA需要将样品中的DNA从细胞核和细胞器中分离出来。
DNA扩增通过PCR技术，可以在短时间内从微量DNA样品中复制出大量DNA片段。
dna亲子鉴定结果
dna亲子鉴定结果dna亲子鉴定结果dna亲子鉴定结果 DNA亲子鉴定是目前最准确的亲权鉴定方法，对于结果如何判断呢;假如小孩和测试男子的DNA形式在一个或多个的DNA探针上不吻合, 那么被测试男子便被100%排除, 即他是0%可能是亲生父亲. 他不可能是孩子的生父.一般来说，父母一方参与检测便可以得到准确的结果，但是假如在条件允许的情况下，建议父亲、母亲、孩子三方都参加检测，因为对于三联体鉴定相对于单亲鉴定来说有更高的准确率，尤其是父母同时参与时，可以更大程度的鉴定出是否医院报错了孩子等情况。
但是在dna亲子关系鉴定无法进展的时候，对于结果应该如何判断呢。
比方在司法案件中，假如被鉴定人中的一方不同意进展亲子鉴定，经过法院的调解和做思想工作仍然是不同意的情况下，应该通过什么证据来认定亲子关系。
在法律上规定：亲属法上的身份权是根据血亲(包括拟制血亲)产生，血缘亲生关系的存在是身份权的根底，父母、子女之间的血亲关系是身份关系的根底，主张身份权的当事人应当首先就父母、子女之间存在亲子关系进展举证。
对于亲子关系的证明可通过父母之间的婚姻或同居事实进展推断判别，婚姻关系或同居关系存续期间所受孕胎儿，无论是否于婚姻关系或同居关系存续期间所生，如无相反证据证明，便可以与该婚姻关系或同居关系双方存在亲子关系。
对于亲子鉴定结果在无法做dna的情况下如何判断便可以通过这种推断的方法进展认定。
如今，物证鉴定技术早已不再是破获刑事案件的专利，它更广泛地被应用于我们的生活当中。
今天，北京华大方瑞司法物证鉴定中心主任邓亚军博士将要为我们讲述的这起案例，就是属于民事案件中常见的一类——亲子鉴定。
故事，还得从一个生疏女人的出现开场……生疏女人从天而降年近60的程文凯一直和儿子程宇生活在一起。
半年前，程老爷子得了一场重病，导致半身不遂，卧床不起，爷儿俩之间的角色有了很大的转换，儿子程宇越来越懂事了，开场挑起照顾父亲和家庭的重担。
亲子鉴定的几种方法
亲子鉴定的几种方法亲子鉴定是通过一系列科学方法来确定亲子关系的一种技术手段。
它可以帮助解决争议，确定父母与子女之间的生物学关系。
亲子鉴定的方法多种多样，包括DNA亲子鉴定、血型亲子鉴定、骨骼亲子鉴定等。
下面将对这几种常见的亲子鉴定方法进行介绍。
一、DNA亲子鉴定DNA亲子鉴定是目前最常用的方法，也是最准确可靠的一种方法。
它通过提取样本中的DNA，比对样本间的遗传信息，从而确定亲子关系。
DNA亲子鉴定可以通过唾液、血液、毛发、指甲等样本进行，其结果具有99.9%以上的准确率。
这种方法的优点在于不受样本来源的限制，鉴定结果可靠。
二、血型亲子鉴定血型亲子鉴定是通过比对父母和子女的血型来确定亲子关系的一种方法。
血型遗传具有一定的规律，不同的血型组合会产生不同的血型后代。
通过比对父母和子女的血型，可以初步判断亲子关系的可能性。
然而，血型亲子鉴定的结果并不具备绝对的准确性，因为某些血型组合的后代血型可能与父母的血型不完全匹配。
三、骨骼亲子鉴定骨骼亲子鉴定是通过比对父母和子女的骨骼特征来确定亲子关系的一种方法。
每个人的骨骼特征都是独特的，而且骨骼特征往往会在亲子间遗传。
通过对父母和子女的骨骼特征进行比对分析，可以初步判断亲子关系的可能性。
然而，骨骼亲子鉴定需要专业的骨骼分析技术和设备，操作复杂，耗时较长。
四、其他亲子鉴定方法除了上述提到的三种常见的亲子鉴定方法，还有一些其他的亲子鉴定方法，如指纹亲子鉴定、声纹亲子鉴定、眼睛彩照亲子鉴定等。
这些方法都是通过比对父母和子女的指纹、声纹、眼睛彩照等特征来确定亲子关系的。
这些方法在一定程度上可以提供一些线索，但其准确性和可靠性相对较低，需要结合其他方法进行综合分析。
亲子鉴定的方法多种多样，每种方法都有其独特的优势和局限性。
DNA亲子鉴定是目前最常用、最准确可靠的方法，被广泛应用于法医学、法律领域以及个人亲子关系确认等方面。
血型亲子鉴定和骨骼亲子鉴定虽然具有一定的局限性，但在一些特定情况下仍然可以提供一些参考信息。
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(5)实验中有两次使用蒸馏水．一次在第一步．加水是为 了使血细胞吸水膨胀破裂，加水后必须充分搅拌．不应少 于5min，使血细胞充分破裂，第二次加蒸馏水是在第三步， 加水是为了稀释氯化钠溶液。 (6)实验中有三次加氯化钠溶液．在第二步中，当加入氯 化钠后．必须充分晃动烧杯，使二者混合均匀，加速染色质 中DNA与蛋白质分离．使DNA充分游离并溶解在氯化钠溶液 中．在第五步中，加氯化钠溶液也是为了DNA的再溶解。不 过这时溶液中蛋白质含量已很少．在第八步中．加的氯化钠 溶液的浓度比前2次低的多，但还是为溶解DNA。 (7)在第七步中，必须使用冷酒精(至少在50C以下存放 24h)，并且将1份含DNA的氯化钠溶液加入到2份的冷酒精 中．如果悬浮在溶液中的DNA丝状物较少，可将混合液放 入冰箱中再冷冻几分钟。
能力训练 一、选择题 1．对三次过滤的叙述中．不正确的是 (A ) (A)第一次过滤后，核物质存在于滤出的固体物中 (B)第二次过滤后．使用多层纱布，DNA存在于纱布上的黏稠物中 (C)第三次过滤后，DNA存在于滤液中．可进一步除去非DNA物质 (D)上述B、C两项均正确 2．在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需用蛋白水解酶处理， 2 DNA 然后用有机溶剂除去蛋白质．请问，用蛋白水解酶处理血样的目的是 ( D) (A)除去血浆中的蛋白质 (B)除去染色体上的蛋白质 (C)除去血细胞表面的蛋白质 (D)除去血细胞中的所有蛋白质，使DNA释放，便于进一步提纯
典例分析 例 在DNA的粗提取实验过程中，先后两次向烧杯中加 入蒸馏水的作用分别是 ( B ) (A)稀释血液．冲洗样品 (B)使血细胞破裂、降低NaCI浓度使DNA析出 (C)使血细胞破裂、增大DNA溶解量 (D)使血细跑破裂，提取含杂质较少的DNA 解析；第一次加入蒸馏水的作用是使血细胞过度洗水 而破裂，以便核内物质释放．第二次如入适量蒸馏水， 是为了降低 NaCl溶液浓度，使DNA因溶解度达到最小而 析出．
ห้องสมุดไป่ตู้
(8)本实验成功的关键 是保证提取到足量且较纯净的DNA．因为DNA在细胞中含量少，所以 在下列步骤中应特别注意，在第一步中使用的鸡血的量要在180mL左 右．提取细胞核物质时要充分搅拌5min以上．在第二步中要充分晃动 烧杯，在第三步中加蒸馏水要控制好用量，同时应用玻璃棒缓缓搅拌 使DNA聚集在玻璃棒上．在第四步中要使用多层纱布过滤，在第五步 中要充分搅拌．在第七步中使用冷酒精．因为DNA易吸附在玻璃容器 上，所以实验中最好使用塑料烧杯和试管，以减少DNA的损失。 (9) 盛放鸡血细胞液的容器和实验中的烧杯和试管最好也是塑料制的， 因为玻璃制品表面带电荷，DNA中的磷酸基带相反的电荷，会被吸附于 玻璃表面，减少DiNA含量。 5. 实验现象与讨论 最后一次搅拌时． 玻璃棒上会有乳白色丝状物 出现，这就是DNA．用 二苯胺试剂鉴定时会发现试管中溶液呈蓝色。
挑战误区 例，下列操作中．对DNA的提取量影响较小的是 ( B ) (A)使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质 (D)搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动 (C)在析出DNA黏稠物时，要缓缓加蒸馏水．直至溶液中 黏稠物不再增多 (D)在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合 液旗入冰箱中冷却 解析：在B向所述操作中，可以保怔DNA分子的完整 性．但不影响提取量。除了A，C中的 、D三项影响DNA的 提取量外．使用塑料器皿也可以减少DNA在操作中的损失。 易错分析：不注意掌握关键的实验步骤，实验容易失 败．本题易错选其他项。
4．注意事项 (1)制备鸡血细胞液时．要在取新鲜鸡血的同时 加入抗凝剂．使血液分层，取下层血细胞沉淀 。 (2)获取较多DNA的关键是向鸡血细胞液加入足量的蒸馏水 ， 以便使细胞膜和核膜破裂，核内物质释放出来。 (3)实验中共3次过滤。过滤时使用的纱布层数与取其滤液 或粘稠物有关． 第l、2次要用其滤液，使用的纱布为1--2层， 第3次是要用其滤出的黏稠物，使用的纱布为多层 (4)实验中有6次搅拌， 除最后一次搅拌外，前5次搅拌 均要朝向一个方向，并且在析出DNA，DNA再溶解和提取 中．各步搅拌都要轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，防止 DNA分子断裂。
3．实验方法与步骤 (1)提取细胞核物质： 取5～10mL鸡血细胞悬液加入烧杯 中．加蒸馏水20mL。同时，用玻璃棒沿一个方向快速充分 搅拌5min，使血细胞过度吸水破裂，细胞核内物质释放出 来，然后用纱布过滤取其滤液． (2)溶解核内的DNA． 在滤液中加入物质的量浓度为2mol／L 的NaCl 40mL，并用玻璃棒沿一个方向搅拌lmin，核中 DNA游离并充分溶解，染色质中的DNA和蛋白质分离。 (3)析出DNA黏稠物： 沿烧杯内壁慢慢加入蒸馏水，同时用 玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌．由于熔液浓度的下降， 使得DNA溶解度下降，蛋白质溶解度上升．DNA析出成白色 丝状黏稠物．当黏稠物不再增加时，停止加入蒸馏水． (4)滤取DNA黏稠物： 用多层纱布过滤，取纱布上DNA的黏稠物 。
实验九
DNA的粗提取与鉴定 的粗提取与鉴定
复习目标 1．了解与实验相关的三个实验原理． 2．会对实验材料选取和处理 ． 3．掌握 实验成功的关健步骤 ．
本实验考查 对实验原理的正确理解和运用；关健的实验 步骤应注意的问题；对实验结果(成功成失败) 作出分析和判断的能力．
1．实验原理 利用DNA在 ， 物质的量浓度为0.14mol／L的氧化钠溶液 中溶解度最低，而 蛋白质此时的溶解度高 的特点，可 以使DNA与蛋白质分离 ，形成沉淀析出，通过过滤，得 ．再利用 DNA不溶于酒精，但细 到 初提取的滤出物DNA 胞中的某些物质可溶于酒精的特点，进一步提取出含杂 质较少的DNA． 利用DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色的特性，可以鉴 定提取的DNA． 2．实验目的 (1)了解生物组织中DNA的存在部位和形式 ． (2)初步掌握DNA的粗提取和鉴定 的方法． (3)观察滤取出来的DNA 物质．
6．从鸡血细胞中提取DNA所用的提取液是 ( A ) (A)NaCI溶液 (B)酒精 (C)二苯胺 (D)柠檬酸钠 7．蛋白酶能使蛋白质水解而使染色质中的DNA分 离出来，下列药品可达到上述同一目的的是 ( B ) (A)蒸馏水 (B)NaCI溶液 (C)NaOH溶液 (D)盐酸
二、非选择题 8 . DNA在氧化钠溶液中的溶解度有二重性，随着NaCI溶液浓度的变 化而变化． (1)请在下列浓度的氯化钠熔液中，选出能使DNA析出最彻底的一种 ( A )和溶解度最高的一种( B ) (A)0.14mol／L (B)2mol／L (C)0.015mol／L (D)0.3mol／L (2)欲使溶有DNA的物质的量的浓度为2mol／L的氧化钠溶液中的 DNA析出，需降低氯化钠溶液的浓度．最有效的方法是( A ) （A)加蒸馏水 （B)加矿泉水 (C)加清水 (D)加生理盐水 (3)DNA不溶于酒精溶液．但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液， 除去杂质 利用这一原理可以 ．可以推测溶于酒精的物质中可能 有某些盐类、蛋白质、糖类或其他大分子物质 。 (4)利用DNA遇 二苯胺 呈蓝色的特性．将该物质作为鉴定 DNA 的试 剂．其实验过程要点是向放有 DNA 的试管中加入4mL的二苯胺试剂 ．观 察试管中溶液颜色的变化．这个实验也说明DNA耐 高 温，加热有利 于 加快染色的反应速度．冷却则有利于DNA 析出 ．
3．在实验中，有两次DNA的沉淀析出．其依据的原理是 (C) ①DNA在氯化钠的物质的量浓度为0.14mol／L时熔解度最低 ②DNA在冷却的体积分数为95H的酒精中能沉淀析出 (A)两次都是① (B)两次都是② (C)第一次是①，第二次是② (D)第一次是②，第二次是① 4 4．一位同学受老师委托去采集鸡血，鸡群中有雌鸡也有雄鸡， 他想应该取含红细胞最多的个体的血．结果他选了下列一只鸡 ( ) A (A)健壮的雄鸡 (B)健壮的雌鸡 (C)小母鸡 (D)小公鸡 5．DNA在下列哪种浓度的NaCl溶液中溶解度最低 ( B ) (A)2mol／L (B)0.14mol／L (C)0.015mol／L (D)0.1mol／L
(5)DNA黏稠物再溶解，取含DNA的黏稠物故于烧杯内，加入物
质的量浓度为2mol／L的NaC[溶液20mL，用玻璃棒向一个方向不 停搅拌3min，使黏稠物尽可能多地溶解。 (6)过滤含DNA的氧化钠溶液：用两层纱布过滤DNA的氯化钠溶 液，取其滤液． (7)提取含杂质较少的DNA：在滤液中加入冷却的无水乙醇，并用 玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌．由于DNA不溶于酒精，会出现乳白色 丝状物，用玻璃棒将丝状物卷起，井用滤纸吸去表面的水分． (8)DNA的鉴定：两支试管中各加入物质的量浓度为0.015mol／L 的氧化钠溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，搅拌使其充分 熔解后．向两支试管中分别加入4mL二苯胺试剂，混匀后置于沸水 浴中加热5min．待试管冷却后，比较两试管的颜色变化，将发现加 入DNA的试管中溶液呈蓝色，从而鉴定DNA的存在．
9. 在DNA的粗提取过程中．有五次用玻璃棒搅拌．第一次搅拌加蒸馏 水的鸡血细胞悬浮液是为了加速细胞破裂，第二次搅拌加物质的量浓度 为2mol／L的氯化钠溶液的滤液是为了使其与DNA 混合均匀 ， 第三次搅拌加蒸馏水至物质的量浓度为0.14mol／L氯化钠溶液是为 了稀释NaCl溶液析出含DNA的黏稠物 ，第四次搅拌放入物质的量浓度为 使黏稠物层尽可能多地溶于溶液中 2mol／L氧化钠溶液中的纱布上有黏稠物是为了 ： 第五次搅拌体积分数为95％的酒精是为了 提取含杂质较少的DNA 。 10．关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较， 最终选择鸡血做实验材料．请根据图回答下列问题：
(1)鸡血细胞中红细胞 含细胞核 ，家鸡属于鸟类，新陈代谢
旺盛，因而血液中 红 细胞数目较多，可以提供丰富 的 DNA 。 (2)实验前由老师用血细胞液供同学们做实验材料．而不用 鸡全血，主要原因是 鸡血细胞中DNA相对含量高 。 (3)在牧区采集牛、羊和马血比较方便．若用该材料按实验 要求完成实验步骤后，结果是很难提取到DNA ．这是因为这 些动物和人类一样 成熟红细胞中无细胞核，但若改用动物肝 脏傲实验材料，实验能顺利进行．这是因为 。 肝细胞有细胞核 (4)若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 程序，使组织细胞更易分离． 研磨