脂类测定
![脂类测定](https://img.360docs.net/img34/01k9t51nrin37a2jastv-41.webp)
![脂类测定](https://img.360docs.net/img34/01k9t51nrin37a2jastv-12.webp)
脂类的测定
一)食品中的脂类物质和脂肪含量
1)脂肪(真脂)
2)类脂质(脂肪酸、磷脂、糖脂等)油脂的伴随物。
大多数动、植物食品都含有天然脂肪或类脂化合物,但含量各不相同。植物性或动物性油脂中脂肪含量最高,而水果蔬菜脂肪含量很低
二)脂肪在食品加工中的作用:
1、脂肪是食品中重要的营养成分之一。
2、每克脂肪在体内可提供37.62k j(9k c a l)热能,比碳水化合物和蛋白质高一倍以上;
3、脂肪可提供必需脂肪酸,如亚油酸等
4、脂肪是脂溶性维生素的良好溶剂,有助于脂溶性维生素的吸收。
5、脂肪与p r o结合生成的脂蛋白,在调节人体生理机能和完成体内生化反应方面都起着十分重要的作用。
6、在食品加工过程中,原料、半成品、成品的脂类含量对产品的风味、组织结构、品质、外观、口感等都有直接的影响。所以脂肪含量是一项重要的控制指标。
三)脂类的测定
常用测定脂类的有机溶剂(特点、适用范围和注意事项):
1.乙醚
1)溶解脂肪的能力强,应用最多。2)乙醚沸点低(34.6℃),易燃。3)乙醚可饱和2%的水。含水乙醚在萃取脂肪的同时,会抽提出糖分等非脂成分。4)含乙醇的乙醚能溶解非脂成分,使结果偏高
2.石油醚
吸收水分比乙醚少,允许样品含微量的水分。石油醚具有较高的沸点,它没有胶溶现象,不会夹带胶态的淀粉、蛋白质等物质。石油醚抽出物比较接近真实的脂类。但乙醚、石油醚都只能提取样品中游离态的脂肪。
3.氯仿—甲醇
一种有效的溶剂,对脂蛋白、磷脂提取效率较高。特别适用于水产品、家禽、蛋制品中脂肪的提取。
样品的预处理
1. 固体样品要粉碎,颗粒大小要合适,注意粉碎过程中的温度,防止脂肪氧化。
2.样品要干燥
温度低——酶活力高,脂肪易降解。
温度高——脂肪易氧化成结合态。
较理想的方法是冷冻干燥法。
3. 酸水解或碱处理
对于乙醚不能渗入内部的或含结合态脂肪。
4.加入海砂或无水硫酸钠
二.脂类的测定方法
一)索氏提取法(索克斯列特抽提法)
(一)原理:将经前处理的、分散且干燥的样品用乙醚或石油醚等溶剂回流提取,使样品中的脂肪进入溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物,即为粗脂肪。粗脂肪——残留物中除游离脂肪外,还含有色素、树脂、蜡状物、挥发油等。
(二)适用范围与特点适用于游离态脂类含量较高,结合态脂类含量少或经水解处理过的(结合态已转变成游离态),样品应能烘干,磨细,不易吸湿结块。
此法经典,对大多数样品的测定结果比较可靠。但费时长(8—16h)溶剂用量大,需要专门的仪器,索氏提取器。
(三)测定方法
1. 滤纸筒的制备
2. 样品处理
固体样品:精密称取干燥并研细的样品 2~5g(可取测定水分后的样品),必要时拌以海砂,无损地移入滤纸筒内。
半固体或液体样品:称取5.0一10.0g于蒸发皿中,加入海砂约20g于沸水浴上蒸干后,再于95—105℃烘干、研细,全部移入滤纸筒内,蒸发皿及粘附有样品的玻璃棒都用沾有乙醚的脱脂棉擦净,将棉花一同放进滤纸筒内。
3.抽提
将滤纸筒或滤纸包放入索氏抽提器内,连接已干燥至恒重的脂肪接受瓶,由冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚(30—60℃沸程),加量为接受瓶的2/3体积,于水浴上(夏天65℃,冬天80℃左右)加热使乙醚或石油醚不断的回流提取,一般视含油量高低提取6—12小时,至抽提完全为止(用滤纸试)。
4.称重
取下接受瓶,回收乙醚或石油醚,待接受瓶内乙醚剩1~2m l时,在水浴上蒸干,再于100~105℃干燥2小时,取出放干燥器内冷却30分钟,称重,并重复操作至恒重。
(四)结果计算
脂肪(%)=(m2-m1)/m×100
m2——接受瓶和脂肪的质量,g;m l——接受瓶的质量,g;m——样品的质量(如为测定水分后的样品质量计),g。
(五)注意及说明
①a.样品应干燥后研细
B.装样品的滤纸筒一定要严密,不能往外漏样品,但不要包得太紧影响溶剂渗透。
C.滤纸筒高度不要超过回流弯管
②对含糖及糊精多的样品,要先以冷水使糖及糊精溶解,经过滤除去,将残渣连同滤纸一起烘干,再一起放入抽提管中。
③抽提用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物,挥发残渣含量低。因水和醇可导致水溶性物质溶解,如水溶性盐类、糖类等,使得测定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化,在烘干时也有引起爆炸的危险。
④乙醚中过氧化物的检查方法:
A.取6m l乙醚,加2m l10%的碘化钾溶液,用力振摇,放置1分钟,若出现黄色,则证明有过氧化物存在。
B.乙醚+少量F e2++少量k C N S—红色现象生成,则证明有过氧化物存在。除过氧化物:含过氧化物乙醚+少量F e s o4--除去过氧化物(蒸馏)
过氧化物如:H2O2、N a2O2、C a O2、B a O2、Z n O2、M g O2等
⑤提取时水浴温度不可过高,以每分钟从冷凝管滴下80滴左右,每小时回流6—12次为宜,提取过程应注意防火。
⑥在抽提时,冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管,这样,可防止空气中水分进入,也可避免乙醚挥发在空气中,如无此装置可塞一团干燥的脱脂棉球。
⑦抽提是否完全,可凭经验,也可用滤纸或毛玻璃检查,由抽提管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上,挥发后不留下油迹表明已抽提完全。
⑧在挥发乙醚或石油醚时,切忌用直接火加热,应该用电热套,电水浴等。烘前应驱除全部残余的乙醚,因乙醚稍有残留,放入烘箱时,有发生爆炸的危险。
⑨反复加热会因脂类氧化而增重。重量增加时,以增重前的重量作为恒重。
⑩因为乙醚是麻醉剂,要注意室内通风。
●快速测油器
●设计原理:
快速测油器有多种结构形式,基本工作原理是:先把被测量的样品放到乙醚中浸煮提出大部分的脂肪,再回收大部分乙醚,使样品高于乙醚的液面以上,用乙醚进行淋洗出样品中残余的油。国外的特卡托脂肪自动测定仪就是利用这个原理。
二)酸水解法
(一)原理:将试样与盐酸溶液一同加热进行水解,使结合或包藏在组织里的脂肪游离出来,再用乙醚和石油醚提取脂肪,回收溶剂,干燥后称量,提取物的重量即为脂肪含量。(二)适用范围与特点:此法适用于各类、各种状态的食品中脂肪测定。特别是加工后的混合食品,易吸湿,不好烘干的,用索氏提取法不行的样品,效果更好。本法不适于测定含磷脂高的食品、如:鱼、贝、蛋品等。本法也不适于测定含糖高的食品,因糖类遇强酸易炭化而影响测定。
(三)测定方法(加入的试剂各自所起的作用)
样品处理、水解、提取(乙醇、乙醚和石油醚)、称重
乙醇:蛋白质沉淀剂,降低表面张力,促进脂肪球聚合;溶解碳水化合物,减少乙醚中这些物质的含量。
石油醚:降低乙醇在乙醚中的溶解度,使乙醇溶解物残留在水层;减轻乳化现象
注意事项及说明:
①测定的样品须充分磨细,液体样品需充分混合均匀,否则结合性脂肪不能完全游离,致使结果偏低。
②水解时应防止大量水分损失,使酸浓度升高。
③开始加入8mL水是为防止后面加盐酸时干试样固化,水解后加入乙醇可使蛋白质沉淀,降低表面张力,促进脂肪球聚合,同时溶解一些碳水化合物、有机酸等。后面用乙醚提取脂肪时,因乙醇可溶于乙醚,故需加入石油醚,降低乙醇在醚中的溶解度,使乙醇溶解物残留在水层,并使分层清晰。
④挥干溶剂后,残留物中若有黑色焦油状杂质,是分解物与水一同混入所致,会使测定值增大造成误差,可用等量的乙醚及石油醚溶解后过滤,再次进行挥干溶剂的操作。
三)罗兹—哥特里(Rose—Gottlieb)法(碱性乙醚提取法、重量法测定乳脂肪)
(一)原理
利用氨一乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜使非脂成分溶解于氨一乙醇溶液中,而脂肪游离出来,再用乙醚—石油醚提取出脂肪,蒸馏去除溶剂后,残留物即为乳脂肪。
(二)适用范围与特点
本法适用于各种液状乳(生乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等),各种炼乳、奶粉、奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中溶解的乳制品,也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。
本法为国际标准化组织(ISO), (FAO/WHO)等采用,为乳及乳制品脂类定量的国际标准法。(三)测定方法
取一定量样品于抽脂瓶中,分别加入氨水,乙醇,乙醚,石油醚,充分摇匀,待上层液澄清时,读取醚层体积,放出一定体积醚层于一已知重的烧瓶中,蒸馏回收乙醚和石油醚,烘干至恒重,称重。
说明:1、加入乙醇,使乙醇溶解物留在下层溶液中2、加入石油醚可使乙醚不与水混溶。石油醚可使分层清晰。
四)巴布科克法和盖勃法(测定乳脂肪)
(一)原理
用浓硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白质等非脂成分,将牛奶中的酪蛋白钙盐转变成可溶性的重
硫酸酪蛋白,使脂肪球膜被破坏,脂肪游离出来,再利用加热离心,使脂肪完全迅速分离,直接读取脂肪层的数值,便可知被测乳的含脂率。
2.适应范围与待点
这两种方法都是测定乳脂肪的标准方法,适用于鲜乳及乳制品脂肪的测定。对含糖多的乳品(如甜炼乳、加糖乳粉等),采用此方法时糖易焦化,使结果误差较大,故不适宜。
此法操作简便,迅速。对大多数样品来说测定精度可满足要求,但不如重量法准确。
仪器:①巴布科克氏乳脂瓶②盖勃氏乳脂计
(三)测定方法
吸取20℃牛乳17.6ml,注入巴氏乳脂瓶中,加等量硫酸,小心倒入乳脂瓶中,硫酸流入牛乳下面成一层,摇动乳脂瓶使牛乳和硫酸混合,即成棕黑色,继续摇动2~3min,将乳脂瓶放入离心机中,离心5min(1000r/min),取出后向瓶中加80℃热水至分离的脂肪层在瓶颈部刻度处,再用同样的转速旋转2min,取出置60℃水浴中保温5min,取出,立即读数。所得数值即为脂肪的百分数。
(四)说明与注意
1)硫酸的浓度要严格遵守规定的要求,如过浓会使乳炭化成黑色溶液不易读数;过稀则不能使酪蛋白完全溶解,会使测定值偏低或使脂肪层浑浊。
2)硫酸除可破坏脂肪球膜,使脂肪游离出来外,还可增加液体相对密度,使脂肪容易浮出。3)加热和离心的目的是促使脂肪离析。
4)罗兹—哥特里和巴布科克法和盖勃法都是测定乳脂肪的标准分析方法。对比研究表明,前者的准确度较后者高,后两者中巴布科克法的准确度比盖勃法的少高点,两者差异显著。5)在巴氏法中采用17.6ml吸管,实际上注入巴氏瓶中只有17.5ml,故样品质量=17.5x1.030=18g
巴氏瓶的刻度共10大格(0-10%),每大格容积0.2ml,脂肪的平均比重0.9,其脂肪质量为0.2x10(10大格)x0.9=1.8g,即每一大格代表1%的脂肪故巴氏瓶颈刻度读数即为脂肪的百分含量。
五)其他方法
(一)氯仿—甲醇提取法
索氏提取法对包含在组织內部的脂肪等不能完全提取出来,酸分解法常使磷脂分接而损失。而在一定的水分存在下,极性的甲醇及非极性的氯仿混合溶液却能有效地提取结合态脂类,如脂蛋白、蛋白脂等磷脂,此法对于高水分生物试样如鲜鱼、蛋类等脂类的测定更为有效。
(1) 原理
用极性的甲醇及非极性的氯仿作溶剂,可与样品中水分形成三元抽取体系,将样品组织中结合的脂质变成游离脂肪,同时也能将如磷脂类极性脂质提取出,挥发掉溶剂,称重定量。(2)试剂①氯仿:97%(体积分数)以上②甲醇:96%(体积分数)以上。③氯仿甲醇混合液:按2:1体积比混合。④石油醚。⑤无水硫酸钠:以120~1350C干燥1~2h。(3)仪器CM提取装置;具塞离心管;离心机
(四)操作方法:
①提取准确称取均匀样品5g于具塞三角瓶内(高水分食品可加适量硅藻土使其分散),加入60mL氯仿-甲醇混合液(对于干燥食品,可加入2~3mL水)。连接提取装置,于650C水浴中,由轻微沸腾开始,加热1h进行提取。
②回收溶剂:提取结束后,取下烧瓶用布氏漏斗过滤,并用氯仿-甲醇混合液洗涤滤器,烧瓶及滤器中试样残渣,滤液、洗涤液一并收集于具塞三角瓶内,置65~700C水浴中回收溶剂,至烧瓶内物料呈浓稠态(而不能使其干涸)。
③石油醚萃取、定量
用移液管加入25ml石油醚,然后加入15g无水硫酸钠,立即加塞混摇1 min ,将醚层移入具塞离心沉淀管进行离心分离(3000r/min)5min.用10mL移液管迅速吸取离心管中澄清的石油醚10mL,于已称量至恒量的干燥称量瓶内,蒸发去除石油醚,于100~1050C烘箱中烘至恒量(约30 min )。
(五)说明
(1)本法适合结合态脂类,特别是磷脂含量高的样品。
(2)本法对高水分试样更为有效,对于干燥试样可先在试样中加一定水,使组织膨润,再用CM混合液提取。
(3)提取结束后,用玻璃过滤器过滤,用容器洗涤烧瓶,每次5ml洗涤3次,然后用30ml 溶液洗涤残渣及滤器。
(4)溶剂回收到残留物尚有一定流动性,不能完全干涸,否则不易溶于石油醚,使测定值偏低。
(5)无水硫酸钠在石油醚之后加入,以免影响石油醚对脂肪的溶解。根据残留物中水的多少,可加无水硫酸钠5~15g。
(二)牛奶脂肪测定仪
快速测量鲜奶脂肪含量的数字式便携仪器,适用于各种收奶现场,可直接将探头插入奶中,无须采样,不用任何试剂,直接测定脂肪含量。具有自动温度补偿器,可测0—30℃鲜奶,可用直、交流两用电源。测量速度3—4 秒/一个奶样。
三. 食用油脂几项理化特性的测定
1、酸价的测定
酸价——中和1 g 油脂中的游离脂肪酸所需氢氧化钾的质量(mg)。
酸价是反映油脂酸败的主要指标。我国制定的油脂“酸价”标准为:一级不超过0.3,二级不超过0.5,三级不超过1,四级不超过3。也就是说,酸价在3以下对人体是安全的。
油脂酸败后会产生强烈的异味,营养价值降低,脂溶性维生素(维生素A、D、E)受到破坏。酸败的油脂用于烹调时,食物中的易氧化维生素也会受到破坏。油脂酸败后产生的氧化物对人体的酶系统,如琥珀酸氧化酶、细胞色素酶等有破坏作用。实验表明,动物长期食用酸败油脂可出现体重减轻、发育障碍、肝脏肿大等现象,并可诱发肿瘤。
2、碘价的测定
碘价(碘值)——100 g 油脂所吸收的氯化碘或溴化碘换算成碘的质量(g)。
碘价在一定范围内反映油脂的不饱和程度。
3、过氧化值的测定
过氧化值——滴定1 g 油脂所需用( 0.002 mol/L ) Na2S2O3 标准溶液的体积(mL)。
过氧化值的大小是反映油脂是否新鲜及酸败的程度。
4、皂化价的测定
皂化价——中和 1 g 油脂中的全部脂肪酸(游离+ 结合的)所需氢氧化钾的质量(mg)。皂化价反映组成油脂的各种脂肪酸混合物的平均分子量大小,皂化价越大,脂肪酸混合物的平均分子量就越小。皂化价较大的食用脂肪熔点较低,消化率较高。
5、羰基价的测定
用羰基价来评价油脂中氧化物的含量和酸败程度。总羰基价——用比色法测定。
5.理解和掌握食用油脂特性(酸价、碘价、过氧化值、皂化值、羰基价)的定义及其测定原理。
6.解释和比较以下各种测定食品中脂肪的方法的原理,指出适合下列每种方法的样品种类:1)索氏提取法;(2)巴布克科法;
粗脂肪测定方法
粗脂肪测定方法 1、简述:本标准适用于各种单一、混合饲料和预混料中粗脂肪的测定方法。 2、方法原理:索氏脂肪提取器中用乙醚提取试样,称提取物的重量,除脂肪外还有有机酸,磷脂、脂溶性维生素,叶绿素等,因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。 3、试剂与仪器 2) 无水乙醚(AR) 3) 索氏脂肪提取器(带球形冷凝管):100或150ml。 4) 索氏脂肪提取仪。 4、使用索氏脂肪提取器测定: 索氏提取器应干燥无水。抽提瓶(内有沸石数粒)在105±2℃烘箱中烘干60min,干燥器中冷却30min,称重,再烘干30min,同样冷却称重,两次重量之差小于0.0008g为恒重。(可直接烘1.5-2h,冷却后将抽提瓶称重编号) 称取试样1-5g,于滤纸筒中,或用滤纸包好,放入105℃烘箱中,烘干120min(或称测水分后的干试样,折算成风干样重),滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度,滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准。将滤纸筒或包放入抽提管,在抽提瓶中加无水乙醚60--100ml,在60--75℃的水浴(用蒸馏水)上加热,使乙醚回流,控制乙醚回流次数为每小时约10次,共回流约50次(含油高的试样约70次)
或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。(将试样在无水乙醚中浸泡三小时,效果更佳) 取出试样,仍用原提取器回收乙醚直到抽提瓶全部收完,取下抽提瓶,在水浴上蒸去残余乙醚,擦净瓶外壁。将抽提瓶放入105+-2℃烘箱中烘干120min,干燥器中冷却30min称重,再烘干30min,同样冷却称重,两次重量之差小于0.001g这恒重。(延长烘干时间至3h,称重一次即可) 5、计算: 粗脂肪(%)= 式中:m--风干试样重量,g m1--已恒重的抽提瓶重量,g; m2--已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量,g. 6、重复性 每个试样取两平行样进行测定,以其算术平均值为结果。 粗脂肪含量在10%以上(含10%)允许相对偏差为3%。 粗脂肪含量在10%以下时,允许相对偏差为5%。 【下载本文档,可以自由复制内容或自由编辑修改内容,更多精彩文章,期待你的好评和关注,我将一如既往为您服务】
食品中粗脂肪含量的测定(索氏抽提法)
实验三食品中粗脂肪含量的测定(索氏抽提法) 一、目的与要求 1、学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法. 2、掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素. 二、原理 利用脂肪能溶于有机溶剂的性质,在索氏提取器中将样品用无水乙醚或石油醚等溶剂反复萃取,提取样品中的脂肪后,蒸去溶剂,所得的物质即为脂肪或称粗脂肪。 三、仪器与试剂 1、仪器 (1)、索氏提取器如图3-3所示 (2)、电热恒温鼓风干燥箱 (3)、干燥器 (4)、恒温水浴箱 2、试剂 (1)无水乙醚(不含过氧化物)或石油醚(沸程30-60°C) (2)滤纸筒 四、测定步骤 1、样品处理 (1)固体样品: 准确称取均匀样品2-5g(精确至0.01mg),装入 滤纸筒内。 (2)液体或半固体: 准确称取均匀样品5-10g(精确至0.01mg), 置于蒸发皿中,加入海砂约20 g,搅匀后于沸水浴上蒸干,然 后在95-105°C下干燥。研细后全部转入滤纸筒内,用沾有 乙醚的脱脂棉擦净所用器皿,并将棉花也放入滤纸筒内。 2、索氏提取器的清洗 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在103°C±2°C的烘箱内干燥至恒重(前后两次称量差不超过2mg)。 3、样品测定 (1) 将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内,连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶,由抽提器冷凝管上端加入乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处,通入冷凝水,将底瓶浸没在水浴中加热,用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。 (2) 抽提温度的控制:水浴温度应控制在使提取液在每6-8min回流一次为宜。 (3) 抽提时间的控制: 抽提时间视试样中粗脂肪含量而定,一般样品提取6-12h,坚果样品提取约16h。提取结束时,用毛玻璃板接取一滴提取液,如无油斑则表明提取完毕。 (4) 提取完毕。取下脂肪烧瓶,回收乙醚或石油醚。待烧瓶内乙醚仅剩下1—2mL时,在水浴上赶尽残留的溶剂,于95—105°C下干燥2h后,置于干燥器中冷却至室温,称量。继续干燥30min后冷却称量,反复干燥至恒重(前后两次称量差不超过2mg)。
第七章 脂类代谢
第七章脂类代谢 一、填空题: 1.饱和脂肪酸的生物合成在中进行。 2.自然界中绝大多数脂肪酸含数碳原子。 3.脂肪酸生物合成的原料是,其二碳供体的活化形式是。4.生成丙二酸单酰CoA需要酶系催化,它包含有三种成份、_ 和。 5.饱和脂肪酸从头合成需要的引物是,其产物最长可含有碳原子。6.人体必需脂肪酸是、和。 7.饱和脂肪酸从头合成的还原力是,它是由代谢途径和转换所提供。8.大于十六碳原子的脂肪酸是生物体内相应的各个系统的酶催化合成。 10.硬脂酸(C18)经β-氧化分解,循环次,生成分子乙酰CoA, FADH2和 NADH。11.脂肪酸β-氧化是在中进行的,氧化时第一次脱氢的受氢体是,第二次脱氢的受氢体是,β-氧化的终产物是。 14.乙酰COA主要由、和降解产生。 二、选择题(只有一个最佳答案): 1.在人体中,脂肪酸以下列哪种形式参与三酰甘油的生物合成( ) ①游离脂肪酸②脂酰ACP ③脂酰CoA ④以上三种均不是 2.脂肪酸生物合成中,将乙酰基运出线粒体进入胞液中的物质是( ) ①CoA ②肉碱③柠檬酸④以上三种均不是 4.饱和脂肪酸从头合成和β-氧化过程中,两者共有( ) ①乙酰CoA ②FAD ③NAD+④含生物素的酶 5.长链脂肪酸从胞浆转运到线粒体内进行β-氧化作用,所需载体是( ) ①柠檬酸②肉碱③辅酶A ④α-磷酸甘油 6.脂肪酸从头合成所用的还原剂是( ) ①NADPH+H+②NADH+H+③FADH2④FMNH2 8.β-氧化中,脂酰CoA脱氢酶催化反应时所需的辅因子是( ) ①FAD ②NAD+③ATP ④NADP+ 9.植物体内由软脂酸(C16)生成硬脂酸(C18)其原料是( ) ①乙酰CoA ②乙酰ACP ③丙二酸单酰CoA ④丙二酸单酰ACP 10.在脂肪酸的合成中,每次碳链的延长都需要什么直接参加?() ①乙酰CoA ②草酰乙酸③丙二酸单酰CoA ④甲硫氨酸 11.合成脂肪酸所需的氢由下列哪一种递氢体提供?() ①NADP+ ②NADPH+H+③FADH2④NADH+H+ 12.脂肪酸活化后,β-氧化反复进行,不需要下列哪一种酶参与?() ①脂酰CoA脱氢酶②β-羟脂酰CoA脱氢酶 ③烯脂酰CoA水合酶④硫激酶 13.软脂酸的合成及其氧化的区别为() (1)细胞部位不同 (2)酰基载体不同 (3)加上及去掉2C?单位的化学方式不同
第七章脂类代谢习题及答案
第七章脂类代谢 一、知识要点 (一)脂肪得生物功能: 脂类就是指一类在化学组成与结构上有很大差异,但都有一个共同特性,即不溶于水而易溶于乙醚、氯仿等非极性溶剂中得物质。通常脂类可按不同组成分为五类,即单纯脂、复合脂、萜类与类固醇及其衍生物、衍生脂类及结合脂类。 脂类物质具有重要得生物功能。脂肪就是生物体得能量提供者。 脂肪也就是组成生物体得重要成分,如磷脂就是构成生物膜得重要组分,油脂就是机体代谢所需燃料得贮存与运输形式。脂类物质也可为动物机体提供溶解于其中得必需脂肪酸与脂溶性维生素。某些萜类及类固醇类物质如维生素A、D、E、K、胆酸及固醇类激素具有营养、代谢及调节功能。有机体表面得脂类物质有防止机械损伤与防止热量散发等保护作用。脂类作为细胞得表面物质,与细胞识别,种特异性与组织免疫等有密切关系。 (二)脂肪得降解 在脂肪酶得作用下,脂肪水解成甘油与脂肪酸。甘油经磷酸化与脱氢反应,转变成磷酸二羟丙酮,纳入糖代谢途径。脂肪酸与ATP与CoA在脂酰CoA合成酶得作用下,生成脂酰CoA。脂酰CoA在线粒体内膜上肉毒碱:脂酰CoA转移酶系统得帮助下进入线粒体衬质,经β-氧化降解成乙酰CoA,在进入三羧酸循环彻底氧化。β-氧化过程包括脱氢、水合、再脱氢与硫解四个步骤,每次β-氧化循环生成FADH2、NADH、乙酰CoA与比原先少两个碳原子得脂酰CoA。此外,某些组织细胞中还存在α-氧化生成α羟脂肪酸或CO2与少一个碳原子得脂肪酸;经ω-氧化生成相应得二羧酸。 萌发得油料种子与某些微生物拥有乙醛酸循环途径。可利用脂肪酸β-氧化生成得乙酰CoA合成苹果酸,为糖异生与其它生物合成提供碳源。乙醛酸循环得两个关键酶就是异柠檬酸裂解酶与苹果酸合成酶前者催化异柠檬酸裂解成琥珀酸与乙醛酸,后者催化乙醛酸与乙酰CoA生成苹果酸。 (三)脂肪得生物合成 脂肪得生物合成包括三个方面:饱与脂肪酸得从头合成,脂肪酸碳链得延长与不饱与脂肪酸得生成。脂肪酸从头合成得场所就是细胞液,需要CO2与柠檬酸得参与,C2供体就是糖代谢产生得乙酰CoA。反应有二个酶系参与,分别就是乙酰CoA羧化酶系与脂肪酸合成酶系。首先,乙酰CoA在乙酰CoA羧化酶催化下生成,然后在脂肪酸合成酶系得催化下,以ACP作酰基载体,乙酰CoA为C2受体,丙二酸单酰CoA为C2供体,经过缩合、还原、脱水、再还原几个反应步骤,先生成含4个碳原子得丁酰ACP,每次延伸循环消耗一分子丙二酸单酰CoA、两分子NADPH,直至生成软脂酰ACP。产物再活化成软脂酰CoA,参与脂肪合成或在微粒体系统或线粒体系统延长成C18、C20与少量碳链更长得脂肪酸。在真核细胞内,饱与脂肪酸在O2得参与与专一得去饱与酶系统催化下,进一步生成各种不饱与脂肪酸。高等动物不能合成亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸,必须依赖食物供给。 3-磷酸甘油与两分子脂酰CoA在磷酸甘油转酰酶作用下生成磷脂酸,在经磷酸酶催化变成二酰甘油,最后经二酰甘油转酰酶催化生成脂肪。 (四)磷脂得生成 磷脂酸就是最简单得磷脂,也就是其她甘油磷脂得前体。磷脂酸与CTP反应生成CDP-二酰甘油,在分别与肌醇、丝氨酸、磷酸甘油反应,生成相应得磷脂。磷脂
脂类测定
脂类的测定 一)食品中的脂类物质和脂肪含量 1)脂肪(真脂) 2)类脂质(脂肪酸、磷脂、糖脂等)油脂的伴随物。 大多数动、植物食品都含有天然脂肪或类脂化合物,但含量各不相同。植物性或动物性油脂中脂肪含量最高,而水果蔬菜脂肪含量很低 二)脂肪在食品加工中的作用: 1、脂肪是食品中重要的营养成分之一。 2、每克脂肪在体内可提供37.62k j(9k c a l)热能,比碳水化合物和蛋白质高一倍以上; 3、脂肪可提供必需脂肪酸,如亚油酸等 4、脂肪是脂溶性维生素的良好溶剂,有助于脂溶性维生素的吸收。 5、脂肪与p r o结合生成的脂蛋白,在调节人体生理机能和完成体内生化反应方面都起着十分重要的作用。 6、在食品加工过程中,原料、半成品、成品的脂类含量对产品的风味、组织结构、品质、外观、口感等都有直接的影响。所以脂肪含量是一项重要的控制指标。 三)脂类的测定 常用测定脂类的有机溶剂(特点、适用范围和注意事项): 1.乙醚 1)溶解脂肪的能力强,应用最多。2)乙醚沸点低(34.6℃),易燃。3)乙醚可饱和2%的水。含水乙醚在萃取脂肪的同时,会抽提出糖分等非脂成分。4)含乙醇的乙醚能溶解非脂成分,使结果偏高 2.石油醚 吸收水分比乙醚少,允许样品含微量的水分。石油醚具有较高的沸点,它没有胶溶现象,不会夹带胶态的淀粉、蛋白质等物质。石油醚抽出物比较接近真实的脂类。但乙醚、石油醚都只能提取样品中游离态的脂肪。 3.氯仿—甲醇 一种有效的溶剂,对脂蛋白、磷脂提取效率较高。特别适用于水产品、家禽、蛋制品中脂肪的提取。 样品的预处理 1. 固体样品要粉碎,颗粒大小要合适,注意粉碎过程中的温度,防止脂肪氧化。 2.样品要干燥 温度低——酶活力高,脂肪易降解。 温度高——脂肪易氧化成结合态。 较理想的方法是冷冻干燥法。 3. 酸水解或碱处理 对于乙醚不能渗入内部的或含结合态脂肪。 4.加入海砂或无水硫酸钠 二.脂类的测定方法 一)索氏提取法(索克斯列特抽提法) (一)原理:将经前处理的、分散且干燥的样品用乙醚或石油醚等溶剂回流提取,使样品中的脂肪进入溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物,即为粗脂肪。粗脂肪——残留物中除游离脂肪外,还含有色素、树脂、蜡状物、挥发油等。 (二)适用范围与特点适用于游离态脂类含量较高,结合态脂类含量少或经水解处理过的(结合态已转变成游离态),样品应能烘干,磨细,不易吸湿结块。 此法经典,对大多数样品的测定结果比较可靠。但费时长(8—16h)溶剂用量大,需要专门的仪器,索氏提取器。
饲料粗脂肪测定方法
饲料粗脂肪测定方法 Method for the determination of crude fat feedstuffs 1 主题内容与适用范围 本标准规定了饲料粗脂肪的测定方法。 本标准适用于各种单一、混合、配合饲料和预混料。 2 原理 索氏(Soxhlet)脂肪提取器中用乙醚提取试样,称乙醚提取后的重量,重量之差即为脂肪。除脂肪外还有有机酸,磷脂,脂溶性维生素,叶绿素等,因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。 3 试剂 3.1无水乙醚(分析纯)。 4 仪器设备 4.1实验室用样品粉碎机或研钵。 4.2 分样筛:孔径0.45nm。 4.3分析天平:感量0.0001g。 4.4电热恒温水浴锅:室温~100℃。 4.5 恒温烘箱:50~200℃。 4.6索氏脂肪提取器(带球形冷凝管):100或150mL。 4.7索氏脂肪提取仪。 4.8滤纸或滤纸筒:中速,脱脂。 4.9干燥器:用氯化钙(干燥级)或变色硅胶干燥剂。 5 试样的制备 选取有代表性的试样,用四分法经试样缩减至500g,粉碎至40目。再用四分法缩减至200g,于密封容器中保存。 6 分析步骤 使用索氏脂肪提取器测定,索氏提取器(4.6)应干燥无水。 称取试样1~5g(准确至0.0002g),于滤纸筒中,或用滤纸包好,放入105℃烘箱(4.5)中,烘干120min。取出放入干燥器中冷却30min称重(m1)。 将滤纸筒或滤纸包放入提取器中,滤纸筒应高于提取器(4.6)虹吸管的高度,滤纸包长度应以全部浸泡于乙醚(3.1)中为准。将滤纸筒或包放入抽提管,在抽提瓶中加无水乙醚(3.1)60~100mL,在60~75℃的水浴(用蒸馏水)上加热,使乙醚(3.1)回流,控制乙醚(3.1)回流次数为每小时约10次,共回流约50次(含油高的试样约70次)或检查抽提管流出的乙醚(3.1)挥发后不留下油迹为抽提终点。 取出试样置干燥洁净的瓷托盘中,放置在通风橱,待多余的乙醚挥发完后放入
第七章 脂类代谢
兰州科技职业学院 课程名称:生物化学授课教师:李妮 No: _17___
第七章脂类代谢 第一节概述 一、什么是脂类? 指脂肪和类脂的总称为脂类。 二、分类 1. 脂肪 (fat) 甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯 2. 类脂(lipoid) 胆固醇 (cholesterol, Ch) 、胆固醇酯 (cholesterol ester, CE) 、磷脂(phospholipid, PL) 、糖脂 (glycolipids,GL)。 三、脂类在体内的分布 (一)脂肪的生理功能 1.储能和氧化供能 2.提供必需脂肪酸 必需脂肪酸:机体不能合成,必须由食物供给的不饱和脂肪酸称为,如亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸。 3.协助脂溶性维生素吸收 4.保温和保护作用 (二)类脂的生理功能 1.维持生物膜的正常结构和功能 2.转化为多种重要的生理活性物质 在体内胆固醇可转化成胆汁酸、类固醇激素、维生素D3等重要物质。必需脂 肪酸可以转化为前列腺素、白三烯等具有重要生理功能的物质。 第二节甘油三酯代谢
一、甘油三酯的分解代谢 (一)脂肪动员 1.定义:贮存在脂肪组织中的甘油三酯,在脂肪酶催化下,逐步水解为甘油和游离脂肪酸(FFA)并释放入血,经血液运输至全身各组织而被氧化利用的过程称为脂肪动员。 2.脂肪动员过程 3. 限速酶 甘油三酯脂肪酶(激素敏感性脂肪酶) 使甘油三酯脂肪酶活性降低的激素: (1).胰岛素 (2).前列腺素E 思考: 糖尿病病人胰岛素分泌减少时如何影响脂肪动员? 使甘油三酯脂肪酶活性增加的激素: 1.肾上腺素 2.去甲肾上腺素 3.促肾上腺皮质激素 4.胰高血糖素 5.促甲状腺激素刺激激素 (二)脂肪酸的氧化 1.脂肪酸氧化的反应部位
血清脂类测定
血清脂类测定 血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。 目前,对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程,均必须检测血浆(清)中的脂类,通过其含量的变化,对临床疾患提供协助诊断的依据。有关医学科研工作,脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。 1.胆固醇测定 血浆中胆固醇及其酯的含量检测,从方法学上可分为两大类:一类是化学法包括抽提法和直接测定法,这类方法目前仍在沿用;另一类是酶法测定,方法敏感特异快速,并能自动化分析,已常规应用。化学测定法种类多,由于显色反应的特异性不同,其结果有一定的差异。目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B反应)法。另外,三氯化铁-硫酸反应法(Zak法)具有显色稳定法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法,胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点,缺点是特异性差,干扰因素比L-B法多,如冰醋酸中含有的乙醛酸,血清样品中的血红蛋白,胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性,Zak法更适合于科研使用。酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用,国产试剂已能满足临床的需要。胆固醇测定用的标准品,按美国国家标准局(NBS)出品纯度达%,是国际公认的参考物,国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品,已供临床检测血清胆固醇使用。 2.甘油三酯测定 血浆甘油三酯的测定,目前多以化学法和酶法定量。化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性,水解成甘油,并以甘油为计算依据。酶法是以特异酶水解甘油三酯,除去脂肪酸,再测定甘油,方法特异,准确而快速,临床广为应用。目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据,然而血清样品中存在有游离甘油,如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油,多年来一直在研究讨论这一问题。若不减去,其测定值将会高于血清样品中的真值,如果要减去,就必须先测出血清样品中的游离甘油,甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤,实际工作中难以做到。有报道血清样品中的游离甘油实际量是~L,相当于甘油三酯的~L,为此建议,实测的甘油三酯量减去一个校正系数即:甘油三酯(mmol/L)=[×总甘油(mmol/L)](mmol/L)。 这一校正系数也仅适用于健康人,对临床病人并不一定适用。据报道,血清样品的游离甘油一直是个未知数,无法测准。为此,目前临床测定血清甘油三酯时,基本上未考虑游离甘油,因为其含量很少,暂且忽略不记。甘油三酯测定的参考物,推荐三油酸甘油酯和三软脂酸甘油酯混合物(2:1,W/W),此参考物适用于化学法。在酶法测定中,仍以高纯度的三油酸甘油酯为参考物。 3.磷脂测定 血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神经磷脂、脑磷脂和其他少量磷脂。如需要分别检测各种磷脂,可以通过薄层层析法、柱层析法和高压液相色谱法。目前,临床仅测定血清磷脂总量。血清磷脂总量的测定方法有化学方法和酶法两大类。化学法是以磷脂中的磷为定量依据,因为每磷脂分子中都含有一个磷酸根,故将磷脂的磷称为脂性磷。由于血清中磷脂大部分为卵磷脂,其分子量中磷约占4%,故将脂性磷换算成磷脂的系数,一般为25。由于化学法均需要抽提,再测抽提液中的磷脂的磷,血清中的磷酸盐不可能混入抽提液中,因此血清中的磷酸盐对磷脂测定的干扰很少。酶法是利用磷脂酶进行定量测定。生物体中磷脂酶包括磷脂酶A1、A2、C和D四种。磷脂酶D特异性差,均可水解卵磷脂、溶血卵磷脂和神经磷脂,三者约占血清总磷脂的95%,临床多用含磷脂酶d 的试剂进行磷脂的定量测定。 4.游离脂肪酸测定
第七章食品中脂肪的测定
第七章食品中脂肪的测定 【教学目标】: 1.掌握食品中脂肪存在状态的相关概念和知识; 2.熟练地掌握乙醚、石油醚、乙醇等有机溶剂的安全使用方法,有机溶剂提取、萃取、回流、回收及分离技术。 3.了解各类食品中的脂肪测定方法,掌握索氏提取法的检测技能。 食品中脂肪是重要的营养成分之一,脂肪是人体组织细胞的一个重要成分,量种富含热能的营养素,也是脂肪溶性维生素的良好溶剂,有助于脂溶性维生素的吸收。脂肪与蛋白质结合生成的脂蛋白,在调节人本生理机能、完全生化反应方面具有重要的作用。因此,各种食品中脂肪的含量是重要的质量指标之一。食品中的脂肪有两种存在形式,即游离脂肪和结合脂肪。测定食品中脂肪含量的方法有索氏提取法、酸水解法、碱水解法、皂化法等。 一、标准方法(GB 5009.6-85) (一)索氏抽提法(第一法) 1.原理 样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后,蒸去溶剂所得的物质,在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外,还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。 2.试剂 (1)无水乙醚或石油醚; (2)海沙;同GB5009.3食品水分的测定方法。 3.仪器 索氏脂肪抽提器。 4.操作方法 (1)样品处理 ①固体样品。精密称取2 -5g (可取测定水分后的样品),必要时拌以海沙,全部移入滤纸筒内。(干样粉碎后过40目筛,肉绞两次,一般样品用组织捣碎机。) ②液体或半固体样品:称取5.0-10.0g ,置于蒸发皿中,加入海沙约20g 于沸水浴上蒸干后,再于95---105℃干燥,研细,全部移入滤纸筒内。蒸发皿及附有样品的玻棒,均用沾有乙醚的脱脂棉擦净,并将棉花放入滤纸筒内。 (2)抽提 将滤纸筒放入抽提管内,连接已干燥至恒量的接受瓶,由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处,于水浴上加热,使乙醚或石油醚不断回流抽提,一般抽提6-12h 。 (3)称量 取下接受瓶,回收乙醚或石油醚,待接受瓶内乙醚剩1-2mL 时在水浴上蒸干,再于95--105℃干燥2h ,放干燥器内冷却0.5h ,称量。 5.计算1002 01?-=m m m X …………………………(3-11) 式中:X---样品中脂肪的含量, % m 1---接受瓶和脂肪的质量,g; m 0---接受瓶的质量,g; m 2---样品的质量(如是测定水分后的样品中,按测定水分前的质量计),g 。 6.说明 (1)本法为索氏(SoxhLet )提取法,为经典方法,测定准确,但费时、费试剂。 (2)本法要求必须干燥无水,水分有碍有机溶剂对样品的浸润。 (3)本法测得的脂肪中,还含有少量的可溶于脂肪的有机酸、色素、香精、醛、酮等,故只可称为粗脂肪。 (4)索氏提取器如图3-7所示。有机溶剂在接受瓶中受热蒸发至冷凝管中,冷凝后于盛装
脂肪测定国标
脂肪的国标检测方法—索氏萃取法 【GB/T 5009.6 —1985】牛奶中脂肪的测定方法 本标准适用于各类食品中脂肪含量的测定。 第一法索氏抽提法 1原理 样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后,蒸去溶剂所得的物质,在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外,还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。 2试剂 2.1无水乙醚或石油醚。 2.2 海砂:同GB 5009.3 —85《食品中水分的测定方法》2.3。 3仪器 索氏提取器。 4操作方法 4.1样品处理 4.1.1固体样品:精密称取2?5g(可取测定水分后的样品),必要时拌以海砂,全部移入滤纸筒内。 4.1.2液体或半固体样品:称取 5.0?10.0g,置于蒸发皿中,加入海砂约20g于沸水浴上蒸干后,再于95?105C干燥,研细,全部移入滤纸筒内。蒸发皿及附有样品的玻棒,均用沾有乙醚的脱脂棉擦净,并将棉花放入滤纸筒内。 4.2抽提 将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内,连接已干燥至恒量的接受瓶,由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3 处,于水浴上加热,使乙醚或石油醚不断回流提取,一般抽提6?12h。 4.3称量 取下接受瓶,回收乙醚或石油醚,待接受瓶内乙醚剩1 ?2ml 时在水浴上蒸干,再于95?105C干燥2h,放干燥器内冷却0.5h后称量。 4.4 计算
式中:X ——样品中脂肪的含量,%; ml――接受瓶和脂肪的质量,g; m0 -- 接受瓶的质量,g; m2――样品的质量(如是测定水分后的样品,按测定水分前的质量计),go 第二法酸水解法 5原理 样品经酸水解后用乙醚提取,除去溶剂即得游离及结合脂肪总量。 6试剂 6.1盐酸 6.295%乙醇 6.3乙醚。 6.4石油醚。 7仪器 100ml具塞刻度量筒。 8操作方法 8.1 样品处理 8.1.1固体样品:精密称取约2g,置于50ml大试管内,加8ml水,混匀后再加10ml 盐酸。 8.1.2 液体样品:称取10.0g,置于50ml大试管内,加10ml盐酸。 8.2将试管放入70?80C水浴中,每隔5?10min以玻璃棒搅拌一次,至样品消化完 全为止,约40?50min。 8.3取出试管,加入10ml 乙醇,混合。冷却后将混合物移于100ml 具塞量筒中,以 25ml乙醚分次洗试管,一并倒入量筒中。待乙醚全部倒入量筒后,加塞振摇1min,小心开塞,放出气体,再塞好,静置12min,小心开塞,并用石油醚一乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10?20min,待上部液体清晰,吸出上清液于已恒量的锥形瓶内,再加5ml 乙醚于具塞 量筒内,振摇,静置后,仍将上层乙醚吸出,放入原锥形瓶内。将锥形瓶置水浴上蒸干,置95?105
7第七章脂类代谢
第七章脂类代谢 一、填空题 1.脂酰CQA的β—氧化经过_________、_________、、_________、和_________四个连续反应步骤,每次β—氧化生成一分子_________和比原来少两个碳原子的脂酰CoA,脱下的氢由____和携带,进入呼吸链被氧化生成水。2.脂肪酸合成的主要原料是_________,递氢体是_________,它们主要来源于____和___。3.脂肪酸合成酶系主要存在于_________,_________内的乙酰CoA需经_________穿梭转运至_________而用于合成脂肪酸。 4.脂肪酸氧化和葡萄糖氧化途径中的第一个共同的中间代谢产物是。 5.脂肪酸分解过程中,长链脂酰C O A进入线粒体需要_________携带,脂肪酸合成过程中,线粒体中的乙酰C O A运出线粒体需要与_________结合成。 6.一分子14碳饱和脂肪酸经次β氧化,生成分子乙酰C O A,产生分子ATP.
7.脂肪酸合成在中进行,合成原料中碳源是,并以形式参与合成;供氢体是,它主要来自和。 二、选择题 A型题 1.下列与脂肪酸β—氧化的无关的酶是A.脂酰CoA脱氢酶 B.β—羟脂酰CoA脱氢酶 C.β—酮脂酰CoA转移酶 D.烯酰CoA水化酶 E.β—酮脂酰CoA硫解酶 2.下列脱氢酶,不以FAD为辅助因子的是A.琥珀酸脱氢酶 B.脂酰CoA脱氢酶C.β—羟脂酰CoA脱氢酶 3.一摩尔软脂酸经一次β—氧化后,其产物彻底氧化生成CO2和H2O,可净生成ATP的摩尔数是 A.5 B.9 C.12 D.14 E.17
4.乙酰CoA用于合成脂肪酸时,需要由线 粒体转运至胞液的途径是 A.三羧酸循环 B.α—磷酸甘油穿梭 C.苹果酸-天冬氨酸穿梭 D.柠檬酸穿 梭 E.肉碱穿梭 5.不参与脂肪酸合成的物质是 A.乙酰CoA B.丙二酰CoA C.NADPH D.ATP E.FADH 6.下列化合物中哪一个不是β氧化过程中所 需要酶的辅助因子: A.NAD+ B.CoA C. FAD D.NADP+ 7.缺乏FAD时,脂肪酸氧化过程中哪一个中间 产物的形成出现障碍: A.β烯脂酰CoA B.β酮脂酰CoA C.脂酰CoA D.β羟脂酰CoA 8.脂肪酸氧化过程中,将长链脂酰CoA载入 线粒体的是: A.ACP B.肉毒碱 C. 柠檬酸 D.乙酰CoA
食品中的脂类测定
食品中的脂类主要包括脂肪(甘油三酯)和一些类脂质,如脂肪酸、脂、糖脂和固醇类k食物中的脂类 95%是甘油三酯,5%是其他脂类。人体贮存的脂类中,甘油三酯高达 99%。脂类的共同特点是具有脂溶性,不仅易溶解于有机溶剂,还可溶解其他脂溶性物质如脂溶性维生素等。人类膳食脂肪主要来源于动物的脂肪组织和肉类以及植物的种子。动物脂肪相对饱和脂肪酸和单个不饱和脂肪酸多,而多不饱和脂肪酸含量较少。植物油主要不饱和脂肪酸。 脂肪是食品中重要的营养成分之一。脂肪可为人体提供体内不能产生而是必需的脂肪酸;脂肪是一种富含热能营养素,是人体热能的主要来源,每克脂肪在体内可提39.7kj(9.46kcal)热能,比碳水化合物和蛋白质高一倍以上;脂肪还是脂溶性维生素的良好溶剂,有助于脂溶性维生素的吸收;脂肪与蛋白质结合生成的脂蛋白,在调节人体生理机能和完成体内生化反应方面都起着十分重要的作用。但过量摄人脂肪对人体健康也是有害的。食品中脂肪的存在形式有游离态的,如动物性脂肪及植物性油脂;也有结合态的。,如天然存在的磷脂。糖脂、脂蛋白及某些加工食品(如焙烤食品及麦乳精等)中的脂肪,与蛋白质或碳水化合物等成分形成结合态。对大多数食品来说,游离态脂肪是主要的,结合态脂肪含量较少。在食品加工生产过程中,原料、半成品、成品的脂类含量对产品的风味、组织结构、品质、外观、口感等都有直接的影响。蔬菜本身的脂肪含量较低在生产蔬菜罐头时,添加适量的脂肪可以改善产品的风味,对于面包之类焙烤食品,脂肪含量特别是卵磷脂等成分,对于面包心的柔软度、面包的体积及其结构都有影响。因此,在含脂肪的食品中,其含量都有一定的规定,是食品质量管理中的一项重要指标。测定食品中的脂肪含量,可以用来评价食品的品质,衡量食品的营养价值,而且对实行工艺监督,生产过程的质量管理,研究 食品的储藏方式是否恰当等方面都有重要的意义。 食品的种类不同,其中脂肪的含量及其存在形式就不相同,测定脂肪的方法也就不同。常用的测定脂类的方法有:索氏提取法、酸分解法、罗紫一哥特里法、巴布科克氏法、盖勃氏法和氯仿一甲醇提取法等。过去普遍采用的是索氏提取法,此法至今仍被认为是测定多种食品脂类含量的有代表性的方法,但对于某些样品测定结果往往偏低。酸水解法能对包括结合态脂类在内的全部脂类进行定量n而罗紫一哥特里法主要用于乳及乳制品中脂类的测定。 二、提取剂的选择及样品的预处理 (一)提取法的选择: 天然的脂肪并不是单纯的甘油三酯,而是各种甘油三酯的混合物,它们在不同溶剂中的溶解度因多种因素而变化,这些因素有脂肪酸的不饱和性、脂肪酸的碳链长度、脂肪酸的结构以及甘油三酸酯的分子构型等。显然,不同来源的食品,由于它们结构上的差异,不可能企图采用一种通用的提取剂。脂类不溶于水,易溶于有机溶剂。测定脂类大多采用低沸点的有机溶剂萃取的方法。常用的溶剂直乙醚、石油醚、氯仿一甲醇混合溶剂等。其中乙醚溶解脂肪的能力强,应用最多。但它沸点低(34.6℃),易燃,可含有约 2%的水分,含水乙醚会同时抽出糖分等非脂类成分,所以实用时,必须采用无水乙醚做提取剂,并要求样品无水分。石油醚溶解脂肪的能力比乙醚弱些,但含水 分比乙醚少,没有乙醚易燃,使用时允许样品含有微量水分。这两种溶剂只能直接提取游离的脂肪,对于结合态脂类,必须预先用酸或碱破坏脂类和非脂成分的结合后才能提取。因二者各有特点,故常常混合使用。具体提取这些结合脂类时,要根据各种食品不同情况作具体处理,并无固定不变的程式,因此,只能对基本原理和共同性的规律作简单介绍。一般说来,在提取之前,必须首先破坏脂类与其他非脂成分的结合,不然就无法得到满意的提取效果。
第八章 脂类的测定
第八章脂类的测定 一、选择题 1.下列不是索氏提取法常用的溶剂为()。 (1)乙醚(2)石油醚(3)乙醇(4)氯仿-甲醇 2.测定花生仁中脂肪含量的常规分析方法是()。 (1)索氏提取法(2)酸性乙醚提取法 (3)碱性乙醚提取法(4)巴布科克法 3.用乙醚提取脂肪时,所用的加热方法是()。 (1)电炉加热(2)水浴加热(3)油浴加热(4)电热套加热 4.用乙醚作提取剂时,()。 (1)允许样品含少量水(2)样品应干燥 (3)浓稠状样品加海砂(4)应除去过氧化物 5.索氏提取法测定脂肪时,抽提时间是()。 (1)虹吸20次(2)虹吸产生后2小时 (3)抽提6小时(4)点滴试验 6.索氏提取法是测定样品中()脂肪含量。 (1)结合态(2)游离态(3)结合态和游离态的总量(4)不确定 7.脂肪测定时,样品包的高度应()。 (1)高出抽提管,以便于脂肪的抽提 (2)与抽提管高度相同,以便于脂肪的抽提 (3)以虹吸管高度的2/3为宜,以便于脂肪的抽提 8.脂肪测定过程中,所使用的加热温度是()。 (1)75℃~85℃(2)200℃~300℃(3)550℃~600℃。 二、填空题 1.提取脂肪常用的有机溶剂为、和。 2.索氏提取法适用脂肪含量的测定。 3.脂类主要以和的形式存在。能溶于乙醚、石油醚等有机溶剂的是。 4.测定脂类常用的提取剂有、和。 5.常用的脂类测定方法为、和。 6.索氏提取器由三部分组成即、和。 7.储存后食用油脂品质可通过和指标来鉴定。 三、名词解释 1.粗脂肪 四、简答题 1.简述脂肪在人体生理方面的作用。 2.简要叙述索氏提取法的操作步骤。 3.简要叙述索氏提取法应注意的问题。 4.简述浸提剂选用乙醚的优劣。 5.简述测定油脂中碘价的作用。 6.脂肪测定过程中应该怎样选择提取液?现有的提取液分别具有哪些特点?
第七章 脂类代谢复习题-带答案
第七章脂代谢 一、名词解释 80、脂肪酸 答案:(fatty acid)自然界中绝大多数为含偶数碳原子,不分枝的饱和或不饱和的一元羧酸。 81、必需脂肪酸 答案:(essential fatty acids EFA)人体及哺乳动物正常生长所需要,而体内又不能自身合成,只有通过食物中摄取的脂肪酸:如亚油酸,亚麻酸,花生四烯酸(可通过亚油酸进一步合成)。 82、β-氧化作用 答案:(beta oxidation)是指脂肪酸在一系列酶的作用下,在α-碳原子和β-碳原子之间发生断裂,β-碳原子被氧化形成羧基,生成乙酰CoA 和较原来少2个碳原子的脂肪酸的过程。83、α-氧化作用 答案:(alpha oxidation)以游离脂肪酸为底物,在分子氧的参与下生成D-α-羟脂肪酸或少一个碳原子的脂肪酸。 84、ω-氧化作用 答案:(omega oxidation)指远离脂肪酸羧基的末端碳原子(ω-碳原子)被氧化成羟基,再进一步氧化成羧基,生成α,ω --二羧酸的过程。 85、乙醛酸循环 答案:(glyoxylate cycle )是植物体内一条由脂肪酸转化为碳水化合物途径,发生在乙醛酸循环体中,可看作三羧酸循环支路,它绕过两个脱羧反应,将两分子乙酰CoA转变成一分子琥珀酸的过程。 二、填空题 102、大部分饱和脂肪酸的生物合成在中进行。 答案:胞液 103、自然界中绝大多数脂肪酸含数碳原子。 答案:偶 104、参加饱和脂肪酸从头合成途径的两个酶系统是和。 答案:乙酰辅酶A羧化酶;脂肪酸合成酶复合体 105、脂肪酸生物合成的原料是,其二碳供体的活化形式是。 答案:乙酰CoA;丙二酸单酰CoA 106、生成二酸单酰辅酶A需要催化,它包含有三种成分 、和。 答案:乙酰辅酶A羧化酶系;生物素羧化酶(BC);生物素羧基载体蛋白(BCCP);转羧基酶(CT) 107、大肠杆菌脂肪酸合成酶复合体至少由六种酶组成、、 、、、和一个对热稳定的低分子量蛋白质。答案:酰基转移酶、丙二酸单酰转移酶、?-酮脂酰ACP合成酶(缩合酶)、?-酮脂酰ACP 还原酶、? -羟脂酰ACP脱水酶、烯脂酰ACP还原酶;酰基载体蛋白(ACP) 108、大肠杆菌脂肪酸合成酶复合体中接受脂酰基的两个巯基臂分别存在于 和上。 答案:-SH;酰基载体蛋白(ACP);? -酮脂酰ACP合成酶 109、饱和脂肪酸从头合成需要的引物是,其产物最长可含有碳原子。 答案:乙酰CoA;十六
脂类的测定习题
脂类的测定习题 一、填空题 1、索氏提取法提取脂肪主要是依据脂肪的特性。用该法检验样品的脂肪含量前一定要对样品进行处理,才能得到较好的结果。 2、用索氏提取法测定脂肪含量时,如果有水或醇存在,会使测定结果偏(高或低或不变),这是因为_ 。 3、罗紫-哥特里法测定乳类脂肪时,需先加入氨水-乙醇溶液的目的是_ 。 4、索氏提取法恒重抽提物时,将抽提物和接受瓶置于100℃干燥2小时后,取出冷却至室温称重为45.2458g,再置于100℃干燥小时后,取出冷却至室温称重为45.2342g,同样进行第三次干燥后称重为45.2387g,则用于计算的恒重值为_ _。 5、索氏提取法使用的提取仪器是_ ___,罗紫-哥特里法使用的抽提仪器是_ __,巴布科克法使用的抽提仪器是__ ___,盖勃法使用的抽提仪器是_ __。 6、索氏提取法测定的是态脂肪。酸水解法测定的是态脂肪含量。 7、检查乙醚中是否有过氧化物的方法是在乙醚中,振摇后水层是否出现。 二、不定项选择题 1、索氏提取法常用的提取溶剂有() (1)乙醚(2)石油醚(3)乙醇(4)氯仿-甲醇
2、测定花生仁中脂肪含量的常规分析方法是(),测定牛奶中脂肪含量的常规方法是()。 (1)索氏提取法(2)酸性乙醚提取法 (3)碱性乙醚提取法(4)巴布科克法 3、用乙醚提取脂肪时,所用的加热方法是()。 (1)电炉加热(2)水浴加热(3)油浴加热(4)电热套加热4、用乙醚作提取剂时,说法错误的是()。 (1)允许样品含少量水(2)样品应干燥 (3)浓稠状样品加海砂(4)应除去过氧化物 5、索氏提取法测定脂肪时,抽提时间是()。 (1)虹吸20次(2)虹吸产生后2小时 (3)抽提6小时(4)用滤纸检查抽提完全为止 6、下列哪种试样不适合用酸水解法测脂肪含量() (1)麦乳精(2)谷物(3)鱼肉(4)奶粉 三、简答题 1.简述索氏提取法测脂肪的原理、适用范围及注意事项。 2.为什么索氏抽提法测得脂肪为粗脂肪? 3.在脂肪测定中对使用的抽提剂乙醚有何要求?为什么?如何提纯乙醚? 4.说明脂肪的存在形式、及其与测定方法的关系。 5.脂类测定最常用哪些提取剂?各有什么优缺点?
【免费下载】第七章 脂类代谢复习题-带答案
第七章 脂代谢 一、名词解释 80、脂肪酸 答案:(fatty acid )自然界中绝大多数为含偶数碳原子,不分枝的饱和或不饱和的一元羧酸。 81、必需脂肪酸 答案:(essential fatty acids EFA )人体及哺乳动物正常生长所需要,而体内又不能自身合成,只有通过食物中摄取的脂肪酸:如亚油酸,亚麻酸,花生四烯酸(可通过亚油酸进一步合成)。 82、β-氧化作用 答案:(beta oxidation )是指脂肪酸在一系列酶的作用下,在α-碳原子和β-碳原子之间发生断裂, β-碳原子被氧化形成羧基,生成乙酰CoA 和较原来 少2个碳原子的脂肪酸的过程。 83、α-氧化作用 答案:(alpha oxidation )以游离脂肪酸为底物,在分子氧的参与下生成D-α-羟脂肪酸或少一个碳原子的脂肪酸。 84、ω-氧化作用 答案:(omega oxidation )指远离脂肪酸羧基的末端碳原子(ω-碳原子)被氧化成羟基,再进一步氧化成羧基,生成α,ω --二羧酸的过程。 85、乙醛酸循环 答案:(glyoxylate cycle )是植物体内一条由脂肪酸转化为碳水化合物途径,发生在乙醛酸循环体中,可看作三羧酸循环支路,它绕过两个脱羧反应,将两分子乙酰CoA 转变成一分子琥珀酸的过程。 二、填空题102、大部分饱和脂肪酸的生物合成在 中进行。答案:胞液103、自然界中绝大多数脂肪酸含 数碳原子。答案:偶104、参加饱和脂肪酸从头合成途径的两个酶系统是 和 。答案:乙酰辅酶A 羧化酶;脂肪酸合成酶复合体105、脂肪酸生物合成的原料是 ,其二碳供体的活化形式是 。答案:乙酰CoA ;丙二酸单酰CoA 106、生成二酸单酰辅酶A 需要 催化,它包含有三种成分 、 和 。 答案:乙酰辅酶A 羧化酶系;生物素羧化酶(BC );生物素羧基载体蛋白(BCCP );转羧基酶(CT ) 107、大肠杆菌脂肪酸合成酶复合体至少由六种酶组成 、 、 、 、 、 和一个对热稳定的低分子量蛋白质 。 答案:酰基转移酶、丙二酸单酰转移酶、? -酮脂酰ACP 合成酶(缩合酶)、? -酮脂酰ACP 还原酶、? -羟脂酰ACP 脱水酶、烯脂酰ACP 还原酶;酰基载体蛋白(ACP ) 108、大肠杆菌脂肪酸合成酶复合体中接受脂酰基的两个巯基 臂分别存在于 以及
生物化学第七章脂类代谢习题剖析
第七章脂类代谢 (一) 名词解释 1.必需脂肪酸(essential fatty acid) 2.脂肪酸的β氧化(O –oxidation) 3.乙醛酸循环(S1yoxylate cycle) 4.柠檬酸穿梭(citriate shuttle) 5.乙酰辅酶 A 羧化酶系(acetyl –CoA carnoxylase) 6.脂肪酸合成酶系统(fatty acid synthase system) 7.酮体(acetone body) 8.酰基载体蛋白(ACP ,acyl carrier protein) 9.肉毒碱穿梭系统(carnitine shuttle system) 10.脂肪动员(fatty activation) (二) 填空题 1.真核生物脂肪酸氧化在细胞的中进行。 2.是脂肪酸以脂酰基形式进入线粒体的载体。 3.当用
6.是动物和许多植物主要的能源储存形式,是由与三分子酯化而成的。 7.在线粒体外膜脂酰辅酶 A 合成酶催化下,游离脂肪酸与和 反应,生成脂肪酸的活化形式,再经线粒体内膜进入 线粒体基质。 8.一个碳原子数为n (n为偶数)的脂肪酸在氧化中需经次氧化循环,生成 个乙酰辅酶A,个FADH 2 和个NADH+H +。 9.乙醛酸循环中两个关键酶是和,使异柠檬酸避免了在循环中的两次反应,实现从乙酰辅酶 A 净合成循环的中间物。 10.脂肪酸从头合成的C2 供体是,活化的C2 供体是,还原剂是。11.乙酰辅酶 A 羧化酶是脂肪酸从头合成的限速酶,该酶以为辅基,消耗,催化与生成,柠檬酸为其,长链脂酰辅酶 A 为其。12.脂肪酸从头合成中,缩合、两次还原和脱水反应时酰基都连接在上,它有一个与一样的长臂。 13.脂肪酸合成酶复合物一般只合成,动物中脂肪酸碳链延长由或酶 系统催化。 14.真核细胞中,不饱和脂肪酸都是通过途径合成的;许多细菌的单烯脂肪酸则是经由途径合成的。 15.甘油三酯是由和在磷酸甘油转酰酶的作用下先形成,再由磷酸酶转变 成,最后在催化下生成甘油三酯。 16.磷脂合成中活化的二酰甘油供体为,在功能上类似于糖原合成中的或淀粉合成中的。 18.在所有的细胞中,活化酰基化合物的主要载体是。 19.乙酰辅酶 A 和CO 2 生成,需要消耗高能磷酸键,并需要辅酶参加。 20.酮体包括、和三种化合物。 22.脂肪酸合成过程中,乙酰辅酶 A 来源于或,NADPH 来源于––途径。23.脂肪酸的合成需要原料、、和等。 24.丙酰辅酶 A 的进一步氧化需要和作酶的辅助因子。 26.合成中,活性中间物在功能上类似于多糖合成中核苷酰磷酸葡萄糖中间物。
脂肪酸检测方法
脂肪酸检测方法 脂肪酸(fatty acid),是指一端含有一个羧基的长的脂肪族碳氢链,是有机物,直链饱和脂肪酸的通式是C(n)H(2n+ 1)COOH,低级的脂肪酸是无色液体,有刺激性气味,高级的脂肪酸是蜡状固体,无可明显嗅到的气味。脂肪酸是最简单的一种脂,它是许多更复杂的脂的组成成分。脂肪酸在有充足氧供给的情况下,可氧化分解为CO2和H2O,释放大量能量,因此脂肪酸是机体主要能量来源之一。 科标检测参照国标及各种文献将脂肪酸衍生化成脂肪酸甲酯,使用十九酸内标,用正己烷提取后稀释后用气相色谱质谱联用仪,外标法结合内标法定量分析。科标检测出具专业脂肪酸检测报告。 检测方法: 1、样品提取 称取适量样品,加入4mL的甲醇/CH2Cl2(1:3)混合溶液,摇匀;恒温在30℃以下超声抽提10min。取出离心管,放于离心机中离心(1800rpm,10min),收集上清液,重复3次;将萃取液在柔和氮气流下吹干。 2、萃取液的皂化 加入3mL 6%KOH的甲醇溶液(配制:6gKOH/甲醇118mL左右),超声10min,放置30min,重复3次,室温放置过夜(瓶盖盖紧)进行碱水解;加入2mL正己烷,超声10min,摇匀,震荡离心,弃除上层正己烷萃取液,重复3次。在上述萃取完剩下的溶液中(水相),加入约1mL 4N的HCl使pH<2,再用2mL正己烷萃取3次。 3、脂肪酸的衍生化 将上述萃取液,转移到带盖玻璃管中,用氮气吹干后,加入约2mL BF3-MeOH,玻璃管上空间冲入氮气后盖盖密闭,于90℃下加热2h;待样品冷却后,加入5%NaCl溶液约1ml,用2ml正己烷萃取3次,并将萃取液转移到2mL进样瓶中,氮气吹干,待分析。 4、色谱条件 色谱柱:Thermo TG-5MS 30m x 0.25mm x 0.25μm 升温程序:80度起始温度,保持1分钟;10度/min升温到200度,5度/min升温到225度,2度/min升温到250度,保持5min。 MS,EI源, 分流模式:不分流