【Y2H操作方法-HXY整理】
YAMAHAYV100II操作规程
YAMAHA100-2操作规程高速度贴片机通用工艺规程1. 目的：将各种贴装元件贴装于线路板上。
2. 适用范围：适用于工厂SMT自动生产线中高速度贴片机YAMAHA YV100II进行电装的所有印制线路板。
3. 引用标4. 准：YAMAHA YVL100II高精度贴片机操作手册。
5. 工艺操作过程5.1. 机器生产运行5.1.1. 日常生产操作流程A. 机器检查B. 开机C. 回原点D. 暖机E. 选择数据F. 检查供料器是否正确安装G. 调整印制线路板定位系统H. 开始生产I. 生产完成J. 关机5.1.2. 生产步骤描述4.1.2.1机器检查A.开机前检查气源电源是否正常，安全盖是否盖好，吸嘴是否正确安装。
B.每日开机前吸嘴检查：吸嘴尖是否破损，沾锡膏，胶水吸嘴臂是否弹性良好供料器是否顺利供料供料器平台是否清洁4.1.2.2开机打开机器电源主开关。
检查各急停按钮是否松开，安全盖是否盖好，按下操纵手柄上的READY键，显示器下方“Emergency Stop”信息消失。
4.1.2.3回原点选择菜单1/1/D2回机器原点，机器自动回原点。
4.1.2.4暖机选择菜单1/1/D1暖机，按空格键选择暖机时间，约10至15分钟。
4.1.2.5选择生产数据如果生产上次生产的数据，此项可跳过，否则按F2键选择生产数据。
选择后，操作屏上出现本数据程序所需各头安装的吸嘴类型。
4.1.2.6检查供料器是否正确安装选择菜单1/1/D4/元件排列，检查供料器安装与数据是否一致。
4.1.2.7调整印制线路板定位系统通过菜单1/1/D4/运行应用/传送带单元，手动定位印制线路板，检查各定位装置是否可以正确工作。
传送带单元组成：Locate pins定位销Push up plate支撑台Edge clamps边夹Push in unit侧顶块Main stopper主挡块Entrance stopper入口挡块Convey Motor传送带电机Conveyor Width传送带宽度Push up pins支撑销A.孔定位方式：升起主挡块，印制线路板进入至主挡块，升起定位销（宽度由传送带下方螺栓调节）顶入印制线路板定位孔，均匀放置支撑销于支撑台上，升起支撑台，检查印制线路板是否固定完好。
双氧水技术操作规程
When enthusiasm becomes a habit, there is no place for fear and worry.简单易用轻享办公（页眉可删）双氧水技术操作规程一、工艺说明尿素双氧水防腐系统就是将一定浓度的双氧水送入高压系统（气提塔、高压甲铵冷、高压洗涤器），替代原来的部分防腐空气（原料CO2气中所加的空气），降低高压系统惰气分压，从而达到节能降耗的目的。
双氧水防腐所用原料是27%（重量）的双氧水（未加稳定剂，不含氯离子）。
二、双氧水防腐系统操作法1、双氧水溶液的配置A、关闭双氧水配液槽排放阀，检查双氧水给料泵的油质、油位、盘车正常后开启双氧水给料泵，从双氧水储槽向双氧水配液槽送浓度为27.5%的双氧水，当双氧水配液槽液位上升15%左右后，停送双氧水給料泵，关切断阀。
B、开启冷脱盐水至双氧水配液槽的切断阀，将双氧水配液槽的液位加至80%左右后关闭脱盐水切断阀。
C、在加脱盐水过程中，开启双氧水给料泵打循环以搅拌双氧水配液槽的双氧水溶液，使其配置更加均匀。
D、静置几分钟后取样分析双氧水浓度达5—8%为宜。
2、倒罐A、通知循环岗位关闭双氧水计量槽低点排放阀，打开双氧水给料泵到双氧水计量槽的切断阀，关闭循环阀。
B、检查双氧水给料泵的油质、油位正常，盘车无卡涩后，通知电工送电。
C、开压力表根部阀，关泵入口排放阀，开双氧水给料泵入口切断阀，引液至泵体，关出口排放阀。
D、启动双氧水给料泵，打开出口阀，向双氧水计量槽加液。
E、当双氧水计量槽加液至90%后，泵房岗位关双氧水给料泵至双氧水计量槽切断阀后停泵。
3、开双氧水计量泵（1）开双氧水计量泵前的准备工作A、检查双氧水计量泵的油质、油位正常，盘车无卡涩后，通知电工送电。
B、原始开车时，应把液压油加油丝堵换成过滤器。
C、打开压力表根部切断阀。
D、打开泵入口总阀，稍开入口各排放阀，再分别打开各泵入口切断阀，将双氧水引到泵入口。
E、开出口排放阀，引液至泵体。
(整理)乙苯单元操作法.
25万吨/年苯乙烯装置操作法常州新日化学有限公司目录1 岗位任务和管理范围 (1)1．1 岗位任务 (1)1．2 管理范围 (1)2 产品和原材料规格 (3)2．1 苯...................................................................................... (3)2．2 乙烯2．3 催化剂2．4 白土3 工艺流程说明3．1烃化反应和后烃化反应系统3．1．1 烃化反应3．1．2 后烃化反应3．1．3 蒸汽发生3.2 烃化液精馏系统4 开车前的准备工作5 投料开车6 正常操作6．1 正常控制的指标6．2 主要操作参数的控制7 停车操作 (20)7．1 正常停车7．2 紧急停车8 异常现象分析 (23)9 安全生产规定以上是氧化岗位操作法的目录格式。
在操作法的最后还附有工艺流程简图和安全生产规定。
1 岗位任务及管理范围1.1 岗位任务乙苯单元岗位的任务是将界区外来的乙烯和来自苯回收塔塔顶采出泵P-1202A/B的苯按一定比率通入二个串联操作的反应器(前烃化反应器R-1101和后烃化反应器R-1102)，在加热至200℃及分子筛催化剂EBZ-500及作用下进行烃化反应生成粗乙苯，另外原料苯首先在保护反应器R-1104中脱除苯中催化剂毒物，对前烃化反应器R-1101和后烃化反应器R-1102中的催化剂起到保护作用。
而乙苯精馏单元回收的多乙苯和苯按比率加入反烃化反应器R-1103中，在加热至190℃及分子筛催化剂EBZ-100作用下发生反烃化反应生成粗乙苯。
反应生成的烃化混合液和反烃化混合液送至苯回收塔T-1201进行苯回收及粗乙苯分离，粗乙苯在乙苯回收塔T-1203进行精制得高纯度中间产品乙苯，乙苯回收塔T-1203塔釜液去多乙苯回收塔T-1204进行多乙苯回收去后烃化反应器R-1103反应得反烃化液。
本岗位还负责烃化/后烃化催化剂离线再生任务。
双氧水操作规程标准版
＊＊***职工技能鉴定培训系列教材双氧水生产工艺操作规程****＊**股份有限公司编制第一篇稀品生产工艺操作规程第一章工艺原理1.1工艺原理：本方法制取过氧化氢是以2—乙基蒽醌（EAQ）为载体，重芳烃及磷酸三辛酯(TOP）为混合溶剂,配制成具有一定比例的溶液（以下称工作液）.将该溶液与氢气一起通入装有钯触媒的氢化塔内,在一定压力和温度下进行氢化反应,得到相应的氢蒽醌(HEAQ）溶液（以下称氢化液）.氢化液在氧化塔内再被空气中的氧气氧化，溶液中的氢蒽醌恢复成蒽醌,同时生成过氧化氢。
利用过氧化氢在水和工作液中溶解度的不同及工作液与水的密度差，用纯水萃取含有过氧化氢的工作液（以下称氧化液）,得到过氧化氢的水溶液(俗称双氧水）。
过氧化氢的水溶液经重芳烃净化处理及空气吹扫,即得到浓度为27。
5%（wt）的过氧化氢产品。
经水萃取后的工作液（以下称萃余液），经过沉降除水，并通过碳酸钾溶液中和其酸性及活性氧化铝再生后再回入氢化工序，继续循环用.在循环运转过程中，部分2—乙基蒽醌逐渐变成四氢-2-乙基蒽醌（H4EAQ），并积累于工作液中，后者亦为本过程的重要载体之一，它亦可反复被氢化、氧化，生成过氧化氢。
一定量四氢—2—乙基蒽醌的存在，将有利于提高氢化反应速度和抑制其它副产物的生成.1。
2化学反应方程式o OC 2H 5H 2C 2H 5OH oH 2-乙基蒽醌（EAQ）2-乙基氢蒽醌（HEAQ）2-乙基四氢氢蒽醌（H 4HEAQ）2-乙基蒽醌（EAQ）OH OH C 2H 53H 2C 2H 5O氢化反应：氧化反应：C 2H 5O 2C 2H 52-乙基四氢蒽醌（EAQ）2-乙基四氢氢蒽醌（H 4HEAQ）2-乙基氢蒽醌（HEAQ）2-乙基蒽醌（EAQ）OHOH C 2H 5O 2C 2H 5O OHOHO H 2O 2H 2O 2 o oo第二章工艺流程与工艺指标第一节工艺流程来自循环工作液泵（P1401AB)的工作液，经循环工作液袋式过滤器（X1402D）、循环工作液过滤器（X1402ABC）滤除可能夹带的固体杂质后，流经工作液热交换器（E1105）、工作液预热器（E1102），将其预热到需要的温度后与经氢气缓冲罐分离水分、氢气过滤器（X1102）净化的氢气同时进入氢化塔（T1101)顶部。
电泳仪使用标准操作规程
电泳仪使用标准操作规程操作步骤：1. 按电源开关，显示屏出现“欢迎使用DYY-12型电脑三恒多用电泳仪…”等字样后，同时系统初始化，蜂鸣4声，设置常设置。
屏幕转成参数设置状态，见图一：其中:左侧大写U: I: P: T: 为电泳时实际值；中间部分显示程序的常设值（预置值）。
Mode(模式)：STD(标准)；TIME(定时)；VH（伏时）；STEP（分步）2.设置工作程序。
用键盘输入新的工作程序。
例如，要求工作电压U＝1000V，电流I限制在200mA以内，功率W限制在100W以内，时间T为3小时20分，并且到时间自动关掉输出。
则操作步骤如下：①按“模式”键，将工作模式由标准（STD）转为定时（TIME）模式。
每按一下模式键，其工作方式按下列顺序改变：STD®TIME®V H®STEP®STD。
②先设置电压U，按“选择”键，先将其反显，然后输入数字键即可设置该参数的数值。
按数字1000,则电压即设置完成。
③设置电流I，按“选择”键，先使I反显，然后输入数字200。
④设置功率P，按“选择”键，先使P反显，然后输入数字100。
⑤设置时间T，按“选择”键，先使T反显，然后输入数字320。
如果输入错误，可以按“清除”键，再重新输入。
⑥确认各参数无误后，按相同颜色电极连接电泳槽。
按“启动”键，启动电泳仪输出程序。
在显示屏状态栏中显示Start! 并蜂鸣4声，提醒操作者电泳仪将输出高电压，注意安全。
之后逐渐将输出电压加至设置值。
同时在状态栏中显示“Run”，并有两个不断闪烁的高压符号，表示端口已有电压输出。
在状态栏最下方，显示实际的工作时间（精确到秒）。
⑦每次启动输出时，仪器自动将此时的设置数值存入“MO”号存储单元。
以后需要调用时可以按“读取”键，再按“0”键，按“确定”键，即可将上次设置的工作程序取出执行。
⑧电泳结束，仪器显示：“END”，并连续蜂鸣提醒。
此时按任一键可止鸣。
hy-2旋涡混匀器的使用说明
hy-2旋涡混匀器的使用说明
漩涡混合器主要用于食品检测，酸碱滴定，科研机构等生物或化学相关的实验。
进口漩涡混合仪具有造型精致、体积小、操作简便，转动时噪音低的特点广泛用于各种理化分析实验中。
漩涡混合器使用方法如下：
1、使用前，开机前保持电源为关闭状态，向左轻旋调速按钮将按钮调到Z小值，以防高转速带来液体飞溅。
2、将仪器置于平稳的工作台上，再将装有溶液的需要混合的器皿(如：烧杯，试管，三角瓶）等平稳置于旋转头上。
需要注意的在进行多个样本操作时，装瓶的时候应保持每个样本内瓶的容液大致持平，这样可避免混匀实验过程中产生较大的振动。
3、打开电源开关，此时指示灯亮起。
轻轻向右调节转速旋钮，匀速升到所需要的速度。
4、漩涡混合仪主要用于混合液体操作。
现在多数款式都有支持点动模式和连续模式可选择，以适应不同实验的需求。
5、结束试验后，不要立即断掉电源，应向左转动调速旋钮，减小转速后，待转动减缓后再关闭电源。
6、使用完毕要及时清洁，平时应保管在干燥、通风、无腐蚀性气体
的地方。
旋涡混合器具有结构简单可靠，体积小，耗电省，噪音低等特点。
广泛应用于生物化学，基因工程，医学等实验需要。
对液体、液固、固固(粉末)混合，它能将你所需混合的任何液体、粉末以高速旋涡状形式快速混合，混合速度快、均匀、彻底。
EYH型二维运动混合机使用标准操作规程
EYH型二维运动混合机使用标准操作规程1．目的：建立YH型二维运动混合机使用操作规程，以规范YH型二维运动混合机操作过程。
2．范围：本规程适用于YH型二维运动混合机的操作管理。
3．职责：生产技术部：负责组织安排操作人员操作设备。
设备操作工：负责按SOP操作程序操作设备、SOP修订。
工程中心：负责培训、监督设备操作，审核SOP。
维修人员：负责设备运行中故障的排除。
设备管理员：负责收集记录设备运行档案。
现场QA：负责SOP执行的监督。
4．内容：4.1概述：本机是由浙江苏省范群化工机械有限公司生产制造，位于提取车间二层，本设备由两台电机带动混合料筒进行定向运转的混合设备，混合机在转动的同时又作定向摆动，混合筒内带有螺旋叶片，正转混合，反转出料。
4.2使用前的准备：4.2.1检查设备清洁状况，各部位应清洁干净，检查设备标识状况，有无清场合格证。
4.2．2检查电器系统是否完好，电动机有无受潮漏电。
4.2.3电源接通后，开空车检查各远动部位的运转情况是否正常，发现故障及时排除。
4.2.4取下“待用”和“已清洁”状态标志牌，挂上“正在运行中”状态标志牌。
4.2.8按照生产要求，领取原料。
4．3操作程序4.3.1打开进料口，关闭出料口蝶阀，装上物料，关紧进料口。
4.3．2打开“电源开关”旋钮，设定好摆定时间（分为三个时段；H为小时，M为分钟，S为秒）；此时，电气控制系统处于待机状态。
4.3.3分别按“滚动开”“摆动开”按钮，混合，摆动开始工作，同时“滚动开指示”“摆动开指示”灯亮。
4.3.4 待混合时间达到设定时间值时，混合自动停止工作，同时“传动关指示”灯亮。
4.3.5 如出料位置不对，可按“摆动关/电动”按钮，将出料口调整至适合最低点，然后按“出料开”按钮，“出料开指示”灯亮，出料开始。
4.3.6出料结束后，按“出料关”按钮，工作程序结束。
4.3.7进行清场并整理好各项相关记录并挂上设备状态标志牌。
4.4注意事项4.4.1本机在装料时，设备的电动机必须停机，以防电器失灵，造成不必要的事故。
氢化操作规范
氢化流程
氢化前 填写 实验记录本 氢化登记 检查 氢化系统
（“四查”）
搭氢化装置
(“三防”) （组长确认）氢化中加氢（“一确认”）
氢化反应 （定时检查）
氢化后
拆除 氢化装置
（“全关闭”）
完成 氢化登记
完成 实验记录
氢化登记
• 进行氢化操作前，需到氢化室将实验员姓 名；氢化台号；氢化反应类型；反应溶剂 及用量；催化剂种类及用量；理论吸氢量； 氢化开始时间等进行书面登记并告知巡查 员。 • 实验员、小组长均检查完氢化反应系统并 依次在氢化记录上签字后，方可进行氢化。 巡查员则需定时检查签字。若氢化需要过 夜，必须注明。 • 氢化反应结束后，需将实际吸氢量；氢化 结束时间进行登记。实验员、巡查员检查 结束后，氢化结束。
“四查” “三防” “一确认” “全关闭”
• • • • • • • 检查氢气钢瓶内是否有氢气 检查整个氢化体系气密性 检查柱内氢气是否需要更换 检查各阀门是否能正常使用 防止反应瓶中氢气压力过大将氢化头弹出，以致氢化反应直 接裸露于空气中，必须用皮筋（≥2根）将氢化头固定于搅拌 装置上 防止氢化体系与反应瓶连接时漏气，以致氢气外泄，必须用 凡士林涂抹各连接处 防止剧烈搅拌时反应瓶破损，以致反应物直接与空气接触及 外泄，必须在反应瓶外放置一个装有水的塑料盆，水面必须 高于反应液液面（当反应液体积超过500ml时，必须使用机 械搅拌） 确认氢气通路的单一性，必须将各三通处暂不使用的支管关 闭，保证氢气由钢瓶放出后通过单一路径进入气柱 按照“顺向打开，逆向关闭”原则，由钢瓶总阀开始逐一关 闭被打开的阀门和三通
~感谢~
• 感谢所有到场研发人员的支持，谢谢~
• 希望通过此次交流能够为大家进行氢化操 作提供帮助
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实验步骤说明**：1. 诱饵质粒pGBKT7-bait的构建2.诱饵融合蛋白BD-bait对AH109酵母的自激活作用及毒性的检测【重要的前期准备】3. 人胰腺cDNA文库的滴定和扩增【不用做了，直接用质粒】4. 转化AH109酵母后转化子（阳性克隆）的筛选【顺序转化或共转化】5. 蛋白质相互作用的验证【一对一验证】**2.诱饵融合蛋白BD-bait对AH109酵母的自激活作用及毒性的检测2.1 LacZ自激活的检测.2.2 HIS3自激活的检测2.3 融合蛋白对酵母菌的毒性检测4. 文库转化AH109酵母后转化子的筛选4.1 文库质粒转化pGBKT7-bait/AH109酵母使用标准的PEG/LiAc转化法将文库质粒转化入已含有pGBKT7-bait质粒的AH109酵母，涂布在SD-Ade-His-Leu-Trp平板上进行重组子筛选4.2 报告基因ADE2、HIS3和lacZ激活的验证ADE2、HIS3的激活：酵母能够在SD-Ade-His-Leu-Trp平板生长LacZ的激活：β-半乳糖苷酶显色反应呈蓝色4.3 pACT2-cDNA质粒的获取：①从酵母中抽提质粒，得到pGBKT7-bait和pACT2-cDNA的混合物②转化E. coli，涂布在含Amp的LB平板上，由于质粒不相容性，转化子中便只含有pACT2-cDNA质粒③从转化成功的E. coli中抽提出pACT2-cDNA质粒5. 蛋白质相互作用的验证【一对一验证】5.1 由于酵母双杂交的假阳性很普遍，所以筛选得到相互作用蛋白的cDNA序列之后，还应将分离出的各种pACT2-cDNA再次单独转化pGBKT7-bait/AH109酵母，即一对一验证，再次检测它们对报告基因的激活情况，排除假阳性5.2 将pACT2-cDNA质粒送测序，得到cDNA片段的序列，在NCBI数据库Blast查出其对应的蛋白质5.3 另外，还必须分析这些pACT2-cDNA质粒的构建情况。
由于商品文库构建的特殊性，要特别关注这些插入的cDNA片段是否发生了frameshift5.4 在上述验证都通过的情况下，仍然需要用诸如免疫共沉淀、GST-pull down、细胞共定位等实验来对这些相互作用来进行验证公司的这三个操作手册：相关质粒载体【更多详细信息见质粒图谱】酵母双杂交系统3的质粒信息Fusion 表位酵母筛选标记细菌筛选标记pGBKT7 DNA/bait c-Myc TRP1 kanamycin Control vectorspCL1 GAL4 LEU2 ampicillin图2.3 pGBKT7的限制性酶切图谱pGBKT7的多克隆位点图谱pCL1质粒图谱另外附上：文库质粒的载体pACT2 和AD-prey构建的载体pGADT7的信息：实验所用菌株基因型及其用途菌株 基因型用途E coli DH5αF-ф80dlacZ △M15 recAl endAl gurA96 thi-1hsdR17(rk-mk+) supE44 relA1 deoR△（lacZYA-argF ）U169用于质粒的扩增与转化AH109MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4, gal80LYS2 : : GAL1UAS-GAL1TATA-HIS3, GAL2UAS-GAL2TATA-ADE2, URA3 : : MEL1UAS-MEL1 TATA-lacZ用于酵母双杂交中的诱饵融合蛋白的宿主菌及酵母双杂交筛选AH109酵母菌的报告基因：AH109酵母菌的表型：培养液和固体培养基●大肠杆菌培养基及相关试剂 LB 培养基：蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠10g加蒸馏水至1000mL ，调整pH 到7.0，高温高压灭菌。
固体LB 培养基：在液体LB 培养基中加入琼脂粉至终浓度1.5-2.0％。
配制抗生素培养基时，氨苄青霉素的最终浓度为60μg/mL ，卡那霉素的最终浓度为50μg/mL 。
●酵母培养基及相关试剂【注意：含有葡萄糖，灭菌时间不要超过20min ，一般15min ，过长时间导致碳化变黑】无氨基酸酵母氮源（YNB）为Difco产品；L-Arginine HCl、L-Histidine HCl monohydrate、L-Lysine HCl、L-Uracill购自Sigma；腺嘌呤半硫酸盐（Adenine hemisulfate salt）购自Amresco；其它各种氨基酸均为国产分析纯。
YPD培养液：蛋白胨 20g酵母提取物 10g葡萄糖 20g加水至1000mL，调pH5.8，高温高压灭菌。
YPDA培养液：在1L YPD培养基中加入15ml 0.2％腺嘌呤半硫酸盐至终浓度为0.003％，调pH5.8，灭菌0.2%腺嘌呤半硫酸盐配方：0.4387g Ademin Sulfate 溶于200ml ddH2O 过滤灭菌，4℃保存固体YPDA培养基：YPDA培养液中加入琼脂粉至浓度为2.0％。
10×省却成分培养基（简称10×DO培养基）：按照下表的配方分别配制：一缺10×DO：10×DO/-Trp，10×DO/-Leu二缺10×DO：10×DO/-Trp/-His，10×DO/-Leu/-Trp三缺10×DO：10×DO/-Trp/-Leu/-His四缺10×DO：10×DO/-Trp/-Leu/-His/-Ade各种氨基酸在10×DO溶液中的浓度（按需要省去部分氨基酸）氨基酸10×浓度L-Adenine hemisulfate salt 200 mg/LL-Arginine HCl 200 mg/LL-Histidine HCl monohydrate 200 mg/LL-Isoleucine 300 mg/LL-Leucine 1000 mg/LL-Lysine HCl 300 mg/LL-Methionine 200 mg/LL-Phenylalanine 500 mg/LL-Threonine 2000 mg/LL-Tryptophan 200 mg/LL-Tyrosine 300 mg/LL-Uracil 200 mg/LL-Valine 1500 mg/L完全极限培养基(亦称缺陷型培养基、选择性压力培养基)：YNB 6.7g10×DO 100MLGlucose 20g加水至1000mL，调pH5.8，灭菌。
固体培养基：上述液体培养基加入琼脂粉至浓度2%。
酵母转化试剂【化学法转化】10×TE缓冲液： 0.1M Tris-HCl，10mM EDTA (pH 7.5)，高压灭菌。
50%(w/v)PEG3350：PEG3350 50g,用灭菌的去离子水溶解，至体积达100mL。
10×LiAc ：1.0M LiAc，用稀释的醋酸调至pH7.5，高压灭菌。
PEG/LiAc溶液（现用现配）：4/5体积的50%PEG3350, 1/10体积的10×TE缓冲液和1/10体积的10×LiAc 混匀，备用。
1×TE/1×LiAc溶液（现用现配）：1/10体积的10×TE缓冲液，1/10体积的10×LiAc，4/5体积的灭菌的去离子水，混匀，备用。
担体DNA 10mg/ml：0.5g 鲱鱼精DNA溶于50ml TE中，磁力搅拌3h，分装于1.5mlEP管，-20℃保存。
用时超声或沸水浴10minβ-半乳糖苷酶滤纸显色分析试剂X-gal储备液：X-gal溶于二甲基甲酰胺中，浓度20mg/mL，-20℃避光保存。
Z Buffer：Na2HPO4·7H2O 16.1g/LNaH2PO4·H2O 5.50g/LKCl 0.75g/LMgSO4·7H2O 0.246g/L调pH值至7.0，高压灭菌。
Z Buffer/X-β-gal混合液(现用现配)：Z缓冲液100mLβ-巯基乙醇0.27mLX-gal储备液 1.67mL感受态酵母菌的制备①将酵母菌AH109菌株划线接种于YPDA平板上，30℃培养3-5d后，平板上长出白色或粉红色克隆；②以灭菌的牙签挑取1个直径在2-3mm的克隆接种于装有1mL YPDA液体培养基的Eppendorf管中(若克隆直径小于2mm，应挑取数个克隆)，剧烈震荡5min以打散菌团；③将之转入含50mL YPDA培养基的三角瓶中，于30℃ 250rpm摇动培养16-18h，至酵>1.5)；母菌繁殖的稳定期(OD600值，④取30mL上述过夜培养物转入含300mL YPDA的三角瓶中，检查稀释培养物的OD600=0.2-0.3；若必要，加入更多的过夜培养物直至OD600应为0.4-0.6；⑤于30℃ 230rpm继续摇培养3h，此时OD600⑥收集培养菌液于50mL离心管中，1000×g，室温离心5min，弃上清；⑦以25-50mL灭菌TE或蒸馏水重悬细菌沉淀，1000×g，室温离心5min，弃上清；⑧用1.5mL新鲜制备的、灭菌的1×TE/1×LiAc重悬沉淀，即为感受态酵母菌。
质粒转化酵母转化实验分组组别质粒培养基预期表型阳性对照pCLl SD/-Leu 蓝色阴性对照pGBKT7 SD/-Trp 白色实验组pGBKT7-bait SD/-Trp 白色① 0.1μg诱饵质粒pGBKT7-bait、阴性对照质粒pGBKT7和阳性对照质粒pCLl分别与0.1mg鲱鱼精DNA于一新的1.5mL离心管中，混匀；②加入100μL酵母感受态细胞，震摇充分混匀；③加入600μL无菌的PEG/LiAc溶液，高速震摇以混匀；④30℃ 200rpm摇动30min；⑤加入70μL DMSO，轻轻颠倒混匀，切勿震摇；⑥42℃水浴中热激(热休克)15min，冰浴1-2min；⑦室温14000rpm离心5sec，移去上清，以500μL无菌的1×TE缓冲液重悬细胞；⑧取100μL涂布于相应的营养缺陷平板上，平放几分钟，至液体渗入琼脂中为止；⑨于30℃倒置培养，进行营养缺陷型筛选，直至克隆出现，一般需要2-4天。
β-半乳糖苷酶滤膜分析①用新鲜(如30℃生长2-4d)的，直径在1-3mm的酵母克隆进行β-半乳糖苷酶分析；②加入2-2.5mL新鲜配制的Z Buffer/X-gal溶液到干净的100mm的培养皿中；③将一张直径大小合适的滤纸放入上述盛有Z Buffer/X-gal混合液的培养皿中浸湿；④用镊子将一灭菌的干滤纸覆盖于培养基的表面，与克隆紧密接触。