碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(AMP缓冲液法)产品技术要求mairui

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碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求kemei

碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求kemei

碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中的碱性磷酸酶(ALP)的活性。

1.1包装规格1.2主要组成成分试剂1主要组分:AMP缓冲液 42 0mmol/L试剂2主要组分:4-硝基苯磷酸二钠 56mmol/L2.1外观2.1.1试剂1应为无色或淡黄色透明溶液,无混浊,无未溶解物。

2.1.2试剂2应为无色或淡黄色透明溶液,无混浊,无未溶解物。

2.2装量液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度:ALP试剂盒在波长395~415nm处测定试剂的空白吸光度值,应不大于0.8。

2.3.2试剂空白吸光度变化率:ALP试剂盒在波长395~415nm处测定试剂的空白吸光度变化率,应不大于0.0050。

2.4分析灵敏度测试120U/L碱性磷酸酶时,吸光度变化率应不小于0.01。

2.5准确度用本公司ALP试剂盒和已上市ALP试剂盒同时测定40个临床样本,相关系数r2应不小于0.95,在[20,100]U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;在(100,800]U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。

2.6精密度2.6.1重复性重复测试(120±12)U/L的样本,所得结果的变异系数CV应不大于5%;2.6.2批间差测试(120±12)U/L的样本,所得结果的批间相对极差应不大于10%。

2.7线性范围ALP试剂盒在[20,800]U/L范围内,线性相关系数(r)应不小于0.990;在[20,100]U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;在(100,800]U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。

2.8稳定性原包装的ALP试剂盒在2℃~8℃避光保存,有效期为12个月。

在ALP试剂盒有效期满后2个月内,分别检测2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项,结果应符合各项目的要求。

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠比色法)说明书

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠比色法)说明书
附录:参考标准曲线范围:测定 Phenol 标准在 5~50U/L 金氏单位时,通过酶标仪 505nm 测 定其吸光度多在 0.1~1.0 之间,标准曲线参考如下:
注意:由于检测仪器和操作手法等条件的不同,参考值范围会有波动,该值仅供参考,对于 要求精确计算 ALP 含量的,可以进行多点重复测定;根据测定经验显示,标准品浓度在 5U/L 以下,标准品浓度在 100U/L 以上,标准曲线会有偏差。
以系列 Phenol 标准(1~6 号)对应的金氏单位(10、20、30、40、50U/L)为横坐标,以相应的 A 标准(1~6 号)为纵坐标,绘制标准曲线。以 A 测定-A 对照的差值为实际的吸光度,用该差 值与标准曲线进行对比,求出酶活力单位。
参考区间(37℃):
健康成年人 健康儿童
3~13 金氏单位 5~28 金氏单位
注意事项: 1、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。 2、如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定,但应注意 96 孔板最大检测体积。 3、所测样品的值高于标准曲线的上限,应稀释样品后重新测定。 4、空白管如果显红色,说明 ALP 显色液不可用,应丢弃。 5、加入显色基液时应迅速,并且及时混匀,否则显色不充分。 6、如无法检测 510nm,亦可检测 500~530nm 范围内吸光度。 7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件 4℃ 避光 4℃ 避光 4℃ 避光 4℃ 避光 4℃ 避光
自备材料: 1、离心管或小试管、水浴锅或恒温箱 2、分光光度计、比色杯 3、ddH2O、PBS 或生理盐水
操作步骤(仅供参考): 1、准备样品: ①细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要可用 PBS 或生理盐水进行适当匀 浆,一般细胞数量在 106 以上,组织应在 100mg 以上,3000~4000rpm 离心取上清,-20℃ 冻存,用于碱性磷酸酶的检测。 ②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定, 尿液通常也可以直接用于测定,-20℃冻存,但为了消除样品本身颜色的干扰,需设置加了 血浆或血清但不加底物的对照。 ③高活性样品:如果样品中含有较高活性的碱性磷酸酶,可以使用原有的裂解液或 PBS 等进 行稀释,如鸡血清、血浆可稀释 5~10 倍后检测。

碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求sainuopu

碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求sainuopu

碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)适用范围:用于体外定量测定人体血清样本中碱性磷酸酶的活性。

1.1 试剂盒包装规格试剂1:1×25ml,试剂2:1×5ml;试剂1:2×60ml,试剂2:2×12ml;试剂1:3×40ml,试剂2:3×8ml;试剂1:4×60ml,试剂2:4×12ml;试剂1:2×400ml,试剂2:1×160ml;试剂1:2×40ml,试剂2:2×8ml。

1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1:无色澄清液体;试剂2:浅黄色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度在37℃、405nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.6。

2.3.2试剂空白吸光度变化率在37℃、405 nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度变化率(△A/min)应不大于0.005。

2.4 分析灵敏度测定活性为120U/L样本时,吸光度变化率(ΔA/min)应不小于0.018。

2.5 线性范围在[25,750]U/L线性范围内,线性相关系数r不小于0.990。

(100,750]U/L范围内的线性相对偏差应不超过±10%;[25,100]U/L时线性绝对偏差应不超过±10 U/L。

2.6 重复性重复测试三份高中低浓度的样本((50±10)U/L、(120±12)U/L、(500±50)U/L),所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。

2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本(120±12)U/L,测定结果的批间相对极差应不大于10%。

2.8 准确度相对偏差:相对偏差应不超过±10%。

2.9 稳定性效期稳定性:试剂盒在2℃~8℃下有效期为12个月,取到效期后的试剂盒进行检测,试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。

碱性磷酸酶测定试剂(ALPAKP)

碱性磷酸酶测定试剂(ALPAKP)

北京华宇亿康生物工程技术有限公司Co-Health (Beijing )Laboratories Co., Ltd. 液体生化试剂使用说明书_碱性磷酸酶测定试剂(ALP/AKP ) (IFCC ,AMP 缓冲液)【注册产品标准】YZB/国 1959-2003 ◇ 【医疗器械注册证号】京药监械(准)字2005第2400405号本试剂适用于人血清或血浆中碱性磷酸酶活性的体外定量分析。

临床意义碱性磷酸酶存在于体内多种组织和器官,其病理性变化表现在:增加:(1) 肝脏疾病如胆汁淤积和肝硬化;(2) 骨骼疾病如软骨病、佝偻病、成骨肉瘤; (3) 恶性肿瘤。

减少:(1) 停止生长(克汀氏病、软骨发育不全); (2) 先天性低磷酸酶血症。

方法学原理磷酸对硝基苯酚(4-NPP )在碱性磷酸酶的作用下,将其磷酸基转移到2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP )受体分子上,释放出的对硝基苯酚(4-NP )在碱性溶液中分子重排形成黄色醌,可在405nm 下检测。

黄色醌形成速率与ALP 活力成正比。

ALP 4 -NPP + H 2O → 4 -NP + 磷酸 Mg 2+, 碱性 试剂组成试剂1(R 1) 试剂2(R 2)AMP 0.35mol/L 4 -NPP 80mmol/L MgCl 2 10.5mmol/L 稳定剂 适量 适用仪器ZYA-1003:适用于日立7060/7150、岛津7200/ 7300/8000全自动生化分析仪;ZYB-1003:适用于日立7170 A /7170、奥林巴斯AU400 /600/1000全自动生化分析;ZYC-1003:适用于日立7020全自动生化分析仪; ZYD-1003:适用于贝克曼CX 系列全自动生化分析仪;ZYE-1003:适用于东芝全自动生化分析仪;TYA-1003、TYB-1003、TYC-1003:适用于其它全自动生化分析仪及各类半自动生化分析仪。

试剂贮存及稳定性试剂自生产日期起2—8℃避光存放可稳定12个月;R 1、R 2按4:1比例混为工作液2—8℃避光可稳定4周。

小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒产品简介

小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒产品简介

小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒产品简介小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒产品简介小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒实验原理小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被小鼠碱性磷酸酶(ALP)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的小鼠碱性磷酸酶(ALP)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样本处理及要求1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。

将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。

推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。

为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。

最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

Elabscience碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒使用说明书

Elabscience碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒使用说明书

(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)Elabscience®碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒Alkaline Phosphatase (ALP) Activity Assay Kit产品货号:E-BC-K091-M产品规格:48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器:酶标仪(500-530 nm)使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。

用途本试剂盒适用于检测动物血清(浆)、体液、组织及细胞中碱性磷酸酶的活力。

检测原理在pH=10的反应液中,碱性磷酸酶催化磷酸苯二钠水解,生成游离酚和磷酸。

酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉结合,并经铁氰化钾氧化生成红色的醌的衍生物,根据红色的深浅计算酶活的高低。

本试剂盒检测组织和细胞样本时,需测定总蛋白浓度,推荐使用BCA法(货号:E-BC-K318-M)。

提供试剂和物品说明:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同测试盒中的试剂不能混用。

对于体积较少的试剂,使用前请先离心,以免量取不到足够量的试剂。

所需自备物品仪器:酶标仪(500-530 nm,最佳检测波长520 nm)、涡旋混匀仪、37℃恒温箱。

耗材:枪头(1000 µL,200 µL,10 μL)、EP管(10 mL,2 mL)。

试剂:双蒸水、PBS(0.01 M,pH 7.4)或生理盐水(0.9% NaCl)试剂准备①试剂盒中的试剂平衡至室温。

②工作液的配制:按试剂一:试剂二为1:1的体积比混匀,现用现配,未用完的试剂2-8℃避光可保存1天。

③不同浓度标准品的稀释:样本准备①样本处理血清血浆等液体样本:直接测定。

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求bjiuqiang

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求bjiuqiang

碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)适用范围:用于体外定量测定人血清中的碱性磷酸酶的含量。

1.1 包装规格包装规格见表1。

表1 包装规格1.2 主要组成成分主要组成成分见表2。

表2 主要组成成分2.1 外观试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂2为淡黄色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。

2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度试剂空白:A405nm(主)/A600nm(副)下测定空白吸光度应≤0.5000。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率用生理盐水作为样品加入试剂测试时,试剂空白吸光度变化率(ΔA/min)应不大于0.005。

2.4 准确度与已上市产品进行比对试验:在[3,1702] U/L区间内,相关系数r≥0.975,在[3,80]U/L区间内测定的绝对偏差应不超过±8U/L,在(80,1702]U/L区间内测定的相对偏差应不超过±10%。

2.5 分析灵敏度测试120U/L碱性磷酸酶时,其吸光度变化率在0.0240~0.0480之间。

2.6 线性区间测试血清样本,试剂线性在[3,1702]U/L区间内:a) 线性相关系数︱r︱应不小于0.990;b) [3,80]U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±8U/L;(80,1702]U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。

2.7 测量精密度2.7.1 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得结果的重复性(变异系数,CV)应不大于5%。

2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差(R)应不大于10%。

2.8 稳定性试剂盒在2℃~8℃密封避光保存,有效期为18个月。

取到效期后的样品检测外观、试剂空白、准确度、线性区间应符合2.1、2.3、2.4、2.6的要求。

碱性磷酸酶活性测定试剂盒说明书

碱性磷酸酶活性测定试剂盒说明书

碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP/ALP)活性测定试剂盒说明书分光光度法50管/24样注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶,在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。

AKP/ALP 广泛分布于人体各脏器中,以肝脏为主。

测定原理:在碱性环境中,AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚;酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510 nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。

自备仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制:试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体×1瓶,4℃避光保存。

试剂四:液体×1瓶,4℃避光保存,未变成蓝绿色之前均可使用。

标准品:液体×1支(EP管中),2 μ mol/mL酚标准液,4℃保存。

粗酶液提取:1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,4℃、8000g离心10min,取上清液待测。

2. 细菌或细胞:按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3. 血液可直接测定,或者适当稀释后测定。

测定步骤:1. 分光光度计预热30min,调节波长到510 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。

3. 空白管:取EP管,加入20μL蒸馏水,200μL试剂二,200μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂四600μL,混匀后于510 nm测定吸光度,记为A空白管。

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2性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体,无沉淀、悬浮物和絮状物。

2.2净含量
液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
试剂以水为空白在37 ℃±1℃,405nm 波长条件下,吸光度应小于 2.5 A。

2.3.2试剂空白吸光度变化率
试剂以水为空白在37 ℃±1 ℃,405 nm 波长条件下,吸光度变化率应小于0.007 A/min。

2.4分析灵敏度
当样本浓度为75 U/L 时,吸光度变化率应不小于0.014 A/min。

2.5线性范围
试剂盒在(5~800)U/L 范围内:
a)线性相关系数r 应不小于0.9900;
b)当样本浓度不大于120 U/L 时,线性绝对偏差应不大于±12.0 U/L;当样本浓度大于120 U/L 时,线性相对偏差应不大于±10.0%。

2.6测量精密度
2.6.1重复性
变异系数:CV 应不大于 3.0%。

2.6.2批间差
相对偏差:R 应不大于 5.0%。

2.7准确度
测定校准品,测定结果与靶值的相对偏差应不大于±10.0%。

2.8分析特异性
血红蛋白浓度在500 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在30 mg/dL 内、内源性酯浓度在500 mg/dL 内、胆红素浓度在40 mg/dL 内,对试剂检测结果的偏差影响应在±10%以内。

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