生化检验辅导：腺苷脱氨酶(ADA)测定及意义
腺苷脱氨酶测定
腺苷脱氨酶测定检验科于2012年7月开展血液ADA检测，该试验主要用于辅助诊断肝脏疾病，指导临床治疗，取得了良好的效果。
现总结如下：1.概述腺苷脱氨酶是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制。
ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。
腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。
测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。
ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。
ADA广泛分布于人体各组织中，T淋巴细胞含量尤其丰富。
血清ADA活性升高见于急性肝炎、酒精性肝纤维化、慢性活动性肝炎、肝硬化、病毒性肝炎和肝细胞瘤病人，结核病渗出液中也可见ADA活性增高。
结合ALT或γ-GT，检测病人血清ADA 活性对肝脏疾病诊断更具有独特价值。
2.检测仪器与原理：检测所用仪器为日立7180全自动生化分析仪，检测原理：ADA 催化腺嘌呤核苷脱氨转变为次黄嘌呤核苷，再经嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）作用生成次黄嘌呤。
次黄嘌呤经次黄嘌呤氧化酶（XOD）作用转变为尿酸和过氧化氢（H2O2）。
H2O2在过氧化物酶（POD）存在的情况下，可与N-乙醛-N-（2-羟基-3-硫丙基）-3-甲基苯胺（EHSPT）和氨基安替比林（4-AA）生成醌染料，醌染料生成速率与ADA含量相关。
3.技术优点：该技术具有测定精密度高，抗干扰能力强，标本中胆红素≤342umol/L，血红蛋白≤200mg/dl，甘油三酯≤8.47mmol/L，抗坏血酸≤4mg/dl 及NH4+对本试剂测定无影响，适合自动化快速测定的特点，为临床常规开展ADA检测应用创造了有利条件。
4.参考范围：4-24U/L，或66-398nkat/L。
ADA 酶比色法
腺苷脱氨酶（ADA ）测定试剂盒（酶比色法） 使用说明书【产品用途】本试剂用于测定血清、胸腹水、脑脊液中的腺苷脱氨酶活性。
【临床意义】肝脏疾病时，本酶活性往往升高，有助于黄疸的鉴别诊断。
在阻塞性黄疸时，此酶活性升高很少，而在肝实质性损伤时，此酶和转氨酶往往同时升高，特别在慢性活动性肝炎和肝硬变时，转氨酶阳性率较低，增高幅度也不明显，而ADA 活性的阳性率可达90%左右，增高程度也较明显。
同时ADA 检测对白血病、伤寒、出血热也有辅助诊断作用。
测定胸腹水及脑脊液标本中的ADA 活性，有鉴别诊断价值。
结核性胸腹水中ADA 活力显著高于癌症及炎症胸腹水中ADA 活力，对早期诊断结核性胸、腹膜炎有较高的敏感性和一定的特异性。
此外，脑脊液ADA 检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标，结核性脑膜炎ADA 活性升高，病毒性脑膜炎不升高。
【适用范围】液体双试剂，即开即用，自动化分析仪用。
【产品规格】R 1 50ml ×2 R 2 50ml ×1【试剂成份】R 1Tris-HCl pH8.0 50mM4-AA 2mM PNP 0.1kU/mLXOD 0.2kU/mL POD 0.6kU/mL 稳定剂 R 2 Tris-HCl ph4.0 50mM 腺苷 10mMEHSPT 2mM【检测原理】腺苷在腺苷脱氨酶作用下脱氨基形成次黄苷，次黄苷在PNP 作用下生成次黄嘌呤，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶（XOD ）作用下转化为尿酸和过氧化氢（H 2O 2），H 2O 2与EHSPT 和4-氨基安替比林（4-AA ）反应生成醌色物，显色强度与ADA 活性成正比。
腺苷−−−→−ADA次黄苷 + NH 3 次黄苷 + Pi −−→−PNP次黄嘌呤 + 核酸-1-磷酸 次黄嘌呤 + 2H 2O + 2O 2−−−→−XOD 尿酸+ 2H 2O 22H 2O 2 + 4-AA + EHSPT −−→−POD醌亚氨染料+ H 20【样本采集】新鲜非溶血血清或血浆，ADA 在4℃时可稳定1周。
腺苷脱氨酶测定临床意义
腺苷脱氨酶测定临床意义
郭文杰
【期刊名称】《实用医技杂志》
【年(卷),期】2006(13)2
【摘要】腺苷脱氨酶（ADA）为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶，其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。
ADA广泛存在于各组织中，以盲肠、小肠黏膜、脾脏、胸腺中含量最高，肝脏、肺、肾、心脏、骨骼肌、神经组织等处含量较低，肝脏含量约为小肠的7％～10％。
肝内ADA90％存在与细胞浆水溶性部分，其余在细胞核内。
此外，血细胞（红细胞、粒细胞、淋巴细胞）内ADA活性约为血液中40倍～70倍，因此测定ADA时应避免溶血。
【总页数】2页(P321-322)
【作者】郭文杰
【作者单位】运城市中心医院,山西,运城,044000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.6
【相关文献】
1.肝硬化患者血清前清蛋白、总胆汁酸、腺苷脱氨酶、胆碱酯酶测定的临床意义[J], 马丽;涂斌
2.慢性肝病患者血清腺苷脱氨酶测定的临床意义 [J], 石鹏辉;李伟民;李永勤
3.糖尿病并发症患者血清腺苷脱氨酶测定的临床意义 [J], 朱征;杨敏;黄倩
4.乙肝患者血清腺苷脱氨酶活性测定的临床意义 [J], 孙福明
5.脑脊液腺苷脱氨酶测定对结核性脑膜炎诊断的临床意义 [J], 谢东玲
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腺苷脱氨酶(ADA)
腺苷脱氨酶（ADA）参考值：0-15U/L 海丰参考区间4~24U/L介绍：腺苷脱氨酶(ADA)为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶，其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。
ADA广泛存在于各组织中，以盲肠、小肠黏膜、脾脏、胸腺中含量最高，肝脏、肺、肾、心脏、骨骼肌、神经组织等处含量较低，肝脏含量约为小肠的7%~10％。
肝内ADA90％存在与细胞浆水溶性部分，其余在细胞核内。
此外，血细胞(红细胞、粒细胞、淋巴细胞)内ADA活性约为血液中40倍~70倍，因此测定ADA时应避免溶血。
血清中的ADA主要来自肝脏，所以肝细胞损伤或膜通透性增强，均可使血中酶活性增高，故可依据该酶活性增高或降低反映肝细胞损伤和恢复程度。
血清腺苷脱氨酶（ADA）正常值：(1)酶速率法(37℃)：健康成年人：7.7-19.3 U/L(2)分光光度法：<25 U/L(3)比色法：健康成年人为：5～25 U/L诊断参考：肝脏疾病：ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。
一．ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与AIT或GGT等组成肝酶谱。
（1）用于判断急性肝损伤及残留病变急性肝炎时ALT明显升高。
ADA仅低度，中度升高。
但重症肝炎发生酶胆分离时，尽管ALT不高，而ADA常明显升高。
而ALT恢复正常，ADA持续升高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。
（2）协助诊断慢性肝病在反映慢性肝损伤时ADA较ALT为优。
慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高，因而可判断慢性肝病的程度。
另外，慢性活动性肝炎活性明显高于慢性迁延性肝炎。
故可用于二者的鉴别诊断。
（3）有助于肝纤维化的诊断ADA活性差异与肝细胞损害关系不大，与肝纤维化程度相关。
肝纤维化程度增加，ADA活性增加。
（4）有助于黄疸的鉴别据文献报道，阻塞性黄疸血清ADA活性明显低于肝细胞性黄疸及肝硬化伴黄疸。
血清α-岩藻糖苷酶与血清腺苷脱氨酶（ADA）
血清α-岩藻糖苷酶与血清腺苷脱氨酶（ADA）
血清α-岩藻糖苷酶检测的临床意义：
1.AFU的敏感性高于AFP，特异性差于AFP。
两者的检测无明显的相关性，但联合检测可以提高肝癌的检出率。
特别是对AFP阴性和小细胞肝癌的诊断价值更大。
原发性肝癌（PHC）患者的血清中AFU 活性不仅高于正常对照，而且显著高于转移性肝癌，肝硬化等疾病。
2. 原发性肝癌与慢性肝炎，肝硬化之间的鉴别诊断。
在慢性肝炎，肝硬化患者的血清中AFU一般仅轻度升膏，且随疾病的治愈而好转降低。
而原发性肝癌患者血清中的AFP持续升高，且幅度较大。
3. 血清中的AFU随妊娠周数的增加而增加，但在自然分娩或人工终止妊娠后回迅速下降，5天后降至正常水平。
4. 有相关的试验证明AFU的检测与CA125的检测对卵巢上皮细胞癌的灵敏度和特异性基本一致，但还需要进一步的证明。
血清腺苷脱氨酶（ADA）检测的临床意义：
ADA在良恶性难辨的渗出液鉴别诊断上有重要的价值。
国内外的研究表明，ADA对诊断结核性渗出液的特异性与敏感性明显优于活检和细菌学方
法。
在结核性胸腹水中ADA的活性明显增高，而癌性胸腹水不增高，血清ADA二者无明显差别。
此外，脑脊液ADA的检测可做为中枢神经系统疾病的
诊断和鉴别诊断，结核性脑膜炎显著增高，病毒性脑炎不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍微增高。
腺苷脱氨酶(ADA),试剂标准操作规程(SOP)--ADA
试剂标准操作规程目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理腺苷在腺苷脱氨酶作用下脱氨基形成黄苷。
黄苷在PNP作用下生成次黄嘌呤，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶（XOD）作用下转化为尿酸和过氧化氢（H2O2）。
H2O2与EHSPT和氨基安替比林（4-AA）反应生成有色染料，产物的颜色与ADA活性成正比。
ADA腺苷+H2O -----------------------黄苷+ 氨PNP黄苷+ 磷酸------------------------次黄嘌呤+ 核糖-1-磷酸XOD次黄嘌呤2H2O2+2O2----------------------尿酸+H2O2POD2H2O2+4-AA+EHSPT -----------------------醌式染料2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆使用EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。
2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，置洁净试管加盖低温保存。
ADA的临床意义
ADA的临床意义ADA的临床意义发布时间：2013-04-10 10:16:52 浏览次数：5 发布人：张继岭（检验科）ADA的临床意义一 ADA的生物学特性及来源腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase, ADA)是一种嘌呤核苷分解代谢中的重要酶类，可特异性催化腺嘌呤核苷产生不可逆脱氨反应生成次黄嘌呤核苷, 再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤, 后者在嘌呤氧化酶作用下生成代谢终产物尿酸经肾脏排出体外。
ADA广泛分布于人体各组织中，以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高，肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。
血液中ADA主要存在于红细胞、粒细胞和淋巴细胞，其活性约为血清的40～70倍，T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活性更高。
二 ADA的临床意义ADA与机体的细胞免疫功能有重要关系，测定血液、体液中的ADA对于某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究具有重要意义。
下面就ADA的临床价值进行简要概述。
（1）肝脏疾病ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。
血清中的ADA活性测定可用于：①判断急性肝损伤及残留病变，急性肝炎时，ADA轻、中度升高，但重症肝炎发生酶胆分离时，ADA明显升高。
急性肝炎后期，ADA增高率高于ALT，其恢复正常时间也较后者为迟， ALT恢复正常而ADA持续升高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。
②协助诊断慢性肝病，可作为慢性肝病的筛选指标。
慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高。
其阳性率达85%～90%，慢性活动性肝炎ADA活性明显高于慢性迁延性肝炎，可用于二者的鉴别诊断。
③有助于肝纤维的诊断④有助于黄疸的鉴别，阻塞性黄疸血清ADA活性及阳性率均明显低于肝细胞性黄疸及肝硬化伴黄疸者。
（2）结核的诊断和鉴别诊断体液中ADA活性水平测定是诊断和鉴别诊断结核病的一个重要辅助手段。
结核患者的血清、胸腹水、脑脊液、支气管肺泡灌洗液中的ADA活性都有不同程度地升高。
血清腺苷脱氨酶ADA测定
血清腺苷脱氨酶ADA测定1.实验原理应用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)，黄嘌呤氧化酶(XOD)和过氧化物酶(POD)反应连续监测法。
ADA酶解腺苷(Adenosine)脱氨产生次黄苷(Inosine)；再通过偶联PNP的作用，生成次黄嘌呤(Hypoxanthine);后者在XOD氧化作用下生成尿酸和过氧化氢；最后在POD的作用下H2O2再与N-乙基-N-(2-羟基-3-硫丙基)-3-甲基苯胺(EHSPT)、4-氨基安替比林(4-AAP)反应(Trinder氏反应)，生成紫红色的有色醌。
通过测量有色醌550nm处吸光度上升的速度来测算ADA的活性。
ADAAdenosine + H2O Inosine + NH3PNPInosine + Pi Hypoxanthine + Ribose 1-phosphateXODHypoxanthine + 2H2O + 2O2 Uric acid + 2H2O2POD2H2O2 + 4-AA P+ EHSPT 4H2O + Quinone dy e2. 标本：2.1 病人准备：新鲜血清，采血后应及时分离，避免溶血。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。
3. 标本存放：血清，采血后应及时分离避免溶血，ADA在4℃稳定一个星期。
4. 标本运输：冰冻条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血等存运输的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：亚太ADA试剂盒（H013 090920 试剂1＋试剂2）6.1.1 试剂组成6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为12个月。
试剂必需避光保存。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：试剂出现颗粒或浑浊，被视作变质，应停止使用。
6.1.5 注意事项：试剂请勿直接接触皮肤、眼睛，如有接触，请用大量清水清洗。
请勿吞服。
6.2 校准品：使用亚太提供的专用校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪项目测定参数.SOP文件。
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1．正常参考值：
速率法：健康成年人：0-19.6 U/L。
比色法：按ADA的习用单位计算，健康成年人为：0-25 U/L。
按国际单位计算，健康成年人为：≤30 U/L。
2．临床意义
血清ADA活性增高见于：
①肝脏疾病：急性黄疸性肝炎，肝细胞出现损伤，在黄疸尚未出现前，可见增高。
因ADA分子量较ALT小，当肝细胞轻度受损时ADA比ALT先释入血内。
慢性肝炎活动期，慢性迁延性肝炎升高明显；肝硬化、原发性肝癌时，ADA活性也升高。
②肿瘤引起的阻塞性黄疸、前列腺癌和膀胱癌、网状细胞瘤、淋巴瘤、溶血性贫血、风湿热、伤寒、痛风、重症地中海贫血、骨髓性白血病、结核、自身免疫性疾病、传染性单核细胞增多症和心力衰竭等均可引起此酶升高。
③结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高，而血清中ADA活性二者无明显差别，故测定胸腹水中ADA活性有助于将两者鉴别。
④结核性脑膜炎ADA显著增高，而病毒性脑膜炎则不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍增高。
所以脑脊液ADA检测可以作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。