透射电镜的构造与工作原理PPT(共57页)

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透射电子显微镜 ppt课件

透射电子显微镜  ppt课件
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一.点分辨本领的测定
将铂、铂-铱或铂-钯等金属或合金,用真 空蒸发的方法获得粒度为5~10埃,间距为2~10 埃的粒子,将其均匀地分布在火棉胶(或碳) 支持膜上,在高放大倍数下拍摄这些粒子的像, 并经光学放大(5倍左右),从照片上找出粒 子间最小的间距,除以总放大倍数,即为相应 电子显微镜的点分辨本领。
荧光屏有较高的分辨率,因此可用光学放 大镜进一步放大。
ppt课件
21
二. 成像方式
TEM有两种基本成像模式: 衍射成像——晶体结构同位分析 显微成像——微观组织形貌观察
1. 显微成像
⑴ 高放大倍数成像:中间镜以物镜像为物,投影
镜又以中间镜像为物,成像于荧光屏,结果可
以获得几万至几十万放大倍数电子像。
使用静电透镜(用电场聚焦)需要高 压,给设备的设计和操作带来不便。
故现代电镜中静电透镜只在电子枪中使 用;而聚光镜、物镜、中间镜和投影镜则 都采用电磁透镜(用磁场聚焦),可以通 过改变激磁电流来调节透镜的聚焦能力。
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4、 TEM和光学透射显微镜的异同
相同点: (1)光学成像原理相同; (2)都能用于形貌分析。 不同点: (1)光源不同; (2)聚焦透镜不同; (3)TEM中有中间镜; (4)成像屏幕不同; (5) TEM镜筒中要保持高真空;
晶体样品通过物镜在后焦面上形成 衍射像,调节中间镜焦距,使其物平面 与物镜后焦面重合,可以最终在荧光屏 上形成二次放大的衍射图像。有意义的 衍射像必须明确它是来自样品那个区域 的衍射波,这就是选区衍射。
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一.样品台
1. 功能:承载样品,并使样品能在物镜极靴孔 内平移、倾斜、旋转,以选择感兴趣 的样品区域或位向进行观察分析。

透射电镜(TEM)原理详解(课堂PPT)

透射电镜(TEM)原理详解(课堂PPT)

G t 36
当A、B两区不是由同一种物质组成时,衬
度不仅取决于样品的厚度差,还取决于样品的
原子序数差。
同样的几何厚度,含重原子散射作用强,
相应的明场像暗;反之,由轻原子组成的区域,
散射作用弱,相应的明场像亮.
复型样品的制备中,常采用真空镀膜投影
的方法,由于投影(重)金属或萃取第二相粒
的圆盘,圆盘面垂直于入射电
子束,并且每个入射电子射中
一个圆盘就发生偏转而离开原
入射方向;未射中圆盘的电子
则不受影响直接通过。
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散射截面的大小
按Rutherford模型,当入射电子经过原子核附近时,
其受到核电场的库仑力-e2Z/rn2作用而发生偏转,其轨
迹是双曲线型。散射角n的大小取决于入射电子和原
0.2~0.3nm
有效放大倍数
103×
106×
物镜孔径角
约700
<10
景深
较小
较大
焦长
较短
较长
像的记录
照相底板
照相底板
正是由于 α很小, TEM的 景深和焦 长都20很大
• TEM成像系统可以实现两种成像操作:一种是将物 镜的像放大成像,即试样形貌观察;另一种是将物 镜背焦面的衍射花样放大成像,即电子衍射分析。
度为ρ和厚度为t的样品上,若入射电子数为n,通过
厚度为dt后不参与成象的电子数为dn,则入射电子散
射率为
单个原子的散射截面
dn N dt A 0
每单位体积样品的散射面积
n
M
单位体积样品中包含的原子个数
厚度为dt的晶体总散射截面
将上式积分,得:
N
N
0
exp

透射电子显微镜的工作原理及标本制课件-文档资料

透射电子显微镜的工作原理及标本制课件-文档资料

固定方法—戊二醛-锇酸双固定
双固定法:指用戊二醛对样品前固定,漂洗后使用锇酸对样品 进行后固定,这种使用两种化学试剂分别前后对样品进行固定 的方法称为双固定法。 先用2.5%戊二醛固定2h以上。 缓冲液多次清洗(pH7.4 0.2mol/L磷酸缓冲液洗三次,15min/ 次)。
1%锇酸固定2h。
3脱水
透射电镜的结构 透射电镜主要由电子光学系统、 真空系统和供电系统三部分组成。其 中电子光学系统通常称为镜筒,是透 射电子显微镜的核心,它又可以分为 照明系统、成像系统和观察记录系统。
TEM
电子光学系统(镜筒) 供电系统 真空系统
照明部分
成像放大部分
显像部分
电子枪:TEM电子源
物镜、中间镜、投影 镜
理想固定剂
1)渗透力强,穿透速度快,能迅速达到组织块的各部 位,立即杀死细胞,以尽量减小死后变化 2)稳定细胞成分和结构,以保证后续的各种处理中物 质不溶解、不丢失 3)对细胞超微结构没有损伤,保证电镜图像的真实性 4)能保存一定的酶活性,以供细胞化学的测定 5)最好提供一定的反差 ,并有防腐作用
切片操作步骤: 装块→装刀→对刀→加水→切片→捞片
切片厚度的判断
颜色 暗灰色 铅灰色 银灰或银白 米黄、金黄 紫色(蓝) 厚度(Å) <400Å 400~500 500~700 700~1000 1000以上 切片 厚度 太薄 较薄 适中 较厚 不能用 分辨 率 高 高 好 低 反差 小 小 好 好
常用固定剂
1)锇酸(OsO4)
优点: ⑴ 几乎和细胞内所有成分发生化学结合 ⑵ 对氮具有较强亲和力,对含有蛋白质的细胞结构固定作用良 好 ⑶ 可保存脂肪,形成脂肪-锇复合物 ⑷ Z=76,增加膜的反差 ⑸ 对磷脂蛋白、核蛋白保护很好 锇酸缺点: ⑴ 不能固定糖元、碳水化合物、核酸,对微管固 定效果差 ⑵ 酶的钝化剂,不能用于细胞化学研究 ⑶ 分子量大,渗透能力差,要求组织块小 ⑷ 固定时间不宜过长 ⑸ 可与乙醇、醛类氧化还原反应生成沉积

《透射电镜原理》课件

《透射电镜原理》课件
透射电镜的图像具有高分辨率, 能够清晰地展示样品的细节和结
构。
立体感强
透射电镜的图像具有很强的立体感 ,能够呈现出样品的层次感和深度 。
色彩丰富
透射电镜的图像可以通过不同的染 色技术呈现出丰富的色彩,增强视 觉效果。
透射电镜的图像解析步骤
图像获取
通过透射电镜获取样品的图像。
特征提取
从图像中提取出样品的主要特征,如细胞核 、细胞质等。

透射电镜的维护与保养
定期清洁透射电镜的镜筒和样品室,保持清洁度。 定期更换透射电镜的灯丝,保证电子源的正常工作。
检查透射电镜的真空系统和气体系统是否正常工作,确 保电子束传输畅通无阻。
定期进行校准和维护,确保透射电镜的各项参数准确性 和稳定性。
透射电镜的图像解
05

透射电镜的图像特点
高分辨率
复型样品制备
总结词
复型样品制备是为了保护原样品,将其复制成另一种材料并制成薄膜,以便在电镜中观察其微观结构 。
详细描述
复型样品制备通常采用硅橡胶、环氧树脂等材料作为基质,将原样品放置在基质中,经过聚合、固化 等步骤后,将原样品取出,留下一个与原样品相似的薄膜。制备过程中需要注意控制温度和压力,以 确保复型样品的准确性和稳定性。
冷冻样品制备
总结词
冷冻样品制备是为了保持生物样品的活 性和天然状态,将样品快速冷冻并制成 薄膜,以便在电镜中观察其微观结构。
VS
详细描述
冷冻样品制备通常采用液氮等低温介质将 生物样品迅速冷冻,然后将其转移到冷冻 切片机中进行切片。制备过程中需要严格 控制温度和切片的厚度,以确保样品的结 构和成分不受影响。同时,冷冻样品制备 还可以用于观察细胞内部的结构和动态过 程。

材料分析方法透射电镜的结构最全PPT资料

材料分析方法透射电镜的结构最全PPT资料
L ② 当入射电子运动偏离轴线(即以速度v平行于线圈轴进入透镜磁场时,电子受磁场力的作用,将产生三个运动分量:轴向运动(速度
vz)、绕轴旋转(vt)和指向轴的运动(vr),作圆锥螺旋近轴运动,最后会聚在轴线上的一点F。 五、电磁透镜的景深与焦长 第一个过程:平行电子束受到周期结构试样散射作用后,除透射束外,还形成各级衍射束,经物镜聚焦会聚在其后焦面上,以衍射花
(2)、聚光镜
• 作用: • ①会聚经加速管加速的电
子束,以最小的损失照射 样品; • ②调节照明强度、孔径角 和束斑大小。
• 一般都采用双聚光镜系统, 结果在样品上可获得2~ 10μm的照明电子束斑。
第一聚光镜
强磁透镜,f很短; M为 1 ~ 1
10 50
调节照射到样品上的束 斑的大小(改变第一聚 光镜的焦距来控制)
• 电子波的波长为: h
mv
• 物质波的波长等于普朗克常量除以动量 。

电子的运动速度v,取决于加速电压U:
1 2
mv
2
eU
• •
h
2em U
• 注:当电子运动速度很高时,电子质量须经过相对论修正。
• 不同加速电压下的电子波波长
加速电压U/kV

20
电子波长λ/Å
0.0859
加速电压U/kV
120
• 照明系统 • 成像系统 • 观察记录系统
• 成像系统是电子光学 部分最核心的部分。
• 透射电镜的工作过程:
• 电子从透射电镜最上面的电子枪发射出来。
• 发射出的电子在加速管内被加速,通过照明系 统的电子透镜照射到试样上。
• 透过试样的电子被成像系统的电子透镜放大、 成像。
• 从观察室的窗口可以观察像,也可将观察到的 像用照片或其他形式记录下来。

透射电镜结构和部功能PPT课件

透射电镜结构和部功能PPT课件

油扩散泵
它的工作原理是用电炉将特种扩散泵油 加热至蒸汽 状态,高温油蒸汽膨涨向 上升起,靠油蒸汽吸附电镜镜体内的气 体,从喷嘴朝着扩散泵内壁射出,在环 绕扩散泵外壁的冷却水的强制降温下, 油蒸汽冷却成液体时析出气体排至泵外, 由机械泵抽走气体,油蒸汽冷却成液体 后靠重力回落到加热电炉上的油槽里循 环使用。
中间镜和投影镜
在物镜下方,依次设有中间镜和第1投影镜、第 2投影镜,以共同完成对物镜成像的进一步放 大任务。从结构上看,它们都是相类似的电磁 透镜,但由于各自的位置和作用不尽相同,故 其工作参数、励磁电流和焦距的长短也不相同。 对中间镜和投影镜这类放大成像透镜的主要要 求是:在尽可能缩短镜筒高度的条件下,得到 满足高分辨率所需的最高放大率,以及为寻找 合适视野所需的最低放大率;可以进行电子衍 射像分析,做选区衍射和小角度衍射等特殊观 察;同样也希望它们的像差、畸变和轴上像散 都尽可能地小。
聚光镜
聚光镜处在电子枪的下方,一般由2~3 级组成,从上至下依次称为第1、第2聚 光镜(以C1 和C2表示)。电镜中设置聚 光镜的用途是将电子枪发射出来的电子 束流会聚成亮度均匀且照射范围可,紧贴样品台,是电镜 中的第1个成像元件,在物镜上产生哪怕 是极微小的误差,都会经过多级高倍率 放大而明显地暴露出来,所以这是电镜 的一个最重要部件,决定了一台电镜的 分辨本领。作用是进行初步成像放大, 改变物镜的工作电流,可以起到调节焦 距的作用。电镜操作面板上粗、细调焦 旋扭,即为改变物镜工作电流之用。
观察、记录系统
观察室 透射电镜的最终成像结果,显现在观察室内的 荧光屏上,观察室处于投影镜下,空间较大, 开有1~3个铅玻璃窗,可供操作者从外部观察 分析用。
照相室 照相室处在镜筒的最下部,内有送片盒(用于 储存未曝光底片)和接收盒(用于收存已曝光 底片)及一套胶片传输机构。对有诊断分析价 值的区域,若想长久地观察分析和反复使用电 镜成像结果,能够尽快把它保留下来。

透射电镜教程PPT课件

透射电镜教程PPT课件
• TEM由照明系统、成像系统、记录系统、真空系统和电器系统组成。
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1. 电磁透镜
• 能使电子束聚焦的装置称为电子透镜(electron lens)
• • 电子透镜 • •
静电透镜 恒磁透镜
磁透镜 电磁透镜
第6页/共35页
(1)电磁透镜的结构
图9-3 电磁透镜结构示意图
第7页/共35页
• 动力学衍射 • 运动学衍射
第31页/共35页
一、运动学理论的基本假设
• 运动学理论是建立在运动学近似[即忽略各级衍射束(透射束为零级衍射束)之间的相互作 用]基础之上的用于讨论衍射波强度的一种简化理论。
• 其基本假设是: • ①入射电子在样品内只可能受到不多于一次的散射。 • ②入射电子波在样品内的传播过程中,强度的衰减可以忽略。即衍射波强度始终远小于
第33页/共35页
为进一步简化计算,采用两个近似处理方法:
• ①双束条件,即除直射束外只激发产生一个衍射束的成像条件。 由上述讨论可知,对薄晶体样品双束条件实际上是达不到的。实 践上只能获得近似的双束条件。因此,用于成像的衍射束应具有 较大的偏离参量,使其强度远小于直射束强度,以近似满足运动 学要求;另一方面该衍射束的强度应明显高于其它衍射束的强度, 以近似满足双束条件;
• TEM样品可分为间接样品和直接样品。
• 要求: • (1)供TEM分析的样品必须对电子束是透明的,通常样品观察区域的厚度以控制在约
100~200nm为宜。 • (2)所制得的样品还必须具有代表性以真实反映所分析材料的某些特征。因此,样品
制备时不可影响这些特征,如已产生影响则必须知道影响的方式和程度。
且当选用的衍射束所对应的倒易点足够偏离厄瓦尔德球面时, 其附近的某个或某些倒易点又将靠近厄瓦尔德球面; • 另一方面,随着样品厚度的减小,倒易杆拉长,更容易产生较 强的衍射,而且样品越薄则越难完全代表大块材料的性质,所 以衍衬分析时样品通常不应制得太薄。可见,用运动学理论解 释衍衬在大多数情况下都是近似的。

透射电镜的构造与工作原理PPT课件(57页)

透射电镜的构造与工作原理PPT课件(57页)

强度方向取决于线圈电流方向。 A
B
• 在不同放大倍数下,像相对物的 旋转角不同。
Br
P vz
• 对于一般的图像观察,不需要考 虑像的旋转,但在进行晶体学
Bz vr
研究时,必须考虑在不同倍数
下像相对于衍射花样的相对旋
转。物与像之间的相对旋15 短磁透镜的聚焦作用示意图
• 考虑电子在均匀磁场中的运动。通电流的长螺线管可以产 生一个均匀轴对称磁场,这个均匀磁场称为长磁透镜。在 均匀磁场中,只有轴向磁场B。当电子运动方向与磁场方
向垂直时,即=90,作用在电子上的力:
F evB mv2 r
式中 r——电子离光轴的径向距离; m——电子质量。
(3-46)
• 如果电子运动方向与 磁场方向成一的角度
物平面 透镜
焦平面
(a)过焦
(b)聚焦
(c)欠焦
图3-17 透镜的聚焦状态
2.孔径半角和透镜光阑
• 大多数散射电子是 前散射电子,因此 很大比例的电子束 可以进入电磁透镜 磁场参与成像。
• 主轴上物点发射的 电子束对电磁透镜
张开的半角定义为
收集半角,在像点 会聚电子束对透镜
张开的半角称为会
聚半角。透镜的放
(一)电磁透镜的聚 焦成像原理
Fq(vB)
• 洛伦茨力:
v
Fq(vB)
B
F-e(vB)
F-e(vB)
图3-11 带电粒子在磁场中
• 若v和B之间的夹角
为,F的大小为,
作用力的大小为:
受力的右手定则 B
r F
FevsB iθn
v
3-12 电子在均匀磁场中的运动 (=90)
什么样的磁场能够使电子聚焦成像
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强度方向取决于线圈电流方向。 A
B
• 在不同放大倍数下,像相对物的 旋转角不同。
Br
P vz
• 对于一般的图像观察,不需要考 虑像的旋转,但在进行晶体学
Bz vr
研究时,必须考虑在不同倍数
下像相对于衍射花样的相对旋
转。物与像之间的相对旋转也 可以通过引入另外的透镜来抵
图3-15 短磁透镜的聚焦作用示意图
Mv f vf u uf f (3-48)
透镜磁场对透镜焦距和放大倍数的影响
透镜的焦距与透射电
物平面
镜的工作电压和磁场
强度有关。在一定电
u
子加速电压下,透镜
透镜
的焦距取决于透镜磁
场强度,磁场强度越 大,磁场对电子折射 越强,透镜焦距越短, 放大倍数越小
v1
v2
像平面(1)
像平面(2)
f1 f2
光轴 图3-16 透镜磁场对透镜焦距和放大倍数的影响
90,电子运动速度
分解为垂直于B的分 量v1和平行于B的分 量v2:
v1vsinθ v2 vcoθs
v1使电子作垂直于磁 场强度的圆周运动,
v2使电子平行于光轴 沿z方向作匀速直线运 动,电子合成的运动 轨迹为一条螺旋线。
图3-13 电子在均匀磁场中的运动 (90)
非均匀磁场的短磁透镜
• 透射电子显微镜实际使用 的是具有轴对称非均匀磁 场的短磁透镜。
(一)电磁透镜的聚 焦成像原理
Fq(vB)
• 洛伦茨力:
v
Fq(vB)
B
F-e(vB)
F-e(vB)
图3-11 带电粒子在磁场中
• 若v和B之间的夹角
为,F的大小为,
作用力的大小为:
受力的右手定则 B
r F
FevsB iθn
v
3-12 电子在均匀磁场中的运动 (=90)
什么样的磁能够使电子聚焦成像
物平面 透镜
焦平面
(a)过焦
(b)聚焦
(c)欠焦
图3-17 透镜的聚焦状态
2.孔径半角和透镜光阑
• 大多数散射电子是 前散射电子,因此 很大比例的电子束 可以进入电磁透镜 磁场参与成像。
• 主轴上物点发射的 电子束对电磁透镜
张开的半角定义为
收集半角,在像点 会聚电子束对透镜
张开的半角称为会
聚半角。透镜的放
• 考虑电子在均匀磁场中的运动。通电流的长螺线管可以产 生一个均匀轴对称磁场,这个均匀磁场称为长磁透镜。在 均匀磁场中,只有轴向磁场B。当电子运动方向与磁场方
向垂直时,即=90,作用在电子上的力:
F evB mv2 r
式中 r——电子离光轴的径向距离; m——电子质量。
(3-46)
• 如果电子运动方向与 磁场方向成一的角度
• 短磁透镜通常是由圆柱壳 子、短线圈和极靴组件三 个部分组成。圆柱壳子由 软磁材料做成,内有环形 间隙。短线圈由铜做成, 装在软磁壳子里。极靴组 件由具有同轴圆孔的上下 极靴和连接筒组成,套在 软磁壳内环形间隙两端。 当铜线圈通电时,在极靴 圆孔内产生一个非均匀的 轴对称磁场。见图3-14。
图3-14 电磁透镜示意图 1水冷却的表面;2冷却水进出口; 3软磁极靴组件;4 铜线圈 ;5电子束
3.3透射电镜的构造与工作原理
组成:照明系统,成像系统,显像和记录系统, 真空系统,供电系统。
照明系统由电子枪和聚光镜系统组成,其功能是 为成像系统提供一束平行的、相干的、并且亮度大 尺寸小的电子束。
成像系统由物镜系统、中间镜(投影镜)系统组 成。对于不同性能的电镜,中间镜和投影镜的数量 不同。
显像和记录系统由荧光屏和照相装置组成。
图3-10 TEM镜筒工作原理简化示意图 electron source电子源,conderser lens 聚光镜,condenser aperture聚光镜光 阑,sample试样,objective lens物镜, objective aperture物镜光阑, projector lens投影镜,screen荧屏
消。
(二)电磁透镜的光学性质
1.电子光路和光学参量
• 在光学透镜中,有三个重要的平面,即物平面、像平面和 焦面
• 得到三个重要的距离,即物距u、像距v和焦距f。三者之 间的关系由牛顿透镜方程描述:
11 1 uv f
(3-47)
• 在透射电镜中,物距总是大于焦距,因此我们不考虑虚象 的形成。
• 凸透镜的放大倍数由像距和物距之比确定,由牛顿透镜方 程可以导出如下关系:
大倍数近似等于/。
• 称为透镜孔径半角:非常重要,控制着照明电
子束的平行相干性和电子图像的分辨率和衬度。
小的照明孔径半角,电子束的平行性和相干性都
较高。
物镜孔径半角大小决定了被物镜收集的电子束部
分即参与成像的电子数量。散射角小于物镜孔径
半角的电子能够进入电磁透镜磁场参与成像,散
射角大于物镜孔径半角的电子不能被电磁透镜收
• 透镜磁场强度与透镜设计参数有关。其中 极靴内孔、上下极靴之间的间隙和线圈匝 数是重要的参数。
• 但对于一定型号的透射电镜,电磁透镜的 类型和规格都已确定,透镜磁场强度的改 变是通过调节电磁线圈激磁电流来实现。
• 而对于使用者来说,只需要调节电磁透镜 电流就可以获得不同的放大倍数。
调节电磁透镜电流控制 透镜的聚焦状态
6电源,7间隙,8极靴圆孔
短磁透镜的聚焦作用
• 电子在非均匀轴对称磁场中运动时,同时受到使其 旋转的作用力和使其向轴偏转的作用力,结果使电 子作圆锥螺旋运动,像与物相对旋转了一个角度。
• 的大小取决于透镜的电子加 速电压与磁场强度。磁场强度
越大,越大;加速电压越大,
电子速度越大,越小。的符
号取决于磁场强度方向,而磁场
一、 电磁透镜
• 两种电子透镜:静电透镜和电磁透镜。实际上除了 电子枪使用静电透镜外,其它部分均使用电磁透 镜聚焦放大。
• 电磁透镜具有与玻璃透镜相似的光学特性,如焦 距,发散角,球差,色差等等。
• 仪器的性能和图像质量主要取决于电子透镜的性 能与质量。通过调整电子透镜的工作参数和相应 的透镜光阑尺寸来控制电子图像和分析信号的质 量。
集。
光阑
• 透镜孔径半角取决于透镜 光阑孔径大小。在透射电 子显微镜中有三个光阑, 聚光镜光阑、物镜光阑和 选区光阑,分别用于控制 会聚在试样表面的电子束 大小和选择用于成像的电 子束。
• 电磁透镜光阑是由Pt或 Mo做成的、中心为可变 圆孔的金属圆盘,或者是 具有一系列不同孔径的金 属片,如图。孔径大小的 范围为10-300m。光阑 可以位于透镜磁场上方、 下方或磁场中。
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