免疫磁珠技术在食品有害微生物检测中应用
氨基磁珠 免疫磁珠的技术及应用
氨基磁珠免疫磁珠的技术及应用一、磁珠的概念磁珠是由磁性微粒与各种含活性功能基团的材料复合而成的具有一定磁性及特殊表面结构的粒子。
磁珠的研究始于20世纪70年代，国内在20世纪80年代以来日渐活跃，磁珠表面通过共聚合和表面改性，可被修饰上多种活性功能基团，如羧基、醛基、氨基等，可以共价结合酶、细胞、抗体、蛋白质等多种生物活性物质。
二、氨基磁珠与免疫磁珠氨基磁珠即为表面修饰有氨基官能团且具有超顺磁性的磁性微粒，是一种被广泛应用的功能性生物磁珠，主要用于免疫磁珠的制备。
在一定条件下，氨基磁珠通过交联试剂（如戊二醛等）的介导，可与蛋白配体（如抗原、抗体等）、寡核苷酸探针等生物分子共价偶联，这类偶联有生物配体的氨基磁珠即为免疫磁珠。
免疫磁珠具有固相化试剂特有的优点以及免疫学反应的高度专一性，被广泛的应用于免疫吸附、免疫分离及免疫检测。
近年来，食品安全已成为世界范围的公共问题，由微生物引起的食源性疾病在食品安全事件中占很大比例并有上升趋势，如日本大肠杆菌O157：H7污染、印度奶粉金黄葡萄球菌肠毒素事件、法国李斯特菌中毒以及美国沙门氏菌属污染等，检测及预防这类病菌是人类共同要面对的问题。
因此，可通过免疫磁珠与这些病菌的特异性抗原结合，形成抗原--抗体复合物，在外加磁场的作用下，使特异性抗原与其它物质分离，从而进行检测与分析，在提高检测准确度的同时，减少操作时间，提高效率。
三、免疫磁珠的优点1.耗时短，整个过程仅需12个小时左右，传统方法需要3-4天。
2.操作简便，只需利用外加的磁场即可操作。
3.成本低，不需要使用昂贵的仪器设备。
4.灵敏度高，可进行痕量检测。
5.自动化操作，可配合仪器进行自动化操作，提高效率。
四、氨基磁珠现状目前，我国的氨基磁珠主要源于进口，不仅价格昂贵，而且售后较为困难。
在这里向大家推荐，洛阳惠尔纳米科技园自主研发的HRCZ-03 氨基磁珠，粒径均一，灵敏度高，稳定性好，可用于制作各类免疫磁珠，受到高校，科研机构的一致好评。
磁性纳米磁珠在微生物学检测中的应用
P rogi nMi crobi ol I m m u nol Ju n. 2 0 1 1 ， V ol .39 N o.2
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磁性纳米磁珠在微生物学检测中的应用
崔海燕 综述， 胡 巍 审校 ( 山东理工大学生命科学学院，山东 淄博
摘
25 5 04 9 )
要: 磁性纳米材料因具有磁响应性和可修饰等特点 ， 被广泛 地应用于生 物技术各 领域�本文介 绍了磁性纳 米
材料的主要合成方法和表征， 对其在生物医学领域的 应用， 特别是在微生物检测中的应用进行了综述 � 关键词: 纳米材料; 磁珠; 微生物检测 中图分类号: R4 4 6 .5 文献标识码: A 文章编号: 1 0 05 -5 673( 2 01 1 ) 02 -00 5 7 -0 3
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微生物学免疫学进展 2 01 1 年第 39 卷第 2 期
P rogi nMi crobi ol I m m u nol Ju n. 2 0 1 1 ， V ol .39 N o.2
2 008 年， 陈 明洁 等［1 4 ］ 采 用本 法 制 备 了 纳 米 Fe 探讨了温度� pH 值以及 Fe / Fe 物质 3 O 4 颗粒， 的量比对 颗粒 粒径 � 形貌 和磁 性能 的影 响� 2 01 0
［1 5 ］ 年， 杨宇翔等 以有机碱四甲基氢氧化铵 ( TM AH ) 2 + 为沉淀剂， 合成了 Fe 混合的纳米 Fe 3O 4 和 Co 3O 4 粒 2 + 3 +
疫磁珠富集的微生物可直接进行培养鉴定; 用免疫磁 珠与 E L I SA 结合的方法可以检测多种病原菌; 磁珠表 面也可修饰核酸片段， 可直接与样品中的核酸大分子 进行互补配对结合 �2 003 年， 顾宏伟等利用生物官能 化的磁珠， 捕获低浓度的耐万古霉素肠球菌及其他革
免疫磁珠技术及其在食品微生物检测中的应用
免疫磁珠技术及其在食品微生物检测中的应用随着食品安全问题的日益严重，食品微生物检测成为了食品安全监管的重要手段。
而免疫磁珠技术作为一种高效、快速、灵敏、特异性强的检测方法，已经在食品微生物检测中得到了广泛应用。
一、免疫磁珠技术的原理免疫磁珠技术是将特异性抗体固定在磁性微珠表面，并将其与待检测样品中的微生物结合，通过磁力分离技术将目标微生物从复杂的基质中分离出来，从而实现快速、高效、特异性强的检测方法。
二、免疫磁珠技术在食品微生物检测中的应用1. 检测食品中的病原微生物免疫磁珠技术可以用于检测食品中的多种病原微生物，如大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等。
该技术具有高灵敏度、高特异性、快速、简便等优点，可以在短时间内检测出食品中的病原微生物，为食品安全监管提供了有力的技术支持。
2. 检测食品中的致病菌免疫磁珠技术还可以用于检测食品中的致病菌，如霉菌、酵母菌等。
该技术可以在短时间内检测出致病菌的存在情况，为食品生产企业提供了有效的质量控制手段。
3. 检测食品中的致敏物质免疫磁珠技术还可以用于检测食品中的致敏物质，如花生、虾、蟹等食品中的过敏原。
该技术可以在短时间内检测出食品中的致敏物质，为过敏人群提供了有效的食品安全保障。
三、免疫磁珠技术的优点1. 特异性强免疫磁珠技术采用特异性抗体，可以高效地捕捉目标微生物，避免误检和漏检。
2. 灵敏度高免疫磁珠技术具有高灵敏度，可以检测出微生物的极低浓度。
3. 快速、简便免疫磁珠技术操作简单，检测速度快，可以在短时间内完成检测。
4. 应用范围广免疫磁珠技术可以应用于多种食品中的微生物、致病菌和致敏物质的检测，具有广泛的应用前景。
四、免疫磁珠技术的发展趋势随着科技的不断发展，免疫磁珠技术在食品微生物检测中的应用将会越来越广泛。
未来，免疫磁珠技术将会进一步提高检测的灵敏度和特异性，加快检测速度，降低成本，为食品安全监管提供更加完善的技术支持。
五、结论免疫磁珠技术是一种高效、快速、灵敏、特异性强的检测方法，在食品微生物检测中得到了广泛应用。
羧基磁珠偶联抗体及应用
羧基磁珠偶联抗体及应用羧基磁珠偶联抗体是一种用于免疫学研究的常用实验工具，其利用磁性珠子表面的羧基官能团结合特定的抗体分子实现目标蛋白或分子的富集和纯化。
本文将对羧基磁珠偶联抗体的原理、制备方法和应用进行探讨。
一、羧基磁珠偶联抗体的原理羧基磁珠偶联抗体技术是一种利用磁性珠子上表面的羧基官能团结合特定抗体分子实现目标蛋白或分子富集和纯化的技术。
其原理是通过将抗体与磁珠表面的羧基官能团进行偶联，例如采用羧基-胺化学反应（EDC-NHS反应）等交联技术，从而实现抗体的高效结合。
此后，将该偶联物加入样品体系中，目标分子会高效结合到磁性珠子表面，而非特异性大量结合于背景物质上，从而实现目标蛋白或分子的快速富集和纯化。
二、羧基磁珠偶联抗体的制备方法（1）磁性珠子的悬浮液制备首先，根据实验需求选择合适的磁性珠子（如聚合物磁珠或硅胶磁珠），将其取出并在磁性力场下沉淀。
接着，使用磁性珠子表面稳定剂（例如Tween20）和其他化学试剂对其进行表面修饰和活化，制备羧基化珠子悬浮液。
（2）抗体偶联将目标抗体按照体积比加入悬浮液中，并搅动反应一段时间。
加入羧基活化交联试剂，如EDC和NHS，进行交联反应。
通过洗涤和离心，去除剩余的试剂，得到羧基磁珠偶联抗体。
（3）应用制得的羧基磁珠偶联抗体，可以用于生物分子的富集和纯化，如蛋白质、核酸、糖类等。
其应用包括但不限于：分析检测、免疫印迹、免疫染色、酶标记、患者体内药物动态监测，等等。
三、羧基磁珠偶联抗体的应用（1）生物分析检测磁珠偶联抗体技术在药物研发和分析中被广泛应用，其技术的独立性和准确性得到了广泛认可。
磁珠偶联法不仅可以对高丰度的蛋白质进行分离，同时还能够快速、稳定地分离寡肽、肽类、多肽、基因、DNA等生物分子物质。
其应用领域主要包括生医、食品安全检测、化妆品等。
（2）临床医学磁珠偶联法能够在病人的外周血液中寻找和规律分析少量的肿瘤细胞和循环肿瘤DNA (ctDNA)。
微生物快速检测方法进展
微生物快速检测方法进展对于人类来说，一些微生物有益的，还有一些微生物对于人类是有害的，这些有害的微生物不但会致使食品腐烂，同时也能够引起人类的疾病，从而对于人类的健康造成不利影响。
大量的微生物分布于空气和水中，因此对于微生物进行提取和检测的过程中，适合的检测仪器和检测方法在其中发挥着非常重要的作用。
标签：微生物;检测方法;进展研究1.微生物快速检测的重要性分析首先，因为在食物当中有着微生物生长过程中所需要的营养，所以很多食物会在一定程度上受到微生物的污染。
受到微生物污染的食品则会对人类的健康造成较大的威胁，所以为了人们的健康安全以及食品安全，对于微生物进行检测是非常重要的。
其次，医院中的病人在受伤之后发生的感染现象，与微生物有着直接的联系。
因此对于医院方面进行微生物的快速检测有利于对医院的感染现象进行控制，并能够对于感染现象起到一定的预防作用。
最后，微生物污染现象大部分是通过空气来进行传播的，所以封闭、温暖、潮湿的室内通常会为微生物的污染创造有利条件。
因此对于室内进行微生物检测是十分重要的，这样才能够具有针对性的采取更加有效的措施，确保生活在室内中的人们健康不会受到微生物的损害。
2.微生物快速检测的方法进展研究2.1生物化学检测生物化学检测分为基因探针检测和PCR检测。
所谓PCR检测其原理就是通过体外酶促反应来进行DNA的合成，通过扩增物的识别过程就能够实现对于菌群的检测。
PCR检测的优点在于灵敏度较高，且能够对于细菌当中存在的拷贝基因进行有效的检测，从而无需增加菌群数量即可完成筛选过程，进而提升进行筛选的成功率。
PCR检测的缺陷在于食物、增菌培养基等其他微生物中的DNA 中所具有的TAP酶抑制性特征，会使得检测结果出现假阴性。
另外，PCR的检测过程是较为严格的，如果外源性细菌的DNA进入到了该检测过程中，那么就会对检测结果造成严重影响。
同时，如果出现装配失误过程，也会对于最终的检测结果造成影响。
病原微生物中细菌常见检测方法有哪些
病原微生物中细菌常见检测方法有哪些病原微生物种类繁多，变异迅速，快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着。
目前，应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因芯片、多聚酶链反应等，该文对这些检测技术进展做一综述。
对人和动物具有致病性的微生物称为病原微生物，又称病原体，有病毒、细菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、真菌、放线菌、朊粒等。
这些病原微生物可引起感染、过敏、肿瘤、痴呆等疾病，也是危害食品安全的主要因素之一。
近年来出现的SARS、高致病性禽流感、西尼罗病毒感染等疾病的传染性极强，往往造成世界性大流行，因此对病原体的检测必须做到快速、准确。
常规病原学检测方法操作繁琐，检测周期长，而且对操作人员技术水平要求比较高。
随着医学微生物学研究技术的不断发展，病原学诊断已不再局限于病原体水平，深入到分子水平、基因水平的检测手段不断出现并被应用于临床和实验室J。
核酸分子杂交技术、PCR技术、基因芯片技术等检测方法，自动化程度高，快速省时、无污染、结果精确，可以准确灵敏地鉴定病原微生物。
1传统的病原微生物的检测方法传统的病原微生物学实验室检查以染色、培养、生化鉴定等为主，将标本直接涂片染色镜检和接种在培养基上进行分离培养是对细菌或真菌感染性疾病进行病原学诊断的常用方法。
1．1直接涂片镜检病原微生物体形体积微小，大多无色半透明状，将其染色后可借助显微镜观察其大小、形态、排列等。
直接涂片染色镜检简便快速，对那些具有特殊形态的病原微生物感染仍然适用，例如淋球菌感染、结核分枝杆菌、螺旋体感染等的早期初步诊断。
直接涂片镜检不需要特殊的仪器和设备，在基层实验室里仍然是十分重要的病原微生物检测手段。
1．2分离培养与生化反应分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。
细菌的生长繁殖需要一定时间，检测周期较长，不能同时处理批量样本。
免疫磁珠技术及其在食品微生物检测中的应用
免疫磁珠技术及其在食品微生物检测中的应用随着食品安全问题的日益严重，对食品微生物检测的需求也越来越高。
传统的微生物检测方法存在着操作繁琐、时间长、灵敏度低等问题，因此需要开发一种更加快捷、准确的检测方法。
免疫磁珠技术作为一种新兴的分离和检测技术，具有操作简便、快速、灵敏度高等优点，在食品微生物检测中得到了广泛的应用。
一、免疫磁珠技术的原理及特点免疫磁珠技术是将磁性珠子与特异性抗体结合，通过磁性珠子的快速分离和富集目标微生物，从而实现对微生物的检测。
磁性珠子具有较强的磁性，可以通过外加磁场的作用来实现珠子与微生物的快速分离。
其特点是操作简单、快速、灵敏度高、重复性好、不受样品复杂性的影响，适用于多种样品类型和微生物种类的检测。
二、免疫磁珠技术在食品微生物检测中的应用1.肠道致病菌检测肠道致病菌是食品中最常见的致病微生物之一，其检测对于食品安全至关重要。
传统的肠道致病菌检测方法通常需要进行培养、分离、鉴定等多个步骤，耗时长且容易出现假阳性结果。
而免疫磁珠技术可以通过特异性的抗体富集目标微生物，避免了传统方法中的多个步骤，大大缩短了检测时间。
同时，免疫磁珠技术具有较高的灵敏度和特异性，可以检测到低浓度的微生物，并且不会产生假阳性结果。
2.食品中的真菌和酵母菌检测真菌和酵母菌是常见的食品污染源，其检测对于保障食品安全至关重要。
传统的真菌和酵母菌检测方法通常需要进行培养、分离、鉴定等多个步骤，耗时长且容易出现假阳性结果。
而免疫磁珠技术可以通过特异性的抗体富集目标微生物，避免了传统方法中的多个步骤，大大缩短了检测时间。
同时，免疫磁珠技术具有较高的灵敏度和特异性，可以检测到低浓度的微生物，并且不会产生假阳性结果。
3.食品中的病毒检测食品中的病毒是一种比较难以检测的微生物，其检测对于保障食品安全至关重要。
传统的病毒检测方法通常需要进行多个步骤，耗时长且容易出现假阳性结果。
而免疫磁珠技术可以通过特异性的抗体富集目标病毒，避免了传统方法中的多个步骤，大大缩短了检测时间。
食品微生物检测技术现状及发展趋势分析
使蛋 白质 改变性质 ， 使ＤＮＡ双链 解旋 红试验 、 Ｖ— Ｐ 试验 、 硝酸盐还原试验 、 明胶试验 等。 虽然 设置 高温环 境 ，
然 后马上 进行 降温 ， 使每 条ＤＮＡ单链 退 利用这 些传 统检 测办法 也可 以达到检 测 目的 ， 但 确实 改变为 单链 ，
子。 完成 此类 检 测 的全部 过程 一般 需要 一小 时 。 如果 操作 、 成 本低 等 ， 当前 广泛 应用 于微 生物 检测 和 其他
依据理论研 究 ， 利用ＰＣ Ｒ技术在极短 的时间 内就可 以 领域 当 中。
检测 到食 品样 品 中含 有病 原 菌的数 量 ， 即使 只 含有 １ ２ ． ５生物传 感 器 生物 传感器将 固定化 的生物成分 当作 本身的敏感
的生物 检测技 术 中得 到普遍 应用 。 基 础 上 ， 创新 发 展 了实 时定量
Ｐ Ｃ Ｒ技术 ， 两者的基本原理一致 ， 但定量技术原理 不一
细菌在 培养 基 内不断生 长繁 殖 ， 同时 会改变 培养
致。 为 了保证 实 时定量 技术 的特异 性 能 ， 在 实 时定量 基 的大 分 子 电惰 性 物 质 ， 使 其成 为小 分 子 电 活性 物 技术 中应用 了荧光染料 和探针 ， 并且 荧光信 号的强 弱 质 ， 同时 使培 养基 的导 电性 发生 一定 的改 变 ， 利 用测
色物质 ， 依据 颜色 的深浅不 同进行 定性 、 定量 ， 来检测
对应微 生物 。 运用 这种方法 ， 可 以大量节 省检测 时间 ，
一
准确定应 用不 同的检 测方法 ， 当然也可 以综合运 用多 种检 测方法 ， 以保 证检测质 量 ， 收 到 良好 的检测效 果 。
免疫磁珠富集在食品中黄曲霉毒素Bi的应用
为 55 μg/mg，前处理体系为 20% 甲 醇 -PBS。所用时间为 2 h，极大地缩 短了检测时间。结果表明：ELISA 线性 关系良好，相关系数为 0.984 2，相对 标 准 偏 差 为 7.2%~13.7%。 评 价 了 直 接法与间接法的富集效果，结果表明 直接法的抗体偶联效率比间接法更高， 而在免疫磁珠用量较少时，间接法对 黄曲霉毒素 B1 回收率更高，尤其对痕 量黄曲霉毒素 B1 样本。实验证明该法 可快速检测酱油中黄曲霉毒素 B1，灵 敏度高，准确性好。
关键词：免疫磁珠；黄曲霉素 B1
1 黄曲霉毒素
黄曲霉毒素是真菌的次级代谢产 物，主要由黄曲霉、寄生曲霉及特曲 霉等产生。黄曲霉毒素在土壤、动植物、 各种坚果中广泛分布。在大豆、稻谷、 玉米、牛奶、酱油、食用油等制品中也 发现大量黄曲霉毒素 [1]。黄曲霉素 B1 （AFB1）对人类具有极高的毒性、致 癌性、致畸性等。也是目前最强的化学 诱变剂，被定为Ⅰ类致癌物，痕量的黄 曲霉素 B1 长期接触食用也会对人体产 生严重的危害。WHO/FAO 规定食品中 黄曲霉毒素最高含量为≤ 20 μg/kg。 黄曲霉素 B1 不易被降解，其热稳定性 强，日常烹饪无法有效将其杀灭。因此， 建立一种能快速有效的方法对食品中的 黄曲霉素 B1 进行检测尤为必要 [2]。
黄艳梅等采用 EDC/NHS 法制备免 疫磁珠，对原料乳中黄曲霉毒素进行 检测，其检出限为 0.1 μg/L，且与真 菌毒素及其他添加物无交叉反应，结 果与 ELISA 一致。
磁珠分离技术
磁珠分离技术摘要:磁珠分离技术是一种分子生物学分离技术, 它利用其表面修饰的磁性颗粒对生物分子或细胞的亲和结合而进行分离, 能对待分离或待检测的靶标进行高效富集, 是一种方便、快速、回收率高、选择性强的方法。
磁珠分离技术在生物学方面的应用始于20世纪70年代后期, 目前已经在分子生物学、细胞学、免疫学、微生物学、生物化学等领域取得一些令人瞩目的研究成果。
基本概念磁珠磁珠是一种通过一定方法将磁性无机粒子与有机高分子结合形成的具有一定磁性及特殊结构的体积在几纳米到几十微米之间的载体微球。
载体微球的核心为金属小颗粒, 常为铁的氧化物或铁的硫化物, 核心外包裹一层高分子材料, 最外层是功能基团, 载体微球表面可根据需要赋予不同的功能基团(如－OH、－COOH、－CHO、－NH2,—SH、—CONO2、—CONH2、—SO3H、—SiH3、—环氧基、—CHCl等)，使其表现具有疏水-亲水、非极性-极性、带正电荷-带负电荷等不同物理性质。
同时具有磁响应性，在外磁场作用下具有磁导向性。
由于载体微球表现的物理性质不同, 可结合不同的免疫配基, 如抗体、抗原、DNA、RNA 等。
应用于磁分离技术的磁性载体微球应具备以下特点: 粒径比较小, 比表面积较大, 具有较大的吸附容量; 物理和化学性能稳定, 具有较高的机械强度, 使用寿命长; 具有可活化的反应基团, 以用于亲和配基的固定化; 粒径均一, 能形成单分散体系; 悬浮性好, 便于反应的有效进行。
载体微球有纳米级、微粒级的, 纳米级的载体微球与微粒级的载体微球相比具有以下优点: 尺寸小, 扩散速度快, 悬浮稳定性好; 比表面积大, 偶联容量大; 超顺磁性, 能快速实现磁性粒子的分散与回收。
磁珠的制备方法：共沉淀法、悬浮聚合法、乳液聚合法、分散聚合法、包埋法及原子转移自由基聚合法等。
免疫磁珠免疫磁珠(Immunomagnetic bead, IMB) 简称磁珠,免疫磁珠由载体微球和免疫配基结合而成。
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2.6 IMB技术在病毒检测中应用
研究者利用抗病毒表面蛋白的单抗或多抗，开发了能捕获病毒颗粒的免疫磁珠， 并对其应用时各个影响因素(孵育温度，时间等)进行了初步评估，证明了利用免 疫磁珠技术可捕获病毒颗粒并用于各种检测的可行性。
如Park 等 制备了针对诺如病毒(norovirus)的GⅠ- 1和 GⅡ- 4 外膜蛋白的多克 隆抗体，与磁珠偶联获得了相应的免疫磁珠后，采用 IMBS 技术与荧光逆转录 PCR 联用(IMBS-real-time RT-PCR)，对人为污染已知量的诺如病毒的草莓进行 检测，结果表明其检出限可低至 3 ～ 7 个 RT-PCR 单位。
2.7 IMB技术在微生物检测应用时的主要影响因素
1 免疫磁珠的质量 2 目标菌、 杂菌及磁珠的比例 3 待测标本的性状 4 磁珠与待测标本的反应条件
2.8 IMB技术在食源性致病菌检测中应用进展
1
IMB技术结合显色培养基 对食源性致病菌进行检测
2
IMB技术结合PCR技术 对食源性致病菌进行检测
2、免疫磁珠技术在食品有害微生物检测中的应用
大肠杆菌
布鲁式菌
单增李斯特菌
副溶血性弧菌
沙门式菌
黄曲霉菌
金黄色葡萄球菌
阪崎肠杆菌
2.1 IMB技术对大肠杆菌O157H7的检测(GB/T 4789.36-2008)
2.2 IMB技术对单增李斯特菌检测 (SN/T 0184.3-2008)
2.3 IMB技术对布鲁氏杆菌检验 (DB32/T-2016)
苏惠玉等人应用 “ 山羊抗黄曲霉菌血清的免疫磁珠 ” 捕获食品中的黄曲 霉菌，不需要进行增菌培养，应用磁捕获-荧光聚合酶链式反应(LMC-FPCR) 技术快速检测鉴定食品中的黄曲霉菌。结果：IMC-FPCR方法检测黄曲霉菌的 最低检测值为2cfu／mL。结论：建立了黄曲霉菌的磁捕获-荧光聚合酶链式 反应法 (IMC-FPCR) ，该方法可用于食品中黄曲霉菌的快速检测及鉴定。
但目前在免疫磁珠的生产上还存在一些问题，其制备难度大，要获得均匀性 好、超顺磁性、粒度适中、易于结合蛋白质的磁珠很难。现今大部分的磁珠市 场被瑞士Dynal和德国的Miltenyi两大公司所占有，其产品价格昂贵，这极大地 限制了免疫磁珠技术在我国的普及及应用。因此，商业化生产优质的国产免疫 磁珠是今后研究的主要方向。相信随着研究的不断深入，免疫磁珠技术的应用 前景定会更加广阔。
直接法
间接法是先用羊抗鼠IgG(第二抗 体)包被磁珠,使磁珠作为第二抗体 载体,当抗原与第一抗体结合后,加 入带有第二抗体磁珠,磁珠上第二 抗体便与第一抗体结合,形成磁珠第二抗体-第一抗体-抗原复合物, 在磁力作用下,与其它物质分离。
间接法
第一抗体
第二抗体
1.5 IMB技术的优点
特异性强、分离速度快、效率高 可重复性好、操作简单 不需要昂贵的仪器设备,不影响被分离细胞或其它生物材 料的生物学性状和功能等
References:
[1].苏惠玉, 谢荣珍与牛建军, 免疫磁珠捕获结合荧光PCR技术检测食品中黄曲霉菌的研究. 食品科学, 2010(10): 第287-291 [2].费枫与黄迅辰, 免疫磁珠的原理与特性及其在动物源性食品检测中的应用研究. 浙江畜牧兽医, 2014(05): 第43-47页. [3].刘细霞与涂俊铭, 免疫磁珠分离技术及其在食源性致病菌检测中应用的进展. 中国抗生素杂志, 2014(12): 第956-960页. [4].盛跃颖与陈敏, 免疫磁珠分离技术在病原微生物检测中的应用. 中国食品卫生杂志, 2011(05): 第478-481页. [5].杜强与屠博文, 全自动免疫磁珠分选系统检测沙门氏菌. 食品安全质量检测学报, 2016(05): 第1836-1839页. [6].支援等, 一种快速检测阪崎肠杆菌的新方法——免疫磁性分离荧光标记. 乳业科学与技术, 2010(05): 第231-233+245页. [7]马燕萍.免疫磁珠技术简介[J].山西职工医学院学报.2000.l0: l0. [8]范蓉,钱和年.免疫磁珠技术一一种新的免疫学技术[J].国外医学(免疫学分册). 1998,21(1):3. [9]陆东东.免疫磁珠技术的应用研究[J].陕西医学检验. l999.14(2): 10.
磁珠
特异性抗体
免疫磁珠
抗原鉴定
加入待测液中 撤去磁场
抗原-抗体-磁性免疫 复合物
磁 性 外 力
复合物分离出来
以细胞分离为例图解免疫磁珠技术的原理
1.4 IMB技术作用方式
直接法是先用抗体包被磁珠,使 抗体与磁珠给合(物理吸附或化学 免疫磁珠分离 结合),再加入抗原物质,二者结合 技术 形成磁珠-第一抗体-抗复原合物, 在磁力作用下, 与其它物质分离。
2.4 IMB对副溶血性弧菌检验(DB32/T -2010)
2.5 IMB技术对其余食源性致病微生物的检测应用
杜强等人利用“全自动免疫磁珠分选系统”检测食品中沙门氏菌， 与国标法相比，全自动免疫珠分选系统取消了SC和TTB增菌，经BPW 增菌后直接使用系统富集目标菌并接种显色平板。结果免疫磁珠法阳性 检出率为32％，国标法阳性检出率为31％，二者无显著性差异(P>0.05)。 但磁珠法取消了二次增菌的步骤，检测时间比国标法节省24 h，且平板 上的单个菌落生长率和菌株特异性也更好。
免疫磁珠技术在食品有害微生物 检测中的应用
小组成员：田理刚、、、朱林韬、赵建秋、董唯
目录
1 免疫磁珠技术的介绍 2 免疫磁珠技术在食品有害微生物检测中的应用 3 小结
免 疫 磁 珠 ( Immunomagnetic bead,
IMB,简称磁珠)技术,是近年发展起来的
将固化试剂特有优点与免疫学反应高度
特异性结合于一体的一项新技术。 以免
疫学为基础,渗透到病理、生理、药理、
微生物、生化及分子遗传学等各个领域,
其在免疫检测、细胞分离、生物大分子
纯化和分子生物学等方面得到越来越广 泛应用。
全自动免疫磁珠技术细胞分选系统AutoMACS Pro
1.2 免疫磁B技术的基本原理
刘琳琳等人利用“自制的金属螯合免疫磁珠”来检测食品中金黄色葡 萄球菌。该法能够在30min内富集检测金黄色葡萄球菌且检测低限可达 100 cfu。同时磁珠可保持活性达3周以上。此检测方法同传统鉴定和分离 金黄色葡萄球菌的方法相比具有速度快、灵敏性高、成本低的优点。
支援 等 人 基于抗原抗体反应的免疫学特异性,以及量子点荧光标记的 高灵敏度,免疫磁珠磁性分离,免疫量子点荧光标记联合应用的检测方法, 对 阪 崎 肠 杆 菌 试验结果表明，能在2h内对乳制品样品中的食源性致病菌 （阪崎肠杆菌）进行检测，且方法特异性好，灵敏度高（达10²cfu/mL）， 其在食品检测领域的应用成为可能。
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IMB技术结合免疫学技术 对食源性致病菌进行检测
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IMB 技术结合电化学技术 对食源性致病菌进行检测
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IMB技术结合流式细胞仪 对食源性致病菌进行检测
3、小结
IMB技术在微生物学检测领域中的应用越来越广泛，其方便有效性主要在于 代替了常规的选择性增菌培养过程，可特异地将目的微生物从样品中快速分离 出来。与其他先进检测技术结合使用，充分发挥二者优势，还能节约更多时间、 发挥更大的作用。