叶绿素荧光及分析技术
叶绿素荧光实验报告
一、实验目的1. 了解叶绿素荧光的产生原理。
2. 掌握叶绿素荧光光谱的测定方法。
3. 分析叶绿素荧光光谱与植物光合作用的关系。
二、实验原理叶绿素荧光是指植物在吸收光能后，部分能量以荧光形式释放出来的现象。
叶绿素荧光的产生原理是：在光合作用过程中，叶绿素分子吸收光能后，电子从基态跃迁到激发态，当电子从激发态回到基态时，释放出光子，形成荧光。
叶绿素荧光光谱反映了叶绿素分子吸收、传递和转化光能的能力，是研究植物光合作用的重要手段。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜叶片（如菠菜、小麦等）2. 实验仪器：荧光分光光度计、剪刀、研钵、紫外灯、比色皿、水浴锅、移液器、超纯水等四、实验步骤1. 制备叶绿素提取液：取新鲜叶片，用剪刀剪碎，加入少量石英砂和碳酸钙粉，用研钵研磨成匀浆。
将匀浆转移至比色皿中，加入适量超纯水，搅拌均匀。
2. 荧光光谱测定：将制备好的叶绿素提取液置于荧光分光光度计中，设置激发波长为400nm，扫描范围为400-800nm，记录荧光光谱。
3. 比较不同处理叶片的荧光光谱：将叶片分为对照组和实验组，对照组置于正常光照条件下，实验组置于黑暗条件下处理一段时间。
处理完毕后，分别测定两组叶片的荧光光谱，比较其差异。
4. 分析荧光光谱：根据荧光光谱，分析叶绿素分子在吸收、传递和转化光能过程中的变化。
五、实验结果与分析1. 叶绿素荧光光谱特征通过荧光分光光度计测定，得到叶绿素荧光光谱。
结果表明，叶绿素荧光光谱具有以下特征：（1）叶绿素荧光光谱在450-650nm范围内有较强的荧光峰，这是由于叶绿素分子在吸收光能后，电子从基态跃迁到激发态，随后以荧光形式释放出来的能量。
（2）叶绿素荧光光谱在665nm附近存在一个较强的荧光峰，这是由于叶绿素分子在吸收光能后，部分能量通过能量传递过程传递给其他叶绿素分子，再以荧光形式释放出来的能量。
2. 不同处理叶片的荧光光谱比较对照组和实验组叶片的荧光光谱存在显著差异。
叶绿素荧光成像技术的原理与应用
叶绿素荧光成像技术的原理与应用一、引言叶绿素是植物中最重要的光合色素，是植物进行光合作用的基础。
溶剂化的叶绿素主要吸收蓝色和红色光，在500～600和650～700nm波长范围内，具有两个吸收峰。
叶绿素荧光成像技术是基于叶绿素发出的荧光信号来进行影像测量的一种实时、无创的模拟测量方法。
本文将介绍叶绿素荧光成像技术的原理、实验流程及其应用。
二、原理叶绿素荧光成像技术是基于叶绿素荧光的成像，叶绿素荧光受光强度和环境因素的影响而变化，可以反映植物的生长状态、光合作用效率和叶片生理变化等信息。
叶绿素荧光成像系统具有高时间分辨率、高空间分辨率的特点，可以获取全景、彩色、实时和定量信息。
叶绿素荧光成像技术主要是利用荧光成像仪和其他仪器支持，通过蓝/绿或红/绿激发光、荧光图像采集和分析等步骤，可以获得叶绿素的分布信息。
三、实验叶绿素荧光成像技术的实验主要分为两个步骤：激发和成像。
首先是激发，将叶片放入光合器中，用荧光成像仪对植物叶片进行光激发，根据荧光成像仪的激光幅度，可以调整植物叶片的荧光强度。
之后，进行成像，将植物叶片放到荧光成像仪中进行拍摄，获取叶绿素的发光信号。
最后，通过荧光照片的处理，可以计算叶片荧光强度和叶绿素荧光参数，如最大光化学利用率、植物光合作用效率等。
四、应用叶绿素荧光成像技术的应用非常广泛，主要涉及到生物学、生态学、农业、气象学，特别适用于植物生长状态监测、植物抗性研究、光合作用效率评估等。
一些具体的应用领域可以如下简要介绍：1.光合作用研究叶绿素荧光成像技术可用于研究植物的光合作用效率、光能利用和光保护机制。
典型的光合作用实验是通过比较光照和黑暗条件下植物的荧光变化来确定植物的光合反应和光保护机制。
2.气候变化影响研究在气候变化方面，叶绿素荧光成像技术可用于研究气候变化导致的植物响应和适应。
通过对多个季节的荧光成像分析可以确定气候变化对地上层和植物生长的影响。
3.生态环境研究叶绿素荧光成像技术可用于研究萎缩地区的植被恢复和生态系统的响应。
对于叶绿素荧光全方面的研究
对于叶绿素荧光全方面的研究对于叶绿素荧光全方面的研究叶绿素荧光现象的发现将暗适应的绿色植物突然暴露在可见光下后，植物绿色组织发出一种暗红色，强度不断变化的荧光。
荧光随时间变化的曲线称为叶绿素荧光诱导动力学曲线。
最直观的表现是，叶绿素溶液在透射光下呈绿色，在反射光下呈红色的现象。
其本质是，叶绿素吸收光后，激发了捕光色素蛋白复合体，LHC将其能量传递到光系统2或光系统1，期间所吸收的光能有所损失，大约3%-9%的所吸收的光能被重新发射出来，其波长较长，即叶绿素荧光。
叶绿素荧光动力学研究的特点1、叶绿素荧光动力学特性包含着光合作用过程的丰富信息光能的吸收和转换能量的传递与分配反应中心的状态过剩光能及其耗散光合作用光抑制与光破坏2、可以对光合器官进行“无损伤探查”3、操作步骤简单快捷光合作用的光抑制光抑制是过剩光能造成光合功能下降的过程。
过剩光能指植物所吸收的光能超出光化学反应所能利用的部分。
过去人们把光抑制与光破坏等同起来，认为发生了光抑制就意味着光和机构遭到破坏。
甚至把光抑制、光破坏、光氧化等，沦为一体。
光抑制的基本特征表现为：光合效率下降说明叶片吸收的光能不能有效地转化为化学能。
光破坏：PSII 是光破坏的主要场所，破坏也可能发生在反应中心也可能发生在与次级电子受体结合的蛋白上。
发生光破坏后的结果：电子传递受阻、光合效率下降。
当过剩的光能，不能及时有效地排散时，会对光合机构造成不可逆的伤害，如光氧化、光漂白等等。
一切影响二氧化碳同化的外界因素，如低温、高温、水分亏缺、矿质元素亏缺等都会减少对光能的利用，导致过剩光能增加，进而加重光破坏。
植物防御破坏的措施1、减少对光能的吸收增加叶片的绒毛、蜡质减少叶片与主茎夹角2、增强代谢能力碳同化光呼吸氮代谢3、增加热耗散依赖叶黄素循环的热耗散状态转换作用中心可逆失活光合作用是指含叶绿素的植物细胞和细菌吸收光能，将无机物转化为有机物并释放氧气的过程。
叶绿素荧光仪分析植物热胁迫选择大小、部位一致的植物叶片，分成几组每组10片，分别置于35℃、40℃、42℃、44℃、46℃、48℃、50℃、52℃的水中，当热胁迫结束后，分别用湿滤纸包住，暗适应一小时后测量暗适应后叶片的Fv/Fm值，然后再将叶片在光照下处理一段时间后测定其光系统II 的有效量子产量。
叶绿素荧光分析技术在植物生物学研究中的应用
叶绿素荧光分析技术在植物生物学研究中的应用叶绿素荧光分析技术（Chlorophyll Fluorescence Analysis, CFA）是一种广泛应用于植物生物学研究的非侵入性、快速、准确的技术手段。
通过测量光合作用中叶绿素荧光的特性，可以获得植物生理和生化过程的相关信息，包括光合效率、光抑制程度、损失机制等。
叶绿素荧光分析技术已经在植物生物学研究的各个领域得到了广泛的应用。
首先，叶绿素荧光分析技术可以用于研究植物的光合作用效率。
光合作用是植物生长和发育的关键过程，而叶绿素荧光是光合作用活性的直接反映。
通过测量叶绿素荧光参数，如最大光化学效率（Fv/Fm）、有效光量子产生率（Yield）、电子传递速率（ETR）等，可以评估植物的光合作用效率，并揭示光合作用过程中的限制因素和调节机制。
其次，叶绿素荧光分析技术可用于研究植物的抗逆性。
植物在生长过程中会面临各种逆境胁迫，如高温、干旱、盐碱等。
这些逆境胁迫会影响植物的生理和生化过程，进而降低植物生长和产量。
叶绿素荧光分析技术可以通过测量不同荧光参数的变化，如非光化学淬灭（NPQ）、非光化学猝灭（qN）等，评估植物对逆境胁迫的响应和适应能力，有助于筛选和培育抗逆性较高的植物品种。
第三，叶绿素荧光分析技术还可以用于研究植物的生长发育和叶片退化过程。
植物的生长和发育是一个复杂的过程，受光照、温度、水分等环境因素的影响。
叶绿素荧光分析技术可以通过测量荧光参数的变化，如初级光化学光谱（O-J-I-P曲线）、最大劲度光化学效率（Vj）、ABS/RC等，评估植物的生长发育状态和叶片衰老程度，为优化植物的生长环境和调控光合作用提供依据。
最后，叶绿素荧光分析技术还可以应用于环境污染监测和生态系统研究。
环境污染物对植物生长和光合作用活性的影响是导致生态系统退化的重要因素之一、叶绿素荧光分析技术可以通过测量不同荧光参数的变化，如荧光上升动力学曲线（Fs）和最大荧光高度（Fm’）、电子传递速率（ETR）等，评估植物对环境污染的响应程度和生态系统的健康状况。
植物光合作用中叶绿素荧光信号的采集与分析
植物光合作用中叶绿素荧光信号的采集与分析植物是生命的重要组成部分，可以通过一种称为光合作用的生化过程将阳光、水和二氧化碳转化为有机化合物和氧气。
光合作用的关键因素是叶绿素，它可以帮助植物吸收光线能量，然后将其转换为化学能以支持生长和发育。
然而，叶绿素也会发出荧光信号，这是因为在光合作用过程中，有一部分能量无法被植物利用，而是以荧光的形式被释放出来。
这些荧光信号可以用来研究植物进行光合作用的效率，并且可以提供关于植物健康状况的有用信息。
下面将详细探讨植物光合作用中叶绿素荧光信号的采集和分析。
一、叶绿素荧光信号的采集叶绿素荧光信号的采集是通过荧光成像仪、复合型光谱仪和便携式测量仪等设备来完成的。
这些设备可以在不破坏植物结构和生物学功能的情况下，对叶绿素荧光进行精确测量。
荧光成像仪是一种高分辨率的设备，能够在整个植物体内进行荧光测量。
它通常通过用不同颜色的滤镜来选择荧光波长范围，从而对叶绿素荧光进行区分和定量。
复合型光谱仪可以精确地检测不同波长的光线，并计算荧光信号的发射强度。
它可以提供相对于草原和森林典型植物的基线荧光，并提供该荧光信号随光点光密度的变化。
便携式荧光测量仪则是一种小型、易于携带的设备，可用于田间测量。
该仪器可以通过测量不同波长下的荧光信号来确定植物光合作用和叶绿素荧光的效率和健康状况。
二、叶绿素荧光信号的分析通过对叶绿素荧光信号的分析，可以评估植物对环境条件的响应和适应能力，包括光合作用效率、生长速率和植物健康状况等。
1. 光合作用效率分析光合作用效率是通过评估叶绿素荧光信号的特定参数来确定的。
其中最常用的参数是光能利用效率（ФPSII），它用于测量光合作用的能源利用效率。
这是通过比较载体光（即未试验光）和光启动样本（即外界光源短时间照射时产生的荧光）下的叶绿素荧光信号来确定的。
此外，荧光信号的持续时间或转化也是评估光合作用效率和疲劳的一个关键参数。
荧光发射后消失的时间越短，荧光信号的升高程度越低，表明植物的光合作用效率越高。
叶绿素荧光研究技术
叶绿素荧光研究技术叶绿素荧光是研究光合作用和植物生理过程的一个重要手段。
叶绿素荧光是叶绿素分子受到光照激发后，发射出的荧光信号。
该技术能够监测光合能力和光合调节机制，了解植物正常或异常生长状况，研究非光合组织如果实和种子的生理过程，评估植物生长环境的适应性等。
一、叶绿素荧光测量原理叶绿素分子吸收光能后，能量被转移给氧化还原反应中心。
当光强过大或光能无法被消耗时，多余的光能会被氧化还原反应中心转化为热量，导致光合系统的损伤。
而当光合系统接受的光能较少时，荧光的发射会增加。
因此，测量叶绿素荧光的强度和特性可以反映光合系统工作的性能。
二、叶绿素荧光参数1.Fv/Fm：最大光化学效率，反映PSII反应中心的状态，值接近0.8时表明植物处于良好的生长状态；2.Fv/Fo：PSII光化学效率，反映感光物质的活性；3.Fm/Fo：光合色素电子传递量，反映光合色素的电子传递能力；4.ETR：PSII电子传递速率，根据荧光叶片的调制的能量进行计算；5.NPQ：非光化学淬灭，表征过量光能和植物应激状态的多巴胺合成。
三、叶绿素荧光测量方法1.便携式叶绿素荧光仪（PAM）：PAM技术适用于野外生态学、环境评估和植物生理等领域研究。
优点是操作简单，适用范围广，可以直接用于测量植物的光合效率、叶片蒸腾等。
2.受控环境下的叶绿素荧光分析仪：此类仪器通常配备一个收集样本荧光的光电探测器和一个稳定的光源。
与PAM相比，仪器的体积较大，需要受控环境条件下进行测量，但有更高的精度和稳定性。
3.瞬态叶绿素荧光测量：瞬态叶绿素荧光测量方法能够提供叶绿素荧光曲线的全面信息。
它利用激光闪光对植物进行刺激，然后通过检测荧光信号的时间和强度来得到更准确的数据，并推断光合电子传递的很多参数。
四、叶绿素荧光研究应用1.光合调节机制研究：通过测量叶绿素荧光参数，可以识别植物光合调节机制的不同特征，对了解光合作用的调控机制具有重要意义。
2.植物逆境胁迫研究：叶绿素荧光参数能够反映植物受到逆境胁迫时的生理和生化变化，如光强强度、干旱和高温等环境条件下的光合能力和耐受性。
光合细胞中叶绿素荧光的成像技术及应用
光合细胞中叶绿素荧光的成像技术及应用生命离不开光合作用，而叶绿素则是光合作用过程中不可或缺的一部分。
在光合作用中，叶绿素吸收光能并将其转换成能量，然而它们也会发生叶绿素荧光现象。
叶绿素荧光是指在光条件下，叶绿素分子发生荧光反应，发出可见光的现象。
因此，叶绿素荧光被广泛应用于生命科学中，特别是生物成像领域。
叶绿素荧光成像技术是一项非破坏性的光学检测技术，它自然地将光合作用和叶绿素荧光显像结合在一起，通过光学成像技术来研究各种生物的代谢状态和结构。
该技术已被广泛用于诸如植物、藻类、细菌、海洋生物等各种生物体系的研究中。
本文将着重介绍叶绿素荧光成像技术在光合细胞中的应用。
一、叶绿素荧光成像技术的原理叶绿素荧光成像技术依赖于叶绿素荧光的发射。
在光合作用期间，光线通过叶绿素分子时，一部分光线被吸收，另一部分则被散射。
被吸收的光线被转化为能量，使叶绿素电子激发到激发态，然后这些电子向其他叶绿素分子传递能量，而其中的一部分能量将不被利用而被转化成热能或叶绿素荧光。
荧光是一种自发的、瞬间的光反应，它释放一个光子并导致分子从激发态恢复到基态。
因此，荧光可以反映叶绿素分子在某些条件下的状态。
二、叶绿素荧光成像技术的应用1. 了解光合细胞的状态叶绿素荧光成像技术可以通过观察绿色荧光物质如何转化成不同光线和颜色，以了解光合细胞中叶绿素的状态。
通过叶绿素荧光成像技术，可以有效地检测到细菌、藻类和植物的光合作用中的一些特定环节的反应和变化。
在这些生物中，生物体荧光图像的形态和位置与光合成效率之间存在一定的关系，在不同的生长和环境条件下，不同类型的光合细胞体会显示出不同的光谱特性和荧光图像特征。
2. 研究光合细胞的构造及其变化叶绿素荧光成像技术可以将叶绿素荧光作为一种非侵入性探针，直接了解到光合细胞的光学特性，以及组织，细胞和光合体中的叶绿素和类叶绿体含量。
在研究植物和藻类时，这项技术对细胞结构、形态和吸收光光谱等方面的探究具有极大的帮助。
叶绿素荧光的实验报告
1. 了解叶绿素荧光的基本原理和特性；2. 掌握叶绿素荧光光谱的测定方法；3. 分析叶绿素荧光与光合作用的关系。
二、实验原理叶绿素荧光是指叶绿素分子在吸收光能后，部分能量以热能形式散失，另一部分能量被叶绿素分子重新吸收并转化为光能的过程。
叶绿素荧光光谱的测定可以反映叶绿素分子在光合作用过程中的能量转移和转化情况。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜叶片（如菠菜、小麦等）2. 实验仪器：荧光分光光度计、荧光激发光源、比色皿、剪刀、镊子、滤纸、乙醇等四、实验步骤1. 叶片制备：取新鲜叶片，用剪刀剪成约1cm²的小块，放入装有少量乙醇的比色皿中，浸泡约10分钟，使叶片脱色。
2. 荧光激发：将脱色后的叶片放入荧光分光光度计的样品室中，调整荧光激发光源的波长为440nm，激发叶片。
3. 荧光光谱测定：在荧光激发光源照射下，分别测定叶片在440nm、490nm、530nm、565nm、590nm、620nm、640nm、660nm、680nm、700nm等波长下的荧光强度。
4. 数据处理：将测得的荧光强度数据输入计算机，利用荧光分光光度计自带软件进行数据处理和分析。
五、实验结果与分析1. 荧光光谱分析：根据实验数据绘制叶绿素荧光光谱图，分析叶绿素分子在光合作用过程中的能量转移和转化情况。
2. 荧光与光合作用的关系：比较不同处理条件下（如光照、温度、氮素供应等）叶绿素荧光光谱的变化，分析叶绿素荧光与光合作用的关系。
1. 叶绿素荧光光谱反映了叶绿素分子在光合作用过程中的能量转移和转化情况；2. 叶绿素荧光强度与光合作用强度呈正相关，即光合作用强度越高，叶绿素荧光强度越大；3. 光照、温度、氮素供应等因素对叶绿素荧光有显著影响。
七、实验讨论1. 实验过程中，叶片制备和荧光激发光源的调整对实验结果有较大影响，需严格控制实验条件；2. 叶绿素荧光光谱的测定结果受多种因素影响，如叶片种类、生长环境等，实验结果具有一定局限性；3. 叶绿素荧光光谱分析为研究光合作用过程提供了一种新的手段，有助于深入了解光合作用机理。
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JUNIOR PAM测量参数
continued
Thanks
测量光源：蓝色LED，，标准强度0.1 μmol m-2 s-1 PAR。 光化光源：蓝色LED，光强范围0～1500 μmol m-2 s-1PAR（光纤与样 品间的距离为1 mm时）。 饱和脉冲光源：蓝色LED，最大饱和闪光强度3000 μmol m-2 s-1PAR 。 远红光源：LED，730 nm。 信号检测：PIN-光电二极管，带短波截止滤光片（λ>710 nm）；选择性 锁相放大器（专利设计）。 微光纤：长40cm，直径1.5 mm。 测量参数：Fo、Fm、Fv/Fm、Ft、Fm’、Fo’、qP、qN、NPQ和rETR等 主机大小：11.3 x 6.2 x2 .8 cm 重量：150 g 电源供应：由电脑供电 耗电：基本操作200 mW（5 V/30 mA），打开饱和脉冲时500 mW（5 V/100 mA） 工作温度：10～40℃ 工作湿度：35％～85％
qN和NPQ
非光化学淬灭的参数
这两个参数都与类囊体基质中依赖pH和玉米黄素产生过程的激发能的非光化学淬 灭相关。与以前的荧光系数比较，qN和NPQ的计算总要测定样品暗适应和光适应 条件下的荧光。
Y(NO)和Y(NPQ)
参与非光化学淬灭的能量
对于集合光合天线分子，Y（NPQ）可以定量激发能通过光保护机制散失的能量： 其他非光化学能量称为Y(NO)。最后，光化学和非光化学耗能之和为1： Y(Ⅱ)+Y(NPQ)+Y(NO)=1
（开/关）频率，检测器只记录与测量光同频的荧光， 因此调制荧光仪允许测量所有生理状态下的荧光，包 括背景光很强时。
饱和脉冲技术，打开一个持续时间很短（一般小于1 s）
的强光关闭所有的电子门（光合作用被暂时抑制）， 从而使叶绿素荧光达到最大。饱和脉冲（Saturation Pulse, SP）可被看作是光化光的一个特例。 光化光越强，PS II释放的电子越多，PQ处累积的电子 越多，也就是说关闭态的电子门越多，F越高。当光化 光达到使所有的电子门都关闭（不能进行光合作用） 的强度时，就称之为饱和脉冲。
为计算ETR，WinControl-3使用JUNIOR PAM内部脉冲激发辐射装置得到 PAR值。在其他光照条件下，不使用PAR带入ETR计算。
光曲线 (Light Curve)
测量程序<Light Curve>指暴露在光强持续增加的活化光下的测定程序。通常，每 个光强的时间间隔对于光合反应完全达到平衡太短。因此，将这中光曲线称为“快 速光曲线”（Rapid Light Curves， RLC），它说明当前光合的状态，不能和经典 光合光相应曲线相混。
JUNIOR PAM测量参数
continued
相对电子传递速率（Relative Electron Transport Rate, ETR ）
根据ETR=PAR•ETR-Factor•PPS2/PPPS•Y(Ⅱ)计算。
光合激发辐射 （Photosynthetic active radiation，PAR ）
光合作用过程的各个步骤密切偶联，因此任何 一步的变化都会影响到PS II从而引起荧光变化，也 就是说通过叶绿素荧光几乎可以探测所有光合作用 过程的变化.
JUNIOR PAM
（Pulse Amplitude Modulated Fluorescence，PAM）
基础调制叶绿素 荧光仪
JUNIOR PAM的主要操作过程
Fo’=1/(1/Fo-1/Fm+1/Fm’)
Fm’：饱和光脉冲诱导期PSⅡ反应中心暂时关闭时 的最大荧光值。 F’：F’值是光处理期间打饱和脉冲光之前荧光曲线 上的点的取值。
JUNIOR PAM测量参数
continued
荧光淬灭系数（Fluorescence Quenching Coefficients）
叶绿素荧光与分析技术
郑彩霞
光合作用与叶绿素荧光
在光合膜上，有2％到10%的吸收光能以PSII荧光的形式释 放出来。而PSI发射的荧光量很小并且是恒定的，这里没有 进行考虑。
活体状态下，叶绿素荧光几乎全部来源于PS II 的Chla（包括天线Chl a），活体叶绿素荧光提供 的快速信息仅仅反映了PS II对激发能的利用和耗散 情况.
暗适应中荧光的增加由暗适应和光适应下叶片光化学淬灭由最大到最小引起的
（Fm-Fo和Fm’-Fo’）。 光适应中荧光量的降低由不产生光化学淬灭和达到最大光化学淬灭（Fm-Fm’和FoFo’）的光淬灭引起的。 在饱和脉冲光发射之前，在Fm’和Fo’之间的区域内，诱导曲线上荧光的水平为F’， 它表示PSⅡ反应中心的关闭程度。
JUNIOR PAM测量参数 相对荧光产量（Relative Fluorescence Yields）
暗适应下测定的参数
Fm：关闭所有PSⅡ反应中心的高光强脉冲激发的最大荧光值。
Fm= Fo + Fv。 Fo ：固定荧光或初始荧光产量，也称基础荧光。代表不参与
PS Ⅱ光化学反应的光能辐射部分，是PS Ⅱ反应中心处于完
Saturation Pulse Method of Quenching Analysis
JUNIOR PAM技术参数
测量光源：蓝色LED，，标准强度0.1 μ mol m-2 s-1 PAR。
光化光源：蓝色LED，光强范围0～1500 μ mol m-2 s-1PAR（
光纤与样品间的距离为1 mm时）。 饱和脉冲光源：蓝色LED，最大饱和闪光强度3000 μ mol m2 s-1PAR。 远红光源：LED，730 nm。 微光纤：长40cm，直径1.5 mm。 测量参数：Fo、Fm、Fv/Fm、Ft、Fm’、Fo’、qP、qN、NPQ 和rETR等
光适应叶夹
暗适应叶夹
•调制叶绿素荧光技术作为测定植物光合作用 最简便有效的技术，在国际生物学界多个领 域得到了非常广泛的应用，如研究植物胁迫、 衰老、筛选突变体等。
•PAM技术与荧光淬灭的饱和脉冲分析结合是
目前测定植物光合作用的标准技术
叶绿素荧光仪工作原理
调制技术：用于激发荧光的测量光具有一定的调制
Fv/Fm和Y(Ⅱ) PSⅡ最大光化学消耗和有效光化学消耗
Y(Ⅱ)衡量激发能用于光化学的量。
qp和qL 非光化学淬灭的参数
这两个参数都是衡量PSⅡ反应中心那部分能量的。qp建立在单个的PSⅡ天线分子 的概念上，而qL假设天线分子之间彼此联系，更接近于叶片内真实情况。这两个 参数的测定不需要使用暗适应样品进行荧光测定，Fo按照Oxborough和 Baker(1997)方法经过计算得到。
全开放时的荧光产量，它与叶绿素浓度有关。 Fv ：可变荧光产量，代表可参与PS Ⅱ光化学反应的光能辐射 部分，反映了PS Ⅱ原初电子受体QA 的还原情况。 Fo 维持PSⅡ反应中心打开的低光强激发的最小荧光值。
光适应下需要测定的参数
Fo’：光处理中的最小荧光值：在<Fo’-Mode>中， Fo’荧光在饱和脉冲之后发出，暗适应是PSⅠ受 到远红光激发快速转运光系统间的电子，因此开 启PSⅡ反应中心。