AKTA层析仪使用操作规程(AKTA蛋白纯化系统经典培训资料)
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程
1、使用前,根据自己所要分离蛋白的性质确定所需的分离柱及缓冲液,打开计
算机及仪器,但不要急于打开软件,等计算机与仪器连接再打开软件,此过程大约需要3-5分钟。
2、将纯水先抽滤脱气,使用?0.45μm的滤膜,,然后选择流路连到机器上,先洗泵,然后给机器一个流速和压力。
选择的最高压力须小于柱子所能承受的压力极限。
3、将柱子连接到仪器上,接柱子时,须等进液管中的液体出来,将柱子的一头与进液管通过接头连接,先不要拧的太紧,等液体从柱子的另一头流出,再用接头将其与出液管相连拧紧,再将进液管端拧紧,这样防止柱子中进入气泡,影响分离效果。
4、柱子接上后,换上配好的缓冲液,须抽滤脱气,用缓冲液平衡至仪器的各条基线都平后,再上样。
5、上样时,必须通过滤膜过滤,0.22μm,,具体上样体积视样品浓度而定,采用
不同的上样环上样。
6、仪器使用完毕,切记要用纯水清洗泵和柱子,洗柱直至各条基线都平为止,防止盐和粒子结晶于泵和柱子使机器报废。
若长期不用,再用20%的乙醇清洗系统和
柱子,防止泵和柱子生长微生物,这一步非常重要,。
7、仪器的PH计每隔一段时间,一个月,须校准一次。
紫外流动池也需定期清洗,三个月,。
生物技术中心仪器管理人,李红兵
2006年10月15日。
AKTAprime操作规程 范本
昆山市工业技术研究院小核酸生物技术研究所有限责任公司ÄKTAprime 全自动层析仪操作规程操作步骤：1.开机：先启动电脑，等电脑启动完成后打开AKTAprime主机电源。
2.点击桌面上的Primeview图标进入层析监视界面。
3.将A/B管道分别放入0.45um/0.22um过滤去离子水中。
4.在AKTAprime主机操作界面按上下键选择Manual Run进入操作菜单界面。
5.选择“Set Pressure Linit”设置系统压力上限，选择“Set Flow Rate”设置流速，选择“Start Run运行。
6.按下操作面板上的“Pause/Cont.”暂停运行。
7.将A/B管道分别放入0.45um/0.22um过滤buffer中。
8.重复操作步骤4—5。
9.按下操作面板上“end”按钮，结束运行。
10.安装层析柱，将层析柱上下管道分别接入AKTA相对应的接口。
11.选择“Set Flow Rate”设置流速，选择“Set Pressure Linit”设置层析柱压力上限，选择“Start Run”运行，开始平衡层析柱。
12.将样品用注射器推入样品环中，选择“Manual Run—Set Inject valvePos--Injection”命令开始进样，等样品全部层析柱后切换“Injection”到“Load”状态。
13.选择“Manual Run—Set Gradient/concentration”命令设置洗脱梯度。
14.洗脱完成后按下控制面板“end”按钮结束层析方法。
15.双击桌面“PrimeView Evaluation”图标，进入Evaluation界面，在Manual run中找到刚才运行的色谱图，选择菜单栏“File—Save As..”命令保存。
16.方法运行完毕后，用0.45um/0.22um过滤后的去离子水冲洗管道。
17.当电导和PH降至中性时换上20%乙醇冲洗管道，直到将所有管道充满乙醇为止。
蛋白纯化AKTA操作说明(二)
蛋白纯化AKTA操作说明（二）引言概述：本文档旨在提供关于蛋白纯化AKTA操作的详细说明。
蛋白纯化是生物化学和生物技术中常用的实验技术之一，能够用于从复杂的生物样品中纯化目标蛋白质。
AKTA操作是常用的蛋白纯化系统，本文将介绍该系统的操作步骤和注意事项，帮助用户顺利进行蛋白纯化实验。
正文：一、AKTA操作之仪器准备1. 确保AKTA蛋白纯化系统已经连接好电源，并打开主机电源开关。
2. 检查液氮罐中的液氮是否充足，并确保液位高于所需运行温度。
3. 打开冰盒，准备好所需的离心管、移液器和其他实验器材。
二、AKTA操作之列柱装配1. 按照实验要求选择合适的色谱柱和填料，并正确装配到AKTA系统中。
2. 使用力学手套松开色谱柱底部的螺丝，将填料注入色谱柱中，确保填料均匀。
3. 同时，注意将填料与色谱柱的连接口处用黑色硅胶密封，以免液体泄漏。
三、AKTA操作之流程设置1. 打开AKTA系统的软件界面，并选择“新建方法”。
2. 在方法设置界面中，设定蛋白纯化的各个步骤，如进样、洗脱等流程参数。
3. 根据实验需求，选择合适的梯度洗脱方案，并输入相应的洗脱液体浓度。
四、AKTA操作之样品处理1. 将待纯化的生物样品进行预处理，如离心、过滤等，以去除杂质。
2. 根据纯化需求，可进行某些特定试剂的添加，如酶切剂、亲和标记剂等。
3. 根据方法设置，将样品装入进样器中，并调整进样量和进样流速。
五、AKTA操作之运行实验1. 保存并加载所设置的方法，确保参数设定正确。
2. 启动AKTA系统，开始实验运行，并监控过程中的各项参数指标。
3. 及时记录实验数据，并根据需要进行样品采样、保存等操作。
总结：通过本文所述的蛋白纯化AKTA操作说明，用户可以了解到系统准备、列柱装配、流程设置、样品处理和运行实验等关键步骤。
合理而正确的操作，将帮助用户获得高质量的蛋白纯化结果。
同时，用户还需根据实际操作中的具体情况，进一步优化实验参数，以满足各自的研究需求。
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程一、目的：为了确保蛋白纯化层析系统操作的准确性、稳定性和安全性，保证实验结果的可靠性，制定本操作规程。
二、适用范围：本操作规程适用于实验室内的AKTA蛋白纯化层析系统操作。
三、操作流程：1.准备工作：(1)预热：打开系统电源，预热至设定温度（一般为室温）。
(2)洗涤缓冲液：根据实验要求，制备所需的洗涤缓冲液，确保其浓度和pH值符合要求。
(3)净化缓冲液：根据实验要求，制备所需的净化缓冲液，确保其浓度和pH值符合要求。
(4)样品：根据实验要求，制备所需的样品。
2.系统配置：(1)连接仪器：将系统中的各个模块连接好，包括色谱柱、注射器、检测器等。
(2)配置方法参数：根据实验要求，在系统内设置合适的流速、梯度洗脱条件等相关参数。
3.样品处理：(1)样品加载：将样品注入到加载注射器中，通过样品加载阀注入到色谱柱中。
(2)洗脱：根据实验要求，设置梯度洗脱条件，将混合物中的目标蛋白纯化。
4.系统清洗：(1)注射器清洗：每次实验结束后，将注射器从系统中取出，用纯化缓冲液反复洗涤至无污染为止。
(2)色谱柱清洗：每次实验结束后，将色谱柱从系统中取出，用纯化缓冲液反复洗涤至无污染为止。
5.系统关闭：(1)关闭电源：关闭系统电源，断开电源线连接。
(2)清洗系统：将系统中的各个模块用水冲洗干净，保持干燥。
(3)整理工作台：将使用过的耗材整理归位，清理工作台。
四、操作注意事项：1.操作前应仔细阅读操作手册，了解仪器的基本原理和操作要点。
2.操作时要穿戴实验室个人防护用品，避免吸入或接触有害物质。
3.在操作过程中，要严格按照实验要求进行，避免操作失误。
4.定期检查系统的运行状态，保证系统正常工作。
5.操作完成后，要及时清洗和整理仪器，保持仪器的干净和完好。
五、风险控制与安全措施：1.使用过程中，注意避免溶液飞溅引起的伤害，避免溶剂和化学品的吸入或接触。
2.避免电源短路或其他电气故障引起的意外事故。
AKTApurifier 层析操作规程
AKTApurifer层析仪操作规程
1、打开电脑和显示器，打开层析仪电源，等待仪器自检完成后，点击电脑桌
面上的UNICORN软件，输入用户名和密码进入软件控制系统。
2、系统清洗：依次用水和缓冲液。
A管放入A缓冲液中，B管放入B 缓冲
液中，进样阀4，5出口管和收集阀的废液出口接到废液瓶中，在System control窗口下，点击Manual打开pump菜单，选择PumpWashPurifier命令，指定冲洗液入口，执行。
样品环的清洗用注射器从进样阀3号位推入缓冲液，反复几次。
3、手动控制：在运行前设定Alarm & Mon 中的报警压力。
缓冲液平衡柱，
用注射器从进样阀3入口推入过滤好的样品，着路在样品环中。
待基线稳定后，在flowpath菜单中injectValve选择切换到inject状态上样，并在Alarm & Mon菜单中选autozeroUV 将紫外调零，上样后转换到load状态，进行样品的洗脱操作。
4、自动控制：先在Method Edit窗口中编辑好方法，然后用注射器从进样阀
3入口推入过滤好的样品着路在样品环中，在System control的窗口中直接按Run，调出编辑好的程序，按照提示将它运行。
5、纯化结束后，用水和20％乙醇依次清洗管路和保存。
如果用泵上样品，
运行PumpWashPurifier命令，将上样品的入口选中，并放置在1MNaOH 中，运行30min，然后用缓冲液，水和20％乙醇依次清洗和保存管路。
蛋白纯化AKTA操作说明(一)2024
蛋白纯化AKTA操作说明（一）引言概述：蛋白纯化是生物技术研究中常用的一种重要技术手段，通过纯化目标蛋白，可以实现对其结构、功能和相互作用的进一步研究。
AKTA是一种常用的蛋白纯化设备，本文将介绍如何进行AKTA操作以获得高纯度的蛋白样品。
本文分为五个大点：设备准备、准备实验材料、样品制备、纯化操作步骤、数据处理和总结。
正文：一、设备准备：1. 查看设备状况：检查AKTA设备的各个组件是否齐全，并确保设备正常工作。
2. 设备消毒：使用适当的消毒剂对AKTA设备进行消毒，确保实验过程的无菌。
二、准备实验材料：1. 缓冲液：根据实验需要选择不同的缓冲液，并准备足够的量。
2. 标记抗体：根据实验需要选择适当的标记抗体，并准备足够的量。
3. 标记亲和树脂：根据实验需要选择适当的标记亲和树脂，并准备足够的量。
4. 标准品：准备适当浓度的标准品作为纯化过程中的参考。
三、样品制备：1. 细胞裂解：采用适当的方法对细胞进行裂解，获得含有目标蛋白的裂解液。
2. 预处理：根据裂解液的性质，进行适当的预处理，如去除杂质、调整pH值等。
3. 样品加载：将预处理后的样品加载到纯化系统中，确保样品的均匀分布。
四、纯化操作步骤：1. 初始化设备：打开AKTA软件，选择纯化方法，并设置相关参数。
2. 样品加载：将样品加载到设备中，并根据实验要求选择适当的柱子和纯化方案。
3. 洗脱：使用缓冲液进行洗脱，去除非目标蛋白和杂质。
4. 目标蛋白回收：使用适当的缓冲液洗脱目标蛋白，并将其收集到已经标记好的收集管中。
5. 清洗设备：使用适当的缓冲液对设备进行清洗，防止交叉污染。
五、数据处理和总结：1. 数据记录：记录纯化过程中的各项数据，如流速、吸光度和洗脱峰。
2. 数据分析：对纯化结果进行分析和比较，评估纯化效果。
3. 总结经验：根据纯化结果总结操作经验，以优化蛋白纯化的流程和效率。
总结：本文介绍了蛋白纯化AKTA操作的基本步骤。
通过设备准备、准备实验材料、样品制备、纯化操作步骤和数据处理，可以获得高纯度的蛋白样品，为后续的蛋白研究提供了可靠的基础。
(完整word版)蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control界面，Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......；Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。
akta 操作规程
akta 操作规程操作规程是指为了规范化、标准化工作流程，确保工作的安全和高效进行而制定的一系列规范和步骤。
以下是关于akta操作规程的一份示例，总字数为1200字。
一、引言akta操作规程旨在确保在akta工作流程中的每个步骤都按照标准程序和最佳实践进行操作，以保证最佳的实验结果和避免任何潜在的风险和错误。
二、适用范围本操作规程适用于所有参与akta工作流程的工作人员，包括实验室技术人员、研究人员等。
三、定义1. akta：一种用于蛋白质纯化的仪器。
2. 标本：指待处理的蛋白质溶液。
四、工作准备1. 检查akta设备是否正常运作，并进行必要的维护和保养。
2. 准备所需的试剂和耗材。
3. 检查仪器和试剂的质量和有效期。
五、样品处理1. 按照相关的实验方案和标准操作程序将标本添加到akta设备中。
2. 设置合适的参数，如流速、压力等，以确保蛋白质纯化的效果最佳。
3. 监测纯化过程中的各项参数，如pH值、溶液浓度等，及时进行调整。
4. 在工作过程中严格遵守个人防护要求，如戴手套、穿实验服，并避免直接暴露于有害化学物质中。
5. 严格按照规定的时间和步骤进行样品处理，避免任何错误。
六、数据记录与分析1. 在整个纯化过程中，准确记录关键步骤和操作参数。
2. 在操作过程中及时记录实验结果，包括纯化效果、产率等。
3. 对结果进行合理的分析和解释，并进行必要的调整和改进。
七、安全措施1. 在操作过程中，严格遵守实验室的安全规定，使用个人防护设备。
2. 防止刺激性、致敏性和有毒性物质的接触，并妥善处理废弃物。
3. 在有害气体、溶液或物质存在的情况下，确保有良好的通风条件。
八、仪器维护与清洁1. 在每次使用后及时进行仪器的维护和保养，检查仪器的功能是否正常。
2. 仪器清洁要求按照实验室的相关规定进行，保持工作区域的干净整洁。
九、问题解决1. 在操作过程中遇到任何问题，应立即与相关人员进行沟通和协调，确保问题及时解决。
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ÄKTApurifier层析仪使用操作规程
1、开机
打开仪器的主电源，打开电脑电源。
待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮并不闪烁）。
双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。
2、准备工作溶液和样品
所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。
当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈、甲醇），需在使用前用低频超声脱气10min。
3、清洗及管道准备
首先将A1管道放入缓冲液或平衡液，binding buffer中，将B1管道放入高盐溶液中或elution buffer，在system control窗口点击工具栏内的manual，选择 pump→pump wash basic，选中A1,B1管道为ON， execute。
泵清洗将自动结束。
4、安装层析柱
在manual里选择pump→flow rate，输入流速1ml/ml，insert；选择Alarm&mon→alarm pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），insert，execute。
待InjectionValve的1号位管道流出水后接入柱子的柱头，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道连上紫外流动池。
5、开始纯化：
1）等待柱子平衡好了（观察电导COND，pH的数值和变化趋势）就准备上样了。
此时将紫外调零，选择Alarm&mon→autozero，exectue。
2）用样品环上：将样品吸进注射器，推掉气泡，从injectionValve的3号位推入（进样量不得低于样品环的体积的2倍）推好后不要取下注射器。
在manual里选择flowpath→injectionValve→inject，execute。
3）用泵上样：点击pause，将A1放入样品中，点击countine，待样品上完后，再将A1放入到平衡液中继续清洗柱子。
2),3)选择一种方式
4）洗脱：上样后用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。
在manual里选择pump→gradient，按照自己的工艺选择targetB（100％）和length（10CV）。
5）设定收集：选择Frac→fractionation_900,输入每管收集体积，exectue。
结束固定体积收集选择Frac→fractionation_stop_900，exectue。
6、清洗泵及卸下层析柱：
将A1和B1入口放入纯水中，启动pump wash purifier功能冲洗A泵和B泵及整个管路。
然后再将A1和B1入口放入20％乙醇中，同样操作将乙醇冲满整个管路保存。
系统给柱子一个慢流速，设置系统保护压力，然后先拆柱子的下端，正在滴水的时候将堵头拧上，再拆柱子的上端，最后拧上上端的堵头。
整个过程防止气泡进入。
7、关闭电源：
从软件控制系统的第一个窗口unicorn manager点击退出，其他窗口不能单独关闭。
然后关闭AKTA主机电源，关闭电脑电源。