微生物学检验--操作流程及评分标准
微生物检测实验操作评分标准
完成实验酒精棉球擦拭手或者洗手（2分）
2
未擦拭手或洗手扣1分
4
分离效果
20
10
10个以上单菌落，少一个扣1分
分区效果
5
无明显分区，只有一个区，扣5分
平板无菌落区按站的比例扣分
污染情况
5
有其他杂菌污染，扣5分
5
5
5分钟，超过1分钟扣1分
4
接种环不灼烧扣4分
灼烧不彻底最多扣3分
接种环拿法不正确扣1分
2试管Leabharlann 取菌（15分）50分3
试管口未灼烧，扣3分
2
持塞手法不正确，扣2分
3
接种环未冷却，扣3分
4
塞塞子是为灼烧塞子与管口，扣4分
3
试管口离开无菌区，扣3分
手法是否标准（5分）
1
持平板的手法不当扣1分
4
开口过大扣4分
分区接种（30分）
5
有离开5CM酒精灯无菌区1次扣2分，最多扣5分
食品中金黄色葡萄球菌平板划线分离考核标准
专业：班级：姓名：学号：
序号
内容
满分
(100分)
评分细则
扣分
总分
1
准备全所需的所有实验材料
15分
3
材料准备充分，中途取用物品扣3分
贴标签
4
未贴扣4分，贴错扣2分，信息不完整扣2分
酒精棉球擦拭手与工作台面
4
未擦拭扣4分
擦拭不彻底扣2分
台面擦拭不彻底扣2分
接种针的灼烧是否彻底，拿法是否科学
5
划完1区未灼烧，扣5分
5
灼烧完未冷却，扣5分
5
单手旋转平板，有明显的分区操作
微生物检测操作流程
微生物检测操作流程《微生物检测操作流程》微生物检测是一项重要的实验室技术，用于检测和鉴定各种微生物，包括细菌、真菌、病毒等。
本文将介绍一般的微生物检测操作流程。
一、样品采集与处理1. 样品选择：根据实验目的选择适当的样品类型，如水样、食品样、土壤样等。
2. 采集样品：采集样品时要注意避免污染和交叉污染。
3. 处理样品：根据具体情况，对样品进行处理，如稀释、研磨、过滤等。
二、培养基的制备1. 选择合适的培养基：根据待检微生物的特性选择适当的培养基类型。
2. 制备培养基：按照标准的配方和操作规程制备培养基。
三、菌落计数1. 加样和摇匀：将样品加入培养基中，并充分摇匀。
2. 培养：将培养基装入培养皿或培养瓶中，进行恒温培养。
3. 菌落计数：根据菌落的外观、形态等特征，进行菌落计数。
四、纯化和鉴定1. 提取纯种菌：从培养基上选取单个菌落，进行传代培养，获得纯种菌。
2. 形态鉴定：通过观察微生物的形态特征，如形状、大小、颜色等，进行初步鉴定。
3. 生理生化特性鉴定：通过对微生物的生理生化特性进行检测，如氧需求性、产气性、酶活性等，进一步鉴定。
五、分子生物学检测（可选）1. 提取DNA/RNA：采用适当的方法提取待检微生物的DNA或RNA。
2. PCR扩增：利用聚合酶链式反应（PCR）扩增目标序列。
3. 凝胶电泳：将PCR产物进行凝胶电泳分析，确定目标序列的存在与否。
六、结果分析与报告1. 结果解读：根据实验结果判断待检微生物是否合格。
2. 报告编写：撰写实验报告，包括实验方法、结果、分析和结论。
3. 结果验证：可以进行复核实验或委托第三方实验室进行验证。
以上即是一般的微生物检测操作流程，不同类型的微生物检测可能会有一些差异。
在实验中，操作人员应严格遵循操作规程，做好实验安全和样品处理，保证检测结果的准确性和可靠性。
食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准
食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准一、食品微生物检验技能操作试题本次考试有五组技能测试题供学生随机抽取，每一组题满分均为100分，占该门课程总成绩的70％。
第一组：使用高压灭菌锅进行培养基的灭菌，并回答相关问题。
第二组：微生物划线分离技术操作，并回答相关问题。
第三组：食品中细菌总数的测定操作，并回答相关问题。
第四组：食品中大肠菌群测定，并回答相关问题。
第五组：常用仪器的使用二、考试程序1、组织学生抽取考试序号，按照此序号依次进行技能考试。
2、按照考试序号组织学生在考前5分钟抽取试题，拿到试题后可以准备5分钟，然后开始操作和回答。
其他学生集中在另一教室等待。
3、考试完的学生不允许与等待考试的学生接触，要迅速离开考场，防止学生利用通讯工具交流试题内容。
三、评分标准第一组湿热灭菌操作一、一、操作用具及物品：高压灭菌锅、试管培养基、三角瓶、线绳、报纸或牛皮纸等。
二、操作过程及评分标准1．首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。
（10分）2．放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。
注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。
（10分）3．加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。
再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。
（10分）4．用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。
(或等压力上升到0.5时，打开放气阀排出冷空气)待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。
当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。
本实验用 1．05kg/cm2，121．3℃，20分钟灭菌。
（10分）提问：1.为什么要放出冷空气？答：因空气是热的不良导体，当高压锅内的压力升高后，它聚集在锅的中下部，使饱和热蒸汽难与被灭菌物品接触。
微生物限度检查操作规程
微生物限度检查操作规程《微生物限度检查操作规程》一、目的微生物限度检查是用于确认产品是否符合微生物水平要求的一种分析方法。
本操作规程的目的是制定微生物限度检查的操作步骤，确保检查结果的准确性和可靠性。
二、适用范围本操作规程适用于所有需要进行微生物限度检查的产品，包括食品、医药和化妆品等。
三、操作步骤1. 准备工作：清洁实验室工作台面和仪器设备，准备所需的培养基和试剂，并确保仪器设备的正常运转。
2. 取样：按照产品的取样标准，从不同批次或不同位置进行取样，并确保取样的代表性。
3. 样品制备：将取样的产品进行样品制备，包括稀释、搅拌和过滤等步骤，以便于后续的微生物检查。
4. 培养：将样品接种在适当的培养基上，根据不同的微生物种类和要求进行培养，并进行恒温培养一定时间。
5. 计数：在培养一定时间后，对培养基上的菌落进行计数，并按照标准方法进行结果的记录和确认。
6. 结果判定：将检查结果与产品的微生物限度标准进行比对，根据结果作出是否合格的判定。
7. 结果记录：将微生物限度检查的结果进行记录，包括样品信息、操作步骤、检查结果和判定等信息，并将结果报告给相关部门或供应商。
四、注意事项1. 操作人员应具备一定的微生物检测知识和操作技能，严格按照操作规程执行。
2. 实验室应保持清洁、卫生，并进行定期消毒和验证。
3. 实验室设备应定期维护和校准，确保设备的准确性和可靠性。
4. 所使用的培养基和试剂应符合相关标准，存放在干燥、阴凉、避光的环境中。
5. 检查结果应及时报告，并根据结果采取相应的控制措施。
以上就是《微生物限度检查操作规程》的主要内容，希望能够帮助大家更好地进行微生物限度检查，确保产品质量和安全。
微生物检验的基本操作技术
微生物检验的基本操作技术一、样品的制备与处理1.样品的选择与采集：根据检验目的和要求，选择适当的样品，并根据采样规范进行取样。
比如，对食品的微生物检验，可以选择不同部位的样品，如表面、内部等；对饮用水的微生物检验，可以选择源头水、管网水等；对环境的微生物检验，可以选择空气、地表水等。
2.样品的保存与运输：为了避免样品中微生物的生长和变化，需要将样品保存在适当的条件下（如低温、暗处等）。
同时，在运输过程中，需要避免样品的污染和损坏。
3.样品的处理：样品处理过程通常包括样品的搅拌、过滤、稀释等。
搅拌可以均匀样品中的微生物分布；过滤可以去除样品中的固体颗粒；稀释可以将样品中微生物的浓度调整到适宜的浓度范围，以便后续的检测操作。
二、微生物的分离与纯化1.微生物培养基的选择：根据待检微生物的特性和对检测结果的要求，选择适当的培养基。
常用的培养基有通用培养基、选择性培养基和特殊培养基。
2.菌落计数：将经过处理的样品按照一定的稀释倍数进行均匀悬浮，并于培养基平板上进行接种。
经过一段时间的培养，可通过菌落的外观、形状、大小、颜色等来初步判断微生物的种类和数量。
3.纯化子菌株：从菌落中选取代表性菌落，通过反复传代培养，最终得到纯种菌株。
三、微生物的鉴定与鉴别1.形态学观察：通过显微镜观察微生物的形态特征，如细胞形状、大小、结构等，可以初步鉴定微生物的类别。
2.生理生化试验：通过微生物的代谢特性进行鉴定。
常用的生理生化试验包括氧需求性试验、酸碱反应试验、温度试验、营养需求试验、代谢产物试验等。
3.分子生物学手段：通过分子生物学技术，如聚合酶链反应（PCR）、DNA序列比对等，对微生物进行进一步的鉴定和鉴别。
例如，利用16SrRNA基因作为分子标志物，可以快速、准确地识别微生物种类。
四、微生物的计数与统计1.液体中微生物的计数：通过在培养基中逐级稀释样品，最后将稀释液接种于平板上，培养一段时间后，根据培养基中菌落的数量进行计数，以反推样品中微生物的浓度。
微生物检测操作规程
微生物检测操作规程《微生物检测操作规程》一、目的微生物检测操作规程旨在规范微生物检测实验的操作流程，确保检测结果的准确性和可靠性。
二、适用范围本规程适用于实验室内进行微生物检测实验的操作人员，包括但不限于食品、医药、环境等领域的微生物检测。
三、操作流程1. 实验前准备（1）检查所需物品和设备的完整性和清洁度；（2）准备好所需的培养基、培养皿、移液器等实验用品；（3）佩戴实验服和手套，保持操作环境清洁。
2. 样品处理（1）按照标准操作程序采集样品，并确保准确记录样品信息；（2）样品处理前进行必要的预处理，如稀释、离心等。
3. 培养和检测（1）按照操作规程在培养基上均匀涂布样品；（2）标注培养皿的信息，包括样品编号、培养基种类、培养温度等；（3）放置在适当的培养温度下培养一定时间；（4）观察培养皿的生长情况，记录培养时间和结果。
4. 结果分析（1）根据培养结果进行初步鉴定和计数；（2）必要时进行进一步的分离、鉴定和鉴定。
四、质控要求（1）实验操作人员应具备相应的微生物检测知识和技能，并接受相关的培训；（2）严格遵守操作规程，确保实验操作的准确性和一致性；（3）定期对实验室设备、试剂和培养基等进行检查和质量控制，确保其完好和有效。
五、记录和报告实验过程中产生的数据和结果应当及时记录，并进行审查和验证。
对于检测结果，应当制作详细的技术报告，包括检测方法、样品信息、结果分析和结论等内容。
六、实施本规程由实验室主管负责组织实施，并由实验室操作人员严格遵守。
七、附则本规程自发布之日起施行，如有变动将另行制定修订，并及时通知相关人员。
以上即为《微生物检测操作规程》的内容，希望广大实验室操作人员严格按照规程执行，确保微生物检测工作的准确性和可靠性。
微生物检验操作步骤
微生物检验操作步骤1.样品收集：根据检验目的选择合适的样品，如食品样品、水样、医疗器械等。
正确采集样品，避免样品受到污染。
2.样品制备：将收集到的样品进行处理，以适应后续的检验步骤。
例如，对食品样品进行均质处理、稀释等。
3.样品接种：将处理后的样品接种到含有合适培养基的培养皿或培养瓶中。
根据不同的微生物类型和检验目的，选择适当的培养基。
4.培养条件设置：根据微生物的生长特点，设置适当的培养条件，包括温度、湿度、氧气含量等。
常见的培养条件是37℃下的静态培养。
5.培养皿封闭：将培养皿或培养瓶盖封闭，避免外部的污染物进入。
可以使用透明胶带或铝箔密封。
6.培养：将已封闭的培养皿或培养瓶放入恒温培养箱中进行培养。
培养的时间因微生物的生长速度不同而不同，通常为24小时至7天。
7.观察：在培养过程中，定期观察微生物的生长状况。
可以在显微镜下观察细菌的形态、颜色、大小等特征，并记录下来。
8.制备涂片：当微生物生长到一定程度时，将培养皿中的细菌涂抹到玻璃片上。
涂片可以用于后续的染色和显微观察。
9.染色：选择合适的染色方法对涂片进行染色，以便更清晰地观察细菌的形态。
常用的染色方法包括革兰染色和抗酸染色。
10.显微观察：在显微镜下观察染色后的涂片，注意细菌的形态、排列方式、胞内结构等细节特征。
根据观察结果，确定微生物的种类。
11.计数：根据涂片的观察结果，使用细菌计数板或其他方法对微生物的数量进行估计。
通常会进行稀释和培养后计数。
12.结果分析：根据观察和计数结果，判断微生物是否符合相应的标准。
根据检验目的，确定微生物的种类和数量，判定样品是否合格。
13.结果报告：将检验结果整理成报告，包括微生物的种类和数量等信息。
报告应准确明确，便于评估和决策。
14.结束处理：检验完成后，对实验室设备进行清洁和消毒处理，避免细菌的传播和污染。
同时，将培养出的微生物进行适当的处理，如灭菌或安全处置。
以上是微生物检验的一般操作步骤，不同类型的微生物检验可能存在一些差异，具体操作步骤应根据实验方法和检验目的进行调整。
微生物检验流程及操作标准
微生物检验流程及操作标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：微生物检验是一种重要的实验室技术，用于检测食品、水质、环境等样品中的微生物存在情况。
微生物检验需要严格遵守一系列操作标准和流程，以确保检验结果的准确性和可靠性。
下面我们将介绍一下微生物检验的流程及操作标准。
一、样品采集1. 样品的采集需要采用无菌工具，并保持样品在采集过程中不受到外界环境的污染。
2. 样品的采集过程应尽量避免接触到任何可能引入外源微生物的物质，比如皮肤、空气等。
3. 采集的样品应标明正确的标识信息，包括样品名称、采集地点、采集日期等。
二、样品处理1. 样品收到实验室后，需要尽快进行处理，避免样品内的微生物增殖或死亡。
2. 样品处理过程需要保持在无菌条件下进行，使用无菌工具进行操作。
3. 样品处理过程中需要按照检验要求进行适当的稀释，以确保实验得出准确的结果。
三、培养基准备1. 培养基的制备需要按照标准的配方和步骤进行，以确保培养基的质量符合要求。
2. 制备培养基时需要严格遵守无菌操作规范，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
3. 制备好的培养基需要在适当的条件下保存，确保培养基的稳定性和有效性。
四、接种操作1. 在进行微生物检验之前，需要准备好无菌的接种环、移液器等工具。
2. 采取适当的方法将处理好的样品接种到培养基上，避免接种时引入外源微生物。
3. 接种操作需要在无菌条件下进行，避免培养物受到任何污染。
五、培养与观察1. 接种后的培养基需要置于适当的温度和湿度条件下进行培养，促使样品中的微生物生长。
2. 定期观察培养基上的生长情况，记录生长的数量和形态，用于后续的分析和鉴定。
3. 在观察过程中需要注意反复进行无菌操作，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
六、鉴定与结果解读1. 当样品中的微生物生长到一定程度时，需要进行鉴定和分析，确定其种属和数量。
2. 鉴定过程需要参考相关的鉴定手册和标准，进行适当的试验和测试。
3. 根据鉴定结果进行结果解读，判断样品中微生物的种类和数量是否符合标准要求。
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1）采样
持无菌棉拭1根，待受试者张大嘴巴后,迅速伸入对方悬臃垂后得咽喉部，轻轻揩取咽喉壁上得分泌物。
2)接种
以无菌方法用棉签在琼脂平板得一角（1/４处)来回划线，去掉棉拭，然后用接种环在原划线上过2～3下，接着往下划线分离。
（4）染色:结晶紫－--卢戈碘液--—95％乙醇-—－－稀释石炭酸复红－--待干、镜检（初染）—-——（媒染）-—--(脱色）——--（复染）
注
意
事
项
１、革兰氏染色成败得关键就是酒精脱色时间。
2、染色过程中勿使染色液干涸。
3、选用幼龄得细菌.G+菌培养１2ｈ—16ｈ,E、ｃoli培养24h。
基础培养基得制备与灭菌操作流程及评分标准
操
作
步
骤
（1)涂片：取清洁无油迹得载玻片1张，用蜡笔划线将其分成左右两格。用接种环先挑取生理盐水1～２环于载玻片每格中央，再分别挑取大肠杆菌与葡萄球菌少许菌落与生理盐水研匀，涂成直径约1、5cm得菌膜。
(2)干燥:让涂片自然干燥，也可在酒精灯火焰较远处微微加热烘干，但切勿靠近火焰。
（3)固定:干燥后得标本片在酒精灯火焰上来回通过3次（以钟摆得速度）,冷却后染色。固定得目得在于杀死细菌,并使菌膜与玻片牢固粘附，避免染色过程中被水冲洗掉,通过固定还可凝固细胞质，改变细菌对染料得通透性,使细菌易与染料结合而着色.
6、使用完毕，要把显微镜外表擦干净,并把镜筒旋下至最低处。最后把显微镜放入镜箱，送回原处保存。
细菌得形态学检验操作流程及评分标准
项目
内容
分值
扣分标准
扣分
目得
掌握革兰染色得基本原理与操作方法
用物
准备
革兰染色液、生理盐水、载玻片、接种环、酒精灯、显微镜、香柏油、蜡笔、擦镜纸、脱油剂
素质要求
能够熟练对细菌标本进行染色,观察结果，对细菌进行分类
灭菌穿刺针沾取细菌后，垂直刺入半固体培养基中央直达近管底处,再沿原穿刺线抽出即可。
注
意
事
项
1.选择适合其生长需要得培养基
2.防止污染。培养基与一切用具必须彻底灭菌;操作时必须靠近火焰；操作完毕后，禁止再让培养基接触外界空气。
3.防止接种器械过热，很容易杀死分离培养得细菌。
细菌得分布操作流程及评分标准
（２）结果观察
2.水中细菌检查
(1）方法：
1)用无菌三角烧瓶以无菌得方法采集水样。
2)用无菌吸管吸取1ml水样以无菌技术加入无菌平皿中。
3）趁热(不烫手为宜），倾注约15ml得普通琼脂，立即在台面上轻轻转动平皿使其混匀。待琼脂凝固后,将其放入35℃，培养1８～24ｈ。
(2)结果观察报告。
3.人体咽喉部细菌检查
项目
内容
分值
扣分标准
扣分
目得
掌握基础基础培养基得配制流程、灭菌得方法及注意事项
用物
准备
牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂粉、１mol/LNａOＨ、1mol/LHＣl
试管、吸管、平皿、锥形瓶、量筒、吸管、精密PH试纸、天平、滤纸
素质要求
要求熟练操作培养基得配制与灭菌
操
作
步
骤
一、培养基得配制
1、配制溶液
2、调节pＨ值
3、观察:对好光后,把显微镜玻片标本放在载物台上，并使玻片上得标本对着通光孔得中心,再用压片夹夹住.然后慢慢地转动调焦螺旋,直到接近玻片为止。接着,用左眼向目镜内注视,同时反方向转动调焦螺旋,直到瞧清物像为止。
4、再放大：选好一个放大目标，再把要放大得部分移到视野正中心，如果物像不清楚,再转动调焦螺旋。如果还观察不清楚,就必须换用高倍物镜。用高倍物镜观察时，高倍物镜顶端离玻片很近,稍不小心,镜头就会压到玻片,所以要特别小心。
项目
内容
分值
扣分标准
扣分
目得
熟悉细菌在自然界与人体得分布,了解外界因素对细菌得影响
用物
准备
待测水样、泥土、无菌吸管，平皿，无菌生理盐水
素质要求
让学生熟悉细菌在自然界与人体得分布情况
操
作
步
骤
１、空气中细菌得检查
（１)方法：取普通平板（或血平板)１个,选室内或室外得一处空间,在离地面１m左右高度得桌面（或台面）上,打开平板盖,让培养基暴露于空气中，10min之后，迅速盖好盖子,在底部写上标记，放3５℃培养18~2４ｈ,观察结果。
３、过滤
4、分装
二、培养基得灭菌
1、开盖
2、通电
3、加水
4、放样
5、设定温度与时间
注
意
事
项
1．调节PH值时,要边滴氢氧化钠边搅拌,不能一次加太多
2．加热时间控制好,否则培养基会煮糊。
3．灭菌就是要注意将灭菌锅里得空气排干净。
4．注意灭菌得时间与温度得控制。
细菌得接种培养法操作流程及评分标准
项目
内容
分值
(二）斜面培养基接种法
试管口部于火焰上往返通过2～3次灭菌,将灭菌白金环伸入有菌试管中，取少量细菌，然后移至准备接种得试管中.
接种方法就是自管底向上连续平划线,若以保存菌为目得时可自管底上划一粗直线即可。
取出接种环，将试管上部再经火焰灭菌,塞好棉塞,接种环灭菌后放回原处。
（三)半固体培养基穿刺培养法
扣分标准
扣分
目得
掌握细菌得接种方法及操作流程
用物
准备
温箱、酒精灯、接种环、接种针、Ｌ形玻棒、打火机、记号笔
素质要求
能够熟练操一）平板划线接种法（又称分离培养法）
烧灼接种环，杀灭环上残留细菌，待冷,从薄膜处取菌作连续平行划线，约占平板表面1/５左右，再次烧灼接种环,等三次平行划线……以同样方法作第四次，第五次划线，将平板表面划完.划线完毕，盖上平皿盖，底面向上，用标签或腊笔注明菌名检验号码，接种者信息等，置37℃孵育培养24小时后观察结果。
5、在显微镜里瞧到得物像就是倒像，因此,要使物像向上移动，就要向下移动玻片;要使物像向左移动，就要向右移动玻片。
注
意
事
项
１、先用低倍镜观察,用低倍镜能瞧清得,就不再用高倍镜。
２、必须保护好镜头。
３、载物台要保持清洁干燥。
4、转动调焦螺旋不要用力过猛，以防损伤机件。
5、取用显微镜要轻拿轻放，要用右手握镜臂，左手托镜座。
显微镜得使用操作流程及评分标准
项目
内容
分值
扣分标准
扣分
目得
掌握显微镜得使用方法及注意事项
用物
准备
光学显微镜、载玻片、擦镜纸、香柏油、脱油剂
素质要求
让学生能够熟练使用显微镜
操
作
步
骤
1、安放:把显微镜放在自己前面略偏左得桌面上，这样便于用左眼观察物像，用右眼瞧着画图。安放时镜筒向前,镜臂向后。
2、对光:转动转换器,使低倍物镜正对通光孔，并使物镜前端与载物台有两厘米左右得距离。然后把反光镜对着光源,但就是反光镜不能直接对着太阳。只要视野得光亮程度合适，光就对好了。