酶工程试题及答案
生物技术概论试题（部分）
⽣物技术概论试题（部分）第⼀部分分类练习⼀、名词解释⽣物技术、细胞⼯程、基因⼯程、酶⼯程、蛋⽩质⼯程、发酵⼯程、⼈类基因组计划、蛋⽩质组学、组织培养、⽣长因⼦、⼈⼯种⼦、连续培育、细胞分化、愈伤组织、分批发酵、肝细胞、TE细胞、酶分⼦修饰、酶反应器、⽣物传感器、⽣物芯⽚、细胞融合、细胞培育、⽆菌操作、组织培养、单倍体、花药培养、花粉培养、胚珠培养、单克隆抗体、体细胞克隆、受体细胞、载体、PCR、限制性内切酶、⽬的基因、转化⼦、花粉管通道法、报告基因、重组⼦、转基因技术、动物反应器、基因治疗、离⼦交换、吸附、超临界流体萃取、固定化细胞、外植体、继代培养、悬浮培养、固定化培养、转基因植物、蛋⽩质功能改性、细胞融合、DNA粘性末端、重组质粒⼆、简答题1、细胞全能性学说的基本内容是什么？2、植物材料与细胞全能性表达有何关系？对培养中的选材有何指导意义？3、细胞脱分化在细胞结构上有何变化？4、细胞周期的调控在细胞脱分化中有何作⽤？5、细胞分化有什么基本特征？6、蔗糖在组织培养过程中的功能是什么？7、与器官发⽣形成个体相⽐体细胞胚形成个体有哪些特点？8、如何理解体细胞胚的遗传稳定性和变异性？9、离体培养物的遗传变异机理是什么？10、哪些因素会影响培养物的遗传变异？11、从体细胞变异的分⼦基础分析体细胞变异的外遗传变异，实践中如何应⽤这些外遗传变异？12、总体上讲离体培养的条件主要有哪些？13、为什么茎尖分⽣组织培养能够除去植物病毒？14、花药培养过程中花药为什么要经过低温处理？15、花药培养中再⽣植株的形成途径与再⽣植株倍性有何关系？16、⽤于建⽴悬浮细胞系的愈伤组织有何要求？17、⼀个好的悬浮细胞系有哪些特征？18、悬浮细胞系在继代培养中其群体⽣长有何规律？19、哪些因素会影响原⽣质体培养？20、原⽣质体融合要经过哪些过程？21、对称融合与⾮对称融合的细胞杂种有何异同？22、胚乳培养有何意义？23、同是薄壁细胞为什么胚乳薄壁细胞培养⽐较困难？24、细胞⼯程对实验室的基本要求有哪些？25、为什么胚乳培养物及其再⽣植株的倍性常发⽣紊乱？26、何为正选择?何为负选择?27、⼈⼯种⼦利⽤有何优点?28、⽤于制备⼈⼯种⼦的繁殖体主要有那些?29、为什么说微型变态器官是最有可能作为⼈⼯种⼦的繁殖体?30、同游离酶相⽐，固定化酶的性质改变主要有哪些？31、固定化操作对酶反应系统的影响主要有哪些？32、固定化酶有何性质？33、固定化酶有哪些指标？34、酶反应器有哪些基本类型？描述其特点？35、酶反应器有何设计原则？36、传感器的有哪些类型？各有何特点？37、蛋⽩质⼯程为什么⼜称为第⼆代基因⼯程？⼆者有何联系与区别？38、简述氨基酸的基本理化性质？39、蛋⽩质的基本组件有哪些？40、什么是蛋⽩质组学？研究细胞内所有蛋⽩质的组成及其动态变化规律的科学，它从更深⼀个层次—蛋⽩质组层次上揭⽰⽣命活动的本质及其规律。
酶工程实验试题及答案
1、酶的固定化方法：吸附法、包埋法、共价结合法、热处理法2、提取酶的有机溶剂有：甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、异丙醇、3、酶生产的主要方式：固体发酵、液体深层通气发酵、固定化细胞或固定化原生质体发酵4、酶的抽提剂有：稀酸、稀碱、稀盐、稀有机溶剂等5、测定酶蛋白含量的方法：凯氏定氮法、双缩尿法、Folin 酚法、紫外法、色素结合法、BCA法、胶体金测定法6、影响酶活力的主要因素：温度、PH、底物浓度、酶浓度、抑制剂、激活剂7、包埋固定化酶的凝胶有：聚丙烯酰胺、聚丙烯醇、光敏树脂、琼脂、明胶、海藻酸钙8、酶的回收率：是指直接测定的固定化酶的活力占固定化之前的活力的百分比。
9、纯化倍数：就是经过纯化后得到的比活力与纯化前比活力之间的比值。
10、盐析的原理：蛋白质溶液在一定浓度范围内，加入无机盐，随着盐浓度增大，蛋白质的溶解度增大，但当盐浓度增到一定限度后，蛋白质将从溶液中析出。
11、在酶的反应过程中如何确保酶的最适反应温度和最适pH值。
保证最适温度的方法：通过发酵罐的热交换设施，控制冷源或热源流量；通过曲室的通风和加热设备控制。
保证最适pH的方法：加酸或加碱，加碳源或氮源物质。
12、在发酵产酶过程中的准备工作：收集筛选菌种，菌种保藏，细胞活化，扩大培养，培养基的配置，对发酵条件的控制。
13、为什么在测酶活实验中要连续不断的测酶活和酶蛋白含量因为酶的活性会受温度和PH值的影响14、终止酶反应的方法：1、迅速升高温度；2、加入强酸、强碱、尿素、乙醇等变性剂；3、加入酶抑制剂；4、调节反应液pH值。
15、固定化的优点：1、可反复使用，稳定性高；2、易与底物和产物分开，便于分离纯化；3、可实现连续生产，提高效率。
16、培养基的成分：碳源、氮源、无机盐、生长因素、水。
17、菌种保藏方法：1、斜面低温保藏法2、液体石蜡油保藏法3、砂土管保藏法4、真空冷冻干燥法5、液氮超低温保藏法。
18、发酵产酶的操作过程：配置培养基、分装、灭菌（112℃—115℃，20min）、孢子悬液（将无菌水加入斜面培养基）、接种、培养（32℃，180r/min，培养72h）19、测定酶活的方法：1、在一定时间内，让适量的底物与酶在最适合条件下；2、加入酶抑制剂或升高温度等方法快速终止酶反应；3、加一定量的显色剂与底物反应，测定液体的吸光度；4、根据吸光度值计算出酶活20、壳聚糖酶如何筛选：采用透明圈法，透明圈法直观、方便、根据壳聚糖不溶于水，以壳聚糖为唯一碳源，培养基浑浊。
酶工程期末试题及答案
酶工程期末试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 酶工程中常用的酶固定化方法不包括以下哪种？A. 吸附法B. 共价结合法C. 包埋法D. 离心法答案：D2. 下列哪项不是酶的催化特性？A. 高效性B. 专一性C. 可逆性D. 需要高温答案：D3. 酶工程中，酶的来源不包括以下哪种？A. 植物B. 动物C. 微生物D. 无机物答案：D4. 酶的活性中心通常包含哪些元素？A. 金属离子B. 氨基酸残基C. 核酸D. 糖类答案：B5. 下列关于酶工程的描述，错误的是？A. 酶工程是生物技术的一部分B. 酶工程可以提高酶的稳定性C. 酶工程可以提高酶的催化效率D. 酶工程不能改变酶的催化特性答案：D6. 酶工程中，酶的固定化技术主要用于什么目的？A. 提高酶的稳定性B. 增加酶的催化效率C. 便于酶的回收和重复使用D. 以上都是答案：D7. 下列哪种酶在工业生产中应用最广泛？A. 淀粉酶B. 蛋白酶C. 纤维素酶D. 脂肪酶答案：A8. 酶的催化效率通常比无机催化剂高多少倍？A. 10倍B. 100倍C. 1000倍D. 10000倍答案：D9. 酶的专一性是由什么决定的？A. 酶的活性中心B. 酶的氨基酸序列C. 酶的三维结构D. 酶的浓度答案：A10. 酶工程中，酶的催化反应通常在什么条件下进行？A. 高温B. 高压C. 常温常压D. 真空答案：C二、填空题（每题2分，共20分）1. 酶工程是通过___________和___________技术，对酶进行改造和应用的一门学科。
答案：基因工程、蛋白质工程2. 酶的活性中心通常由___________和___________组成。
答案：氨基酸残基、金属离子3. 酶的催化作用是通过___________和___________来实现的。
答案：降低反应活化能、提供反应途径4. 酶工程中，酶的固定化方法主要有吸附法、___________和___________。
(完整版)酶工程习题及答案
酶工程试题(A)一名词解释（每题3分，共计30分）1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。
2.自杀性底物：底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂，这种底物叫自杀性底物。
3.别构酶；调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子的构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应的酶叫别构酶4.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶5.Mol催化活性：表示在单位时间内，酶分子中每个活性中心转换的分子数目6.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。
7.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶8.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶9.非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学10模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
二填空题(每空1分,共计30分)1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。
2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。
3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是序列机制，另一类是乒乓机制。
4.可逆抑制作用可分为竞争性，反竞争性，非竞争性，混合性；5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。
6.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。
7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂，固体酶制剂，纯酶制剂和固定化酶制剂。
生物技术制药试题及答案
生物技术制药试题及答案一、名词解释1. 生物技术（biotechnology）：有时也称为生物工程（bioengineering），是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，利用生物得体或其体系或它们的衍生物来制造人类所需要的各种产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。
2．基因工程（gene enginerring）：是指在基因水平上的操作并改变生物遗传特性的技术。
即按照人们的需要，用类似工程设计的方法将不同来源的基因（DNA 分子）在体外构建成杂种DNA分子，然后导入受体细胞，并在受体细胞内复制、转录和表达的操作，也称DNA重组技术。
3．细胞工程（cell engineering）：是指在细胞为基本单位，在体外条件下进行培养、繁殖或人为地使细胞某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而达到改良生物品种和创造新品种的目的，加速繁育动植物个体，或获得某种有用物质的技术。
4．酶工程（enzyme engineering）：是利用酶、细胞器或细胞所具有的特异催化功能或对酶进行修饰改造，并借助生物反应器和工艺过程来生产人类所需产品的技术。
5．发酵工程（fermentation engineering）：是指利用包括工程微生物在内的某些微生物或动、植物细胞及其特定功能，通过现代工程技术手段（主要是发酵罐或生物反应品的自动化、高效化、功能多样化、大型化）生产各种特定的有用物质；或把微生物直接用于某些工业化生产的一种技术。
由于发酵多与微生物密切联系在一起，所以又称之为微生物工程或微生物发酵工程。
6. 生物反应器（bioreactor）：主要包括微生物反应器、植物细胞培养反应器，动物细胞培养反应器以及新发展起来的有活体生物反应器之称的转基因植物生物反应器，转基因动物生物反应器等。
7. 转基因动物：是指在基因组中稳定地整合有导入的外源基因的动物。
8. 转基因植物：是指通过体外重组DNA技术将外源基因转入到植物细胞或组织，从而获得新遗传特性的再生植物。
酶工程 期末试题及答案完整版 天津农学院
一、名词解释1 酶工程：酶的生产、改性与应用的技术过程2 酶的改性：通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程，主要包括酶分子修饰、酶固定化、酶非水相催化和酶定向进化等。
3 酶的专一性：指在一定的条件下，一种酶只能催化一种或一类结构相似的底物进行某种类型反应的特性。
4 酶活力：在一定条件下，酶所催化的反应初速度。
5 酶的催化反应速度：用单位时间内第五代减少量或产物的增加量表示，即V = -dS/dt=dP/dt6 酶活力单位：在特定条件下，每1min催化1ｕmol的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位，这个单位称为国际单位（IU）。
7 组成型酶：有的酶在细胞中的量比较恒定，环境因素对这些酶合成速率影响不大8 细胞生长动力学：主要研究发酵过程中细胞生长速率以及各种因素对细胞生长速率的影响规律。
9 固定化细胞：指采用各种方法固定在载体上，在一定的空间范围进行生长、繁殖和新陈代谢的细胞。
10 酶的提取与分离纯化：将酶从细胞或其他含酶原料中提取出来，在与杂质分开，而获得所要求的酶制品的技术过程。
11 盐析沉淀法：简称盐析法，利用不同蛋白质在不同的盐浓度条件下溶解度不同的特性，通过在酶液中添加一定浓度的中性盐，使酶或杂质从溶液中析出沉淀，从而使酶与杂质分离的过程。
12 层析分离：利用混合液中各组分的物理化学性质的不同，使各组分以不同比例分布在两相中。
13 吸附层析：利用吸附剂对不同物质的吸附力不同而使混合物中各组分分离的层析方法。
14 分配层析：利用各组分在两相中的分配系数不同，而使各组分分离的层析方法。
15 离子交换层析：利用离子交换剂上的可解离基因（活性基团）对各种离子的亲和力不同而达到分离目的的一种层析分离方法。
16 电泳：带电粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的过程17 酶分子修饰：通过各种方法使酶分子结构发生某些改变，从而改变酶的催化特性的技术过程。
18 氨基酸置换修饰：将酶分子肽链上的某一个氨基酸置换成另一个氨基酸，从而改变酶的催化特性的修饰方法称为氨基酸置换修饰。
本科 酶工程 个人总结试题
一．名词解释：1.酶（enzyme）：具有生物催化功能的生物大分子。
2.全酶（holoenzyme）:全酶=脱辅酶+辅因子。
3.酶活力（enzyme activity）:在一定条件下，酶所催化的反应初速度。
4.固定化酶（immobilized enzyme）:将酶与水不溶性的载体结合，制备固定化酶的过程。
5.酶固定化（enzyme immobilization）:通过某些方式将酶和载体结合，使酶被集中或限制，使之在一定空间范围内进行催化反应。
6.酶转换数（KP）:又称为摩尔催化活性，是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数（摩尔数）。
是酶催化效率的一个指标。
7.酶活力单位（IU）:在特定条件下（温度可采用25℃，PH等条件均采用最适条件），每1min催化1μmol的底物转化为产物的酶量定义为一个酶活力单位，这个单位称为国际单位。
8.组成型酶（constitutive enzyme）:有的酶在细胞中的量比较恒定，环境因素对这些酶的合成速度影响不大。
例如：DNA/RNA聚合酶，糖酵解途径的各种酶。
9.适应型酶/调节性酶（adaptive enzyme）:有的酶在细胞中的含量却含量变化很大，其合成速率明显受到环境因素的影响。
例如：β-半乳糖苷酶。
10.模拟酶（mimic enzyme）:又称人工合成酶或酶模型，是指根据酶的作用原理，用人工合成的具有活性中心和催化作用的非蛋白质结构的化合物。
11.核酸酶（ribozyme）:具有催化活性的RNA。
12.抗体酶（abzyme）:具有催化活力的抗体。
13.酶分子修饰（enzyme molecular modifiation）:通过各种方法酶分子结构发生改变，从而改变酶的某些性质和功能的过程。
14.单纯酶模型（enzyme-based mimics）：，即以化学方法通过天然酶活性的模拟来重建和改造酶活性；15机理酶模型（mechanism-based mimics），即通过对酶作用机制诸如识别、结合和过渡稳定化的认识，来指导酶模型的设计和合成；二．填空题1酶的抑制作用包括：（可逆抑制）和（不可逆抑制）。
酶工程试题及答案
酶工程试题及答案文件编码（008-TTIG-UTITD-GKBTT-PUUTI-WYTUI-8256）一、名词解释（本题共8个小题，每小题2分，共16分）。
1、固定化酶：2、原生质体：3、超滤：4、酶的催化特性：5、生物酶工程：6、酶的必需基团和活性中心：7、诱导与阻遏：8、酶反应器：二、填空题（本题共5个小题，每空2分，共24分）.1、酶的分类（）（）（）。
（三种即可）2、酶活力是（）的量度指标，酶的比活力是（）的量度指标，酶转换数是（）的量度指标。
3、微生物产酶模式可以分为同步合成型，（）中期合成型，（）四种。
4、酶的生产方法有（），生物合成法和化学合成法。
5、优良的产酶微生物所具备的条件：（1）（）（2）（）（3）（）（写出三种即可）。
三、判断题（本题共10个小题，每空分，共15分）。
1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。
2、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。
3、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。
4、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。
5、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。
6、补料是指在发酵过程中补充添加一定量的营养物质，补料的时间一般以发酵前期为好。
7、酶固定化过程中，固定化的载体应是疏水的。
8、在酶的抽提过程，抽提液的 pH 应接近酶蛋白的等电点。
9、青霉素酰化酶不但能催化青霉素侧链的水解作用，而且也能催化逆反应。
10、亲和试剂又称活性部位指示试剂,这类修饰剂的结构类似于底物结构。
四、问答题（本题共5个小题，共45分）。
1、试述提高酶发酵产量的措施。
（8 分，答出四点即可）2、酶失活的因素（8分）3、酶的提取方法有哪些（8分）4、酶分子修饰的意义有哪些（6分）5、试简述酶分子的定向进化。
（5分）6、固定化酶和游离酶相比，有何优缺点（10分，优缺点答五点即可）答案一、1、固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶固定在载体上，能使酶发挥催化作用的酶；2、原生质体：脱去细胞壁的植物、真菌或细菌细胞；3、超滤：超滤是采用中空纤维过滤新技术，配合三级预处理过滤清除自来水中杂质；4、酶的催化特性：①极高的催化效率②高度的专一性③酶活性的可调节性④酶的不稳定性5、生物酶工程：是指在基因水平上，对酶蛋白分子进行修饰、改造，改进酶蛋白的催化特性或酶蛋白的蛋白质特性等；6、酶的必需基团：指酶分子中与酶的活性密切相关的基团；活性中心：是与底物结合并催化反应的场所；7、酶合成的诱导是指加入某种物质使酶的合成开始或加速进行的过程；酶合成的阻遏作用则是指加入某种物质使酶的合成中止或减缓进行的过程。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
酶工程试题(A)
一名词解释（每题3分，共计30分）
1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。
2.自杀性底物：底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂，这种底物叫自杀性底物。
3.别构酶；调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子的构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应的酶叫别构酶
4.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶
5.Mol催化活性：表示在单位时间内，酶分子中每个活性中心转换的分子数目
6.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。
7.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶
8.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶
9.非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学
10模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
二填空题(每空1分,共计30分)
1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。
2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。
3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是序列机制，另一类是乒乓机制。
4.可逆抑制作用可分为竞争性，反竞争性，非竞争性，混合性；
5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。
6.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。
7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂，固体酶制剂，纯酶制剂和固定化酶制剂。
8.通常酶的固定化方法有吸附法，包埋法，交联法，
共价键结合法。
9.酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。
10.模拟酶的两种类型是半合成酶和全合成酶。
11.抗体酶的制备方法有拷贝法和引入法。
三问答题(每题10分,共计40分)
1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？
解：优点（1）易将固定化酶和底物，产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺
（2）可以在较长的时间内连续使用（3）反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化（4）提高了酶的稳定性
（5）较能适于多酶反应
（6）酶的使用效率高产率高成本低
缺点
（1）固定化时酶的活力有损失
（2）比较适应于水溶性底物
（3）与完整的细胞相比，不适于多酶反应。
2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。
解：.方法:透析与超虑离心分离凝胶过滤盐析等电点沉淀共沉淀吸附层析电泳亲和层析热变性酸碱变性表面变性等（原理略）
3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？
解：（1）微生物种类多，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样
（2）微生物生长繁殖快，酶易提取，特别是胞外酶
（3）来源广泛，价格便宜
（4）微生物易得，生长周期短
（5）可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高
（6）可以利用以基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种4
[S](mol/L)V0(umol/min)
0.510-628
4.010-640
1.010-570
2.010-595
4.010-5112
1.010-4128
2.010-4139
1.010-2140
解：最大反应速度140 ，Km: 1.010-5
酶工程试题（B）
一名词解释
1抗体酶：是一种具有催化作用的免疫球蛋白，属于化学人工酶
2酶反应器：是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置，他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件，使底物最大限度的转化为物。
3模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
4底物抑制：在酶促反应中，高底物浓度使反应速度降低的现象。
5稳定pH：酶在一定的pH范围之内是稳定的，超过这个限度易变性失活，这样的pH范围为此酶的稳定pH
6产酶动力学：主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响，包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。
7凝胶过滤：又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。
8固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶
9非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学
10液体发酵法：以液体培养基为原料进行微生物的繁殖和产酶的方法，根据通风方法不同又分为液体表层发酵法和液体深层发酵法。
二填空题(每空1分,共计30分)
1.Km值增加，其抑制剂属于竞争性抑制剂，Km不变，其抑制剂属于非竞争性抑制剂，Km减小，其抑制剂属于反竞争性抑制剂。
2.菌种培养一般采用的方法有固体培养法和液体培养法。
3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括温度，PH ，氧气，搅拌，湿度和泡沫等。
4.打破酶合成调节机制限制的方有控制条件，遗传控制，其它方法。
5.酶生物合成的模式分是同步合成型，延续合成型，中期合成型，滞后合成型。
6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有热变性法，酸碱变性法和表面变性法
7. 通常酶的固定化方法有交联法、包埋法，吸附法、共价结合法
8. 酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。
9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的过滤态，从而降低了底物分子的能障，而抗体结合的抗原只是一个基态分子，所以没有催化能力
三问答题(每题10分,共计40分)
1.在生产实践中，对产酶菌有何要求？
一般必须符合下列条件：
a)不应当是致病菌，在系统发育上最好是与病原菌无关
b)能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高
c)菌种不易变异退化，不易感染噬菌体
d)最好选用产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高
在食品和医药工业上应用，安全问题更显得重要
2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素？
解：（1）被修饰酶的性质，包括酶的稳定性，酶活性中心的状况，侧链基团的性质及反应性（2）修饰反应的条件，包括PH与离子强度，修饰反应时间和温度，反应体系中酶与修饰剂的比例等
3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团
解：（1）酶蛋白N端的α氨基或赖氨酸的∑氨基
（2）酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的β羧基或谷氨酸的γ羧基
（3）半胱氨酸的巯基1分
（7）丝氨酸骆氨酸苏氨酸上的羟基
（8）苯丙氨酸和骆氨酸上的苯环
（9）组氨酸上的咪唑基
色氨酸上的吲哚基
体积（ml）活力单位（u/ml）蛋白氮（mg/ml）
初提取液120200 2.5
硫酸铵沉淀5810 1.5
解：（1）起始总活力：200120＝24000（单位）
（2）起始比活力：200 2.5＝80（单位/毫克蛋白氮）
（3）纯化后总活力8105＝4050（单位）2
（4）纯化后比活力810 1.5＝540（单位/毫克蛋白氮）
（5）产率（百分产量）：405024000＝17％
（6）纯化倍数：54080=6.75。