植物脱氢酶(PDHA)活性检测试剂盒说明书 微量法
亮氨酸氨基肽酶(LAP)活性检测试剂盒说明书 微量法
亮氨酸氨基肽酶（LAP）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC4145规格：100T/96S产品内容：试剂一：液体120mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存；临用前加入2.5mL丙酮溶解。
产品说明：LAP是一种膜结合酶，广泛存在于肝、胆、胰等组织中，参与组织蛋白和某些肽类的降解更新。
各类肝病患者因肝细胞损伤，血清LAP的活性均有不同程度的升高，LAP可以作为各类肝病的一项初步检测指标，特别是肝癌鉴别诊断的指标。
LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算LAP活性。
自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、丙酮、匀浆器/研钵。
操作步骤：一、样本处理：组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，然后，10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
细胞：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
液体：直接检测。
二、测定操作：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，波长调至405nm，分光光度计蒸馏水调零。
2、加样表：在微量玻璃比色皿/96孔板中分别加入下列试剂试剂名称（μL）测定管空白管试剂一10样品上清10试剂一170170试剂二2020在微量玻璃比色皿/96孔板中分别加入上述试剂，充分混匀后于405nm处测定30s时的吸光值A1，迅速置于37℃水浴3min（有控温功能的酶标仪可以将温度调至37℃），拿出迅速擦干测定210s时的吸光值A2，计算△A测定管=A2测定-A1测定，△A空白管=A2空白-A1空白，△A=△A测定管-△A空白管。
植物氨态氮含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法
植物氨态氮含量检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC1520规格：50T/48S产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存，临用前将试剂三倒入使其充分溶解备用。
该试剂溶解后10天内有效。
试剂二：粉剂×2瓶，4℃避光保存。
临用前加2mL蒸馏水充分溶解。
试剂三：液体45mL×1瓶，4℃保存。
标准品：粉剂×1支，10mg半胱氨酸，4℃避光保存。
临用前加入1.157mL提取液，得到1000μg/mL氮标准液。
产品说明：氮素是构成生物体的一种必需元素。
铵态氮进入植物细胞后形成氨基酸或酰胺，植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，在570nm有特征吸收峰；通过测定570nm 吸光度，来计算氨基酸含量。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、无水乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，室温匀浆后于25℃，12000g离心10min，取上清待测。
二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
2、将1000μg/mL氮标准液用提取液分别稀释为200、100、50、25、12.5μg/mL。
3、操作表：试剂名称（μL）测定管标准管空白管样本50--标准品-50-蒸馏水--50试剂一500500500无水乙醇500500500试剂二505050混匀后盖紧瓶盖封口膜封口（防止水分散失），置于沸水浴中保温10min，冷却后反复颠倒EP管数次，将测定管8000rpm离心5min后取上清，于570nm测定吸光值。
显色后务必在30min内测完。
3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书 微量法
3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2215规格：100T/96S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体12uL×1支，4℃保存。
临用前加入0.4mL蒸馏水充分混匀，或根据比例现配现用；用不完的试剂4℃保存一周。
产品说明：GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。
GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD+，340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃，离心20min，取上清，置冰上待测。
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，分光光度计蒸馏水调零。
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒说明书
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒说明书微量法100管/48样注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循环（TCA）的主要氢受体，生成的NADH经呼吸电子链（ETC）传递把电子交给氧，在合成ATP的同时，形成大量的ROS，同时NADH再生为NAD+。
糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。
NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。
较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高，处于过氧化状态。
此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。
另外，NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理：分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH，NADH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT）为甲瓒，在570nm下检测吸光值；而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品：酶标仪、台式离心机、移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
NAD+和NADH的提取：1 血清（浆）中NAD+和NADH的提取：NAD+的提取：按照血清（浆）体积（mL）：酸性提取液体积（mL）为1：5~10的比例（建议取约0.1mL血清（浆），加入1mL酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μL上清液，加入500μL碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。
AMM氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品说明书
AMM氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品说明书AMM氨测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）一、产品概述AMM氨测定试剂盒是一种基于谷氨酸脱氢酶法的高精度、高灵敏度氨测定试剂盒，用于测量生物体内氨浓度。
本试剂盒可广泛应用于医学、生物科学研究以及临床实验室等领域。
其准确度和可靠性得到了专业机构的认可。
二、试剂组成1. 测定液：包含谷氨酸脱氢酶、NADH（二磷酸腺苷二核苷酸）、缓冲液等。
2. 校准液：含有已知浓度的氨溶液，用于校准仪器。
3. 样本提取液：用于提取样本中的氨，使其能够反应产生信号。
三、试剂储存和稳定性1. 试剂的储存温度应为2-8摄氏度，避免阳光直接照射。
2. 开封后的试剂应储存在2-8摄氏度，并尽快使用。
3. 严禁冷冻试剂，以免造成试剂失效。
4. 正确存放条件下，试剂的稳定期为12个月。
四、仪器要求本试剂盒适用于多种型号的分光光度计，要求光敏器件工作稳定、精密度高，峰值吸光度范围在340-380nm之间。
五、操作步骤1. 准备工作a. 取出试剂，放置于室温下30分钟，使其回温到室温。
b. 将待检样本从冰箱取出后，回温至室温。
c. 开机并调整光源和光敏器件，确保仪器正常工作。
2. 样本制备a. 取适量样本加入样本提取液中，按照规定的比例稀释，混匀待用。
3. 样本测定a. 取适量测定液加入试管或微孔板中，作为反应底物。
b. 加入适量样本提取液，搅拌均匀。
c. 读取反应开始后一段时间内的吸光度值。
d. 将读数输入分光光度计或计算机，根据标准曲线计算样品中氨的浓度。
4. 结果判定a. 根据标准曲线上的吸光度值和已知浓度的校准液所对应的吸光度值，计算样品中氨的浓度。
b. 根据实验需求，判断测量结果的可靠性和准确性。
六、注意事项1. 操作前请阅读使用说明书。
2. 所有操作都必须在规定的温度下进行，以保证试剂和样本的稳定性。
3. 使用量杯、试管和微孔板等器具时，应保证其清洁干燥，以免发生干扰现象。
4. 实验过程中应避免直接接触皮肤和吸入试剂，如有意外接触，请立即清洗。
生物膜微生物活性的测定
生物膜微生物活性的测定(TTC-DHA)法在本课题研究中，生物膜微生物的活性通过氯化三苯基四氮唑(TTC)-脱氢酶活性测定法进行。
利用氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride ，TTC；Shanghai Reagent Co., Ltd, Shanghai, China)的还原性产物TTC-甲瓒(TF)的量，来表示微生物的活性。
一、生物膜样品的制备取10g载体生物膜，用蒸馏水润洗2次，置于锥形瓶中，用玻璃珠剧烈摇动将生物膜打碎，用生理盐水20mL稀释，用玻棒搅动，使成悬液，备用。
二、主要仪器和试剂氯化三苯基四氮唑( TTC)-葡萄糖标准溶液:TTC分析纯0.1 g与葡萄糖l g共溶于100 mL蒸馏水中，棕色试剂瓶保存；甲苯(分析纯)；三氯甲烷(分析纯)；三羟甲基氨基甲烷(Tris)-HCI缓冲溶液，pH值为8．6；其它：硫化钠。
三、标准曲线的制作在分液漏斗中依次注入l，2，3，4，5，6 mL浓度为l g ·L-1 TTC-葡萄糖标准溶液，2 mL Tris-HCI缓冲溶液及lmL 10％Na2S新配溶液,摇匀；待溶液充分显色后，准确加入甲苯溶液5mL，振摇，完全提取TF。
放置片刻；待溶液分层后，取有机溶液层, 移至lcm比色皿中,稳定2 min用752紫外分光光度计在波长485nm处，测对应的吸光度(A)值，对脱氢酶活性作图，以试剂空白作对照，绘制标准曲线。
四、生物膜脱氢酶活性测定取生物膜制备液2mL于带塞试管中，依次加入Tris-HCl缓冲液、0.1 mol ·L-1葡萄糖液、0.5％TTC各2 mL，置入37±1℃恒温箱中培养6 h后取出，加2滴浓硫酸终止反应，准确加入5 mL甲苯，振摇，在4000 rpm下离心5 min，取有机溶剂层比色。
在上述条件下，将1h产生1µgTF的量为1个酶活力单位。
过氧化物酶(Peroxidase,POD)试剂盒使用说明
3、细菌或细胞 POD 活性
（1）按样本蛋 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一个酶活 力单位。
POD（U/mg prot）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样 本体积（5μL）÷0.01×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）=4900×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）
2、组织 POD 活性
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每 mg 组织蛋白在每 ml 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 定义为一个酶 活力单位。
POD（U/mg prot）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样 本体积（5μL）÷0.005×ΔA 测定÷蛋白质浓度（mg/mL）=9800×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）
用 96 孔板测定的计算公式如下
1、血清（浆）POD 活性
单位的定义：每 mL 血清（浆）在每 ml 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 定义为一个 酶活力单位。
POD（U/mL）＝245μL（反应体系）÷1000μL×血清（浆）总体积（1000μL）÷样本 体积（5μL）÷0.005×ΔA =9800×ΔA
（2）按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每 1 万个细菌或细胞在每 ml 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一 个酶活力单位。
POD（U/104 cell）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样 本体积（5μL）÷0.01×ΔA÷细菌或细胞密度（104 cell /mL）=4900×ΔA÷细菌或细胞密 度（104 cell /mL）
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每 g 组织在每 ml 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一个酶活力单 位。
植物褪黑素(MT)说明书
植物褪黑素(MT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T0.2ng/L -15 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞及其它相关样本中褪黑素(MT)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物褪黑素(MT)水平。
用纯化的植物褪黑素(MT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入植物褪黑素(MT)，再与HRP标记的褪黑素(MT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的植物褪黑素(MT)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物褪黑素(MT)浓度。
试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（20ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液 1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
10ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液5ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液2.5ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液1.25ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液0.625ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
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植物脱氢酶(PDHA)活性检测试剂盒说明书微量法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC3125
规格:100T/48S
产品内容：
试剂一：粉剂×2瓶。
使用前加少量水溶解，定容至50mL，避光、4℃保存（尽量现配现用）。
试剂二：液体100mL×2瓶，4℃保存。
试剂三：乙酸乙酯，自备。
产品说明：
生物体的脱氢酶(Plant dehydrogenase,PDHA)的活性在很大程度上反映了生物体的活性状态，能直接表示生物细胞对其基质降解能力的强弱。
受氢体2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride，即TTC）在细胞呼吸过程中接受氢以后，其还原产物三苯基甲替（TriphenylFormazone，即TFF）呈现红色，在波长485nm处有最大吸收峰，采用分光光度法于485nm测定其吸光值，即得植物脱氢酶活性。
试验中所需的仪器和试剂：
台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板（非聚苯乙烯/聚丙烯材质）、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水、乙酸乙酯（不允许快递，请用户自备）。
操作步骤：
一、样品处理：
称取0.1g的植物组织，用双蒸水清洗3-4次，用滤纸吸干水分，备用。
二、测定步骤：
1、可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至485nm，乙酸乙酯调零。
2、操作表：取5mLEP管依次加入
对照管测定管
样品（g）0.10.1
试剂一（mL）1
试剂二（mL）21
充分混匀，37℃，暗培养3h，取出后立即冰浴5min，去滤液，尽量用滤纸吸干样品，置于研钵/匀浆器中。
试剂三（mL）11
充分研磨（建议在通风橱操作）后全部移至于离心管中，用少量试剂三冲洗研钵，一起加入离心管，用试剂三定容至2mL，10000rpm/min，4℃，离心5min，取200μL上清至微量
玻璃比色皿或96孔板中，测定485nm下的吸光值。
计算ΔA=A测定-A对照。
三、脱氢酶活力计算
A:用微量玻璃比色皿（光径，1cm）测定的计算公式如下
酶活单位定义：在37℃时，每小时每克组织样品使反应体系吸光值每增加0.01为一个酶活单位。
脱氢酶活性（U/g/h）=ΔA÷0.01÷T÷W=33×ΔA÷W。
B:用96孔板（光径，0.5cm）测定的计算公式如下
酶活单位定义：在37℃时，每小时每克组织样品使反应体系吸光值每增加0.005为一个酶活单位。
脱氢酶活性（U/g/h）=ΔA÷0.005÷T÷W=66.7×ΔA÷W。
T：反应时间，3h；W：样品鲜重，g。
注意事项：
1.配制好的试剂一避光保存于4℃，尽量在一周内使用，若出现红色，则不能使用。
2.试剂三易挥发，有毒，为了您的健康，请穿实验服，戴口罩，戴乳胶手套操作。
3.反应完成后立即冰浴以终止反应，并去除干净残留的反应液。
4.如果测定出来的吸光值较大，需把样品适当稀释再进行测定，注意计算公式乘以稀释倍数。
5.如果用96孔板进行检测，建议不要使用聚苯乙烯/聚丙烯材质的96孔板。