7生化指标测定-4月17日
血生化指标
血液生化检查各指标及对应正常值列表含量最多，心肌细胞中含量其次，只有极少量释放血中。
所以血清中此酶活力很低。
当肝脏、心肌病变、细胞坏死或通透性增加时，细胞内各种酶释放出来，使血清中此酶活性升高。
所以测定血清中此酶的含量可作为诊断、鉴别诊断及预后观察的依据。
项目尿素临床意义血中尿素氮主要经肾小球滤过，从小便中排出体外，当肾小球受损时滤过率降低，血中BUN升高。
所以BUN是反映肾小球滤过功能的重要指标。
项目血肌酐临床意义血中的肌酐由外源性和内源性两类组成，主要由肾小球滤过，肾小管基本不重吸收。
内源性肌酐由肌肉代谢产生，每天生成量相当衡定，在外源性肌酐摄入量稳定的情况下，血液中肌酐的浓度取决于肾小球的滤过功能。
当肾实质受损时血中肌酐浓度升高，这是检测肾小球滤过功能的重要指标。
项目血尿酸临床意义 "此项指标有助于较早期的诊断肾脏的病变。
尿酸含量升高：（1）痛风症，尿酸含量可升高。
（2）急慢性肾小球肾炎，一般伴有血清尿酸增高。
（3）血白病，多发性骨髓瘤，红细胞增多症或其它恶性肿瘤也可导致血尿酸升高。
（4）氯仿，四氯化碳及铅中毒等均可使血尿酸增高。
"项目胆固醇临床意义总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯，肝脏是合成和贮存的主要器官。
胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激紊、胆汁酸及维生素D 等生理活性物质的重要原料，也是构成细胞膜的主要成分，其血清浓度可作为脂代谢的指标。
国内外专家推荐成人理想胆固醇值为<5.2mmol/L。
项目甘油三脂临床意义是临床血脂分析的重要指标。
取血前36小时不饮酒，至少12小时不进食，取血前禁食高脂肪食物。
葡萄糖是临床糖尿病分析的重要指标。
总胆红素是临床黄疸分析的重要指标。
第一批纳入年票的旅游景区(点)共20个。
其中,市区3个:武侯祠、南阳府衙、医圣祠;县(市)17个:内乡县衙、内乡宝天曼、内乡桃花源西峡老界岭、西峡石门湖、西峡蝙蝠洞、西峡老君洞、西峡五道幢淅川香严寺、淅川坐禅谷、淅川八仙洞南召五朵山、南召真武顶邓州花洲书院桐柏淮源社旗山陕会馆方城石川景区办理办法：1、80元人民币；2、本人1寸彩照一张；3、南阳地区（本人）身份证复印件一张；4、旅行社均可以办理（我在南阳的一个旅行社几分钟办完）（你也可让你的朋友代办）。
常规生化检验项目各项指标参考范围和临床意义
常规生化检验项目各项指标参考范围和临床意义常规生化检验项目是临床医学中常用的一种实验室检验方法，用于评估人体内各种生物化学过程的正常与异常状况，有助于诊断疾病、监测疗效和预测疾病进展等。
以下是常规生化检验项目中一些重要指标的参考范围和临床意义。
1.血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）：参考范围：ALT：男性≤50U/L，女性≤35U/L；AST：男性≤40U/L，女性≤35U/L。
临床意义：ALT和AST通常用于评估肝功能，出现异常意味着肝细胞损伤，并且可以帮助区分肝炎、肝病毒感染、肝细胞癌等。
2.血清总蛋白（TP）和白蛋白（ALB）：参考范围：TP：60-80g/L；ALB：35-55g/L。
临床意义：TP和ALB是评估肝功能和营养状况的重要指标，异常可提示肝脏疾病、营养不良等。
3.血清尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）：参考范围：BUN：2.86-8.21 mmol/L；Cr：53-106 μmol/L。
临床意义：BUN和Cr是评估肾功能的重要指标，异常可以提示肾脏功能损伤，如急性肾衰竭、慢性肾病等。
4.血清总胆红素（TBIL）和直接胆红素（DBIL）：参考范围：TBIL：3.4-20.5 μmol/L；DBIL：0-6.8 μmol/L。
临床意义：TBIL和DBIL常用于评估肝胆系统功能，异常可以提示肝胆疾病，如黄疸、胆结石等。
5.血清钠（Na）、钾（K）和钙（Ca）：临床意义：这些电解质指标常用于评估水电解质平衡和神经肌肉功能，异常可以提示肾功能障碍、电解质紊乱、神经肌肉病等。
6.血清葡萄糖（GLU）：参考范围：空腹血糖：3.6-6.1 mmol/L。
临床意义：血糖是评估糖代谢的指标，异常可以提示糖尿病、胰岛素抵抗等。
7.血清甲状腺素（T3、T4）和甲状腺刺激素（TSH）：参考范围：T3：1.2-3.1 nmol/L；T4：63-165 nmol/L；TSH：0.55-4.78 mIU/L。
生化需氧量(BOD)的测定
ISO 5815-1、ISO5815-2：2003 比我国 GB 7488-87 在很多方面有改进，如 在样品的保存方法、方法的适用范围、检出限的测定方法、样品的前处理方法、 接种液的选择、稀释接种法稀释倍数的确定方法、溶解氧的测定方法等方面都有 所改进。 3.标准修订原则和依据
生化需氧量（BOD5）是水中有机物质在微生物的作用下，进行氧化分解所消 耗的溶解氧量，以氧的 mg／L 表示。是间接表示水中有机物污染程度的一个综合 性指标。
目前,我国 BOD5 的测定方法为稀释接种法（GB 7488-87），该标准是 1987 年 制定的，20 多年一直没有修订。原理为：样品在 20±1℃培养 5 天，用碘量法分 别测定培养前后的溶解氧浓度，二者之差为 BOD5 。因此，每个样品需要分两瓶， 一瓶测定培养前的溶解氧，另一瓶测定培养后的溶解氧。
每组培养多瓶样品，分别测定不同培养时间的 BOD5。对比加与不加丙烯基硫脲硝 化抑制剂二组的测定结果。仙女河样品测定结果见表 4，标样测定结果见表 5。
培养时间(天)
BODn (mg/L)
不加 加
平均 BODn (mg/L)
不加 加
不加 BODn /加 BODn
差异
表 4 仙女河样品测定结果
5
9
63.2 68.0 73.6 81.2 83.6 86.0
定 BOD5 值。然后对测得的四组数据在 95%的置信概率条件下，用 Cochrane 和 Grubbs 检验法进行检验，判断这四天的 BOD5 分析结果是否存在显著性差异，结
生化项目SOP
沭阳县仁慈医院检验科生化室作业指导书文件编号：SYXRCYYLAB-SH –SOP第A版编制：路珊珊钱丽萍审核：李萍批准：侯波生效日期：2012年10月01日沭阳县仁慈医院检验科修订页血清总胆红素(T-BIL)测定一、目的保证总胆红素测定的结果准确、可靠。
二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。
三、适用范围钒酸盐氧化法测定总胆红素。
四、试剂来源本标准操作程序适用于上海执诚生物科技股份有限公司生产的总胆红素测定试剂盒。
五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。
六、原理此方法基于样品中的总胆红素在pH3.0 环境中，在有机复合物氧化剂的作用下，可以被氧化成胆绿素，而胆红素特有的黄色也随即消失，在450nm 处测定吸光度的变化，即可计算出样品中总胆红素的浓度。
七、试剂R1：硫磺酸缓冲液（pH2.9） 0.1mol/L表面活性剂R2：磷酸缓冲液（pH7.0） 10mmol/L有机钒酸盐 4mmol/L 不同批号试剂盒中各组份不能互换。
本试剂对光敏感，2～8℃密闭避光保存可以稳定18个月（勿冷冻）；首次开启试剂后，避光保存于2～8℃防污染环境中，可继续稳定至效期。
校准液： Randox 公司提供的系列校准品。
八、标本采血清总胆红素(T-BIL)测定血清、血浆。
样本2～8℃保存可以存放约3天，-20℃保存可以存放3个月，但只能冻融一次。
九、操作步骤1、标本编号，分离血清，依顺序置样品架上。
2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。
3、仪器校准：将校准液置试管架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值测定符合要求即可应用。
一般每3～6个月校准一次，若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准。
4、测定参数：血清量 7μl试剂Ⅰ 200μl试剂Ⅱ 50μl主波长 444nm次波长 548nm反应类型终点法；负反应测定时间 10分钟温度 37℃报告单位μmol/L5、结果计算：ΔA 样品样本中总胆红素的含量 = ------- ×标准液浓度ΔA 标准单位换算：mg/dl×17.1=μmol/L十、正常参考值5.1-20μmol/L血清总胆红素(T-BIL)测定十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再做一组质控品，共三组。
生化标准操作程序
4.1.1.3 药物的影响。很多的药物进入人体后可影响某些化验项目的结果，病人在化验前
应尽可能停服对实验有干扰的药物。
4.1.2
静脉血标本采集前医生、护士应注意的问题：
4.1.2.1. 检验申请单填写要求：检验申请单用钢笔或黑笔填写，使用正楷字，字迹清楚，
填写完整。填写内容包括：受检者姓名、性别、年龄、临床诊断、送检标本、检验项目、标
4.1.1.1 避免剧烈运动，一般主张抽血前 24 小时不做剧烈运动，清晨取血，住院病人可在
起床前抽血，匆忙赶到门诊的人应至少休息 15 分钟后取血。
4.1.1.2 注意合理饮食。除了急诊或其它特殊原因外，一般主张在禁食 12 小时后空腹取血，
延长空腹时间(饥饿)或餐后血液的化学成分都会变化.饮酒对实验亦有影响。
2
临床标本采集程序
1. 目的:
规范临床标本的采集，减少实验前的影响因素。
2. 范围:
适用于为协助疾病诊断和治疗而进行的临床生化样品采集活动。临床样本包括血液、尿
液、胸腹水等各种体液。
3. 职责:
临床生化实验室：指导临床各科室正确采集标本，提高实验结果的准确性。
4. 程序:
4.1 静脉血的采集：
4.1.1 静脉样者签名。
4.1.2.2 采用一次性真空采血管，多项化验时应首先将血注入血常规管，然后是抗凝管（注
意要正确使用抗凝剂），最后是非抗凝管。
4.1.2.3 采血时的体位建议以坐位 5 分钟后取血为宜，止血带使用应少于 1 分钟，以免引
起血液淤滞，造成血管内溶血或血液某些成分的改变。
1
目录
临床标本采集程序................................................................
圈养黇鹿对北方4种常见苗木叶片适口性浅析
圈养黇鹿对北方4种常见苗木叶片适口性浅析张鹏骞;孟玉萍;张树苗;陈星;段建彬;钟震宇【摘要】为研究鹿科动物食性,探讨树叶用作鹿科动物饲料的可能性,以黇鹿为试验对象,选取北方常见榆树、刺槐、垂柳及毛白杨等4种树种新鲜叶片作为饲料,对其适口性进行分析.结果表明,黇鹿对4种叶片喜食程度依次为榆树叶、刺槐叶、垂柳叶和毛白杨叶;通过对叶片粗蛋白质含量(CP％)、酸洗纤维(ADF％)、中洗纤维(NDF％)等7种生化指标测定发现叶片中的CP含量(P=0.001)、ADF含量(P=0.025)及NDF含量(P=0.032)是影响其对叶片选择的关键因素.【期刊名称】《山西农业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(034)004【总页数】4页(P332-335)【关键词】叶片;黇鹿;适口性【作者】张鹏骞;孟玉萍;张树苗;陈星;段建彬;钟震宇【作者单位】北京麋鹿生态实验中心,北京100076;北京麋鹿生态实验中心,北京100076;北京麋鹿生态实验中心,北京100076;北京麋鹿生态实验中心,北京100076;北京麋鹿生态实验中心,北京100076;北京麋鹿生态实验中心,北京100076【正文语种】中文【中图分类】S816.41黇鹿（Dama dama），英文名为Fallow deer，属偶蹄目、鹿科、黇鹿属，反刍动物，全身毛黄褐色，尾略长，性温顺，以草、嫩枝和树叶为食，雄鹿的鹿角上部扁平或呈掌状，雌鹿不长角［1，2］。
将树叶用作动物饲料的报道已见报端［3］，树叶中含有动物所必须的营养物质，经处理后作为动物饲料，有助于提高其机体的免疫力［4］。
前人研究表明，榆树（Ulmus pumila）、刺槐（Bl ack Locust）、垂柳（Salix babylonica）、毛白杨（Popul us tomentosa Carr）等4种树木的叶片中含有较为丰富的粗蛋白质、粗纤维等物质，比较适于用作饲料，但也含有单宁酸等物质［5～8］。
临床生化项目SOP
目录1.谷丙酸氨基转移酶测定2.门冬氨酸氨基转移酶测定3.碱性磷酸酶测定4.γ-谷氨酰转酞酶测定5.总蛋白测定6.白蛋白测定7.总接胆红素测定8.钙测定9.磷测定10.镁测定11.葡萄糖测定12.甘油三脂测定13.胆固醇测定14.高密度脂蛋白测定15.低密度脂蛋白测定16.载脂蛋白A1测定17.载脂蛋白B测定18.脂蛋白a测定19.尿素测定20.肌酐测定21.尿酸测定22.乳酸脱氢酶测23.钾、钠、氯测定24.生化室内质控管理程序1、丙氨酸氨基转氨酶测定（HZSH/XZ-001E）1.方法学原理：速率法l.1标本中加入试剂R1(缓冲液、酶、辅酶)1.2加入试剂R2(α-酮戊二酸)启动反应α-酮戊二酸+L-丙氨酸谷丙转氨酶L-谷氨酸+ 丙酮酸丙酮酸+NADH 乳酸脱氢酶乳酸+NAD2.试剂包装规格：R1：酶辅酶液4X80ml1酶/辅酶a，R2：ａ-KG液4×30ml3.试剂品牌、主要内含物：日本世诺试剂盒试剂R1：(缓冲液、酶、辅酶)0.35mol/l L-丙氨酸NADH：0.21mmol/lLDH： 1.5ku/l防腐剂试剂R2：(α-酮戊二酸)α-酮戊二酸：62mmol/lT ris缓冲液L-丙氨酸：1mol/l防腐剂4.仪器型号、测定参数：AU2700样品量7.5ul 反应温度：37℃试剂I 150ul 试剂II 50ul 测定波长（副、主）410nm 340nm5.校准间隔：由理论K值计算，每日做试剂空白。
6.标准品的不确定度：无7.室内质控：两个浓度水平质控品8.操作步骤：见AU2700全自动生化分析仪操作卡9.线性范围：1-1000u/l10.参考范围：1-52U/l11.临床意义：人体中很多脏器都含有ALT，其分布大致为肝>肾>心>肌肉。
肝内ALT活性远远超过其它脏器的活性，主要存在于肝细胞质的可溶性部分，故测定ALT反映肝脏损害具有特殊意义。
血清ALT活性增高原因：急性病毒性肝炎；骨骼肌、肾脏及胰腺等组织坏死；伴有急性肝炎的传染性单核细胞增多症；严重心肌梗塞、心力衰竭时的肝郁血；胆道疾病、肝外癌性胆道梗阻性黄疸（如胆管癌、胰头癌）、胆石症、胆管炎及胆囊炎；应用氯丙嗪、异烟肼、锑剂、奎林、呋喃西林、利福平、某些避孕药、苯巴妥、利眠宁等药物，以及酒精、铅、汞、四氯化碳等中毒；外科手术、麻醉、剧烈运动、早期妊娠等。
妊娠的生物化学检验
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（二）尿液hCG定性试验 ➢胶体金免疫层析法（GICA）
➢检测限为50U/L，需2min~30min完成
➢GICA原理：免疫反应和物理层析 ➢快速、敏感和操作简便，是目前应用最广
生物活性:
①促进乳腺发育，为产后泌乳作准备；
②参与代谢：
FFA增加； 抑制母体细胞摄取葡萄糖；
促进蛋白质合成。
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PL测定的临床意义：
① 诊断滋养层细胞疾病，葡萄胎患者血中 PL值较正常妊娠低，但hCG反而增高， hCG/PL比值比正常妊娠高100倍。
② 早孕时连续测定PL，可预测先兆流产，此 时PL值偏低或呈下降趋势。
③ 妊娠35周后血浆PL低于4.0μg/ml提示先兆 子痫、胎盘功能不良或胎儿宫内窒息。
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（2）胎盘分泌的类固醇激素:
孕酮和雌激素 ➢维持妊娠期子宫内膜的正常形态、功能、充
足血供并为分娩做准备。 ➢孕酮由胎盘利用母体的Ch合成，从妊娠36天
起胎盘即能生产足够孕酮，到37孕周达最 高峰，一直保持到临产前才稍降。
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➢胎盘缺乏17α-羟化酶，因此所有雌激 素都从中间产物17-羟孕酮合成。
பைடு நூலகம்
硫酸脱氢表雄酮(DHEA) 16α-OH-DHEAS
胎盘雌激 素的前体
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17α羟化 酶缺 陷阻 断步 骤
胆固醇 孕烯醇酮
17α-羟化酶缺陷 阻断步骤
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样品的蛋白质浓度(mg/mL)
试管
空白
标准
测定（）
肺泡灌洗液(mL) 蒸馏水(mL)
0.563g/L 标准液(mL)
0 0.05
0.05 3.0
0.05
考马斯亮蓝试剂(mL) 3.0 A595nm
3.0
摇匀，静置5min，1 h内以0号管为空白对照，在595nm处比色
稀释10倍的灌洗液：0.1ml肺泡灌洗液＋0.9ml 0.15mol/L NaCl
×
标准品浓度 （10nmol/ml）
×
样本测试前 稀释倍数
血浆中超氧化物歧化酶的测定
• 测试前先确定最佳取样量:
当测试新样品时, 做三只不同取样量的测试管。如:测1%脑 组织匀浆，取样量分别为10µl、30µl、50µl。然后计算：
(对照管OD值-测定管OD值)÷对照管OD值，结果应该在
0.15-0.55之间，即百分抑制率在15-55%之间，然后取百分 抑制率在45%-48%左右的一管作为最佳取样量，因为酶的百
位 个 位
1 5 0
H1000
千 位 百 位 十 位
0 8 0
H200
百 位 十 位 个 位
1 5 0
百 位 十 位 意事项
• 仪器预热30min，调至所需波长。 • “T”档，调整拉杆， 将空白管的比色皿放置于光路中。 1. 打开盖，按“0%”， 数字窗显示为“00.0”。 2. 关上盖，按“100%”，
数字窗显示为“100.0”，重复三次。
3. 按“A/T/C/F”，调至“Abs”档，按“0A”，数字窗显示为“00.0”。 • 通过拉杆依次将各测试管置于光路中，读取测试管的吸光度值。（反 复三次求平均值）。
MDA 测定方法
标准管 10nmol/ml 标准品（ml） 无水乙醇（ml） 测试样品（ml） 试剂一（ml） 试剂二（ml） 试剂三（ml） 50％冰醋酸（ml） 0.1 0.1 0.1 3 1 0.1 充分混匀 3 1 0.1 0.1 3 1 1 0.1 0.1 3 标准空白管 测定管 测定空白管
分抑制率与酶的活力呈抛物线关系，若百分抑制率大于60%
时，则将样品浓度稀释或减少取样量后再测试。若百分抑 制率小于20%时，则需将样品量加大后测试。
血浆中超氧化物歧化酶的测定
• 计算公式：
SOD活力单位（U）：每毫升反应液中SOD抑制率达 50%时所对应的SOD量为一个SOD活力单位。
血浆中SOD活力(U/ml)= 空白管OD值—测定管OD值 空白管OD值 反应体系的 样本测试前 ÷50%× 稀释倍数 × 稀释倍数
充分混匀，试管口用保鲜膜扎紧，用针头刺一小孔，95℃水浴（或用锅开盖煮沸）40 分钟 ， 取出后流水冷却，4000 转/分离心 10 分钟 ，取上清，在 532nm 处以蒸馏水调零，测各管吸 光度值（注意：1-2 组同学需要做标准和空白管，其余组同学只做测定管）
注意事项
当标准品取样量为0.1ml时，则标准管吸光度减去标准
试剂与器材
主要试剂
MDA试剂盒（可测血清/浆、红/白细胞、培养细胞
等的脂质过氧化物的量）、50％冰醋酸、无水乙醇
主要器材
试管架、试管、分光光度计、移液器(0.1ml、1ml)
操作方法
标准管 10nmol/ml标准品（ml） 0.1 空白管 测定管
无水乙醇（ml）
测试样品（ml） 试剂一（ml） 试剂二（ml） 试剂三（ml） 50％冰醋酸（ml） 0.1
测定快速、简便
干扰物质少
考马斯亮蓝染色法
缺 点
测定不同蛋白质有较大偏差，选用g—球蛋 白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差
仍有一些物质干扰此法的测定（去污剂、
Triton X-100、SDS等）
试剂与器材
主要试剂
考马斯亮蓝G-250、1mg/ml标准蛋白溶液、
0.15 mol/L NaCl
血浆中超氧化物歧化酶的测定
• 举例：
取未稀释血浆0.03ml，检测SOD活力，测定管吸光度 0.298，空白管吸光度0.465，计算如下：
血浆中 SOD 活力(U/ml)= 0.465—0.298 0.465
÷ 50% ×
3.33(反应液总量) 0.03(所取样品量)
× 1 =79.73U/ml
SOD 测定方法
0.1
0.1 0.1 0.1 3 1 1 0.1 0.1 3
混匀
3 1 3 1
混匀→试管口用保鲜膜扎紧，用针头刺一小孔→ 95℃水浴（或用锅开 盖煮沸）40min →流水冷却→4000转/分离心10min →取上清→532nm处 以蒸馏水调零测各管吸光度值
计 算
血清中MDA含量（nmol/ml）＝ 测定管－空白管 标准管－空白管
空白管吸光度为0.065～0.070
若检测样本吸光度太低，可以将水浴时间延长至 80min
溶血标本不宜作此实验，因血红蛋白使MDA检测结果 偏高
标准蛋白溶液(mL) 0.15mol/L NaCl(mL) 考马斯亮蓝试剂(mL)
摇匀，静置5min，1h内以0号管为对照调零，在595nm处比色
A595nm
绘制标准曲线：以A595nm为纵坐标，标准蛋白含量为横坐 标，在坐标纸上绘制标准曲线
2. 未知样品蛋白质浓度测定 测定方法同上，取合适的未知样品体积，使其测定 值在标准曲线的直线范围内，根据所测定的A595nm 值，在 标准曲线上查出其相当于标准蛋白的量，从而计算出未知
5
4 0.04 0.06
5
5 0.05 0.05
5
6 0.06 0.04
5
7 0.07 0.03
5
8 0.08 0.02
5
9 0.09 0.01
5
10 0.1 0
5
摇匀，静置5min，1h内以0号管为对照调零，在595nm处比色
A595nm
绘制标准曲线：以A595nm为纵坐标，标准蛋白含量为横坐 标，在坐标纸上绘制标准曲线
考马斯亮蓝染色法
原 理
Protein
+
+ CH3CH2 N CH2 SO 3 CH3 O CH2CH3
NH
Coomassie G-250
CH3
C
N CH2CH3 CH2 SO Na 3
Acid
Blue
Protein - Dye Complex
Amax = 595nm
考马斯亮蓝染色法
优 点
灵敏度高
操作方法
1.标准曲线制作 取14支试管，分两组按下表平行操作
试管编号
稀释后标准蛋白浓度 (mg/ 0.1mL) 0 0 0 0.1 5 1 0.01 0.1 0 5 2 0.02 0.1 0 5 3 0.03 0.1 0 5 4 0.04 0.1 0 5 5 0.05 0.1 0 5 6 0.06 0.1 0 5 7 0.07 0.1 0 5 8 0.08 0.1 0 5 9 0.09 0.1 0 5 10 0.1 0.1 0 5
色杯洗干净
血清中丙二醛（MDA)测定
原理
MDA可与硫代巴比妥酸(TBA)形成红色产物（三 甲川），在532nm处有最大吸收峰
血浆中丙二醛（MDA)测定
意义
机体产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多不饱和 脂肪酸引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物如 MDA，引起细胞损伤。因而测试MDA的量常常可反映机体内 脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞受损的程度 MDA的测定常常和超氧化物歧化酶（SOD）的测定互相 配合，SOD活力的高低间接反应了机体清除自由基的能力， 而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重 程度
计 算
蛋白浓度（g/L）＝
测定管OD值－空白管OD值 标准管OD值－空白管OD值
×
标准管浓度 （0.563g/L）
×
样本测试前 稀释倍数
注意事项
1 2 在试剂加入后的5～20 min内测定吸光度，因
为在这段时间内颜色最稳定
测定中，蛋白-染料复合物会有少部分吸附于
比色杯壁上，测定完后立即用乙醇将蓝色的比
测定管 试剂一（ml） 测试样品（ml） 蒸馏水（ml） 试剂二（ml） 试剂三（ml） 1.0 0.03 0.1 0.1 测定空白管 1.0 0.3 0.1 0.1 0.1 2
试剂四（ml） 0.1 充分混匀，37℃恒温水浴 40 分钟 显色剂（ml） 2.0
混匀，室温放置 10 分钟，于 550nm 波长处，以蒸馏水调零，比色。
移液器操作注意事项
• 辩别量程、轻按缓放、严禁倒置
移液器操作注意事项
• 移液器数字窗读数表示法
H20 十H100
位 个 位
1 5 0
H1000
千 位 百 位 十 位
0 8 0
H200
百 位 十 位 个 位
1 5 0
百 位 十 位 个 位
0
8 0
移液器操作注意事项
• 移液器数字窗读数表示法
H20 十H100
主要器材
试管架、试管、分光光度计、移液器(100μl、
1000 μl）
操作方法
1.标准曲线制作 取14支试管，分两组按下表平行操作
试管编号 标准蛋白溶液(mL) 0.15mol/L NaCl(mL)
考马斯亮蓝试剂(mL)
0 0 0.1
5
1 0.01 0.09
5
2 0.02 0.08
5
3 0.03 0.07
肺泡灌洗液蛋白质的定量测定 血清丙二醛及超氧化物歧化酶的测定
基础医学实验教学中心
实验目的
学习考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的原 理和方法 学习硫代巴比妥酸法测定丙二醛及超氧 化物歧化酶的原理与方法