水中油类的紫外分光光度法测定
水和废水 石油类的测定紫外分光光度法(试行) HJ 970-2018
编号：XXX环境科技有限公司方法验证报告水质石油类的测定紫外分光光度法（试行）HJ 970-2018方法验证人员：方法验证日期：一、实验室基本情况1.1人员情况公司安排分析人员XXX和XXX进行了《水质石油类的测定紫外分光光度法（试行》（HJ970-2018）分析方法的验证。
验证人员通过培训学习熟悉了该标准方法原理及分析流程，能够熟练操作仪器，独立完成整个分析过程，并通过了公司自认定考核。
分析人员见表1。
表1 分析人员一览表1.2仪器设备及试剂、标准物质该标准主要使用的仪器设备由成都市计量检定测试院进行检定，具体内容见表2。
表2仪器设备（包括仪器、前处理装置）标准方法要求萃取剂正己烷应于波长225nm处，以水做参比液用1cm 石英比色皿测得的透光率大于90%（2cm石英比色皿测得的透光率大于81%），其余试剂均为符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为蒸馏水或去离子水。
本次方法验证使用标准物质和试剂见表3。
表3试剂、标准物质1.3实验室环境条件标准方法对测试环境无特殊要求，符合实验室日常环境控制即可。
目前实验室环境监控设备配置有温湿度表。
由于实验所用正己烷具有一定毒性，实验室配有通风橱，实验人员配备防毒面具。
二、方法简介2.1样品2.1.1 样品采集参照GB 17378.3和H/T 91、HJ/T 164的相关规定进行样品的采集。
用采样瓶采集500ml样品。
样品采集后，加入盐酸酸化至pH≤2。
2.1.2 样品保存参照GB17378.3和HJ493的相关规定进行样品保存，如样品不能在24h内测定，应在0'C~4C冷藏保存，3d内测定。
2.1.3 样品制备2.1.3.1萃取将样品全部转移至1000ml分液漏斗中，量取25.0ml正己烷洗涤采样瓶后，全部转移至分液漏斗中。
充分振摇2 min,期间经常开启旋塞排气，静置分层后，将下层水相全部转移至1000ml量筒中，测量样品体积并记录。
注1:乳化程度较重时，可向除去水相后的萃取液中加入1滴~4滴无水乙醇破乳，若效果仍不理想，可将其转移至玻璃离心管中，2 000 /min离心3 min。
211089236_地表水中石油类测定工作中紫外分光光度法的应用
- 114 -生 态 与 环 境 工 程石油类会对地表水产生一定的污染，污染原因主要包括石油开采、加工、运输、排放以及泄露等，生活污水及工业废水也是造成石油类对地表水污染的原因。
我国危险废弃物名单中共包括危险物质48中，其中即包括石油类，其位列前十名。
石油类物质含有大量的芳香烃物质，其含有毒性会严重伤害人体，特别是双环及三环，其在多环芳烃中具有一定的代表性，毒性不容小觑，人体一旦接触到这些物质会对其皮肤、呼吸系统、神经系统等造成严重的伤害，出现中毒现象。
对水中石油类进行测定时，红外分光光度法会用到四氯化碳作为萃取剂，其会破坏大气臭氧层。
1 测定方法在20世纪80年代，已就四氯化碳的使用签订了协议书，其在全球范围内被列为禁用试剂，目前我国也明确规定禁止使用四氯化碳，所以目前亟需解决的问题就是制定新的水质石油类测定方法。
已有部分研究指出，四氯化碳在红外分光光度法中的应用已找到替代物质，即四氯乙烯。
四氯乙烯的优势为毒性不高，沸点高，属于非可燃、易爆物质，但是也存在缺点，稳定性不佳，检出限较四氯化碳高，在测定Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类地表水及一类、二类海水石油类时使用四氯乙烯有一定的局限性，所以当务之急是找到具体的解决方法。
采用紫外分光光度法对石油类进行测定时，是通过紫外区对石油及相关物质的吸收情况完成的。
在芳香族化合物中，带有苯环和共轭双键的主要吸收波长分别为250nm~260nm 和215nm~230nm 。
一般原油的吸收波长有2个峰值，一个是225nm ，另一个是254nm ，轻质油为225nm ，同炼油厂的油。
在石油类中，轻质油是造成地表水源污染的来源，因此在关于紫外分光光度法测定水质石油类的试行文件中，紫外吸收广度确定为225nm 。
并且在萃取石油时，选用正己烷优势明显，其毒性不高，杂质也不多。
水中石油类测定采用紫外分光光度法，不仅操作难度低，精度高，较为灵敏，还可以拓展测定范围[1]。
水中的油类包括生活污水及工业废水，水中的生物经过分解后也会形成油类。
紫外分光光度法测定水中石油类的方法验证
根据《关于消耗臭氧物质的蒙特利尔议定书》，我国已于2019年1月1日起履行停止实验室使用四氯化碳的承诺。
因此，为满足地表水石油类监测的需要，生态环境部颁布了《水质石油类的测定紫外分光光度法（试行）》HJ 970-2018。
本文对标准HJ 970-2018中提出的检出限、测定下限、精密度、准确度进行验证。
一、方法概述1.本方法依据《水质石油类的测定紫外分光光度法（试行）》HJ 970-2018。
在pH≤2的条件下，样品中的油类物质能被正己烷萃取，萃取液经无水硫酸钠脱水，经被硅酸镁吸附除去动植物油类等极性物质，于225nm 波长处测定吸光度，石油类含量与吸光度符合朗伯-比尔定律。
2.本方法适用于地表水、地下水和海水中石油类测定。
二、仪器和试剂1.仪器设备。
500ml 棕色硬质玻璃瓶，1000ml 分液漏斗，50ml 锥形瓶，转速可达300r/min 的振荡器，转速可达3000r/min 的离心机，紫外分光光度计，移液管，容量瓶，其他实验室常用器皿。
2.试剂。
石油类标准贮备液（1000mg/L ），透光率≥90%的正己烷，盐酸，无水硫酸钠，100～60目硅酸镁，玻璃棉。
三、验证步骤1.样品的采集。
按照HJ/T 91、HJ/T 164中相关规定进行样品的采集，用干燥的500mL 棕色玻璃瓶采集水样，加入盐酸酸化至pH≤2。
采样前不用水样对样品瓶进行冲洗，采样前先破坏可能存在的油膜，在水面至300㎜采集柱状水样，采集的水样全部用于测定。
2.校准曲线。
（1）配置浓度为100mg/L 石油类标准使用液。
移取5.00mL 石油类标准贮备液于50mL 容量瓶中，用正己烷定容，摇匀。
（2）移取0.00mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL 和4.00石油类标准使用液于6个25mL 容量瓶中，用正己烷稀释至标线，摇匀。
标准系列浓度分别为0.00mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、4.00mg/L、8.00mg/L 和16.0mg/L。
紫外分光光度法测定水中石油类的方法
自动紫外油分析仪，无须使用无水硫酸钠进行脱水处分析仪将直接从萃取仪器中吸入萃取液进行测量。
自动测量、自动清洗，还可以连续自动测量水中石油类，使用硅酸镁吸附柱对水中动植物油进行吸附，同时计算机会实时提示硅
全自动紫外油分析仪编辑区中选择“空白”，点击空白右侧“增加”按钮，选择“空白
号口毛细管插入正己烷试剂瓶中，点击“运行”按钮，仪器将自动进行测量。
处，以水作为参比对正己烷的透
则可以使用，
1 000 mL分液漏斗
进行萃取，将硫
t=3.14；
而标准规定检出限为
2.2 标准曲线
动进行超量稀释。
石油类浓度为
选取。
分析水环境中石油类紫外分光光度法方法
153ECOLOGY生 态区域治理分析水环境中石油类紫外分光光度法方法福建省厦门环境监测中心站 贺琦一、引言随着对石油资源使用需求的增加，水环境中的石油类含量对人类健康、渔业和生态系统构成了严重威胁。
而新制定的环境标准对于水环境中石油类含量提出了更高的要求。
在对地表水、地下水、黑臭水体和海水样品的常规监测过程中我国各个监测站都采用《水质石油类的测定紫外分光光度法》HJ970-2018（试行）[1]法测定。
由于水质石油类采样分析时必须全样分析且油在水体中分布不均匀的特殊性，平时采样过程通常没有留存备用水样。
因此一旦分析结果超标就要重新采样复测，相当浪费人力物力，对于海水监测几乎不能实现。
但是实际分析过程中由于水样成分复杂容易发生乳化现象，由于破乳不完全引入误差或者脱水不完全造成数据异常不可避免。
所以本实验想要通过硅酸镁吸附的时长不同，和吸附次数不同对待测样品的影响，证明利用硅酸镁小柱或者硅酸镁对石油类分析过程中乳化、脱水不完全的待测液进行二次吸附，能够使检测结果有效降低且不会低于真实数值，避免石油类分析一遇到数据超标就需要重新采样的现象发生。
二、材料和方法（一）仪器与药品盐酸（国药集团GR）；硫酸（国药集团GR）；正己烷（Merck）；无水乙醇（国药集团AR）；无水硫酸钠（国药集团AR）；硅酸镁（国药集团AR）；石油类标准物质（国家海洋环境监测中心）。
紫外可见分光光度计(美普达UV6100）；全自动紫外测油仪(上海昂林OL1040)。
（二）紫外可见光分光光度法1.工作曲线的测定按照《水质石油类的测定紫外分光光度法》HJ970-2018（试行）绘制标准工作曲线。
2.硅酸镁震荡吸附对石油类分析的影响实验取50ml 浓度为0.050mg/l 和0.500mg/l 的油标样各4份加入6g 无水硫酸钠和6g 硅摘要：目的：探索一种紫外分光光度法检测水中石油类含量异常的补充方法。
方法通过探究硅酸镁吸附的时长不同和吸附次数不同，对水样中石油类检测结果的影响。
《水质石油类的测定紫外分光光度法》HJ 970-2018 方法验证报告 已通过省环保局审批
《水质石油类的测定紫外分光光度法》方法验证报告（已通过省环保局审批）1 适用范围本标准适用于地表水、地下水和海水中石油类的测定。
2 方法依据HJ 970-2018 水质石油类的测定紫外分光光度法（试行）。
3 方法原理在pH≤2的条件下，样品中的油类物质被正己烷萃取，萃取液经无水硫酸钠脱水，再经硅酸镁吸附除去动植物油类等极性物质后，于225nm波长处测定吸光度，石油类含量与吸光度值符合朗伯-比尔定律。
4 试剂和材料4.1 盐酸：ρ（HCl）=1.19g/ml。
4.2 硫酸：ρ（H2SO4）=1.84g/ml。
4.3 正己烷（C6H14）。
使用前于波长225nm处，以水做参比测定透光率，透光率大于90%。
4.4 无水乙醇（C2H6O）。
4.5 无水硫酸钠（Na2SO4）。
于550℃下灼烧4h，冷却后装入磨口玻璃瓶中，置于干燥器内贮存。
4.6 硅酸镁（MgSiO3）：150μm~250μm（100目~60目）。
于550℃下灼烧4h，冷却后称取适量硅酸镁于磨口玻璃瓶中，根据硅酸镁的重量，按（m/m）的比例加入适量蒸馏水，密塞并充分振摇数分钟，放置12h，备用。
4.7 石油类标准贮备液：ρ=1000mg/L。
直接购买市售正己烷中石油类的有证标准物质，批号为BW011002z，厂家为北京海岸鸿蒙标准物质技术有限责任公司。
4.8 石油类标准使用液：ρ=100mg/L。
准确移取5.00ml石油类标准贮备液（4.7）于50ml容量瓶中，用正己烷（4.3）定容，摇匀。
可保存24h。
4.9 玻璃棉。
用正己烷（4.3）浸洗15min，晾干后置于干燥玻璃瓶中，备用。
5 仪器和设备5.1 采样瓶：500ml棕色硬质玻璃瓶。
5.2 UV-5100B型紫外分光光度计：仪器编号为xx，波长200nm~400nm，并配备2cm石英比色皿。
5.3 分液漏斗：1000ml，具聚四氟乙烯旋塞。
5.4 锥形瓶：50ml，具塞磨口。
5.5 HY-5型回旋式振荡器：仪器编号为xx，转速可达300r/min。
水中油检测仪原理及分析方法
水中油检测仪原理及分析方法随着工业化和城市化的深入发展，水污染问题越来越严重，水中油类污染物也逐渐成为环保领域要解决的难题之一。
水中油类污染物的检测需要专业仪器和测试技术，而水中油检测仪便是用于检测水体中油类污染物的一种仪器。
本文将介绍水中油检测仪的原理及其分析方法。
一、水中油检测仪的原理水中油检测仪是一种能在水环境中直接检测油污染的仪器。
检测方式有两种，一种是利用紫外线吸收分光光度法检测油类污染物，一种是利用荧光原位探测法检测油类污染物。
1.紫外线吸收分光光度法该方法是利用油类污染物在紫外线下的吸收特性来检测的。
它的原理是通过将检测器照射于含有油污染物的水样中，使得水样中的油污染物的能量被吸收。
同时，在传输的过程中，光的强度会随着油污染物的浓度而降低。
通过检测测量得到的光强信号，可以计算出油污染物的浓度。
2.荧光原位探测法荧光原位探测法是新型的油污检测技术，它基于荧光分析的原理，通过荧光染料与油类污染物之间的特定反应，测定水中油类污染物的含量。
荧光原位探测法技术成熟，具有快速、准确、无需分离样品等特点，可以用于在线检测油类污染物。
二、水中油检测仪的分析方法水中油检测仪的使用方法相对简单，但使用正确的方法可以保证检测精度。
下面将分别介绍紫外线吸收分光光度法和荧光原位探测法的使用方法。
1.紫外线吸收分光光度法的使用方法步骤一：打开检测仪器的电源并进入菜单界面，选择UV（紫外线光谱）模式。
步骤二：准备样品，将所需测量的水样送入检测器的试管中。
步骤三：选择所需的波长范围，并设置检测参数（如初始值和终止值）。
步骤四：开始检测，等待一段时间后，读取仪器上显示出来的检测结果。
2.荧光原位探测法的使用方法步骤一：打开检测仪器的电源，并进入相应的菜单界面，选择荧光探针模式。
步骤二：准备样品，将所需测量的水样送进试管中。
步骤三：加入荧光探针，按照设备操作说明进行样品的搅拌，并等待一段时间。
步骤四：读取仪器上显示出来的检测结果。
实验水中矿物油的测定(紫外分光光度法)
水中矿物油来自工业废水和生活污水的污染。工业废水中石油类(各种烃类 的混合物)污染物主要来自原油的开采、加工和运输以及各种精炼油的使用等部 门。矿物性碳氢化合物，漂浮于水体表面，将影响空气与水体界面氧的交换。 分散在水中以及吸附与悬浮微粒上或以乳化状态存在于水中的油，被微生物氧 化分解，将消耗水中的溶解氧，使水质恶化。矿物油类中所含的芳烃虽较烷烃 类少得多，但其毒性要大得多。
在进行萃取工作，每次萃取应尽快地完成。 6、采样瓶为玻璃瓶，不能用肥皂洗采样瓶，采样时应定量采样，将水样全部 移入分液漏斗中，并用石油醚涮洗采样瓶，将涮洗液移入分液漏斗中进行萃取。
环境监测
油（mg / L） m 1000 V
式中 —— 从校准曲线中查出相应油的量，； ——水样体积，。
五、注意事项
1、不同油品的特征吸收峰不同，如难以确定测定波长时，可向50 容量瓶中移 入标准使用溶液20～25，用石油醚稀释至标线，在波长为215～300 间，用10 石英比色皿测的吸收光谱图(以吸光度为纵坐标，波长为横坐标的吸光度曲线)， 一般以最大吸收峰处的波长作为分析波长。 2、萃取用的分液漏斗不能涂抹凡士林。 3、水样及空白测定所使用的石油醚应为同一批号，否则会由于空白值不通而 产生误差。 4、如石油醚纯度较低，或缺乏脱芳烃条件，亦可采用己烷作萃取剂。把己烷 进行重蒸馏后使用，或用水洗涤3次，以除去水溶性杂质。以水作参，于波长 225 处测定，其透光率应大于80％方可使用。 5、乙醚为低沸点、易燃和具麻醉作用的有机溶剂，使用时宜小心，周围应无 明火，并在通风柜内操作。室温较高时，水样和乙醚宜先置冰水浴中剂
(1)分光光度计 (具有215～256 )，10 石英比色皿； (2)1000分液漏斗； (3)500容量瓶； (4)G3型25 玻璃砂心漏斗。
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天然发布时间：2008-12-04
生物网文章标签：
生物论坛研究发现恐龙家族1850种有71%未被发现（蝎铁蛋白ferritin
天然水中油类的紫外分光光度法测定
一、实验目的
加深对环境中油类污染的认识，掌握油类的分析方法和技术，学会使用紫外分光光度计。
二、实验原理
水中的油类来自较高级生物或浮游生物的分解，也有来自工业废水和生活污水的污染。
漂浮于水体表面的油，影响空气－水体界面中氧的交换。
分散于水中的油，部分吸附于悬浮微粒上，或以乳化状态存在于水体中，部分溶于水中。
水中油可被微生物氧化分解，从而消耗水中溶解氧，使水质恶化。
重量法是常用的分析方法，它不受油的品种限制，所测定的油不能区分矿物油和动、植物油。
重量法方法准确，但操作繁杂，灵敏度差，只适于测定
5mg/L以上的油品。
紫外分光光度法比重量法简单。
石油类含有的具有共轭体系的物质在紫外光区有特征吸收峰。
带有苯环的芳香族化合物主要吸收波长微250～260nm，带有共轭双键的化合物主要吸收波长为215～230nm。
一般原油的两个吸收峰波长为225及256nm，其他油品如燃料油、润滑油等的吸收峰也与原油相近。
本方法测定波长选为256nm，最低检出浓度为0.05mg/L，测定上限为
10mg/L。
三、仪器和试剂
1．紫外分光光度计（具有1cm石英比色皿）。
2．1L分液漏斗。
3．25mL容量瓶。
4．石油醚（60～90℃）或正己烷：
纯化后使用，透光率大于80％。
如不纯，可用下法纯化。
纯化：
将0.30～0.15mm（60～100目）粗孔微球硅胶和0.246～0.125mm（70～120目）中性层析氧化铝在150～160℃活化4h，趁温热装入直径2.5cm、长
75cm的玻璃柱中，使硅胶柱高60cm，上面覆盖5cm厚的氧化铝层。
将石油醚通过此柱后收集于试剂瓶中。
以水为参比，在256nm处透光率应大于80％。
5．油标准贮备液：
用20号重柴油、15号机油或其他认定的标准油品配制。
准确称取标准油品0.1000g溶于石油醚中，移至100mL容量瓶中，并用石油醚稀释至标线，此溶液每毫升含1.00mg油，贮于冰箱备用。
6．（1+1）硫酸。
7．氯化钠。
8．无水硫酸钠（事先于马福炉300℃烘1h，冷后装瓶）。
四、实验步骤
1、标准曲线的绘制把油标准贮备液用石油醚稀释为每毫升含
0.100mg油的标准液。
向8个10mL容量瓶中依次加入油标准液0.20，
0.50，1.00，
2.00，
3.00，5.00，7.00，10.00mL，用石油醚稀释至标线。
其相应的浓度为2.00，
5.00，10.00，20.0，30.0，50.0，70.0，100.0mg/L。
最后，在波长256nm 处，用1cm石英比色皿，以石油醚为参比液测定标准系列的吸光度，并绘制标准曲线。
2、将水样500mL全部倾入1000mL分液漏斗中，加入5mL（1+1）硫酸（若水样取样时已酸化，可不加）及20g氯化钠，加塞摇匀，用15mL石油醚洗采样瓶，并把此洗液移入分液漏斗中，充分振摇2min（注意放气），静置分层。
把下层水样放入原采样瓶中，上层石油醚放入25mL容量瓶中，再加入
10mL石油醚，重复提取水样一次，合并提取液于容量瓶中。
加石油醚至标线，摇匀。
若容量瓶里有水珠或浑浊，可加入少量无水硫酸钠脱水。
3、在波长256nm处，用1cm石英比色皿，以脱芳烃的石油醚为参比，测定其吸光度，并在标准曲线上查出相应的浓度值。
五、结果与讨论
1．C
油（mg/L）＝C*V
2/V1式中：
C——从标准曲线上查出的相应油浓度（mg/L）；V1——被测水样体积（mL）；V2——石油醚定容体积（mL）。
2．使用的石油醚应在一个较大的容器中混匀，使用相同透光率的石油醚，绘制标准曲线及样品测定，否则会由于空白值不同而产生误差。
3．采集的样品必须有代表性。
当只测定水中乳化状态的石油时，要避开漂浮在水面的油。
一般在水表面以下20～50cm处取水样。
若要连同油膜一起采样，要注意水的深度、油膜厚度及覆盖面积。
4．采样瓶应为定容的（如500或1000mL）清洁玻璃瓶，用溶剂清洗干净，勿用肥皂洗。
每次采样时，应装水至刻度线。
5．为了保存水样，采集样品之前，可向瓶里加入硫酸【每升水样加5mL （1+1）硫酸】，使水样pH＜2，抑制微生物活动，于低温下（＜4℃）保存。
在常温下，样品可保存24h。