TP的测定
TP抗体的测定及临床意义教材教学课件

利用生物传感器对TP抗体进行快速、实时 检测,具有操作简便、高通量等优点。
TP抗体研究的最新成果
新型TP抗体检测试剂盒的研发
01
针对TP抗体的特异性检测,开发出灵敏度高、特异性强、操作
简便的试剂盒,为临床诊断提供有力支持。
TP抗体与疾病关联性的研究
02
深入探讨TP抗体与疾病发病机制、病程进展及预后的关系,为
03
TP抗体的治疗与预防
TP抗体的治疗方法
药物治疗
使用抗生素、抗炎药等药 物进行治疗,以降低TP抗 体滴度,缓解症状。
免疫抑制疗法
通过抑制免疫系统反应, 减少TP抗体的产生,缓解 病情。
血浆置换疗法
通过置换血浆,去除体内 TP抗体,达到治疗目的。
TP抗体的预防措施
避免接触感染源
避免与感染TP抗体的人接触,以 降低感染风险。
提高免疫力
保持健康的生活方式,加强锻炼, 提高自身免疫力,预防感染。
定期检测
对于高危人群,定期进行TP抗体 检测,以便早期发现和治疗。
TP抗体的治疗效果评估
临床评估
随访观察
根据患者的症状和体征,评估治疗效 果。
定期随访观察患者情况,评估病情稳 定性和复发风险。
实验室检测
通过实验室检测TP抗体滴度,评估治 疗效果。
TP抗体的检测方法
1 2
酶联免疫法(ELISA) 利用酶标记的抗原或抗体与待测样本中的抗原或 抗体结合,通过显色反应来检测梅毒螺旋体抗体 的方法。
化学发光法
利用化学发光技术来检测梅毒螺旋体抗体的方法, 具有高灵敏度和高特异性的特点。
3
快速血浆反应素试验(RPR)
一种快速、简便的检测方法,通过观察血清在一 定条件下与活性炭颗粒的反应来判断是否存在梅 毒螺旋体抗体。
废水水质测定方法

废水水质测定方法(1)TP的测定实验中主要考察的水质指标是水中磷的含量,其分析方法严格按照《水和废水监测分析方法(第四版)进行,采用钼酸盐分光光度法测定(GB-11893-89)。
实验的测定的原理是:在酸性的条件下,正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应,生成磷钼杂多酸,被还原剂抗坏血酸还原,则变成蓝色络合物,通常成为磷钼蓝。
在测定中需要的试剂包括:①(1+1)硫酸;②10%抗坏血酸溶液:溶解10g抗坏血酸溶于水,并稀释至1000mL;③钼酸盐溶液:溶解13g钼酸铵于100mL水中,溶解0.35g酒石酸锑氧钾于100mL水中,在不断的搅拌下,将钼酸铵溶液徐徐加到300mL(1+1)硫酸,加酒石酸锑氧钾溶液并且混合均匀。
储存在棕色的玻璃瓶里在4℃保存;④浊度-色度补偿液:混合两份体积的(1+1)硫酸和一份体积的10%抗坏血酸溶液;⑤磷酸盐储备液:将优级纯磷酸二氢钾于110℃干燥两个小时,在干燥器中放冷。
称取0.2197g溶于水,移入1000mL容量瓶中,加(1+1)硫酸5mL,用水稀释至标线。
此溶液每毫升含有50.0ug磷(以P计);⑥磷酸盐标准溶液:吸取10.00mL磷酸盐储备液于250mL容量瓶中,用水稀释至标线,此溶液每毫升含2.00ug磷,临用时现配。
测试的主要步骤包括:①标准曲线的绘制:取数支50mL具塞比色管,分别加入0、0.5、1.00、3.00、5.00、10.0、15.0mL,加水至50mL。
向比色管加入1mL10%抗坏血酸溶液,混匀。
30s后加2mL钼酸盐溶液充分混匀,放置15min。
然后用10mm或者30mm比色皿,在700nm波长处,以零浓度溶液为参比,测量吸光度。
本实验中所绘制的标准曲线如图2-1:0.350.300.25吸光度0.200.150.100.050.0005101520253035TP含量(mg)图2-1磷标准曲线②水样消解:采用过硫酸钾消解法,取水样25mL,加入4mL过硫酸钾溶液,将刻度管的塞盖紧之后,用一小块纱布将管口包住并用线将其扎紧,放一组刻度管置于大烧杯中,将烧杯放入高压蒸气消毒器中加热,待压力表显示锅内压力达到达1.1kg/cm2,对应的锅内温度为120℃时,保持此状态30min,然后停止加热。
实验室TP监测

TP测定——钼酸铵分光光度法1. 概述1.1 方法原理在酸性条件下,正磷酸盐与钼酸盐、酒石酸锑氧钾反应,生成磷钼杂多酸,被还原剂抗坏血酸还原,则变成蓝色络合物,通常即称磷钼蓝。
1.2 干扰及消除砷含量大于2mg/L有干扰,可用硫代硫酸钠除去。
硫化物量大于2mg/L有干扰,在酸性条件下通氮气可以除去。
六价铬大于50mg/L有干扰,用亚硫酸钠除去。
亚硝酸盐大于1mg/L有干扰,用氧化消解或加氨磺酸均可以除去。
铁浓度为20mg/L,使结果偏低5%;铜浓度达10mg/L不干扰;氟化物小于70mg/L也不干扰。
水中大多数常见离子对显色的影响可以忽略。
1.3 方法的适用范围本方法最底检出浓度为0.01mg/L(吸光度A=0.01时所对应的浓度);测定上限为0.6mg/L。
可适用于测定地表水、生活污水及化工、磷肥、机加工金属表面磷化处理、农药、钢铁、焦化等行业的工业废水中的正磷酸盐分析。
2. 仪器及试剂2.1 仪器2.1.1 分光光度计。
2.1.2医用手提式蒸气消毒器或者压力锅(1.1-1.4kg/cm2)2.1.3 50ml具塞(磨口)刻度管。
2.2试剂2.2.1(1+1)硫酸;2.2.1 10%抗坏血酸溶液:溶解10g抗坏血酸于水中,并稀释至100ml。
该溶液贮存在棕色玻璃瓶中,在约4℃可稳定几周。
如颜色变黄,则弃去重配。
2.2.3钼酸盐溶液:溶解13g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24•4H2O]于100ml水中。
溶解0.35g酒石酸锑氧钾[KSbC4H4O7•1/2H2O]于100ml水中。
在不断搅拌下,将钼酸铵溶液徐徐加到300ml(1+1)硫酸中,加酒石酸锑氧钾溶液并且混合均匀。
贮存在棕色的玻璃瓶中于约4℃保存。
至少稳定两个月。
2.2.4浊度―色度补偿液:混合两份体积的(1+1)硫酸和一份体积的10%抗坏血酸溶液。
此溶液当天配制。
2.2.5磷酸盐贮备溶液:将优级纯磷酸二氢钾(KH2PO4)于110℃干燥2h,在干燥器中放冷。
总磷检测方法步骤

总磷检测方法步骤一、引言总磷(Total Phosphorus,TP)是指水体中所有形态的磷的总和。
总磷是评价水体营养状态和水质污染程度的重要指标之一。
本文将介绍几种常用的总磷检测方法及其步骤。
二、总磷检测方法及步骤1. 显色比色法显色比色法是一种常用的总磷检测方法。
其主要步骤如下:(1)样品处理:首先需要将水样收集并过滤,去除其中的杂质。
然后,将过滤后的水样溶液转移到试剂盒提供的标准管中。
(2)试剂添加:根据试剂盒使用说明,逐步向标准管中添加试剂,使其与水样中的总磷发生反应。
(3)颜色测量:根据试剂盒使用说明,使用光度计测量标准管中产生的颜色深度,从而确定水样中总磷的含量。
2. 高温消解-分光光度法高温消解-分光光度法是一种较为准确的总磷检测方法,其主要步骤如下:(1)样品处理:首先需要将水样收集并过滤,去除其中的杂质。
然后,将过滤后的水样溶液转移到消解瓶中。
(2)消解:将消解瓶放入高温消解仪中,设定适当的温度和时间进行消解。
消解后,待样品冷却至室温。
(3)分光光度测量:将消解后的样品转移到分光光度计中,选择适当的波长进行测量。
根据测量结果,计算得出水样中总磷的含量。
3. 水质分析仪法水质分析仪法是一种自动化的总磷检测方法,其主要步骤如下:(1)样品处理:首先需要将水样收集并过滤,去除其中的杂质。
然后,将过滤后的水样转移到水质分析仪器中。
(2)仪器设置:根据仪器使用说明,设置适当的参数,如测量波长、时间等。
(3)测量:启动水质分析仪器,进行测量。
仪器会自动完成样品的处理、反应和测量,并将结果显示出来。
4. 液相色谱法液相色谱法是一种精确度较高的总磷检测方法,其主要步骤如下:(1)样品处理:首先需要将水样收集并过滤,去除其中的杂质。
然后,将过滤后的水样转移到液相色谱仪中。
(2)仪器设置:根据液相色谱仪使用说明,设置适当的参数,如流速、柱温等。
(3)测量:启动液相色谱仪,进行测量。
仪器会自动完成样品的处理、分离和检测,并将结果显示出来。
tp抗体滴度测定报告(一)

tp抗体滴度测定报告(一)TP抗体滴度测定报告概述•本报告旨在对TP抗体滴度测定进行详细的分析和解释。
•TP抗体滴度测定是一种常用的血清学检测方法,用于诊断梅毒。
什么是TP抗体滴度测定?•TP抗体滴度测定是一种间接免疫试验,用于检测梅毒感染。
•该检测基于可溶性胶体金技术,通过检测患者血清中特异性抗体的滴度来确定梅毒感染程度。
检测原理1.收集患者血清样本。
2.将样本稀释并与梅毒抗原混合。
3.混合物与胶体金标记的抗人IgG抗体反应,形成金颗粒-抗原-抗体复合物。
4.滴入试纸上后,金颗粒-抗原-抗体复合物在过氧化氢的存在下发生颜色反应。
5.根据颜色的深浅来确定患者血清中特异性抗体的滴度。
结果解读•根据滴度结果,可以判断患者是否感染梅毒,以及感染程度的轻重。
•一般来说,滴度较低的患者可能是过去曾感染或正在疗愈的患者。
•滴度较高的患者则可能是近期感染或严重感染的患者。
•针对不同滴度结果,可能需要进一步的检测和诊断确认。
注意事项•TP抗体滴度测定只是一种初步的筛查方法,结果可能会受其他因素影响而出现误差。
•对于滴度结果较高的患者,建议进行更为精确的检测和诊断,如螺旋体梅毒血清学试验。
结论•TP抗体滴度测定是一种常用的梅毒血清学检测方法,可以初步判断患者是否感染梅毒以及感染程度的轻重。
•结果解读需要综合其他临床资料进行确认,以确保最准确的诊断结果。
以上是对TP抗体滴度测定报告的详细分析和解释,希望对您有所帮助。
如有任何疑问或进一步需要,请及时与相关专业医生进行沟通和咨询。
TP的测定

TP在天然水和废水中,磷几乎都以各种磷酸盐的形式存在,它们分为正磷酸盐,缩合磷酸盐(焦磷酸盐、偏磷酸盐和多磷酸盐)和有机结合的磷酸盐,它们存在于溶液中,腐殖质粒子中或水生生物中。
天然水中磷酸盐含量较微。
化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业的工业废水及生水污水中常含有较大量磷。
磷是生物生长的必需的元素之一。
但水体中磷含量过高(超过0.2mg/L)可造成藻类的过量繁殖,直至数量上达到有害的程度(称为富营养化),造成湖泊、河流透明度降低,水质变坏。
1.方法的选择水中磷的测定,通常按其存在的形式,而分别测定总磷、溶解性正磷酸盐和总溶解性磷,如下图所示正磷酸盐的测定,可采用钼锑抗光度法;氯化亚锡钼蓝法;离子色谱法。
2.样品的采集和保存总磷的测定,于水样采集后,加硫酸酸化至PH≤1保存。
溶解性正磷酸盐的测定,不加任何试剂。
于2~5℃冷处保存,在24h内进行分析。
水样的预处理采集的水样立即经0.45µm微孔滤膜过滤,其滤液可溶性正磷酸盐的测定。
滤液经下述强氧化剂的氧化分解,测得可溶性总磷。
取混合水样(包括悬浮物),也经下述强氧化剂分解,测得水中总磷含量。
(一)过硫酸钾消解法仪器(1)医用手提式高压蒸汽消毒器或一般民用压力锅(1~1.5kg/cm2)(2)电炉,2kw(3)调压器、2kvA(0~220V)(4)50ml(磨口)具塞刻度管试剂5%(m/V)过硫酸钾溶液:溶解5g过硫酸钾于水中,并稀释至100 ml。
步骤(1)吸取25.00 ml混匀水样(必要时,酌情少取水样,并加水至25 ml,使含磷量不超过30µg)于50 ml具塞刻度管中,加过硫酸钾溶液4 ml,加塞后管口包一小块纱布并用线扎紧,以免加热时玻璃塞冲出。
将具塞刻度管放在大烧杯中,置于高压蒸汽消毒器或民用压力锅中加热,待锅内压力达1.0kg/cm2 (相应温度为120℃)时,调节电炉温度使保持此压力30min后,停止加热,待压力表指针将至零后,取出放冷。
TP抗体的测定及临床意义

梅毒血清学试验的假阳性生物学基础
梅毒螺旋体抗体试验所测为抗T. pa llidum的 IgG/ IgM类抗体。试验中所用抗原 FTA2ABS:T. pallidum subsp pallidum 的 Nichols株冻干悬液 TPPA:Nichols株超声处理 EL ISA:纯化的/基因重组的分子量(MW) 47 000、45500、17000、15500的T. pa llidum 特异抗原
梅毒的血清学试验
非特异性类脂质抗原血清试验:
是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原检查血清中的反 应素,用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种试 验,原理基本相同: 1、性病研究实验室玻片试验(VDRL) :由于试剂需现配 现用,故而国内实验室很少采用。但VDRL是唯一可用 于神经性梅毒诊断的血清学方法
胎儿在宫内感染梅毒螺旋体后,胚胎晚期(6~ 9个月)已能合成 IgM型抗体,出生后第 3个月 开始形成 IgG 型抗体; IgM 抗体不能通过胎盘, 而 IgG 抗体能通过胎盘,如患儿血清中检侧出 19S-IgM抗梅毒螺旋体抗体是诊断先天梅毒的 有力证据
一种是非特异性抗体---反应素(reagin)
2、快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR):在特制的纸片 上进行,加入一定量特制的炭粉,可使抗原抗体出现 凝集,用肉眼可观察结果。
3、甲苯胺红试验(TRUST):在试剂中加入甲苯胺红代替 炭粉 颗粒,使结果更易于观察。 4、不加热血清反应素试验(USR)
梅毒的血清学试验
非特异性类脂质抗原血清试验的缺陷:
检
梅毒的血清学试验
梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA IgG) 原理:用超声裂解的梅毒螺旋体为抗原,致敏惰性明胶颗 粒,此致敏明胶颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋 体抗体结合,产生肉眼可观察的凝集反应。是TPHA 的升级产品。 优点: 1、试剂稳定,批间差小 2、结果判读清晰明确 3、敏感性和特异性高 不足:结果判定主观,不易保存.
TP 文档,总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)检测标准操作规程

1、方法依据:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)测定方法2、适用范围:适用于人血清或血浆总蛋白(TP)的测定。
3、试剂仪器:3.1 试剂:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2 试剂储存:未开启的试剂盒在2℃~8℃保存有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存,在2℃~8℃可稳定28天。
试剂不可冰冻3.3 仪器:迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理在碱性条件下,蛋白质与铜离子生成紫蓝色复合物。
显色强度和蛋白质浓度成正比4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆样本。
采集后及时测定,应避免溶血和污染4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。
4.3.2 校准:4.3.2.1 标准液的准备:标准液的准备:校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品,按说明书要求稀释后分装,-20℃冷冻保存,用前提前15分钟从冰箱中取出,复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序:首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准:1)换试剂批号或出现质控漂移时;2)当仪器做完保养后;3)仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准,校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控:在标本开始之前做质控,质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围60~80 g/L(注:各实验室应有自己的参考范围。
)4.5 方法评价线性范围:2~120 g/L。
样本中含量超出可报告范围,请用生理盐水稀释后测定,结果乘以稀释倍数。
反应曲线异常时应进行重复测定确认。
精密度:批内 CV ≤ 3%批间 CV ≤ 4.5%分析灵敏度:本试剂盒检测低限2 g/L。
5、临床意义TP 分为白蛋白和球蛋白两类,具有维持胶体渗透压,运输多种代谢物,调节被运输物质生理作用等功能,与机体免疫功能密切相关。
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TP在天然水和废水中,磷几乎都以各种磷酸盐的形式存在,它们分为正磷酸盐,缩合磷酸盐(焦磷酸盐、偏磷酸盐和多磷酸盐)和有机结合的磷酸盐,它们存在于溶液中,腐殖质粒子中或水生生物中。
天然水中磷酸盐含量较微。
化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业的工业废水及生水污水中常含有较大量磷。
磷是生物生长的必需的元素之一。
但水体中磷含量过高(超过0.2mg/L)可造成藻类的过量繁殖,直至数量上达到有害的程度(称为富营养化),造成湖泊、河流透明度降低,水质变坏。
1.方法的选择水中磷的测定,通常按其存在的形式,而分别测定总磷、溶解性正磷酸盐和总溶解性磷,如下图所示消解水样总磷用0.45μ滤膜过滤的磷消解可溶性正磷酸盐可溶性总磷酸盐正磷酸盐的测定,可采用钼锑抗光度法;氯化亚锡钼蓝法;离子色谱法。
2.样品的采集和保存总磷的测定,于水样采集后,加硫酸酸化至PH≤1保存。
溶解性正磷酸盐的测定,不加任何试剂。
于2~5℃冷处保存,在24h内进行分析。
水样的预处理采集的水样立即经0.45µm微孔滤膜过滤,其滤液可溶性正磷酸盐的测定。
滤液经下述强氧化剂的氧化分解,测得可溶性总磷。
取混合水样(包括悬浮物),也经下述强氧化剂分解,测得水中总磷含量。
(一)过硫酸钾消解法仪器(1)医用手提式高压蒸汽消毒器或一般民用压力锅(1~1.5kg/cm2)(2)电炉,2kw(3)调压器、2kvA(0~220V)(4)50ml(磨口)具塞刻度管试剂5%(m/V)过硫酸钾溶液:溶解5g过硫酸钾于水中,并稀释至100 ml。
步骤(1)吸取25.00 ml混匀水样(必要时,酌情少取水样,并加水至25 ml,使含磷量不超过30µg)于50 ml具塞刻度管中,加过硫酸钾溶液4 ml,加塞后管口包一小块纱布并用线扎紧,以免加热时玻璃塞冲出。
将具塞刻度管放在大烧杯中,置于高压蒸汽消毒器或民用压力锅中加热,待锅内压力达1.0kg/cm2 (相应温度为120℃)时,调节电炉温度使保持此压力30min后,停止加热,待压力表指针将至零后,取出放冷。
(2)试剂空白和标准溶液系列也经同样的消解操作。
注意事项(1)如采样时水样用酸固定,则用过硫酸钾消解前将水样调至中性。
(2)一般民用压力锅,在加热至顶压阀出气孔冒气时,锅内温度为120℃。
(3)当不具备压力消解条件时,亦可在常压下进行,但操作步骤如下:分取适量混匀水样(含磷不超过30µg)于150ml锥形瓶中,加水至50 ml,加数粒玻璃珠,加1 ml 3+7硫酸溶液,5 ml 5%过硫酸钾溶液,置电炉上加热煮沸,调节温度使保持微沸30~40min,至最后体积为10 ml 止。
放冷,加1滴酚酞指示剂,滴加氢氧化钠溶液至刚呈微红色,再滴加1mol/L硫酸溶液使红色褪去,充分摇匀。
如溶液不澄清,则用滤纸过滤于50 ml比色管中,用水洗锥形瓶及滤纸,一并移入比色管中,加水至标线,供分析用。
(二)硝酸—硫酸消解法仪器(1)可调电炉或电热板(2)125ml凯式烧瓶试剂(1)硝酸(ρ=1.40g/ml)(2)1+1硫酸(3)硫酸(1/2H2SO4):1mol/L(4)氢氧化钠溶液:1mol/L,6mol/L(5)1%(m/V)酚酞指示液步骤吸取25.0ml水样置于凯式瓶中,加数粒玻璃球,加2ml(1+1)硫酸及2~5ml硝酸。
再电热板上加热至冒白烟,如液体尚未清澈透明,放冷后,加5ml硝酸,再加热至冒白烟,并获得透明液体。
放冷后加约30ml水,加热煮沸约5min。
放冷后,加1滴酚酞指示剂,滴加氢氧化钠溶液至刚呈微红色,再滴加1mol/L硫酸溶液使微红色正好褪去,充分混匀,移至50ml比色管中。
如溶液浑浊,则用滤纸过滤,并用水洗凯式烧瓶和滤纸,一并移入比色管中,稀释至标线,供分析用。
(三)硝酸—高氯酸消解法仪器(1)可调电炉或电热板(2)125ml锥形瓶试剂1.硝酸:(ρ=1.40g/ml)2.高氯酸(优级纯):含量70~72%3.硫酸(1/2H2SO4):1mol/L4.氢氧化钠溶液:1mol/L,6mol/L5.1%(m/V)酚酞指示剂:0.5g酚酞溶于95%乙醇并稀释至50ml 步骤吸取25.0ml水样置于锥形瓶中,加数粒玻璃球,加2ml硝酸,在电热板上加热浓缩至10ml。
放冷后加5ml硝酸,再加热浓缩至10ml,放冷。
加3ml高氯酸,加热至冒白烟时,可在锥形瓶上加小漏斗或调节电热板温度,使消解液在锥形瓶内壁保持回流状态,直至剩下3~4ml,放冷。
加水10ml,加1滴酚酞指示剂,滴加氢氧化钠溶液至刚呈微红色,再滴加1mol/L硫酸溶液使微红色正好褪去,充分混匀,移至50ml比色管中。
如溶液浑浊,可用滤纸过滤,并用水充分洗锥形瓶及滤纸,一并移入比色管中,稀释至标线,供分析用。
注意事项(1)消解时需在通风橱中进行。
(2)视水样中有机物含量及干扰情况,硝酸和高氯酸用量适当增减。
(3)高氯酸与有机物的混合物,经加热可能产生爆炸,应注意防止这种危险的产生:不要往可能含有有机物的热溶液中加入高氯酸。
●含有有机物的水样的消化过程总要先用硝酸处理,而后使用高氯酸完成消化过程。
●绝对不可将消解液蒸干。
一、钼酸铵分光光度法GB11893--89 概述1.方法原理在酸性条件下,正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应。
生成磷钼杂多酸,被还原剂抗坏血酸还原,则变成蓝色络合物,通常即称磷钼蓝。
2.干扰及消除砷含量大于2mg/L有干扰,可用硫代硫酸钠去除。
硫化物含量大于2mg/L有干扰,在酸性条件下通氮气可去除。
六价镉大于50 mg/L 有干扰,用亚硫酸钠去除。
亚硝酸盐大于1mg/L有干扰,用氧化消解或加氨磺酸均可以去除。
铁浓度为20mg/L,使结果偏低5%;铜浓度达10 mg/L不干扰;氟化物小于70 mg/L是允许的。
海水中大多数离子对显色的影响可以忽略。
3.方法的适用范围本方法最低检出浓度为0.01 mg/L(吸光度A=0.01时所对应的浓度);测定上限为0.6 mg/L。
可适用于测定地面水、生活污水及日化、磷肥、机加工金属表面磷化处理、农药、钢铁、焦化等行业的工业废水中的正磷酸盐分析。
仪器分光光度计试剂(1)1+1硫酸(2)10%(m/V)抗坏血酸溶液:溶解10g抗坏血酸于水中,并稀释至100ml。
该溶液贮存在棕色玻璃瓶中,在冷处可稳定几周。
如颜色变黄,则弃去重配。
(3)钼酸盐溶液:溶解13g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24.4H2O]于100ml 水中。
溶解0.35g酒石酸锑氧钾[K(SbO)C4H4O6·1/2H2O]于100ml 水中。
在不断搅拌下,将钼酸铵溶液徐徐加倒300ml(1+1)硫酸中,加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。
试剂贮存在棕色的玻璃瓶中于冷处保存。
至少稳定2个月。
(4)浊度—色度补偿液:混合两份体积的(1+1)硫酸和一份体积的10%(m/V)抗坏血酸溶液。
此溶液当天配制。
(5)磷酸盐贮备溶液:将磷酸二氢钾(KH2PO4)于110℃干燥2h,在干燥器中放冷。
称取0.217g溶于水,移入1000ml容量瓶中。
加(1+1)硫酸5ml,用水稀释至标线。
此溶液每毫升含50.0µg 磷(以P计)。
(6)磷酸盐标准溶液:吸取10.00ml磷酸盐贮备液于250ml容量瓶中,用水稀释至标线。
此溶液每毫升含2.00µg磷。
临用时现配。
步骤1.校准曲线的绘制取数支50ml具塞比色管,分别加入磷酸盐标准使用液0、0.50、1.00、3.00、5.00、10.0、15.0 ml,加水至50 ml。
(1)显色:向比色管中加入1 ml 10%(m/V)抗坏血酸溶液混匀,30s后加2ml钼酸盐溶液充分混匀,放置15min。
(2)测量:用10mm或30mm比色皿,于700nm波长处,以零浓度溶液为参比,测量吸光度。
2.样品测定分取适量水样(使含磷量不超过30 µg)用水稀释至标线。
以下按绘制校准曲线的步骤进行显色和测量。
减去空白试验的吸光度,并从校准曲线上查出含磷量。
计算磷酸盐(P, mg/L)=式中,m—由校准曲线查得的磷量(µg);V—水样体积(ml)。
精密度和准确度各实验室分析质控样的精密度和准确度,见下表。
协作实验测得方法的精密度和准确度样品名称含量(P mg/L)实验室数消解方法室内相对标准差(%)室间相对标准差(%)相对误差(%)USEP A2.06 13 K2S2O8氧化0.75 1.33 1.74 ESEP A2.06 6 HNO3-HClO4氧化 1.41 1.49 +1.85 USEP A0.20 11 K2S2O8氧化 1.9 3.3 +10 各实验室分析地面水和工业废水的精密度和准确度,见下表。
各实验室测定实际水样的精密度和准确度水样类型含量(Pmg/L)实验室数消解方法单个实验室相对标准差(%)加标回收率(%)地表水0.02-2.5414 K2S2O8 0.3-13 90.5-105 工业废水0.06-6.1714 K2S2O80.18-13.7 90-106地表水0.07-2.29 6 HNO3-HClO40.9-8.1 97.2-104 工业废水0.40-1.535 HNO3-HClO40.89-2.12 97.4-101注意事项(1)如试样中浊度或色度影响测量吸光度时,需做补偿校正。
在50ml比色管中,水样定容后加入3ml浊度补偿液,测量吸光度,然后从水样的吸光度中减去校正吸光度。
(2)室温低于13℃时,可在20~30℃水浴中,显色15min。
(3)操作所用的玻璃器皿,可用1+5的盐酸浸泡2h ,或用不含磷酸盐的洗涤剂刷洗。
(4)比色皿用后应以稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻,以除去吸附的钼蓝呈色物。
二、氯化亚锡还原光度法概述1.方法原理在酸性条件下,正磷酸盐与钼酸铵反应,生成磷钼杂多酸。
当加入还原剂氯化亚锡后,则转变成蓝色络合物,通常即称为钼蓝。
2.干扰及消除氯离子含量达0.15%以上时,使显色减弱(其它卤素离子亦同);硫酸根离子,含量在1%以上时,则使色度增加;高铁(Fe3+)离子具有氧化作用,含量达40mg/L时,可影响显色;铜(Cu2+)离子含量大于1mg/L时,可出现负偏差;硅酸在此显色条件下不干扰;砷酸可与磷酸一样显色;其色度约为磷酸的1/20。
水中过锰酸盐、六价铬等离子含量较高时,影响磷钼蓝显色,遇此情况,可加适量亚硫酸钠溶液使还原,并再经煮沸以除去剩余的亚硫酸根离子。
3.方法的适用范围本方法最低检出浓度为0.025mg/L,测定上限为0.6 mg/L。
适用于地面水中正磷酸盐的测定。
仪器分光光度计试剂(1)钼酸铵溶液:称取8.25g钼酸铵溶于约75ml水中,另量取100ml 浓硫酸徐徐注入300ml水中。
冷却后,将钼酸铵溶液在搅拌下注入硫酸溶液中,加水至500 ml,贮于聚乙烯瓶中,如浑浊或变色则应重配。