黄酮标准曲线绘制的实验报告
紫外测黄酮实验报告
一、实验目的1. 掌握紫外-可见分光光度法测定黄酮类化合物含量的原理和方法。
2. 学习使用紫外-可见分光光度计进行定量分析。
3. 了解黄酮类化合物的性质及其在自然界中的应用。
二、实验原理黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的天然化合物，具有较强的生物活性。
本实验采用紫外-可见分光光度法测定黄酮含量，其原理基于黄酮类化合物在特定波长下有最大吸收峰，通过测定该波长下的吸光度值，根据标准曲线计算样品中黄酮的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：芦丁标准品、样品（含黄酮类化合物）、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等。
2. 仪器：紫外-可见分光光度计、电子天平、容量瓶、移液管、试管等。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）准确称取芦丁标准品0.01g，用无水乙醇溶解，转移至100mL容量瓶中，定容至刻度，得到0.1mg/mL的芦丁标准溶液。
（2）分别取1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL芦丁标准溶液于试管中，加入2.5mL 5%NaNO2溶液，混匀，放置6分钟。
（3）加入2.5mL 10%Al（NO3）3溶液，混匀，放置6分钟。
（4）加入10mL 4%NaOH溶液，混匀，用无水乙醇定容至25mL，摇匀。
（5）以无水乙醇为空白，在510nm波长下测定吸光度值。
（6）以吸光度值为纵坐标，芦丁标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定（1）准确称取样品0.01g，用无水乙醇溶解，转移至100mL容量瓶中，定容至刻度，得到0.1mg/mL的样品溶液。
（2）按照绘制标准曲线的步骤，测定样品溶液在510nm波长下的吸光度值。
（3）根据标准曲线，计算样品中黄酮的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线根据实验数据绘制标准曲线，得到线性回归方程为：A=0.0685C+0.0035，相关系数R2=0.9988。
2. 样品测定根据标准曲线，计算样品中黄酮的含量为0.045mg/g。
六、实验结论1. 本实验成功运用紫外-可见分光光度法测定了样品中黄酮的含量，结果表明该方法准确可靠。
黄酮含量测定实验报告
黄酮含量测定实验报告1. 实验目的本实验旨在探究不同食材中黄酮含量的差异，并利用比色法测定黄酮的含量。
2. 实验原理比色法是利用物质对可见光的吸收特性进行定量分析的方法。
黄酮是一类具有广泛生物活性的天然化合物，常常用作药物和食品添加剂。
黄酮的浓度可以通过其在特定波长下的吸光度来确定。
3. 实验步骤3.1 准备工作- 准备所需食材样品，如黄芩、枸杞、山楂等。
- 准备试剂：甲醇、石油醚、2N盐酸、硼酸溶液、盐酸。
3.2 提取黄酮1. 将所选食材样品粉碎，并称取3克样品。
2. 将样品加入25mL石油醚，室温条件下搅拌30分钟，以去除油脂。
3. 过滤样品，将滤液收集入锥形瓶中。
4. 再加入25mL甲醇，室温条件下搅拌30分钟，以提取黄酮。
5. 过滤后，用甲醇定容至100mL。
3.3 构建标准曲线1. 取黄酮标准品，分别称取0.1g、0.2g、0.3g、0.4g和0.5g，置于50mL锥形瓶中。
2. 分别加入25mL石油醚和25mL甲醇，按上述方法提取黄酮。
3. 过滤后，用甲醇定容至50mL，得到浓度分别为2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL和10mg/mL的黄酮溶液。
3.4 测定样品黄酮含量1. 将提取得到的样品溶液取5mL，并用甲醇定容至25mL。
2. 取适量样品溶液置于比色皿中，以甲醇为对照组。
3. 在波长为380nm的紫外可见光谱仪中测定吸光度。
4. 实验结果与分析4.1 标准曲线根据所得的吸光度数据，绘制出黄酮浓度与吸光度之间的标准曲线。
4.2 样品含量计算根据所测得的样品吸光度值，利用标准曲线可得到样品中黄酮的浓度。
5. 实验讨论与结论本实验利用比色法测定了不同食材中黄酮的含量。
通过对标准曲线的测定和样品吸光度的测量，可以准确计算出样品中黄酮的含量。
本实验的结果对于食品科学和药物研发具有重要意义。
黄酮作为一种天然化合物，具有多种生物活性，可以抗氧化、抗炎和抗肿瘤等。
因此，了解黄酮含量对于评估食材的营养价值和药物疗效具有指导意义。
中药制剂分析实验三 黄酮
测定其含量。
本实验利用黄酮类化合物在硝酸钠的碱性溶液中与铝离 子产生高灵敏度的橙红色配合物，从而利用可见分光光度法 （比色法）测定大山楂丸中总黄酮的含量。
三、仪器与试药
可见分光光度计、分析天平、索氏提 取器、95%乙醇、5%亚硝酸钠溶液、 10%硝酸铝溶液、1%氢氧化钠溶液、 5%乙醇液
四、操作步骤
单选（20）多选（8）不定向选择（8）简答（15）论述 （20）计算（ 14 ）综合（15质量分析设计方案）
1. 对照品溶液的配制：
精密称取槲皮素对照品20mg，置100ml容量瓶中，加入95%
乙醇50ml使溶解，然后加50%乙醇稀释至刻度，即得 0.2mg/ml的对照品溶液。
2.标准曲线的制备：
精密量取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml分别置 10ml容量瓶中，各加50%乙醇使成5ml，精密加入5%亚硝 酸钠0.3ml，摇匀，放置6min，加入10%硝酸铝0.3ml，摇 匀，放置6min，加入1%氢氧化钠液4ml，分别用5%乙醇稀
中药制剂分析实验
实验三 可见分光光度法测定 大山楂丸中总黄酮的含量
一、实验目的要求
1.掌握用可见分光光度法测定中药制剂中总黄酮含量 2.掌握可见分光光度计的使用方法
二、基本原理
大山楂丸由山楂、神曲、麦芽组成，主要功能为开胃消食， 山楂主要有效成分为有机酸类、黄酮类及多种维生素。其中 黄酮类化合物具有结构，可与Al3+、铅盐、Mg2+等金属盐类 试剂反应，生成有色配合物（510nm），用可见分光光度法
释至刻度，摇匀，放置15min，以第一瓶作空白，用可见分
光光度计测其吸收度，绘制标准曲线，计算回归方程。 A=0.287×C+0.00433
实验报告（终2）
实验报告（终2）紫外分光光度法测定槐花中总黄酮含量的方法学验证（实验报告）实验日期温度相对湿度实验人员学号一、实验目的1、掌握比色法测定槐花药材中总黄酮含量的方法及原理2、掌握方法学验证并证明采用的方法适合于相应的检测要求二、实验原理槐花药材的主要有效成分是黄酮类化合物，其中芦丁的含量最高，所以槐花药材的鉴别及含量测定均以芦丁为指标成分。
黄酮类化合物在碱性条件下与铝盐发生配位反应，生成红色的配位化合物，使得最大吸收波长红移至可见光区，且具有较高的吸收系数。
黄酮类与铝盐的配位反应是定量完成的，因此可采用比色法测定槐花药材中黄酮的含量，避免其他非黄酮成分对测定准确度的影响。
药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应检测要求，在建立药品质量标准时，分析方法需经验证。
本次实验所进行的是槐花总黄酮含量测定的方法学验证，验证内容包括线性、精密度、重现性、稳定性、准确度（回收率）。
三、仪器与试剂仪器：紫外-可见分光光度计，电子天平，玻璃比色皿，超声仪，25ml量瓶（15个），100ml量瓶（10个），150ml锥形瓶（6个），100ml量筒（2个），50ml烧杯（7个），洗耳球（2个），洗瓶(2个)，胶头滴管（2支），药匙（2支），玻棒（2支），移液枪（2支），移液枪头（若干），长颈漏斗（4个），1ml吸量管（3支），2ml吸量管（2支），5ml吸量管（2支），10ml吸量管（2支），500ml烧杯（1个）试剂：槐花药材，芦丁对照品，5%亚硝酸钠溶液，10%硝酸铝溶液，氢氧化钠试液，甲醇，乙醇四、实验步骤1．供试品溶液的制备：将槐花研碎，取粗粉约1g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入60%（v/v）乙醇100ml，称定重量，超声30分钟，取出冷却至室温，用60%（v/v）乙醇补足失重，摇匀，过滤，取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
2．对照品溶液的制备：取芦丁对照品50mg，精密称定，置于25ml量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热时溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。
黄酮含量测定的标准曲线
黄酮含量测定的标准曲线黄酮化合物是一类具有多种生物活性的天然产物，广泛存在于植物中，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生理活性。
因此，对黄酮含量进行测定具有重要的研究意义。
而建立黄酮含量测定的标准曲线，是进行黄酮含量测定的重要步骤之一。
首先，我们需要准备一系列不同浓度的标准溶液。
这些标准溶液的浓度应当覆盖我们待测样品中黄酮含量的范围，通常选择3-5个不同浓度的标准溶液。
然后，我们使用适当的方法进行黄酮含量的测定，比如常用的分光光度法或高效液相色谱法。
在测定过程中，我们需要注意控制好实验条件，保证实验结果的准确性和可重复性。
接下来，我们将利用测定得到的标准溶液的吸光度数据，绘制标准曲线。
通常情况下，我们将不同浓度的标准溶液的吸光度作为横坐标，浓度作为纵坐标，绘制出吸光度与浓度的标准曲线。
在绘制标准曲线时，我们需要选择合适的曲线拟合方法，比如线性拟合、二次拟合等，以保证标准曲线的准确性和可靠性。
通过标准曲线，我们可以准确地测定待测样品中黄酮含量。
首先，我们需要将待测样品提取得到其溶液，然后测定其吸光度。
接着，我们可以根据标准曲线，通过测定得到的吸光度值，反推出待测样品中黄酮的含量。
需要注意的是，测定待测样品时，我们需要选择合适的稀释倍数，以保证测定结果在标准曲线的线性范围内。
在进行黄酮含量测定时，我们还需要注意一些实验技巧。
比如，在制备标准溶液时，需要严格控制溶液的浓度，避免因为溶液浓度不准确而导致测定结果的误差。
在测定待测样品时，需要进行多次重复测定，以确保测定结果的准确性。
此外，实验过程中需要注意安全，避免对人身和实验室环境造成危害。
总之，建立黄酮含量测定的标准曲线是进行黄酮含量测定的重要步骤之一。
通过合理选择标准溶液、测定方法和曲线拟合方法，我们可以准确地测定待测样品中黄酮的含量，为进一步研究黄酮化合物的生物活性和药理作用提供可靠的数据支持。
芦丁标准曲线测黄酮含量方法
芦丁标准曲线测黄酮含量方法芦丁是一种黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性，因此在药物、保健品和食品等领域有着广泛的应用。
测定芦丁含量是对相关产品质量的重要指标之一。
本文将介绍一种测定芦丁含量的标准曲线方法，以供参考。
1. 实验原理。
芦丁的含量测定一般采用紫外分光光度法。
在一定波长下，芦丁溶液对紫外光的吸收量与其浓度成正比。
通过构建芦丁的标准曲线，可以准确测定样品中芦丁的含量。
2. 实验步骤。
（1）准备工作。
将实验所需的仪器和试剂准备齐全，包括分光光度计、芦丁标准品、乙醇、紫外吸收比色皿等。
（2）制备标准曲线。
取一系列不同浓度的芦丁标准溶液，分别用乙醇稀释至不同浓度。
分别用分光光度计测定各标准溶液的吸光度，并绘制标准曲线。
（3）测定样品。
将待测样品溶解于乙醇中，用分光光度计测定其吸光度，并根据标准曲线计算出芦丁的含量。
3. 实验注意事项。
（1）实验中应注意避光操作，防止芦丁溶液被光照射而发生降解。
（2）使用乙醇时需注意防止挥发，以免浓度发生变化。
（3）在制备标准曲线时，应确保各标准溶液浓度范围覆盖待测样品的含量范围。
4. 结果分析。
通过标准曲线测定出的样品芦丁含量，可以为相关产品的质量控制提供重要参考。
同时，标准曲线的斜率和截距也可以反映出测定方法的灵敏度和准确性。
5. 实验应用。
本方法可以应用于药物、保健品、食品等领域中芦丁含量的测定，具有简便、快速、准确的特点，适用范围广泛。
总结，标准曲线测定芦丁含量是一种简便有效的方法，通过合理的实验操作和数据处理，可以得到准确的结果。
在实际应用中，可以帮助生产厂家和监管部门对相关产品的质量进行有效监控，保障产品的安全和有效性。
希望本文所介绍的方法能够对相关领域的研究和生产工作有所帮助。
黄酮实验报告
综合化学实验实验报告实验名称： 黄酮类化合物的提取及其在功能化妆品中的应用姓名： 孙明 学号： 1011080214 专业： 应用化学 班级： 0802 同 组 人： 裴丽娜 王朋娜 孙 明 指导教师： 完成时间： 2011.11.28河北科技师范学院理化学院综合化学实验室Hebei Normal University of Science & Technology目录摘要 (2)1 绪论 (3)2 实验原理 (3)3 实验仪器和药品 (4)3.1 实验仪器 (4)3.2 实验药品 (4)4 实验过程 (4)4.1 侧柏叶中黄酮的提取及定性分析 (4)4.2 侧柏黄酮洗发香波的配制及性能定 (6)4.3 侧柏黄酮雪花膏的配制及性能测定 (7)5 结果与讨论 (7)5.1 侧柏叶中黄酮的含量 (7)5.2 侧柏叶黄酮提取物的紫外—可见分析 (8)5.3 洗发香波和雪花膏的性能测定 (9)6 结论 (10)参考文献摘要采用超声波法和索氏提取法从侧柏叶中提取黄酮类化合物。
芦丁中也含有黄酮类化合物，根据不同溶度的黄铜提取液对应不同的吸光度，作出标准曲线，得出吸光度关于浓度的方程，然后再测得侧柏提取液的吸光度，根据方程计算黄酮类化合物的含量。
黄酮类化合物主要用于激活毛母细胞和促进血液循环，使毛发生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作用。
去屑止痒的机理在于抑制头发表皮细胞蜕化的速度，延迟脱落，减少脂溢性皮肤病的产生。
因此，广泛应用于洗发香波的制备中。
同时它还有很好的美白效果，可添加到雪花膏中。
关键词：侧柏；黄酮类化合物；洗发香波；雪花膏1 绪论侧柏(Platycladus orientalis)系柏科侧柏属常绿乔木，别名扁柏、香柏、片柏、片松。
喜生于湿润肥沃的山坡[1]，分布于全国大部分地区。
现代医学研究证明，侧柏叶对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、宋内氏痢疾杆菌有明显的抑制作用，能缩短出血和凝血时间，对肺炎、痢疾、高血压等多种疾病有一定的疗效。
标准曲线法测黄酮含量计算
标准曲线法测黄酮含量计算黄酮化合物是一类具有重要生物活性的化合物，广泛存在于植物中。
它们在植物生长和生理过程中起着重要的作用，对人体健康也有着积极的影响。
因此，测定植物中黄酮含量具有一定的研究意义。
标准曲线法是一种常用的测定黄酮含量的方法，本文将介绍如何使用标准曲线法计算黄酮含量。
首先，准备工作。
需要准备的试剂和设备包括，乙醇、乙酸乙酯、乙酸、乙酸钠、二氧化硅、标准品、紫外分光光度计等。
在实验操作前，要确保所有试剂和设备都已经准备就绪，并且清洁干净。
其次，制备标准曲线。
选取几种不同浓度的标准品，分别用乙醇稀释成一系列不同浓度的溶液。
然后，分别取一定体积的每种标准品溶液，加入相应的试剂和溶剂，进行提取和转化。
最后，用紫外分光光度计测定各标准品溶液的吸光度，并绘制标准曲线。
接下来，测定样品。
将待测样品制成适当的溶液，然后用相同的方法进行提取和转化。
测定样品溶液的吸光度，并根据标准曲线计算出样品中黄酮的含量。
最后，结果分析。
根据实验得到的数据，计算出样品中黄酮的含量，并进行统计分析。
同时，还可以对不同样品进行比较，找出含量差异较大的样品，为后续研究提供参考。
通过标准曲线法测定黄酮含量，可以得到准确的结果，并且具有较高的重现性和灵敏度。
这种方法简单易行，适用于大批量样品的测定。
在实际应用中，可以根据需要对标准曲线法进行改进和优化，以满足不同样品的测定要求。
总之，标准曲线法是一种常用的测定黄酮含量的方法，通过合理的实验设计和严格的操作规范，可以得到准确可靠的结果。
希望本文的介绍能够对相关研究工作提供一定的帮助，也希望读者能够在实际操作中加以实践和改进，以获取更好的实验效果。
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黄酮标准曲线绘制的实验报告1.总黄酮的测定1.1 实验仪器电子天平AR2140;紫外可见分光光度计UV2754;型数控超声波清洗器KQ3200DB;超级恒温槽;Rotavapor R200 旋转蒸发仪 ;FD21C250 冷冻干燥机21.2 试剂及药品芦丁标准品硝酸铝国产分析纯（配成5 %）亚硝酸钠国产分析纯（配成10 %）氢氧化钠国产分析纯配成（配成1mol/L）95%乙醇，无水乙醇国产分析纯（配成60%乙醇 50%乙醇）DPPH·（2，2-diphenyl-1-picrylhydrazyl，二苯代苦味肼基自由基）Vc（Ascrobic acid，维生素 C，抗坏血酸）没食子酸对照品：基准纯。
大青叶子采摘于海南大学东坡湖畔1.3实验步骤：及波长的确定样品60℃烘干粉碎机粉碎，过20目筛，装入试剂瓶中备用。
根据查阅文献总黄酮在波长为510nm处吸收值最大。
精密称取120 ℃干燥至恒重的芦丁标准样品37.5mg置于100mL烧杯中,用60%乙醇溶解后定容至25mL 容量瓶中,摇匀，即可得1.5mg/mL的芦丁标准溶液。
及绘制标准曲线精密吸取芦丁标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL ,分别置于10mL 容量瓶中，并定容至刻度线。
得到0.0mg/ml、0.15mg/ml、0.3mg/ml、0.45mg/ml、0.6mg/ml、0.75mg/ml、0.9mg/ml的标准品溶液，分别取1ml到试管中各加5 %亚硝酸钠溶液0.3mL 摇匀,放置6min ,加10%硝酸铝溶液0.3mL 摇匀,放置6min ,加1mol /L氢氧化钠溶液4mL ,再用60%乙醇溶液稀释至刻度,放置15min 后,分别在510nm 处测定其吸光度（Tai,Cai&Dai,2011）。
（以试剂空白做参比）以吸光度A 为纵坐标,浓度c为横坐标,绘制标准曲线。
用最小二乘法进行线性拟合,得c与A 的线性回归方程以及相关系数R2。
序号浓度（ug/ml）吸光度1 0 02 15 0.1803 30 0.3494 45 0.5465 60 0.7276 75 0.8847 90 1.063表1-1：芦丁标准曲线测定数据图1-2：芦丁标准曲线根据查阅文献总黄酮在波长为510nm处吸收值最大。
取黄酮提取液，取提液2ml至10ml的比色管中用60%的乙醇定容至刻度线则稀释5倍。
取稀释好的溶液4份1ml置入10ml 的比色管中，其中一份用60%的乙醇定容，作为参比溶液。
其余各份各加5%亚硝酸钠溶液0.3mL 摇匀,放置6min ,加10%硝酸铝溶液0.3mL 摇匀,放置6min ,加1mol 氢氧化钠溶液4mL ,再用60%乙醇溶液稀释至刻度,放置15min后,分别在510nm处测定其吸光度。
代入标准曲线回归方程可得浓度数据（以芦丁为参比）,三次结果取平均值。
经换算后得样品中总黄酮含量。
样品总黄酮含量(mg/g)=X*n*V1/( V *W)式中：X—测出的浓度，mg/ mL;（直接代入，不用换算。
）n—稀释倍数，量纲为1;V—样液总体积，mL;IV—测定时取样体积，mL;W—样品质量，g。
2.总分含量的测定2.1 实验仪器ALZO4型电子分析天平:上海梅特勒一托利多仪器有限公司;DELA犯O型pH计:上海梅特勒一托利多仪器有限公司;723可见分光光度计:上海菩华科技仪器有限公司;DK一512型电热恒温水浴锅:上海森信实验仪器有限公司;容量瓶(250mL，10OmL，25mL)、比色管管(10mL);烧杯、移液管、吸耳球。
2.2试剂及药品没食子酸对照品：基准纯，购于上海分析试剂厂，置50℃真空干燥箱真空中干燥4 h。
乙醇为工业级，蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
2.3 Folin—Ciocalteu比色法测定总酚酸含量3.3.1 Folin—Ciocalteu试剂的配制称取20 g钨酸钠和5 g钼酸钠于圆底烧瓶中，用140 ml蒸馏水溶解，加入10ml 85％的磷酸溶液和20 ml 浓盐酸，文火回流10 h ，然后加入3 g 硫酸锂及15 ml 双氧水，加热沸腾15 min 至亮黄色，不得带微蓝和绿色。
冷却，移入250 ml 容量瓶中，定容，贮于棕色瓶中，4℃冰箱保存。
准确称取15．00 mg 干燥的没食子酸，加蒸馏水适量，超声溶解，放冷，以蒸馏水定容至50ml ，制成0.3mg/mL 没食子酸的溶液，作为对照品溶液。
将0.3mg/mL 的没食子酸标准溶液分别配制成0.0mg/mL ，0.03mg/mL ，0.06mg/mL ，0.09mg/mL ，0.12mg/mL ，0.15mg/mL 、0.18mg/mL 、0.21mg/mL 的溶液，分别取1mL 置于10mL 的容量瓶中，加入2 ml 福林试剂，充分摇匀，加入0．75ml 7.5％碳酸钠溶液．混匀，以蒸馏水稀释至刻度。
振荡一下，静置2h (Guo&Wei,2011)。
同时制作空白管。
为消除供试品溶液本身颜色的干扰，同时制作不加显色剂的对照管。
于765 nm 波长处测定吸光度值。
2.3.3标准曲线的制备以吸光度A 为纵坐标,浓度c 为横坐标,绘制标准曲线。
用最小二乘法进行线性拟合,得c 与A 的线性回归方程以及相关系数R 2。
表3-1：没食子酸标准曲线测定数据图3-1：没食子酸标准曲线 取提液2ml 至10ml 的比色管中用60%的乙醇定容至刻度线则稀释5倍。
取稀释后溶液1ml 四份,分别置于10mL 比色管中，加入2 ml 福林试剂，充分摇匀，加入0．75ml 7.5％碳酸钠溶液．混匀，以蒸馏水稀释至刻度。
振荡一下，静置2h 。
同时制作空白管。
为消除供试品溶液本身颜色的干扰，同时制作不加显色剂的对照管。
于765 nm 波长处测定吸光度值。
总酚酸含量计算：序号浓度（ug/ml ） 吸光度（WL765.0）13 0.132 26 0.284 39 0.411 412 0.582 515 0.712 618 0.843 7 211.013多酚含量（mg/100g ）=100g 0.5X(mg)⨯⨯⨯）总酚酸称样量（稀释倍数3.清除 DPPH ·的能力的测定 3.1.实验仪器、药品及试剂 2.1.1 实验仪器ALZO4型电子分析天平:上海梅特勒一托利多仪器有限公司; DELA 犯O 型pH 计:上海梅特勒一托利多仪器有限公司; 723可见分光光度计:上海菩华科技仪器有限公司; DK 一512型电热恒温水浴锅:上海森信实验仪器有限公司; 容量瓶(250mL ，10OmL ，25mL)、比色管(10mL); 烧杯、移液管、吸耳球。
DPPH·（2，2-diphenyl-1-picrylhydrazyl ，二苯代苦味肼基自由基）； Vc （Ascrobic acid ，维生素 C ，抗坏血酸）为分析纯； 无水乙醇，蒸馏水配制0.06mMDPPH 试剂，放入冰箱4℃进行冷藏，以备用。
准确称取17.6mgVc 到100mL 的烧杯中用无水乙醇溶解后，置于50mL 的容量瓶中定容至刻度线及可以得到2mmol/L 的母液，分别量1、2、3、4、5、6ml 至10ml 的比色管中用无水乙醇定容至刻度线，则可以得到0.2mmol/L 、0.4mmol/L 、0.6mmol/L 、0.8mmol/L 、1mmol/L 、1.2mmol/L 的溶液。
从以上比色管中分别取0.1ml 溶液置于试管中再加入3.9ml 的DPPH ，反应30min,在517nm 测出吸光值(Thoo&Ho,2010)，用无水乙醇代替待测液作为对照，用无水乙醇作空白，重复三组。
清除率=[(Ac-Ai)/Ac]×100%式中，Ac ：0.1 mL 无水乙醇加 3.9mL DPPH 溶液的吸光度；Ai ：0.1 mL 待测液加 3.9mLDPPH 溶液的吸光度。
表3-1：VC 标准曲线测定数据 以吸光度A 为纵坐标,浓度c 为横坐标,绘制标准曲线。
用最小二乘法进行线性拟合,得c 与A 的线性回归方程以及相关系数R 2。
图3-1：VC 含量与吸光度的关系图3-1：VC 含量与清除率的关系取提液4ml 至10ml 的比色管中用60%的乙醇定容至刻度线则稀释2.5倍。
取稀释后溶液0.1mL 三份,分别置于10mL 试管中，再分别加入配置好的DPPH 溶液3.9mL,摇匀，反应30min 后，分别在517nm 处测定其吸光度。
代入标准曲线回归方程可得浓度数据（以Vc 为参比）,三次结果取平均值。
经换算后得样品自由基清除率。
4. 清除ABTS +自由基能力的测定4.1ABTS +自由基的配制准确称取0.19215gABTS 于50mL 的容量瓶中，用无水乙醇定容，摇匀，浓度7mmol/L ；序号 C （mmol/L ）吸光度清除率/%0 00 1 0.2 0.529 14.92 2 0.4 0.424 30.90 3 0.6 0.32 46.73 4 0.8 0.209 63.62 5 1 0.11 78.69 61.20.02 92.397mmol/LABTS +.与2.45mmol/L 的高硫酸钾等体积混合，在室温、避光黑暗的条件下静置过夜反应12~16h ，形成 ABTS + 自由基储备液。
该储备液在室温，避光的条件下稳定。
用前用无水乙醇稀释成工作液，于波长734nm 处测得其吸光度为0.7000（±0.02），再装入棕色试剂瓶中，放入冰箱4℃进行冷藏，以备用。
4.2标准曲线的绘制(Zhu&Lian,2011)，用无水乙醇作空白，重复三组。
清除率=[(Ac-Ai)/Ac]×100%式中，Ac ：0.1 mL 无水乙醇加 3.9mL ABTS + 自由基溶液的吸光度；Ai ：0.1 mL 待测液加 3.9mL ABTS + 自由基溶液的吸光度。
表4-1：Vc 浓度与吸光值和清除率的数据 图4-1Vc 浓度与其吸光值的关系 图4-2：Vc 浓度与其清除ABTS能力的关系5.还原能力的测定5.1实验试剂磷酸盐缓冲溶液（配成PH6.6 0.2mol/l ）; K 3Fe(CN)6溶液（配成1%）; 三氯乙酸（配成10%）； FeCl 3（配成0.1%）； 没食子酸 无水乙醇序号 C （mmol/l ）吸光度清除率/% 1 00.00 20.10.57 12.04 3 0.2 0.493 23.92 4 0.3 0.422 34.88 5 0.4 0.351 45.83 6 0.5 0.276 57.41 7 0.6 0.2 69.14 8 0.7 0.118 81.79 90.80.035 94.605.2标准曲线的绘制磷酸盐缓冲溶液(pH6.6 0.2mol/L)：准确称取7.16g 的磷酸氢二钠至100mL 的烧杯中用蒸馏水溶解后，置于100mL 的容量瓶中用蒸馏水定容，即可得到0.2mol/L 的磷酸氢二钠，同样的方法配制0.2mol/L 的磷酸二氢钠。