实验三 植物营养(铵态氮,硝态氮)
铵态氮和硝态氮测定方法!!!-副本
铵态氮和硝态氮测定⽅法-副本铵态氮测量⽅法（2mol?L-1KCl浸提—靛酚蓝⽐⾊法）1）⽅法原理2mol?L-1KCl溶液浸提⼟壤，把吸附在⼟壤胶体上的NH4+及⽔溶性NH4+浸提出来。
⼟壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作⽤，⽣成⽔溶性染料靛酚蓝，溶液的颜⾊很稳定。
在含氮0.05～0.5mol?L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正⽐，可⽤⽐⾊法测定。
2）试剂（1）2mol?L-1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于⽔中，稀释⾄1L。
（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释⾄1L。
此试剂不稳定，须贮于棕⾊瓶中，在4℃冰箱中保存。
（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢⼆钠（Na2HPO4?7H2O，化学纯）7.06g、磷酸钠（Na3PO4? 12H2O，化学纯）31.8g和52.5g?L-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂⽩粉溶液)5mL溶于⽔中，稀释⾄1L，贮于棕⾊瓶中，在4℃冰箱中保存。
（4）掩蔽剂将400g?L-1的酒⽯酸钾钠（KNaC4H4O6?4H2O，化学纯）与100g?L-1的EDTA⼆钠盐溶液等体积混合。
每100mL 混合液中加⼊10 mol?L-1氢氧化钠0.5mL。
（5）2.5µg?mL –1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取⼲燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯0.4717g溶于⽔中，洗⼊容量瓶后定容⾄1L，制备成含铵态氮（N）100µg?mL –1的贮存溶液；使⽤前将其加⽔稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5µg?mL –1的标准溶液备⽤。
3）仪器与设备：往复式振荡机、分光光度计。
4）分析步骤（1）浸提称取相当于10.00g⼲⼟的新鲜⼟样（若是风⼲⼟，过10号筛）准确到0.01g，置于150mL三⾓瓶中，加⼊氯化钾溶液100mL，塞紧塞⼦，在振荡机上振荡1h。
安泰氮肥和硝态氮肥的鉴别实验 心得体会
安泰氮肥和硝态氮肥的鉴别实验心得体会铵态氮促进植物吸收阴离子，消耗有机酸；而硝态氮促进植物吸收阳离子，促进有机阴离子的合成。
一般来说，旱地植物具有喜硝性，而水生植物或强酸性土壤上生长的植物，则表现为喜铵性，这是作物适应土壤环境的结果。
如玉米、小麦对硝态氮偏好，在等氮量的供应条件下，硝态氮的增产效果会更突出一些；烟草和蔬菜，它们也是喜硝态氮的作物。
硝态氮极易分解，在土壤中活动性大，能迅速提供作物氮素营养，同时，又易于流失、肥效较短，这种特性符合烟草的要求，叶片要生长快，在适当时候能能落黄“成熟”。
而且硝态氮有利于烟草体内形成柠檬酸、苹果酸等有机酸，烤出的烟叶品质好，燃烧性好。
蔬菜施用硝态氮肥产量高，如硝态氮低于肥料全氮的50%时，产量会明显下降。
铵态氮和硝态氮施用后，在水田利用率一般只有30%-54%，在旱地里被作物吸收利用要好一些。
铵态氮肥施到水田里后，落在水下的泥层（氧化层）上，由于土壤微生物的作用，通过亚硝酸菌把铵态氮氧化成亚硝酸，再通过硝酸菌把亚硝酸氧化成硝酸。
水稻是嗜铵性作物，吸收铵态氮肥的能力较强。
亚硝酸和硝酸在水中成为带负电荷的离子，不仅很少被作物吸收，也不能被土壤吸附，很容易随水流失，或者渗透到泥土下层（还原层），由于缺氧而产生还原过程，经过反硝化细菌（或脱氮菌）的作用，将硝酸还原成亚硝酸，进而还原成气体状态的氮或氧化氮，往空气中跑掉了。
经过这样的“硝化-还原”过程，铵态氮肥的损失率一般达15%左右，高的则在40%以上，损失惊人。
硝态氮肥主要经流失和还原作用而损失。
尿素、石灰氮等酰铵态氮肥，本身不直接被作物吸收，它们在水中先转化为铵态氮，除被作物吸收一部分外，其余的也因发生上述“硝化作用”而损失，或随水流失。
植物营养学实验
实验一根系阳离子交换量的测定（淋洗法）根系是作物吸收养分的重要器官，作物根系阳离子代换量（Cation Exchange Content, CEC）的大小，大体上可反映根系吸收养分的强弱和多少，因此，测定根系阳离子代换量（CEC）对于了解作物吸收养分的能力与指导合理施肥具有一定的意义。
一、方法原理根系中的阳离子，在稀HCl中，能被H+代换出来，而根系所吸收的H+量与代换出来的阳离子量相等。
在洗去多余的HCl溶液后，用中性KCl溶液将H+代换出来，以KOH溶液滴定至pH 7.0，根据消耗KOH的浓度和用量，计算出阳离子代换量（以每1kg干根的厘摩尔数表示）。
二、操作步骤从田间选取具有代表性的植株若干（尽可能不要损坏根系），先用水冲洗根系，再放在筛子上置于水中轻轻振荡，至洗净为止，后再用蒸馏水冲洗数次，然后切去地上部分，置于30℃烘箱中烘干（一般烘8 h以上），将烘干根样取出磨细，过18~25号筛（0.7~1.0 mm），混合均匀，贮于广口瓶中备用。
称取烘干磨细的根样0.1000 g，放入180~250 mL烧杯中，先加几滴蒸馏水使根系湿润，避免以后操作时根浮在液面上，再加0.01 mol·L -1HCl 100 mL，搅拌5 min，待根样下沉后，将大部分盐酸连同根样倒入漏斗中过滤，然后用蒸馏水漂洗至无Cl-为止（用AgNO3检验）（一般用110~200 mL蒸馏水，少量多次即可洗至无Cl-）。
再用尖头玻棒将过滤纸中心穿孔，以100 mL KCl（事先调至pH 7.0）逐渐将过滤纸上的根样全部洗入原烧杯中，用pH计测定根-KCl 悬浮液pH值，然后加7~8 d酸碱混合指示剂，用0.01 mol·L -1 KOH滴定至兰绿色（保持30 s 不变），记下所消耗的0.01 mol·L -1 KOH 毫升数，并以此计算出根系的阳离子代换量（以每1kg干根的厘摩尔数表示）。
三、结果计算CEC（cmol·kg-1）=N KOH×V KOH×100 根样干重（g）四、注意事项1、过滤及漂洗时，溶液不超过漏斗的2/3处，并遵守“少量多次”的洗涤原则。
转氨酶、硝态氮、铵态氮等测定方法
六、氮含量〔硝酸盐、亚硝酸盐、游离氨基酸、铵态氮等〕的测定：〔2g〕样品提取液的提取: 称取新颖植物组织2g，参加15ml无离子水研磨成匀浆，置于45℃振荡机中摇动浸提〔或超声波〕lh后用5ml无离子水冲洗干净，然后离心或过滤(如含色素需用活性炭脱色)，滤液备用。
备注〔lg的经历〕：可溶性糖、可溶性蛋白质、VC等需要研磨提取的简单指标也可以使用此提取液按比例测定。
1硝态氮的测定：标准氮试剂：精称KNO3 0.9021g，溶于少量重蒸无离子水中，并定容至250ml，含N 量为500µgNO3一N／ml。
5％水杨酸一硫酸溶液：称取水杨酸5g，溶于100ml浓H2SO4(比重1．84)中，搅拌溶解后贮于棕色瓶内，冰箱中至多保存l周，最好现用现配。
2mol／L NaOH溶液：称取NaOH 80g放入500ml硬质烧杯中，参加重蒸无离子水200ml，溶解后定容至l000ml。
操作方法标准曲线制作取：50ml容量瓶6只(编号)，依次参加标准氮试剂5、l0、l5、20、25、30ml，用无离子水定容，那么成为50、100、l50、200、250、300 ug／ml 的氮系列标准溶液；再取干沽50ml三角瓶7只，分别装入上述系列溶液0．2ml，剩下的1只三角瓶参加无离水0.2ml(作为O 点)；然后分别参加5％水杨酸一硫酸溶液0.8ml，混匀静置20--30min(显色)；最后参加2mol／L NaOH溶液l9ml，混匀。
冷却后利用751分光光度计，于410nm下比色，记录光密度(OD)值；并以OD 值为纵座标，以标准氮(0、50、l00、150、200、250、300 ug)为横座标，绘制一条标准曲线(通过原点的直线)。
0.1ml滤液＋0.4ml 5％水杨酸一硫酸溶液，混匀静置20--30min(显色)；最后参加2mol／L NaOH溶液9.5ml，混匀。
冷却后利用751分光光度计，于410nm下比色，记录光密度(OD)值；结果计算按照公式A= CV1/(WV2) 计算。
植物铵态氮实验报告
一、实验目的1. 了解植物体内铵态氮的生理作用及其与植物生长的关系。
2. 掌握植物铵态氮含量的测定方法。
3. 通过实验，提高对植物营养生理学知识的理解和应用能力。
二、实验原理植物吸收氮素主要以铵态氮和硝态氮两种形式。
铵态氮是植物体内氮素代谢的重要形式，对植物生长和发育具有重要作用。
本实验采用苯酚-次氯酸钠法测定植物体内铵态氮含量。
苯酚-次氯酸钠法：在酸性条件下，苯酚与铵态氮反应生成苯酚-铵，苯酚-铵在碱性条件下与次氯酸钠反应生成黄色化合物，通过比色法测定黄色化合物的吸光度，从而计算出植物体内铵态氮含量。
三、实验材料1. 植物样品：小麦、玉米、大豆等。
2. 试剂：苯酚、次氯酸钠、盐酸、氢氧化钠等。
3. 仪器：电子天平、酸度计、分光光度计、研钵、移液管、试管等。
四、实验步骤1. 样品处理：将植物样品洗净、烘干、磨碎，过40目筛，准确称取0.5g（精确到0.0001g）样品置于50mL锥形瓶中。
2. 水解：向锥形瓶中加入5mL 0.1mol/L盐酸，充分振荡，使样品充分溶解。
3. 反应：向锥形瓶中加入2mL苯酚-次氯酸钠溶液，充分振荡，使样品与试剂充分反应。
4. 测定：用酸度计测定溶液pH值，调整至8.5，在分光光度计上测定黄色化合物的吸光度。
5. 计算铵态氮含量：根据标准曲线，计算出样品中铵态氮含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：以铵态氮浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：根据标准曲线，计算出样品中铵态氮含量。
3. 结果分析：比较不同植物样品的铵态氮含量，分析其与植物生长的关系。
六、实验结论1. 通过本实验，掌握了植物铵态氮含量的测定方法。
2. 实验结果表明，植物体内铵态氮含量与植物生长密切相关，不同植物品种对铵态氮的吸收和利用能力存在差异。
3. 本实验为进一步研究植物营养生理学提供了实验依据。
七、实验注意事项1. 实验过程中，注意溶液的pH值，确保反应条件适宜。
2. 称量样品时，注意精确度，避免误差。
铵态氮和硝态氮的营养特点
学习目标
1.掌握作物体内氮素的含量。 2.掌握作物氮的营养特点。 3.掌握氮素的吸收。
一、植物体内氮的质量分数和分布
1.质量分数
一般植物含氮量约占植物体干物重的0.3%-5%，而含量的多少与 植物种类、器官、发育阶段有关。含氮量多的是豆科作物，例如大豆 茎秆含氮嚣是2.49％；非豆科作物一般含氮量较少，例如禾本科作物 一般干物质含氮量在1％左右。作物的幼嫩器官和成熟的种子含蛋白质 多，含氮也多，而茎秆特别是衰老的茎秆含蛋白质少，含氮量也少， 例如小麦的籽粒含氮量为2．0％～2．5％，而茎秆含氮0．5％左右
有时小分子的有机态氮如蛋白质、氨基酸和酰胺态氮等也能被植 物吸收利用。
无机态：NH4+－N、NO3-－N（主要）
吸收的形态
有机态：NH2 －N、氨基酸、 （少量） 核酸等
（一）植物对硝态氮的吸收与同化
1. 吸收：植物主动吸收NO3-－N
植物吸收的氮素主要是铵态氮和硝态氮。在旱地农 田中，硝态氮是作物的主要氮源。由与土壤中的铵态 氮通过硝化作用可转变为硝态氮。所以，作物吸收的 硝态氮多于铵态氮。
4. 氮是酶的成分（酶本身是蛋白质）
5. 氮是多种维生素、植物激素、生物碱等的成分
（维生素B1、B2、B6、IAA、CK ）
供氮对马铃薯伤流液中细胞分裂素含量的影响
细胞分裂素含量（µmol） 天
连续供氮
连续不供氮
0
196
196
3
420
26
6
561
17
三、植物对氮的吸收与同化
植物吸收氮素的形态主要是无机态氮，即铵态氮和硝态氮。
结论：只要在环境中为铵态氮和硝态氮创造出各自所需要的 最适条件，它们在生理上是具有同等价值。
硝态氮和铵态氮
硝态氮和铵态氮
【原创实用版】
目录
1.硝态氮和铵态氮的定义和特点
2.硝态氮和铵态氮的转化关系
3.硝态氮和铵态氮对环境的影响
4.硝态氮和铵态氮的监测和管理
5.硝态氮和铵态氮在农业中的应用
正文
硝态氮和铵态氮是氮循环中的两种重要形态。
硝态氮指的是氮元素在硝酸根离子 (NO3-) 形态存在，而铵态氮指的是氮元素在铵离子 (NH4+) 形态存在。
硝态氮和铵态氮在环境中的转化关系十分复杂。
在自然环境中，硝态氮可以通过反硝化作用转化为铵态氮，也可以通过硝酸盐的还原作用转化为氮气。
而铵态氮在土壤中可以通过氨化作用转化为硝态氮，也可以通过硝酸盐的氧化作用转化为氮气。
硝态氮和铵态氮对环境的影响各不相同。
硝态氮是水体中的主要污染物之一，其过量存在会导致水体富营养化，从而影响水生生物的生存。
而铵态氮在土壤中是植物的养分来源，但是过量的铵态氮会导致土壤酸化，从而影响土壤的生态功能。
对于硝态氮和铵态氮的监测和管理，我国有严格的标准和方法。
对于水体中的硝态氮和铵态氮，我国采用化学方法进行监测，并且根据监测结果制定相应的水环境质量标准。
对于土壤中的硝态氮和铵态氮，我国采用土壤检测方法进行监测，并且根据监测结果制定相应的土壤环境质量标准。
硝态氮和铵态氮在农业中都有广泛的应用。
硝态氮和铵态氮都是植物
的养分来源，可以促进植物的生长。
在农业生产中，我们通常通过施用化肥的方式来补充硝态氮和铵态氮。
但是，过量的氮肥施用会导致硝态氮和铵态氮的过量积累，从而影响农业生产的可持续性。
硝态氮和铵态氮
硝态氮和铵态氮硝态氮和铵态氮是植物生长必需的两种氮素形式。
它们在植物生长过程中发挥着重要的作用，但它们的性质、作用以及在农业生产中的应用方式却有所不同。
一、硝态氮和铵态氮的定义及区别硝态氮，又称硝酸态氮，是指植物可吸收的硝酸盐形态的氮。
它主要来源于土壤中的硝酸盐矿物和有机物的分解。
硝态氮在土壤中移动性强，易被植物吸收，但同时也易流失。
铵态氮，又称氨基态氮，是指植物可吸收的氨基形态的氮。
它主要来源于土壤中的氨基酸和氨态氮。
铵态氮在土壤中移动性较差，但不易流失。
二、硝态氮的性质和作用硝态氮是一种快速作用的氮素形式，能迅速满足植物生长的需求。
硝态氮在土壤中容易被植物吸收，对提高植物的早期生长速度和叶面积有很好的效果。
此外，硝态氮还能促进植物对其他矿质元素的吸收。
三、铵态氮的性质和作用铵态氮是一种慢速作用的氮素形式，对植物的生长具有持久的促进作用。
铵态氮在土壤中不易流失，可以保证植物长期稳定的氮素供应。
此外，铵态氮还能提高植物的抗逆性，促进植物的生长。
四、硝态氮和铵态氮在农业生产中的应用在农业生产中，硝态氮和铵态氮的应用各有侧重。
硝态氮适用于作物生长初期，可以迅速提高作物生长速度，为高产打下基础。
铵态氮适用于作物生长中后期，可以保证作物稳定的氮素供应，提高作物品质。
五、如何合理施用硝态氮和铵态氮要实现硝态氮和铵态氮的合理施用，首先要了解不同作物的氮素需求特点。
对于需氮量大的作物，如水稻、小麦等，可以适当增加硝态氮和铵态氮的施用量。
其次，要掌握硝态氮和铵态氮的施用时机，一般在作物生长初期施用硝态氮，生长中后期施用铵态氮。
最后，要注意硝态氮和铵态氮的施用比例，避免过量施用导致环境污染。
总之，硝态氮和铵态氮在植物生长过程中起着重要作用。
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高级植物生理实验报告
植物营养
农学院
农药学
东保柱2013202054
2013年12月27日
实验1 植物组织铵态氮含量的测定（茚三酮比色法）
一、实验原理
植物吸收的氮主要是氨态氮和硝态氮，后者经过还原过程形成氨，前者经同化后形成谷氨酰胺和谷氨酸，然后形成其他氨基酸和蛋白质。
测定氨态氮的方法有多种，本实验为改良的茚三酮比色法。
α-氨基酸与水合茚三酮溶液一起加热，经氧化脱氨变成相应的α-酮酸，酮酸进一步脱羧变成醛，水合茚三酮则被还原，在弱酸环境中，还原型茚三酮，氨和另一分子水合茚三酮反应，缩合生成蓝紫色物质。
根据蓝紫色的深浅，在580nm 波长下测定吸光值。
本实验中在茚三酮试剂中添加乙二醇并补加正丁醇和丙醇，可以克服茚三酮的不稳定性。
二、仪器设备
研钵、烧杯、漏斗、量筒、具塞试管、三角瓶、容量瓶、移液管、天平、沸水浴锅、可见分光光度计
三、试剂
1. 10%醋酸(100mL)
2. 1% 抗坏血酸（100mL）
3. 5μg/mL 亮氨酸或丙氨酸溶液（0.005g定容至1000mL）
4. pH
5.4醋酸缓冲液：8.8mL 0.2mol/L 醋酸（冰醋酸11.55mL稀释至1000mL）加41.2mL 0.2mol/L醋酸钠（醋酸钠1
6.4g或三水醋酸钠2
7.2g 配成1000mL）。
5. 水合茚三酮试剂：1.1g茚三酮放到烧杯中，加入15mL正丙醇，摇匀，溶解，后加入30ml正丁醇和60ml乙二醇，混匀，再加9mL pH5.4醋酸缓冲液，混匀。
保存于棕色瓶中，冰箱保存，适用期限10天。
四、操作步骤
1. 标准曲线的绘制
以下表所示量从5μg/mL 亮氨酸或丙氨酸溶液中分别取溶液并在每个试管中加蒸馏水至2mL，对照加2mL 蒸馏水，后在各试管中加入3mL 水合茚三
酮试剂和0.1mL 1%抗坏血酸，摇匀。
盖上试管塞，于沸水中加热15分钟，取出后搅拌冷却15分钟。
冷却后的有色溶液中加无水乙醇至10mL，在波长580nm 处测吸光值，以铵态氮浓度（μg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线。
试管号 1 2 3 4 5 6 7
试剂（mL） 0 0.2 0.4 0.8 1.2 1.6 1.8
铵态氮浓度 0 0.5 1 2 3 4 5 （μg/mL）
2.称取0.5g 新鲜植物材料，放入研钵中，加入5mL 10%醋酸，研磨后以蒸馏水
稀释至100mL ，混匀，通过滤纸过滤，弃去最先滤下的一部分滤液后过滤到100mL三角瓶中。
3.从剩下的滤液中取2mL 放入试管中，加3mL 水合茚三酮试剂和0.1mL 1%抗
坏血酸，摇匀。
盖上试管塞，于沸水中加热15分钟。
同时将盛有对照溶液（提取液用蒸馏水代替）的试管加热。
4.取出后搅拌冷却15分钟。
加热形成的红色茚三酮试剂被氧氧化而褪色，茚三
酮与氨基酸形成的蓝紫色反应产物仍然存留并变得更加鲜明。
冷却后的有色溶液中加无水乙醇至10mL ，混匀。
在波长580nm 处测光密度值，根据标准曲线查得数值代入以下公式计算铵态氮含量。
样品c值:1.436、1.435、1.436、1.435
（0.1×10×C）
X（100g 样品中的氨态氮毫克数）= ×100
（2×n）
C：比色液中氨态氮浓度（μg/mL）
10：比色液体积（mL）
n：样品重量（g）
100：分析溶液总体积（mL）
0.1：μg换算成mg 并折算成100g 物质中含量的换算系数。
实验2 植物体内硝态氮含量的测定
一、原理
在浓酸条件下，ＮＯ
３
－与水杨酸反应，生成硝基水杨酸。
生成的硝基水杨酸在碱性条件下（ｐＨ１２）呈黄色，最大吸收峰在波长４１０ｎｍ处，可直接比色测定。
二、仪器和设备
分光光度计、天平、刻度试管、移液器、移液管、容量瓶、漏斗、水浴锅、滤纸
三、试剂
1. 500mg/L ＮＯ
３－-N标准溶液：称取KNO
3
0.3611g溶于蒸馏水中，定容至100mL。
2. 5% 水杨酸-硫酸溶液：称取5g水杨酸溶于100mL浓硫酸中，搅拌溶解后，贮藏于棕色瓶中。
3.8% NaOH溶液：8.695g NaOH溶于100mL蒸馏水中。
四、方法
1. 标准曲线的制作
（1）吸取500mg/L ＮＯ
３
－-N标准溶液0, 1, 2, 3, 4, 6, 8mL分别放入50mL 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，使之成为0、10、20、30、40、60、80mg/L的系列标准溶液。
（2）吸取上述系列标准溶液0.1mL，分别放入刻度试管中，以0.1mL蒸馏水代替标准溶液作空白。
再分别加入0.4mL 5%水杨酸-硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20分钟后，再加入8% NaOH溶液9.5mL，摇匀冷却至室温。
显色液总体积为10mL。
（3）以空白作参比，在410nm波长下测定光密度。
以ＮＯ
３
－-N浓度为横坐标，光密度值为纵坐标，绘制标准曲线并计算出回归方程。
2. 硝酸盐的测定
（1）样品液的制备：取2g植物材料切碎后放入刻度试管中，加入10mL蒸
馏水，封口。
置于沸水浴中提取30分钟，冷却，将提取液过滤到25mL容量瓶中，并反复冲洗残渣，最后定容至刻度。
（2）样品液的测定：吸取样品液0.1mL分别放入刻度试管中，加入5%水杨酸-硫酸溶液0.4mL，混匀后置室温下20分钟，再慢慢加入9.5mL 8% NaOH溶液，待冷却至室温后以空白作对照，在410nm波长下测定光密度值。
在标准曲线上查
－-N浓度，再用以下公式计算其含量。
得或用回归方程计算出ＮＯ
３
－-N含量（mg/g）=（D×样品液总量）/样品鲜重
ＮＯ
３
－-N浓度（mg/L）
D：标准曲线上查得ＮＯ
３
实验数据统计
实验四植物营养
4.1植物体内硝态氮含量测定
硝酸根离子含量和吸光值标准曲线如下所示：
如图所示：标准曲线相关性系数为0.9344，线性关系良好
样品硝态氮含量两重复分别为：1.435、1.436，平均值为1.4355.则每100g鲜马铃薯中硝态氮含量为1.4355mg/100g
4.2 植物体内铵态氮含量测定
根据铵根离子浓度和吸光值得到的标准曲线如下：。