实验四-柠檬酸含量的测定
柠檬总酸含量的测定
综合性、设计性实验报告(本科学生)姓名：毛修林学号：2010021141专业：化学班级：1班实验课程名称：《分析化学实验》指导教师及职称：郭红老师（高级实验师）开课学期：2011 至2012 学年上学期上课时间：2011 年12 月 6 日资源环境学院编印一、实验设计方案：实验序号及名称：柠檬中总酸度的测定实验时间：2011年12月6日小组合作：是小组号：一成员：毛修林、鲁静宁、杨全、李丽霞(一)．【实验目的】：1.学会水果样品的预处理方法。
2.掌握酸碱滴定法测定水果样品中总酸度的原理和方法。
3.掌握强碱滴定弱酸的滴定过程，突跃范围及指示剂的选择原理。
4.柠檬总酸含量的测定。
5.规范记录数据并进行数据处理。
（二）．【主要试剂和仪器】：1.试剂：KHP基准试剂，固体NaOH，酚酞指示剂，新鲜柠檬2个。
2.仪器：榨汁机，50.00mL碱式滴定管，25 .00mL移液管,250 mL锥形瓶3只，电子天平，250 mL容量瓶2只。
(三）．【实验原理】：柠檬主要含有柠檬酸，其结构式为：，各级解离常数分别为：K a1=7.4×10-4，K a2=1.7×10-5，K a3=4.0×10-7。
由于柠檬酸各相邻解离常数之间相差不大，故不能分步滴定，但由于最后一级解离常数并不小，因此可以用NaOH标准溶液作滴定剂，按多元酸一次进行滴定。
反应式为：HOOCCH2C(OH)(COOH)CH2COOH+3NaOH＝NaOOCCH2C(OH)(COONa)CH2COONa+3H2O。
反应产物为弱酸弱碱盐，滴定范围在碱性范围内，因此可选用酚酞作指示剂，滴定至溶液由无色变为微红色即达到终点，再根据消耗NaOH标准溶液的体积计算柠檬总酸含量。
计算式为：总算度（g/100g）=(K(CV)NaOH×100)/(V试液×m试样/250)（其中：K=0.064）。
（四）．【实验内容、步骤】：1.试样预处理：取柠檬试样去皮、去柄、去核，切成块状，置于搅拌机中捣碎并混匀，称取50g捣碎试样充分抽滤，将滤液在75～80℃水浴中加热30分钟，冷却后再转入容量瓶中加蒸馏水稀释为250mL备用。
柠檬酸(citric acid, CA)含量测定试剂盒说明书
货号：MS2101 规格：100管/96样柠檬酸（citric acid, CA）含量测定试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：CA是生物体内常见的有机酸，是重要的食品风味物质。
此外，CA是三羧酸循环第一步反应的产物。
测定原理：酸性条件下，柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+，在545nm处有特征吸收峰；通过测定545nm吸光值的增加，即可计算出样品中柠檬酸含量。
自备实验用品及仪器：低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配置：试剂一：液体×2瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体×1管，－20℃保存。
试剂四：粉剂×1管，室温保存。
临用前配制，加入2mL试剂一，充分溶解。
试剂五：液体×1管，4℃避光保存。
标准品：液体×1管，250μmol/L柠檬酸标准液，4℃保存。
样品中柠檬酸提取：1.液体样品中柠檬酸提取：取0.1mL液体加试剂一0.9mL，充分混匀，11000g，4℃离心10min，取上清液，待测。
2.组织中柠檬酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。
11000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
3.线粒体中柠檬酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，600g/min，4℃离心5min；取上清至另一EP管中，11000g，4℃离心10min，弃上清（此上清液可用于细胞质CA含量测定）；向沉淀中加试剂二200μl，以及试剂三2μl，充分悬浮溶解，11000g，4℃离心10min，取上清液，待测。
4.细菌、真菌中：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；11000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
玉米淀粉发酵实验报告
一、实验目的1. 掌握玉米淀粉发酵的基本原理和操作方法；2. 了解发酵过程中微生物的生长规律和代谢产物；3. 培养实验操作技能，提高对发酵工艺的认识。
二、实验原理玉米淀粉是一种重要的碳水化合物，在微生物的作用下，可以转化为酒精、乳酸等代谢产物。
本实验采用黑曲霉作为发酵菌种，利用其发酵玉米淀粉产生柠檬酸。
三、实验材料1. 实验仪器：锥形瓶、酒精灯、烧杯、量筒、玻璃棒、温度计、pH计、过滤装置等；2. 实验试剂：玉米淀粉、黑曲霉、蒸馏水、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钠、氢氧化钠等；3. 实验培养基：玉米淀粉培养基、葡萄糖培养基、氯化钠培养基等。
四、实验步骤1. 准备玉米淀粉培养基：称取100g玉米淀粉，加入1000mL蒸馏水，搅拌均匀，煮沸5分钟，待冷却至室温后，加入2g氯化钠、1g磷酸二氢钠，调pH值为6.0。
2. 制备黑曲霉菌悬液：将黑曲霉接种于葡萄糖培养基中，在28℃、180r/min的条件下培养24小时，取出菌液，用无菌生理盐水洗涤2次，制成菌悬液。
3. 接种：将黑曲霉菌悬液按1%的比例接入玉米淀粉培养基中，充分搅拌均匀。
4. 发酵：将接种后的培养基置于28℃、180r/min的条件下发酵48小时。
5. 柠檬酸提取：发酵结束后，将培养基过滤，收集滤液，加入适量的氢氧化钠，调节pH值为8.0，再加入适量的活性炭脱色，过滤后得到柠檬酸溶液。
6. 柠檬酸含量测定：采用滴定法测定柠檬酸溶液的含量。
五、实验结果与分析1. 发酵过程中，培养基pH值逐渐降低，说明黑曲霉在发酵过程中产生酸性代谢产物。
2. 柠檬酸含量测定结果显示，发酵液中含有一定量的柠檬酸。
3. 通过实验，成功地将玉米淀粉转化为柠檬酸，为玉米淀粉的深加工提供了新的途径。
六、实验总结1. 本实验成功地将玉米淀粉发酵转化为柠檬酸，为玉米淀粉的深加工提供了新的思路。
2. 通过实验，掌握了玉米淀粉发酵的基本原理和操作方法，了解了发酵过程中微生物的生长规律和代谢产物。
高效液相色谱法测定柠檬酸的含量
高效液相色谱法测定柠檬酸的含量
高效液相色谱法是一种常用的化学分析方法，用于分离和测定复杂样品中的各种组分。
以下是使用高效液相色谱法测定柠檬酸含量的基本步骤：
1. 样品处理：根据样品的性质，选择适当的提取和纯化方法，以从样品中分离出柠檬酸。
2. 配置标准溶液：准确称取一定量的柠檬酸标准品，用适当的溶剂溶解，配置成一定浓度的标准溶液。
3. 液相色谱分析条件设置：选择合适的色谱柱、流动相、流速等参数，确保柠檬酸的有效分离。
4. 样品进样：将处理后的样品溶液注入液相色谱仪，进行分离分析。
5. 数据处理：通过与标准品对比，确定柠檬酸的峰，并使用相应的计算公式计算柠檬酸的含量。
6. 重复实验：为了确保数据的准确性和可靠性，通常需要进行多次重复实验。
需要注意的是，以上步骤仅为一般性指导，实际操作中可能需要根据具体情况进行调整。
此外，操作人员应具备相关的实验技能和理论知识，并严格遵守实验室安全规定。
果汁饮料中总酸度的测定实验报告
果汁饮料中总酸度的测定实验报告一、实验目的1、掌握果汁饮料中总酸度的测定原理和方法。
2、学会使用酸碱滴定法测定果汁饮料中的总酸度。
3、熟练掌握滴定操作和数据处理。
二、实验原理果汁饮料中的总酸度通常以所含主要有机酸（如柠檬酸、苹果酸、酒石酸等）的含量来表示。
一般采用酸碱滴定法进行测定，以酚酞为指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定至溶液呈微红色且 30 秒内不褪色为终点。
根据消耗的氢氧化钠标准溶液的体积和浓度，计算出果汁饮料中总酸度的含量。
三、实验试剂和仪器1、试剂氢氧化钠（分析纯）邻苯二甲酸氢钾（基准试剂）酚酞指示剂（1%乙醇溶液）2、仪器电子天平碱式滴定管（50ml）移液管（25ml）容量瓶（250ml）锥形瓶（250ml）玻璃棒烧杯（500ml、100ml）四、实验步骤1、氢氧化钠标准溶液的配制与标定配制：称取 4g 氢氧化钠固体，加适量蒸馏水溶解，冷却后转移至1000ml 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。
标定：准确称取 04 06g 邻苯二甲酸氢钾基准试剂于 250ml 锥形瓶中，加 50ml 蒸馏水溶解，滴加 2 3 滴酚酞指示剂，用待标定的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈微红色且 30 秒内不褪色，记录消耗氢氧化钠溶液的体积。
平行标定 3 次，计算氢氧化钠标准溶液的浓度。
2、样品处理准确吸取 25ml 果汁饮料样品于 250ml 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。
3、滴定用移液管吸取 25ml 稀释后的果汁饮料样品于 250ml 锥形瓶中，加50ml 蒸馏水，滴加 2 3 滴酚酞指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定至溶液呈微红色且 30 秒内不褪色，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积。
平行滴定 3 次。
五、实验数据记录与处理1、氢氧化钠标准溶液的标定｜序号｜邻苯二甲酸氢钾质量（g）｜消耗氢氧化钠溶液体积（ml）｜氢氧化钠标准溶液浓度（mol/L）｜平均浓度（mol/L）｜｜｜｜｜｜｜｜ 1 ｜＿____ ｜＿____ ｜＿____ ｜｜｜ 2 ｜＿____ ｜＿____ ｜＿____ ｜｜｜ 3 ｜＿____ ｜＿____ ｜＿____ ｜｜计算公式：＄C_{NaOH}＝＼frac{m}｛V\times02042}＄其中，＄C_{NaOH}＄为氢氧化钠标准溶液的浓度（mol/L），＄m$为邻苯二甲酸氢钾的质量（g），＄V$为消耗氢氧化钠溶液的体积（ml），02042 为邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量（g/mol）。
柠檬中柠檬酸的含量测定
柠檬中柠檬酸含量的测定一、实验目的1、学会水果样品的预处理方法2、掌握用酸碱滴定法测水果样品的总酸度原理和方法3、能配置实验所需的标准溶液4、规范记录数据和数据处理二、实验原理1、NaOH标准溶液的标定NaOH易吸收水分及空气中的二氧化碳，因此，不能用直接法配制标准溶液。
需要先配成近似的浓度的溶液再标定，标定使用邻苯二甲酸氢钾为基准物进行标定。
以酚酞为指示剂，当滴定终点呈浅红色，半分钟内不退色，反应如下：KHC8H4O4+NaOH=KNaC8H4O4+ H2O2、柠檬中柠檬酸的测定原理：根据酸碱中和原理，用碱标准溶液滴定试样液中的酸时，以酚酞为指示剂。
当滴定至终点溶液呈浅红色，且30s不褪色时，根据滴定时消耗的标准NaOH溶液的体积，可算出试样中的总酸度。
其反应式为：HOOCCH2C(OH)(COOH)CH2COOH+3NaOH———NaOOCCH2C(OH)(COONa)CH2COONa+3H2O三、实验用品榨汁机、小刀、碱式滴定管、试剂瓶、锥形瓶、移液管、量筒/烧杯、容量瓶、胶头滴管、洗耳球、洗瓶、水浴锅、铁架台、电子天平、玻璃棒、滤纸、0.1000mol/LNaOH溶液、邻苯二甲酸氢钾、酚酞指示剂、柠檬式样、蒸馏水、四、实验步骤1、0.1000mol/LNaOH标准溶液的配制和标定（1）称取固体NaOH约2.0g放置在烧杯中，先加入100ml蒸馏水将其溶解，再转移至试剂瓶中加水稀释至500ml，混匀，待标定。
（2）用减量法准确称取0.4～0.5g邻苯二甲酸氢钾3份，分别放入250ml锥形瓶中，加25mL 蒸馏水溶解。
（3）然后加1-2滴酚酞指示剂，用标定的NaOH 溶液滴定至微红色，且半分钟不褪色即为终点，记录消耗NaOH 溶液的体积。
2、试样处理：取柠檬若干个，去皮、去柄、去核，切成块状，置于榨汁机中榨汁。
称取榨得的柠檬汁20g （称准至小数点后两位）于洁净干燥的小烧杯中，用适量的蒸馏水定量地将果汁样洗人250mL 容量瓶中，定容，摇匀，备用。
总酸的测定(滴定法)
总酸的测定（滴定法）一、实验目的：掌握用标准碱液滴定园艺产品中总酸度的方法。
二、实验原理果汁具有酸性反应，这些反应取决于游离态的酸以及酸式盐存在的数量。
总酸度包括未解离酸的浓度和已解离酸的浓度。
酸的浓度以摩尔浓度表示时，称为总酸度。
含量用滴定法测定。
果蔬中含有各种有机酸，主要有苹果酸、柠檬酸、酒石酸、草酸……。
果蔬种类不同，含有机酸的种类和数量也不同，园艺产品中酸的测定是根据酸碱中和的原理，即用标定的氢氧化钠溶液进行滴定。
三、材料、仪器与试剂（一）材料：苹果、橙汁等（二）仪器：碱式滴定管（50ml）、容量瓶（100ml）、容量瓶（250ml）、移液管（10ml）、烧杯（100ml）、研钵或组织捣碎机、天平、漏斗、滤纸等。
（三）试剂1．0.1mol/L氢氧化钠：称0.4g氢氧化钠定容至100ml。
2．1%酚酞指示剂：称1.0g酚酞，加入100ml 90%的乙醇溶解。
四、操作步骤1.固体样品⑴称取20-25g苹果放入研钵中捣碎⑵加入蒸馏水转入250ml的容量瓶中⑶定容⑷过滤⑸吸取滤液50ml放入锥形瓶中⑹加入2—3滴酚酞⑺0.1mol/L氢氧化钠滴定⑻记录消耗氢氧化钠的体积（重复3次）⑼计算2、液体样品⑴吸取50ml橙汁放入250ml的容量瓶中⑵定容⑶吸取样液50ml放入锥形瓶中⑷加入2—3滴酚酞⑸0.1mol/L氢氧化钠滴定⑹记录消耗氢氧化钠的体积（重复3次）⑺计算五、计算V C×N×折算系数总酸度（%）= ——×————————×100W V1式中：V——样品稀释总体积（ml）V1——滴定时取样液体积C——消耗氢氧化钠标准液毫升数N——氢氧化钠标准液摩尔浓度W——样品重量（g）折算系数：即不同有机酸的毫摩尔质量（g/mmol），园艺产品中的总酸度往往根据所含酸的不同，而取其中一种主要有机酸计量。
园艺产品中常见的有机酸以及其毫摩尔质量折算系数加下：苹果酸——0.067（苹果、梨、桃、杏、李子、番茄、莴苣）醋酸——0.060（蔬菜罐头）酒石酸——0.075（葡萄）柠檬酸——0.070（柑橘类）。
化学物质的含量测定
化学物质的含量测定在化学实验和工业生产中，准确测定化学物质的含量是非常重要的。
不同的化学物质有不同的含量测定方法，下面将介绍几种常见的含量测定方法。
一、滴定法滴定法是一种常用的化学分析方法，用于测定溶液中某种物质的含量。
其原理是通过加入一种已知浓度的试剂，使试剂与待测物质反应，达到等量点（滴定终点），从而计算出待测物质的含量。
例如，我们可以使用盐酸溶液来测定饮料中的柠檬酸含量。
首先，我们需要将待测饮料与盐酸溶液混合，加入酚酞指示剂作为指示剂。
当溶液由无色变为粉红色时，表明反应已经达到等量点，这时记录下所加入的盐酸溶液的体积，就可以计算出柠檬酸的含量。
二、重量法重量法是一种直接测定物质质量的方法，适用于不溶于溶液的固体物质。
通过称量待测物质和标准物质的质量，然后根据它们之间的摩尔比例计算出待测物质的含量。
举个例子，我们可以使用重量法来测定硫酸铜中铜的含量。
首先，我们需要将待测硫酸铜样品称为已知质量的称量瓶中，然后加入过量的锌粉，使其与硫酸铜反应生成铜，在反应结束后，将生成的铜沉淀过滤、洗涤并干燥，最后称量铜的质量，即可计算出硫酸铜中铜的含量。
三、分光光度法分光光度法是一种利用物质对特定波长的光吸收或发射特性进行分析的方法。
通过测量光的透射或吸收强度，可以确定物质的浓度。
例如，我们可以使用分光光度法来测定酒精饮料中的乙醇含量。
首先，我们需要将待测酒精饮料样品稀释，并使用分光光度计测量在特定波长下的光吸收。
然后，利用已知浓度的乙醇标准溶液构建标准曲线，根据待测样品的吸光度值，可以计算出乙醇的含量。
四、气相色谱法气相色谱法是一种广泛应用于有机物分析的方法，特别适用于挥发性、易揮发或气态的化合物。
通过在气相色谱仪中，利用物质在固定相和流动相中的分配系数差异进行分离和检测。
举个例子，我们可以使用气相色谱法来测定食品中的残留农药含量。
首先，将待测食品样品提取并转化为气态化合物，然后将气态化合物导入气相色谱仪中进行分离和检测。
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实验四 柠檬酸含量的测定
实验目的
1．掌握配制和标定NaOH 标准溶液的方法。
2．进一步熟练滴定管的操作方法。
3．掌握柠檬酸含量测定的原理和方法。
主要试剂和仪器
仪器：4F 滴定管；锥形瓶；容量瓶；移液管（25mL ）；烧杯；洗瓶。
试剂：邻苯二甲酸氢钾（基准物质，100-1250C 干燥1小时，然后放入干燥器内冷却后备用）；NaOH 固体；柠檬酸试样；0.2%酚酞乙醇溶液。
实验原理
大多数有机酸是固体弱酸，如果有机酸能溶于水，且解离常数Ka ≥10-7，可称取一定量的试样，溶于水后用NaOH 标准溶液滴定，滴定突跃在弱碱性范围内，常选用酚酞为指示剂，滴定至溶液由无色变为微红色即为终点。
根据NaOH 标准溶液的浓度c 和滴定时所消耗的体积V 及称取有机酸的质量，计算有机酸的含量。
n n 1
(H A)(H A)100%1000
c V M n m ω⨯⨯=⨯⨯样
有机酸试样通常有柠檬酸，草酸, 酒石酸, 乙酰水杨酸, 苯甲酸等。
滴定产物是强碱弱酸盐,滴定突跃在碱性范围内,可选用酚酞为指示剂。
用NaOH 标准溶液滴定至溶液呈粉红色(30s 不褪色)为终点。
实验步骤
1．0.10 mol ·L -1 NaOH 溶液的配制及标定 0.10 mol ·L -1 NaOH 溶液的配制同实验一。
准确称取0.4-0.6 g 邻苯二甲酸氢钾，置于250 mL 锥形瓶中，加入20-30 mL
水，微热使其完全溶解。
待溶液冷却后，加入2-3 滴0.2%酚酞指示剂，用待标定的NaOH溶液滴定至溶液呈微红色，半分钟内不褪色，即为终点（如果较长时间微红色慢慢褪去，是由于溶液吸收了空气中的二氧化碳所致），记录所消耗NaOH溶液的体积。
平行测定3次。
2.柠檬酸试样含量的测定
用分析天平采用差减法准确称取柠檬酸试样约 1.5g，置于小烧杯中，加入适量水溶解，定量转入250mL容量瓶中，用水稀至刻度，摇匀。
用25mL移液管移取上述试液于250mL锥形瓶中，加入酚酞指示剂1～2滴，用NaOH标准溶液滴至溶液呈微红色，保持30秒不褪色，即为终点。
记下所消耗NaOH溶液体积，计算柠檬酸质量分数。
如此平行测定3次，相关数据填入表2中。
实验数据记录及处理
写出有关公式，将实验数据和计算结果填入表1和2。
根据记录的实验数据分别计算出NaOH溶液的准确浓度和柠檬酸的质量分数，并计算三次测定结果的相对标准偏差。
对标定结果要求相对标准偏差小于0.2%，对测定结果要求相对标准偏差小于0.3%。
表1 邻苯二甲酸氢钾标定氢氧化钠
表2 柠檬酸质量分数
计算公式：
1
(NaOH)(NaOH)(HnA)
()25.001000
250.00
S c V M n HnA m ω⋅⋅=
⋅⨯ n=3为柠檬酸H 个数；M (H n A)= 210.14 g / mol 为有机酸的摩尔质量；m s 为有机酸试样（柠檬酸）的称样量。
思考题
1. 为什么试样要先称取1.5g ，稀释定容后又移取25 ml(十分之一)滴定，能否直接称取0.15g 于锥形瓶中，直接用NaOH 标准溶液滴定?
2. 本次实验中用的试样是一水合柠檬酸，如果部分失水，测定结果偏高还是偏低？。