第17章 高效液相色谱法
分析化学前八章课后习题答案(第六版,李发美)
第二章误差和分析数据处理1．指出下列各种误差是系统误差还是偶然误差？如果是系统误差，请区别方法误差、仪器和试剂误差或操作误差，并给出它们的减免办法。
(1)砝码受腐蚀；(2)天平的两臂不等长；(3)容量瓶与移液管未经校准；(4)在重量分析中，试样的非被测组分被共沉淀；(5)试剂含被测组分；(6)试样在称量过程中吸湿；(7)化学计量点不在指示剂的变色范围内；(8)读取滴定管读数时，最后一位数字估计不准；(9)在分光光度法测定中，波长指示器所示波长与实际波长不符。
(10)在HPLC测定中，待测组分峰与相邻杂质峰部分重叠。
答：（1）系统误差；校准砝码。
（2）系统误差；校准仪器。
（3）系统误差；校准仪器。
（4）系统误差；控制条件扣除共沉淀。
（5）系统误差；扣除试剂空白或将试剂进一步提纯。
（6）系统误差；在110℃左右干燥后称重。
（7）系统误差；重新选择指示剂。
（8）偶然误差；最后一位是估计值，因而估计不准产生偶然误差。
（9）系统误差；校准仪器。
（10）系统误差；重新选择分析条件。
2．表示样本精密度的统计量有哪些? 与平均偏差相比，标准偏差能更好地表示一组数据的离散程度，为什么？3．说明误差与偏差、准确度与精密度的区别和联系。
4．什么叫误差传递？为什么在测量过程中要尽量避免大误差环节？5．何谓t分布？它与正态分布有何关系？6．在进行有限量实验数据的统计检验时，如何正确选择置信水平?7．为什么统计检验的正确顺序是：先进行可疑数据的取舍，再进行F检验，在F检验通过后，才能进行t检验?8．说明双侧检验与单侧检验的区别，什么情况用前者或后者?9．何谓线性回归？相关系数的意义是什么？10．进行下述运算，并给出适当位数的有效数字。
(1)41016.614.1510.452.2⨯⨯⨯ (2)0001120.010.514.2101.3⨯⨯ (3)002034.0512.21003.40.514⨯⨯⨯- (4)050.11012.21.80324.02⨯⨯⨯(5)5462.31050.78940.142.551.22856.23-⨯⨯-+⨯(6) pH = 2.10 , 求[H +] = ?（2.54×10?3；2.98×106；4.02；53.0；3.144；7.9×10?3mol/L ） 11．两人测定同一标准试样，各得一组数据的偏差如下： (1)0.3 －0.2 －0.4 0.2 0.1 0.4 0.0 －0.3 0.2 －0.3 (2)0.10.1－0.60.2－0.1－0.20.5－0.20.30.1① 求两组数据的平均偏差和标准偏差；② 为什么两组数据计算出的平均偏差相等，而标准偏差不等？③ 哪组数据的精密度高？ （①1d ＝0.24，2d ＝0.24，S l ＝0.28，S 2＝0.31。
色谱分析知到章节答案智慧树2023年齐齐哈尔大学
色谱分析知到章节测试答案智慧树2023年最新齐齐哈尔大学第一章测试1.色谱的分离的核心部分是色谱柱。
参考答案:对2.色谱分析法只能测定有色物质。
参考答案:错3.吸附色谱是利用吸附剂对样品的吸附性能不同达到分离。
参考答案:对4.气固色谱和液固色谱都是吸附色谱。
参考答案:对5.基于组份在两项之间溶解或吸附能力的不同，经过反复多次的平衡，使性质有微小差别的组份分离。
（）参考答案:对第二章测试1.衡量色谱柱选择性的指标是（）。
参考答案:相对保留值2.衡量色谱柱柱效的指标是（）。
参考答案:理论塔板数3.下列途径（）不能提高柱效。
参考答案:将试样进行预分离4.在一定柱长条件下，某一组分色谱峰的宽窄主要取决于组分在色谱柱中的（）。
参考答案:扩散速率5.色谱柱温升高的结果是（）。
参考答案:组分的保留体积减小6.组分的分配系数越大，表示其保留时间越长。
（）参考答案:对7.在载气流速比较高时，分子扩散成为影响柱效的主要因素。
（）参考答案:错8.分离温度越高，保留时间缩短，峰面积不变。
（）参考答案:对9.某试样的色谱图上出现三个色谱峰，该试样中最多有三个组分。
（）参考答案:错10.色谱柱理论塔板数n与保留时间的平方成正比，组分的保留时间越长，色谱柱理论塔板数越大，分离效率越高。
（）参考答案:错第三章测试1.根据色谱峰的面积可以进行定性和定量分析。
( )参考答案:错2.采用内标法进行高效液相色谱法定量时，需知校正因子。
参考答案:对3.用色谱法进行定量时，要求混合物中每—个组分都能出峰的方法是( )。
参考答案:归一化法4.色谱分析中，某试样中有不出峰组分，不能采用下列哪种定量方法? ( )参考答案:归一化法5.色谱外标法的准确性较高，无需仪器稳定性高。
（）参考答案:错第四章测试1.检测器性能好坏将对组分分离产生直接影响（）参考答案:错2.对所有物质均有响应的气相色谱检测器是( )。
参考答案:热导检测器3.热导池检测器是一种质量型检测器（）参考答案:错4.为了用气相色谱法测定样品中的微量水分，宜选用的检测器是（）。
分析化学实验智慧树知到课后章节答案2023年下温州医科大学
分析化学实验智慧树知到课后章节答案2023年下温州医科大学温州医科大学第一章测试1.为使天平读数从0.000g切换为0.0000g，应采取下列哪个步骤（）A:长按cal/1/10键 B:长按ON/OFF键 C:短按cal/1/10键 D:短按ON/OFF键答案:短按cal/1/10键2.称量在空气中性质不稳定的试样时，应采用下列哪种称量方法（）A:选项均可 B:差减法 C:直接法 D:定量法答案:差减法3.电子天平的水平泡如果偏向右边，说明右边低了，要升高右边的脚或降低左边的脚。
（）A:错 B:对答案:错4.用容量瓶准确配制溶液时，最后的定容应该放置在水平的桌面上完成。
（）A:对 B:错答案:错5.分析天平平衡读数时，必须关好天平的左右两侧边门。
（）A:对 B:错答案:对第二章测试1.移液管在取液前需要用待取液润洗两到三次。
（）A:对 B:错答案:对2.在用移液管移取液体时，当液面升高到刻度线以上时，立即用食指按住移液管上口，将移液管提起离开液面，先用滤纸擦掉移液管外壁上的液膜，然后将移液管的末端靠在容器内壁上，调好液面高度。
（）A:错 B:对答案:对3.使用吸量管分别移取不同体积的同一溶液时，应尽量使用同一支吸量管。
（）A:对 B:错答案:对4.在平行实验中，第一份样品滴定完成后，如果滴定管中的标准溶液还留下一半以上，可以继续用来滴定第二份样品，以免浪费试剂。
（）A:对 B:错答案:错5.盐酸滴定氢氧化钠，到终点时消耗的滴定剂的体积，记录正确的是（）A:24.00 mL B:24 mL C:24.0 mL D:24.0000 mL答案:24.00 mL第三章测试1.紫外分光光度计不需要经常鉴定的项目是（）A:杂散光 B:波长的准确度 C:pH对测定的影响 D:吸收度准确性答案:pH对测定的影响2.紫外分光光度计的定量原理（）A:摩尔吸收系数表示 B:透射光比率 C:与入射光强度、吸收介质厚度与浓度成正比 D:透射光除以入射光答案:与入射光强度、吸收介质厚度与浓度成正比3.使用紫外分光光度计测定时，取吸收池，手指应拿毛玻璃面的两侧，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净。
第十七章-气相色谱法..
相对极性Px分类：
β,β ' -氧二丙腈：P =100
角鲨烷：
P =0
其余：Px=0---100 分为5级 0—20 0或1 非和弱极性
角鲨烷、甲基硅 橡胶
21—40 2 中等极性 DNP、OV-17
41—60 3 中等极性 氰基硅橡胶
61—80 4 极性
二、实验条件的选择性
R(
n 4
)
r2r,12,1 1
k2k2 1
（a） （ b） （c）
a：柱效项 b：柱选择性项 c：柱容量项
1.提高r21和k
（1） r21 反映了固定液的选择性， r21值越大（即固定液选 择性 好），分离度就越大，分离越好。若r21 =1 ，则 R = 0 ，两组分不能分离。
1. 填充柱
2. 毛细管柱(开管柱)
四、检测系统 1. 热导池检测器 2. 氢火焰离子化检测器 3. 电子捕获检测器 4. 火焰光度检测器
五、温度控制系统 控制和测量汽化室、色谱柱、检测器温度。
色谱柱温控方式：恒温分析、程序升温。
三、气相色谱法的特点
1. 高选择性 2. 高效能 3. 高灵敏度 4. 分析速度快 5. 应用范围广 沸点在500℃以下，热稳定好，分 子量在400以下的组分的分离和测定
对于气体、气态烃等低沸点混合物，柱温选在比平均沸 点低50℃至平均沸点范围内分析。
对于沸点范围较宽的试样，宜采用程序升温。
程序升温：指在一个分析周期里，色谱柱的温度随时 间由低温到高温呈线性或非线性地变化，使沸点不同的组分， 在其最佳柱温下流出，从而改善分离效果，缩短分析时间。
总结：范第姆特方程 H=A+B/U+CU
高效液相色谱法3
2.内标法 内标法分为 工作曲线法 内标一点法 内标二点法 内标对比法 校正因子法 在HPLC中最常用内标对比法。 选择内标物的三个条件(纯、样品中不含有、保留时 间接近)，在HPLC中的要求与GC完全一致。一般可选择 一个化学结构与待测物质相似、物理性质相近的纯物质作 为内标物，加到待测样品溶液中，经过样品前处理后进样。 使用内标法可抵消因仪器稳定性差、进样量不够准确等原 因带来的实验误差。
(一) 多环芳烃的分析 一 多环芳烃的分析(图21－18) 多环芳烃的分析，可用反相或吸附色谱法分析。反 相色谱法用ODS柱，用乙腈−水或甲醇−水为流动相。但用 甲醇−水时，保留时间较长，因此多采用梯度洗脱。多环 芳烃也可用硅胶(YWG等)柱，以不含水的正己烷为流动相， 也能获得较好的分离效果，但需注意溶解样品的溶剂应与 流动相的性质相近。许多多环芳烃是致癌物质，其含量监 测在食品分析与环境保护监测中都有实用意义。
(1)内标对比法： 这种方法不需知校正因子又具有内标法的定量准确 度与进样量无关的特点，方法简便实用。在药物分析中分 析结果(含量)常用标示量％表示:
( Ai / As )样品 (ms )样品 W 标示量% = × × ×100% ( Ai / As )对照 (ms )对照 m
(21.13)
式中(ms)样品与(ms)对照分别是内标物在试样溶液及对照溶液 中的量，W为平均片重(或丸重等)，m是取样量，其它符 号的含义同GC章。若试样溶液与对照溶液中加人内标物 的量相等，所称取的样品重与平均片重相同，则上式的后 二项均等于1。
A的标示量％=(178024／202694)÷(154856／171222)×100％=97.l％ P的标示量％=(820968／202694) ÷(692272／171222)×100％=100.l％ C的标示量％=(407792／202694) ÷(372221／171222)×100％=92.5％
仪器分析 高效液相色谱法
第17章HPLC法17.1 内容提要17.1.1 基本概念高效液相色谱法──在经典液相色谱法的基础上，引入了气相色谱(GC)的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，使之发展成为高分离速率、高分离效率、高检测灵敏度的高效液相色谱法，易称为现代液相色谱法。
高效液相色谱仪──采用了高压输液泵、高效固定相和高灵敏度检测器等装置的液相色谱仪称为高效液相色谱仪。
梯度洗脱──用两种(或多种)不同极性的溶剂，在分离过程中按一定程序连续的改变流动相的浓度、配比和极性，使样品中各组分能在最佳的分配比下出峰的操作技术。
也称为梯度淋洗。
低压梯度──又称外梯度，特点是先混合后加压。
它是采用在常压下预先按一定的程序将溶剂混合后再用泵输入色谱柱系统，易称为泵前混合。
高压梯度──又称内梯度，特点是先加压后混合。
它有两台高压输液泵、梯度程序器(或计算机及接口板控制)、混合器等部件组成。
两台泵分别将两种极性不同的溶剂输入混合器，经充分混合后进入色谱柱系统，是一种泵后高压混合形式。
柱外效应──由色谱柱以外的因素引起的色谱峰形扩展的效应。
柱外因素常指从进样口到检测器之间，除色谱柱以外的所有死时间，如进样器、连接管、检测器等的死体积，都会导致色谱峰形加宽、柱效下降。
液固吸附色谱法──以固体吸附剂为固定相，吸附剂表面的活性中心具有吸附能力，样品分子被流动相带入柱内，它将与流动相溶剂分子在吸附剂表面发生竞争吸附性。
K值大的强极性组分易被吸附，K值小的弱极性组分难被吸附，样品组分因此被分离。
液液分配色谱法──根据物质在两种互不相溶(或部分互溶)的液体中溶解度的不同，有不同的分配，从而实现分离的方法。
分配系数较大的组分保留值也较大。
正相分配色谱法──流动相极性低而固定相极性高的称为正相分配色谱法。
反相分配色谱法──流动相极性高而固定相极性低的称为反相分配色谱法。
化学键合相──利用化学反应将有机分子键合到载体表面上，形成均一、牢固的单分子薄层而形成的各种性能的固定相。
仪器分析 第十五-第十九章思考题
第十五章思考题1.色谱法具有同时能进行分离和分析的特点而区别于其它方法，特别对复杂样品和多组份混合物的分离，色谱法的优势更为明显。
2.按固定相外形不同色谱法是如何分类的？是按色谱柱分类：①平面色谱法：薄层色谱法、纸色谱法②柱色谱法：填充柱法、毛细管柱色谱法3.什么是气相色谱法和液相色谱法？气体为流动相的色谱称为气相色谱。
液体为流动相的色谱称为液相色谱。
4.保留时间（tr）、死时间（t0）及调整保留时间（t’r）的关系是怎样的？t’r = tr - t05.从色谱流出曲线可以得到哪些信息？①根据色谱峰的个数可以判断样品中所含组分的最少个数；②根据色谱峰的保留值可以进行定性分析；③根据色谱峰的面积或峰高可以进行定量分析；④色谱峰的保留值及其区域宽度是评价色谱柱分离效能的依据；⑤色谱峰两峰间的距离是评价固定相（或流动相）选择是否合适的依据。
6.分配系数在色谱分析中的意义是什么？①K值大的组分,在柱内移动的速度慢，滞留在固定相中的时间长，后流出柱子；②分配系数是色谱分离的依据；③柱温是影响分配系数的一个重要参数。
7.什么是选择因子？它表征的意义是什么？是A，B两组分的调整保留时间的比值α= t’r（B）/t’r（A）＞1意义：表示两组分在给定柱子上的选择性，值越大说明柱子的选择性越好。
8.什么是分配比（即容量因子）？它表征的意义是什么？是指在一定温度和压力下，组分在两相分配达到平衡时，分配在固定相和流动相的质量比。
K=ms/mm意义：是衡量色谱柱对被分离组分保留能力的重要参数；9. 理论塔板数是衡量柱效的指标，色谱柱的柱效随理论塔板数的增加而增加，随板高的增大而减小。
10.板高（理论塔板高度H/cm）、柱效（理论塔板数n）及柱长（L/cm）三者的关系（公式）？H=L / n11.利用色谱图如何计算理论塔板数和有效理论塔板数（公式）？12.同一色谱柱对不同物质的柱效能是否一样？同一色谱柱对不同物质的柱效能是不一样的13.塔板理论对色谱理论的主要贡献是怎样的？(1)塔板理论推导出的计算柱效率的公式用来评价色谱柱是成功的；(2)塔板理论指出理论塔板高度H 对色谱峰区域宽度的影响有重要意义。
第17章 制剂分析概论-知识点2-含量与标示百分含量的计算
制剂含量表示的是每个样本的含 量与标示量的偏离程度
片剂含量测定 标示量% 每片中药标物示的量实（际g含/片量）（g/片）100%
含量
平均片重（g/片）100%
供测试得品量质量
平均片重（g/片）
100%
标示量（g/片）
标示量（g/片）
特点：灵敏度高、准确度高 仪器价格比较低廉 应用广泛
缺点：专属性较差
紫外-可见分光光度法
对照品比较法
配制：供试品溶液CX ；对照品溶液CR 测定：CX = CR（AX/AR）
要求：溶剂一致，CX/CR =(10010)%
含量：
吸收系数法
配制：供试品溶液CX 测定：
含量：
固体制剂： 液体制剂：
固体制剂： 液体制剂：
电子捕获检测器（ECD）
缺 点 ： 价格昂贵
HPLC法, GC法
内标加校正因子法
内标物加入待测样品中，以待测 组分和内标物的峰面积大小对比
外标法
以对照物质和样品中待测组分的峰 面积大小相比较进行定量的方法。
要求：对照品、内标物同一条件 下出峰，且符合含测要求
优点：准确度高、不受进样重 复性影响
应用：GC、微量成分
（一）容量分析法（滴定分析法）
特点：准确度高、操作简便、快速、 仪器简单、价廉
应用：常量分析 原料药的含量测定 组分含量>1%
缺点：专属性差
容量分析法（滴定分析法）
直接滴定法 用滴定液直接滴定被测药物的含量
剩余滴定法
含量：
固体制剂：
滴定度 浓度校正因子
液体制剂：
剩余滴定法
又称返滴定法或回滴定法，是先加入定量过量的滴 定液A，使其与被测药物定量反应，待反应完全后， 再用另一滴定液B来回滴剩余的滴定液A
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非极性键合相 2. 中等极性键合相 3. 极性键合相
1.化学键合相色谱法的固定相
（1）非极性键合相(反相色谱键合相) 硅胶表面键合烃基硅烷，为非极性基团，其烃基 配基可以是不同链长的正构烷烃
如十八烷基硅烷(octadecylsilane,ODS或用C18表示) 应用最广泛 辛烷基硅烷(用 C8来表示)又可以是带有苯基的碳链
HPLC
第一节 概述 第二节 基本原理 第三节 高效液相色谱法 的主要类型 第四节 高效液相色谱仪 第五节 高效液相色谱法 的应用
学习目标 1.掌握化学键合相色谱法、高效液相 色谱法应用。 2.掌握高效液相色谱法的洗脱方式及 梯度洗脱的优点。 3.熟悉高效液相色谱法与经典的液相 色谱法和气相色谱法的异同点。 4.熟悉高效液相色谱仪的构造。 5.了解高效液相色谱法固定相和流动 相的选择。
可以通过改变键合官能团的类型来改变分离的选
择性。 传质速度快，柱效高。 适于梯度洗脱。
化学键合相色谱法分类
分类：
正相(normal phase，NP)键合相色谱法
固定相极性比流动相的极性要强， 适合于分离中等极性和极性强的化合物
反相(reversed phase，RP)键合相色谱法
第三节 高效液相色谱法的主要类型
分配色谱法(partition hromatography) 吸附色谱法(adsorption chromatography) 离子交换色谱法（IEC） 空间排阻色谱法（SEC） 化学键合相色谱法(bonded phase chromatography. BPC) 胶束色谱法(micellar chromatography；MC)
常用的有硅胶、氧化铝及高分子多孔微球(有机胶)，其
一、 液-固吸附色谱法
1. 液-固吸附色谱法的固定相
堆积硅珠(YQG)
由二氧化硅溶胶加凝结剂聚合而成。粒径3～5um，理
论塔板数每米8万，传质阻力小，柱容量大，是一种好 的高效填料
高分子多孔微球(YSG)
又称有机胶，表面为芳烃官能团，由苯乙烯与二乙烯
恒流泵：在输送流动相过 程中流量恒定。常用柱塞 往复泵 输液泵应具备的性能：
无脉动；流量恒定；流量范
围宽且可调节；耐高压；耐 腐蚀 ；适于梯度洗脱
过滤和脱气
流动相和样品溶液的过滤
目的：以免其中的细小颗粒堵塞色谱柱以及影响高压输
液泵的正常工作。
流动相进入高压泵前必须进行脱气处理
目的：除去其中溶解的气体(如氧气)，防止流动相由色
第一节 概述
高效液相色谱法（HPLC）
－－以高压液体为流动相的液相柱色谱法。 又称为高压液相色谱法；高速液相色谱法。
一、 高效液相色谱法与经典液相色谱法的比 较 二、 高效液相色谱法与气相色谱法的比较
一、 高效液相色谱法与经典液相色谱法 的比较
经典液相色谱法为基础，引入气相色谱法的理论和 实验技术。 高压输送流动相，流速快，分析速度快。 高效固定相，颗粒极细（一般为10μm以下）、规 则均匀的固定相，(键合相)传质阻抗小，柱效高， 分离效率高。 高灵敏度检测器，灵敏度大大提高。紫外检测器最 小检测限可达10-9g，而荧光检测器最小检测限可达 10-12g。
接管、接头、检测器在内的管路体积（死体积）。 死体积越大，对色谱峰展宽影响越大。
为了减少柱外因素对峰宽的影响，必须尽量减小
驻外死体积。如采用进样阀进样，使用“零死体 积接头”连接管路各部件，并尽可能使用内腔体 积小的检测器。
第三节 高效液相色谱法的主要类型
一、 液-固吸附色谱法 二、 化学键合相色谱法 三、 流动相的要求和洗脱方式
氰乙硅烷基键合在硅胶表面制成。它们常作为正相色谱 的固定相。 该键合相表面基团为极性较大的基团，
2.化学键合相色谱法的流动相
在化学键合相色谱中，溶剂的洗脱能力(即溶剂的强 度)直接与溶剂的极性有关。
正相键合相色谱中，由于固定相是极性的，因此极性强
的流动相洗脱能力强； 反相键合相色谱中，由于固定相是非极性的，因此，极 性弱的流动相洗脱能力强
固定相的极性比流动相极性弱， 适用于分离非极性至中等极性的化合物
1.化学键合相色谱法的固定相
键合相的种类:
化学键合相按基团与载体(硅胶)相结合的活性键
类型，
分为酯化型(Si-O-C)和硅烷化型(Si-O-Si-C)
化学键合相按基团的极性可将其分为非极性、中
等极性和极性三类
1.
苯交联而成
用于分离芳烃、杂环、甾体、生物碱、脂溶性维生素、
酚、醛、醚等。柱效低，但选择性好，峰形好。
2.液-固吸附色谱法的流动相
常用溶剂:
己烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈、水。
流动相的选择
应重点考虑溶剂的极性
溶剂的极性强弱可用Snyder提出的溶剂极性参
数ε0来表示。ε0为溶剂分子在单位吸附剂表面的 吸附自由能。ε0越大，说明溶剂的极性越强， 洗脱能力就越强。
第二节 基本原理
一、 柱内展宽 二、 柱外展宽
高效液相色谱法对基本概念和理论
如塔板理论、速率理论、保留值与分配系数的关系、 分离度等与气相色谱法基本一致，
由于流动相分别为液体和气体，两者的扩散系数和粘度
差别较大，因而在应用色谱基本理论时，必须考虑本身 的特点。
其中最重要的是速率理论中，各种动力学因素对高 效液相色谱峰展宽带影响与气相色谱中有所不同。
谱柱进入检测器时因压力降低而产生气泡，增加基线的 噪音，造成灵敏度降低，甚至无法分析。 脱气方法：常用的脱气方法有低压脱气法、吹氦脱气法 和在线脱气法。目前，许多高档的高效液相色谱仪都配 有在线脱气装置。
而后者又可进一步分为
普通反相液液分配色谱法
离子对色谱法(ion
pair chromatography ,LPC)
离子抑制色谱法(ion
suppression chromatography ,ISC)
一、 液-固吸附色谱法
1. 液-固吸附色谱法的固定相
次还有分子筛及聚酰胺等 硅胶 表孔硅胶、全多孔硅胶、堆积硅珠 全多孔硅胶 优点：表面积大，容量大 缺点：孔径深，传质阻力大 无定形全多孔硅胶(YWG)：粒径5～10um，理论塔 板数每米2～5万，价格便宜、载样量大，但渗透性差 球形全多孔硅胶(YWG)：粒径3～10um，理论塔板 数每米8万，涡流扩散项小，渗透性好。
二、 化学键合相色谱法
以化学键合相为固定相的色谱法，简称键合 相色谱法(bonded phase chromatography； BPC) 化学键合相：采用化学反应的方法将官能团 键合在载体表面所形成的固定相
化学键合相色谱法优点
优点：
耐溶剂冲洗，化学性能稳定，热稳定性好(70℃
以下不致破坏)，使用寿命长。
分析化学
“十二五”职业教育国家规划教材
主编
石慧 刘德秀
化学工业出版社
目 录
第一章 绪论 第二章 分析天平与称量方法 第三章 误差与分析数据处理
第十章 配位滴定法
第十一章 氧化还原滴定法 第十二章 电化学分析法 第十三章 紫外-可见分光光度法
第四章 样品的采集及常见的与处理 方法
3.固定相和流动相的选择
（2）流动相的选择 正相键合相色谱法
采用在烷烃中加适量极性调节剂的方法
反相键合相色谱法
一般以极性最大的水为主体，加入一定量与水互溶的甲
醇、乙腈和四氢呋喃等极性调节剂。水－甲醇是反相色 谱最常用的流动相
混合溶剂（二元或多元流动相）
三、 流动相的要求和洗脱方式
高效液相色谱仪
主要部件
process and main assembly of HPLC
一、 高压输液系统 二、 进样系统 三、 分离系统 四、 检测系统 五、 数据处理系统
输液系统
进样系统
色谱柱系统 检测系统
数据记录处理系统
一、高压输液系统
高压输液泵
压力：150～350×105 Pa
非极性键合相型号（国产）： YWG-C18H37、YQG-C18H37、YWG-C6H5
1.化学键合相色谱法的固定相
（2）中等极性键合相
常见的有醚Байду номын сангаас键合相。
这种键合相可作为正相或反相色谱的固定相，视流动相
的极性而定。
（3）极性键合相
如氨基或氰基等，分别将氨丙硅烷基[-Si(CH2)3NH2 ]和
根据固定相和流动相相对极性的大小，液液分 配色谱法又可以分为
正相液液分配色谱法(normal-phase liquid-
liquid partitionn chromatography, NLLC)和反 相液液分配色谱法(reversed-phase liquidliquid partition chromatography ,RLLC)
选择流动相时应注意的几个问题：
（1）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂 质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。 （2）避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降 或损坏柱子。如使固定液溶解流失；酸性溶剂破坏 氧化铝固定相等。 （3）试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产 生沉淀并在柱中沉积。 （4）流动相同时还应满足检测器的要求。当使用 紫外检测器时，流动相不应有紫外吸收。
二、 高效液相色谱法与气相色谱法的比 较