实验室常用培养基

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实验用培养基配制>

1 .牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)

牛肉膏3g,蛋白胨10g , NaCI 5g,水1000mL , pH7.4 〜7.6

2. 高氏1 号培养基(用于放线菌培养)

可溶性淀粉20g , KNO 3 1g , NaCI 0.5g , K 2 HPO 4- 3H 2 O 0.5g , MgSO

4 7H 2 O 0.5g, , FeSO4 -7H 2 O 0.01g,水1000mL , pH7.4 〜7.6。

配制时注意,可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。

3 .马丁氏(Martin )培养基(用于从土壤中分离真菌)

K 2 HPO 4 1g , MgSO 4 -7H 2 O 0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g , 1/3000 孟加拉红水

溶液100mL,水900mL,自然pH , 121 C 湿热灭菌30min 。

待培养基融化后冷却55〜60 C时加入链霉素(链霉素含量为30卩g/mL).

4. 马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)

马铃薯(去皮)200g, 蔗糖(或葡萄糖) 20g, 水1000mL

配制方法如下: 将马铃署去皮, 切成约2cm 2 的小块, 放入1500mL 的烧杯中煮沸

30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液加糖, 再补足至

1000mL, 自然pH. 霉菌用蔗糖, 酵母菌用葡萄糖.

5. 察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)

蔗糖30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 7H 2 O 0.5g, KCI 0.5g, FeSO4 7H

2 O 0.1g, 水1000mL, pH7.0 〜7.2

6. HayfIik 培养基(用于支原体培养)

牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g, NaCI 5g,琼脂15g, pH7.8〜

8.0,

分装每瓶70mL, 121 C 湿热灭菌15min,待冷却至80 C左右,每70mL中加入马血清

20mL,25% 鲜酵母浸出液10mL, 15 醋酸铊水溶液2.5mL, 青霉素G 钾盐水溶液(20 万单位以上)0.5mL, 以上混合后倾注平板. 注意: 醋酸铊是极毒的药品, 需特别注意安全操作.

7 .麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基)

葡萄糖0.1g, KCI 0.18g ,酵母膏0.25g ,醋酸钠0.82g, 琼脂I.5g ,蒸馏水

lOOmL。溶解后分装试管,1I5 °C湿热灭菌15min。

8 .葡萄糖蛋白胨水培养基(用于V.P .反应和甲基红试验)

蛋白胨0.5g ,葡萄糖0.5g ,K 2 HPO 4 0.2g ,水100mL, pH7.2, 1l5 C 湿热灭菌

20min 。

9 .蛋白胨水培养基(用于吲哚试验)

蛋白胨10g, NaCl 5g, 水1000mL ,pH7.2 〜7.4, 121 C 湿热灭菌20min 。

10 .糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验)

蛋白胨0.2g, NaCl 0.5g, K 2 HPO 4 0.02g ,水100mL ,溴麝香草酚蓝(质量分数1% 水溶液) 0.3mL ,糖类lg 。分别称取蛋白胨和NaCl 溶于热水中,调pH 至

7.4 ,再加入溴麝香草酚蓝(先用少量质量分数95% 乙醇溶解后,再加水配成质量分数1% 水溶液),加入糖类,分装试管,装量 4 〜5cm 高,并倒放入一杜氏小管(管口向下,管内充满培养液)。115 C 湿热灭菌

20min 。灭菌时注意适当延长煮沸时间,尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。常用的糖类,如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等(后两种糖的用量常加大为质量分数 1.5%)。

11. RCM 培养基(强化梭菌培养基)(用于厌氧菌培养)

酵母膏3g ,牛肉膏l0g ,蛋白胨10g ,可溶性淀粉lg ,葡萄糖5g, 半胱氨酸盐酸盐0.5g ,NaCl 3g ,NaAc 3g, 水l000mL, pH8.5 ,刃天青3mg/L, l2l C 湿热灭菌

30min 。

12. TYA 培养基(用于厌氧菌培养)

葡萄糖40g ,牛肉膏2g ,酵母膏2g ,胰蛋白胨(bacto-typetone)6g ,醋酸铵3g, KH 2 PO 4 0.5g , MgSO 4 • 7H 2 O 0.2g , FeSO 4 ・7H 2 O 0.01g,水1000mL,

pH6.5, 121 C湿热灭菌30min。

13 .玉米醪培养基(用于厌氧菌培养)

玉米粉65g,自来水1000mL,混匀,煮10min成糊状,自然pH, 121 C湿热灭菌

30min 。

14 .中性红培养基(用于厌氧菌培养)

葡萄糖40g ,胰蛋白胨6g ,酵母膏2g ,牛肉膏2g ,醋酸铵3g ,KH 2 PO 4 5g ,中性红0.2g, MgSO 4 7H 2 O 0.2g , FeSO 4 7H 2 O 0.01g,水1000ml, pH6.2, 121 C湿热灭菌30min。

15 .CaCO3 明胶麦芽汁培养基(用于厌氧菌培养)

麦芽汁(6 波美)1000mL ,水1000mL ,CaCO 3 10g, 明胶10g ,pH6.8, 121 C湿热灭菌30min 。

16 .BCG 牛乳培养基(用于乳酸发酵)

(A)溶液:脱脂乳粉100g ,水500mL ,加入质量分数 1.6% 溴甲酚绿(B.C.G)

乙醇溶液1mL ,80 C 灭菌20min 。

(B)溶液:酵母膏

10g ,水500mL ,琼脂20g , pH6.8, 121 C 湿热灭菌

20min 。

以无菌操作趁热将(A)、(B)溶液混合均匀后倒平板。

17 .乳酸菌培养基(用于乳酸发酵)

牛肉膏5g ,酵母膏5g ,蛋白胨10g ,葡萄糖10g ,乳糖5g, NaCl 5g ,水1000mL, pH6.8, 121 C湿热灭菌20min。

18 .酒精发酵培养基(用于酒精发酵)

蔗糖10g, MgSO 4 -7H 2 O 0.5g, NH 4 NO 3 0.5g,质量分数20% 豆芽汁2mL,

KH 2 PO 4 0.5g ,水100mL ,自然pH 。

19. 柯索夫培养基(用于钩端螺旋体培养)优质蛋白胨0.4g, NaCl 0.7g, KCl 0.02g, Na HCO 3 0.01g ,CaCl 0.02g, KH 2 PO

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