四种甘草对人乳腺癌细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的比较研究(精)
甘草药理活性的研究
甘草药理活性的研究【摘要】甘草的抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、抗炎及免疫调节作用活性综述。
【关键词】甘草；药理作用甘草具有益气健脾，请热解毒，止痛和调和诸药之功效。
用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽多痰，脘胀，四肢挛急，疼痛，痈肿疮毒，缓解药物毒性。
它的根可做祛痰剂，利尿剂和清肺剂，有祛痰解毒之功效。
临床上广泛用于胃溃疡、十二指肠溃疡、肺结核、支气管哮喘、传染性肝炎、血栓性静脉炎、皮炎等。
特别在解毒、抗菌、抗肿瘤作用上有明显效果。
甘草中的甘草酸还有显著的肾上腺皮脂激素样作用，可用于人体抗衰老，增强免疫力作用。
1 抗肿瘤作用1．1 黄酮类的抗肿瘤作用药理学研究证明，甘草中异黄酮类物质具有植物雌激素活性，可以抑制乳癌细胞、前列腺癌细胞的增殖，近年来由于发现甘草查而酮对爱滋病毒的抑制作用比甘草强，且具有抗癌作用，使甘草黄酮类化合物的研究成为医药界关注的新焦点，已发现10大类100多个化合物，主要有甘草黄酮、异甘草黄酮醇、甘草素、异甘草素等。
实验表明，活性氧可引起DNA碱基损伤，导致基因突变，进一步造成细胞癌变，因而应用抗氧化剂预防肿瘤的发生正日益受到重视。
甘草黄酮类生物活性较强，对脂质过氧化物丙二醛的生成有明显的抑制作用，能有效清除体内产生的自由基，从而阻断脂质过氧化反应的进行。
2 抗氧化作用甘草黄酮类成分属于查而酮和二氢黄酮，均为含有酚羟基的化合物。
其对脂质过氧化物终产物丙二醛（MDA）的生成具有明显抑制作用。
傅乃武等[1]报道了14种甘草黄酮类化合物对4种活性氧的清除效应，光果甘草酮和甘草查而酮A对过氧化氢溶血的抑制效应最显著。
3 抗病原微生物作用甘草中黄酮类化合物中抗菌成分较多，作用较强。
其黄酮类单体化合物甘草查而酮A和甘草查而酮B等对革兰阳性菌中的金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的抑制作用相当于链霉素；对酵母菌和真菌的作用高于链霉素；对革兰阴性菌中的大肠杆菌和绿脓杆菌抑制作用相当于链霉素[2]。
体外实验表明，甘草查而酮A 还可抑制杜氏利什曼原虫和硕大利什曼原虫的体前鞭毛和无鞭毛的生长。
甘草的抗肿瘤作用及机制研究
甘草的抗肿瘤作用及机制研究近年来，癌症已成为世界范围内的重大公共卫生问题，严重威胁人类健康和生命。
当前，尽管已有了一系列有效的抗癌药物，但其副作用和治疗效果的限制使人们更加关注自然草药的抗肿瘤作用。
甘草作为一种中草药，其抗癌潜力近年来受到了广泛的研究和关注。
甘草是一种具有广泛应用的中草药，被广泛地应用于中国和其他许多亚洲国家的中医药中。
甘草根和根茎中的主要活性成分为甘草酸，这是一种三萜皂苷化合物，已被证实具有多种药理学活性，包括抗炎、抗氧化、抗病毒和抗肿瘤作用。
甘草的抗肿瘤作用已在许多研究中得到证实。
首先，甘草酸可以抑制肿瘤细胞的生长和增殖。
研究发现，甘草酸能够通过调节细胞周期和促进细胞凋亡来抑制多种肿瘤细胞的增殖。
此外，甘草酸还可以抑制癌症细胞的侵袭和转移，从而抑制肿瘤的进展。
其次，甘草还可以增强化疗药物的抗肿瘤作用。
化疗是目前常用的癌症治疗方法之一，然而其严重的副作用和耐药性限制了其疗效。
研究发现，甘草可以通过增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性来增强其抗肿瘤作用，从而降低化疗剂量和减少副作用。
甘草的抗肿瘤机制也得到了一定程度的理解。
首先，甘草酸可以调节多个信号通路来抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭。
研究发现，甘草酸可以通过抑制PI3K/AKT和MAPK信号通路来抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭。
另外，甘草酸还可以抑制NF-κB信号通路的活化，从而减少癌症炎症反应和抑制肿瘤细胞的增殖。
其次，甘草酸还可以调节肿瘤微环境，抑制肿瘤细胞的生长和转移。
研究发现，甘草酸可以通过调节肿瘤相关细胞和细胞因子的表达来改变肿瘤微环境，从而抑制肿瘤细胞的生长和转移。
此外，甘草酸还可以增强机体的免疫功能，促进肿瘤细胞的识别和清除。
总的来说，甘草作为一种中草药，具有潜在的抗肿瘤作用。
甘草酸作为其主要活性成分，在抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭方面起到重要作用。
此外，甘草酸还可以增强化疗药物的抗肿瘤效果，为癌症治疗提供新的思路和方向。
然而，目前对于甘草的抗肿瘤作用及其机制的研究仍在初级阶段，还需要进一步深入的研究来揭示其更为详尽的机制和应用价值。
甘草在肿瘤治疗中的作用与机制研究
甘草在肿瘤治疗中的作用与机制研究肿瘤是严重威胁人类健康的疾病之一，对于肿瘤的治疗，科学家们一直在不断探索与研究。
甘草，一种常见的中药材，近年来受到了越来越多的关注。
本文将就甘草在肿瘤治疗中的作用与机制进行研究与讨论。
一、甘草的概述甘草，又名甘遂，为豆科植物甘草的根和茎，具有多种药理活性成分，如甘草酸和甘草次酸等。
甘草在中药学上有温中健脾、清热解毒、润肺止咳等功效，被广泛应用于中医传统治疗中。
二、甘草在肿瘤治疗中的作用1. 抗肿瘤作用研究表明，甘草具有显著的抗肿瘤活性。
甘草中的甘草酸和甘草次酸等成分能够抑制肿瘤细胞的生长和增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤的血管生成等。
此外，甘草还能增强患者的免疫功能，提高机体对肿瘤的抵抗能力。
2. 减轻化疗副作用甘草具有一定的抗炎和抗氧化作用，可以降低化疗药物对正常细胞的损伤，减轻化疗的副作用，如恶心、呕吐、脱发等。
此外，甘草还能减轻化疗引起的骨髓抑制，并促进血小板的生成，预防由于化疗导致的血小板减少症状。
三、甘草在肿瘤治疗中的机制1. 抑制肿瘤细胞增殖甘草酸和甘草次酸等成分可抑制肿瘤细胞的分裂和增殖，通过调节癌细胞周期蛋白的表达，干扰细胞周期的进行，使癌细胞无法继续分裂生长。
2. 诱导肿瘤细胞凋亡甘草中的甘草次酸能够通过多个信号转导通路，如PI3K/Akt信号通路和NF-kB信号通路等，诱导肿瘤细胞凋亡。
此外，甘草还能抑制肿瘤细胞的转移和侵袭能力，对肿瘤的生长和发展起到抑制作用。
3. 调节免疫功能甘草中的甘草酸可增加机体自然杀伤细胞和巨噬细胞的活性，促进免疫细胞的增殖和活化，增强机体的抗肿瘤能力。
此外，甘草还能抑制白细胞介素-6（IL-6）等炎症因子的产生，减少炎症反应，提高机体免疫系统的整体功能。
综上所述，甘草在肿瘤治疗中具有显著的抗肿瘤作用，并能减轻化疗的副作用。
其作用机制主要包括抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡和调节免疫功能等。
然而，需要进一步的临床研究和实验室研究来验证甘草在肿瘤治疗中的疗效和安全性，以推广其在临床应用中的价值。
甘草中部分主要成分抗乳腺癌机制的研究进展
Advances in Clinical Medicine 临床医学进展, 2023, 13(5), 7471-7476 Published Online May 2023 in Hans. https:///journal/acm https:///10.12677/acm.2023.1351043甘草中部分主要成分抗乳腺癌机制的研究进展 王 猛1，王宽宇2*1黑龙江中医药大学研究生院，黑龙江 哈尔滨 2黑龙江中医药大学附属第一医院外科，黑龙江 哈尔滨收稿日期：2023年4月11日；录用日期：2023年5月6日；发布日期：2023年5月15日摘 要甘草，因其可解百毒、调和诸药，而被称为“国老”，陶弘景说：“此草最为众药之主，经方少不用者，犹如香中有沉香也”，历代医学典籍中对甘草均有记载，现代研究表明，甘草中的部分主要成分如甘草酸、甘草次酸、甘草素等对乳腺癌细胞具有抑制作用，本文梳理了近年来甘草中部分主要成分的抗乳腺癌机制的研究文献，并在此基础上进行概述。
关键词甘草，乳腺癌，黄酮类化合物，三萜类化合物Research Progress on Anti-Breast Cancer Mechanism of Main Components in Glycyrrhiza uralensisMeng Wang 1, Kuanyu Wang 2*1Graduate School of Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin Heilongjiang 2Surgical Department, First Affiliated Hospital, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin Heilongjiang Received: Apr. 11th , 2023; accepted: May 6th , 2023; published: May 15th , 2023AbstractLicorice is called “Guolao” because it can dispel hundreds of poisons and conciliate various medi-cines. Tao Hongjing said: “This herbal medicine is the master of all medicines, there are few clas-sical prescriptions that don’t use it, just as the production of incense always uses aloes.”, which is *通讯作者。
甘草对人类乳腺癌细胞的抑制作用研究
甘草对人类乳腺癌细胞的抑制作用研究引言：乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤之一，也是导致女性死亡的主要原因。
目前，乳腺癌的治疗主要包括手术切除、化疗、放疗和靶向治疗等。
然而，这些治疗方法常常伴随着严重的副作用和耐药性问题。
因此，寻找新的抗乳腺癌治疗策略变得尤为重要。
甘草（Glycyrrhiza），一种常见的中草药，已被广泛用于中医传统药物中。
许多研究发现，甘草具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤和免疫调节等多种药理活性。
近年来，研究者发现甘草具有对人类乳腺癌细胞的抑制作用，成为了一个热门的研究领域。
甘草成分及其对乳腺癌细胞的抑制作用：甘草含有多种化学成分，其中最为重要的是甘草酸和甘草皂苷。
研究发现，这些成分能够显著抑制乳腺癌细胞的增殖和生长。
甘草酸作为主要活性成分之一，具有明显的抗肿瘤作用。
研究表明，甘草酸能够通过多种途径抑制乳腺癌细胞的增殖。
首先，它能够诱导乳腺癌细胞凋亡，通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达，使细胞发生凋亡。
其次，甘草酸还可以抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力，通过调节转录因子和相关信号通路的活性，抑制转录因子Snail和Slug的表达，从而减少细胞的侵袭和迁移能力。
甘草皂苷是甘草中另一个重要的成分，具有重要的抗肿瘤活性。
一项研究发现，甘草皂苷能够显著抑制乳腺癌细胞的增殖，并诱导其发生凋亡。
此外，甘草皂苷还能抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力，通过调节多种信号通路和蛋白激酶的活性，抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移。
机制探究：甘草对乳腺癌细胞的抑制作用可能涉及多种机制。
研究表明，甘草能够抑制乳腺癌细胞的细胞周期进程，通过调节细胞周期蛋白和细胞周期关键蛋白激酶的活性，阻滞乳腺癌细胞的细胞周期进程，从而抑制细胞的增殖。
此外，甘草还能够调节多种信号通路和蛋白激酶的活性，如PI3K/AKT信号通路、MAPK信号通路等，从而抑制乳腺癌细胞的增殖和生存能力。
研究发现，甘草能够抑制PI3K/AKT信号通路的活性，抑制AKT的磷酸化，从而抑制乳腺癌细胞的生长和转移能力。
甘草的研究报告论文
甘草的研究报告论文甘草（Glycyrrhiza）是一种常见的中药材，被广泛应用于中医药领域。
它具有多种功效，如止咳祛痰、抗炎、促进消化等。
本篇研究报告论文将对甘草的研究进展进行综述，总结其药理作用和临床应用。
甘草的主要有效成分是甘草酸，这是一种三萜类化合物。
研究表明，甘草酸具有多种生物活性，如抗炎、抗肿瘤、抗氧化等。
它可以抑制白细胞活化和炎症介质的释放，从而具有抗炎作用。
此外，甘草酸还可以抑制癌细胞的增殖和侵袭，具有抗肿瘤活性。
此外，甘草酸还可以清除自由基，减轻氧化应激对细胞的损害，具有抗氧化活性。
除了甘草酸外，甘草还含有甘草苷、异甘草苷等多种有效成分。
这些成分具有保护肝脏、促进胃肠道健康、抗过敏等作用。
甘草苷主要通过抑制过敏介质的释放，发挥抗过敏作用。
异甘草苷可以增加胃黏膜的黏液分泌，保护胃黏膜，促进消化。
临床上，甘草被广泛应用于咳嗽、气喘、胃炎、溃疡等疾病的治疗。
研究表明，甘草具有镇咳祛痰、平喘止嗽、抗溃疡、抗菌等作用。
它可以缓解咳嗽、促进痰液排出，减轻气喘症状。
此外，甘草还可以抑制幽门螺杆菌的生长，减少消化道感染的发生。
因此，在胃炎、溃疡等疾病的治疗中，甘草常常被用作辅助药物。
在临床应用中，甘草的使用方法有多种。
一种常见的应用方式是制成甘草煎剂或颗粒剂，然后口服。
此外，甘草还可以制成外用制剂，如甘草酸乳膏或甘草酸软膏，用于治疗皮肤炎症、烫伤等。
甘草酸口服液也是常用的甘草制剂之一，用于缓解咳嗽、气喘等呼吸道疾病的症状。
尽管甘草具有多种药理作用和临床应用，但其使用仍需谨慎。
甘草的长期大剂量使用可能导致水钠潴留、高血压等不良反应。
因此，在使用甘草时，应根据患者个体情况进行剂量和疗程的调整，以避免不良反应的发生。
综上所述，甘草具有多种药理作用，包括抗炎、抗肿瘤、抗过敏、保护胃肠道健康等。
它在临床上广泛应用于咳嗽、气喘、胃炎、溃疡等疾病的治疗。
但需要注意的是，甘草的使用仍需谨慎，避免不良反应的发生。
研究甘草的抗癌作用与细胞生物学机制
研究甘草的抗癌作用与细胞生物学机制甘草，又称为甘草根，是一种具有悠久历史的中药材。
在传统医学中，甘草被广泛用于治疗各种疾病，包括感冒、消化不良和呼吸道感染等。
然而，近年来的研究表明甘草还具有抗癌的潜力，引起了科学界的关注。
本文将介绍研究甘草的抗癌作用及其细胞生物学机制。
一、甘草的抗癌活性众所周知，癌症是一种由异常细胞生长和扩散引起的疾病。
它是一种严重威胁人类健康的疾病，也是当前社会关注的焦点。
最近的研究发现，甘草中含有多种化合物，如甘草酸、黄酮类化合物和甘草苷等，这些化合物被认为具有抗癌活性。
1. 甘草酸的抗癌作用甘草酸是甘草中的一种主要活性成分。
多项研究表明，甘草酸具有抗癌的作用。
一些研究发现，甘草酸可以抑制癌细胞的增殖和转移，同时还可以诱导癌细胞凋亡。
此外，甘草酸还可以调节癌细胞内的信号通路，抑制肿瘤的生长和扩散。
2. 黄酮类化合物的抗癌作用黄酮类化合物是甘草中另一类具有抗癌活性的化合物。
研究表明，黄酮类化合物可以抑制肿瘤细胞的增殖，并且具有抗氧化和抗炎的作用，从而抑制癌细胞的生长和扩散。
此外，黄酮类化合物还可以增强免疫系统的功能，增加机体对抗癌的能力。
3. 甘草苷的抗癌作用甘草苷是甘草中的一种重要成分，也是甘草具有抗癌活性的原因之一。
研究发现，甘草苷可以通过多种途径抑制癌细胞的增殖和扩散。
甘草苷不仅可以降低癌细胞的存活率，还可以促使癌细胞凋亡，并且对肿瘤的血管生成起到一定的抑制作用。
二、甘草的细胞生物学机制为了更好地理解甘草的抗癌作用，科学家们进行了大量的研究，并发现了一些与其相关的细胞生物学机制。
以下是一些重要的细胞生物学机制：1. 抑制癌细胞增殖研究发现，甘草酸和黄酮类化合物可以抑制癌细胞的增殖通过干扰癌细胞的细胞周期进程、调节细胞分裂和DNA合成等关键过程，从而阻断癌细胞的生长。
2. 诱导癌细胞凋亡甘草酸和甘草苷被发现可以诱导癌细胞凋亡，通过干扰癌细胞的存活信号通路，调节凋亡相关蛋白的表达，促使癌细胞进入凋亡状态，从而抑制肿瘤的生长。
甘草多糖对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响及机制
甘草多糖对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响及机制陈艳丽;李海平;姜丽娜;刘薇;许刚【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2022(37)5【摘要】目的探讨甘草多糖介导上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)对乳腺癌细胞侵袭、迁移的影响以及对过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor G,PPARG)/脂肪酸结合蛋白(fatty acid biding protein 4,FABP4)信号通路的调节作用。
方法第4代对数生长期MDA-MB-231细胞随机分为对照组、甘草多糖组、NC组、si-PPARG组和si-PPARG+甘草多糖组,甘草多糖组细胞加入质量浓度50μg·mL^(-1)甘草多糖100μL培养24 h,NC组和si-PPARG组细胞分别转染si-PPARG-NC和si-PPARG干预24 h,si-PPARG+甘草多糖组细胞转染si-PPARG干预24 h后,加入质量浓度150μg·mL^(-1)甘草多糖100μL处理24 h,对照组细胞不做处理。
qRT-PCR检测PPARG和FABP4 mRNA相对表达量,CCK-8法检测细胞增殖率,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,蛋白印迹法(Western blot)检测PPARG、FABP4、上皮钙黏蛋白(E-cad)、神经钙黏蛋白(N-cad)和波形蛋白(Vimentin)相对表达量。
结果与对照组比较,甘草多糖组PPARG 和FABP4 mRNA相对表达量及PPARG、FABP4和E-cad蛋白相对表达量升高,细胞增殖率降低,N-cad和Vimentin蛋白相对表达量降低,细胞迁移和侵袭能力减弱(P<0.05);si-PPARG组PPARG和FABP4 mRNA相对表达量及PPARG、FABP4和E-cad蛋白相对表达量降低,细胞增殖率升高,N-cad和Vimentin蛋白相对表达量升高,细胞迁移和侵袭能力增强(P<0.05)。
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四种甘草对人乳腺癌细胞增殖抑制和诱导凋亡作用
的比较研究
[ 08-05-16 15:17:00 ] 作者：马淼编辑：studa20
【摘要】目的比较新疆四种野生甘草活性成分对人乳腺癌细胞的增殖
抑制作用，以期筛选出药效最佳的甘草种类。
方法采用MTT法检测不同样品对BCAP37细胞的增殖抑制作用，Hoechst33258荧光染色法检测各样品诱导BCAP37细胞凋亡的作用。
结果4种甘草的活性成分对人乳腺癌BCAP37
细胞具有显著的增殖抑制与诱导凋亡的作用，且存在显著的种间与产地间差
异。
结论抗癌药效最佳的甘草种类为阿拉尔甘草。
【关键词】甘草活性成分人乳腺癌BCAP 37细胞
Comparative Study on the Anti-proliferation and Apoptosis-
inducing Effects of Active Components from Four Glycyrrhiza Species
on Human Breast Cancer BCAP-37 Cell
Abstract:ObjectiveTo select the optimal glycyrrhiza species for medicinal utilization by comparing the anti-proliferation and apoptosis-inducing effects of active components from four wild glycyrrhiza species in Xinjiang on human breast cancer BCAP37 cell.
MethodsThe anti-proliferation effects of different samples on BCAP
37 cell were measured by MTT assay. The cell apoptotic rate was detected by Hoechst 33258 stain.ResultsActive components of four Glycyrrhiza species inhibited the proliferation of BCAP37 cells
and induced apoptosis significantly. What's more, there were
significant interspecific and spatial variations in the anti-proliferation and apoptosis-inducing effects. ConclusionThe optimal Glycyrrhiza species for anticancer utilization is Glycyrrhiza
alalensis L.
Key words:Glycyrrhiza; Active Component; Human breast cancer BCAP37 Cell
甘草是我国十分重要的中药材，素有“十方九草”的美誉。
近年来，随着对甘草开发利用的不断深入，甘草被广泛用于药品、食品、保健品、化妆品
等领域［1］，甘草的市场需求量剧增。
我国是世界上甘草出口大国，其中
80％为野生甘草，仅有20％为栽培甘草。
我国甘草储量锐减，由建国初期
200～250万吨下降到50～70万吨［2］。
现存的野生甘草资源已无法满足日益
增长的市场需求，因此，人工栽培甘草势在必行，野生优质甘草品种的筛选显
得尤为紧迫。
甘草的品质高低最终要以其药效来衡量，前人仅以活性成分含量为指标对甘草品质进行的研究是片面的［3～7］。
甘草中最重要的两大类活性成分甘草酸类和甘草黄酮类化合物均具有抗炎、抗病毒及抗肿瘤之功效［8,9］，甘草的抗肿瘤活性尤其受到国内外学者的关注。
乳腺癌是全球妇女最常见的恶性肿瘤。
新近报告，美国女性乳腺癌的发病率已跃升为1/7，而在我国过去10年中，乳腺癌发病率也上升了27%，乳腺癌业已成为威胁妇女生命和健康的头号杀手［10］。
因此，本文研究了新疆的胀果甘草Glycyrrhiza inflata Batal.，光果甘草G. glabra L.，阿拉尔甘草G. alalensis L.和黄甘草G. eurycarpa L.等4种野生甘草的甘草水提物和甘草总黄酮对人乳腺癌BCAP37细胞的增殖抑制作用，以期筛选出药效最佳的甘草栽培种类，为优质甘草的规模化人工种植奠定基础，为甘草抗癌新药物的研发提供科学依据。
1 器材
1.1 细胞株人乳腺癌BCAP37细胞株由中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库提供。
1.2 实验样品各样品采样地点及样品名称见表1。
所有样品经石河子大学李学禹先生鉴定为真品。
表1 采样地点及样品名称（略）
1.3 试剂与仪器
1.3.1 试剂RPMI1640培养基,Gibco公司；小牛血清,杭州四季青生物工程材料有限公司；HEPES，华美生物工程公司；胰蛋白酶，上海蓝季科技发展有限公司；四噻唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO), Sigma公司；顺铂(DDP)，江苏豪森药业股份有限公司；Hoechst33258染色试剂盒，碧云天生物技术研究所。
1.3.2 仪器CO2 培养箱，美国（Forma）；Metertech ∑960自动酶标仪；荧光显微镜，OlympusBX51；超净工作台，上海净化设备厂；血球记数板，上海医用光学仪器厂。
2 方法
2.1 实验样品采集与处理采集株龄一致(根茎粗细相等)的4种甘草的根茎材料，立即放入80 ℃烘箱中烘干至恒重，然后用药材粉碎机将其粉碎成粉末，过100目筛，备用。
2.2 甘草活性成分的制备
2.2.1 甘草水提物准确称取1.0 g甘草根茎干粉加10 ml蒸馏水于室温下放置48 h，12 000 r/min离心10 min，μm微孔滤膜过滤除菌，加样前用细胞培养液根据文献［11］将不同样品配制成含甘草酸为1 200 μg/ml 的受试样品。
2.2.2 甘草总黄酮准确称取1.0 g甘草根茎粉末，用250 ml无水乙醇加5滴浓盐酸溶液为提取剂在索氏提取器中于95℃的水浴加热条件下提取6 h，浓缩至30 ml，μm微孔滤膜过滤除菌，加样前用细胞培养液根据文献［11］将不同样品配制成含总黄酮为50 μg/ml的受试样品。
2.3 细胞培养BCAP-37细胞用含10％灭活小牛血清的RPMI1640培养基，加入NaHCO3 2 g/L，谷氨酰胺0.24 g/L，Hepes 2.4 g/L，青霉素100
U/ml，链霉素100 mg/ml，置于37℃, 5％ CO2孵箱中培养。
实验用细胞均处于对数生长期，常规台酚蓝计数活细胞大于95％。
2.4 细胞增殖抑制实验(MTT法)将处于对数生长期的细胞用胰蛋白酶消化后, 制成2.0×105个/ml的细胞悬液,然后以每孔100 μl接种到96孔板上, 在37℃，5% CO2孵箱中培养24 h后更换培养液，实验组加入不同的受试样品100 μl，终浓度分别为：甘草水提物中甘草酸浓度为600
μg/ml，甘草总黄酮25 μg/ml，每一样品均设8个平行孔，阳性对照组加入顺铂100 μl：终浓度50 μg/ml，空白对照组加入等体积的培养液。
继续培养24 h,48 h及72 h后，每孔加入20 μl MTT溶液(浓度为5 mg/ml)，轻振培养板，放回培养箱内再孵育4 h后，吸尽上清液，每孔中加二甲基亚砜150
μl，振荡器上振荡10 min, 用酶标仪检测各孔吸光度（OD值）测定波长
λ=570 nm。
抑制率计算公式为：抑制率(％)=〔(对照组OD值－实验组OD值)/对照组OD值〕×100％。
2.5 细胞凋亡率实验取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡20 min，
0.9%NaCl溶液洗涤3次，再用细胞培养液洗涤1次。
将盖玻片置于六孔板内，种入细胞，培养过夜，使约为50%～80%满。
加入甘草水提物和甘草总黄酮，继续培养48 h，吸尽培养液，加入0.5 ml固定液，固定10 min。
去固定液，用0.9%NaCl洗两次，3 min/次，吸尽液体,洗涤时用摇床。
加入0.5 ml Hoechst33258染色液，染色5 min,也用摇床。
用0.9%NaCl洗两次，3 min/次。
滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，尽量避免气泡。
荧光显微镜下（Ex350nm，Em460nm）随机选取5个视野拍照后计数其凋亡细胞与正常细胞，凋亡率＝〔凋亡细胞/（凋亡细胞＋正常细胞）〕
×100％。
2.6 统计学处理实验所得所有数据均经SPSS12.0 软件处理并对处理组间进行单因素方差分析，P<0.05时表示存在显著性差异。