TSKGEL色谱柱的清洗(中文)
TSKgel PW系列水相分子尺寸排阻色谱柱使用说明书
水相分子尺寸排阻色谱柱TSKgel PW系列使用说明书东曹株式会社安全注意事项［注意标签］■远离火源使用易燃溶剂时，请务必小心。
否则可能会导致火灾、爆炸或中毒。
■使用环境必须通风良好如果通风不良，易燃或有毒溶剂可能会导致火灾、爆炸或中毒。
■请勿喷洒溶剂溶剂发生喷洒或泄露可能会导致火灾、触电、中毒、受伤以及腐蚀。
清除漏出的溶剂时，请佩戴合适的护具。
■请佩戴护目镜和防护手套有机溶剂和酸属于有害物质，切勿直接接触皮肤。
■请小心处理包装处理不当可能会导致产品破裂或溶剂飞溅。
■请勿将本产品用于其他目的本产品仅可用于分离和提纯，请勿用于其他用途。
■请确认化合物的安全性请确认分离和提纯后的化合物和溶剂安全可靠。
■正确废弃请根据当地法律法规正确废弃。
注请将本说明书保存在本产品附近，以便日后参阅。
目录1. 简介 (1)2. 打开包装 (1)3. 色谱柱部件 (2)4. 安装 (2)5. 维护 (3)6. 溶剂 (4)7. 流速 (6)8. 温度 (8)9. 准备样品 (8)10. 理论塔板数和不对称因子的计算方法 (9)11. 保护柱 (10)12. 故障排除 (11)13. 质量标准和质量保证 (13)1. 简介TSKgel PW系列色谱柱是东曹株式会社开发的高效液相色谱柱，主要用于水相高效凝胶过滤色谱（GFC），适用于各类水溶性物质。
该类色谱柱适用于水溶性合成聚合物、低聚物以及生物物质，如多糖、核酸、蛋白质、肽等的分析或制备。
请仔细阅读本使用说明书，确保正确、有效地使用该类色谱柱。
表1应用领域应用领域适用的色谱柱水溶性合成聚合物水溶性生物聚合物多糖G4000PW(XL)，G5000PW(XL)，G6000PW(XL)，GMPW(XL)水溶性低聚物肽G2500PW(XL)，G3000PW(XL)非离子低聚物（低聚糖）G-Oligo-PW，G2000PW核酸G-DNA-PW注：TSKgel G-Oligo-PW和G2000PW可以在较宽的pH值范围内吸附离子型样品。
TOSOH TSKgel SW系列.色谱柱的清洗
硅胶基质分子尺寸排阻色谱柱清洗方法1.100%纯水以0.2mL/min的流速冲洗1.5小时.2.如果是疏水性吸附，以20%乙腈水溶液为流动相（用0.45um的有机相滤膜过滤），采用0.2mL/min的流速冲洗1.5小时.3.100%纯水以0.2mL/min的流速冲洗1.5小时.4.如果是离子性物质的吸附，以0.1mol/LPB（0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4）缓冲液+0.1mol/LNa2SO4溶液为流动相（用0.45um的水相滤膜过滤），采用0.2 mL/min 的流速冲洗1.5小时后，再以0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)为标准品，进样量为20uL,在UV280nm下，以0.1mol/LPB（0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4）缓冲液+0.1mol/LNa2SO4溶液为流动相检测柱效,。
5.如果是碱性物质的吸附，以pH2.5的磷酸缓冲溶液为流动相（用0.45um的水相滤膜过滤），采用0.2mL/min的流速冲洗1.5小时。
6.如果上述处理后仍未能解决问题可能是氢键的吸附，在淋洗液中添加6-8mol/L的尿素或者0.2%-0.3%的中性界面活性剂（Triton、Tween）（用0.45um的水相滤膜过滤）后以0.2mL/min的流速冲洗1.5小时。
但需要注意尿素和表面活性剂会在柱中残留。
一般不建议此项操作。
7.冲洗完成后，使用0.1mol/LPB（0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4）缓冲液+0.1mol/LNa2SO4溶液为流动相（0.45um水相滤膜过滤），0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)为标准品，进样量为20uL,在280nm检测柱效。
色谱柱冲洗方法
色谱柱冲洗方法（最新版4篇）篇1 目录1.色谱柱冲洗的必要性2.色谱柱冲洗的方法2.1 水冲洗法2.2 有机溶剂冲洗法2.3 缓冲盐冲洗法2.4 反冲法3.色谱柱冲洗的注意事项篇1正文色谱柱是液相色谱系统中的核心部件，它在样品分离过程中起着至关重要的作用。
然而，在色谱柱使用过程中，柱内可能会积累一些脏物或盐析物，影响色谱柱的分离效果。
因此，对色谱柱进行定期冲洗是非常必要的。
下面我们将介绍几种常见的色谱柱冲洗方法。
首先，水冲洗法是最常用的色谱柱冲洗方法。
此方法操作简便，只需将色谱柱连接到水流系统上，使用纯水进行冲洗。
篇2 目录一、色谱柱冲洗的必要性二、色谱柱冲洗的方法1.水冲洗法2.纯有机相冲洗法3.缓冲盐冲洗法4.反冲法5.专用清洗剂冲洗法三、不同类型色谱柱的冲洗方法1.反相色谱柱2.正相色谱柱3.离子交换色谱柱4.凝胶渗透色谱柱四、色谱柱冲洗的注意事项篇2正文色谱柱是高效液相色谱系统中的核心部件，其在样品分离过程中起到关键作用。
然而，在长时间的使用过程中，色谱柱内部可能会积累一些脏物，影响色谱柱的分离效果。
因此，对色谱柱进行定期冲洗是非常必要的。
色谱柱冲洗的方法有很多种，下面我们分别进行介绍：1.水冲洗法：这是一种最常用的色谱柱冲洗方法。
使用纯水或含有少量缓冲盐的水进行冲洗，可以有效去除色谱柱内部的脏物。
对于反相色谱柱，可以使用纯水或甲醇/水混合溶液进行冲洗。
2.纯有机相冲洗法：在冲洗色谱柱时，可以使用纯有机溶剂（如乙腈、甲醇等）来代替水相。
这种方法适用于具有疏水性的色谱柱，如 C18、C8 等。
3.缓冲盐冲洗法：在冲洗过程中，可以加入一定浓度的缓冲盐，以保持色谱柱内部的离子强度。
这种方法适用于离子交换色谱柱和凝胶渗透色谱柱。
4.反冲法：这是一种比较彻底的冲洗方法，可以有效去除色谱柱内部的沉淀物。
在反冲过程中，需要将色谱柱的流动相改为反向，并提高流速。
然而，反冲过程可能会对色谱柱造成一定程度的损伤，因此需要谨慎操作。
TSKgel SW系列色谱柱维护和修理保养
TSKgel SW系列色谱柱维护和修理保养TSKgel SW系列色谱柱紧要用于水相高效凝胶过滤色谱（GFC）。
该类色谱柱的设计适用于各类水溶性物质，如蛋白质、酶以及核酸等的分析或制备。
我们同时供应不锈钢色谱柱和玻璃色谱柱。
特别是玻璃色谱柱，不但是生物相容型的，而且还配有一个拥有塑料末端接头的高精度玻璃管。
一、故障排出使用TSKgel色谱柱时，依照以下说明可以避开大部分问题的发生。
但是，有些问题（如由色谱柱寿命、吸附物质、产生的气泡、填料干燥或溶剂凝固等引发的问题）一旦发生就无法清除，因此使用色谱柱时应特别当心。
1、末端接头堵塞假如压降加添或流速降低，应当从色谱柱逆向进液清洗末端接头。
假如无法清除堵塞，则必需替换新的接头。
2、替换末端接头准备一个新的末端接头，并从色谱柱上取下旧的末端接头。
注意不要碰到填料表面。
假如发觉柱头发生塌陷，该处空间应依照12.3节的说明使用TSKtop—off gel填充。
然后，请参照4.4节清除进口侧的空气。
3、柱头塌陷压力上升过快、使用的流速大于设定的限值、脉动式进液、频繁替换溶剂等都会引发柱头塌陷。
柱头塌陷会猛烈降低理论塔板数（N）（这类色谱柱的塔板数一般只有一般色谱柱的70%以下），而且比较简单导致拖尾峰。
发生此类现象时，请从色谱柱的进口侧取下末端接头，假如发觉空隙，请用TSKtop—off gel填充。
此时，特别是玻璃色谱柱，必需使用扭矩扳手以2.9 N・m的力道拧紧末端接头。
这样，应当可以恢复到更高的分别度。
假如由于某些特别原因，使用该方法无法恢复分别度，请替换为新的色谱柱。
4、色谱柱杂质吸附严重长时间重复使用色谱柱后，洗脱时间有时会发生猛烈变化。
此时，选择其他溶剂清洗色谱柱比较有效。
以下为几种典型的清洗方法。
①离子性吸附（清除离子性杂质）通过提高清洗液的盐浓度（通常0.5 mol/L）进行过柱清洗。
使用酸性水溶液，如磷酸盐缓冲液（pH 2.5）过柱清洗。
②疏水性吸附（清除疏水性杂质）在清洗液中添加甲醇、乙腈（10—20%）等水溶性有机溶剂进行过柱清洗。
凝胶色谱柱洗涤流程
凝胶色谱柱洗涤流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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TSKHILICAFCHICIEX系列色谱柱使用冲洗方法
TSKHILICAFCHICIEX系列色谱柱使用冲洗方法色谱柱的冲洗方法对于保护色谱柱、延长使用寿命、提高分离效果至关重要。
下面将分别介绍TSKHILIC、AFC、HIC和IEX系列色谱柱的冲洗方法。
1.TSKHILIC色谱柱的冲洗方法：a.初次使用：先用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱内可能存在的盐离子和有机溶剂。
b.然后，使用10-20mL纯水/乙醇（80:20，体积比）洗脱样品洗涤剂残留物，同时保护柱内填料。
c.最后，使用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱床中可能存在的溶剂残留物。
2.AFC色谱柱的冲洗方法：AFC（Affinity Chromatography）色谱柱是一种亲和色谱柱，常用于分离具有特定亲和性的分析物。
以下是一种常用的冲洗方法：a.初次使用：先用公认的吸附剂（如硫酸铵）溶液冲洗柱床两倍柱床体积，以平衡柱内填料，并去除可能存在的污染物。
b.然后，使用适宜pH值的缓冲液（如磷酸缓冲液）进行冲洗，以去除填料和样品中的杂质。
c.最后，使用缓冲液冲洗柱床两倍柱床体积，以达到柱床的稳定状态。
3.HIC色谱柱的冲洗方法：HIC（Hydrophobic Interaction Chromatography）色谱柱是一种疏水相色谱柱，常用于分离疏水性物质。
以下是一种常用的冲洗方法：a.初次使用：先用有机溶剂（如乙醇）冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱内可能存在的水分和杂质。
b.然后，使用含盐缓冲液进行冲洗，使样品组分与填料发生疏水相互作用，以达到最佳分离效果。
c.最后，用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除盐离子和有机溶剂残留物。
4.IEX色谱柱的冲洗方法：IEX（Ion Exchange Chromatography）色谱柱是一种离子交换色谱柱，常用于分离带有不同电荷的离子。
以下是一种常用的冲洗方法：a.初次使用：先用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱内可能存在的杂质。
b.然后，使用合适的缓冲液（含有对应离子交换基团的缓冲液）进行冲洗，以保持样品组分在填料上的稳定吸附。
TSKgelPWxl系列色谱柱介绍
分离范围（道尔顿） < 3,000 < 40,000
2,000 - 300,000 4,000 - 800,000 40,000 - 8,000,000 1,000 - 8,000,000
< 3,000 40,000 - 8,000,000
表 3 TSKgel PW 系列色谱柱与 PWXL 系列色谱柱最小理论塔板数的比较
TSKgel G2500PW 规格色谱柱几乎与大孔径规 格色谱柱具有相同的化学性质，并且可以与大孔径色
谱柱结合使用。另外，TSKgel G2500PW 色谱柱与 TSKgel G2000PW 色谱柱具有几乎相同的校准曲线。 但应当指出的是，TSKgel G2500PW 色谱柱对小分子 的分离在一定程度上不如 TSKgel G2000PW。 （4）TSKgel G-Oligo-PW 色谱柱简介
分离报告 No.037
水性尺寸排阻色谱柱简介： TSKgel PWXL 系列
目录
1. 简介
1
2. TSKgel PWXL 色谱柱的特点
1
3. TSKgel PWXL 色谱柱的基本特性
5
3-1 流速对理论塔板数的影响
5
3-2 离子特性
5
3-3 疏水性
6
3-4 对温度的稳定性
7
ห้องสมุดไป่ตู้
3-5 溶剂互溶性
8
4. 色谱柱的选择
等级
TSKgel G2500PW TSKgel G3000PW TSKgel G4000PW TSKgel G5000PW TSKgel G6000PW TSKgel GMPW
TSKgel PW 系列
7.5mm ID × 60cm
7.5mm ID ×30cm
凝胶色谱柱怎么清洗和存放
凝胶⾊谱柱怎么清洗和存放 凝胶⾊谱技术是六⼗年代初发展起来的⼀种快速⽽⼜简单的分离分析技术，由于设备简单、操作⽅便，不需要有机溶剂，对⾼分⼦物质有很⾼的分离效果。
凝胶⾊谱法⼜称分⼦排阻⾊谱法。
凝胶⾊谱主要⽤于⾼聚物的相对分⼦质量分级分析以及相对分⼦质量分布测试。
⽬前已经被⽣物化学、分⼦⽣物学、⽣物⼯程学、分⼦免疫学以及医学等有关领域⼴泛采⽤，不但应⽤于科学实验研究，⽽且已经⼤规模地⽤于⼯业⽣产。
那么，凝胶⾊谱柱应该如何进⾏清洗和存放呢？ 1.凝胶⾊谱柱的清洗。
为了不使被测物质和杂质停留在⾊谱柱中，在每次的样品分析⼯作完成之后，都应及时地清洗凝胶⾊谱柱。
⾸先要⽤对被测样品洗脱能⼒强的溶剂来洗脱凝胶⾊谱柱，以分析⼯作中常⽤的反相⾊谱分析法为例，因其先流出的物质是极性⼤的物质，此时应⽤100%的甲醇或使⽤异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性⼩的物质洗脱下来，洗脱液的⽤量⼀般为柱体积的20倍即可。
如果流动相是缓冲溶液，则应先⽤蒸馏⽔来冲洗凝胶⾊谱柱，以冲掉凝胶⾊谱柱内的盐，然后再⽤合适的溶剂来冲洗。
2.凝胶⾊谱柱的存放。
如果凝胶⾊谱柱暂时不⽤，存放时要注意以下⼏点：1.将凝胶柱⽤蒸馏⽔冲净后充上0.02%-0.05%的叠氮钠⽔溶液封存,或三氯丁醇(0.015%) 苯基汞代盐(0.001-0.01%)将⾊谱柱封闭后低温保存(温度在5℃左右)在冰箱。
2.再次使⽤时,⽤蒸馏⽔将保护溶液冲洗掉即可使⽤。
3.如果第⼆天还要使⽤也要从系统中取下，将柱封闭后存于4~8度的冰箱中冷藏。
成都摩尔科学仪器有限公司专业提供各种规格型号的凝胶⾊谱柱，如：（SRT SEC凝胶⾊谱柱，Zenix Sec 凝胶⾊谱柱，SRT-C SEC凝胶⾊谱柱，Zenix-C SEC凝胶⾊谱柱，Mono GPC凝胶⾊谱柱，Nanofilm凝胶⾊谱柱，MS-G10凝胶⾊谱柱。
）这⼏款赛分科技研发⽣产的凝胶⾊谱柱。
能够和各⼤知名（安捷伦,沃特斯,岛津,赛默飞）品牌相提并论。
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吸附的主要原因 反相硅胶柱填充介质（固定相）与样品间常常会发生下列吸附现象： （1） 残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附； （2） 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附； （3） 疏水性极强的物质在柱中的蓄积。 以上现象，会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复性不良等状况的发生。
清洗方法 1、疏水性物质的去除 使用有机溶剂（乙腈、甲醇、乙腈与 THF 的混合溶剂）进行清洗。 考虑样品成分对于有机溶剂的溶解性，选用比淋洗液浓度高的有机溶剂、或选用极性较低的有机溶 剂进行过柱清洗。这种情况下，有必要注意淋洗液中盐的析出现象。 2、碱性物质（金属配位物质）的去除 使用酸性水溶液与有机溶剂的混合液（0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、 甲醇的混合液）进行过柱清洗。 *一般来说，清洗时间可选择为过柱 5-10 个柱体积便可。 在附吸成分其吸附力极强时，即使进行过清洗，柱性能也有可能得 不到恢复。另外，请充分考虑淋洗液的 pH 值，以避免损坏色谱柱。
清洗方法
☆硅胶基质分子尺寸排阻色谱柱 根据上述发生的吸附现象，结合测定样品的具体信 息，请选择下列合适的柱清洗方法。 ☆树脂基质分子尺寸排阻色谱柱 1、离子性吸附 对于阳离子性吸附物质，通过提高盐浓度进行过柱 清洗。 （1mol/L 的醋酸缓冲液） 2、疏水性吸附 对于疏水性吸附物质，可通过提高有机溶剂的浓度 （PW ·PW XL：50%、α 及 SuperAW ：100%可） 进行过柱清洗。 3、复合吸附 对于阳离子性·疏水性物质的去除，可提高盐浓度 进行过柱，水洗后，提高有机溶剂浓度进行过柱。 *一般来说，清洗时间可选择为过柱 5-10 个柱体积便可。 在附吸成分其吸附力极强时，即使进行过清洗，柱性能也有可能得 不到恢复。另外，请充分考虑淋洗液的 pH 值，以避免损坏色谱柱。 1、碱性物质的去除（离子性吸附） 通过提高淋洗液的盐浓度（通常 0.5mol/L）进行过柱清洗。 2、疏水性吸附的去除（疏水性吸附） 在淋洗液中添加甲醇、乙腈（10-20%）等水溶性有机溶剂 进行过柱清洗。本法请注意缓冲液中盐的析出。 3、在淋洗液中添加尿素、中性界面活性剂 在淋洗液中添加 6-8mol/L 的尿素或 0.2-0.3%的中性界面 活性剂（Triton、Tween、Brij 等）后进行过柱清洗。但需 注意尿素及界面活性剂的柱中残留。
清洗方法 1、0.1-0.2mol/L NaOH 水溶液（ABA-5PW 柱不适用） 测定状态下，用 0.1-0.2mol/L 的 NaOH 水溶液通过样品进样阀清洗数次（3-5 回） 。 2、20-40% 醋酸水溶液 与上述 NaOH 水溶液的清洗方法相同。 3、在淋洗液中添加水溶性有机溶剂（疏水性吸附物质的去除） 在淋洗液中添加甲醇、乙腈等水溶性有机溶剂（浓度<20%）进行过柱清洗。 （注意盐的析出） 4、在淋洗液中添加尿素、中性界面活性剂（难溶性蛋白的去除） 在淋洗液中添加 6-8mol/L 的尿素或 0.2-0.3%的中性界面活性剂 （Triton、Tween、Brij 等）后进行过柱清洗。但需注意尿素及界 面活性剂的柱中残留。 通常情况下，使用方法 1 和 2 便可将吸附物质去除。如果方法 1 和 2 不能恢复柱效，则可使用方法 3 和 4。注意，在附吸成分其 吸附力极强时，即使进行过清洗，柱性能也有可能得不到恢复。
COLUMN CLEANING
色谱柱的清洗
兵
亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱 ●离子交换色谱柱（IEC）
SuperQ-5PW, DEAE-5PW, SP-5PW, CM-5PW, DEAE-NPR, SP-NPR, BioAssist Q, BioAssist S
●疏水反应色谱柱（HIC）
Phenyl-5PW, Ether-5PW, Butyl-NPR, BioAssist Phenyl
COLUMN CLEANING
色谱柱的清洗
亲水性乙烯基树脂基质分子尺寸排阻色谱柱
SuperAW 系列, α 系列, PW·PWXL 系列, BioAssist G6PW
硅胶基质分子尺寸排阻色谱柱 卷
பைடு நூலகம்
SW·SWXL·SuperSW 系列, BioAssist SWXL 系列
吸附的主要原因
用于高分子分子量测定的分子尺寸排阻（SEC）色谱柱有 SuperAW 系列、α 系列、PW ·PWXL 系列等产品。柱中 填充介质与样品间常会发生： （1）离子相互作用； （2）疏水相互作用等现象。 （1）离子性吸附 分子尺寸排阻色谱柱中的树脂填充介质，由于羧基带有负电荷（尽管非常少） ，样品中带有正电荷的组分将会与其发 生离子吸附作用。 （2）疏水性吸附 分子尺寸排阻色谱柱中的树脂填充介质，会与一些疏水性较高的样品（如：具苯环物质）发生疏水吸附作用。 硅胶基质的填料，常会与一些难溶性膜蛋白等疏水性物质发生疏水性吸附作用。另外，残存的硅醇基会与碱性物质 间发生离子吸附。对于硅胶基质的填料，虽然不是发生吸附作用，但必须考虑酸性条件下官能团会发生脱落或碱性 条件下硅胶基质会发生溶解的情况。
COLUMN CLEANING
色谱柱的清洗
色谱柱的清洗 色谱柱的清洗 反相硅胶色谱柱
ODS-100S, ODS-100V, ODS-100Z, Super-ODS, Super-Octyl, Super-Phenyl, ODS-80TS QA, ODS-80TS, Octyl-80TS, CN-80TS, ODS-80TM, ODS-120T, ODS-120A, TMS-250, OligoDNA RP
●亲和色谱柱（AFC）
Heparin-5PW, Chelate-5PW, Boronate-5PW, ABA-5PW, Blue-5PW, BioAssist Chelate
吸附的主要原因（非特异性吸附） 亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱，除了可选用键合了离子交换基团的离子交换柱外，还可 选用疏水反应、亲和等其他多种类型的柱子。 这些类型的色谱柱，其充填介质化学稳定性好，不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置 变化的现象。尽管如此，由于柱子的反复使用，在长时间使用后，样品组分的洗脱情况还是会发生 改变的。其原因与样品中极微量的附吸物在柱中的蓄积有关。特别由于生物样品组分复杂，这种吸 附现象时有发生。 （非特异性吸附）当观察到这样的现象后，应使用合适的溶剂将蓄积的吸附物质 去除，以恢复柱子的性能。