人教版高中生物选修3课件2.2 动物细胞培养和动物体细胞核移植课件
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人教版选修三生物课件：2.2.1动物细胞培养和核移植
有机物：糖、氨基酸、促生长因子
(2)营养
动物血清、血浆：P补46充旁培栏养题液及中小没有知完识全搞清
楚的补成充分合成培养基中所缺乏的营养物质及激素等。
36.5±0.5℃
细胞代谢
7.2~7.4
培养液的PH7
5.应用: 连线表示动物细胞培养的应用及实例
可根据变异细胞占细胞总数的比 例来判断毒性的大小。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动 物进行了100%的复制吗？为什么？
不是。克隆动物的DNA绝大部分来自供体细胞核，但还有少 量DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞的细胞质。此外， 生物的性状还受环境的影响。
17Biblioteka 思考题1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操 理由：______________________________ 作过程的不同点？ 胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性较容易。
5胚)体胎细细胞胞是核分移化使植程技度细术低得，胞到恢的复克从其隆全牛瓶能从性生壁较殖容胰方上易式。蛋上脱看白属落于酶下来，便于分装后继续培养。
2、克隆动物遗传物质的来源？
10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。
归纳：克隆动物的基因型、性别、主要性状、染色体组成均与供核个体相同。
10~50 5)体细胞核移植技术得到的克隆牛从生殖方式上看属于
2.相关概念: (1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞_贴__附__在__瓶__壁__上。 (2)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到_表__面__相__互__接__触__时, 细胞_停__止__分__裂__增__殖__的现象。 (3)原代培养:指动物组织消化后的_初__次__培__养__。 (4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现_接__触__抑__制__后,需要重新用 _胰__蛋__白__酶__等处理,然后分瓶继续培养,让细胞_继__续__增__殖__的培 养过程。
人教课标版生物选修3专题2、1《动物细胞培养和核移植技术》精品课件(共37张PPT)[优秀课件资料]
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原理： 细胞增殖
动物细胞培养的过程
胰蛋白酶或胶原 蛋白酶，使之分 散成单个细胞
取组织块
剪碎组织
用酶，处 理组织
传代培养
原代培养
细胞悬浮 液
用培养液稀释制 成细胞悬浮液
动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官
取动物组织块 剪碎组织
动物组织细胞间隙 中含有一定量的弹 性纤维等蛋白质。
分散成单个细胞
胰蛋白酶处理
此处细胞在该生活环境中能
无限生长和增殖吗？
细胞培养
胚胎或幼龄动物的组织器官
剪碎
胰蛋白酶
单个细胞
贴壁生长
加培养液制成
接触抑制
细胞悬浮液
原代培养
细随胞着洗 释在细涤、贴胞、分壁分稀离10生裂代长，以过 数内分程 量，瓶中 不保继， 断持续正培常养二倍体核型
增细加胞，增最殖后缓形成一个1单0代层细，胞
传代培养
课堂小结
动物细胞 培养和核 移植技术
动物细胞 培养
细胞培养的应用和概念 细胞培养的过程 细胞培养的条件 细胞培养技术的应用
动物体细胞 核移植技术 和克隆动物
核移植技术和克隆动物的概念 体细胞核移植技术的过程 体细胞核移植技术的应用前景 体细胞核移植技术存在的问题
随堂测试
1.在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目
我们能否利用类似植物组织培养获得完 整植物体的方法培养动物细胞，使其发 育成一个完整的个体？
能不能用高产奶牛的一个体细胞，培育出一头 高产奶牛呢？
不能，高度分化的植物细胞仍保持着全能性， 而动物细胞的全能性会随细胞分化程度的提高 逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。
全能性高低：植物细胞＞动物细胞
根据动物细胞核仍具有全能性的特点， 怎样将动物细胞的全能性表达？ 利用动物体细胞核移植技术
动物细胞培养的过程
胰蛋白酶或胶原 蛋白酶，使之分 散成单个细胞
取组织块
剪碎组织
用酶，处 理组织
传代培养
原代培养
细胞悬浮 液
用培养液稀释制 成细胞悬浮液
动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官
取动物组织块 剪碎组织
动物组织细胞间隙 中含有一定量的弹 性纤维等蛋白质。
分散成单个细胞
胰蛋白酶处理
此处细胞在该生活环境中能
无限生长和增殖吗？
细胞培养
胚胎或幼龄动物的组织器官
剪碎
胰蛋白酶
单个细胞
贴壁生长
加培养液制成
接触抑制
细胞悬浮液
原代培养
细随胞着洗 释在细涤、贴胞、分壁分稀离10生裂代长，以过 数内分程 量，瓶中 不保继， 断持续正培常养二倍体核型
增细加胞，增最殖后缓形成一个1单0代层细，胞
传代培养
课堂小结
动物细胞 培养和核 移植技术
动物细胞 培养
细胞培养的应用和概念 细胞培养的过程 细胞培养的条件 细胞培养技术的应用
动物体细胞 核移植技术 和克隆动物
核移植技术和克隆动物的概念 体细胞核移植技术的过程 体细胞核移植技术的应用前景 体细胞核移植技术存在的问题
随堂测试
1.在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目
我们能否利用类似植物组织培养获得完 整植物体的方法培养动物细胞，使其发 育成一个完整的个体？
能不能用高产奶牛的一个体细胞，培育出一头 高产奶牛呢？
不能，高度分化的植物细胞仍保持着全能性， 而动物细胞的全能性会随细胞分化程度的提高 逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。
全能性高低：植物细胞＞动物细胞
根据动物细胞核仍具有全能性的特点， 怎样将动物细胞的全能性表达？ 利用动物体细胞核移植技术
高中生物选修三专题二 动物细胞培养和细胞核移植 课件
5.为什么有时需要进行无血清培养：
在科学研究中，有时需要明确界定培养液的成分，而血清中由于
含有许多未知成分，会对研究结果有影响，因此，在进行细胞培 养时，也可采用无血清培养。无血清培养基是在基本培养基中， 添加一些已知的促进细胞生长和增殖的物质。
6.去核方法：
目前核移植技术中普遍使用的去核方法是
。还有
人教版高中生物选修3 现代生物科技专题 专题2细胞工程 2.2动物细胞工程
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
策划：霞山区黄大明名师工作室 学校：湛江市第四中学 讲授：陈泰保老师
由疫情想到的
▪ 平凡的岗位可以逆行成为英雄。——“担当” ▪ 坚守在家看似平凡，但与他国相比，我们国人却
不由显得可爱许多。——“民族自信” ▪ 一个人若没有道德底线，影响的可能只是自己，
体细胞核移植技术存在的问题
1、胚胎存活率低 2.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型 过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失 调等。 3.克隆动物食品的安全性问题引争议。 4、其他担忧
课堂小结
动物细胞培养和核移植技术
动概念：
细胞贴壁、接触抑制、 原代培养、传代培养、
蔗糖、植物激素
培养结果 培养目的
获得新个体或细胞产品
快速繁殖、培育 无病毒植株等
动物细胞培养
细胞增殖
液体培养基
葡萄糖、动物血清 大量产生细胞 或细胞产物 生产生物制品、 检测有毒物质等
动物细胞特点？
▪ 分化潜能逐渐变弱：随着细胞分化程 度的提高而逐渐受到限制，分化潜能 变弱。
▪ 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含 有保持物种遗传性所需的全套基因， 而且并没有因细胞分化而丢失基因， 因此高度分化细胞的细胞核仍具有全 能性
生物选修3动物细胞培养和核移植技术PPT课件
动物细胞培养技术是生物技术领域中的一项重要技术，广泛应用 于细胞生物学、生物医学、药物研发和生物工程等领域。
动物细胞培养的历史与发展
动物细胞培养技术最早可以追溯到20世纪初，但直 到20世纪50年代才开始有系统的研究。
1951年，卡森等人成功地进行了小鼠胚胎细胞的原 代培养，标志着动物细胞培养技术的诞生。
生物选修3动物细胞培养和核 移植技术ppt课件
目
CONTENCT
录
• 动物细胞培养技术概述 • 动物细胞培养技术的基本原理 • 核移植技术的基本原理 • 核移植技术的操作流程 • 核移植技术的优缺点与伦理问题 • 核移植技术的未来展望与研究方向
01
动物细胞培养技术概述
动物细胞培养的定义
动物细胞培养是指将动物组织或细胞从体内取出，在体外进行培 养，使其在人工条件下生长、繁殖和代谢的过程。
04
核移植技术的操作流程
供体细胞的选择与准备
供体细胞来源
选择健康、无病原体污染的动 物胚胎或生殖细胞作为供体细 胞来源。
细胞培养
将供体细胞进行体外培养，使 其分裂和增殖，以获得足够的 细胞数量。
遗传修饰
根据需要，对供体细胞进行遗 传修饰，如基因敲除、基因敲 入等。
受体细胞的准备
01
02
03
受体细胞来源
核移植技术的应用前景
核移植技术可以应用于濒危动 物的繁殖和保护，通过该技术 可以快速繁殖出大量濒危动物 个体，为物种保护提供有力支 持。
核移植技术还可以应用于动物 模型的建立，通过该技术可以 快速获得遗传背景相同的动物 模型，为疾病研究、药物研发 等方面提供有力支持。
随着技术的不断进步和应用范 围的扩大，核移植技术将会在 未来的生物医学领域发挥更加 重要的作用。
生物：2.2.1《动物细胞培养和核移植技术》课件(新人教版选修3)
出来的物质
3、克隆过程运用的技术手段？ 动物体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植 4、多利的大部分性状与谁一样？
白面绵羊
高度分化的体细胞核具有全能性 5、结论？
克隆动物的研究意义
1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.作为异种移植的供体 4.保护濒危动物
体细胞核移植技术存在的问题
原理：细胞增殖
动物细胞培养的过程（见课本）
动物胚胎或幼龄动物的组 织、器官（取材）
剪碎
（分解细胞间的蛋白） 动物组织细胞间隙中含 单个细胞 有一定量蛋白质 加培养液 细胞悬液 原代培养
遗传物质 未改变
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
10代细胞 细胞株
50代细胞
遗传物质 已改变
传代培养
细胞系 无限传代
细胞株和细胞系的区别：
1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过 大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。
2.成功率非常低 3、克隆动物食品的安全性问题。
教学反馈
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细 胞（ ） A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细 胞 2、动物细胞工程技术的基础是 （ ）
A
A.动物细胞融合 C.胚胎移植
4、动物细胞培养能否像绿色植物组织 培养那样最终培养成新个体？
不能，动物细胞培养只能使细胞 数目增多，而不能发育成个体
5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？
能
6、动物细胞培养过程中特别要注意什么？
注意时间的控制
7、能够用胃蛋白酶代替胰 蛋白酶吗？为什么？
不能，因为两者的最适PH不同， 而正常组织细胞的生存环境与胰蛋 白酶的最适PH较接近
A
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进 行；
3、克隆过程运用的技术手段？ 动物体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植 4、多利的大部分性状与谁一样？
白面绵羊
高度分化的体细胞核具有全能性 5、结论？
克隆动物的研究意义
1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.作为异种移植的供体 4.保护濒危动物
体细胞核移植技术存在的问题
原理：细胞增殖
动物细胞培养的过程（见课本）
动物胚胎或幼龄动物的组 织、器官（取材）
剪碎
（分解细胞间的蛋白） 动物组织细胞间隙中含 单个细胞 有一定量蛋白质 加培养液 细胞悬液 原代培养
遗传物质 未改变
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
10代细胞 细胞株
50代细胞
遗传物质 已改变
传代培养
细胞系 无限传代
细胞株和细胞系的区别：
1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过 大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。
2.成功率非常低 3、克隆动物食品的安全性问题。
教学反馈
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细 胞（ ） A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细 胞 2、动物细胞工程技术的基础是 （ ）
A
A.动物细胞融合 C.胚胎移植
4、动物细胞培养能否像绿色植物组织 培养那样最终培养成新个体？
不能，动物细胞培养只能使细胞 数目增多，而不能发育成个体
5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？
能
6、动物细胞培养过程中特别要注意什么？
注意时间的控制
7、能够用胃蛋白酶代替胰 蛋白酶吗？为什么？
不能，因为两者的最适PH不同， 而正常组织细胞的生存环境与胰蛋 白酶的最适PH较接近
A
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进 行；
人教版高中生物选修三2.2.1《动物细胞培养和核移植技术》ppt课件
无机物：无机盐、微量元素等。 ②营养有机物：糖、氨基酸、促生长因子 、
血清、血浆
等。
③温度和
温度： 36.5 pHpH： 7.2～7.4
±0.5 ℃哺乳动物
④气体环境OCO2：2：细维胞代持谢培养液所的必需pH的
• (3)应用
• ① 生 产 生 物 制 品 ： 如 病 毒 疫 苗单克隆、抗体干 扰 素 、
• ④温度与动物体温相近 ⑤需要O2，不需要CO2 ⑥需要O2和CO2
•
A．①②③④⑤⑥
B．①②③④
• C．①③④⑤⑥
D．①②③④
动物体细胞核移植技术和克隆动物
• 1．概念
• 将动物的一个细胞细的胞核
，移入一个已经
去掉细胞核的
中，使其
并发育成一
个 卵母细胞
，最终重组发育为动物个体。新的胚胎
• 2．分类
等。
动物细胞
• ②应用于基因工程：
是基因工程技
术中受体常细用胞 的
。
• ③应用于检测有毒物质
，判断某种物质的毒性。
• ④用于生理、病理、药理 癌药物等。
等方面的研究，如筛选抗
• [思维激活1] 进行动物细胞培养为何常选用幼龄动物 组织或胚胎作培养材料？动物细胞培养需要脱分化吗？
• 提示 幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低， 增殖能力很强，更易于培养。动物细胞培养不需经过 脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变弱， 失去了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就 没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。
• (5)人的核移植
经诱导分化，形成相
应的组织、器官后，可以用于组织器官的移植。
• (6)研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发 展过程和治疗疾病。
人教版高中生物选修3课件2.2 动物细胞培养和动物体细胞核移植课件
细胞分化程度低，恢复全能性容易
细胞分化程度高，恢复全能性不容易
（5）过程： （6）应用： 繁育优良畜群、挽救濒危动物、克隆人体器官 （7）问题：
4、无限细胞系细胞与原代细胞相比，不再具有单层、贴壁 和接触抑制现象。这些细胞带有癌变细胞的特点。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.2 培养过程
胚胎或幼龄动物的 组织器官
传代培养
剪碎
用胰蛋白酶处理 分散成单个细胞
原代培养
细胞悬液
动物胚胎或幼龄动物 的组织器官 胰蛋白酶
分散成单个细胞
（4）种类：
细胞分化程度低，恢复全能性容易
细胞分化程度高，恢复全能性不容易
（5）过程：
从卵巢中取 卵母细胞， 体外培养至 MⅡ期
将供体细 胞整个注 入去核的 卵母细胞 中
此时细胞 核靠近第 一极体。 最外层是 透明带
用物理或化学方法 激活受体细胞促进 其分裂和发育
形成的早期胚胎移 植到第三只（代孕） 母牛子宫内
用胰蛋白酶处理 分散成单个细胞
能否用胃蛋白酶？会不会把细细胞悬液
胞整个消化掉？
原代培养
原代培养：动物组织“消化”后的初次培养。
动物细胞的贴壁生长
原代培养：动物组织消化后的初次培养。
细胞贴壁：培养帖附性细胞时，悬液中分散 的细胞很快就贴附在瓶壁上。
原代培养：动物组织消化后的初次培养。
细胞贴壁：培养帖附性细胞时，悬液中分散 的细胞很快就贴附在瓶壁上。
细胞悬液 加培养液
原代培养 （分装前）
10代以内，保持 正常二倍体核型
传代培养
10代以内细胞 50代细胞
无限传代细胞
细胞增殖缓 慢，核型可 能发生变化
人教版高中生物选修3专题二动物细胞培养和核移植技术(课件 共18张PPT)
细胞贴壁图示
接触抑制
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 增加。
接触抑制
⑤要避免接触抑制让细胞继续分裂应怎么处理？ 继续用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细 胞，再分瓶培养。 ⑥正常的细胞能无限分裂吗？如果出现能无限分 裂的细胞则说明细胞发生了何种变化？ 正常细胞一般只能分裂50-60次左右，随分 裂次数的增加，增殖会逐渐缓慢直至停止，此时 细胞保持正常二倍体核型。 传代培养中会出现部分细胞获得不死性，朝 着等同于癌细胞的方向发展，这些细胞的细胞核 型发生改变。
③要使碎块分散成单个细胞应该怎么处理？ ④细胞悬液中的细胞在生长中会出现什么现象？ ⑤要避免接触抑制让细胞继续分裂应怎么处理？ ⑥正常的细胞能无限分裂吗？如果出现能无限分 裂的细胞则说明细胞发生了何种变化？
答疑解惑： ①为什么一般选用动物胚胎或幼龄个体的器官或 组织做动物细胞培养材料？ 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官的细胞分化 程度低，增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。 ②对组织块进行剪碎的目的是什么？ 增大组织块与外界溶液的接触面积。
1、动物细胞培养的概念
从动物机体中取出相关组织，将它 分散成单个细胞，然后在适宜的培养基 中，让这些细胞生长和繁殖。
思考：概念中关键词有哪些？
取出、分散、单个、适宜、繁殖
2、动物细胞培养过程：
请同学们观察动物细胞培养过程示意图并讨论以 下问题： ①为什么一般选用动物胚胎或幼龄个体的器官或 组织做动物细胞培养材料？ ②对组织块进行剪碎的目的是什么？
2.2 动物细胞工程
2.2.1动物细胞培养 和核移植技术
温故知新：
植物细胞工程常用的技术手段有哪些？
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接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接 触时，细胞就会停止分裂增殖。
传代培养：将贴满瓶壁的原代细胞重新用胰 蛋白酶处理，分装到两个或两个 以上的培养瓶中继续培养，称为 传代培养。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.2 培养过程
胚胎或幼龄动物的 组织器官
传代培养
剪碎
用胰蛋白酶处理 分散成单个细胞
电刺激使 两个细胞 融合构建 重组细胞
克隆牛
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.动物体细胞核移植和克隆动物
（1）概念：将一个动物的细胞核，移入一个已经去掉细胞 核的卵母细胞中，使其重组发育成新的胚胎， 这个新的胚胎最终发育为动物个体。
（2）结果：克隆动物
（3）原理：动物细胞核的全能性
（4）种类：
（4）种类：
细胞分化程度低，恢复全能性容易
细胞分化程度高，恢复全能性不容易
（5）过程：
从卵巢中取 卵母细胞， 体外培养至 MⅡ期
将供体细 胞整个注 入去核的 卵母细胞 中
此时细胞 核靠近第 一极体。 最外层是 透明带
用物理或化学方法 激活受体细胞促进 其分裂和发育
形成的早期胚胎移 植到第三只（代孕） 母牛子宫内
4、无限细胞系细胞与原代细胞相比，不再具有单层、贴壁 和接触抑制现象。这些细胞带有癌变细胞的特点。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.2 培养过程
胚胎或幼龄动物的 组织器官
传代培养
剪碎
用胰蛋白酶处理 分散成单个细胞官 胰蛋白酶
分散成单个细胞
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.4 应用
植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 原理
培养基性质 培养基特有成分
培养目的
植物组织培养
细胞的全能性 固体培养基
蔗糖 植物激素 快速繁殖、培育 无病毒植株
动物细胞培养
细胞增殖 液体培养基 葡萄糖 动物血清
获得细胞或 细胞分泌蛋白
原代培养
细胞悬液
关于原代培养，注意：
1、原代培养中的“代”并非细胞的“代” 数，因为培养过程中细胞经多次分裂已经产生 多代子细胞。
2、原代培养的细胞具有单层（成单层排 列）、贴壁（紧贴瓶壁生长）、接触抑制（单 细胞沿瓶壁生长汇合时生长即停止）等特点。
关于传代培养，注意：
1、需要传代培养的原因：一是细胞之间相互接触而发生接 触性抑制；二是因营养不足和代谢物积累而不利于生长或发 生中毒。
2、传代代数与细胞增殖代数不是同一概念。在细胞培养时， 所说的“第10代细胞”，仅指该细胞已经传代10次。细胞传 一代后，一般能增殖3～6次，经过潜伏期、指数生长期和平 台期。当细胞达到平台期时，就需要进行传代培养，否则细 胞会中毒，发生形态改变，甚至死亡。
3、传至10-50代左右时，增殖变缓慢乃至停止，少数细胞 的细胞核型发生改变，获得不死性（癌性）。这些能够无限 传代的细胞，称为细胞系。
用胰蛋白酶处理 分散成单个细胞
能否用胃蛋白酶？会不会把细细胞悬液
胞整个消化掉？
原代培养
原代培养：动物组织“消化”后的初次培养。
动物细胞的贴壁生长
原代培养：动物组织消化后的初次培养。
细胞贴壁：培养帖附性细胞时，悬液中分散 的细胞很快就贴附在瓶壁上。
原代培养：动物组织消化后的初次培养。
细胞贴壁：培养帖附性细胞时，悬液中分散 的细胞很快就贴附在瓶壁上。
如何培养动物细胞?
2.2.1 动物细动胞物的幼培分龄养化动和程物度组核低织移，细胞植增比殖技老能术龄
1.动物细胞培养力强，有丝分裂旺盛，更容易
培养。 1.2 培养过程
动物组织细胞间隙中含有一定 量的弹性纤维等蛋白质，将细 胚胎胞或幼网龄络动起物来的形成具有剪一碎定弹性 和组织韧器性官的组织和器官。
细胞分化程度低，恢复全能性容易
细胞分化程度高，恢复全能性不容易
（5）过程： （6）应用： 繁育优良畜群、挽救濒危动物、克隆人体器官 （7）问题：
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.动物体细胞核移植和克隆动物
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.动物体细胞核移植和克隆动物
（1）概念：将一个动物的细胞核，移入一个已经去掉细胞 核的卵母细胞中，使其重组发育成新的胚胎， 这个新的胚胎最终发育为动物个体。
（2）结果：克隆动物
（3）原理：动物细胞核的全能性
细胞悬液 加培养液
原代培养 （分装前）
10代以内，保持 正常二倍体核型
传代培养
10代以内细胞 50代细胞
无限传代细胞
细胞增殖缓 慢，核型可 能发生变化
细胞系
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.3 培养条件
无菌、无毒环境 营养：糖、氨基酸、促生 长因子、无机盐、微量元素、 动物血清等。 温度和PH：36.5±0.5℃， PH为7.2-7.4为宜。 气体环境：O2和CO2 ，CO2 可以维持培养液pH。放入 CO2 箱中培养。
专题二 细胞工程
动物细胞工程（1）
细胞工程的基本技术
植物细胞工程
动物细胞工程
植物组织培养技术 动物细胞培养技术（基础） 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术
单克隆抗体技术 细胞核移植技术
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.1概念 从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个
细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长 和增殖。
传代培养：将贴满瓶壁的原代细胞重新用胰 蛋白酶处理，分装到两个或两个 以上的培养瓶中继续培养，称为 传代培养。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.2 培养过程
胚胎或幼龄动物的 组织器官
传代培养
剪碎
用胰蛋白酶处理 分散成单个细胞
电刺激使 两个细胞 融合构建 重组细胞
克隆牛
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.动物体细胞核移植和克隆动物
（1）概念：将一个动物的细胞核，移入一个已经去掉细胞 核的卵母细胞中，使其重组发育成新的胚胎， 这个新的胚胎最终发育为动物个体。
（2）结果：克隆动物
（3）原理：动物细胞核的全能性
（4）种类：
（4）种类：
细胞分化程度低，恢复全能性容易
细胞分化程度高，恢复全能性不容易
（5）过程：
从卵巢中取 卵母细胞， 体外培养至 MⅡ期
将供体细 胞整个注 入去核的 卵母细胞 中
此时细胞 核靠近第 一极体。 最外层是 透明带
用物理或化学方法 激活受体细胞促进 其分裂和发育
形成的早期胚胎移 植到第三只（代孕） 母牛子宫内
4、无限细胞系细胞与原代细胞相比，不再具有单层、贴壁 和接触抑制现象。这些细胞带有癌变细胞的特点。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.2 培养过程
胚胎或幼龄动物的 组织器官
传代培养
剪碎
用胰蛋白酶处理 分散成单个细胞官 胰蛋白酶
分散成单个细胞
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.4 应用
植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 原理
培养基性质 培养基特有成分
培养目的
植物组织培养
细胞的全能性 固体培养基
蔗糖 植物激素 快速繁殖、培育 无病毒植株
动物细胞培养
细胞增殖 液体培养基 葡萄糖 动物血清
获得细胞或 细胞分泌蛋白
原代培养
细胞悬液
关于原代培养，注意：
1、原代培养中的“代”并非细胞的“代” 数，因为培养过程中细胞经多次分裂已经产生 多代子细胞。
2、原代培养的细胞具有单层（成单层排 列）、贴壁（紧贴瓶壁生长）、接触抑制（单 细胞沿瓶壁生长汇合时生长即停止）等特点。
关于传代培养，注意：
1、需要传代培养的原因：一是细胞之间相互接触而发生接 触性抑制；二是因营养不足和代谢物积累而不利于生长或发 生中毒。
2、传代代数与细胞增殖代数不是同一概念。在细胞培养时， 所说的“第10代细胞”，仅指该细胞已经传代10次。细胞传 一代后，一般能增殖3～6次，经过潜伏期、指数生长期和平 台期。当细胞达到平台期时，就需要进行传代培养，否则细 胞会中毒，发生形态改变，甚至死亡。
3、传至10-50代左右时，增殖变缓慢乃至停止，少数细胞 的细胞核型发生改变，获得不死性（癌性）。这些能够无限 传代的细胞，称为细胞系。
用胰蛋白酶处理 分散成单个细胞
能否用胃蛋白酶？会不会把细细胞悬液
胞整个消化掉？
原代培养
原代培养：动物组织“消化”后的初次培养。
动物细胞的贴壁生长
原代培养：动物组织消化后的初次培养。
细胞贴壁：培养帖附性细胞时，悬液中分散 的细胞很快就贴附在瓶壁上。
原代培养：动物组织消化后的初次培养。
细胞贴壁：培养帖附性细胞时，悬液中分散 的细胞很快就贴附在瓶壁上。
如何培养动物细胞?
2.2.1 动物细动胞物的幼培分龄养化动和程物度组核低织移，细胞植增比殖技老能术龄
1.动物细胞培养力强，有丝分裂旺盛，更容易
培养。 1.2 培养过程
动物组织细胞间隙中含有一定 量的弹性纤维等蛋白质，将细 胚胎胞或幼网龄络动起物来的形成具有剪一碎定弹性 和组织韧器性官的组织和器官。
细胞分化程度低，恢复全能性容易
细胞分化程度高，恢复全能性不容易
（5）过程： （6）应用： 繁育优良畜群、挽救濒危动物、克隆人体器官 （7）问题：
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.动物体细胞核移植和克隆动物
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.动物体细胞核移植和克隆动物
（1）概念：将一个动物的细胞核，移入一个已经去掉细胞 核的卵母细胞中，使其重组发育成新的胚胎， 这个新的胚胎最终发育为动物个体。
（2）结果：克隆动物
（3）原理：动物细胞核的全能性
细胞悬液 加培养液
原代培养 （分装前）
10代以内，保持 正常二倍体核型
传代培养
10代以内细胞 50代细胞
无限传代细胞
细胞增殖缓 慢，核型可 能发生变化
细胞系
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.3 培养条件
无菌、无毒环境 营养：糖、氨基酸、促生 长因子、无机盐、微量元素、 动物血清等。 温度和PH：36.5±0.5℃， PH为7.2-7.4为宜。 气体环境：O2和CO2 ，CO2 可以维持培养液pH。放入 CO2 箱中培养。
专题二 细胞工程
动物细胞工程（1）
细胞工程的基本技术
植物细胞工程
动物细胞工程
植物组织培养技术 动物细胞培养技术（基础） 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术
单克隆抗体技术 细胞核移植技术
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞培养
1.1概念 从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个
细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长 和增殖。