氨基葡萄糖盐酸盐HPLC含量检测方法(USP40)中文
盐酸氨基葡萄糖质量标准及检验操作规程
文件名称盐酸氨基葡萄糖质量标准及检验操作规程文件编号JS-SPE-YL-002版本号BS1.0 第 1 页共 7 页一、目的：规范辅料盐酸氨基葡萄糖的取样及检验操作程序，为盐酸氨基葡萄糖的采购、检验及贮存提供依据，建立评定盐酸氨基葡萄糖质量和批准放行的标准，确保物料的正常使用。
二、适用范围：适用于采购人员的采购依据，取样人员的取样依据，检验人员的检验依据，仓库保管人员的贮存依据，复核人的复核依据，质量部长的批准放行和监督的依据，QA监控的依据，盐酸氨基葡萄糖药材质量评价的依据。
三、责任者：采购人员按本规范项下规定的标准进行采购；取样人按本规范项下的取样方法执行取样操作及书写记录；检验人按本规范项下的检验方法执行检验操作及书写记录；复核人按本规范进行复核检查；质量部长按本规范进行监督和批准放行；QA按本规范对药材质量实施监控；仓库保管人员按本规范项下的贮存条件进行保管。
四、内容：1物料名称：中文名：盐酸氨基葡萄糖拼音名：Yiansuan Anjiputaotang 拉丁名：Glucosamine Hydrochloride2 物料代码：YL0073 标准依据：《中国药典》2010年版二部P12344 经批准的供应商：5 来源：本品为2-氨基-2-脱氧-D(+)-吡喃葡萄糖盐酸盐，按干燥品计算，含C6H14O3NCl应为98.0%~102%。
6 取样方法：6.1取样器具：不锈钢剪刀、不锈钢勺、75%乙醇、手套、自封袋、取样标签、留样标签6.2盐酸氨基葡萄糖属直接入药辅料，须按取样规则在洁净取样车或洁净取样间取样。
6.3用不锈钢剪刀将外包装打开，在洁净取样车或洁净取样间条件下，按2～3个不同部位各取盐酸氨基葡萄糖5～10g；每一包件取样量为25～50g，最终抽取量为200g。
20g用做微生物限度检查，其他180g取好的样品平均分成三份分别放入自封袋中，封口。
其中2份贴取样标签，用于检验和复验；1份贴留样标签，用于留样观察。
氨基葡萄糖盐酸盐标准
食品添加剂氨基葡萄糖盐酸盐3结构式、分子式和相对分子量结构式：分子式：C6H13NO5.HCl相对分子量：215.634要求4.1性状产品为白色或类白色结晶粉末。
4.2理化指标应符合表1的规定。
表14.3微生物指标应符合表2的规定。
表25试验方法除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682中规定的水。
5.1感官将样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽和状态。
5.2氨基葡萄糖盐酸盐（C6H13NO5.HCl）含量5.2.1仪器设备5.2.1.1液相色谱仪；5.2.1.2氨基柱(4.6mm×25cm，5μm)；5.2.1.310μL定量环；5.2.1.4电子分析天平(万分之一)。
5.2.2分析要求5.2.2.1鉴别：在含量测定项下记录色谱图，对照品溶液的主峰保留时间与样品溶液的主峰保留时间应一致；5.2.2.2系统适应性：拖尾因子≤2，理论塔板数≥1500，RSD≤2%。
5.2.3色谱条件5.2.3.1流速：1.5mL/min；5.2.3.2色谱柱温度：35℃；5.2.3.3检测器：紫外检测器；5.2.3.4检测器波长：195nm；5.2.3.5进样量：10μL；5.2.3.6运行时间：20分钟；5.2.4溶液制备5.2.4.1流动相溶液制备流动相A：乙腈；流动相B：称取3.5g磷酸氢二钾，加入0.25ml的氨水，用水定容至1L，混匀，用磷酸调节PH至7.5；流动相A：流动相B=75:25。
蒸馏水和所用试剂均使用色谱级，流动相要用0.45μm的有机相滤膜过滤后并超声15分钟，待用。
5.2.4.2稀释液的配制乙腈:水=50:50，蒸馏水和乙腈均使用色谱级，流动相要用0.45μm的有机相滤膜过滤后并超声15分钟，待用。
5.2.4.3对照品液精确称取对照品三份0.38g(精确至0.0002g)置于100mL容量瓶中，用稀释液溶解并定容至刻度，摇匀待用。
5.2.4.4供试品液精确称取烘干的供试品两份0.38g(精确至0.0002g)置于100mL容量瓶中，用稀释液溶解并定容至刻度，摇匀待用。
盐酸氨基葡萄糖 欧洲药典标准
盐酸氨基葡萄糖欧洲药典标准
盐酸氨基葡萄糖是一种常用的药物，其欧洲药典标准如下：
1. 名称：盐酸氨基葡萄糖（Glucosamine Hydrochloride）
2. 分子式：C6H13NO5·HCl
3. 分子量：215.63
4. 外观：白色结晶性粉末
5. 溶解性：易溶于水，微溶于乙醇
6. 鉴别试验：
（1）红外光谱法：与对照品的红外吸收光谱图相符。
（2）氯化铵试验：样品在加入氯化铵后立即产生白色沉淀。
7. 含量测定：
采用高效液相色谱法（HPLC）进行含量测定。
样品在流动相中以260nm处检测。
结果应符合规定的标准。
8. 水分测定：
样品在105℃下干燥至恒重，得到的水分含量应不超过1.0%。
9. 重金属含量：
采用原子吸收光谱法进行重金属含量测定。
结果应符合规定的标准。
10. 细菌限度：
采用菌落计数法进行细菌限度测定。
结果应符合规定的标准。
以上就是盐酸氨基葡萄糖的欧洲药典标准，这些标准对于保证药品的质量和安全性具有重要意义，同时也为相关行业提供了技术支持和指导。
HPLC法测定盐酸氨基葡萄糖颗粒中盐酸氨基葡萄糖的含量
HPLC法测定盐酸氨基葡萄糖颗粒中盐酸氨基葡萄糖的含量杨华良;雷勇胜【摘要】目的:建立HPLC法测定盐酸氨基葡萄糖颗粒中盐酸氨基葡萄糖的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,用Venusil XBP NH2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；流动相为乙腈-磷酸盐缓冲溶液(67:33)；流速1.5 ml/min；检测波长195 nm;柱温35℃.结果:在0.015 ～0.093 75 mg的范围内,盐酸氨基葡萄糖的浓度与峰面积呈良好的线性关系(r =0.999 9)；平均回收率为104.55％,RSD为0.61％.结论:本方法准确、简便、专属性强,适用于盐酸氨基葡萄糖颗粒中盐酸氨基葡萄糖的含量测定.【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2011(023)006【总页数】3页(P17-19)【关键词】HPLC;盐酸氨基葡萄糖颗粒;含量测定【作者】杨华良;雷勇胜【作者单位】天津市中心妇产科医院,天津300052;天津药物研究院,天津300193【正文语种】中文【中图分类】R927.2氨基葡萄糖是一种从天然甲壳质中提取的氨基己糖，是人体及动物体内关节组织中糖蛋白的天然成分。
本品为白色结晶性粉末，分子式为C6H13NO5。
氨基葡萄糖具有修复和维持软骨及关节功能的作用，可延缓骨性关节炎的病理过程和疾病进展。
近年来国内外已成功的将其引入到全身骨关节炎的治疗和预防。
冉兰等[1]采用比色法测定盐酸氨基葡萄糖片中盐酸氨基葡萄糖的含量，显色后在527nm处有最大吸收；庄旭琴[2]采用旋光度法测定盐酸氨基葡萄糖片中盐酸氨基葡萄糖的含量，但该方法专属性差，辅料也有可能产生影响；任连杰等[3]采用积分脉冲安培检测-高效阴离子交换色谱法测定盐酸氨基葡萄糖，优化了淋洗条件和积分脉冲安培检测条件；吴虹等[4]采用HPLC -ELSD测定盐酸氨基葡萄糖的含量；本方法参考最新的美国药典USP32 -NF27版[5]，采用HPLC-UV测定盐酸氨基葡萄糖颗粒的含量。
氨基葡萄糖盐酸盐COA出厂检验报告单
Yeast&Mold
<100cfu/g
1 Ocfu/g
大肠杆菌
E.COLI
Negative/g
Negative/g
沙门氏菌
Salmonella
Negative/10g
Negative/10g
金黄色葡萄球菌Staphylococcus Aureus
Negative/g
Negative/g
储仔条件
Storage Conditions
Preserve in tight, light-resistant containers.
结 论
Conclusion
Conforms to USP39
注：按照ICHQ3D的相关要求，针对不是有意添加元素杂质的口服产品应考虑的杂质包括镐Cd、铅Pb、碑As、汞Hg、钻Co、
HPLC
外观
Appearance
A white crystalline powder
Conformed
比旋度
Specific rotation[a]20D
+70.0°—+73.0°
+72.42°
含量
Content
98.0%—102.0%
100.0%
硫酸盐
Sulfates
<0.24%
<0.24%
干燥失重
Report Date：
生产日期：
Manufacture Date：
数量：
有效期：
Batch Size：
Expire Date:
检验项目
Items
规格Specification
结果Results
RP—HPLC法测定盐酸氨基葡萄糖胶囊中盐酸氨基葡萄糖的含量
作者 单 位 ：５ ３ ０ 广 州 钢铁 企业 集 团 医院 ０ ８ ｌ
９ ７３
国际医药卫生导 报 ２ １ 年 第 １ 卷 第 ０ 期 ００ ６ ８
Ｉ ＭＨＧＮ，Ａ ｒｌ２ １ ｐｔ ０ ０，Ｖｏ．６ Ｎ ．８ １１ ｏ０
表 １ 样 品回收率结果
表 ２ 三批供试品测定结果 （ 标示 含量 ％ ，ｎ ６） ＝
果较好 。从表 ２ 结果 可看出 ，本法 与 比色法 比较 ，
本 法更 简便 、准确 ，专 属性更 强 。
参考文献
的质量 控制 。
１ 仪 器 与试 药
２８ 重 复性试验 ．
取 同一批号 （ ８ ２ １ ） ０ １ １０ 样品 ６
份 ，制备供试 品溶液 ，测定 ，结果盐酸氨基葡萄 ９６ Ｓ ．％。 １１ 仪器 Ｗａ ｒ高效液相色谱仪 ；２ ９ 系列二 糖 的平均标 示量为 ９ ．％ ，Ｒ Ｄ为 ０７ ． ｔｓ ｅ ６０ ２９ 回收率试 验 取 已测 定含量 的盐 酸氨基葡 ． 元梯度泵 、 ９ 紫外检测 器 、 ｍ ｏ ｅ数据处理 系 ９０ Ｅ ｐｗｒ 统。德 国 Ｓ Ｒ Ｏ Ｉ Ｓ Ｃ ２ ５ Ａ Ｔ Ｒ Ｕ — Ｐ ２ Ｄ电子天平 。 萄糖胶 囊 内容 物 ，分 别精 密 称取 盐酸 氨 基葡 萄 ． ０ ０ ０ ２０ ｇ ０ ｌ １ 试药 盐酸氨基葡萄糖胶囊 （ ． ２ 批号 ： ８２ ０ ， 糖对 照品 ８ 、１．、１ ．ｍ ，各置 ２ ｍ 量瓶 中， ０ １ １３ ０ １ １０ ９ １ ０ ） ８ ２ ，００ ７ ，盐酸氨基葡萄糖对 照品 （ １ １ 中 用 水稀 释至刻 度 ，分别 进样 ，结果 见表 １ 。
氨基葡萄糖盐酸盐分析方法比较
氨基葡萄糖盐酸盐分析方法比较摘要：分别采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）、高效液相色谱-示差折光检测法（HPLC-RID）和高效离子色谱-脉冲安培检测法（HPIC-PAD）检测氨基葡萄糖盐酸盐，确定了几种方法的检测限和线性范围，考察了方法的精密度，测定了氨基葡萄糖盐酸盐的加标回收率。
结果显示，在三种方法中HPIC-PAD方法能测定到最低浓度的氨基葡萄糖盐酸盐，且具有最高的精密度；HPLC-RID方法检测限最高，精密度最差。
关键词：高效液相色谱，高效离子色谱，蒸发光散射，示差折光，脉冲安培检测前言：氨基葡萄糖类物质具有重要的生理活性，Elson-Morgan法[1]是此类物质测定的经典方法，由于其只能测定总的糖类而使其应用受到限制。
多种色谱方法在糖类的分析中发挥着重要作用，如气相色谱法[2]（GC）、凝胶色谱法[3]（GPC）、高效毛细管电泳法[4]（HPCE）、高效液相色谱法[5,,,678]（HPLC）、高效离子色谱法[9,10]（HPIC）等。
这些检测方法对不同糖类化合物的检测分析各有不同的优势。
最常用的糖类化合物的分析方法为高效液相色谱法，近年来离子色谱技术在糖类化合物分析中的应用也越来越广泛。
本文对几种糖类物质测定方法在氨基葡萄糖盐酸盐分析中的应用进行了比较，为氨基葡萄糖类物质分析的方法选择提供指导。
1、实验仪器和材料1.1试剂和样品乙腈（TEDIA，HPLC级），超纯水（Milli-Q），氨水（西陇化工，分析纯）氨基葡萄糖盐酸盐标准样品（国家海洋局第三海洋研究所），氨基葡萄糖盐酸盐对照品（中国药品生物制品检定所），硫酸氨基葡萄糖胶囊（由厦门蓝湾科技有限公司提供）准确称取、精确定容的浓度为40.00mg/mL和1.00mg/mL的氨基葡萄糖盐酸盐标准储备液。
1.2仪器和条件电子天平（Sartorius BP211D），Milli-Q Biocel A10超纯水机（Millipore）HPLC-ELSD法：Waters-Alliance 2695型高效液相色谱仪，Alltech ELSD800蒸发光散射检测器，Waters Carbohydrate柱（250 mm×4.6 mm，4μm）；流动相为乙腈：水=70：30；流速：1.0 mL/min；柱温：28oC；ELSD参数：载气流速为3.00L/min，蒸发管温度为80oC。
氨基葡萄糖盐酸盐标准
食品添加剂氨基葡萄糖盐酸盐3结构式、分子式和相对分子量结构式：分子式：相对分子量：4要求性状产品为白色或类白色结晶粉末。
理化指标应符合表1的规定。
表1 微生物指标应符合表2的规定。
表25试验方法除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682中规定的水。
感官将样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽和状态。
氨基葡萄糖盐酸盐（）含量仪器设备液相色谱仪；氨基柱×25cm，5μm)；μL定量环；电子分析天平(万分之一)。
分析要求鉴别：在含量测定项下记录色谱图，对照品溶液的主峰保留时间与样品溶液的主峰保留时间应一致；系统适应性：拖尾因子≤2，理论塔板数≥1500，RSD≤2%。
色谱条件流速：min；色谱柱温度：35℃；检测器：紫外检测器；检测器波长：195nm；进样量：10μL；运行时间：20分钟；溶液制备流动相溶液制备流动相A：乙腈；流动相B：称取磷酸氢二钾，加入的氨水，用水定容至1L，混匀，用磷酸调节PH至；流动相A：流动相B=75:25。
蒸馏水和所用试剂均使用色谱级，流动相要用μm的有机相滤膜过滤后并超声15分钟，待用。
稀释液的配制乙腈:水=50:50，蒸馏水和乙腈均使用色谱级，流动相要用μm的有机相滤膜过滤后并超声15分钟，待用。
对照品液精确称取对照品三份(精确至置于100mL容量瓶中，用稀释液溶解并定容至刻度，摇匀待用。
供试品液精确称取烘干的供试品两份(精确至置于100mL容量瓶中，用稀释液溶解并定容至刻度，摇匀待用。
样品与对照品溶液需要通过μm有机相滤头过滤后进样。
操作步骤系统适应性按液相色谱仪检验操作规程，开启仪器并使仪器达到稳定状态后,用相同体积的进样针将三个对照品溶液按顺序依次注入色谱（定量环10μL），每个对照品分别进两针，共计六针，分别计算校正因子f1……f6，利用校正因子按下式计算得：RSD≤2%。
相对标准偏差计算公式：式中：RSD——相对标准偏差；f i——第i针工作对照品的校正因子,是相应工作对照品的重量与面积的比值；f——工作对照品的平均校正因子；n——连续取了n针工作对照品校正因子。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
氨基葡萄糖盐酸盐HPLC含量检测方法(USP40)
含量测定
●过程
缓冲液：在1-L容量瓶中溶解3.5克磷酸二氢钾在水中。
加入0.25毫升氢氧化铵，用水稀释至体积，混合。
用磷酸调节pH值为7.5
流动相：乙腈和缓冲区（75∶25）
稀释剂：乙腈和水（50∶50）
标准溶液：3.8毫克/毫升USP氨基葡萄糖盐酸盐标准品稀释剂
样品溶液：3.8毫克/毫升氨基葡萄糖盐酸盐稀释剂（注意：用机械方法摇匀以帮助溶解）
●色谱系统
（参考色谱法<621>，系统适应性）
模式：LC
检测器：UV 195nm
色谱柱： 4.6-mm × 15-cm，5-µm填充 L8
柱温：35℃
流速：1.5ml/min
进样量; 10 µL
●系统适应性
样品：标准溶液（氨基葡萄糖部分的峰值在约10分钟，由于氯离子的存在色谱图上在孔隙体积附近会出现一个较大的附加峰）
适应性要求
拖尾因子：氨基葡萄糖峰不超过2.0
理论塔板数≥1500
相对标准偏差：≤2.0%
●检测：
样品：标准溶液和样品溶液氨基葡萄糖(C 6 H 13 NO 5 · HCl)含量的计算
结果=(r
U /r
S
) × (C
S
/C
U
) × 100
r
U
=样品溶液的峰面积
r
S
=标准溶液的峰面积
C
S
=氨基葡萄糖盐酸盐标准溶液的浓度
C
U
=氨基葡萄糖盐酸盐样品溶液的浓度接受标准：98.0%-102%（以干计）。