无核葡萄的胚挽救技术

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无核葡萄胚挽救苗的驯化及移栽技术

Ｊ．ＳＨＡＮＸＩＡＧＲＩＣ．ＵＮＩＶ．（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ）
雹ｌ目＿Ｉ圜圆
学报（自然科学版２ｏ１５．３５（２）：ｌ４７
００３２３３
无核葡萄胚挽救苗的驯化及移栽技术
ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎｏｆＰｏｌｌｕｔｉｏｎｉｎＥｍｒｙｏＲｅｓｃｕｅｏｆＳｅｅｄｌｅｓｓＧｒａｐｅｓ
纪薇，高美英，张鹏飞，杨忠义，牛铁荃，温鹏飞
（山西农业大学园艺学院，山西太谷０３０８０１）
摘
要：胚挽救技术是无核葡萄种质创新的重要途径之一，胚挽救苗从实验室移栽至大田的最终成活率直接影响无核
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｅｍｂｒｙｏｒｅｓｃｕｅｔｅｃｈｎｉｑｕｅｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｗａｙｓｏｆｓｅｅｄｌｅｓｓｇｒａｐｅｇｅｒｍｐｌａｓｍｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｆｉｎａｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｏｆｅｍｂｒｙｏｒｅｓｃｕｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓｆｒｏｍｔｈｅｌａｂｏｒａｔｏｒｙｔＯｔｈｅｆｉｅｌｄｉｓａｆｆｅｃｔｅｄｂｙｍａｎｙｆａｃ — ｔｏｒｓ，ｗｈｉｃｈｄｉｒｅｃｔｌｙａｆｆｅｃｔｓｔｈｅｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆｓｅｅｄｌｅｓｓｇｒａｐｅｓｂｒｅｅｄｉｎｇ．Ｗｉｔｈｓｔｅｎｏｓｐｅｒｍｏｃａｒｐｙｇｒａｐｅｖａｒｉｅｔｉｅｓａｓｍａｔｅｒｉ — ａｌｓ，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｒａｐｅｖａｒｉｅｔｙ，ｅｍｂｒｙｏｒｅｓｃｕｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓｑｕａｌｉｔｙ，ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇｍｅｔｈｏｄ，ｍａｔｒｉｘｔｙｐｅａｎｄｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｎｔｈｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｏｆｇｒａｐｅｅｍｂｒｙｏｒｅｓｃｕｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓｗｅｒｅｓｙｓｔｅｍａｔｉｃａｌｌｙｓｔｕｄｉｅｄｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ．Ｔｈｅｒｅ — ｓｕｉｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｎｔｈｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｏｆｇｒａｐｅｅｍｂｒｙｏｒｅｓｃｕｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓｂｅｔｗｅｅｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｖａｒｉｅｔｉｅｓ．Ｔｈｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇｏｆｒｏｂｕｓｔｓｅｅｄｌｉｎｇｓｃｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｍｐｒｏｖｅｔｈｒｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｏｆｇｒａｐｅｅｍｂｒｙｏｒｅｓｃｕｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓ．Ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ２００ｍｇ・ｋｇ一ｏｆＡＢＴ１０ｗａｓｄｉｐｐｅｄｆｏｒ３０Ｓ＋ｈａｒｄｅｎｉｎｇｆｏｒ１５ｄｉｎ

胚挽救育种技术

我国在 20世纪60 年代开始应用胚挽救技术，用于桃、杏的杂交育种。
我国在20 世纪90 年代初开始无核葡萄胚珠培养研究。
现在胚挽救技术在果树育种上的应用越来越广泛。
? 三、胚挽救技术的应用
? 1、培育早熟品种 ? 2、培育无核品种 ? 3、克服远缘杂种不育 ? 4、培育三倍体及其它多倍体新种质 ? 5、克服多胚品种珠心胚的干扰
1982年，Ramming 首次报道无核葡萄胚珠培养，获得了2株实生苗。
Ramming D W，Emershad R L．In ovule embryo culture of seeded and seedless Vitis vinifera L. HortScience (Abst.). 1982, 17(3): 487
4.5 胚珠培养环境的设置
低温处理：
? 在核果类的未熟胚培养中，低温对胚发育萌发有促进作用；桃、樱桃、李等核果类果树的幼胚培养，若不经过低温 (1~5℃)处理，常导致胚活力不强，萌芽力不高，易形成畸形苗。
? 在种子败育型无核葡萄的胚培养中，低温的必要性仍
看法不一。 ? 低温处理时间
? 培养基相态： 3种
不同无核葡萄品种和组合在几种胚珠发育培养基的胚发育效果
70
%) 60
ment( 50
率 develop
40
育发
bryo
30
胚 em
of 20
Percentage
10 0
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ER ER+GA0.5+IAA1.5 Nitsch+GA0.5+IAA1.5 B5+GA0.5+IAA1.5
ER(无cys no cys) MM3 BT+GA0.5+IAA1.5 MS+GA0.5+IAA1.5

无核葡萄胚挽救技术研究进展

ＤＯＩ：１０．１３４１４／ｊ．ｃｎｋｉ．ｚｗｐｐ．２０１４．０３．０１３
萄是世界上种植面积较大的水果之一，占全球无核品种作父本，但是获得无核后代的几率较低。而且育ｊ水果种植面积的１０％以上。它不仅能投产旱，种周期长；三倍体杂交育种虽可以获得无核葡萄，但是二营养丰富，而且适应性强，经济效益高 …。而无核葡萄品倍体与四倍体的亲和力差，获得杂交后代难度同样很大。种更是以其品质优良、食用方便广受消费者的喜爱ห้องสมุดไป่ตู้ 。。近因此将无核品种做母本，利用胚挽救技术，在合子胚败育年来无核葡萄育种技术取得较大进展。迄今为止，美国已之前将其取出并在适宜的条件下离体培养，使其继续发育培育出了４Ｏ多个无核葡萄品种Ｈ】，中国、日本、以色列也成苗，最终形成完整植株的话，这样便能极大地提高后代
萄也习惯称为 “ 无核葡萄 ” 。有个别葡萄品种存在种子败小的胚中获得植株，也可以获得单倍体植株从而缩短育种
育和不完全败育两种败育形态，如壬亮经过试验研究发周期】。鉴于胚挽救的种种优势，此项技术已在无核葡萄
子］，仅留有不同大小的种子痕迹。由于残存种痕很薄且针对这些胚进行早期离体培养最终获得完整植株的一种技脆，在食用葡萄时，不易感觉到它的存在，所以把这类葡术。胚挽救技术不仅影响植物问远缘杂交，而且可以从弱

无核抗病葡萄胚挽救技术体系优化及新品系培育

无核抗病葡萄胚挽救技术体系优化及新品系培育无核葡萄是当今世界葡萄消费和育种的重要方向之一。

无核葡萄的合子胚在发育过程中败育而不能发育成正常的种子,因而常规育种只能以无核品种作父本杂交选育无核葡萄品种,但后代中无核几率低(0～15.9%),育种效率低下。

胚挽救技术可用于无核葡萄作母本的品种间杂交,后代无核性状比率高(45%～82%),育种效率高,但选育的欧洲葡萄无核品种的突出缺点是缺乏抗病性。

国外已将该技术应用于无核葡萄与圆叶葡萄育种中,但又存在杂交障碍,成苗率极低的问题。

中国葡萄属野生种抗病性强,与欧亚种无核品种杂交亲合性强。

因此,利用胚挽救技术获得欧洲葡萄无核品种与中国葡萄属野生种杂交后代,以培育无核抗病葡萄新品种(系)是完全可行的。

本研究田间人工杂交38 个葡萄种间杂交组合和13 个种内杂交组合。

在前期胚挽救初步研究的基础上,本试验用19 个以无核葡萄为母本的杂交组合为试材,进行了无核抗病葡萄胚挽救的进一步研究,主要取得了如下研究结果: 1. 通过田间杂交和胚挽救获得了51 个杂交组合的葡萄新种质2998 份。

利用胚挽救技术获得19 个杂交组合幼苗814 株,其中13 个无核品种×中国葡萄属野生种(杂种)组合成苗257 株;常规田间杂交组合32 个,成苗2184 株,其中20 个中国葡萄属野生种(杂种)×无核品种组合成苗1606 株; 2. 获得了适宜无核抗病葡萄即将败育的幼胚继续发育的最佳培养基:MM3+10mmol/L 甘氨酸;建立了其最优培养方式:固液双层培养;筛选到了适宜作胚挽救母本的欧洲葡萄无核品种是爱莫无核(Olmo Seedless)、底来特(Delight)和火焰无核(Flame Seedless)。

适宜培养基、培养方式和胚挽救母本的最佳搭配使无核抗病葡萄胚发育率高达66.67%,成苗率达64.58%。

获得了一种适宜诱导合子胚胚状体再生的培养基配方:ER 固体+1.0umol/L BA。

假单性结实无核葡萄胚败育时期的确定及胚挽救影响因素的研究

假单性结实无核葡萄胚败育时期的确定及胚挽救影响因素的研究无核葡萄是当今世界葡萄消费和育种的重要方向之一。

假单性结实无核葡萄的合子胚在发育过程中败育而不能发育成正常的种子,因而常规育种只能以无核品种作父本杂交选育无核葡萄品种,但后代中无核几率低（0～15.9%）,育种效率低。

而胚挽救技术可以挽救败育的幼胚,使无核葡萄品种作母本成为了可能,大大提高了无核葡萄的育种效率。

本试验以延边地区主栽的两个无核葡萄品种无核白和布朗无核为试材,研究了胚败育时期及胚挽救的影响因素。

研究结果表明:无核白在授粉后第38天大部分胚开始败育,胚乳在胚发生败育之前已经开始败育并解体消失,随之胚也开始出现败育,并在授粉后第44天完全败育;布朗无核的胚也是伴随着胚乳的败育消失而开始大量败育的,大部分胚在授粉后第42天开始败育,并在授粉后第46天完全败育消失。

所以,无核白的最佳胚挽救时期是授粉后第37天,布朗无核的最佳胚挽救时间是授粉后第40天。

无核白的最佳胚挽救培养基为Nitsch+IAA 1.0 mg·L-1+BA 0.5 mg·L-1+GA30.5 mg·L-1,附加6%的蔗糖;在此培养基上,授粉后第37天的无核白胚珠的萌发率为42.25%,成苗率为23.96%;布朗无核最佳胚挽救培养基为Nitsch+IAA 2.0mg·L-1+BA 0.5 mg·L-1+GA3 0.5 mg·L-1,附加6%的蔗糖,在此培养基上,授粉后第40天的布朗无核胚珠的萌发率和成苗率分别为44.97%和39.74%。

用胚挽救技术创制无核葡萄及三倍体新种质的开题报告

用胚挽救技术创制无核葡萄及三倍体新种质的开题报告
背景概述：
葡萄是全球最重要的经济作物之一，其广泛的适应能力和对多种气候和土壤类型的容忍性使其成为各国重要的果树品种之一。

为了应对市场需求，保证葡萄产业的可
持续发展，需要不断研发新的葡萄品种。

无核葡萄和三倍体新种质因其具有较高的生
产性和经济效益，一直是葡萄育种的研究热点。

研究目的：
本研究旨在采用胚挽救技术，创制无核葡萄及三倍体新种质，为葡萄产业的可持续发展做出贡献。

研究方法：
1. 无核葡萄的创制：通过胚挽救技术，将已经成熟的花粉或叶片细胞脱除基因组，然后与无核葡萄雌性植株杂交，得到无核葡萄。

2. 三倍体新种质的创制：将双倍体无核葡萄与四倍体葡萄雌性花器杂交，得到三倍体新种质。

3. 分子生物学鉴定：采用PCR、酶切等分子生物学方法，对无核葡萄及三倍体新种质杂交后代进行鉴定，确保其品质与性状符合预期。

预期结果：
通过使用胚挽救技术创制无核葡萄及三倍体新种质，我们预期得到的新种质将具有较高的生产性和经济效益，并且对于葡萄产业的发展是具有重要意义的。

意义与价值：
研究结果可以创制出真正意义上的无核葡萄，可以便于人们直接食用，也能更好地满足人们在加工和储存方面的需求，有着较好的市场前景。

同时，三倍体新种质可
以通过不同的组合运用到不同地理环境中，提高葡萄品种整体的适应性，对于丰富葡
萄品种、提高葡萄产业经济效益都具有重要的推动作用。

葡萄胚挽救研究进展

葡萄胚挽救研究进展马宗新（河南科技大学林学院）摘要：本文综述了葡萄胚挽救的研究进展，以期为葡萄育种工作者提供技术参考。

胚挽救技术已成为国内外无核葡萄育种的重要方法而被广泛应用[1,2,5,22]。

Charles分离并培养了菜豆(Phaseolus)与荞麦(Fagopyrum)的胚并获得了植株。

Hannig在1904年提出胚胎组织培养的研究路线，在一些十字花科植物如萝卜上应用，取这些植物接近成熟的胚分离培养，成功地在含有无机盐和糖液的培养基上将其培养为成熟胚：Laibaeh使用不能发育成有活力种子的亚麻杂种(宿根亚麻×澳洲亚麻)将其合子胚培养成熟，获得了在自然条件下由于胚败育而得不到的杂种：Van等在1941年在诱导曼陀罗植物胚胎发育和愈伤组织形成中使用椰子汁(液体胚乳)，增加了培养基中的营养促使胚胎生长和发育，成为胚胎培养的转折点。

迄今为止，通过胚胎培养已经获得了许多由于胚败育而不能获得的杂种。

开创了胚胎培养在植物育种中应用的先河，自Rammig首次利用无核葡萄胚珠培养的方法获得了两株葡萄实生苗以来，给无核葡萄胚挽救培育新品种开辟了新的途径。

这充分证明借助胚培养技术获得无核新品种是完全可能的[1,3,6,8]。

1、胚挽救的意义胚拯救技术是基于组织培养技术发展起来的。

主要针对由于营养、生理或遗传原因，造成难以播种成苗或在发育早期阶段就败育或退化的胚进行早期离体培养主要是利用离体胚在培养基上的再次培养获得适宜的生长条件及营养成分．使发育不良的幼胚得以二次生长．分化成健康的植株体。

目前胚抢救技术在果树上应用最为广泛，其中在抢救小麦远缘杂种和葡萄三倍体育种及无核品种的培育上都取得不少成果。

胚挽救技术可以及时抢救不能继续发育的胚：通过胚拯救获得的苗瓶内生根及根尖染色体制片．及早鉴定杂交后代的倍性，大大缩短倍性育种的周期：通过胚拯救技术获得的杂交后代，可以直接快速获得更多的幼苗．极大的提高了杂交后代的繁殖速度，极大地促进育种效率。

‘弗雷无核’胚挽救适宜接种期研究

目前无核葡萄在国外葡萄市场上占据绝对的主导地位。

在我国随着经济发展,以及消费市场的日趋成熟,无核葡萄也越来越受到消费者的青睐,种植面积不断增加,市场对不同类型品种的需求日渐丰富多元化。

因此培育优质无核葡萄品种,已成为葡萄育种的主流方向。

传统的育种方法,为避免无核葡萄合子胚败育,只能用有核葡萄品种作为母本、无核品种作为父本进行杂交。

这种方法,仅能产生较少的无核后代,效率非常低,平均仅为13.5%[1]。

而使用胚培养技术,则可以使用无核葡萄作母本,有核、无核葡萄均可以作父本杂交,既可以极大拓宽亲本的选择范围,同时也可以简化育种程序,提高了后代的无核率,胚的离体培养使无核葡萄的育种周期缩短,对无核葡萄的育种有极大的促进作用。

1982年RAMMING 等[2]率先发明胚挽救技术,成功实现无核葡萄作为杂交母本,从而大幅提高无核后代的比例,使得这项葡萄育种技术得到更广泛的推广与普及应用。

国内外专家学者也正在利用这种手段进行无核葡萄的选育,到目前为止,法国、美国、日本等许多国家创造出了大量的无核葡萄新品种种质。

我国部分高校和科研院所自20世纪80年代中后期开始引进发展该技术,在无核葡萄的胚培养技术方面做了大量的工作。

目前,通过胚挽救技术已选育出了数十种新的无核葡萄品系,并培育出一些新种质[3]。

‘火焰无核’葡萄又称‘弗蕾无核’,欧亚种,原产美国,由美国Fresno 园艺试验站杂交选育而成。

1993年新疆葡萄瓜果开发研究中心将其作为资源引入新疆,1998-2001年3年品比试种,获得好评[4]。

2001年大量扩繁推广,目前已成为新疆推广面积较大的无核品种之一。

据中国农业大学梁树乐等人研究,以火焰无核为母本进行胚培养,胚萌发率以及成苗率明显高于其他10个无核品种。

因此本研究采用弗雷无核做母本,本地自育与外引品种做父本配置组合,做进一步试验研究。

1材料与方法1.1试验材料试验于2019年在石河子农业科学研究院葡萄所试验园进行,供试母本材料是8年‘弗雷无核’,3~5个中部果穗挂牌,去雄后分别与本所资源圃多年生‘无核白鸡心’‘紫香无核’‘夏至红’‘粉红亚都蜜’葡萄进行杂交,获得杂交组合。

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三、主要影响因素
4. 胚珠培养环境的设置培养条件的设置对于胚挽救也有一定的影响。如合适的温度、适量的光照及培养基适宜的pH 值都是胚挽救成功的重要条件。有研究说明，常温、黑暗比低温、光照更有利于胚珠的发育。 5. 胚培苗的移栽及其管理胚挽救苗炼苗移栽胚挽救育种的瓶颈环节。主要是因为挽救苗由无菌容器向田间移栽的过程中经历了一个由半异养到自养、高湿到低湿、恒温到变温、无菌到有菌的过程，环境条件发生了剧烈的变化。
根据其外植体的不同，胚挽救技术包括子房培养、胚珠培养和胚培养。现在由于试验条件的限制以及远缘杂交胚比正常胚弱小等原因，很难从子房中直接剥离出幼胚进行胚培养，并且子房培养与胚珠培养和胚培养相比，实验操作较为简便，而且能够获得比较满意的结果。因此子房培养应用相对要广泛一些。
胚挽救技术的应用 1、培育早熟品种 2、培育无核品种 3、克服远缘杂种不育 4、培育三倍体及其它多倍体新种质 5、克服多胚品种珠心胚的干扰
谢谢观看！
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无核葡萄的胚挽救技术
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无核葡萄的胚挽救技术
一、概念二、方法步骤三、主要影响因素四、存在的问题及今后的研究方向五、参考文献
一、概念
胚挽救（embryo rescue）
是指对由于营养和（或）生理原因造成难以播种成苗或在发育早期阶段就败育、退化的胚进行早期分离培养成苗.
五、参考文献
[1] 唐冬梅，王跃进，赵荣华，潘学军，蔡军社，张剑侠，张朝红，骆强伟.无核葡萄胚挽救中影响胚发育的因子.中国农业科学 2009,42(7):24492457. [2] 程和禾，吴雅琴，赵艳华.奥迪亚无核葡萄胚挽救技术研究[J].河北农业科技，2008，12（11）：30-32. [3] 唐冬梅，蔡军社，骆强伟，等.用于无核葡萄选育的胚挽救技术研究[J]. 果树学报，2008，25（3）：316-321. [4] 程琳琳，王跃进，石艳，等.无核葡萄胚挽救影响因素的研究[J].西北植物学报，2007，27（7）：1317-1322. [5] 范春霞，周燕，高述民，张小方.胚挽救技术应用于无核葡萄育种的研究进展.《现代农业科技》,2009 ,9 :19-20.
培养室三角瓶→温室营养钵→苗圃地
三、主要影响因素
1. 优良的树种和品种(基因型）
为保证获得杂交后的合子胚，一定要用假单性结实的无核葡萄作母本。在亲本选择时除保证无核性状外，选择并培育抗病、早熟大粒、抗逆性强等优良性状是目前的育种方向。无核葡萄胚的发育受基因型的严格控制。有研究者通过无核葡萄与有核葡萄胚挽救杂交后代的抗寒性研究，证实了葡萄抗寒性具有母性遗传现象。因此，在进行葡萄的抗寒性杂交选育中，一定要注意亲本特别是母本的选配。 2. 确定最佳胚挽救时期（胚龄）不同品种，甚至同一品种的不同植株，同一植株的不同部位，其胚发育期的长短是不同的。胚龄指从授粉开始到剥离胚培养的时间天数。胚龄越小越难培养成功，且与胚培养成苗率呈正相关。因此，胚龄是影响胚培养成功的关键因素之一。不同品种胚发生败育的时期不同。应在胚发育到最高程度，但又尚未开始败育的时期进行培养。因此，研究胚败育的过程，确定胚珠接种的最佳时期是胚挽救成功的前提。
二、方法步骤
1、葡萄的杂交
采集花粉去雄授粉
2、实验室胚挽救
4、移入大田
3、胚萌发成苗
无核葡萄胚培养：
1、取幼果，灭菌剖开果粒，取出胚珠 2、接种至胚珠发育液体培养基上
3、60天后，在解剖镜下剖开胚珠，取出胚，接种在固体胚萌发培养上
4、胚萌发长成正常苗
5、接至继代培育基上继代扩繁
胚挽救试管苗的移栽：
四、存在的问题及今后的研究方向
胚挽救技术作为一种高效育种技术，在无核葡萄的品种选育中得到了广泛地应用且进展迅速，不仅极大地拓宽了葡萄育种的范围和效率，更缩短了育种周期，推动了葡萄育种的进程。但是，这项技术还存在较多的不足，如虽然胚挽救技术较成熟，但葡萄无核性状的遗传规律理论研究较少；应用于远缘杂交育种，供选群体无核性状来源少且育种效率低，对不同无核葡萄的基因型还缺乏调节机制研究；对不同葡萄无核品种的适宜接种时期以及幼胚营养水平和培养条件深入研究不够；无核葡萄育种与常规有核杂交育种和分子辅助标记选择技术结合不紧密等。因此，立足已有的研究基础，胚挽救技术结合现代生物技术将会大大地提高优良无核葡萄品种的选育效果，而精确的基因定位技术和进一步完善并充分发挥无核葡萄胚挽救技术体系，是今后研究努力的方向。
三、主要影响因素
3. 选择适宜的培养基、激素、糖水化合物及胚珠处理方式无核葡萄胚挽救中选择适宜的培养基是获得成功的关键环节。在胚挽救过程的不同培养阶段所选用的基本培养基类型不同。在胚珠培养阶段，大多数研究者认为Nitsch 或NN 为胚发育的基本培养基效果良好，并经过多年研究总结出了适合无核葡萄胚珠培养的ER 培养基。在胚萌发和成苗培养阶段，多数研究者认为1/2MS 或Wood Plant（WP）培养基较好。经研究比较ER 和Nitsch 两种固液双层胚珠发育培养基对胚珠萌发的效果，结果发现后者更适宜于无核葡萄杂种胚的萌发和胚状体发生。因此，在胚挽救过程中，注意基本培养基应随着胚的不同发育阶段而进行及时更换。在胚挽救中，无核葡萄胚珠培养适合在较高的铵态氮的培养基上，在培养基中适当添加活性炭和0.2~0.5mg/L 的BA 对无核葡萄的胚珠发育有促进作用。为打破胚的休眠，可加入适宜浓度的GA 和IAA 取代低温处理。诱导分化阶段可加入6－BA 和NAA。在幼胚生长中，附加碳水化合物如葡萄糖和果糖等，既可提高培养基的渗透压，还可为胚的发育提供能量，对胚性生长有利，但后期胚的萌发需降低渗透压。切开胚珠可以改善胚与培养基之间的物质交流，横切的胚珠培养萌发率最高。
单性结实型（Parthenocarpy）受精卵形成的合子胚在发育过程中
(卵细胞不经过受精作用而直接发育成果实 ) 发生败育,至果实成熟时只留下种子无核葡萄残迹,杂交育种时以无核葡萄作母本将难以得到杂交后代。所以常规的无核育种方法都是以有核品种作假单性结实型（Pseudo-Parthenocarpy ）母本,无核品种只能作父本。但是这即种子败育型（Stenospermocarpy ） 85% 样的杂交组合方式获得的后代中无 (虽受精，但受精后的胚很快停止发育导致无核果实产生) 核株系比率很低。如果采用胚挽救技术将合子胚在败育之前取出,在适宜的条件下离体培养, 使其发育成无核葡萄胚挽救技术熟,并最终使胚萌发形成杂交单株, 是对假单性结实类型的无核品种，在其合子胚败育之前进行人工离体培就可用无核葡萄品种作母本, 从而养使其继续发育，最终萌发成苗，形成完整的植株。使后代的无核比率大大提高。之前，以有核材料（母本）×无核材料（父本）的杂交方式培育的无核葡萄品种的无核比率很低，且选育1 个品种的周期非常长（10 年以上）。现利用胚挽救方法可进行“无核×无核”方式杂交，通过胚挽救其后代来培育无核品种，并结合现代生物技术，从而使无核比率成倍提高，且大大缩短了品种的选育时间。自从1982 年Ramming首次报道使用胚挽救技术以来,很多学者也开展了相关研究,并不断加以完善, 使这一技术在无核葡萄育种中得到了广泛的应用
王跃进等于2000年首次开始选用中国野生葡萄作父本，与欧洲无核葡萄进行杂交，通过胚挽救技术获得无核抗病后代。
秦红无核
ห้องสมุดไป่ตู้
秦翠无核
植株生长旺盛，适宜棚架栽
培，单株产量15.8 kg，亩产 2133 kg左右，极丰产。较抗白腐病、炭疽病，轻感霜霉病、白粉病。适宜中长梢修剪，抗病性及适应性均强，栽培上加强肥水管理。