实验二减数分裂标本的制作与观察
小鼠减数分裂标本的制备及观察.
【实验内容】
一、标本制备过程 1. 处死动物，剥离睾丸。2. 取部分睾丸组织，匀浆取上皮细胞悬液。3. 悬液加入培养液小瓶，置培养箱内培养24小时。4. 培养终止前4小时， 加入秋水仙素。5. 收取细胞0.075mol/L KCL低渗处理。6. 1000rpm离 心8分钟，取沉淀。7. 甲醇：冰醋酸（3：1）固定。8. 滴片，Giemsa 染色，镜检。 二、标本的观察 1、 精原细胞有丝分裂中期相，明确小鼠染色体数目40条。 2、 使用油镜找出减数分裂各时相，着重观察第一次减数分裂的形态变化。 前期I：细线期；偶线期；双线期；终变期。 中期I：四分体排列在赤道面上； 后期I：同源染色体移向两极； 末期I：
二、绘制所观察的人口腔上皮细胞并注明基本结构。
Experiment 13
小鼠减数分裂标本 的制备及观察
【实验目的】
1. 理解小鼠睾丸组织减数分裂标本的制备技术 2. 掌握减数分裂过程中各期染色体的形态特征
【实验原理】
减数分裂是二倍体生殖细胞在形成配子时 的一种特殊的细胞分裂形式。通过小数鼠丸细胞 的体外培养以增加减数分裂相，获得分裂较高的 标本
动物生殖细胞有丝分裂过程
雌雄小鼠生期
终变期
中期I
后期
末期
【作
业】
一、分别求出使用低倍镜(10X)，高倍镜(40X)时目镜测微尺每格代表 的长度： 低倍镜：目镜测微尺每格代表的长度= 高倍镜：目镜测微尺每格代表的长度= 三、计算人口腔上皮细胞的核质比例。 计算细胞、细胞核体积的公式： 圆 形 V=4/3πr 3(r为半径) 椭圆形 V=4/3πab2(a、b分别为长、短半径) 核质比 N／D=Vn／(Vc—Vn)(Vn为核的体积，Vc是细胞的体积) ×lO(μm)= ×lO(μm)= μm μm
减数分裂的制片与观察二
3. 盖上盖玻片，在盖玻片上垫1－2层吸水纸，用 一只手稳住载玻片和盖片防止滑动，另一只手用 解剖针的针柄敲击盖片。以大拇指轻轻挤压盖玻 片，注意挤压时勿使盖玻片错位。粗滤纸可吸去 多余的染液。然后，即可将制片进行镜检观察。
4.镜检观察 先用低倍镜观察，找到一个好的分裂相，再转 用高倍镜观察。要求能够分辨减数分裂的各个 时期。
偶线期
粗线期
双线期
终变期
中期
后期
后期
前期II
中期II
后期II
末期II
四分体
小孢子
三、实验用品
实验材料：固定好的小麦花蕾 仪器物品：显微镜、镊子、解剖针 实验药品：改良品红或醋酸洋红。
四、实验操作流程
1.在擦洗干净的载玻片上加一滴醋酸洋红（或卡 宝品红）溶液，将剥取的小麦花药放在载玻片上 的醋酸洋红溶液中。用镊子和解剖针将花药撕开， 尽量将其中的花粉母细胞挤出，弃去花药壁。 2.在室温下染色 2 分钟。
实验 7 小麦花粉母细胞减数分 裂制片技术和染色体观察（二）
一、实验目的
1、学习减数分裂压片标本制备方法。 2、观察小麦花粉母细胞减数分裂过程， 掌握减数分裂各个时期特点。
二、实验原理
小麦花粉母细胞经减数分裂产生四个小孢子， 染色体数目减半为n。小孢子进一步发育为花 粉粒。
减数分裂过程
细线期
偶线期
五、实验结果与分析
1．绘出自己所制作片子的分裂相(3个时期）， 说明其时期和特点。 2. 分析自己制片操作过程中出现的问题及可能原因。
注意事项
一般中部小穗首先发育，然后依次向上、下逐 步发育，而每一小穗则基部小花首先发育。
一次取材不要太多。 用过的载玻片盖玻片必须刷洗干净。
实验二.植物花蕾减数分裂制片及观察
实验材料
大葱花序 2n=16
实验方法
1、取材：采集刚现蕾的花序置于固定液内固定24 小时后。分别放入95%、80%的酒精中依次脱水， 于70%的酒精中保存。 2、水洗花药：分别取大葱花序的上、中、下三朵 小花，放在培养皿中水洗。
3、取花药：取出花药放在载玻片上，用滤纸吸取多 余水分，用镊子和解剖针取出花药，每朵小花中有6 个花药，弃去其余部分。每一部位小花分别制片一张。
4、染色：在花药上滴加一滴改良苯酚品红染液，边 用镊子夹碎边染色10分钟，弃去其余残渣，盖上盖 玻片（防止气泡产生） 5、压片：用滤纸包住盖玻片和载玻片，大拇指压片 或用镊子轻匀敲片； 6、镜检：先在低倍镜找到有分裂相的细胞，再用 高倍镜仔细观察染色体的形态特征
实验作业及思考题
1、制作大葱花序减数分裂玻片（上、中、下三个 部位）。 2、画出减数分裂中期Ⅰ、后期Ⅰ 、末期Ⅰ 、中期 Ⅱ、后期Ⅱ、末期Ⅱ六个时期染色体形态图。 思考题：减数分裂过程中染色体的动态变化与遗 传 学三大规律之间的联系。
实验二 植物花蕾减数分裂制片及观察Fra bibliotek实验目的
1 学习和掌握减数分裂玻片的制备方法和 技术； 2 观察高等植物花粉形成过程中减数分裂各 个时期的特征以及染色体的动态变化。
实验原理
减数分离是生物体在性母细胞成熟时， 配子形成过程中发生的一种特殊的细胞分 裂。 染色体复制一次，细胞连续分裂两次， 子细胞染色体数目是母细胞染色体数目的 一半。 偶线期：联会 粗线期：交换 双线期：交叉
实验02观察蝗虫精母细胞减数分裂装片
实验02 观察蝗虫精母细胞减数分裂装片目的要求通过观察蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置和数目，加深对减数分裂过程的理解。
实验原理蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞，再形成精子。
此过程要经过两次连续的细胞分裂：减数第一次分裂和减数第二次分裂。
在此过程中，细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化，因而可据此识别减数分裂的各个时期材料用具蝗虫精母细胞减数分裂固定装片、显微镜实验步骤1、把蝗虫精母细胞减数分裂固定装片放到显微镜的载物台上，用标本夹夹好。
2、调好显微镜在高倍镜下观察，识别初级精母细胞、次级精母细胞和精细胞。
3、先在低倍镜下依次找到件数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞，再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。
4、根据观察结果，尽可能多地绘制减数分裂不同时期的细胞简图（左眼观察，右眼绘图）。
(1)宜选用雄性个体生殖器官如植物的花药、动物的精巢作为观察减数分裂的实验材料的原因：①雄性个体产生精子的数量多于雌性个体产生卵细胞的数量。
②在动物卵巢内的减数分裂没有进行彻底，排卵时排出的仅仅是次级卵母细胞，其只有和精子相遇后，在精子的刺激下，才能继续完成减数分裂Ⅱ。
(2)精巢内精原细胞既可进行有丝分裂，又可进行减数分裂，因此可以观察到染色体数为n、2n、4n的不同细胞分裂图像。
观察减数分裂实验的关键提醒（1）临时装片制作时应特别注意的几个关键环节①为了更加清晰地观察染色体形态，在解离前，一般要对动物组织进行低渗处理，其目的是凭借渗透作用使细胞膨胀，染色体铺展，同时可使黏附于染色体的核仁物质散开，以便能在一个平面上观察所有染色体形态。
②低渗处理后再进行解离固定，将细胞杀死并去除细胞之间的黏连物，使细胞彼此分开，经压片，细胞会彼此分散开，解离后进行漂洗，去除解离液对染色效果的影响，染色体容易被醋酸洋红(染)液或龙胆紫溶液染色，染色完成后进行制片并压片。
细胞生物学实验报告 细胞凝集实验
姓名郭雪飞系年级2014级生物基地班同组者科目遗传学题目减数分裂标本的制作与观察学号201400140095一、实验名称减数分裂标本的制作与观察二、实验目的1、从遗传与变异的角度掌握其解百纳过程，并理解减数分裂的意义。
2、学会正确进行生殖细胞的取材和制作减数分裂玻片标本的技术。
3、观察前期I，认识减数分裂前期I染色体的复杂变化，了解其各个时期的具体特征。
三、实验原理1、减数分裂及其意义减数分裂是生物细胞中染色体数目减半的分裂方式。
性细胞分裂时，染色体只复制一次，细胞连续分裂两次，这是染色体数目减半的一种特殊分裂方式。
减数分裂不仅是保证物种染色体数目稳定的机制，同时也是物种适应环境变化不断进化的机制。
减数分裂的结果是：成熟生殖细胞中的染色体数目比原始生殖细胞的减少一半。
减数分裂（Meiosis）范围是进行有性生殖的生物；时期是从原始生殖细胞发展到成熟生殖细胞。
它是有性生殖的个体在形成生殖细胞过程中发生的一种特殊分裂方式，不同于有丝分裂和无丝分裂，减数分裂仅发生在生命周期某一阶段，它是进行有性生殖的生物性母细胞成熟、形成配子的过程中出现的一种特殊分裂方式。
受精时雌雄配子结合，恢复亲代染色体数，从而保持物种染色体数的恒定。
另外，在减数分裂过程中同源染色体和非姐妹染色单体间发生基因重组，使配子的遗传多样化，增加了后代对环境的适应性，因此减数分裂不仅是保证生物种类染色体数目稳定的机制，同时也是物种适应环境变化不断进化的机制。
减数分裂不仅是保持物种遗传物质稳定传递的手段；在减数分裂过程中，通过同源染色体非姐妹染色单体的联会，非同源染色体的自由组合以及四分体中非姐妹染色体的部分片段的交叉互换，增加了基因变异种类，增强了群体的遗传多样性，为自然选择提供更多原材料。
姓名郭雪飞系年级2014级生物基地班同组者3、减数第二次分裂过程姓名郭雪飞系年级2014级生物基地班同组者科目遗传学题目减数分裂标本的制作与观察学号201400140095 精子：经过变形期形成精子，精子可分为头、中段和尾三部分（精子的变化过程是从圆形→椭圆形→梭形→丝状）。
减数分裂
7 镜检：先在低倍镜下找到细胞，再换 成高倍镜仔细观察。
实验报告：
1 画出在显微镜下看到的减数分裂各时期 的图像；
2 在显微镜下注意区分花粉母细胞和药壁 细胞，说明它们有什么不同；
3 结合染色体的行为，说明减数分裂过程 中有哪些重要的遗传学事件发生？
实验2 植物细胞减数分裂 及染色体行为的观察
实验目的：
1 学习用植物花药制备减数分裂玻片标本的方 法；
2 了解高等植物减数分裂的细胞学特征，重点 掌握染色体的动态变化过程，为理解遗传学的基本 遗传规律奠定细胞学基础。
实验原理：
高等植物的花粉形成过程中，花药内的某些细 胞分化成小孢子母细胞，小孢子母细胞经过减数分 裂的两次分裂，最终形成4个单倍的小孢子。在适 当的时候采集植物的花蕾，进行固定、染色、压片 等过程，可以在显微镜下看到小孢子母细胞减数分 裂的过程和染色体的变化。
大葱要选取嫩绿饱满、总苞光滑的花蕾。
2 固定：将花序总苞剥去，放入卡诺氏 固定液中，室温下处理3小时后，经95%乙醇 洗后,于70%乙醇中冷藏保存。
3 分离花粉母细胞：冲洗后的花序取上、 中、下部各2个花蕾放在载玻片上，取出花 药，用解剖针反复挤压花药，最后将药壁残 渣去除干净。
4 染色：用改良苯酚品红染液染色 10~15min。
实验材料：
大葱、蚕豆、玉米等都是可以选择的材 料。本实验选用大葱的花药。
实验用品：
用具：显微镜、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、酒精灯、铅笔、吸水纸等。
药品：蒸馏水、卡诺氏固定液、45%醋酸、改 良苯酚品红染液等。
实验步骤：
1 取材：选取适当的花蕾是实验的关键, 不同植物材料的取材时间有所不同。（Why）
【VIP专享】小鼠精巢细胞减数分裂标本的制备与观察
小鼠细胞分裂标本的制备与观察一、实验目的a)掌握小鼠精巢染色体标本制作法。
b)观察减数分裂过程中不同时期的染色体。
c)观察腹水瘤细胞有丝分裂中不同时期的染色体形态。
二、实验原理a)减数分裂（Meiosis）是发生于生殖细胞的一种特殊的细胞分裂方式，DNA复制一次，而细胞连续分裂两次，形成单倍体的精子和卵子。
减数分裂远比有丝分裂复杂，经两次细胞分裂，分别称减数分裂Ⅰ、减数分裂Ⅱ，两次分裂间又一个较短的间期，这个间期DNA不复制。
b)雄性动物精子发生于睾丸曲精细管的生精上皮细胞，由其中的精原细胞经多次有丝分裂和生长，形成初级精母细胞，初级精母细胞经减数分裂形成次级精母细胞，次级精母细胞有丝分裂成精细胞，再经一系列变化成精子。
c)因此，通过分离曲细精管、剪碎并加入液体吹打，可使官腔各种细胞游离出来，然后经过低渗、固定、染色等过程就可制成包含减数分裂各期的标本。
三、实验试剂及仪器a)材料：成年雄性小白鼠b)用品：注射器、平皿、尖头镊子、剪刀（普通剪刀、眼科小剪刀）、吸管、离心管、离心机、玻片等。
c)试剂：1、100μg/ml秋水仙素。
2 、2％柠檬酸钠溶液3、 0.075M的KCI4、3:1甲醇:冰醋酸及1:1甲醇:冰醋酸（应现配）5、PH6.8，0.01M的PBS缓冲液6、Gimesa原液7、Gimesa工作液：1份Gimesa原液加9份PH6.8，0.01M的PBS缓冲液，混匀。
工作液应现用现稀释。
四、实验步骤a)细胞收集i.小鼠精巢细胞收集1.注射秋水仙素，增加中期分裂相。
(试验前4－5小时，小鼠腹腔注射秋水仙素0.5ml（100μg/ml）。
2.取睾丸并清洗。
断颈处死小鼠，剖开腹部，取出肾形睾丸，放入盛有4－5 ml2％柠檬酸钠溶液的平皿中，洗去污血，去掉胞外脂肪等物。
3.挑出曲细精管并剪碎。
弃污液，另加柠檬酸钠溶液1 ml，用尖头镊尖将曲细精管拉出，并用眼科剪尽量将其剪碎。
4.游离并收集细胞。
制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤
制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤引言：减数分裂是生物体繁殖中一种重要的细胞分裂方式，用于有性生殖的过程中。
为了研究减数分裂的机制和过程，科学家需要制备高质量的减数分裂细胞标本。
在制备减数分裂细胞标本时，低渗处理是一个关键步骤，它可以帮助保持细胞形态和结构的完整性。
下面将详细介绍制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤。
一、材料准备1. 细胞培养基：根据实验需要选择适当的培养基，如DMEM或RPMI-1640等。
2. 10% PBS：将PBS溶液稀释至10%浓度。
3. 磷酸缓冲液（PB）：配制1M磷酸二氢钾（KH2PO4）和1M磷酸二氢钠（Na2HPO4）溶液，并按比例混合得到pH为7.4的PB缓冲液。
4. 0.25% 吡啶蓝溶液：将0.25g吡啶蓝溶解在100ml PB缓冲液中。
5. 2% 钾氯化铷（KCl）溶液：将2g KCl溶解在100ml去离子水中。
二、细胞处理1. 细胞收集：将培养皿中的细胞用PBS洗涤一次，然后加入足够的PBS悬浮细胞。
2. 离心：将细胞悬液转移到离心管中，并以1000rpm的速度离心5分钟，倒掉上清液。
3. 固定：用10% PBS缓冲液固定细胞，将固定液滴加到细胞沉淀上，轻轻混匀，静置15分钟。
4. 再次离心：以相同的速度和时间离心，倒掉上清液。
三、低渗处理1. 加入低渗处理缓冲液：向沉淀中加入足够的0.25% 吡啶蓝溶液，使其完全浸泡细胞沉淀。
2. 低渗处理时间：根据实验需要和样本类型确定低渗处理时间。
通常情况下，10-30分钟的低渗处理时间足够保持细胞形态和结构的完整性。
3. 再次离心：以相同的速度和时间离心，倒掉上清液。
四、细胞固定1. 加入固定液：向沉淀中加入足够的2% KCl溶液，使其完全浸泡细胞沉淀。
2. 固定时间：根据实验需要和样本类型确定固定时间。
通常情况下，10-30分钟的固定时间足够保持细胞形态和结构的完整性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
【实验项目】减数分裂标本的制作与观察
实验二减数分裂标本的制作与观察
〖目的和要求〗
通过本实验，掌握减数分裂标本的制作方法，观察减数分裂过程中染色体的动态变化。
了解减数分裂在遗传学中的意义和重要性。
〖实验原理〗
减数分裂是配子形成过程中所特有的细胞分裂方式。
减数分裂过程中，染色体只复制一次，核分裂两次，形成的配子中染色体的数目变为原来的一半，雌、雄配子的结合就保证了染色体数目的恒定。
在分裂过程中可以辨认染色体形态和数量上的动态变化，从而为遗传学研究中远缘杂中的分析、染色体工程中的异系鉴别，常规的组型分析以及三个基本归路的论证，提出了直接与间接的依据。
〖实验材料〗
植物花及花序，性成熟的蝗虫
〖用具和药品〗
显微镜、剪刀、镊子、单面刀片、载玻片、盖玻片等
卡诺氏固定液、石炭酸品红（或醋酸洋红）染色液、改良苯酚品红
〖实验步骤〗
（一）花药涂压法
1. 取材：选取适当大小的花蕾，是观察花粉母细胞减数分裂的关键步骤，减数分裂时的植株形态和花蕾的大小，依植物种类和品种不同，须经过实践记录，以备后来参考。
通常应从最小的花蕾起试行观察，在花冠现色和花药变黄（或红、紫）之前为好。
凡是白天开花的，可在上午7—10时固定。
2. 固定：卡诺固定液中固定2-24h。
固定后，保存在70%的酒精中，放入冰箱中冷藏供用。
3. 染色与压片：
1）取固定好的花蕾置载玻片上，吸去多余的保存液，用解剖刀及刀片解剖出一个花药，视花药大小横切为3—4段（纵切）。
2）加一滴染液，用解剖针轻压花药，使花粉母细胞从切口出来，静置染色5~10分钟，此时可从不同大小的花中连续取出几个花药，进行同样的染色处理。
3）依次将载玻片在酒精灯上来回移动几次轻微加热，同时用解剖针轻微拨动花药以促进着色，进一步去除残存的花药壁，滤纸吸去多余染液。
4)加盖玻片，在盖玻片上覆以滤纸，用拇指均匀用力压下，勿使盖玻片移动或压破。
4. 镜检。
先在低倍镜下寻找花粉母细胞，一般花粉母细胞较大，圆形或扁圆形，细胞核大，着色较浅。
而一些形状较小，整齐一致着色较深的细胞是药壁体细胞，一些形状处于中间略呈扇形的细胞是从四分体脱开后的小孢子或幼小花粉粒。
如形状较大，内部较透明并具有明显外壳的细胞则是成熟的花粉粒。
观察到有一定分裂相的花粉母细胞后，用高倍镜观察减数分裂各时期染色体的行为和特征。
（二）蝗虫精巢制片
1.取材和固定
野外捕捉成体雄性蝗虫，浸入卡诺氏固定液中固定，或摘去头部浸泡在生理盐水内。
2.解剖精巢。
取出蝗虫，用剪刀剪去头胸部，然后在腹部两侧各剪一刀，掀开背板，取出消化道背面两条黄色的团块即是精巢。
它是由许多精小管组成。
3.染色及压片。
1)用镊子取一小段管状精巢（长度最好不超过1mm），置于载玻片上，用解剖针将精小管纵向挑开，滴加适量的醋酸洋红液（改良中性红液），染色15~20min。
2）盖上盖玻片，在酒精灯上过2~3次热，上覆吸水纸，压片。
4. 镜检。
镜下可见呈圆形、核大、染色较深的精原细胞，精母细胞，减数分裂各时期的细胞，同时可观察到细胞小、核大、胞质少的精细胞和精子。
〖注意事项〗 1.注意取材的时间 2.压片时，防止起泡产生。
〖作业〗1. 根据减数分裂不同时期的典型细胞，侧重于染色体的动态变化，绘成见图，并加以注释。
2. 列表比较减数分裂和有丝分裂的异同。