产酶条件优化方案
提高发酵产酶量的措施
提高发酵产酶量的措施一、优化培养条件1.1温度：在一定的温度范围内，大部分酶的活性随着温度的升高而增强。
因此，可以通过调整培养温度来提高发酵产酶量。
1.2 pH值：酶的活性受pH值影响较大，只有在适宜的pH值条件下，酶的活性才能得到充分发挥。
因此，可以通过调节培养液的pH值来提高发酵产酶量。
1.3溶氧浓度：对于好氧菌，发酵过程中的溶氧浓度对产酶量有显著影响。
可以通过调整搅拌速度和通气量来控制溶氧浓度，从而提高发酵产酶量。
二、基因工程2.1构建高产酶的基因工程菌：通过基因工程技术将目的基因导入到菌种中，构建高产酶的基因工程菌，从而提高发酵产酶量。
2.2基因表达调控：通过基因表达调控手段，如诱导表达、补料表达等，来提高目的基因的表达水平，从而增加发酵产酶量。
三、添加诱导物添加适当的诱导物可以促进酶的合成，从而提高发酵产酶量。
诱导物可以是天然的，也可以是人工合成的。
选择合适的诱导物并根据实验条件优化其浓度是提高发酵产酶量的有效手段。
四、细胞固定化通过固定化技术将菌体固定在载体上，可以提高菌体的生长速度和存活率，同时延长菌体的寿命并提高产酶量。
选择合适的固定化载体和工艺参数是实现这一目标的关键。
五、补糖与补料5.1补糖：通过适时补充葡萄糖等营养物质，可以促进菌体的生长和代谢，从而提高发酵产酶量。
同时，控制补糖速率和浓度可以有效避免对菌体生长和产酶的抑制作用。
5.2补料：适当的补料可以延长发酵周期，提高产物浓度。
选择合适的补料种类和添加时机是关键。
六、降低产物抑制6.1控制产物浓度：产物浓度过高可能会对菌体的生长和产酶产生抑制作用。
因此，在发酵过程中应控制产物浓度在适宜范围内，避免其对发酵过程的影响。
6.2添加抗抑物：某些物质如丙酮酸、硫酸铵等可以减轻或消除产物对菌体生长和产酶的抑制作用。
在发酵过程中适时添加这些物质可以提高发酵产酶量。
七、提高搅拌速率提高搅拌速率可以增加溶氧浓度，促进菌体生长和代谢。
但同时也会增加能源消耗和剪切力对菌体的损伤。
稻草秆腐解菌产酶条件优化及菌种鉴定
稻 草 秆腐 解 菌 产酶 条 件优 化 及 菌 种 鉴 定
魏赛金 ， 王世强 ， 胡殿 明 ， 倪 国荣 ， 涂 国全 ， 潘 晓华ｈ
（ １ ． 江西农业大学 作物生理生态与遗传育种教育部重点实验室／ 江西省作物生理生态与遗传育种重点实验室 ， 江西
南昌 ３ ３ ０ ０ ４ ５ ； ２ ． 江西农业 大学 生物科学与工程学 院 ， 江西 南 昌 ３ ３ ０ ０ ４ ５ ）
江西农 业大 学学 报
２ ０ １ ３ ， ３ ５ （ ５ ） ： １ ０ ４ ２—１ ０ ４ ７
ｈ ｔ ｔ ｐ ： ／ ／ ｘ ｕ ｅ ｂ ａ ｏ ． ｊ ｘ ａ ｕ ． ｅ ｄ ｕ ． ｃ ａ
Ｅ —ｍａ ｉ ｌ ： ｎ ｄ ｘ ｂ ７ ７ ７ ５ ＠ ｓ ｉ ｎ ａ ． ｃ ｏ ｍ
Ａｃ ｔ ａ Ａｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｈ ｕ ｒ ａ ｅ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ａ ｔ ｉ ｓ Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｘ ｉ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ
２ ． Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｂ ｉ ｏ ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｉ ｒ ｎ ｇ ， Ｊ Ａ Ｕ， Ｎ ａ ｎ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ３ ３ ０ ４５ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｓ ｔ ａ ｒ ｔ ｉ ｎ ｇ ｆ ｒ ｏ ｍ ｐ ｒ ｏ ｍｏ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｃ ｏ ｍｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ ｓ ｔ ｒ ａ ｗ ｓ ｔ ａ ｌ ｋ ｓ ， ｔ ｈ ｅ ｉ ｍｐ ａ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ａ ｖ ａ ｉ ｌ ａ ｂ ｅ ｃ ａ ｒ ｂ ｏ ｎ
腈水解酶重组茵发酵产酶条件的优化及应用
Ｃｈ ｍｉｔｙ ＆ Ｂｉｅｎ ｉｅ ｉｇ ｅ ｓｒ ｏ ｇ ｎ ｅｒ ｎ
ｄ ｉ１ ． ９ ９ ｊｉｓ ． ６ ２ ４ ５ ２ １ ． ３ ０ ６ ｏ ：０ ３ ６ ／．ｓｎ １ ７ —５ ２ ． ０ ２ ０ ． ０
腈 水 解 酶 重 组 茵 发 酵 产 酶 条 件 的优 化 及 应 用
解 酶 基 因 的 工 程 菌 Ｅ．ｏｉ Ｌ １ Ｄ ３ ／ Ｅ ８ （ ） ｃｌ Ｂ ２ （ Ｅ ） ｐ Ｔ２ ｂ ＋ 一
Ｒ一 一）扁 桃酸 的生 产 方 法 主 要 有 化 学 法 和 生 物 （ 一
法 ， 中生物 法 中的腈水 解酶 催化法 由于底物 价廉 、 其 反 应 条件 温 和 、 环境 污染小 、 化率高 、 物光学 纯度 高 ， 转 产
Ｘ ｅ ［ ¨ 通 过大 规 模 的筛 选 和育 种 ， 得 一株 ｕ等 １ ］ 获 高活 性 的 立 体 选 择 性 腈 水 解 酶 菌 株 Ａ． ａ ｃ ｌ ｆ ｅａｉ ｓ
Ｚ ＵＴ １ ， 利用该 腈水 解 酶 进行 了生 物催 化 外 消旋 Ｊ Ｂ ０并 扁桃 腈生 产 Ｒ一 一）扁 桃酸 的研究 。用 Ｐ Ｒ方法 扩增 （ 一 Ｃ 出 Ａ． ａ ｃｌ Ｊ ｆ ｅａｉ Ｚ ＵＴＢ ０腈 水 解 酶 基 因 ， 将 其 插 入 ｓ １ 并
到重视 。
到表 达 载 体 ｐ Ｔ ８ （ 中 ，Ｐ Ｇ 诱 导 后 ， 水 解 酶 Ｅ ２ ｂ ＋） Ｉ Ｔ 腈
在 大 肠 杆 菌 胞 内 进 行 了 活 性 表 达 ， 有 较 高 的 活 具
性 川。 ，
作者 在此 优化 了含 有 Ａ． ａ ｃｌｓ Ｊ ｆ ｅａｉ Ｚ ＵＴＢ Ｏ腈 水 Ｉ
产蛋白酶菌的筛选及产酶条件优化
大庆师范学院本科生毕业论文蛋白酶产生菌培养条件的条件优化院(部)、专业生命科学学院生物技术研究方向微生物学学生姓名朱琳学号200901122598指导教师姓名张亦婷2013年06月01日摘要采用大庆师范学院生命科学学院花园附近土壤、农田土壤及体育场附近土壤作为样品，并从中筛选分离并得到产蛋白酶能力较高的菌株，经过初步鉴定该菌株属芽孢杆菌。
通过对其产酶条件进行优化，结果显示该菌产酶最佳碳源为质量浓度15g/L的乳糖，最佳氮源为质量浓度20g/L的尿素，最适初始pH值为6.5，最适发酵温度为35℃。
关键词：菌种筛选；鉴定；蛋白酶；条件优化AbstractThe sewage treatment plant soil near east institute, soil and soil samples near farms .Using milk hydrolysis circle screening model separating screening in high ability get protease whr1 strains. Preliminary appraisal of the fungus belong to bacillus. After the optimization of the condition, the capability of whr1 was improved, the optimal condition is: carbon source is sucrose 15g/L; nitrogen source is Yeast extract 20g/L, the pH is 6.5; fermentation temperature is 35℃.Key words：Screening；Identified；Protease；Conditions optimization目录摘要 (1)Abstract (2)1 引言 ...........................................................................................................................................................2 材料与方法 (3)2.2.2 实验材料 (3)2.2.1 菌株筛选 (3)3.1 菌株筛选 (6)3.1.1 菌株的分离筛选 (6)2.3 条件优化 (7)2.3.1 不同碳源对产酶的影响 (7)2.3.3不同氮源对产酶的影响 (8)2.3.4 培养基不同初始pH值对产酶的影响 (9)2.3.5 不同温度对产酶的影响 (10)4 结论 (10)11 引言蛋白酶是催化蛋白质中肽键水解的酶，是一类广泛应用于皮革、毛皮、丝绸、医药、食品、酿造等方面的重要工业用酶，也是目前世界上产销量最大的商业酶，其市场占有率约占整个商品酶销售量的60％，微生物蛋白酶从微生物中提取，不受资源、环境和空间的限制，具有动物蛋白酶和植物蛋白酶所不可比拟的优越性。
一株碱性α-淀粉酶产生菌的筛选及产酶条件优化
Ｆ ｏ ｎ ｕ ｏ ｄａ ｄＤｒｇ
２ １ 年 第 ｌ 卷第 ０ 期 ００ ２ ５
１７ ６
一
株碱 性 淀粉 酶产生菌 的筛选及产 酶条件优 化 一
宋 燕，李 津
（ 山东博士伦福瑞达制药有 限公司， 山东 济 南 ２ ０ ０ ） ５ １ １
摘 要 ： 目的 获 取 工 业 生 产 上 有 潜 在 应 用 价 值 的 碱 性 淀 粉 酶 产 生 菌 。 方 法 土 壤 中 筛 选 出５ 产 淀 粉 酶 的 菌 株 ； 经 正 交 株 试 验 确 定 培 养 基 的 最 优 组 成 ； 通 过 摇 瓶 发 酵 初 步 确 定 了 发酵 条 件 。 结 果 产 淀 粉 酶 活 性 最 高 的 为 来 源 于 草 地 土 壤 的 菌 株
Ａｆ ｒｃ ｌｖ ｔｄ ｆｒ８ｈｉ ｈ ｋ ｒａ ０ ℃ ｗｉ ０ｒ ｎ ｔｅａ ｌｓ— ｒｄ ｃｎ ｃｉｉ ｆ １一 ｅ ｃ ｅ １ ｔ ｕｔ ａｅ ｓ ａ ｅ ｔ ｅ ｉ ｏ ｎ ４ ｔ １ ／ ， ｈ ｍｙ ａｅｐ ｏ ｕ ｉｇ ａ ｔ ｔ ｏ ￥Ｉ ６ｒａ ｈ ｄ２ Ｕ／ ｈ ８ ｍｉ ｖｙ １４
Ｓ ＯＮＧ Ｙａ ＬＩ ｉ ｎ， ｎ Ｊ
（ｈ ｎ ｏ ｇ ａ ｓｈ Ｌ ｍ ｄ ｈ ｒ ｃｕｉ ｌ ｏ Ｌｄ Ｊｎ ｎ ５ １ １ Ｃ ｉ ） Ｓ ａ ｄ ｎ ｕｃ ＆ ， ， ２ ａ Ａ ｓ ａ ｔ Ｏｂ ｅｔ ｅ ｏｏ ｔｉ ｌａｉｅａ ｌｓ—ｒｄ ｃ ｇｓ ａ ｓ ｉ ａ ｅｐ ｔ ｔ ｌ ａｕ ｓ ｎｔｅｉｄ ｓ ｙ ｂ ｔ ｃ： ｊｃｉ Ｔ ｂａｎａ ｌ ｍｙａｅｐｏ ｕ ｉ ｔ ｉ ｃ ｈ ｖ ｏｅ ｉ ｌｅ ｕｔ ． ｒ ｖ ｋ ｎ ｎ ｒ ｎ ｗｈ ｈ ｎ ａｖ ｉ ｈ ｎ ｒ
／．，它在发酵８ｈ ／６ 时产酶 能力最强 ；优化后 的培养 基为玉米粉３％，蛋 白胨０８％，磷酸氢二钠０６％，硫酸铵０ ． ． ． ２％，氯 化铵０１ ． ５％，ｐ ．。于４ Ｈ ９０ ０℃，１０ｒ ｎ ８ ｍｉ条件 下培养，菌株 ／ ６ ／ ／ ．酶活性 可达 到２１４Ｕ ｍＬ １ ／ 。结论 筛选 出５ 株产淀粉酶 的菌 株 ，其 中菌株 ／ ６ 株耐碱性Ⅱ淀粉酶产 生菌 。 ／一是１ 一 关键词 ：碱性 淀粉 酶；菌株筛选；正交试验 ；优化
产酶条件优化实验
产酶条件优化实验
产酶条件优化实验是一种常用的方法，用于确定最佳的培养条件以提高酶的产量。
以下是一些常见的优化实验方法：
1. 培养基成分优化：通过调整培养基中的碳源、氮源、无机盐等成分的浓度和比例，来寻找最适合酶产量的组合。
2. 培养条件调控：包括温度、pH值、培养时间、初始菌液浓度等的调节，以找到适合酶活性和细胞生长的最佳条件。
3. 添加辅助物质：有些辅助物质如酶诱导剂、共诱导剂等可以促进酶的合成和分泌，通过添加适当的浓度来增加酶的产量。
4. 营养补充：通过添加适量的酵母提取物、维生素、微量元素等来增加细胞代谢活性，从而提高酶的产量。
5. 发酵工艺优化：对发酵参数如搅拌速度、通气量、发酵方式等进行调整，以提高产酶效果。
需要根据具体的产酶菌株和酶的类型进行实验设计和优化，建议在科学研究机构或者相关实验室进行操作以确保安全和可靠性。
产脂肪酶菌株的筛选及产酶条件优化
霞品研究与开发
Ｆｏ ｄＲｅｅ ｒ ｈ Ａｎ ｖ ｐ ｎｔ ｏ ｓａ ｃ ｄＤｅ ｄｏ ｍｅ
２１ ０ １年 ６月
第３ 卷 期 １ ２ 第６ １ ９
产脂肪酶菌株的筛选及产酶条件优化
李 鑫玲 ’孙晓菲 ’孟楠 ’ 卜 ， ， ， 美玲 ’刘进 。
（． １河南科 技大学 食 品与生物 工程学 院 ， 河南 洛阳 ４ １０ ； ． 岛啤酒 （ ７０３ ２青 太原 ） 有限公司 ， 山西 太原 ０ ０ ３ ） ３０ ２
４ 结 语
Ｃ ｏｅｅ ［ ． ｕｒｉｎＲ ｓａｃ ， ０ ，６ ５ ６ ５ ０ ｒ ａ ｔｎｓＪ Ｎ ｔ ｔ ｅｅｒｈ ０ ６２ ： ５ — ６ １ ｉｏ ２ 【】 Ｊｎ ａ Ｍ． ｏｄ ＇－ ｕｉ＇ ｅ ｎ ｒ ｏｏｅ ｕ ｕ ｅＣ ｓ ｏ ３ ａｎｔ Ｒ ｌａ Ｇ ｔ ｒ ｚａｄＭａ ａＤ ｌｒｓＬ ｑ ｅｄ ａｔ ． ｎ ｅｒ ｉ ｒ
摘 要 ： 土壤样本 中分 离出一株具有较 高活力 的产脂肪酶 菌株 ， 步确定为假 单胞菌属。对该 脂肪 酶产 酶条件进 从 初
行 优 化 ， 佳 碳 源为 糊精 、 最 氮源 为 硫 酸铵 ， 适发 酵 温度 为 ３ ， 最 ０℃ 最适 起 始 ｐ 为 ７ 。 Ｈ ． ０
关键词 ： 脂肪酶 ； 假单胞菌属 ； 产酶条件
６・ Ｏ
芎。 ０ 墓４ 。 ０
赡 ３０ ．
速搅 拌均匀 ， 高压灭菌倒板前再用磁力搅拌器混匀 ； 种
子培养 基 （ ： 萄糖 ２ ，Ｎ ２ ．， Ｐ ４ ．， ％）葡 ． （ Ｈ ） ０ ０ ＫＨ Ｏ ０１ ０ ｓ ５ 橄榄油 １ ， Ｓ ７ ． ， 白胨 ２５ ｐ ．； 酵 ． ＭｇＯ ・Ｈ ００ ５ 蛋 ０ ０ ．，Ｈ ７ 发 Ｏ 培养基（ ： 白胨 ２ ， ％）蛋 ． 蔗糖 ０ ， ０ ． 橄榄油 １ ，Ｎ ４￣ ４ ５ ． （ Ｈ ） Ｏ ０ Ｓ
赊店老酒大曲中耐高温霉菌的筛选与产酶条件优化
赊店老酒大曲中耐高温霉菌的筛选与产酶条件优化1. 引言1.1 背景介绍赊店老酒大曲是一种传统酿酒工艺中使用的主要发酵剂，其在酿造过程中起到很重要的作用。
在大曲中，存在着各种微生物，包括霉菌。
随着酿酒技术的不断发展，对大曲中微生物的特性和效果的研究也越来越重要。
随着现代酿酒工艺的快速发展，人们对赊店老酒大曲中耐高温霉菌的筛选和产酶条件优化的研究也越来越深入。
目前，针对这一问题的研究还比较有限，需要更多的实验和数据支持。
本研究旨在通过对赊店老酒大曲中耐高温霉菌的筛选和产酶条件优化的实验研究，深入了解其特性和作用机制，为酿酒工艺的改进提供科学依据和参考。
希望通过本研究的开展，能够为酿酒行业的发展和改进提供一定的帮助和指导。
1.2 研究目的研究目的旨在探究赊店老酒大曲中耐高温霉菌的筛选方法及产酶条件优化的实验研究。
通过对这些耐高温霉菌的筛选，可以深入了解其在酿造过程中的作用机制，为提高酒品质和生产效率提供科学依据。
优化产酶条件不仅可以提高酶活力，还可以减少生产成本，提高生产效率，对酒类生产行业具有积极的推动作用。
通过本研究可以为耐高温霉菌的利用和产酶条件的优化提供新的思路和方法，为酒类酿造工艺的改进和提升提供有力支持，对推动酒类产业的发展具有重要意义。
1.3 意义在食品工业中，霉菌是一种常见的微生物，对食品质量和安全产生重要影响。
赊店老酒大曲中的耐高温霉菌特别具有研究和应用的潜力。
通过对耐高温霉菌的筛选和相关产酶条件的优化研究，不仅可以深入了解赊店老酒大曲中微生物的多样性和功能，也有助于提高大曲的发酵效率和酒质量。
对耐高温霉菌的研究还能为探索其他食品中的耐高温菌种提供参考，拓展微生物资源的利用范围，推动食品工业的技术进步。
本研究具有重要的理论和应用意义，有助于促进食品工业的发展和提升产品质量。
2. 正文2.1 赊店老酒大曲的特点赊店老酒大曲是一种优质的传统酿造发酵剂，在中国酿酒业中拥有悠久的历史。
其主要特点包括以下几个方面：1. 发酵活性高：赊店老酒大曲中的微生物群落丰富，包括酵母菌、霉菌等多种微生物，在发酵过程中能够高效地将淀粉、蛋白质等底物转化为乙醇、香气等有机化合物，提高酒精发酵效率。
提高酶活的方法
提高酶活的方法
一、酶的结构优化
1.酶的改造：通过遗传工程手段对酶的基因进行改造，引入突变体或
构建新的酶，以增加酶的催化活性和稳定性。
2.酶的化学改性：通过化学方法引入化学修饰剂，如PEG、获得修饰
基团、金属离子等，改变酶的空间构型，提高酶的催化效率和稳定性。
3.酶的固定化：将酶固定在固相载体上，形成固定化酶，可以提高酶
的稳定性和重复使用性。
二、酶的参数优化
1.温度优化：通过优化反应温度，找到适合酶活性的最佳工作温度，
提高酶的活性。
2.pH值优化：通过控制反应体系的pH值，找到适合酶催化的最佳pH 值，提高酶的活性。
3.底物浓度优化：通过调整底物浓度，使酶催化反应在酶的饱和浓度
下进行，提高酶的活性。
4.酶的浓度优化：通过调整酶的浓度，使酶与底物的摩尔比达到最佳
比例，提高酶的活性。
三、酶的环境优化
1.协同作用：将多个酶的作用进行协同，使其在反应体系中相互促进，提高整体的反应效率。
2.辅酶或辅因子添加：给予酶所需的辅酶或辅因子，如辅酶NADH、
辅因子腺苷酸二磷酸（ATP）等，增加酶的催化活性。
3.培养条件优化：通过优化微生物培养条件，如培养基成分、培养温度、培养时间等，提高酶产量和活性。
4.抑制剂或激活剂的添加：通过给予酶所需的抑制剂或激活剂，调节
酶的活性，增加催化活性。
总的来说，提高酶活的方法包括酶的结构优化、酶的参数优化和酶的
环境优化。
通过改造酶的结构、优化酶的参数和环境，可以提高酶的活性、稳定性和催化效率，从而促进酶的应用和产业发展。
产酶条件优化
“产酶条件优化”资料合集目录一、耐低温降解纤维素菌株筛选、鉴定及产酶条件优化二、脂肪酶高产菌株筛选、产酶条件优化及脂肪酶大量纯化研究三、一株纤维素酶真菌的筛选鉴定及产酶条件优化四、纤维素酶产生菌的筛选、发酵产酶条件优化及酶学特性研究五、一株产纤维素酶的暹罗芽孢杆菌筛选及产酶条件优化六、烟草秸秆废弃物中纤维素降解菌的筛选、鉴定及产酶条件优化七、耐低温降解纤维素菌株筛选、鉴定及产酶条件优化八、产环糊精葡萄糖基转移酶的菌株分离、产酶条件优化与酶学特性研究九、脂肪酶高产菌株的筛选及产酶条件优化耐低温降解纤维素菌株筛选、鉴定及产酶条件优化随着环境问题日益严重，生物可降解材料的研究和应用变得日益重要。
其中，纤维素作为地球上最丰富的可再生资源之一，其降解和利用是当前研究的热点。
然而，纤维素的降解需要特定的微生物菌株，尤其在低温环境下，筛选和鉴定具有耐低温特性的纤维素降解菌株是当前的重要任务。
在本次研究中，我们从不同环境中收集了多种微生物，通过在低温条件下筛选，我们成功获得了一株具有良好耐低温性能的纤维素降解菌株。
该菌株可以在低温条件下有效降解纤维素，并且表现出较高的酶活性。
为了进一步了解该菌株的特性，我们采用了多种分子生物学和生理学方法对其进行了鉴定。
结果表明，该菌株属于一个名为Xylanimonas 的属，这是一个在纤维素降解方面具有良好前景的菌种。
接下来，我们对该菌株的产酶条件进行了优化。
通过单因素实验和正交实验，我们发现该菌株的最佳产酶条件为：温度20℃，pH值为6.5，在含有1%纤维素的液体培养基中培养。
在此条件下，该菌株的酶活性达到了最大值。
总的来说，我们的研究提供了一种具有耐低温特性的纤维素降解菌株，并对该菌株的产酶条件进行了优化。
这为纤维素的生物降解和利用提供了新的可能性，有助于推动生物可降解材料的发展和环保事业的发展。
脂肪酶高产菌株筛选、产酶条件优化及脂肪酶大量纯化研究一、引言脂肪酶（Lipases）是一类在生物体内起着重要作用的酶，它们能够水解脂肪，生成脂肪酸和甘油。
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滤纸条降解试验
吸取纤维素降解菌种子液1ml接种到装有50ml赫奇逊培养液的250ml三角瓶中，瓶中放置1c m×6cm的新华Ⅰ号滤纸条，同时设置不加菌液的滤纸条作为对照，每个处理3个重复。
置于30℃恒温摇床，200r/min振荡培养5d，观察各瓶中滤纸条溃烂情况。
赫奇逊培养液：KH2PO4 1.0g MgSO4·7H2O 0.3g CaCl2 0.1g NaCl 0.1g FeCl3 0.01g NaNO3 2.5g pH7.2～7.3 蒸馏水1000ml
纤维素酶活的测定
1CMC酶活测定
取培养好的发酵液于4000r/min的条件下离心15分钟，上清液即为粗酶液。
分别加入相对应菌株的粗酶液1mL，加入柠檬酸缓冲液1ml，再加入0.8%的羧甲基纤维素钠溶液 1.5mL，震荡摇匀，将所有试管置于50℃的水浴锅中保温50min，保温完成后取出试管，加入2mL DNS显色剂，震荡摇匀，将各试管置于沸水浴中水浴加热5min，使DNS显色剂与还原糖充分反应，5min后取出试管用流水冷却，再用蒸馏水定容至20mL，将各试管摇匀后以葡萄糖标准曲线1号管作为对照，依次测定各菌株在紫外分光光度计540nm处的OD值，计算出平均值后，参照葡萄糖标准曲线查出还原糖的量。
2FPA酶活测定
取培养好的发酵液于4000r/min的条件下离心15分钟，上清液即为粗酶液。
分别加入相对应菌株的粗酶液1mL，加入柠檬酸缓冲液1ml，再加入滤纸(1cm ×6cm) 一条，震荡摇匀，将所有试管置于50℃的水浴锅中保温50min，保温完成后取出试管，加入2mL DNS显色剂，震荡摇匀，将各试管置于沸水浴中水浴加热5min，使DNS显色剂与还原糖充分反应，5min后取出试管用流水冷却，再用蒸馏水定容至20mL，将各试管摇匀后以葡萄糖标准曲线1号管作为对照，依次测定各菌株在紫外分光光度计540nm处的OD值，计算出平均值后，参照葡萄糖标准曲线查出还原糖的量。
3Avicel cellulase (Avicelase)
500 uL of enzyme mixed with 1mL of Avicel (1%, w/v) for determining the Avicelase activity. 详细见给你的那篇文献
通过以上两种方法，测得复筛得到的酶活高的菌株每8 h的粗酶酶活产酶曲线，测到72h。
确定酶活达到最大的最适时间。
产酶条件优化
研究不用培养温度、pH 值、碳源、氮源、接种量、装液量对菌株产酶的影响，并在各因子最适条件下培养菌株，检测其产酶酶活。
(培养的时间均为酶活达到最大的最适时间)
培养时间：生长曲线和产酶曲线
1 培养温度对产酶的影响。
将复筛得到的酶活高的菌株分别接种于5个100 mL的羧甲基纤维素培养基中（用250mL的三角瓶承装），并分别在25、30、35、40、45℃下培养，培养一定时间后，测定其CMC酶活，从而确定菌株产酶的最适温度。
2 培养起始pH 对产酶的影响。
将复筛得到的酶活高的菌株分别接种于5 个100 mL 羧甲基纤维素培养基中，并将其起始pH 值分别调至 5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0。
培养一定时间后，测定其CMC 酶活，从而确定菌株产酶的最适pH 值。
3 不同碳源对产酶的影响。
分别以CMC-Na、微晶纤维素、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖、可溶性淀粉、麦麸、乳糖为碳源代替基础培养基中的碳源，添加量均为10g/L ，培养纤维素降解菌。
培养一定时间后，测定其CMC 酶活，从而确定菌株产酶的最适碳源。
然后添加不同浓度(20g/L、30g/L、40 g/L、50 g/L、60 g/L、70 g/L、80 g/L)的最适碳源代替基础培养基中的碳源，培养纤维素降解菌。
培养一定时间后，测定其CMC 酶活，从而确定菌株产酶的最适碳源的最适浓度。
4 不同氮源对产酶的影响。
分别以胰蛋白胨、酵母浸粉、牛肉膏、NH4 NO3、(NH4)2SO4、NH4Cl、KNO3、NaNO3、尿素、大豆为氮源代替基础培养基中的氮源，添加量均为2g/L，培养菌株。
培养一定时间后，测定其CMC 酶活，从而确定菌株产酶的最适氮源。
然后添加不同浓度(1 g/L、3g/L、5g/L、7g/L、9g/L、12g/L)的最适氮源代替基础培养基中的氮源，培养纤维素降解菌。
培养一定时间后，测定其CMC酶活，从而确定菌株产酶的最适氮源的最适浓度。
5 不同接种量对产酶的影响。
将复筛得到的酶活高的菌株分别以不同的接种量(1%、2﹪、4﹪、6﹪、8﹪、10﹪)接种于5个100 mL的羧甲基纤维素培养基中，培养一定时间后，测定其CMC 酶活，从而确定菌株产酶的最适接种量。
6不同装液量对产酶的影响。
25mL/250mL、50mL/250mL、80mL/250mL、100mL/250mL、150mL/250mL 在最适条件下培养菌株
根据以上结果，配制以最适碳源，氮源的培养基，最适起始pH值并在最适
温度的条件下培养最适时间，测其酶活，做3个平行试验，取平均值。
注：培养基配方
羧甲基纤维素培养基：羧甲基纤维素钠10g、蛋白胨10 g、Yeast extract（酵母浸粉）10 g、NaCl 5 g、K2HPO4 1 g、MgSO4·7H2O 0. 2 g、CaCl2 0.3 g，FeSO4·7H2O 5 mg，M nSO4 1.6 m g，ZnCl2 1.7 m g，CoCl2 2 mg，pH 调至7. 2。
基础培养基：NaCl 5 g、K2HPO4 1 g、MgSO4·7H2O 0.2 g、CaCl20.3 g，FeSO4·7H2O 5 mg，M nSO4 1.6 mg，ZnCl2 1.7 mg，CoCl2 2 mg，pH 调至7.2。
酶（CMCase）特性研究（见英文文献）
酶的特性研究
1）pH值
2）温度
3）不同pH值对酶稳定性影响
4）不同温度（热稳定性）对酶稳定性影响
5）金属离子酶活性的影响
1 酶催化反应的最适条件
1.1温度对酶活力的影响
将CMCase测定中的水浴温度分别设为30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃，分别测定测CMCase和FPase，以最高酶活值为100%，得到并比较这两种酶处在不同温度的酶促反应中的相对酶活力，从而确定其最适酶促反应温度。
1.2 pH对酶活力的影响
分别配制pH 值为 3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0 的柠檬酸缓冲液用于稀释粗酶液，然后用不同pH值的柠檬酸缓冲液分别配制浓度为1%的CMC-Na溶液，分别测定CMCase和FPase，以最高酶活值为100%，获得并比较两种酶在不同pH酶促反应中的相对酶活力，最后确定最适酶促反应pH 值。
2 酶的稳定性研究
2.1 酶的热稳定性研究
将稀释后的粗酶液分别置于30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃的水浴中恒温处理lh后，在最适酶促反应条件下测定不同温度处理后的CMCase和FPase剩余酶活力，以未做特殊处理的粗酶液作对照，评价两种酶的热稳定性。
2.2 酶的pH稳定性研究
配制pH 值为 3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0 的柠檬酸缓冲液，分别加入粗酶液，在4℃下放置2h后，在最适酶促反应条件下测定剩余酶活力，以未用缓冲液处理的粗酶液的酶活力为对照，评价两种酶的pH 稳定性。
3 金属离子对酶活力的影响
用最适pH值的缓冲溶液配制终浓度为l0-3mol/L的Fe2+、Mg2+、Pb2+、Ca2+、Cu2+、Zn2+、Co2+、Na+、Mn2+和K+的离子溶液，并对粗酶液进行稀释，在最适酶促反应条件下测定CMCase与FPase，把不加任何金属离子的具有相同的稀释倍数的粗酶液作为对照组，研究金属离子对CMCase与FPase的影响。