利用SCAR标记鉴定‘陇椒5号’辣椒种子的纯度

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应用分子标记检测作物杂交种纯度研究现状及比较分析

应用分子标记检测作物杂交种纯度研究现状及比较分析作者：刘子记曹振木杨衍来源：《长江蔬菜·学术版》2013年第06期摘要：分子标记技术可以弥补和克服杂交种纯度形态学及同工酶鉴定中的许多缺陷和难题，为作物杂交种纯度鉴定提供一种准确、可靠、快速、方便的方法。

通过综述几种常用分子标记技术的原理、优缺点及其在作物杂交种纯度鉴定中的应用现状，展望了分子标记检测技术在杂交种纯度检测乃至遗传育种、良种推广中的重要性，以期为研究分子标记技术提供参考。

关键词：纯度鉴定；分子标记；杂交种；多态性种子是重要的农业生产资料，是实现农业科技进步的载体。

种子质量的优劣直接影响农产品质量和优良品种的增产潜力，而种子质量的好坏在很大程度上取决于种子的纯度，开展种子纯度检测对保证种子质量和提高生产效益具有重要意义。

生物混杂及机械混杂是影响杂交种纯度的主要原因，作物杂交种纯度检验的常用方法主要包括形态鉴定、田间鉴定和同工酶电泳技术鉴定等[1]。

种子形态差异有限，且易受环境条件影响，因此形态鉴定准确性较差；田间鉴定所需时间较长，成本较高，表型易受栽培措施和环境条件的影响，不同的鉴定者对同一性状的评价也存在一定的差异，不能满足快速检测杂交种纯度的需要；同工酶鉴定虽然准确、可靠、不受外界环境影响，但多态性不够丰富，且有组织和器官特异性[2]。

随着作物新品种数量的不断增加，遗传基础日趋狭窄，传统的鉴定方法不能有效区分遗传关系较近的杂交种[3]，难以满足作物杂交种纯度鉴定在精确度方面的要求。

近年来，随着DNA分子标记技术的问世及迅速发展，使得从基因组水平上检测杂交种纯度成为可能。

分子标记技术能够从DNA水平上揭示杂交子代与亲本间的遗传差异，不受植株生长季节的限制，不受基因表达、栽培条件和环境条件的影响，无器官、组织及发育特异性，能够检测微小的变异，多态性丰富，稳定性高，可以大大缩短检验时间[4]。

近年来，分子标记技术在国内外被广泛应用于作物杂交种纯度鉴定。

辣椒新品种蓉椒5号的选育

摘要蓉椒５号是以０７．１６为母本、Ｏ７．２４为父本组配而成的辣椒一代杂种。该品种为中熟，从定植到采收需６０ｄ左右，前期产量占总产量的１７％；株高７７．５ｃｍ，开展度７５～８１ｃｍ；果实长羊角形，青熟果绿色，老熟果红色，果纵径１８～２０ｃｍ，果横径１．４～１．６ｃｍ，果肉厚０．２０ｃｍ，平均单果质量ｌ４．２ｇ；耐高温，抗病性强，味较辣，宜干制、泡渍、酱制，综合性状优良；每６６７ｍＥ鲜椒产量２０００～２２００ｋｇ；适合在四川各主要辣椒产区栽培。关键词辣椒；蓉椒５号；一代杂种；选育
Hale Waihona Puke ＡｂｓｔｒａｃｔＲｏｎｇｊｉａｏ５ｉｓａｈｏｔｐｅｐｐｅｒＦ１ｈｙｂｒｉｄｂｒｅｄｂｙｃｒｏｓｓｉｎｇ０７ — １６ａｎｄ０７ — ２４．Ｉｔｉｓａｍｉｄ — ｍａｔｕｒｅｖａｒｉｅｔｙ，
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＣｈｅｎｇｄｕＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１７１３０，Ｃｈｉｎａ）
ＢｒｅｅｄｉｎｇｏｆａＮｅｗＨｙｂｒｉｄＨｏｔＰｅｐｐｅｒＶａｒｉｅｔｙ ‘ －＿＿ — — Ｒｏｎｇｊｉａｏ５

QuEChERS-气相色谱质谱联用检测辣椒中33种农药残留

QuEChERS-气相色谱质谱联用检测辣椒中33种农药残留作者：龙家寰秦立新陈明贵廖国会段婷婷来源：《现代农业研究》2020年第01期【摘; ;要】构建QuEChERS-气相色谱质谱联用检测辣椒当中33种农药残留的快速检测方式。

超声提取乙腈，N-正丙基乙二胺（primary secondary amine，PSA）与C18净化，通过测定HP-5MS色谱柱的分离。

在浓度测定范围0.4μg～20.0μg/mL内，具有良好的线性关系，r>0.995;浓度添加是25、80、150μg/kg的时候，平均的回收率在74.31%～119.72%之间，相对的标准偏差是2.0%～15.3%（n=6），检出限是0.02～4.6μg/kg，定量的下限是0.07～15.3μg/kg。

该方法可以检测辣椒当中的农药残留。

【关键词】辣椒;农药残留;气相色谱质谱;QuEChERS中图分类号：S-3; ; ; ; ; ; ; ;文献识别码：A; ; ; ; ; ; ; ;文章编号：2096-1073（2020）01-0079-81由于栽培方式改变，设施农业越来越受人们青睐，但是在设施种植时密闭的时间较长，通风少，没有接受阳光直射，导致棚内温度和湿度都大于大棚外，适宜病虫害的发生，所以大棚内病虫害的发生和危害比露地严重。

例如大棚里蚜虫的发生频繁和时间均长于大棚外，并且大棚内病虫害的种类也比露地严重。

由于人们认识的偏差，为了达到迅速杀死防治病虫害的目的，在农药的使用上经常没有按说明书指导，随意加大用药量，随意混用农药，不考虑安全间隔，盲目用药。

有时两类容易毒性叠加的农药也随意混用，不间隔使用，从而大大增加了大棚蔬菜的农药残留量。

又因为大棚内的农药消解速度比露地慢，这样就直接导致大棚内蔬菜农药的残留量高，人们发生食物中毒的情况比露地蔬菜严重。

1; 材料及方法1.1; 试剂和材料（色谱纯）乙腈：美国Fisher公司;（分析纯）无水硫酸钠、氯化钠：国药集团化学试剂有限公司;（PSA：40μm～60μm，色谱纯）N-正丙基乙二胺、十八烷基键合相硅胶（C18，色谱纯）：博纳艾杰尔公司。

利用SSR技术快速鉴定2个辣椒杂交品种纯度

利用SSR技术快速鉴定2个辣椒杂交品种纯度作者：陈琛罗俊杰陈卫国来源：《甘肃农业科技》2020年第04期摘要：利用SSR分子标记技术，对辣椒杂交种甘科4号和甘科10号及其父母本进行引物筛选和纯度鉴定，旨在建立供试品种的高效纯度鉴定体系，并对公布的辣椒SSR核心引物进行验证。

结果表明， 2个品种各筛选出1对引物在亲本间有明显差异，在杂交种中表现为共显性，分别为Es330和Epms923。

利用这2对引物分别对供试品种进行纯度鉴定，甘科4号的纯度为96.4%，与田间种植鉴定纯度98.2%相差1.8百分点;甘科10号的纯度为91.8%，与田间种植鉴定纯度92.7%相差0.9百分点。

说明筛选出的2对引物对甘科4号和甘科10号种子纯度的鉴定结果真实可靠，可以用于杂交种纯度的高效快速鉴定。

关键词：辣椒; SSR分子标记;纯度鉴定Abstract：In this study，pepper hybrid cultivars Ganke 4、Ganke 10 and their parental inbred lines were used to identify hybrid purity by SSR markers， aiming at establishing a quick and efficient purity identification system for tested varieties， verifying the published pepper SSR core primers at the same time. The results showed that there was one primer pair selected in each cultivars，named Es330 and Epms923， which had significant difference between the parental inbred lines， and showed co-dominance in the hybrids. Using the two primer pairs to identify the purity of the tested varieties，the purity of Ganke 4 was 96.4%， which had 1.8 percentage point difference from the purity of 98.2% identified in field. the purity of Ganke 10 was 91.8%，which had 0.9 percentage point difference from the purity of 92.7% by field identification. It was proved that the identification of hybrid purity of Ganke 4 and Ganke 10 were authentic and reliable， the two SSR markers could be used for efficient and rapid identification of hybrid purity.辣椒（Capsicum annuum L.）在中国每年的种植面积超过200万hm2，是中国栽培面积最大的蔬菜作物之一[1 ]。

利用SSR标记鉴定3个辣椒杂交种品种的纯度

利用SSR 标记鉴定3个辣椒杂交种品种的纯度李淑红　赖黎丽　李淑琴　李世聪　朱华国　庞芳芹*（石河子大学农学院，　新疆生产建设兵团绿洲生态农业重点实验室，　新疆石河子，　832003）摘　要　辣椒(Capsicum annuum L.)杂交种子纯度快速检测技术对于保证辣椒杂交品种种子生产具有重要的意义。

红龙13号、红龙18号、红龙25号辣椒杂交种是新疆隆平红安生物科技有限责任公司选育并大面积栽培的主栽品种。

为鉴定上述3个品种的纯度，本实验在特异性引物筛选的基础上，利用SSR 标记技术对3个辣椒品种进行了种子纯度鉴定。

结果表明，每个品种都有1对以上SSR 引物可将其父本和母本分开，3个辣椒杂交种品种的纯度分别为95.35%、89.36%和95.25%。

SSR 分子标记方法可以准确鉴定辣椒杂交种纯度，且大大缩短纯度鉴定周期。

关键词　辣椒；SSR 标记；种子纯度鉴定；红龙13号；红龙18号；红龙25号收稿日期：2018-02-26基金项目：新疆兵团应用基础研究（2015AG008），兵团人才发展博士后专项资助项目（cz0014）作者简介：李淑红（1990-）,女，硕士研究生，专业方向为作物育种的原理与方法；E-mail ：2695639191@ *通信作者：庞芳芹（1977-），女，助理实验师，学士，现主要从事生物技术利用等工作；E-mail ：57530422@Purity Identification of Three Pepper Hybrids Using SSR MarkerLi Shuhong Lai Lili Li Shuqin Li Shicong Zhu Huaguo Pang Fangqin *（Key Laboratory of Oasis Ecological Agriculture Xinjiang Production and Construction Corps, College ofAgriculture, Shihezi University, Shihezi 832003, China ）Abstract Using molecular markers to test seed purity is important for high quality seed producing. The pepper hybrids of Honglong 13, Honglong 18, and Honglong 25, which are largely cultivated in Xinjiang province, were bred by Xinjiang Longping Hongan Biotechnology Co., Ltd. In this study, SSR markers were used to identify the purity of the three varieties. The results showed that the purities were 95.35%, 89.36%, and 95.25% for Honglong 13, Honglong 18 and Honglong 25, respectively. The SSR molecular marker can efﬁciently identify the purity of pepper hybrids.Key words hot pepper; SSR marker; seed purity identiﬁcation ；Honglong 13; Honglong 18; Honglong 25辣椒属茄科（Solanaceae ）辣椒属（Capsicum ），是一种重要的蔬菜作物，即可鲜食，又是重要的调味品，广泛种植于世界各地。

辣椒的品种稳定和遗传纯度检测方法

辣椒的品种稳定和遗传纯度检测方法目前辣椒作为一种重要的经济作物和热门的调味品，其种植和研究已经成为农业科技领域的热点。

为了确保辣椒品种的稳定和遗传纯度，科学家们需要进行品种稳定性和遗传纯度检测。

本文将介绍辣椒的品种稳定性和遗传纯度检测方法。

首先，品种稳定性检测是指确定辣椒种质资源的遗传稳定性和一致性。

辣椒的品种稳定性直接影响到其种子和种苗的市场价值和质量。

一种品种的稳定性高，即遗传变异性小，种子和种苗之间的遗传一致性较高。

为了进行品种稳定性检测，可以利用分子标记技术，比如SSR（简单序列重复）和SNP（单核苷酸多态性）等。

这些技术可以通过分析辣椒种质资源的DNA序列变异来确定品种间的相似性和遗传一致性。

其次，遗传纯度检测是指确定种子或种苗中杂种的存在程度。

杂种会导致辣椒品种的不稳定和不一致性，从而影响辣椒的产量和质量。

为了进行遗传纯度检测，可以利用分子标记技术和传统的遗传学方法。

分子标记技术可以通过分析种子或种苗中的DNA序列来确定其亲本品种和可能的杂种来源。

传统的遗传学方法则包括了对花粉形态、花粉活力和遗传性状等的观察和分析。

在实际应用中，对于辣椒品种的稳定性和遗传纯度检测常常采用综合方法。

首先，通过外部观察和分类对辣椒种质资源进行筛选。

这可以通过观察植株的生长习性、叶片形态、花朵形态等来判断不同品种之间的差异。

然后，在确定了一些潜在的稳定品种后，可以使用分子标记技术对这些品种进行分析。

这些分子标记技术可以通过特定的引物识别辣椒品种的遗传特征，从而判断其遗传一致性和亲本品种。

此外，为了进一步确保辣椒品种的稳定性和遗传纯度，还可以采用田间试验和温室试验。

通过在不同环境条件下观察和比较种子或种苗的生长情况和产量表现，可以评估辣椒品种的稳定性和遗传纯度。

综上所述，辣椒的品种稳定性和遗传纯度检测是非常重要的，可以通过综合应用外部观察、分子标记技术和田间试验来进行。

这些检测方法可以帮助农户和科学家们确保辣椒品种的质量和产量，推动辣椒产业的发展。

辣椒新品种陇椒5号的选育

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分子标记技术在辣椒种子纯度检测中的应用

分子标记技术在辣椒种子纯度检测中的应用
杨中周
【期刊名称】《中国瓜菜》
【年(卷),期】2015(28)3
【摘要】种子的纯度是种子质量的重要指标,其对产量及品质均有直接而明显的影响.辣椒种子纯度鉴定技术也由传统的主要依赖形态鉴定逐步发展形成集形态学鉴定、细胞学鉴定、蛋白及同工酶电泳鉴定和遗传标记鉴定等技术的鉴定技术体系,特别是基于DNA水平的分子标记技术为种子纯度鉴定提供了一个新的途径.对用于辣椒纯度鉴定的几种分子标记技术的基本原理及应用进行了概述,并全面阐述了各自的优缺点,主要包括RFLP、RAPD、SCAR、SSR、ISSR、SRAP、SNP,旨在为辣椒分子纯度鉴定提供参考.
【总页数】4页(P1-4)
【作者】杨中周
【作者单位】安徽江淮园艺种业股份有限公司合肥230031
【正文语种】中文
【相关文献】
1.SSR分子标记技术在种子纯度检测中的应用 [J], 刘奇燕
2.DNA分子标记技术在玉米纯度检测中的应用研究 [J], 曲志伟
3.RAPD分子标记技术应用于家蚕品种纯度检测的研究 [J], 廖富蘋;林健荣;莫红丽;余爱群;文哲光
4.一种高通量水稻DNA提取方法及其在种子纯度检测中的应用 [J], 刘毅;赵洪阳;
唐金娟;王加红;刘国兰
5.分子标记技术在蔬菜作物品种鉴定与纯度检测中的应用 [J], 柳李旺;侯喜林;龚义勤;张玉明;王开荣;郑军飞
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（．肃农业大学农学院，１甘甘肃兰州７０７；．肃省农业科学院蔬菜研究所，肃兰州７０７）３００２甘甘３００
ｊ、
摘要： ‘ 椒５号，椒及其父、本为试材，取基因组ＤＮ，ｒＣＲ标记鉴定其种子纯度．果表明以陇辣母提Ａ，，ＳＡＩａ结从辣椒多态性丰富的１０条引物中筛选获得１条可用于鉴别母本和Ｆ的引物Ｒ２，条可用于鉴别父本和Ｆ５Ｇ５０１的引物Ｒ８；Ｒ５０进行克隆、序，计出１对ＳＡＲ引物，特异鉴别ＦＧ７０将Ｇ２测设Ｃ能和母本．关键词：椒；Ｃ辣ＳＡＲ标记；度鉴定纯
２１Ｏ１年２月
甘
肃
农
业
大
学
学
报
第４６卷
双月刊
第１期５～５５７
ＪＯＵＲＮＡＩＯＦＧＡＮＳＡＧＲＩＵＣＵＩＴＵＲＡＩＵＮＩＶＥＲＳＴＹＩ
利用ＳＡＲ标记鉴定 ‘ Ｃ陇椒５号，椒种子的纯度辣
陈灵芝张建农王兰兰，兵强。～，，魏
材料在田间能观察到材料本身的特征特性时，摘采
植株茎端嫩叶提取ＤＮＡ．
１２ＤＮＡ提取及ＲＡＰ反应体系建立．Ｄ
辣椒基因组ＤＮＡ的提取采用北京天根生物公
司的植物基因组快速提取试剂盒；ＲＡＰ引物购自Ｄ天根生物公司和上海生工生物工程技术服务有限公司．Ｐ —ＣＲＡＤＰＲ体系（５Ｉ）包括２２：０ｍｍｏ・Ｌｌ一
增效率较高，但很多引物的多态性不明显（１．图）
２２ＲＰ引物的稳定性和多态性筛选．ＡＤ本试验中，筛选出了２条特异ＲＤ引物共ＡＰＲ５０和Ｒ８（２，过扩增程序反复验证２２７Ｏ图）通０次
ＳＡＲ引物的特异性．Ｃ — Ｃ扩增体系为２ＣＳＡＲＰＲ５
Ｆｌ的ＲＤ扩增产物；，ＡＰ１４为Ｆ；，１２５为父本；，３６为母本
Ｉ除引物分上、游各加１Ｌ外，余用量同，下其
广泛应用于西瓜、瓜种子的纯度鉴定ｌ．ＲＤ甜３但ＡＰｊ
１材料与方法
１１试验材料．
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引物比ＲＡＰＤ引物多十几个碱基，且退火温度提而
Ｖｅｅａｌｓｇｔｂｅ．ＧａｓａｅｆＡｇｉｕｔｒｌＳｉｎｅ，Ｌａｚｏ３００，Ｃｈｎ）ｎｕＡｃｄｍｙｏｒｃｌｕａｃｅｃｓｎｈｕ７０７ｉａ
ＡｂｔａｔＧｅｅｉｐｒｔｆｐｐｅｆ‘ ｎｊａ．ｓｒｃ：ｎｔｃｕｉｙｏｅｐｒｏＬｏｇｏＮｏ５’ｗａｄｎｉｅｙＤＮＡｘｒｃｉｎａｄＳｉｓｉｅｔｆｄｂｉｅｔａｔｎＣＡＲｏ
中图分类号：４．Ｓ６１３文献标识码：Ａ文章编号：１０３５２１）１０５ — ３０３４１（０１０ —０５０
Ｉｅｔｆｃｔｏｆｇｅｅｉｒｔｆｐｐｅｆｄｎｉｉａｉｎｏｎｔｃｐｕｉｙｏｅｐｒｏ
‘ ｏｇｉｏＮｏ５ｙＳＬｎｊ． ’ｂＣＡＲａ
ＣＨＥＮｎ — ｈ。Ｌｉｇｚｉ。ＺＨＡＮＧｉｎｎｎ，ＡＮＧｎｌｎ，ＥＩＢｎ — ｉｎ。＇Ｊａ — ｏｇＷＬａａ。Ｗｉｇｑａｇ
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软件设计ＳＡＲ引物，天根生化科技有限公司合Ｃ由
成引物．１５Ｓ．ＣＡＲ标记鉴别 ‘ 椒５号 ’ 品种纯度陇的
以 ‘ 椒５号 ’ 椒５陇辣Ｏ个单株及其母本验证
注：～３为Ｒ２１５０对亲本及Ｆ的产物；～６为Ｒ８ｌ４７０对亲本及
ｐａｅｒｍｂｉｒｎｔｆｏＦ１ｈｙｒｄ．
Ｋｅｒｓ：ｅｐｅ；ＳＣＡＲａｋｅｙｗｏｄｐｐｒｍｒｒ；ｐｕｉｙｉｅｔｆｃｔｏｎｒｔｄｎｉｉａｉ
‘ 陇椒５ ’ 号是甘肃省乃至整个西北地区保护地
及露地辣椒种植的主栽品种ｌ．着该品种的广泛】随］
ＲＤ扩增体系，足部分由ｄＨ。补齐．增程ＡＰ不ｄＯ扩序为：５℃ 预变性５ｍｉ；５ ℃变性３；０℃退火９ｎ９０Ｓ６
图２引物Ｒ２５０和Ｒ８７０的电泳结果
Ｆｉ２Ｅｌｃｇ．ｅ ”ｏｐｏｒｓｓｒｓｔｒｍｅｈｅｉｅｕｌｓｏｆｐｉｒ
以‘ 陇椒５号 ’ 辣椒及其父、本筛选ＰＤ多母ＡＰ
态性引物，是在父、本中能扩增出特异片段的引凡母
图ｌＲＡＰ扩增电泳结果Ｄ
ＦｉＥ１ｃｒｈｏｅｉｅｕｔｇ．１ｅｔｏｐｒｓｓｒｓｌｓｏｆＲＡＰＤ
ｗｉｈｔｉｕｖｒａｔａｅｓａａｅｉｌ．ＴｈｅｒｓｔｈｏｅｈａｈｅｐｒｍｅｓｏｆＲＧ５ｎｔｈｓｃｈｉａｎｄｉｓｐｒｎｔｓｍｔｒａｓｅｕｌｓｓｗｄｔｔｔｉｒ２０ａｄＲＧ７０８ｃｕｌｅｏｅｒｔｎｅａｅａａｅｐａｅｒｏｄｂｅｕｓｄｆｒｓｐａａｉｇｆｍｌｎｄｍｌｒｎｔｆｏｍｙｂｉｒｍ５ｒｔｒｌｇｎｕｃｏｔｄｅｐｉ — Ｆｌｈｒｄｆｏ１０ａｂｉａｙｏｉｏｈｅｉｒｍｅｓＴｈａｄｏｒ．ｅｂｎｆＲＧ５０ｗａｌｎｅｎｅｅｃｄｔｅｉｎｅｓａＳ２ｓｃｏｄａｄｓｑｕｎｅｏｂｅｄｓｇｄａＣＡＲａｋｅｏｒｓｐａａｍｌ
基金项目：肃省自然科学基金（Ｚ０１Ａ２ —４）甘３Ｓ４－５０２．
收稿日期：Ｏ００１修回日期：Ｏ００６２１５１；２１９０
甘肃农业大学学报
种及其亲本材料；０８年６月，杂交种及其亲本２０当
素的影响，果不够准确；问种植鉴定周期太长，结田费时费力，利于种子及时销售ｊ利用ＲＡＰ技不．Ｄ
体系，为辣椒新品种的推广提供一定的技术保障．
术进行种子纯度鉴定，由于方法简单、捷、快可靠，已
供试材料 ‘ 椒５号 ’ 椒及其亲本由甘肃省农陇辣业科学院辣椒研究组提供．０８年２月，种杂交２０播
高到５～６ＯＯ℃ ，克服了ＲＤ不稳定和重复性既ＡＰ
作者简介：灵芝（９１）女，研究员，陈１７－，副主要从事辣椒育种及栽培工作．Ｅｍａ：ｓｈｚ３＠ｓａｃｒｉｇｃｌｈ８ｉ．ｏｌｎｎ
辣椒杂交种提供一套简便有效的室内种子纯度鉴定
种植和国内种业市场的日趋成熟，杂交种子纯度其的快速检测显得越来越重要．统的种子鉴定主要传采用种子形态学鉴定、苗特征鉴定等，受环境因幼易
差的缺陷，又具有简单、实用、本低的优点．成］本试验选用 ‘ 陇椒５号 ’ 交一代种及其亲本为杂材料，通过ＲＡＰＤ和ＢＡ法ｌ相结合，立 ‘ Ｓ５建陇椒５号 ’ 椒种子纯度的ＳＡＲ标记检测体系，进一辣Ｃ并步以‘ 陇椒５号 ’ 椒单株为试材进行验证，辣旨在为
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ｄＨ。补足．ＡＰ反应扩增程序为：５℃预变ｄＯ］ＲＤ９
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