实验报告-不同因素对酶的影响
影响酶活性的条件实验报告

2. 取三支干净试管,分别加入等量质量分数为2%的淀粉酶溶液,设置30、60、90度三个温度梯度,将相应的试管和淀粉溶液分别放入相应温度的热水中,加热五分钟;
3. 将加热到相同温度的淀粉溶液和淀粉酶溶液同时混合,同时在对照组试管中加入等量蒸馏水,混合均匀后在相应的温度中继续加热五分钟,令其充分反应 ;
材料用具
质量分数为2%的新配置的淀粉酶溶液,质量分数为3%的可溶性淀粉溶液,质量分数为5%的盐酸,质量分数为5%的NaOH,FeCl3溶液,热水,蒸馏水,碘液,斐林试剂
试管,量筒,小烧杯,大烧杯,滴管,试管夹,酒精灯,三脚架,石棉网,温度计,pH试纸,火柴
实验过程
Ⅰ.观察温度对酶活性影响实验
实验二:影响酶活性的条件实验
实验原理
淀粉酶在适宜的温度下可以将淀粉水解形成麦芽糖,麦芽糖遇碘不变蓝,但是可以和斐林试剂反应产生砖红色沉淀;过氧化氢酶在适宜的pH下可以催化过氧化氢分解产生氧气。
实验目的
细胞中几乎所有的化学反应都是由酶来催化的件的改变对酶活性的影响。
4. 将反应后试管中的溶液平均分为两份,一份均加入斐林试剂,一份均加入碘液 ;
酶的影响因素实验报告

酶的影响因素实验报告实验名称:酶的影响因素实验实验目的:通过对不同因素对酶活性的影响进行实验,找出影响酶活性的因素,并了解酶催化作用的基本知识。
实验原理:酶是一种具有生物催化作用的蛋白质,催化速率较快,在生物体内起着至关重要的作用。
在不同的环境条件下,酶的反应速率也会受到影响。
本实验将对不同因素对酶活性的影响进行实验研究,以发现影响酶活性的因素。
实验过程:1. 制备酶溶液:将5毫升的酶溶液放入试管中。
2. 分别加入不同的物质:将分别是纯净水、酶底物、酸、碱、高温、甲醇、铜离子、铅离子等对酶活性有影响的物质分别加入到酶溶液试管中,每个因素都进行一次试验。
3. 静置反应:将试管放置在恒温器中,反应时间为10分钟。
4. 添加显色剂:在反应结束后,将显色剂加入到试管中,观察反应结果。
实验结果:1.在纯净水中,酶的活性基本不变。
2.在酶底物中,酶的活性显著增加。
3.在高温条件下(60℃),酶的活性下降。
4.在酸性条件下,酶的活性显著下降。
5.在碱性条件下,酶的活性显著上升。
6.在甲醇中,酶的活性下降。
7.在铜离子中,酶的活性下降。
8.在铅离子中,酶的活性显著下降。
实验结论:1.温度是酶活性影响最大的因素,合适的温度可以使酶的活性达到最高。
2.酸碱度也是影响酶活性的重要因素,酶对不同酸碱度条件具有不同的反应。
3.还原剂(如甲醇)、金属离子都会对酶的活性产生不同程度的影响,应避免在这些环境条件下使用酶。
实验总结:通过本次实验,我了解到酶对环境条件的敏感性,有助于我进一步了解酶催化作用的基本原理,并可以有针对性地选择酶进行实验。
但本实验仅是基础实验,更多的因素还需要进一步的探索和研究。
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告

激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
影响酶作用的因素:影响酶促反应的因素常有酶的浓度、底物浓度、pH值、温度、抑制剂、激活剂等。
其变化规律有以下特点:
1、酶浓度对酶促反应的影响:在底物足够,其它条件固定的条件下,反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时,酶促反应的速度与酶浓度成正比。
2、底物浓度对酶促反应的影响:在底物浓度较低时,反应速度随底物浓度增加而加快,反应速度与底物浓度近乎成正比,在底物浓度较高时,底物浓度增加,反应速度也随之加快,但不显著,当底物浓度很大且达到一定限度时,反应速度就达到一个最大值,此时即使再增加底物浓度,反应也几乎不再改变。
3、酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。
氯离子为唾液淀粉酶的激活剂,铜离子为其抑制剂,激活剂使酶的活性升高,抑制剂使酶活性降低。
注意事项:
激活剂和抑制剂对于酶活性的影响,常常分不清激活剂,因为加入蒸馏水、NaCl、Na2SO4这3支试管的颜色一致,都是黄色。
出现这种现象的原因是酶活性太高了,需要稀释唾液,唾液稀释至加入蒸馏水的试管呈浅红色即可。
这样一来,这3支试管的颜色分别是浅红、黄、浅红,就可以断定Cl-是激活剂。
偶尔也有分不清抑制剂的就是加入蒸馏水、CuSO4、
Na2SO4这三支试管的颜色一致,都是蓝色。
因为酶活性太低,需要提高酶活性,只要重新制备唾液淀粉酶就行(但是新酶的活性不可太高,否则又分不清激活剂)。
最后3支试管的颜色应该是浅红、蓝、浅红,可以断定Cu2+是抑制剂。
酶的影响因素实验报告

酶的影响因素实验报告酶的影响因素实验报告简介:酶是一种生物催化剂,在许多生物化学反应中起到关键作用。
酶的活性受到多种因素的影响,本实验旨在探究温度、pH值和底物浓度对酶活性的影响。
实验一:温度对酶活性的影响材料和方法:1. 准备一组酶溶液和一组底物溶液;2. 将两组溶液分别加入不同温度的试管中,如10℃、25℃、40℃、60℃和80℃;3. 在每个试管中加入相同量的底物溶液,并迅速混合;4. 通过测定反应物质浓度的变化来测定酶活性。
结果与讨论:将实验结果记录在表格中,可以观察到随着温度的升高,酶活性逐渐增加,但在一定温度范围内,酶活性达到最大值后开始下降。
这是因为酶是一种蛋白质,高温会使其构象发生变化,导致酶活性的降低。
因此,适宜的温度可以提高酶活性,但过高的温度会对酶的结构产生不可逆的破坏。
实验二:pH值对酶活性的影响材料和方法:1. 准备一组酶溶液和一组底物溶液;2. 将两组溶液分别加入不同pH值的缓冲液中,如pH 2、pH 4、pH 7、pH 9和pH 12;3. 在每个试管中加入相同量的底物溶液,并迅速混合;4. 通过测定反应物质浓度的变化来测定酶活性。
结果与讨论:将实验结果记录在表格中,可以观察到酶活性在不同pH值下呈现不同的变化趋势。
一般来说,酶活性在酸性和碱性条件下都较低,而在中性条件下较高。
这是因为酶的活性受到酸碱度的影响,过高或过低的pH值会破坏酶的结构,从而降低酶的催化效率。
实验三:底物浓度对酶活性的影响材料和方法:1. 准备一组酶溶液和一组不同浓度的底物溶液;2. 将不同浓度的底物溶液分别加入试管中;3. 在每个试管中加入相同量的酶溶液,并迅速混合;4. 通过测定反应物质浓度的变化来测定酶活性。
结果与讨论:将实验结果记录在表格中,可以观察到随着底物浓度的增加,酶活性也随之增加。
这是因为酶的活性与底物的浓度呈正相关关系,更高的底物浓度意味着更多的底物分子与酶发生反应,从而提高酶的催化效率。
酶活性的影响实验报告

一、实验目的了解酶活性受哪些因素的影响,探究不同因素对酶活性的影响程度,为后续酶学实验提供理论依据。
二、实验原理酶是一种生物催化剂,具有高效性、专一性和可调节性。
酶活性受多种因素影响,如温度、pH值、底物浓度、酶浓度、激活剂和抑制剂等。
本实验通过探究不同因素对酶活性的影响,了解酶活性的变化规律。
三、实验材料1. 试剂:淀粉酶、蔗糖酶、淀粉、蔗糖、NaOH、HCl、pH试纸、蒸馏水、斐林试剂等。
2. 仪器:试管、烧杯、量筒、胶头滴管、恒温水浴锅、pH计等。
四、实验方法1. 温度对酶活性的影响(1)将淀粉酶溶液分别置于0℃、25℃、40℃、60℃、80℃的恒温水浴锅中,保温5分钟。
(2)取等量淀粉加入各试管中,分别加入等量淀粉酶溶液。
(3)观察并记录各试管中淀粉水解的程度。
2. pH值对酶活性的影响(1)用pH试纸测定不同pH值(如3、5、7、9、11)的NaOH和HCl溶液。
(2)将淀粉酶溶液分别置于不同pH值的溶液中,保温5分钟。
(3)取等量淀粉加入各试管中,分别加入等量淀粉酶溶液。
(4)观察并记录各试管中淀粉水解的程度。
3. 底物浓度对酶活性的影响(1)将淀粉酶溶液分别置于25℃恒温水浴锅中。
(2)取不同浓度的淀粉溶液加入各试管中,分别加入等量淀粉酶溶液。
(3)观察并记录各试管中淀粉水解的程度。
4. 酶浓度对酶活性的影响(1)将淀粉酶溶液分别稀释成不同浓度。
(2)将淀粉酶溶液分别置于25℃恒温水浴锅中。
(3)取等量淀粉加入各试管中,分别加入不同浓度的淀粉酶溶液。
(4)观察并记录各试管中淀粉水解的程度。
5. 激活剂和抑制剂对酶活性的影响(1)在淀粉酶溶液中加入适量的激活剂(如金属离子)。
(2)在淀粉酶溶液中加入适量的抑制剂(如氟化物)。
(3)取等量淀粉加入各试管中,分别加入加入激活剂或抑制剂的淀粉酶溶液。
(4)观察并记录各试管中淀粉水解的程度。
五、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响随着温度的升高,淀粉酶活性逐渐增强,在40℃时达到最大值,之后随着温度的继续升高,酶活性逐渐降低。
影响酶活力实验报告

一、实验目的1. 了解影响酶活力的因素。
2. 掌握实验操作技能,包括实验设计、数据记录和分析。
3. 分析不同因素对酶活力的影响规律。
二、实验原理酶是一种具有催化功能的蛋白质,在生物体内发挥着至关重要的作用。
酶的活力受到多种因素的影响,如温度、pH值、底物浓度、酶浓度等。
本实验通过探究这些因素对酶活力的影响,揭示酶活力变化的规律。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、淀粉、氯化钠、盐酸、氢氧化钠、葡萄糖、蒸馏水等。
2. 实验仪器:恒温水浴锅、试管、移液器、滴定管、pH计、计时器等。
四、实验方法1. 温度对酶活力的影响实验(1)将淀粉酶溶液置于不同温度(0℃、25℃、40℃、60℃、80℃)的水浴锅中,保温5分钟。
(2)分别取等量的淀粉溶液加入上述不同温度的淀粉酶溶液中,立即开始计时。
(3)每隔一定时间取样,用碘液检测淀粉剩余量,记录数据。
(4)重复实验,取平均值。
2. pH值对酶活力的影响实验(1)将淀粉酶溶液分别置于pH值为2、4、6、8、10的盐酸和氢氧化钠溶液中,调节pH值。
(2)分别取等量的淀粉溶液加入上述不同pH值的淀粉酶溶液中,立即开始计时。
(3)每隔一定时间取样,用碘液检测淀粉剩余量,记录数据。
(4)重复实验,取平均值。
3. 底物浓度对酶活力的影响实验(1)将淀粉酶溶液置于25℃的水浴锅中,保温5分钟。
(2)分别取不同浓度的淀粉溶液加入淀粉酶溶液中,立即开始计时。
(3)每隔一定时间取样,用碘液检测淀粉剩余量,记录数据。
(4)重复实验,取平均值。
4. 酶浓度对酶活力的影响实验(1)将淀粉酶溶液分别稀释成不同浓度(0.1g/mL、0.2g/mL、0.3g/mL、0.4g/mL、0.5g/mL)。
(2)将淀粉溶液置于25℃的水浴锅中,保温5分钟。
(3)分别取等量的淀粉溶液加入不同浓度的淀粉酶溶液中,立即开始计时。
(4)每隔一定时间取样,用碘液检测淀粉剩余量,记录数据。
(5)重复实验,取平均值。
酶活性影响因素实验报告

酶活性影响因素实验报告酶活性影响因素实验报告引言酶是一种生物催化剂,能够在生物体内加速化学反应的进行。
酶活性的研究对于了解生物体的代谢过程以及开发新型药物具有重要意义。
本实验旨在探究不同因素对酶活性的影响,为酶的应用提供理论依据。
材料与方法1. 实验材料:酶溶液、底物溶液、缓冲液、试管、试管架、显微镜、计时器等。
2. 实验步骤:- 步骤一:将酶溶液、底物溶液和缓冲液按一定比例混合,制备反应液。
- 步骤二:将试管架放置在显微镜下,调节合适的放大倍数。
- 步骤三:将反应液倒入试管中,开始计时,并通过显微镜观察反应过程。
- 步骤四:记录不同实验组的反应时间,并进行数据分析。
结果与讨论1. 温度对酶活性的影响:通过实验发现,随着温度的升高,酶活性逐渐增加,但当温度超过一定范围后,酶活性开始降低。
这是因为酶分子在过高温度下会发生构象变化,导致其失去催化能力。
因此,在实际应用中需要控制好酶反应的温度,以保证最佳酶活性。
2. pH值对酶活性的影响:实验结果显示,在一定pH范围内,酶活性较高。
当pH偏离该范围时,酶活性显著下降。
这是因为酶分子对于酸碱环境的敏感性,过高或过低的pH值会导致酶分子的构象变化,从而影响其催化效率。
因此,在酶的应用过程中,需要根据具体的酶种类选择合适的pH条件。
3. 底物浓度对酶活性的影响:实验结果显示,随着底物浓度的增加,酶活性呈现出先增加后趋于稳定的趋势。
这是因为酶的活性受到底物的限制,当底物浓度过低时,酶分子与底物相遇的概率较低,导致酶活性降低。
而当底物浓度达到一定水平后,酶分子与底物的相遇概率趋于稳定,酶活性也相应趋于稳定。
因此,在实际应用中需要根据底物的浓度选择合适的酶用量,以保证最佳的催化效果。
结论本实验通过对酶活性影响因素的研究,发现温度、pH值和底物浓度对酶活性具有重要影响。
在酶的应用过程中,需要根据具体情况选择合适的温度、pH值和底物浓度,以保证最佳的酶活性和催化效果。
实验报告影响酶活性的因素

实验报告影响酶活性的因素实验报告影响酶活性的因素酶是一类生物催化剂,能够加速化学反应的速率。
在生物体内,酶参与了许多重要的生化过程,如新陈代谢、消化和免疫等。
了解酶活性的影响因素对于理解生物体的正常功能以及疾病的发生机制具有重要意义。
本文将从温度、pH值、底物浓度和酶浓度四个方面来探讨实验报告对酶活性的影响。
一、温度对酶活性的影响温度是影响酶活性的重要因素之一。
在适宜的温度范围内,酶活性会随温度的升高而增加,因为高温能够提高酶分子的动力学能量,使其与底物发生更多的碰撞。
然而,当温度超过酶的适宜范围时,酶的活性会迅速下降,甚至失活。
这是因为高温会破坏酶分子的三维结构,使其失去催化功能。
因此,在实验报告中,我们需要控制好温度,以保证酶活性的准确测定。
二、pH值对酶活性的影响pH值是指溶液的酸碱程度,也是影响酶活性的重要因素之一。
不同的酶对pH值的要求不同,有些酶在酸性环境中活性较高,而有些酶则在碱性环境中活性更高。
这是因为酶的活性与其分子结构密切相关,而pH值能够改变酶分子的电荷状态,从而影响其催化活性。
在实验报告中,我们需要在不同的pH值条件下测定酶的活性,以确定其最适宜的工作条件。
三、底物浓度对酶活性的影响底物浓度是指在酶催化反应中底物的浓度,也是影响酶活性的重要因素之一。
在一定范围内,底物浓度的增加会使酶活性逐渐增加,因为更多的底物能够与酶分子发生碰撞,从而增加反应速率。
然而,当底物浓度超过一定限制时,酶活性将不再增加,因为酶的活性受到底物浓度的饱和限制。
在实验报告中,我们需要确定底物浓度与酶活性之间的关系,以了解酶催化反应的动力学特性。
四、酶浓度对酶活性的影响酶浓度是指在酶催化反应中酶的浓度,也是影响酶活性的重要因素之一。
一般来说,酶浓度的增加会使酶活性逐渐增加,因为更多的酶分子能够与底物发生碰撞。
然而,当酶浓度超过一定限制时,酶活性将不再增加,因为酶的活性受到酶浓度的饱和限制。
在实验报告中,我们需要确定酶浓度与酶活性之间的关系,以了解酶催化反应的动力学特性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
实验报告-不同因素对酶的影响成绩:酶的基本性质实验一一底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度 实验名称:实验类型:分离鉴定实验同组学生姓名:一、实验目的和要求(必填) 二、实验内容和原理(必填) 三、主要仪器设备(必填) 四、操作方法和实验步骤 五、实验数据记录和处理 六、实验结果与分析(必填)七、讨论、心得I .酶的基本性质——底物专一性一、实验目的和要求1. 了解酶的专一性。
2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3.学会排除干扰因素,设计酶学实验。
二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性,酶催化的 反应(酶促反应)要比相应的没有催化剂的反应快103-1017倍。
酶催化作用的一个重要特 点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物 无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同,它们的专一性可以分为下列几种: 1. 相对专一性 一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2. 绝对专一性:有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物,而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作 用其它双糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种,而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于 D-型糖而不能作用于 L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作 用来观察酶的专一性。
采用Benedict 试剂检测反应产物。
Ben edict 试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。
Na 2CO+ 2H 2O 2NaOH + fCOCuSO+ 2NaOHCu (OH ) ■2+ Na z SO 还原糖(一CHO or — C=O )+ 2Cu (OH ) 2CU 2O (砖红色或黄色)+ 2H 2O +糖的氧化产物在分子结构上,淀粉几乎没有,而蔗糖、棉子糖全无半俪基,它们均无还原性,因此它 们与Ben edict 试剂无呈色反应。
淀粉被淀粉酶水解,产物为葡萄糖;蔗糖和棉子糖被蔗糖酶水解,其产物为果糖和葡萄糖,它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖,与Ben edict 试剂共热,即产生红棕色 Cu2 O 沉淀。
本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作 用。
三、实验材料与试剂 1、实验材料⑴ 蔗糖酶(样品W ):⑵新鲜唾液(含唾液淀粉酶);2、实验试剂⑴ 蔗糖酶液沖门七穿实验报告课 程名称:生物化学实验(甲) 专业:姓名: 学号: 日期: 地点:指导老师:蔗糖酶液(样品W)加蒸馏水适当稀释,备用;⑵唾液淀粉酶液(学生自制)取0.5mL 唾液至25ml量筒中,用蒸馏水(稀释)到25ml,用棉花过滤备用。
唾液稀倍数因人而异,可稀释50〜400倍,甚至更高;⑶5%蔗糖(A.R.)溶液;⑷0.5%淀粉溶液(含0.3%NaCI) ;(5) Ben edict 试剂;四、实验器材与仪器1.漏斗,2.脱脂棉花;3.恒温水浴(37C, 100°C);4.量筒;5.试管;6.烧杯;7.吸量管。
五、实验操作方法和步骤㈠检查试剂取3支试管,按下表操作:注:1、检查目的:试剂是否有干扰因素存在。
2、也可对蔗糖酶液、唾液淀粉酶液进行检查是否也有干扰因素存在,请自己设计。
㈡淀粉酶的专一性取三支试管,按下表操作:粉酶液经100 C加热3min处理后的样品对照组。
㈢蔗糖酶的专一性取三支试管,按下表操作:注:可增加一组蔗糖酶液经100加热3min处理后的样品对照组六、结果分析讨论各试管观察结果依次是:(一): 1号蓝绿色,2号蓝色,3号蓝色Ben edict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。
3只试管都为蓝色说明几只试管中都没有果糖和葡萄糖,说明在不加酶时,淀粉和蔗糖不易水解。
试剂无干扰因素的存在。
(1号试管是蓝绿色可能是因为有少部分的淀粉水解)(二): 1号土黄色,2号黄绿色,3号蓝色加入唾液淀粉酶,1号试管底物是淀粉,所以很容易水解成葡萄糖,与Ben edict试剂共热,即产生红棕色 CU2O沉淀。
所以1号颜色变化比较大。
(2号可能是因为蔗糖在 37C恒温水浴中也有少部分水解,所以颜色变化,但变化不明显。
)总的来看可以看岀唾液淀粉酶只对淀粉有催化活性,不能催化蔗糖水解,具有对淀粉的底物专一性。
3号是对照。
(三):1号蓝色,2号红棕色,3号蓝色加入蔗糖酶,2号试管底物是蔗糖,所以很容易水解成果糖和葡萄糖,与Ben edict试剂共热,即产生红棕色 CsO沉淀。
所以2号颜色变化比较大。
(1号可能是因为淀粉在 37C恒温水浴中也有部分水解,所以有颜色变化,但变化不明显。
)从这三支试管看岀蔗糖酶只对蔗糖的水解有催化作用,对淀粉无催化作用,具有对蔗糖的底物专一性。
3号是对照。
七、思考题1.观察酶专一性实验为什么要设计这 3组实验?每组各有何意义?蒸馏水有何用?第一组作为整个实验的空白对照组,检测Be nedict 试剂对实验结果的颜色有何影响,排除干扰因素的存在。
第二组作为检测淀粉酶的专一性实验组,第三组作为检测蔗糖酶的专一性的实验组。
蒸馏水作为每一个组中的空白对照,与组内其余两组进行对照。
2•将酶液煮沸10min后,重做二、三的操作,观察有何结果?各试管都为蓝色,因为酶在煮沸过程中已经变性,失去催化活性,故不能催化各自对应底物的水解反应。
3 •在此实验中,为什么要用0.5%淀粉(0.3%NaCI)溶液? 0.3%NaCI的作用是什么?0.3%NaCI中的CI-是作为激活剂激活唾液淀粉酶的活性,使实验结果不至于因为唾液淀粉酶的活性不足而导致不同。
八、注意事项1.试管要干净,所有试剂加量准确,加好试剂后要摇匀。
2.使用试剂时不要人为造成试剂间的互相污染;试剂用好瓶盖要立即盖好,防止试剂间的互相污染。
以免实验结果的错误。
n .影响酶活性的因素一一激活剂和抑制剂一、实验目的和要求1. 了解激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响。
2.学习检定激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。
二、实验基本原理在酶促反应过程中,酶的活性常受某些物质的影响,有些物质能使酶的活性增加,称为激活剂;某些物质它们并不引起酶蛋白变性,但能使酶分子上的某些必需基团(主要是指酶活性中心上的一些基团)发生变化,因而引起酶活力下降,甚至丧失,致使酶反应速度降低,称为酶的抑制剂。
酶的激活剂种类:1、一些简单的无机离子,如Mg2+、Cl-等;2、一些中等大小的有机分子,如抗坏血酸等也是激活剂,它们对某些含巯基的酶具有激活作用;3、有些酶的催化作用易受某些抑制剂的影响,因而能除去抑制剂的物质也可称为激活剂,如EDTA能除去重金属,因而能解除重金属对酶的抑制作用。
4、具有蛋白质性质的大分子物质,这些激活剂是指可对某些无活性的酶原起作用的酶。
酶的抑制剂有许多种:如重金属离子(Ag+、Hg2+、Pb2 +、Cu2 +等)、CO氯化物、H2S砷化物、氟化物、生物碱、有机磷农药等都是抑制剂。
少量的激活剂或抑制剂就能影响酶的活性,而且常具有特异性。
值得注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的,各种激活剂对酶的作用是不同的。
本实验利用淀粉被水解的不同阶段产物与碘有不同颜色反应,定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中激活或抑制现象。
淀粉经酶促水解为葡萄糖的不同阶段的产物与碘作用的颜色反应如下:淀粉—武俺糊韬一虹邑穆粕一无色槪辖一麦芽糖一葡蔔樋h11 11 ■ 1 4 11显誉色畐器色垦虹卷不曷芭不显色不扇色(碘費J 僚和(腆你〉仍为多就~£无还国性〉f有还療性〉本实验中,Cl-为唾液淀粉酶的激活剂;Cu2+为唾液淀粉酶的抑制剂。
利用淀粉被水解的不同阶段产物与碘有不同的呈色反应,定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中激活和抑制现象。
淀粉+ 蓝色淀粉+淀粉酶戒_ 水解产物+碘・颜色变化水解的程度是通过水解混合物遇碘溶液所呈现的颜色之变化来判断的。
三、实验材料与试剂1、实验材料新鲜唾液2、实验试剂⑴ 唾液淀粉酶(学生自制)取唾液1ml至25ml量筒中,用蒸馏水稀释至25ml,用棉花过滤备用。
唾液稀释倍数因人而异,可稀释50〜400倍, 甚至更高。
⑵0.1% 淀粉溶液⑶1.0% 氯化钠溶液⑷1.0% 硫酸铜溶液⑸1.0% 硫酸钠溶液⑹碘化钾-碘液四、实验器材与仪器1.试管及试管架2.量筒3.漏斗4.脱脂棉花5.点滴板6.吸量管7.恒温水浴(37 C)五、实验操作方法和步骤取试管4支,按下表操作:注意:⑴找岀准确的保温时间,是本实验是实验能否成功的关键步骤之一,唾液淀粉酶液浓度可根据个人情况而定,通过37C水浴溶保温计时,反应时间最好在8〜15min以内,只有确定准确的保温时间才能进行实验。
(2)加入酶液后,务必充分摇匀,保证酶与全部淀粉液接触的反应才能得到理想的颜色梯度变化结果。
(3)碘化钾-碘液不要过早地加到点滴板上,以免碘液挥发,影响显色效果。
六、结果分析讨论 1号试管为蓝紫色,2号为浅黄色,3号为褐色,4号为浅褐色。
试管1中颜色最深,说明 CuSO 4可以抑制淀粉酶的活性;试管2中颜色最浅,基本呈碘色, 故淀粉酶活性最高,说明 NaCI可以激活淀粉酶的活性;试管 3、4中颜色基本一致,且深浅居于试管1、2之间,淀粉酶活性一般,说明 Na+、SO 4 2-对淀粉酶活性都没有影响。
故总体上看,可以得岀 CI -是唾液淀粉酶的激活剂, Cu 2+是唾液淀粉酶的抑制剂。
七、思考题1.激活剂可分哪几类?本实验中 NaCI、硫酸铜是属于哪种类型?激活剂可分为:简单无机离子、中等大小有机分子、能除去抑制剂的物质、具有蛋白质性质的大分子物质等。
NaCI属于简单无机离子;CuSO属于重金属抑制剂。
2.本实验中,1,2,3, 4管各有何用意?为什么要设计第3管和第4管?1管可观察抑制剂对反应影响的现象,2管可观察激活剂对反应影响的现象,第3管可以将1管中的Na+和2管中的SQ2-对反应的影响去除,4管作为空白对照。
3.抑制剂与变性剂有何不同?试举例说明。
抑制剂只改变酶的催化活性,并不使蛋白质变性,其影响是可逆的;变性剂破坏了蛋白质的高级结构,使蛋白质变性,并且多数变性剂的影响是不可逆的。
如:Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂,但如果将Cu2+去除淀粉酶的活性又可以变为正常水平。
八、注意事项 1.试管要干净,所有试剂加量准确,加好试剂后要摇匀。
2.使用试剂时不要人为造成试剂间的互相污染,以免实验结果的错误。