纤维素半纤维素木质素含量测定方法

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纤维素、半纤维素、木质素测定

纤维素、半纤维素、木质素测定

纤维素含量的计算:纤维素=ADF(%)-经72%硫酸处理后的残渣(%)酸性洗涤木质素(ADL)含量的计算:ADL(%)=残渣(%)-灰分(硅酸盐,%)酸性洗涤木质素和酸不溶灰分(AIA)测定的优化:把酸性洗涤纤维置于50ml烧杯中,加入5ml 72%硫酸,20℃水解3h,然后加水45ml,室温过夜,次日用已称恒重的3号砂芯漏斗过滤,水洗残渣至pH6.5,于60℃烘干,称重。

把剩余残渣在马福炉中550℃经2.5h灰化,测得灰分重量。

洗涤优化:经过实际试验,发现中性洗涤纤维测定和酸性洗涤纤维测定中用丙酮冲洗这步效果不大,测量精度要求不高时,可省略。

方法一:化学滴定法(我们测定出来的结果较文献报道偏低)(一)纤维素含量的测定1.0.1N2.K(2)(3)(4)(5)(6)(7)定,用去(8)(9)1. 0.5%淀粉,2.(1)(2)5min (3)(4)(5)(6)(7)(8)(9)移液管吸取10mL滤液,加入10mL碱性铜试剂,盖好在沸水中煮15min(10)冷却,加入5mL草酸-硫酸混合液,加入0.5mL 0.5%淀粉,用0.01N硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失,用去b mL(11)取10mL碱性铜试剂,加5mL草酸-硫酸混合液,再加10mL滤液,加入0.5mL 0.5%的淀粉,0.01N硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失,用去a mL(12)生物质中半纤维素的含量计算公式x% = 0.9×100 [ 248-(a-b)](a-b)/10000×10×n(三)木质素含量的测定1. 所需溶液1%醋酸,丙酮,73%硫酸,10%氯化钡溶液,0.5N重铬酸钾溶液,浓硫酸,0.1 N硫酸亚铁铵溶液,试亚铁灵指示剂。

2. 实验步骤(1)标定新配的0.1N硫酸亚铁铵溶液, 滴定度为K(2)称取自然风干的生物质粉末0.05-0.1g,数值为n(3)装入离心管,加入10mL 1%醋酸,摇动5min混匀(4)离心,用5mL 1%醋酸洗沉淀(5)加丙酮3-4mL,在摇荡的情况下浸泡3min,洗三次(6)用玻璃棒将沉淀沿管壁分散开,将离心管放热水中使沉淀充分干燥(7)在干燥沉淀中加入73%硫酸3mL,用玻璃棒搅匀,挤压成均匀的浆液(8)室温下放置一夜(9)加入10mL蒸馏水,搅匀,置沸水中5min(10)冷却,加入0.5mL 10%氯化钡溶液,搅匀,离心,倒出清液,分别用10mL蒸馏水冲洗沉淀两次,每次要混匀原理:生物质(浒苔、锯末和玉米秸秆)在加热的情况下用醋酸和硝酸的混合液处理,在这种情况下,细胞间的物质被溶解,纤维素也分解成单个的纤维,木质素、半纤维素和其它的物质也被除去。

纤维素半纤维素木质素含量测定

纤维素半纤维素木质素含量测定

纤维素半纤维素木质素含量测定
纤维素半纤维素木质素测定是研究木材结构和生理性质重要方面,也是该分析行业最常用的测定之一。

木材中纤维素,半纤维素和木质素是木质工程材料的重要组成部分,它们的特性影响着材料的性能,因此知道它们的相对含量是非常重要的。

纤维素、半纤维素和木质素的测定可以采用雷蒙德-福特法,也是众多分析实验中最常用的方法。

该方法的原理是用蒸馏水分解木材组成,将得到的溶液浓缩时间控制和酸处理,然后测定残余物中含有的有机物,从而计算纤维素、半纤维素和木质素的百分含量。

实验步骤如下:
(1)首先,将2 g木材样品用一定量(常用容量为50ml)清水加热(离心搅拌),搅拌30min;
(2)离心中滤,50mL SuperECO 设备或阿诺德滤筒滤液,收集滤液并浓缩大约1/10;(3)用蒸馏水冲洗滤滤器上的残渣,加水至20 ml;
(4)将1N HCl或硝酸注入反应槽,增加滤液中的酸,保持恒定的pH值;
(5)将溶液加热至90℃,维持此温度15min;
(6)放置冷却,把所有有机物沉淀,并将浓度提高至20 mL;
(7)将沉淀物抽滤,用烘干后放入110℃高温烘箱烘干,直至恒定重量。

最后,用烘干的物质的重量和木材样品的重量来计算储存集的百分率。

实验得出的数据一般可用于研究木材的结构和组成,分析不同木材品种的差异,以及确定木材结构变化后其用途和性能上的影响。

以上是纤维素半纤维素木质素含量测定原理和步骤。

通过精心实施,可以得到准确准确的数据,为以后应用提供基础性数据,提高分析效率和可靠性。

纤维素、半纤维素、木质素测定

纤维素、半纤维素、木质素测定

原理采用范氏(Van Soest)的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)原理: 植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理,不溶解的残渣为中性洗涤纤维,主要为细胞壁成分,其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。

植物性饲料经酸性洗涤剂处理,剩余的残渣为酸性洗涤纤维,其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。

酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐,从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。

将72%硫酸处理后的残渣灰化,在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素(ADL)的含量。

试剂的配制中性洗涤剂(3%十二烷基硫酸钠):准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠(EDTA,C10H14O8Na2?2H2O,分析纯)和6.8g硼酸钠(Na2B4O7?10H2O,分析纯)放入烧杯中,加入少量蒸馏水,加热溶解后,再加入30g十二烷基硫酸钠(C12H25NaO4S,分析纯)和 10ml乙二醇乙醚(C4H10O2,分析纯);再称取4.56 g无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,分析纯)置于另一烧杯中,加入少量蒸馏水微微加热溶解后,倒入前一个烧杯中,在容量瓶中稀释至1000ml,其中pH 值约为6.9~7.1(pH值一般勿需调整); 1N 硫酸:量取约27.87 ml浓硫酸(分析纯,比重1.84,98%),徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中,冷却后注入1000ml容量瓶定容,标定;酸性洗涤剂(2%十六烷三甲基溴化铵):称取20g十六烷三甲基溴化铵(CTAB,分析纯)溶于1000ml1N硫酸,必要时过滤;中性洗涤纤维测定准确称取1.0000g样品(通过40目筛)置于直筒烧杯中,加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。

将烧杯套上冷凝装置于电炉上,在5~10min内煮沸,并持续保持微沸60min。

煮沸完毕后,取下直筒烧杯,将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤,将烧杯中的残渣全部移入,并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣,直洗至滤液呈中性为止。

美国能源部NREL-测三素标准

美国能源部NREL-测三素标准

NREL法测定纤维素、半纤维素及木质素的含量(版本日期:2008-4-25)一、准备工作1、72 %(w/w)硫酸的配制(100 g)98 %的浓硫酸:72 / 98 % = 73.5 g水:100 −73.5 = 26.5 g注意:先加水后加硫酸!2、器皿125 mL白口瓶(72 %硫酸)水解瓶(配橡胶盖、铝盖)G3玻砂漏斗二、测定步骤1、称取0.3000 ± 0.001 g的绝干原料加入水解瓶,标记,做平行样;2、加入3.00 ± 0.01 mL的72 %硫酸,搅拌至原料充分混合。

混匀后置于30 ± 3 ℃的水浴中保温60 ± 5 min,每5~10 min搅拌一次;3、取出加入84 ± 0.04 mL去离子水稀释到4 %,盖紧旋钮,颠倒混匀;4、做sugar recovery standards (SRS)校正糖在酸解时的损失。

配制糖溶液,包括:葡萄糖,木糖(浓度越接近酸解样品中的糖浓度越好)。

称取各种糖精确至0.1 mg至水解瓶,加入10 mL去离子水,加入348 μL的72 %硫酸,旋紧旋钮。

和酸解样品灭菌锅121 ℃,1 h,取出冷却后打开;5、酸水解后使用G3玻璃器皿真空过滤,取50 mL滤液测量酸溶木质素,纤维素和木聚糖含量;6、使用热的去离子水洗涤过滤后残渣到中性,在烘箱105 ± 3 ℃,干燥至绝干,称量记录。

干燥后转移到马弗炉中,575 ± 25 ℃灼烧24 ± 6 h测量灰分。

取出冷却至室温后称重记录。

每个样品取平行对照。

由此得到酸不溶木质素的含量:酸不溶木素含量(AIL %) = (G2−G1) × (1−Extra%) / [ G (1−W) ] × 100 %其中:G2为过滤后残渣和玻璃滤器的绝干重量g,G1为灼烧后的灰分和玻璃滤器的重量g,G为水解样品质量g,W为水分含量,Extra %代表抽提物的含量。

纤维素、半纤维素、木质素测定

纤维素、半纤维素、木质素测定
a:滴定10ml K2Cr2O7-H2SO4对照液所用去Na2SO3的体积(ml)
半纤维素含量的测定
1.1实验仪器及试剂
100ml烧杯一只、电炉、离心机、玻棒、球形玻盖、分光光度计、80%的Ca(NO3)2溶液、2mol/L盐酸、6%苯酚、浓硫酸
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ1.2实验步骤
称取黄姜粉0.2g装入100ml烧杯,加入80%的Ca(NO3)2溶液15ml,加热至沸,在微沸的条件下加热5min。稍冷后离心,用10ml热水洗涤,共洗涤离心3次。向装有沉降物的离心管中加入2mol/L盐酸10ml,盖好带有玻棒的球形玻盖,沸水中煮沸45min,同时要定时进行搅拌,随后过滤,收集滤液,待测。取待测样品和对照各2ml(含糖10~50μg),分别加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,静止10min摇匀,室温放置20min后550nm测光密度。用预先以葡聚糖做好的标准曲线即可计算出样品中总糖的重量,再用下面的公式计算半纤维的百分含量(%)
X:纤维素百分含量(%)K:Na2S2O3滴定度W:黄姜粉的重量(g)
a:滴定10ml K2Cr2O7-H2SO4对照液所用去Na2S2O3的体积(ml)
b:测定纤维素所用去Na2S2O3的体积0.675:纤维素的滴定度乘100
木质素含量的测定
3.1实验仪器及试剂
离心机、电炉、玻棒、量筒、1%HAc、丙酮、72%的H2SO4溶液、10%的BaCl2、0.25mol/L K2Cr2O7-H2SO4溶液、0.1mol/LKI溶液、淀粉溶液。
2.2实验步骤
称取黄姜粉0.1g,装入离心管中,加入HAc和HNO3混合液10ml,盖上带有玻棒的球形玻盖,置沸水中煮沸25min,同时要定期进行搅拌。冷却后离心,弃上清。而后向沉降中加0.25mol/LK2Cr2O7-H2SO4溶液10ml,搅匀,将离心管放入开水中10min,并定时搅拌。冷却后将溶液倒入250ml烧杯中,同时用15ml蒸馏水冲洗沉淀。待溶液冷却后加入0.25mol/LK2 K2Cr2O7-H2SO4溶液50ml和几滴淀粉溶液,用0.05mol/L的Na2S2O3体积。按下面的公式计算纤维素的百分含量(%)

玉米秸秆中纤维素、半纤维素和木质素的测定

玉米秸秆中纤维素、半纤维素和木质素的测定

( . si t f e iiea dL f ce c s Unv ri f ia , ia 5 0 2 Chn ; 1I t ueo dcn n ieS in e, iest o n n Jn n2 0 2 , i a) n t M y J
( . h n o gZ o g i R etr f o dA dt e, i n2 0 1, hn ) 2 S a d n h n xe &D C ne F o d iv sJ a 5 0 3 C ia o i n
能 源 。怎 样充 分 利 用秸 秆 就 成 了迫 切 要解 决 的问
题 。玉 米秸 秆 主 要 由植 物 细胞 壁 组 成 ,基 本 成 分
和 聚木 糖 硫 酸 酯 ;木 质 素是 由 四种 醇单 体 ( 香 对
豆醇、松柏醇 、5羟基松柏醇、芥子醇 )形成 的 一

种 复 杂 酚类 聚合 物 ,可用 作 混凝 土减 水剂 、 陶
c lu o e h mie l o ea d lg i o t n s32 , 7.2% a 4 ells , e c l ul s i n n c n e ti % 2 8 n nd 1 2%,S ha o l ma ul u eo o 5。 o t twec u d kef l s fc r n sa k . t l s
摘 要 为 了解决大量玉米秸秆被 焚烧或堆砌在 田头,既污染环境又浪 费能源的I ̄ ,对原有的测定纤维素、半纤维素和 ' - - 1 木质 素含 量的方法进行试验创新 ,得 出 了更准确 、 简便的测定方 法;测得 玉米秸秆 中纤维素 半纤 维素和木质素含量 的
质 量 分数 分 别 为 3%、 2 .2 和 1 .2 2 7 8 % 4%,进 而 能充 分 利 用 玉 米 秸秆 。 5

纤维素的测定方法

纤维素的测定方法

实验原理植物的主要化学成分是纤维素、半纤维素和木质素这三部分。

它们是构成植物细胞壁的主要组分。

其中,纤维素组成微细纤维,构成纤维细胞壁的网状骨架,而半纤维素和木质素是填充在纤维和微细纤维之间的“粘合剂”和“填充剂”。

1. 纤维素生物制粉末在加热的情况下用醋酸和硝酸的混合液处理,在这种情况下,细胞间的物质被溶解,纤维素也分解成单个的纤维,木质素、半纤维素和其它的物质也被除去。

淀粉、多缩戊糖和其它物质受到了水解。

用水洗涤除去杂质以后,纤维素在硫酸存在下被重铬酸钾氧化成二氧化碳和水。

C6H10O5 + 4K2Cr2O7 + 16H2SO4 = 6CO2 + 4Cr2(SO4)3 + 4K2SO4 + 21H2O过剩的重铬酸钾用硫酸亚铁铵溶液滴定,再用硫酸亚铁铵滴定同量的但是未与纤维素反应的重铬酸钾,根据差值可以求得纤维素的含量。

2. 半纤维素用沸腾的80%硝酸钙溶液使淀粉溶解,同时将干扰测定半纤维素的溶于水的其它碳水化合物除掉。

将沉淀用蒸馏水冲洗以后,用较高浓度的盐酸,大大缩短半纤维素的水解时间,水解得到的糖溶液,稀释到一定体积,用氢氧化钠溶液中和,其中的总糖量用铜碘法测定。

铜碘法原理:半纤维素水解后生成的糖在碱性环境和加热的情况下将二价铜还原成一价铜,一价铜以Cu2O 的形式沉淀出来。

用碘量法测定Cu2O的量,从而计算出半纤维素的含量。

测定还原性糖的铜碱试剂中含有KIO3和KI,它们在酸性条件下会发生反应,也不会干扰糖和铜离子的反应。

加入酸以后,会发生反应释放出碘:KIO3+ 5KI +3H2SO4= 3I2+ 3K2SO4+3H2O加入草酸以后,碘与氧化亚铜发生反应:Cu2O + I2+ H2C2O4= CuC2O4+ CuI2+ H2O过剩的碘用Na2S2O3溶液滴定:2Na2S2O3 + I2 = Na2S4O6 + 2NaI3. 木质素用1%的醋酸处理以分离出糖、有机酸和其它可溶性化合物。

然后用丙酮处理,分离出叶绿素、拟脂、脂肪和其它脂溶性化合物。

植物半纤维素的测定

植物半纤维素的测定

植物半纤维素的测定植物半纤维素是一种存在于植物细胞壁中的复杂多糖,由于其在纤维素和木质素之间的位置,具有重要的生物学和工业应用价值。

因此,准确测定植物半纤维素的含量对于研究植物细胞壁的结构和功能以及工业生产中的应用具有重要意义。

本文将介绍几种常用的测定植物半纤维素含量的方法。

一、化学分析法化学分析法是测定植物半纤维素含量最常用的方法之一。

其中,硫酸盐法是最常用的一种方法。

该方法通过将样品与浓硫酸反应,将纤维素和木质素溶解,而半纤维素则不溶解,从而可以通过差异计算出半纤维素的含量。

二、酶解法酶解法是一种通过使用特定酶解植物细胞壁中的纤维素和半纤维素的方法。

常用的酶解剂包括纤维素酶、半纤维素酶等。

通过对样品进行酶解反应,然后通过酶解产物的分析,可以确定半纤维素的含量。

三、近红外光谱法近红外光谱法是一种通过检测样品在近红外波长范围内的吸收光谱,来预测样品的成分含量的方法。

该方法不需要对样品进行化学处理,能够快速准确地测定植物半纤维素的含量。

四、红外光谱法红外光谱法是一种通过检测样品在红外光谱范围内的吸收光谱,来判断样品中的化学成分的方法。

通过对红外光谱图的分析,可以确定植物半纤维素的含量。

五、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种通过将样品溶解后,通过在特定条件下通过色谱柱分离植物半纤维素的方法。

通过测定色谱图中半纤维素峰的面积或峰高,可以计算出半纤维素的含量。

六、质谱法质谱法是一种通过将样品分解后,通过质谱仪检测样品中的化学组分的方法。

通过质谱图的分析,可以确定植物半纤维素的含量。

测定植物半纤维素的含量可以使用多种方法。

每种方法都有其优缺点,选择合适的方法应根据实际需求和实验条件进行。

随着科学技术的不断进步,相信测定植物半纤维素含量的方法会越来越准确和便捷,为植物细胞壁的研究和工业应用提供更多的支持。

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HPLC 图:
样 1:
MV
40.00 38.00 36.00 34.00 32.00 30.00 28.00 26.00 24.00 22.00 20.00 18.00 16.00 14.00 12.00 10.00 8.00 6.00 4.00 2.00 0.00 -2.00
1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00 18.00 19.00 20.00 分钟
1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00 18.00 19.00 20.00 分钟
(其中ε为生物质在特定波长的吸收
能力,可查)
单糖浓度 C
CHPLC 稀释倍数 .
标准单糖平均回收率 Rave.sugar=稀 稀酸 酸处 处理 理前 后糖 糖液 液浓 浓度 度
纤维素%=C1g0l0u0
86.73 L 0.90 W 物料重量
100%
半纤维素%=(Cxyl100C0araW)物料86重.7量3L 0.88 100%
3. 粉碎物料,取 40 目‐60 目之间的木质纤维素。称取 300±10.0 mg,用滤纸包好放入索氏 抽提提取管中,使其低于虹吸管最高处。
4. 水抽:水溶性物质有无机物质;非结构性糖;含氮物质等,用索氏抽提法抽提 6‐24 h。 (根据木质纤维素特点决定需不需要进行水抽)
5. 醇抽:(水抽后将水倒干净后加入 95% 乙醇进行醇抽)醇溶性物质有叶绿素;蜡类或其 他微量组分,用索氏抽提法抽提 16‐24 h。(5g:200mL,看物料密度和抽提器高度)
6. 抽提完成后风干物料(如果湿,40℃同前条件预干燥) 7. 将物料加入带盖的管中(20mL 具塞试管),加入 3.00±0.01mL 的 72% 硫酸溶液并搅拌
1 min,将管盖好后放入 30±3 ℃的水浴锅中温浴 60±5 min,每隔 5-10 min 搅拌一
次,搅拌过程中保持管在水浴锅中。(全过程磁力搅拌就好)
温为 55 ℃,检测器温度为 30 ℃,监测器为示差折光检测器,运行时间为 20 min。
15. 根据标准曲线算得样品中糖的浓度,进而算的纤维素半纤维素的含量。
16.
计算方法:W =W ‐W 酸不溶性木质素
坩埚+滤渣干燥后重量
马弗炉烧后坩埚重量
%酸溶性木质素
UVabs 0.08673 稀释倍数 ε 物料重 光程长
8. 将管中的物料转移到一个带盖的瓶子中,稀释酸的浓度至 4% ,所加蒸馏水包括冲洗水 在内共 84.00±0.04 mL 。
9. 移取糖回收标准液(SRS)10.00 mL 于另一瓶中,加入 348 µL 72% 硫酸。糖回收标准液: 即为单糖的 4% 稀硫酸溶液,用于折算糖稀酸、高温水解过程中变成其他物质,如糠醛 等的损失率。精确称取一定量的葡萄糖、木糖、阿拉伯糖于 100mL 容量瓶中,分装成 10 份,每份 10 mL,放入‐80℃ 超低温冰箱中保存,用时溶解后加入 348 µL 72% 硫酸溶液 即可。(可先测样品浓度,再回去参照该浓度配样算回收率)
NREL 测纤维素、半纤维素和木质素的含量的步骤
1. 测木质纤维素中的水分。用烘箱在 105℃下烘干至恒重(至少烘 4 h)测其含水量。 2. 如果木质纤维素中含有的水分高于 10%则需风干,在空气湿度较大或物料较湿的情况下
于不高于 40℃的烘箱内烘(恒重),如果含水量低于 10%则无需处理而进行粉碎,粉碎时 机器会产生热量对生物质有影响,所以一次粉碎时间不宜过长。
13. 酸溶性木质素的测定(6 h 以内测定)。取滤液稀释适当倍数后用分光光度计测其 OD 值
(0.7‐1),硫酸作为参比和稀释液。
14. 滤液用碳酸钙中和后进行 HPLC 法分析结构糖含量。用 Biorad Aminex HPX‐87H 柱对样品
进行分析的条件为:流动相为 0.005M 硫酸, 流速为 0.6 mL / min,进样量为 20 µL,柱
10. 将瓶子放入高压灭菌锅中,于 121 ℃下保温 60 min,待温度降为室温的时候打开瓶盖。 11. 用烘干至恒重在干燥器中冷却并记录其重量的砂芯坩埚抽滤,所得滤液用来分析纤维素
半纤维素含量及酸溶性木质素,残渣则用来分析酸不溶性木质素。
12. 将坩埚放入 105 ℃烘箱中烘干至恒重(重量精确到 0.1 mg),再放入 575±25℃ 马弗炉 中烧 24±6 h。马弗炉的程序升温条件为:从室温升至 105 ℃,保持 12min,以 10 ℃ /min 的速率升至 250 ℃ 保持 30 min,以 20 ℃/min 的速率升至 575 ℃保持 180 min。 待温度降至 105 ℃的时候将坩埚取出放入干燥器中冷却并称重。(总灰分与酸不溶木素 灰分不同,这一步要测)
实验结果:
标准单糖回收率葡萄糖
. .
1.034 标准单糖回收率木糖
. .
1.149
标准单糖回收率阿拉伯糖
. .
1.084
纤维素含量 . / .
. .
. . 35.61% (其中 0.9673 为稀释倍数)
半纤维素含量 .
.
.
.
.
.
. . 21.68% (其中 0.9673 为稀释倍数)
木质素含量=酸溶性木质素+酸不溶性木质素=3.67%+23.56%=27.23%
保留时间/min 8.857 9.472
单糖类别 葡萄糖 木糖
10.404 样品 2:
阿拉伯糖
MV
38.00 36.00 34.00 32.00 30.00 28.00 26.00 24.00 22.00 20.00 18.00 16.00 14.00 12.00 10.00 8.00 6.00 4.00 2.00 0.00 -2.00
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