预购2018动物疫病监测诊断试剂清单
预购2018动物疫病监测诊断试剂清单
预购2018年度动物疫病监测诊断试剂清单试剂盒内容：试剂微量滴定板，已用 PRRSV 重组蛋白包被酶结合物浓缩液（10X）阳性对照阴性对照稀释缓冲液 14稀释缓冲液 3浓缩洗涤液（20X）底物溶液终止液（H 2 SO 4 0.5M）1. 酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在5℃（±3℃）下贮存。
2. 其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。
3. 洗涤液和样品稀释液可用于ID VET 所有系列产品。
检测步骤：在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。
试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。
1. 微孔板样品预稀释：1:40 倍195μL 样品稀释液14 加入每孔。
5μL 用于检测样品加入对照不需要稀释加样：100μL 阴性对照（不需稀释）加入孔A1 和B1。
100μL 阳性对照（不需稀释）加入孔C1 和D1。
100μL 预稀释样品加入剩下孔内提示：加样后板震荡混匀（2min,200rpm）效果更佳且不会影响结果。
2. 21℃（±5℃）下孵育30min±3min。
3. 用300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔5 次。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔变干。
4. 用样品稀释液3 按照1：10 的比例的稀释浓缩酶标结合物（10X）制备酶标结合物（1X）（1 份浓缩洗涤液加9 份样品稀释液3）。
5. 吸取100μL 的酶标记结合物（1X）加入到每孔中。
6. 21℃（±5℃）下孵育30min±3min。
7. 重复步骤3。
8. 吸取100μL 的底物溶液加入到每孔中。
9. 21℃（±5℃）下暗室内孵育15min±2min。
10. 在每孔中加入100μL 的终止液终止显色反应。
11. 在酶标仪的450nm 波长读结果。
实验有效性：在下列情形下实验有效：阴性对照的平均OD 小于等于0.150. OD NC ≤≤0.150阳性对照与阴性对照平均OD 值差值大于等于0.150 OD PC - OD NC ≥0.150结果判定：对于每个样品，计算其S/P 比值：每个样品得出一个（S/P）值结果值结果S/P≤0.4 阴性S/P≤0.4 阴性S/P＞0.4 阳性S/P＞0.4 阳性5猪瘟ELISA试剂盒实验原理：微量滴定板已经用E2 糖蛋白包被。
草鱼细菌性病原体嗜水气单胞菌分离鉴定和药敏试验
2019.102018年笔者对泗阳县运河北片草鱼养殖进行了疫病监测与流行病学调查，并对具有典型症状的发病草鱼进行了病原菌株分离和鉴定，将鉴定出的嗜水气单胞菌进行了常用抗菌药物敏感性试验，旨在为嗜水气单胞菌病原引起的草鱼细菌性疾病有效检验与防控及相对应的有效治疗提供依据。
一、材料与方法1.试验材料(1)2018年4－10月在草鱼养殖场的不同发病塘口，选取具有典型发病症状草鱼进行分离，分离部位为血液，采样时间、地点、症状、API－20E 生化反应编号、菌株种类详细情况见表1。
(2)营养肉汤、营养琼脂、TCBS 琼脂、脱脂奶蔗糖胰蛋白胨琼脂购于北京陆桥。
肠杆菌和其他非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(英文名API 20E)购于梅里埃诊断产品(上海嘉合)有限公司。
动物用药敏分析试剂板购于南京菲恩医疗科技有限公司。
2.试验方法细菌分离鉴定和菌株对药物感受性试验在县水产站病害检测无菌操作室内进行。
试验操作遵循《鱼类细菌病检疫技术规程(SC/T 7201.1－2006、SC/T 7201.1－2006)》和梅里埃API－20E 试剂条鉴定及南京菲恩动物用药敏分析试剂板操作流程。
二、试验结果1.嗜水气单胞菌分离及形态特征观察从病鱼血液分离到的嗜水气单胞菌在普通营养琼脂培养基上生长良好，28℃培养18～24小时，形成圆形光滑、边缘整齐、湿润、微凸、微白色菌落，在脱脂奶蔗糖胰蛋白胨琼脂平板上，菌落呈乳白色、微凸、湿润，周围出现清晰的溶蛋白透明圈，革兰氏染色阴性，油镜视野下短杆状。
2.嗜水气单胞菌的氧化酶试验和生理生化鉴定对分离的细菌进行生理生化检测，结果判定为嗜水气单胞菌的具体生理生化特征见表2。
依据《伯杰氏鉴定细菌学手册》(1994)“气单胞菌属细表1菌株分离清单汇总442019.10表312株细菌对8种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)对照毫克/升菌种间特征鉴别表”对分离到的嗜水气单胞菌进行Ⅰ和Ⅱ分类，并分别命名为Ⅰ－1、Ⅰ－2、Ⅰ－3和Ⅱ－1、Ⅱ－2、Ⅱ－3、Ⅱ－4、Ⅱ－5、Ⅱ－6、Ⅱ－7、Ⅱ－8、Ⅱ－9。
两种试剂盒分别检测猪口蹄疫O型、A型疫苗抗体的对比试验
2018 年第 8 期 兽医实验室
两种试剂盒分别检测猪口蹄疫 O 型、A 型 疫苗抗体的对比试验
杨虹 1 吴聪 2 1. 南昌市动物疫病预防控制中心 2. 江西农业大学动物科技学院
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄动物的一种急性、 对猪口蹄疫 O 型、A 型二价疫苗免疫抗体进行了免疫效
二、结果
1. 抗 体 检 测 合 格 率。 使 用 VP1-ELISA 诊 断 试 剂 盒 检 测 O 型、A 型 口 蹄 疫 抗 体 合 格 率 分 别 为 86.67%、 80.00%，使用 SPC-ELISA 检测试剂盒检测 O 型、A 型 口蹄疫抗体合格率分别为 90.00%、83.33%（表 1）。
最好的水平。 选择合适的接毒时间至关重要，进行 PCV2 培养时 ,
应在细胞接种或未形成单层之前接种。细胞接种后 0 h 以 MOI 为 0.05 接种 PCV2 病毒，接种病毒时间较早 , 严重影响了细胞的正常生长，病毒毒价较低 ；细胞接种 后 12 h 以 MOI 为 0.05 接种 PCV2 病毒，细胞密度有所 提高，虽然理论上细胞数越多 , 其所收获的病毒也应该 最多 , 但病毒毒价并没有细胞接种后 6 h 接种 PCV2 高。 说明细胞密度并不是决定病毒滴度的决定性因素 , 而是 细胞的生长状态。这主要是由于 PCV2 病毒在增值子代
3. 检 测 试 剂 盒。（1） 猪 口 蹄 疫 O 型 病 毒 VP1 结
2018 年以前，我国对猪一直进行 O 型口蹄疫的强 构 蛋 白 抗 体 ELISA 诊 断 试 剂 盒（VP1-ELISA）：批 号
制免疫，但根据农医发 [2018]1 号文件“农业部关于印发 20180302，购自郑州中道生物技术有限公司 ；猪口蹄疫
病毒时需要宿主细胞 DNA 复制相关的酶参与，只有细胞 处于指数生长前期时其 DNA 复制酶的活性最局，数量 最多。
中国动物疫病预防控制中心公布非洲猪瘟现场快速检测试剂名单
07据了解，按照农业农村部畜牧兽医局要求，中国动物疫病预防控制中心（农业农村部屠宰技术中心）（以下简称“中心”）于3月27日至5月 26日组织开展了第二次非洲猪瘟现场快速检测试剂评价工作，并对1月4日已公布的非洲猪瘟快检试剂进行了抽检。
6月11日，中心发布了通过专家评审的非洲猪瘟现场快速检测试剂名单，以便相关单位根据农业农村部有关检测工作要求选择使用。
本次评价和抽检对各单位送检的试剂盒中试产品进行了实验室测评和专家评审，检测样品类型仅限于样品盘的类型，包括猪血液和猪组织样品。
通过专家评审的非洲猪瘟现场快速检测试剂名单包括26个单位的34个产品，分为荧光定量PCR 类和等温扩增类两大类型，详细名单如下（表1）：表1非洲猪瘟现场快速试剂检测名单（按生产企业名称首字母顺序排列，不分先后）类型生产企业试剂名称应用范围荧光定量PCR 类北京明日达科技发展有限责任公司非洲猪瘟病毒实时荧光PCR 快速检测试剂盒猪血液和猪组织样品快速检测北京纳百生物科技有限公司非洲猪瘟病毒免提取快速荧光PCR 检测试剂盒北京伊森宝生物科技有限公司非洲猪瘟病毒实时荧光PCR 快速检测试剂盒广东海大畜牧兽医研究院有限公司非洲猪瘟病毒核酸检测试剂盒（便携式快速荧光PCR 法）广州悦洋生物技术有限公司非洲猪瘟病毒荧光PCR 快速检测试剂盒哈尔滨国生生物科技股份有限公司非洲猪瘟病毒荧光PCR 检测试剂盒哈尔滨维科生物药业有限公司非洲猪瘟病毒荧光定量PCR 检测试剂盒哈尔滨元亨生物药业有限公司非洲猪瘟病毒直接荧光PCR 快速检测试剂盒哈尔滨元亨生物药业有限公司非洲猪瘟病毒实时荧光PCR 快速检测试剂盒湖南国测生物科技有限公司非洲猪瘟病毒实时荧光PCR 检测试剂盒吉林和元生物工程股份有限公司非洲猪瘟病毒荧光定量PCR 快速检测试剂盒洛阳莱普生信息科技有限公司非洲猪瘟病毒荧光PCR 快速检测试剂盒洛阳普泰生物技术有限公司非洲猪瘟病毒荧光热对流PCR（cPCR）快速检测试剂盒青岛立见诊断技术发展中心非洲猪瘟病毒荧光定量PCR 快速检测试剂盒（冻干）青岛立见诊断技术发展中心非洲猪瘟病毒荧光定量PCR 快速检测试剂盒瑞普（保定）生物药业有限公司非洲猪瘟病毒荧光PCR 检测试剂盒上海快灵生物科技有限公司非洲猪瘟病毒荧光PCR 检测试剂盒（产物讲解备选)深圳市易瑞生物技术股份有限公司非洲猪瘟病毒直接荧光PCR 检测试剂盒深圳真瑞生物科技有限公司非洲猪瘟病毒荧光PCR 检测试剂盒深圳真瑞生物科技有限公司非洲猪瘟病毒微流控荧光PCR 快速检测试剂盒唐山怡安生物工程有限公司非洲猪瘟病毒荧光PCR 快速检测试剂盒武汉科前生物股份有限公司非洲猪瘟病毒实时荧光PCR 检测试剂盒肇庆大华农生物药品有限公司非洲猪瘟病毒（ASFV）荧光PCR 检测试剂盒郑州中道生物技术有限公司非洲猪瘟病毒荧光定量PCR 快速检测试剂盒中国牧工商集团有限公司VetMAXTM 非洲猪瘟病毒（AAFV）qPCR 检测试剂盒中国农业科学院兰州兽医研究所非洲猪瘟病毒直接扩增qPCR 检测试剂盒中牧实业股份有限公司成都药械厂非洲猪瘟病毒荧光PCR 检测试剂盒中牧实业股份有限公司兰州生物药厂非洲猪瘟病毒荧光PCR 快速检测试剂盒中国动物疫病预防控制中心公布非洲猪瘟现场快速检测试剂名单Copyright©博看网 . All Rights Reserved.行业纵览08中国动物保健 | 2019.07张鹤宇（1914—1975），河北省丰润县人，家畜解剖学家，教育家，长期从事家畜解剖学的研究工作，在大熊猫颅骨和消化器官、蒙古绵羊肾、北京鸭头部解剖，马腰荐神经丛及肾的血管分布等方面，都有较深入的研究。
猪病诊断试剂一览表
猪瘟 ELISA 抗原检测试剂盒（IDEXX）检测 病毒，特异性 100%全血、扁桃体、脾、肾 96ELISA
抗体检测试剂盒（IDEXX）检测抗体，与中和法 相关性 89.6%，特异性 100%血清 4802 猪伪狂犬 病 ELISA 检测试剂盒（基因缺失型，IDEXX）可 检测病毒感染，北美与欧盟指定扑灭计划使用，
但是始终没有说过关于爱情的任何字眼,她也习惯性的依赖,习惯性的丢三落四
毒通用 RT-PCR 检测试剂检测口蹄疫病毒，用于 猪口蹄疫的诊断与检测血清、水泡皮 10
cc0af1ca 易博
但是始终没有说过关于爱情的任何字眼,她也习惯性的依赖,习惯性的丢三落四
用于猪繁殖与呼吸综合征的诊断与检测肺、淋巴 结、血清 10 免疫组织化学诊断试剂检测病毒， 用于猪繁殖与呼吸综合征的诊断与检测肺、扁桃 体 304 猪细小病毒 PCR 检测试剂检测病毒，用于
猪细小病毒病的诊断与检测肠系膜淋巴结、肝脏 105 猪圆环病毒 PCR 诊断试剂检测病毒，用于圆 环病毒的诊断及 PCV-1、PCV-2 的鉴别诊断肺脏、 淋巴结、心脏、血清 480ELISA 试剂盒检眼,她也习惯性的依赖,习惯性的丢三落四
用于血清中的 PCV-2 的鉴别诊断血清 966 猪弓形 体 ELISA 试剂盒检测抗体，用于猪弓形体病的诊 断与检测血清 967 猪喘气病 ELISA 试剂盒 （IDEXX）检测抗体，用于感染或免疫效果检测
血清 480ELISA 试剂盒（IDEXX）检测抗体，用于 猪流感的诊断与检测血清 4808 口蹄疫非结构蛋 白抗体检测口蹄疫病毒非结构蛋白抗体，用于猪 口蹄疫病毒感染的诊断与检测血清 96 口蹄疫病
但是始终没有说过关于爱情的任何字眼,她也习惯性的依赖,习惯性的丢三落四
畜牧兽医局动物疫病监测诊断试剂采购项目的公开招投标书范本
嘉兴市畜牧兽医局动物疫病监测诊断试剂采购项目公开招标文件项目编号：JXSJ--采购单位：嘉兴市畜牧兽医局代理机构：嘉兴市建新工程造价咨询事务所有限公司备案单位：嘉兴市财政局年月日目录第一章公开招标采购公告 (3)第二章招标需求 (8)第三章投标人须知 (38)第四章评标办法 (52)第五章嘉兴市政府采购合同 (53)第六章投标文件格式 (58)第一章公开招标采购公告根据政府采购相关法律规定，经嘉兴市财政局确认委托[委托号：JM-_号]，嘉兴市建新工程造价咨询事务所有限公司受嘉兴市畜牧兽医局的委托，就下列项目进行公开招标，特邀请国内合格的投标人前来投标，现将有关事项公告如下：一、招标项目编号:JXSJ--二、采购组织类型：分散采购委托代理三、采购方式：公开招标四、招标项目：嘉兴市畜牧兽医局动物疫病监测诊断试剂采购项目五、采购内容及数量：、采购试剂名称、规格型号、生产商要求请见下表：注：预算单价为试剂每头份（毫升、条）的价格，头份数以说明书中最大头份为准，ELISA类Nx孔试剂盒所报单价为每孔价格。
、本次招标确定的中标单位供应期限自合同签订之日起至年月日；供应范围包括嘉兴市本级及各县（市、区）畜牧兽医局。
、本次招标选择一家供应商，如采购人对供应商的考核合格，金额不变的情况下可续签。
六、合格投标人的资格要求:、符合政府采购法第二十二条（、具有独立承担民事责任的能力；、具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度；、具有履行合同所必需的设备和专业技术能力；、有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录；、参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录；、法律、行政法规规定的其他条件）之供应商资格规定；、未被“信用中国”（）、中国政府采购网（）列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单。
、代理商应具有相应的兽药经营许可证或医疗器械经营许可证。
、具有主要投标货物原厂商授权的产品代理证书或持有原厂商针对本项目的特别授权书。
动物疫病抗体监测及相关器材用品采购项目询价成交公示招投标书范本
询价文件（采购）项目名称：和田市动物疫病抗体监测及相关器材用品采购项目采购单位：和田市畜牧兽医局联系人：杨湘于电话：详细地址：和田市招标代理机构：喀什铭远建设工程项目管理咨询有限公司联系人：吴晓禾电话：-详细地址：和田市阿恰勒西路号（玉洲花园小区）栋单元室招投标监督管理机构备案登记栏：和田市政府采购办备案目录第一部分询价公告第二部分投标须知第三部分货物需求及参数技术要求第四部分采购合同（范本）第五部分报价文件编制内容及格式样表备案盖章处和田市动物疫病抗体监测及相关器材用品采购项目询价公告喀什铭远建设工程项目管理咨询有限公司受和田市畜牧兽医局的委托，对和田市动物疫病抗体监测及相关器材用品采购项目进行询价采购，现邀请合格投标人进行投标。
一、项目名称：和田市动物疫病抗体监测及相关器材用品采购项目二、项目编号：KSMYHT-ZFCGGK--三、采购单位：和田市畜牧兽医局四、资金来源：财政资金五、采购内容：诊断液、防护用品、一次性耗材及相关器材等（具体技术参数详见招标文件）六、采购预算：.元（此采购预算为最高限价、如超过预算价的报价为无效报价）七、项目实施地点、供货时间、采购清单、技术要求等详见招标文件八、投标供应商资格要求：、满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条要求，须有相应的经营范围。
、投标供应商须提供经年审合格的营业执照（须有相应的采购经营范围）、税务登记证、组织机构代码证（或“三证合一”的营业执照）、法人应携带《法定代表人身份证明》及身份证原件，委托代理人应携带《法人代表授权委托书》及身份证原件；、投标供应商需提供兽药经营许可证；、凡拟参加本次招标项目的供应商，如在“信用中国”网站（）、中国政府采购网（）被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单的（尚在处罚期内的），将拒绝其参本次采购活动；、在本地区具有技术支持和完善的服务体系（报名时必须提供相关证明材料）；、本项目不接受联合体投标。
重庆市开州区牧兽医局20182020年兽用疫苗等防疫物资定
重庆市开州区畜牧兽医局2018-2020年兽用疫苗等防疫物资定点供应商采购中标结果预公示项目名称重庆市开州区畜牧兽医局2018-2020年兽用疫苗等防疫物资定点供应商采购采购编号2017ZFCG226 采购方式公开招标评审日期2018年1月10日公示日期2018年1月10日中标候选人包一：第一中标候选人：成都民生消毒剂有限责任公司；第二中标候选人：重庆旭牧兽药有限公司；第三中标候选人：重庆福斯特兽医用器材有限公司。
包二：第一中标候选人：重庆福斯特兽医用器材有限公司；第二中标候选人：重庆旭牧兽药有限公司；第三中标候选人：成都聚德鑫科技有限公司。
包三：第一中标候选人：重庆福斯特兽医用器材有限公司；第二中标候选人：重庆旭牧兽药有限公司；第三中标候选人：成都聚德鑫科技有限公司。
拟中标人包一：成都民生消毒剂有限责任公司（地址:成都市青羊区蛟龙工业港高新区B区7座）；包二：重庆福斯特兽医用器材有限公司（地址:重庆市渝北区松石支路468号16栋1-1-1）；包三：重庆福斯特兽医用器材有限公司（地址:重庆市渝北区松石支路468号16栋1-1-1）。
拟中标价包一：报价为95℅；包二：报价为98℅；包三：报价为95℅。
主要拟中标标的见附件采购人名称重庆市开州区畜牧兽医局采购人地址重庆市开州区云枫街道桔乡路426号采购联系人吕老师采购人电话采购代理机构名称重庆市开州区公共资源交易中心采购代理机构地址重庆市开州区文峰街道富厚街291号项目负责人陈老师联系电话评标委员会成员名单张进、熊灿、伍小勇、傅晓林、冉宇生附件：开州区畜牧兽医局2018-2020年兽用疫苗等防疫物资定点供应商采购项目主要拟中标标的情况序号名称品牌、规格型号制造商原产地1 二氯异氰脲酸钠粉民生牌，二氯异氰脲酸钠，含有效氯20%。
250克/瓶、40瓶/箱，每箱10公斤、100箱/吨。
成都民生消毒剂有限责任公司成都2 复合酚民生牌，复合酚，含酚、醋酸22-26%。
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预购2018年度动物疫病监测诊断试剂清单在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。
试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。
1. 微孔板样品预稀释：1:40 倍195μL 样品稀释液 14 加入每孔。
5μL 用于检测样品加入对照不需要稀释加样：100μL 阴性对照（不需稀释）加入孔 A1 和 B1。
100μL 阳性对照（不需稀释）加入孔 C1 和 D1。
100μL 预稀释样品加入剩下孔内提示：加样后板震荡混匀（2min,200rpm）效果更佳且不会影响结果。
2. 21℃（±5℃）下孵育 30min±3min。
3. 用 300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔 5 次。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔变干。
4. 用样品稀释液 3 按照 1：10 的比例的稀释浓缩酶标结合物（10X）制备酶标结合物（1X）（1 份浓缩洗涤液加 9 份样品稀释液 3）。
5. 吸取 100μL 的酶标记结合物（1X）加入到每孔中。
6. 21℃（±5℃）下孵育 30min±3min。
7. 重复步骤 3。
8. 吸取 100μL 的底物溶液加入到每孔中。
9. 21℃（±5℃）下暗室内孵育 15min±2min。
10. 在每孔中加入 100μL 的终止液终止显色反应。
11. 在酶标仪的 450nm 波长读结果。
实验有效性：在下列情形下实验有效：阴性对照的平均 OD 小于等于 0.150. OD NC ≤≤ 0.150阳性对照与阴性对照平均 OD 值差值大于等于 0.150 OD PC - OD NC ≥ 0.150结果判定：对于每个样品，计算其 S/P 比值：每个样品得出一个（S/P）实验原理：微量滴定板已经用 E2 糖蛋白包被。
加入样本和对照，经过孵育，如样本中含有抗体，将形成抗原-抗体复合物。
经过洗板，加入过氧化物酶结合物，它与没有结合抗体的点位结合，形成抗原-酶结合物复合体。
经过洗板，加入含底物 TMB 液。
呈色反应是与样本中抗体含量成反比；若没有抗体，溶液将呈现蓝色，并在加入终止液后转为黄色。
抗体存在的情况下将不呈现任何显色反应。
在 450nm 波长检测 OD 值。
稀释缓冲液 18 加入血清稀释后会改变颜色试剂盒内容：试剂包被的微量滴定板酶结合物标准液（10X 浓缩）阳性对照阴性对照稀释缓冲液 8浓缩洗涤液（20X）稀释缓冲液 12底物溶液终止液（H 2 SO 4 0.5M）1. 酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在 5℃（±3℃）下贮存。
2. 其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。
3. 洗涤液和样品稀释液可用于 ID VET 所有系列产品。
检测步骤：在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。
试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。
1.血清1. 加样：50μL 8 号稀释液加入每孔。
50μL 阳性对照加入孔 A1 和 B1。
50μL 阴性对照加入孔 C1 和 D1。
50μL 待检测样品加入剩下其他孔内。
2. 2. 37℃℃（±±2℃℃））下孵育 45±4min（短时孵育）或在 21℃℃（±±5℃℃））下孵育 16-20 小时（过夜孵育）。
3. 甩干板中液体，用 300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔 3 次。
在每一次洗涤后，甩去每个板孔中的液体，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液体。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔壁变干。
4. 非常重要：10X 浓缩酶标记抗体用稀释缓冲液 12 进行 10 倍稀释（1 份浓缩液+9份稀释液）。
吸取稀释的 100μL 的酶标抗体加入到每孔中。
5. 21℃℃（±±5℃℃））下孵育 30±3min。
6. 甩干板中液体，用 300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔 3 次，洗涤过程中避免孔壁变干。
7. 吸取 100μL 的底物溶液加入到每孔中。
8. 21℃℃（±±5℃℃）下暗室避光孵育 15min±2min。
9. 在每孔中加入 100μL 的终止液终止显色反应。
10. 在酶标仪的 450nm 波长读取 OD 值。
实验有效性：在下列情形下实验有效：阴性对照的平均 OD 大于 0.7 OD NC > 0.7阳性对照平均 OD 值小于阴性对照的 30% OD PC / OD NC ＜ 0.3结果判定：对于每个样品，计算其 S/N 百分比（S/N%）每个样品得出一个（S/N）短时孵育或过夜孵育的结果如下：值结果值结果S/N%≤50% 阳性S/N%≤50% 阳性50%＜S/N%≤60% 可疑50%＜S/N%≤60% 可疑S/N%＞60% 阴性S/N%＞60% 阴性2. 其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。
3. 相同名称的洗涤液和样品稀释液可用于 ID VET 所有系列产品。
检测步骤：在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。
试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。
1.血清1.1 短时间孵育1. 加样：每孔加入 50μL 样品稀释液 4。
孔 A1 和 B1 分别加入 50μL 阳性对照。
孔 C1 和 D1 分别加入 50μL 阴性对照。
剩下其他孔内加入 50μL 待检测样品2. 37℃（±2℃）下孵育 45min±4min。
1.2 过夜孵育1. 加样：每孔加入 75μL 样品稀释液 4。
孔 A1 和 B1 分别加入 25μL 阳性对照。
孔 C1 和 D1 分别加入 25μL 阴性对照。
剩下其他孔内加入 25μL 待检测样品2. 21℃（±5℃）下过夜孵育 16-20 小时。
1.3 不过过夜孵育或是短时间孵育，以下 1-9 步骤相同1. 甩干板中液体，用 300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔 3 次。
在每一次洗涤后，甩去每个板孔中的液体，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液体。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔壁变干。
2. 用稀释液缓冲液 3 按照 1：10 的比例的稀释浓缩酶标结合物（10X）制备酶标结合物（1X）（1 份浓缩洗涤液加9 份样品稀释液）。
3. 吸取 100μL 的酶标记结合物（1X）加入到每孔中。
4. 37℃（±2℃）下孵育 30min。
5. 甩干板中液体，用 300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔 3 次，洗涤过程中避免孔壁变干。
6. 吸取 100μL 的底物溶液加入到每孔中。
7. 21℃（±5℃）下暗室避光孵育 15min。
8. 在每孔中加入 100μL 的终止液终止显色反应。
9. 在酶标仪的 450nm 波长读结果。
实验有效性：在下列情形下实验有效：阴性对照的平均 OD 大于 0.7 OD NC > 0.7阳性对照平均 OD 值小于阴性对照的 30% OD PC / OD NC ＜ 0.3结果判定：对于每个样品，计算其 S/N 百分比（S/N）每个样品得出一个（S/N）实验原理：微量滴定板已经用伪狂犬病毒抗原包被。
加入样本和对照，经过孵育，如样本中含有抗体，将形成抗原合物。
经过洗板，加入过氧化物酶结合物，它与伪狂犬 gE 抗原的剩余位点结合，形成抗原酶结合物标准液（直接使用）阳性对照阴性对照稀释缓冲液 13浓缩洗涤液（20X）底物溶液终止液（H 2 SO 4 0.5M试剂1. 酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在 5℃（±3℃）下贮存。
2. 其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。
3. 相同名称的洗涤液和样品稀释液可用于 ID VET 所有系列产品。
检测步骤：在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。
试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。
1.血清1.1 短时间孵育1. 加样：每孔加入 20μL 样品稀释液 13。
孔 A1 和 B1 分别加入 50μL 阳性对照。
孔 C1 和 D1 分别加入 50μL 阴性对照。
剩下其他孔内加入 50μL 待检测样品。
2. 37℃（±2℃）下孵育 1h30±6min。
1.2 过夜孵育( 可以提高检测能力)1. 加样：每孔加入 80μL 样品稀释液 4。
孔 A1 和 B1 分别加入 20μL 阳性对照。
孔 C1 和 D1 分别加入 20μL 阴性对照。
剩下其他孔内加入 20μL 待检测样品。
2. 21℃（±5℃）下过夜孵育（16-20 小时）。
1.3 不管过夜孵育或是短时间孵育，以下 1-8 步骤相同1. 甩干板中液体，用 300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔 3 次。
在每一次洗涤后，甩去每个板孔中的液体，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液体。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔壁变干。
2. 吸取 100μL 的酶标记结合物（直接使用）加入到每孔中。
3. 21℃（±5℃）下孵育 30±3min。
4. 甩干板中液体，用 300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔 3 次，洗涤过程中避免孔壁变干。
5. 吸取 100μL 的底物溶液加入到每孔中。
6. 21℃（±5℃）下暗室避光孵育 15min±2min。
7. 在每孔中加入 100μL 的终止液终止显色反应。
8. 在酶标仪的 450nm 波长读结果。
实验有效性：在下列情形下实验有效：阴性对照的平均 OD 大于 0.7 OD NC > 0.7阳性对照平均 OD 值小于阴性对照的 30% OD PC / OD NC ＜ 0.3结果判定：对于每个样品，计算其 S/N 百分比（S/N）每个样品得出一个（S/N）短时孵育或过夜孵育的结果如下：值结果值结果S/N≤60% 阳性S/N≤60% 阳性60＜S/N≤70% 可疑60＜S/N≤70% 可疑。