显微镜技术发展
显微镜的发展史流程
显微镜的发展史流程一、早期简单显微镜显微镜的历史可以追溯到公元前一世纪，当时人们使用简单的放大镜来观察细小的物体。
这些早期的显微镜主要是使用单片或双片放大镜来放大物体的图像。
它们的功能非常有限，但为后来的显微镜技术奠定了基础。
二、光学显微镜诞生随着光学的发展，人们开始利用透镜组合来制造更复杂的光学显微镜。
1608年，荷兰眼镜制造商汉斯·利伯在两片透镜之间放置了一个可调节距离的管筒，从而发明了第一台实用的光学显微镜。
这种显微镜可以放大物体数十倍，使得科学家们能够观察到肉眼无法看到的微观世界。
三、显微镜技术革新17世纪和18世纪，显微镜技术得到了进一步的革新。
透镜的制作工艺不断改进，使得显微镜的放大倍数不断提高。
同时，科学家们开始利用染色技术来改善显微镜的观察效果，使得细胞等微观结构更加清晰可见。
四、电子显微镜发明20世纪初，电子显微镜的发明为显微镜技术带来了革命性的突破。
电子显微镜利用电子束代替光束来照射样品，从而实现了更高的放大倍数和更高的分辨率。
这使得科学家们能够观察到更加细微的结构和分子层面的现象。
五、超分辨率显微镜随着科学技术的进步，超分辨率显微镜技术的出现使得显微镜的分辨率进一步提高。
超分辨率显微镜利用特殊的光学原理和技术手段，突破了传统光学显微镜的分辨率极限，使得科学家们能够观察到更加精细的细胞结构和分子动态。
六、数字显微镜发展近年来，数字显微镜的快速发展为显微镜技术带来了新的变革。
数字显微镜将光学显微镜与计算机技术相结合，实现了图像的数字化处理和存储。
这使得科学家们能够更加方便地对观察结果进行分析和共享，同时也提高了显微镜的观测效率和精度。
七、纳米显微镜技术纳米显微镜技术是近年来兴起的一种新型显微镜技术，它利用特殊的纳米探针或纳米光源来观察纳米尺度的微观结构。
这种技术能够实现对单个分子或纳米颗粒的精确观测和操控，为纳米科学和纳米技术的发展提供了强有力的支持。
八、未来显微镜展望随着科学技术的不断进步，未来显微镜技术将继续迎来新的突破和发展。
显微镜的发展历史
引言：显微镜是一种重要的科学仪器，它以放大的方式使我们能够观察微小物体的细节。
随着时间的推移，显微镜经历了多个阶段的发展，从最早的简单光学设备到现代高级显微镜，为科学研究提供了巨大的帮助。
本文将详细介绍显微镜的发展历史，并重点分析其中的五个重要阶段。
概述：1.早期显微镜：早在17世纪，人们就开始使用简单的光学显微镜，如单透镜显微镜和复合透镜显微镜。
这些显微镜之所以简单，是因为它们只有一个透镜，无法提供高放大倍数。
2.高分辨率显微镜：19世纪末至20世纪初，学者们开始尝试使用高分辨率显微镜。
这些显微镜采用了更复杂的光学系统，可以提供更高的放大倍数和更高的分辨率。
其中包括波长更短的紫外显微镜和超分辨显微镜等。
3.电子显微镜：20世纪20年代，电子显微镜的发明引起了科学界的巨大轰动。
电子显微镜能够以更高的分辨率观察物体，并且可以观察非常小的微粒，如分子和原子。
4.共焦显微镜：20世纪60年代，共焦显微镜的问世彻底改变了生物学研究的面貌。
共焦显微镜利用激光扫描物体表面，可以获得物体的三维图像，并且对活体观察非常有效。
5.原子力显微镜：20世纪80年代，原子力显微镜的出现引起了巨大的轰动。
原子力显微镜可以以原子尺度观察物体的表面，对于材料科学和纳米技术的发展有重要意义。
正文：1.早期显微镜1.1单透镜显微镜的原理和结构1.2复合透镜显微镜的优缺点1.3显微镜在生物学研究中的应用1.4早期显微镜的局限性2.高分辨率显微镜2.1紫外显微镜的原理与使用2.2超分辨显微镜的工作原理2.3高分辨率显微镜在医学研究中的应用2.4高分辨率显微镜的挑战与发展3.电子显微镜3.1电子显微镜的工作原理与种类3.2电子显微镜在物理学研究中的应用3.3电子显微镜在材料科学中的应用3.4电子显微镜的局限性与改进4.共焦显微镜4.1共焦显微镜的原理和构造4.2共焦显微镜在细胞生物学研究中的应用4.3共焦显微镜在神经科学研究中的应用4.4共焦显微镜的发展和未来趋势5.原子力显微镜5.1原子力显微镜的原理和工作方式5.2原子力显微镜在纳米技术研究中的应用5.3原子力显微镜在材料科学中的应用5.4原子力显微镜的挑战和发展方向总结：显微镜的发展历史可以追溯到早期的简单光学显微镜，经过高分辨率显微镜、电子显微镜、共焦显微镜和原子力显微镜等多个阶段的发展，科学家们得以以更高的分辨率观察微小物体的细节。
2024年原子力显微镜市场发展现状
原子力显微镜市场发展现状概述原子力显微镜（AFM）是一种高分辨率的显微镜，能够在原子尺度上观察表面结构和物质特性。
随着科学技术的不断发展，原子力显微镜在材料科学、生物学、纳米技术等领域中得到广泛应用。
本文将对原子力显微镜市场的发展现状进行分析和概述。
原子力显微镜的原理原子力显微镜是一种基于探针的显微镜，利用纳米尺度探针对样品表面进行扫描，通过感知和调节探针与样品之间的相互作用力来获得样品的表面形貌和物理特性。
其工作原理主要包括近场力测量、反馈控制和成像处理等步骤。
近场力测量是原子力显微镜的核心原理，利用纳米尺度的探针与样品表面之间的相互作用力，如静电力、范德华力和弹性力等，通过感应、扭曲或振动探针来测量样品表面的形貌和性质。
反馈控制则是通过调节探针与样品之间的距离来保持合适的相互作用力，并保持探针与样品之间的力平衡状态。
成像处理是将所测得的原子力显微镜数据转化为可视化的图像，通常以三维形式呈现样品表面的形貌。
原子力显微镜市场的发展现状市场规模原子力显微镜市场的规模不断扩大，预计在未来几年会继续保持增长。
根据市场报告，2019年全球原子力显微镜市场规模达到了X亿美元，并预计在2025年将达到X亿美元的规模。
应用领域原子力显微镜在材料科学、生物学、纳米技术等领域的应用非常广泛。
在材料科学领域，原子力显微镜可以用来研究材料的表面形貌、纳米结构和性质，为新材料的开发和优化提供重要参考。
在生物学领域，原子力显微镜可用于观测生物样品的细胞结构、蛋白质折叠和分子相互作用等过程，为生物学研究提供了新的视角。
在纳米技术领域，原子力显微镜可以用来制备和操控纳米结构，为纳米器件和纳米材料的设计和制造提供关键支持。
市场竞争原子力显微镜市场竞争激烈，主要厂商包括Bruker、Keysight Technologies、NT-MDT Spectrum Instruments等。
这些公司在技术研发、产品质量和售后服务方面都有自己的优势。
显微镜发展史发展阶段
显微镜发展史发展阶段
显微镜的早期发展
显微镜的早期发展可以追溯到17世纪。
1590年，荷兰眼镜商亚斯·詹森和汉斯·利珀希分别发明了简易的显微镜，但这些早期的显微镜放大倍数较低，主要用于观察昆虫等小物体。
1665年，英国物理学家罗伯特·胡克制作了第一台复式显微镜，并首次描述了植物细胞的构造，为细胞这一概念命名。
同时，荷兰科学家安东尼·列文虎克发明了单式显微镜，并发现了微生物和细菌。
显微镜的重要发明和改进
18世纪，随着光学和机械技术的发展，显微镜的质量和分辨率有了显著提升。
1830年，约瑟夫·杰克逊·利斯特通过透镜组合减小了球面像差，进一步改进了显微镜。
19世纪，德国物理学家恩斯特·阿比对透镜设计进行了重要改进，提高了显微镜的分辨率。
20世纪，随着电子显微镜的发明，科学家能够观察到更小的物体，推动了生物学和材料科学的发展。
现代显微镜的发展和应用
现代显微镜与摄像系统、显示器或电脑相结合，实现了对被测物体的实时观察和记录。
随着数码技术和计算机技术的发展，显微镜的功能更加智能化和人性化。
在医学领域，手术显微镜的应用提高了手术的精确度，特别是在眼科和耳鼻喉科手术中发挥了重要作用。
此外，荧光显微镜等高级显微技术在基础研究和临床应用中也越来越普及。
显微镜技术发展历史的过程
显微镜技术发展历史的过程1. 显微镜的起源显微镜，顾名思义，就是一个让我们看见微小世界的工具。
想象一下，十七世纪的某个小镇，两个好奇的小家伙，像小侦探一样，发现了这个神奇的东西。
他们一开始只是用几片玻璃，拼拼凑凑，没想到一放在一起，竟然能把微小的物体放大好几倍。
这真是神奇得让人目瞪口呆。
说到这里，有人可能会问，最早的显微镜到底是啥模样？其实那时候的显微镜就像个小箱子，里面装着镜子和透镜，放在一个木架子上，真是土得掉渣，不过，谁能想到这玩意儿竟然成了后来科学进步的奠基石呢！1.1. 第一个显微镜的神秘据说，最早的显微镜是由一位荷兰人，叫做莱文虎克（Leeuwenhoek）发明的。
他可不是一个普通的商人，而是个热爱科学的好奇者。
莱文虎克通过自己的改良，把显微镜的放大倍率提高到了300倍，这样一来，连水里的微生物都能一览无余。
想想看，那时候的人们竟然能看到“看不见的世界”，简直就像打开了新大陆的大门，大家都兴奋得像喝了蜜糖水。
也难怪，莱文虎克后来被称为“微生物学之父”。
1.2. 随着科技的进步到了十八世纪，显微镜又经历了一番改造，出现了复合显微镜。
这种显微镜有多个透镜，能更清晰地观察样品。
说实话，这时候的科学家们就像一群小孩，拿着新玩具，简直玩得不亦乐乎。
他们发现了细胞，提出了细胞理论，这下子，生物学、医学等学科可谓是“柳暗花明又一村”。
这一波科技的进步，就像是在科学界投了一颗重磅炸弹，所有人都在忙着研究新发现，生怕落后于人。
2. 显微镜的种类繁多显微镜的种类可真不少，从光学显微镜到电子显微镜，每种都有它独特的魅力。
光学显微镜就像个家常便饭，大家都很熟悉，但一提到电子显微镜，哇，那简直是高端大气上档次。
电子显微镜利用电子束来照射样品，能把物体放大到十万倍，简直让我们看到了微观世界的细节，像是打开了一扇通往另一个维度的窗户。
2.1. 电子显微镜的崛起说到电子显微镜，不得不提的就是它的发明者——赫尔曼·沃尔特（Ernst Ruska）。
显微镜发展历程
显微镜发展历程显微镜是一种广泛应用于科学和医学研究的重要工具，它能够以高分辨率观察微小尺寸对象。
随着时间的推移，显微镜经历了多次革新与发展。
以下是显微镜发展的主要里程碑：1. 17世纪中期，荷兰人安东·凡·李渊发明了第一台复合显微镜。
这是一种使用两个凸透镜来放大图像的仪器，它大大改善了人们对微观世界的观测能力。
2. 19世纪早期，德国物理学家欧仁·冯·诺依曼（Eugen von Nussbaum）改进了显微镜的设计，他增加了一对望远镜，使目镜与客镜的位置可以调节。
这种改进使得显微图像更加清晰，并提供了更大的观测灵活性。
3. 1830年代，德国光学工程师卡尔·人斯（Carl Zeiss）与冯·诺依曼合作，开创了现代显微镜制造的先河。
他们使用优质光学玻璃和精密加工技术，制造出高品质的物镜和目镜，使得显微镜的分辨率大幅提高。
4. 1873年，英国生物学家约翰·马修斯·伯克（John Matthew Burgess）改进了显微镜的照明系统，他使用了凹面镜来聚焦光线，从而实现了更好的照明效果和更高的图像对比度。
5. 1931年，德国物理学家恩斯特·阿贝尔（Ernst Abbe）提出了一种数学模型，即“阿贝原理”，用于描述物镜与目镜的设计关系。
这一原理对于提高显微镜的分辨率起到了重要作用，为后续的显微镜设计提供了理论基础。
6. 1951年，美国物理学家哈里·尤茨（Harry R. Yutz）发明了一种倒置显微镜。
这种显微镜的设计结构将物镜放置在样品的下方，目镜放置在顶部。
倒置显微镜在生物医学领域的细胞培养和组织观察中得到广泛应用。
7. 1980年代至今，显微镜的发展进入了数字时代。
高速、高灵敏度的电子图像传感器取代了传统的目镜，并与计算机技术结合，实现了数字显微镜的出现。
数字显微镜能够实时获取高质量的显微图像，并具有图像处理和分析的功能。
光学显微镜技术的发展和应用
光学显微镜技术的发展和应用伴随着科技的不断发展，光学显微镜技术已经成为各行各业非常重要的工具。
无论是科研、生物医学、材料学、纳米科学等领域，都需要用到光学显微镜。
本文将从技术的发展历程、现状，以及将来的应用前景三个方面来阐述光学显微镜技术的发展和应用。
一、技术的发展历程光学显微镜是用光学原理放大被观察物体的图像的仪器。
起始于17世纪中叶，当时存在着折射率不同的两种玻璃种类，使得光线可以被弯曲，人们便发明了眼睛放大图像。
1665年，Leeuwenhoek发明了简单显微镜，他用几个极为精细的玻璃小球制成放大倍数较小的显微镜，成为史上第一批应用显微镜进行生物学研究的人。
后来，蚁视镜、昆虫镜等新的显微镜种类不断涌现，也推动了显微镜技术的进一步发展。
直到19世纪，光学理论得到了更大的发展，显微镜的分辨率逐渐提高。
1816年，法国人Savart发明望远显微镜，改善前方不清晰的问题。
1930年代，电子光学技术的出现使得显微镜的分辨率再度提高，同时发明了荧光标记，使得作用物质变得更加明显。
二、现状随着科技的快速发展，光学显微镜也经历了很多改变，现代显微镜具有数字和计量显示、自动对焦、三维渲染以及通过细胞成像进行的非侵入性探测等先进功能。
其中最为重要的是拥有高速图像采集和高分辨率成像的能力。
光学显微镜通过显微镜镜头组，光探测器和计算机通过界面通常可实现测量复杂性与高敏感度的高级研究方法。
同时，半导体器件晶圆中的二维图像能够获得高效的监测和加工。
利用光学显微镜还可以观察单个分子的运动轨迹，实现单分子荧光成像工具，能够在单细胞和分子的水平上研究细胞生物学和生物化学问题。
光学显微镜也被广泛应用于生命科学和化学，为这些领域带来了重大的贡献。
一个很好的例子是光学显微镜在组织学中的应用。
组织学研究是关于组织结构和功能的研究，通常涉及利用分子标记技术来跟踪实验材料中的不同成分。
光镜对细胞组织结构的细节保留和空间免疫学分析的发展从产生了大量生物学数据发现，可以加深对正常和疾病生物过程的理解，这是疾病诊断和治疗的重要依据和科学研究的重要手段。
2024年电子显微镜市场发展现状
2024年电子显微镜市场发展现状引言电子显微镜是一种重要的科学仪器，广泛应用于生物学、材料科学、化学和医学等领域。
随着科技的进步和实验需求的增长，电子显微镜市场也迎来了快速发展。
本文将探讨电子显微镜市场的发展现状。
市场规模和增长根据市场研究报告，电子显微镜市场在过去几年中得到了稳步增长。
预计到2025年，全球电子显微镜市场的价值将达到XX亿美元。
这主要归因于电子显微镜在各个领域的广泛应用和技术的不断创新。
应用领域1.生物学：电子显微镜在生物学领域中扮演着重要的角色。
它能够提供高分辨率的图像，帮助科学家们观察和研究微生物、细胞结构和分子组成等生物学特性。
2.材料科学：电子显微镜在材料科学中的应用也逐渐增加。
它可以帮助研究人员观察材料的表面形貌、微观结构和材料缺陷，以及分析材料的成分和元素分布。
3.化学：电子显微镜在化学领域的应用主要集中在观察和分析化学反应过程、催化材料和纳米材料等方面。
它能够提供高清晰度的原子尺度图像，帮助研究人员深入理解化学反应和材料的功能特性。
4.医学：电子显微镜在医学领域中的应用主要集中在细胞学、病理学和医学诊断等方面。
它可以提供高分辨率的细胞图像，帮助医生们识别病原体、观察组织细胞结构和诊断疾病。
技术进步和创新随着科技的不断进步，电子显微镜的技术也在不断创新和改进。
以下是一些最新的技术发展： 1. 高分辨率：新一代的电子显微镜能够提供更高的解析度，使科学家们能够观察到更小的细节和微观结构。
2. 低温操作：一些电子显微镜已经实现了低温操作，可以在低于常温的环境中观察和研究材料的特性和行为。
3. 扫描透射电子显微镜（STEM）：STEM技术可以提供更高的空间分辨率和能谱分析功能，使科学家们能够更详细地研究样品的原子结构和化学成分。
4. 原位观察：一些电子显微镜可以实现原位观察，即观察和记录材料的变化和行为，例如化学反应过程和材料性能的变化。
主要厂商和市场竞争目前，电子显微镜市场主要由一些知名厂商主导，例如菲利普斯（FEI）、日本电子（JEOL）和台湾开发工业（TSMC）等。
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齐冬
2007，10 武汉
人眼观察事物的大小
透镜的历史
公元前2500年埃及玻璃制品 公元前1世纪有吹制玻璃 公元1世纪：凸透镜——放大镜，燃烧玻璃 13世纪透镜被称为Lens（象扁豆“lentil”的种子) 15世纪在威尼斯发现水晶，叫cristallo 1675年在玻璃中加入铅氧化物改进折射率和色散 1902年Irving W Colburn申请玻璃拉制仪，大规模生产玻璃门窗 1904 Michael Owen 申请玻璃容器专利
• 活细胞相关研究
• SIM • 活细胞成像系统
暗场显微镜
丁道尔(Tyndall)现象，微粒对斜射光反 射或衍射，增大了人眼可见性。
实际所见为光放大的光斑，极高 的放大率 极黑暗的背景 适合石油、微生物、神经生物等 研究
QiDong 2007,10
2
偏光显微镜
依据波动光学原理观察和精 密测定标本细节,或透明物 体改变光束的物理参数,以 此判别物质结构的一种显微 镜
古代显微镜历史上的两个重要人物
Robert Hooke (1635-1703) 使用复式显微镜 第一个提出细胞概念 绘制了许多精美的显微图像
古代显微镜历史上的两个重要人物
Leeuwenhoek 设计了几百种功能较简单的显微镜， 放大倍率取决于透镜质量可以从70X到250X ， 分辨率可以达到约1um， 绘制出原生动物、细菌和红细胞等
1952年Georges Nomarski 发明并注册DIC
专利
通过特制的棱镜将偏振光分解为振动方向相互垂直，强度相等的光 束，光束在极近的两点（小于显微镜的分辨率）上通过被检物体，从 而在相位上略有差别，使图象呈现出立体三维感觉。
QiDong 2007,10
微分干涉称/DIC
比相差分辨率更高、有明显的三维立体感 更适合厚标本观察 双折射物质不能达到DIC镜检效果 不能应用于塑料容器培养物的观察
QiDong 2007,10
第一台复式显微镜
QiDong 2007,10
Zacharias Janssen and Hans Janssen
此前眼镜已经被使用 Janssen‘s 显微镜包括双面凸透镜的目镜和单面凸的物镜,通过伸缩 镜筒可以进行10X－3X的观察 通常用来看跳蚤或小的爬行动物因此又叫“跳蚤镜”（flea glasses)
1932年Edwin H. Land宣布发明偏 振片
偏光显微镜
QiDong 2007,10
矿物质、化学物品鉴别
鉴别、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿瘤细胞、横纹肌、毛发、肝脏胶原
和伤口愈合等
QiDong 2007,10
相差显微镜
Frits Zernike (1888-1966), 1934年发现相差原理，1938 年生产出第一台相差显微 镜，1953 获诺贝尔奖
QiDong 2007,10
QiDong 2007,10
QiDong 2007,10
Image from parker lab, Dept. Neurobiology & Behavior, University of California, Irvine
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x y
Z+2 Z+1 Z0 Z-1
Z-2
QiDong 2007,10
提高未染色标本的可见性和对比度； 图象显示阴影或近似三维结构而不会产生光晕； 可检测双折射物质(岩石切片、水晶、骨头) ； 可检测玻璃,塑料等培养皿中的细胞,器官和组织； 聚光镜的工作距离可以设计的更长；
QiDong 2007,10
荧光显微镜的原理在1904年就由Köhler发现，而直到1970年才被广泛 应用。 镀膜技术、无限远技术的运用，使荧光显微镜的应用产生了质的飞跃。 And fluorescence microscopy, in principle already seen by Köhler in 1904, has become a very valuable addition to light microscopy since about 1970.
QiDong 2007,10
荧光显微镜的优点和用途
优点：
• 检出能力高（放大作用） • 对细胞的刺激小（可以活体染色） • 能进行多重染色 用途： • 物体构造的观察——荧光素 • 荧光的有无、色调比较进行物质判别——抗体
荧光等 • 发荧光量的测定对物质定性、定量分析
4
宽场照明显微镜和共聚焦图像比较
•劣势
•处理速度慢 •需要较高专业知识和实际经验 •对球场比较敏感
2-photon
• 1931Mayer博士预言多光子 现象。
• 30年后被实验证实 • 1963年获得诺贝尔奖
2 Photon
2 Photon Microscope
•优势： •长波长激发激发深度更大 •焦平面外几乎激发无荧光 •低的标本刺激 •无需针孔阻挡，采集效率高
QiDong 2007,10
QiDong 2007,10
1
有放大就清晰吗？
象差和分辨率概念
1666年牛顿发现棱镜光谱分离现象 1729年Chester Moore Hall 在大型透镜 上使用了消色差技术 19世纪上半叶Lister生产出消色差NA 0.65的干镜 1873年Ernst Abbe发现显微镜透镜的光 学原理: R∝k*λ/NA 1876年Ernst Abbe发现各种颜色的校对 开始指导研发复消色差物镜 1886年Schott and Associates, Inc. 生 产出第一个复消色差物镜
激光
物镜 标本
激光在标本平面做点－点扫描
共聚焦显微镜的共轭平面 5
激光扫描共聚焦显微镜的监测器
Photomultiplier Tube (PMT)
• 点采集 (不象CCD一样直接记录图像) • 高敏感度(适合暗光采集) • 大采集靶面 • 低噪音 • 反应快速
AOTF
局部刺激和扫描——ROI 0.1%激光强度调整，快速----普通ND只能1％调节，且速度慢 减少荧光粹灭
S. Simon et. al/Rockefeller Univ.
TIRFM 应用
• Cell 表面成像
– 细胞/底物接触
– 膜表面动力学/蛋白质定位研究
• 单分子成像
– 肌球蛋白，肌动蛋白与Cy3标记ATP
• 胞吐/胞吞作用(配合高速CCD) • 心肌Ca2+火花(配合高速CCD)
细胞膜研究 Ex.
与AOTF功能结合 ——荧光漂白后恢复（FRAP)
AOTF/ZOOM
光刺激和取图分别间隔进行
488nm获取图像
选取AOTF/ZOOM位置
405nm激光刺激， 获取AOTF/ZOOM图像
双扫描光诱导——快速、同步光诱导
如何完成双扫描?
引入了一个独立的扫描单元 “SIMS”
同步激光 扫描
35
细胞质内多点快速FRAP
细胞样品来自北京中医医院
36
6
取图激光 488nm＆543nm
同步激光 405nm
任意时间, 任意位置
Data from; Dr. Atsushi Miyawaki and Ms. Ryoko Ando in RIKEN BSI
Laser Sscanning Confocal Microscope
反卷积（Deconvolution）显微镜
优点 (v. confocal) 低光漂白 高的S/N 低价格
Disadvantages 速度慢，结果实验经验影响
反卷积（Deconvolution）显微镜
•优势
•低的光漂白 •高图像获取速度 •信噪比较高 •可以进一步改善共聚焦显微镜获取的图像 •可以获得更弱信号的高信噪比图像 •价格较低
图片来自于Dr. Steve Ruzin
1955年MINSKY发明共聚焦原理
1951年，Minsky建构了世界上第一个神经 元网络模拟器
是MIT AI 实验室的创办人之一
被认为是20世纪人工智能研究的奠基人之 一
共聚焦原理
共聚焦针孔 (Pinhole)
分光镜
光电倍增管 (PMT) 荧光滤光片 (发射光滤色片)
低折射率 高折射率 q
只有临近盖玻片表面（近场）的荧光分子才能 被激发。远场分子不受激发。
TIRF系统物镜:
APO100XOHR (NA1.65) PLAPO100XOTIRFM (NA1.45) PLAPON60XOTIRFM (NA1.45) UAPO150XOTIRFM (NA1.45) APON60XOTIRFM (NA1.49)
囊泡 膜
胞吐
消逝波
神经递质
9
10
通过将光程差转变成振幅差的办法，使原本不可见的透明的活细胞或组 织标本得以以明暗反差的方式展示出来，无需对标本进行杀死和染色。
QiDong 2007,10
相差显微镜
优点： 鉴定活细胞最实用、最经济的方法
非常适合薄的活细胞标本观察
缺点： 稍厚标本或悬浮细胞会反差过大
QiDong 2007,10
微分干涉称/DIC
QiDong 2007,10
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微分干涉称/DIC
检偏镜Analyzer
QiDong 2007,10
DIC 滑板
物镜
万能聚光镜， DIC棱镜
起偏镜 Polorizer
卤素灯
DIC－PH
Robert Hoffman ，1975
斜射光照射到标本产生折射、衍射，光线通过物镜光密度梯度调节器产生不 同阴影，从而使透明标本表面产生明暗差异，增加观察对比度。
•优点
•厚标本更清晰的单层结构/光切 •同步多通道荧光 •ZOOM •光操作