小檗碱的提取分离及鉴定

盐酸小檗碱得提取分离及鉴定

黄连具有清热燥湿、清心除烦,泻火解毒得功效。

黄连得有效成分主要就是生物碱，已分离出得主要生物碱有小檗碱(berbｅrｉｎe)、掌叶防己碱（palmaｔine)、黄连碱(jatrorrｈizine）等。其中小檗碱含量最高，可达1０%左右,就是以盐酸盐得状态存在于黄连中。小檗碱有很强得抗菌作用,已广泛地应用于临床,掌叶防己碱也作药用,其抗菌性能与小檗碱相似。

［目得要求]

1．学习与掌握水溶性生物碱得提取方法。

2.学习与掌握生物碱得柱色谱分离方法。

[实验原理]

小檗碱为黄色针状结晶,ｍp为145℃，游离得小檗碱能缓缓溶于水(1：2０)及乙醇中（1:1０0）,易溶于热水及热醇,难溶于乙醚,石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂,其盐在水中溶解度很小，尤其就是盐酸盐。盐酸盐为l：50０，枸橼酸盐1:１25,酸性硫酸盐1:1０0，硫酸盐ｌ:3０,但在热水中都比较容易溶解。

小檗碱常以季铵碱形式存在,碱性强(pka11、5３),能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。

CHO

OCH3

OCH3季铵式(红棕色）醇式(黄色) 醛式(黄色)

N+

OCH3

小檗碱（黄连素)

掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶,溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶,并有强烈

得黄色荧光。易溶于热水或热乙醇,在冷水中得溶解度也比盐酸小檗碱大。

N +

H 3CO

OCH 3

掌叶防己碱本实验就是利用小檗碱与掌叶防己碱得硫酸盐在水中溶解度大得性质,用硫酸水提取出来总生物碱,再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用,使生物碱盐析出,以除去水溶性杂质。再利用两种生物碱极性不同,采用柱色谱分离。

[实验内容]

一、提取分离

黄连粗粉50ｇ

O 4５０0ml,浸渍20分钟

加石灰乳调ＰH 值至中性

放置１0分钟，抽滤

滤液

加HC ｌ调PH2～3

加滤液体积4~5%得NaCl,放置30分钟,抽滤

沉淀滤液

(主要含小檗碱、掌叶

防己碱、黄连碱等生物碱）

加２00ml 水加热至澄明趁热抽滤

滤液

放置、抽滤

沉淀

二、生物碱类检识

１．化学检识:

(1)丙酮加成反应:取样品０.05ｇ,溶于50mｌ热水中,加入10％N ａＯH溶液2mｌ,混合均匀后，于水浴中加热至５0℃,加入丙酮5ml,放置,即有柠檬黄色结晶析出。此反应可用于原小檗碱型季铵生物碱得鉴别。

(2)漂白粉显色反应:小檗碱酸性水溶液中加漂白粉(或通入氯气),溶液即变樱红色。

２.薄层色谱检识

吸附剂：硅胶G

对照品：盐酸小檗碱甲醇溶液

样品：不同色带得甲醇溶液

展开剂：ＣＨCｌ3-MeOH-冰HＡc(7:1:２）

检视:先在紫外灯光（365nm）下观察荧光,再喷改良碘化铋钾试剂。

[实验说明及注意事项]

1．以硫酸盐代替盐酸盐,可增加生物碱得浸出量。

２.盐析最佳用量为4~５%。

[思考题］

１.根据小檗碱得性质,除用硫酸水溶液提取外,尚可用哪些提取方法?

请设计一个提取工艺流程。

２.掌握根据化合物结构及色谱条件推测不同化合物得Rｆ值得方法。在本实验色谱条件下,请比较小檗碱与掌叶防己碱极性及Rf值。