柠檬酸提取及鉴定实验方案
柠檬酸提取及鉴定实验方案
柠檬酸提取及鉴定实验方案柠檬酸是一种广泛应用的有机酸，在食品、化妆品、医药等领域具有重要的作用。
本实验旨在通过提取柠檬中的柠檬酸，并利用化学方法对所提取的柠檬酸进行鉴定。
实验材料及仪器：1.柠檬2.无水乙醇3.水4.二氯甲烷5.醋酸钠6.硝酸银7.硝酸铁8.乙醇9.烧杯、滤纸、分液漏斗、玻璃棒、滴管等实验器材实验步骤：1.准备样品：取适量的柠檬，去皮并剥开。
2.提取柠檬酸：将柠檬放入搅拌器中，加入适量的水，搅拌至柠檬完全研磨成泥状。
将泥状柠檬溶液倒入烧杯中。
3.酸化反应：向烧杯中加入适量的醋酸钠溶液，并搅拌均匀。
酸化反应会使柠檬酸从柠檬中转移到水相中。
4.分离柠檬酸：将烧杯中的柠檬提取液倒入分液漏斗中，加入等体积的二氯甲烷。
轻轻旋转分液漏斗，使两相充分混合。
5.分离两相：停止分液漏斗的转动，使两相分层分离。
将下层的二氯甲烷相反复与新鲜的无水乙醇进行提取，直到提取的二氯甲烷相中不再出现柠檬酸。
6.精制柠檬酸：将提取的二氯甲烷相倒入干净的烧杯中，将烧杯置于加热板上用温水慢慢去除溶剂，将残留物风干。
7.鉴定柠檬酸：将精制的柠檬酸溶解于乙醇中。
7.1硝化试验：取一小部分柠檬酸溶液加入硝酸银溶液中，观察是否生成颜色或沉淀。
7.2反铁氰试验：取另一小部分柠檬酸溶液加入硝酸铁溶液中，观察是否生成颜色或沉淀。
7.3pH值测定：使用pH试纸或pH计测定柠檬酸溶液的酸碱性。
7.4熔点测定：将柠檬酸溶液完全风干，然后进行熔点测定，记录并与标准熔点进行比较。
实验安全注意事项：1.实验过程中要注意个人防护，如戴手套、实验服等。
2.柠檬酸为应用广泛的有机酸，但仍需避免直接接触眼睛和皮肤。
3.部分试剂具有刺激性和腐蚀性，操作时要注意安全。
实验结果及讨论：通过以上步骤，可以成功地提取到柠檬中的柠檬酸，并对其进行了鉴定。
硝化试验和反铁氰试验是常用的有机酸鉴定方法，通过反应生成的颜色或沉淀可以判断柠檬酸的存在。
pH值测定和熔点测定则可进一步确定柠檬酸的性质。
吸交法提取柠檬酸新工艺及实验方案
吸交法提取柠檬酸新工艺及时验方案一、实验目的我国的柠檬酸生产厂家目前全部采用“钙盐法”提取工艺，每生产一吨柠檬酸要产生两吨固体硫酸钙，成为工业垃圾，造成严重的环境污染；由于需要加热和洗涤，生产过程粗放，因而能源消耗大、自动化水平较低；工艺本身存在缺陷，至少要有10％已经发酵好的柠檬酸未被提取，造成巨大浪费。
采用“吸交法”新工艺后，柠檬酸总提取收率平均达90.09％，产品质量显著提高，98％以上达到英国药典规定标准，生产成本每吨下降1180元，副产品硫酸钠可回收利用，实现了清洁化生产。
二、实验原理将发酵液用板框过滤，清液在经膜过滤、通过炭柱脱色，阳柱除去阳离子，然后用吸交柱将柠檬酸解吸出来。
选择吸交法提取工艺路线。
“吸交法”是利用吸交树脂吸取滤液中的柠檬酸，然后用一定浓度的硫酸溶液将柠檬酸洗出。
发酵液↓菌丝体（50%水）←压滤↓↓烘干膜过滤↓↓菌丝体（10%水）炭柱←脱色↓阳柱←盐酸↓稀硫酸—→吸交柱↓阴柱↓浓缩↓结晶↓三、实验器材1 仪器烧杯、离子交换柱、三角瓶、碱式滴定管、移液管。
2 试剂经板框压滤后的发酵清液、活性炭、阴阳离子交换树脂、5%Hcl、浓硫酸、氢氧化钠、酚酞指示剂。
四、实验步骤1、取发酵精滤液约500ML,测量精确体积V1及酸度C1。
种子液、发酵液酸度测定：取过滤后的种子液1ml于250ml三角瓶中，加25ml蒸馏水，摇匀，加入2滴1%酚酞指示剂，摇匀，用0.1429mol/L的NaOH滴定至溶液由无色到粉红色为终点，记下所消耗的NaOH的ml数。
0.1429×V NaOH×0.07酸度%= ×100%12、将发酵液过炭柱脱色，控制流速为170v/h,观察溶液的颜色变化。
待脱色完毕后再测体积V2和酸度C2。
用蒸馏水洗炭柱，pH 由2至2.5时中止洗涤，测量洗液体积V3及浓度C3。
继续水洗炭柱至到中性。
3、先将体积V2和酸度C2的溶液过阳离子交换柱，以脱去溶液中的一些阳离子。
柠檬酸含量的测定方法
柠檬酸含量的测定方法
实训指导：柠檬酸含量的测定方法
一、仪器设备
1.常压万用表：用于检测焊枪电压；
2.pH计：用于测定样品中柠檬酸的含量；
3.烧杯：用于样品的烧结；
4.密度形状分析仪：用于测定样品中柠檬酸的粒径，准确含量
二、实验步骤
1、样品的准备：用量秤称取柠檬酸样品，放入100mL烧杯中；
2、实验设备准备：准备常压万用表、PH计、密度形状分析仪等实验设备；
3、柠檬酸溶解：将称取的柠檬酸样品加入稀释液中，搅拌溶解；
4、电位试验：使用常压万用表检测柠檬酸样品电位是否正常；
5、柠檬酸浓度测定：将溶解的柠檬酸样品及稀释后的样品，滴入PH 计中，读取PH值，以此确定柠檬酸浓度；
6、密度形状分析：用密度形状分析仪测定样品中柠檬酸的粒径，以此准确判定样品含量；
7、实验结论：使用仪器设备，结合PH计测定及密度形状分析仪的测定结果，得出柠檬酸的浓度及粒径，以此确定样品含量。
三、注意事项
1、实验过程中，要注意柠檬酸的溶解，搅拌时间不宜过长；
2、搅拌时应当避免产生气泡，以免干扰实验结果；。
柠檬酸发酵及产物提取
综合实验：柠檬酸发酵及产物提取（一）柠檬酸发酵一、实验原理柠檬酸发酵为典型的有机酸发酵，淀粉质原料经淀粉酶作用水解为葡萄糖，葡萄糖经EMP途径氧化为丙酮酸，丙酮酸进一步被氧化脱羟生成乙酰CoA，就一般能量代谢过程而言，生成的乙酰CoA与草酰乙酸缩合成柠檬酸后进入三羟酸循环，通过三羟酸循环进行有氧呼吸的能量代谢。
但就柠檬酸产生菌而言，由于其乌头酸流水作业事酶和异柠檬酸脱氢酶活性很低，而柠檬酸合成酶的活性很高，因而大量积累柠檬酸，草酰乙酸的提供则仍通过丙酮酸羧化而成，柠檬酸的生成途径如下式：2 C6H12O6 +3 O2→2 C6H8O7 +4 H2O国内目前柠檬酸发酵所采用的原料主要是山芋干及废糖蜜。
二、实验器材（一）材料1．菌种：黑曲霉2．蔗糖、硫酸铵等（二）主要仪器设备1．旋转式摇床、超净工作台、15L发酵罐等三、操作步骤1．种子培养基制备：马铃薯培养基配方:(1000ml)马铃薯（去皮）200g葡萄糖（或蔗糖）20g琼脂15~25g水1000ml自然pH2．种子液培养：将已灭菌的种子培养基接入一环斜面孢子于35℃±1℃、250r.p.m条件下培养24~36h。
3．种子培养液质量要求：镜检菌丝生长健壮，结成菊花形小球，球直径不超过100μm，每毫升含菌球数在1~2万之间，无异味、无杂菌污染；pH2~2.5；酸度1.5~2.0%。
4．发酵培养基制备：蔗糖15%，硫酸铵0.4%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁7水0.025%。
5. 上罐灭菌（操作同实验一）5．发酵：将培养好的种子液按发酵培养液体积的5%接入到已灭菌的发酵培养基中，于35℃±1℃、500转条件下发酵4天。
6.分别在0,24,48,72,96小时测定一下参数。
四、实验结果1．对种子液进行镜检，画下菌丝形态，并测定菌球直径及粗略估算每ml种子液中的菌球数。
2．测定成熟发酵液的酸度，并就发酵结束后的菌体形态作出描述。
3．计算柠檬酸发酵的转化率，即每100克葡萄糖经转化所能生成的柠檬酸克数，柠檬酸酵的理论转化率按下列反应计算应为106.7%。
高效液相色谱法测定柠檬酸的含量
高效液相色谱法测定柠檬酸的含量
高效液相色谱法是一种常用的化学分析方法，用于分离和测定复杂样品中的各种组分。
以下是使用高效液相色谱法测定柠檬酸含量的基本步骤：
1. 样品处理：根据样品的性质，选择适当的提取和纯化方法，以从样品中分离出柠檬酸。
2. 配置标准溶液：准确称取一定量的柠檬酸标准品，用适当的溶剂溶解，配置成一定浓度的标准溶液。
3. 液相色谱分析条件设置：选择合适的色谱柱、流动相、流速等参数，确保柠檬酸的有效分离。
4. 样品进样：将处理后的样品溶液注入液相色谱仪，进行分离分析。
5. 数据处理：通过与标准品对比，确定柠檬酸的峰，并使用相应的计算公式计算柠檬酸的含量。
6. 重复实验：为了确保数据的准确性和可靠性，通常需要进行多次重复实验。
需要注意的是，以上步骤仅为一般性指导，实际操作中可能需要根据具体情况进行调整。
此外，操作人员应具备相关的实验技能和理论知识，并严格遵守实验室安全规定。
柠檬酸提取及鉴定实验方案
柠檬酸提取及鉴定实验方案
不能出现突兀或无聊的内容：
一、实验简介
柠檬酸是一种有用的有机物质，广泛用于食品工业，医药，化工等领域。
它具有独特的清新柠檬香味，可以抑制食品变质，延长食品的保质期，具有较高的市场价值。
本实验旨在通过提取，定量和鉴定柠檬酸的方法，
识别柠檬酸的实际容量。
二、实验材料
1. 柠檬果汁150ml；
2.含氯化钠的和食酸（取量为2毫升）；
3.200毫升的0.1mol/L氢氧化钠溶液；
4.磷酸钠溶液：向500毫升水中添加5克磷酸钠，搅拌至溶解，然后
稀释至1000毫升；
5.铁锌粉末：向1000毫升水中添加1克铁锌粉末，搅拌至溶解，然
后稀释至1000毫升；
6.柠檬酸标准溶液：向1000毫升水中添加1克柠檬酸，搅拌至溶解；
7.煤油；
8.玻璃棒；
9.移液管；
10.坩埚；
11.烧杯；
12.幻灯片；
13.吸管；
14.便携式发光分光光度计；
三、实验步骤
1.将柠檬果汁放入烧杯中，加入2毫升含氯化钠的和食酸，加热至90℃，提取柠檬酸，煤油用于凝固；
2. 将凝固物以玻璃棒放入坩埚中，添加75毫升0.1 mol/L的氢氧化钠溶液，加热至沸水，使柠檬酸溶于溶液中；。
柠檬中柠檬酸的含量测定
柠檬中柠檬酸含量的测定一、实验目的1、学会水果样品的预处理方法2、掌握用酸碱滴定法测水果样品的总酸度原理和方法3、能配置实验所需的标准溶液4、规范记录数据和数据处理二、实验原理1、NaOH标准溶液的标定NaOH易吸收水分及空气中的二氧化碳，因此，不能用直接法配制标准溶液。
需要先配成近似的浓度的溶液再标定，标定使用邻苯二甲酸氢钾为基准物进行标定。
以酚酞为指示剂，当滴定终点呈浅红色，半分钟内不退色，反应如下：KHC8H4O4+NaOH=KNaC8H4O4+ H2O2、柠檬中柠檬酸的测定原理：根据酸碱中和原理，用碱标准溶液滴定试样液中的酸时，以酚酞为指示剂。
当滴定至终点溶液呈浅红色，且30s不褪色时，根据滴定时消耗的标准NaOH溶液的体积，可算出试样中的总酸度。
其反应式为：HOOCCH2C(OH)(COOH)CH2COOH+3NaOH———NaOOCCH2C(OH)(COONa)CH2COONa+3H2O三、实验用品榨汁机、小刀、碱式滴定管、试剂瓶、锥形瓶、移液管、量筒/烧杯、容量瓶、胶头滴管、洗耳球、洗瓶、水浴锅、铁架台、电子天平、玻璃棒、滤纸、0.1000mol/LNaOH溶液、邻苯二甲酸氢钾、酚酞指示剂、柠檬式样、蒸馏水、四、实验步骤1、0.1000mol/LNaOH标准溶液的配制和标定（1）称取固体NaOH约2.0g放置在烧杯中，先加入100ml蒸馏水将其溶解，再转移至试剂瓶中加水稀释至500ml，混匀，待标定。
（2）用减量法准确称取0.4～0.5g邻苯二甲酸氢钾3份，分别放入250ml锥形瓶中，加25mL 蒸馏水溶解。
（3）然后加1-2滴酚酞指示剂，用标定的NaOH 溶液滴定至微红色，且半分钟不褪色即为终点，记录消耗NaOH 溶液的体积。
2、试样处理：取柠檬若干个，去皮、去柄、去核，切成块状，置于榨汁机中榨汁。
称取榨得的柠檬汁20g （称准至小数点后两位）于洁净干燥的小烧杯中，用适量的蒸馏水定量地将果汁样洗人250mL 容量瓶中，定容，摇匀，备用。
柠檬酸检验作业指导书
柠檬酸检验作业指导书一、实验目的本实验旨在通过柠檬酸的化学反应与实验方法，掌握柠檬酸的定性与定量分析。
二、实验原理柠檬酸，化学式为C6H8O7，是一种广泛应用于食品、药品和日用品中的有机酸。
本实验主要以明胶和柠檬酸作为反应体系，根据柠檬酸与氢氧化钠的酸碱中和反应，测定柠檬酸的浓度。
三、实验仪器与药品1.仪器：分析天平、柠檬酸移液管、容量瓶、烧杯、滴定管、酒精灯等。
2.药品：柠檬酸试样、氢氧化钠溶液、甲醇、浓硫酸等。
四、实验步骤1.将柠檬酸试样取约 1.5g，溶于100mL甲醇中，并加入数滴浓硫酸，加热至柠檬酸完全溶解。
2.加入60mL纯水，并加热至80℃，避免沉淀。
3.把溶液冷却至室温，用中等浓度的氢氧化钠溶液进行滴定。
4.用甲醇将滴定试管中的溶液冲洗至烧杯中，直到试液呈现淡粉色的反应为止。
5.此时滴定试管中的溶液总体积为V1mL。
6.在同样的条件下进行一次空白试验，用空白试液滴定氢氧化钠溶液至淡粉色的标志出现。
7.此时空白试液滴定氢氧化钠溶液的体积为V2mL。
8.柠檬酸的质量浓度可以通过以下公式计算得出：C=（N1-N2）×C2/V1其中C为柠檬酸的质量浓度，N1为柠檬酸试液滴定体积，N2为空白试液滴定体积，C2为氢氧化钠溶液的浓度，V1为柠檬酸试液的体积。
五、注意事项1.柠檬酸试样的取样量应控制在一定范围内，避免实验误差。
2.氢氧化钠溶液浓度应准确，以保证实验结果的准确性。
3.实验过程中要保持实验环境整洁、安全，注意火源等，确保实验顺利进行。
4.所有使用的玻璃仪器应事先清洗干净，避免实验污染。
六、实验结果与分析根据实验步骤所得数据，可以通过公式计算出柠檬酸的质量浓度。
实验的目的是掌握柠檬酸的定性与定量分析，因此要比对实际测量结果与理论值进行对比，分析实验的准确性与可靠性。
七、实验总结本实验通过对柠檬酸的化学性质及反应进行研究，掌握了柠檬酸的定性与定量分析的方法。
实验结果显示，通过柠檬酸滴定与化学计算，可以准确测定柠檬酸的质量浓度。
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柠檬酸的提取及鉴定
实验目的
学习钙盐沉淀硫酸转溶提取柠檬酸的方法；
学习结晶精制柠檬酸的方法
实验材料
发酵液：黑曲霉玉米粉发酵培养基；
仪器：旋转薄膜蒸发仪、水浴锅；
其它材料：0.1mol/L NaOH、0.1M H2SO4溶液、固体碳酸钙粉末
实验原理钙盐沉淀法的原理
碳酸钙（或氢氧化钙）可与发酵液中的柠檬酸发生中和反应，生成难溶性的柠檬酸钙沉淀，柠檬酸钙在80～90度之间溶解度极低，通过过滤（或离心）的方法将其与糖、蛋白质、其他有机酸、无机离子等可溶性杂质分离开。
在柠檬酸钙沉淀物中加入稀硫酸在80～85度之间进行酸解反应，生成柠檬酸和硫酸钙沉淀，硫酸钙在80度左右溶解度极低，趁热过滤（或离心）可将其与柠檬酸分离，获得较纯净的柠檬酸酸解液。
后续工艺：柠檬酸酸解液再进行脱色、阳离子交换层析除去杂质，最后可以通过结晶法获得纯净的柠檬酸晶体。
结晶法的原理原理：通过冷却、挥发溶剂等方法使溶液达到过饱和状态时，具有一定形状和大小的固态粒子可从均匀的溶液中析出，称为结晶。
结晶过程：1、产生晶核；2、晶核成长过饱和度是这两个过程的推动力。
影响晶体质量的因素：
1、溶液中杂质少，产品纯度较高；
2、冷却结晶时，温度要缓慢降低，防止晶核大量形成，形成粒度不一的晶体；
3、控制搅拌速度，结晶初期可搅拌促使晶核产生，晶核成长时降低搅拌速度，防止将长成的晶体打碎。
实验步骤1、黑曲霉玉米粉发酵液八层纱布过滤除去菌体和残渣量筒测量清液体积V0；
2、量取5mL清液、5mL蒸馏水于锥形瓶中，再滴入2～3滴酚酞用0.1M NaOH
溶液滴定，滴定终点为淡红色，30s内不褪色，记下消耗的NaOH溶液
体积V1；
M酸（g）＝V1(mL)×0.1(mol/L)×0.001×1/3×210×V0/5
M碳酸钙（g）＝M酸×（V0－5）/V0×1/210×3/2×100
3、钙盐沉淀：
称取一定质量的碳酸钙粉末，边搅拌边缓慢地加入到剩余的清液（止产生大量的泡沫使溶液溢出），85度反应10min（使柠檬酸钙沉淀下来），趁热抽滤，并用与沉淀体积相当的沸水涤沉淀物2次（除去残糖、蛋白质等可溶性杂质）；
4、酸解：VH2SO4（mL）＝M碳酸钙/100/0.1(mol/L)×1000
在沉淀物中加入约等体积的蒸馏水，调匀成浆状，量取一定体积0.1M H2SO4溶液，边搅拌边加入到浆液中，85度反应10min，趁热抽滤，获得清亮的酸解液；
5、低压浓缩：将酸解液转入圆底烧瓶中，水浴60～70度，真空度0.08~0.09MPa，
浓缩至原体积约1/10；
6、冷却结晶：将浓缩液转入烧杯中，于室温下搅拌，待出现晶核，停止搅拌，
再移入4度冰箱冷却结晶约15min，抽滤获得柠檬酸晶体，烘干后称重m 柠檬酸。
计算黑曲霉发酵柠檬酸的产率：
m柠檬酸（g）/ V发酵液（mL）
样品的鉴定
①取少量试样，用直火灼烧，即缓慢分解，但不发生焦糖臭。
②试样溶液用4.3%氢氧化钠溶液调至中性，加硫酸汞溶液加热至沸。
再加1滴0.1N高锰酸钾溶液，振荡，紫色即消退，并产生白色沉淀。
③试样溶液用4.3%氢氧化钠溶液调至中性，加过量的7.5%氧化钙溶液，冷时无变化，煮沸，即发生白色颗粒状沉淀。
在一部分中加4.3%氢氧化钠溶液，沉淀不溶解，另一部分中加24%盐酸，则溶解。
④试样溶液用4.3%氢氧化钠溶液调至中性，加过量的0.1N硝酸银溶液，即发生白色沉淀。
白色沉淀能在硝酸或40%氮溶液中溶解。
取氮溶液于试管中，在水浴上加热至60～70℃，管壁不显眼镜。